Summary
Dette dokument beskriver, hvordan Elvax 40W kan anvendes som en langsom frigivelse fremgangsmåde til afgivelsesenheden til voksne rotter nethinden. Protokollen til fremstilling, påfyldning og levere lægemiddel-harpikskompleks til øjet er beskrevet.
Abstract
Sygdomme i nethinden er vanskelige at behandle, som nethinden ligger dybt i øjet. Invasive metoder til drug delivery er ofte nødvendig for at behandle disse sygdomme. Kroniske retinale sygdomme, såsom retinal ødem eller neovaskularisering normalt kræver flere intraokulære injektioner til effektivt at behandle tilstanden. Men de risici, der er forbundet med disse injektioner øges med gentagen levering af lægemidlet. Derfor skal etableres for at minimere risikoen for reinjektion alternative leveringsmetoder. Flere andre undersøgelser har udviklet metoder til at levere stoffer i længere tid, ved materialer, der kan frigive kemikalier langsomt ind i øjet. I denne undersøgelse, vi skitsere brugen af Elvax 40W, en copolymer harpiks, til at fungere som et redskab for narkotika levering til voksne rotter nethinden. Harpiksen er fremstillet og fyldt med lægemidlet. Lægemiddel-harpikskomplekset derefter implanteres i glaslegemet hulrum, hvor det langsomt vil frigive lægemidlet i løbet af timig. Denne fremgangsmåde blev testet under anvendelse af 2-amino-4-phosphonobutyrate (APB), glutamat analog, der blokerer lyset respons på nethinden. Det blev påvist, at APB langsomt blev frigivet fra harpiksen, og var i stand til at blokere den retinale respons med 7 dage efter implantation. Dette indikerer, at langsom frigivelse afgivelsesenheden ved hjælp af denne copolymerharpiks er effektiv til behandling af retina, og kan anvendes terapeutisk med en yderligere test.
Introduction
Behandlingen af kroniske sygdomme, såsom diabetes og forhøjet blodtryk indebærer mange udfordringer, som disse sygdomme generelt kræve behandling i længere tid, ofte for livet. Dette har givet anledning til udvikling af langsom frigivelse drug delivery-systemer, der mindsker behovet for hyppig dosering. Effektiviteten af disse langsom frigivelse metoder er blevet demonstreret gennem udvikling af insulinpumper, at reducere antallet af insulininjektioner er nødvendige til behandling af diabetes. Kroniske sygdomme i øjet, især dem, der påvirker dens indre lag, kræver hyppig indgivelse af lægemidler gennem invasive procedurer. En sådan kronisk sygdom, der påvirker det menneskelige øje er aldersrelateret maculadegeneration (AMD). Det påvirker den centrale del af nethinden, som er et lag af neuralt væv beliggende på bagsiden af øjet er ansvarlig for at indlede vision. AMD er den førende årsag til blindhed i den vestlige verden 1. En særlig udfordring med at behandle retinal sygdomme er, at lægemidlet er nødvendig for at nå denne dybe lag i øjet, som ofte kræver invasive metoder til levering. Lægemidler administreres sædvanligvis til det glasagtige kammer og nethinden hjælp intravitreale injektioner. Men med hver injektion er der en risiko for, efter injektion komplikationer, herunder endophthalmitis, nethindeløsning, katarakt og glasagtigt hemorrhaging 2. Denne risiko multipliceres med hvert reinjektion af lægemidlet.
Reduktion af behovet for flere injektioner ville være en stor fordel i behandlingen af AMD. At behandle den våde form for AMD, hvor ny vækst fartøj er et adelsmærke, den etablerede terapeutiske strategi er at målrette endotel vækstfaktorer (VEGF) ved hjælp af VEGF hæmmere 3. På nuværende tidspunkt er disse leveres ved gentagne intravitreale injektioner. Tilsvarende behandling af maculaødem, en almindelig komplikation af diabetisk retinopati, kortikosteroider leveret gennem gentagne injektioner Begrebet en langsom frigivelse drug delivery system blev først beskrevet ved anvendelse af en silikonegummi køretøj til at levere små molekyler i dyrevæv 5. Siden da er der blevet udviklet andre langsom frigivelse metoder til at levere større molekyler, hvoraf flere er blevet testet i øjet. Partikel bærere, såsom bionedbrydelige mikrosfærer, poly-lactid-co-glycolid (PLGA) nanopartikler og phospholipid vesikler (liposomer), kan være nyttige som varevogne 6,7. PLGA nanopartikler og liposomer er blevet sammenlignet i en in vitro miljø for deres evne til at levere anticancermidler over sclera over tid 7. Begge køretøjer var effektive langsomt frigive narkotika. Imidlertid blev undersøgelsen kun udført i et in vitro miljø. Bochot et al. (2002) 8 testeteffektiviteten af liposomer til at afgive molekyler til nethinden in vivo. De har vist, at liposomer med held levere små oligonukleotider til kanin nethinden. Forfatterne foreslog, at liposomer kunne være gavnlig i behandling af retinale sygdomme 8. Arten af disse vesikler til at flyde i glaslegemet betyder imidlertid, at de sandsynligvis vil sløre eller hinde 9. Okabe et al. (2003) 10, ikke biologisk nedbrydelig polymer diske består af 33% ethylen-vinylacetat at anvende beta-methasone i kaniner. De implanterede diske i en scleral lomme og demonstreret en effektiv frigivelse af lægemidlet i glaslegemet og retina op til en måned 10. Men i dette særlige protokol, implantatet var relativt store og stive, og krævede en mere kompleks kirurgisk procedure, herunder en stor sclerale indsnit og suturering. En tidligere undersøgelse undersøgte tissue reaktion på forskellige polymer køretøjer ved at implantere dem i hornhinden i kaninøjne, og fandt, at ethylen og vinylacetat vasket i alkohol ikke forårsager betændelse eller irritation. Disse komplekser blev vist at opretholde levering af større forbindelser i animalsk væv i længere tid, nogle over op til 100 dage er afhængige af lægemidlet 11. En sådan type copolymerharpiks er udviklet industrielt i form af Elvax 40W (40 vægt% ethylen-vinylacetat comonomerindhold med en W amidtilsætningsstof at forbedre pellet håndtering). Denne copolymer harpiks er et inert stof, som er stabilt både plads og legemstemperatur. Det har ikke vist sig at forårsage allergi eller toksicitet i biologisk væv. Denne harpiks har faktisk leveres et stort udvalg af stoffer i forskellige eksperimentelle modeller, der undersøger funktionerne af forskellige systemer, såsom bryst-gangsystemet 12, den primære cortex 13,14 </ Sup>, og frøen visuelle system 15. Denne harpiks er også blevet anvendt i øjet til at levere lægemidler til udviklingen skildpadde 16,17, kyllingefoster 18,19, og voksen fritte nethinder 20. Hos rotter centralnervesystemet, har harpiksen kun blevet anvendt i hjernen 21-23, men dens anvendelse i rotteøjet er ikke blevet dokumenteret. Fordelene ved denne copolymerharpiks til at levere medikamenter langsomt til nethinden i forhold til andre metoder, er, at det er en stabil forbindelse, der ikke forårsager betændelse eller irritation i øjet. I modsætning partikel bærere vil lægemiddel-harpikskompleks ikke hinde efter implantering, da det sædvanligvis forbliver på stedet for levering i stedet for flydende i glaslegemet. Det ville kun kræve en simpel implantation processen i den glasagtige hulrum tæt limbus af øjet, og ville ikke kræve sutur efter implantation. Der har for nylig været en fremkomst i flere hidtil ukendte leveringssystemer, såsomindkapslet celle teknologi (ECT) 24,25 hydrogeler 26, og mikrofilm 27. Men fremgangsmåden anvendt i den aktuelle undersøgelse til fremstilling og levering af lægemiddel-harpikskompleks er både let at følge og billig, hvilket er mere fordelagtig til anvendelse i et basisk forskningsmiljø. Udfordringen ved at anvende dette kompleks til at levere langsigtede lægemiddelbehandlinger er at bestemme den optimale koncentration af lægemidlet, der vil maksimere de terapeutiske fordele ved at have færre intravitreale injektioner. Dette papir har til formål at demonstrere anvendelsen af den lægemiddel-harpikskompleks til langtidsbehandling af den voksne rotte nethinden. Effekten af denne leveringsmåde testes ved glutamat analog 2-amino-4-phosphonobutyrate (APB) som lægemiddel. APB blokerer lyset respons af on bipolære celler ved at efterligne glutamat, et endogent neurotransmitter i nethinden 28. Når APB konkurrerer med glutamat til dets receptor, det blokerer light svar. APB har været anvendt i fysiologiske studier at kontrollere retinal funktion og måle dens virkning ved hjælp af elektrofysiologiske metoder såsom elektroretinografi (ERG). I tidligere undersøgelser har APB været brugt til både kortsigtet 29 og langtidsbehandling af udviklingen i nethinden; sidstnævnte er involveret give en enkelt dosis via intraokulær injektion dagligt i 30 dage 30. Den samme mængde APB (0,092 mg i sterilt saltvand, i en koncentration på 50 uM) blev anvendt til alle injektioner som foreslået i tidligere arbejde 28,29,31. Vi valgte APB at teste lægemiddel-harpiks kompleks som en langsom frigivelse køretøj til at levere lægemidler i øjet. De metoder, der er skitseret i denne undersøgelse svarer til tidligere beskrevne fremgangsmåder, der involverer fremstilling af den lægemiddel-harpiks kompleks 16,32; Men vi også detaljerede bestemmelser for anvendelsen specifikt i voksne rotter øjet. Efter kirurgisk implantation af APB-loaded harpiks i øjet, blev ERG udført for at fastslå, om APB afskaffer retinal lys reaktion, og derfor hvorvidt APB er lykkedes frigivet i glaslegemet og nethinden.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle udførte eksperimenter var i overensstemmelse med ARVO Redegørelse for anvendelsen af dyr til øjenlæger og Vision Research, og med godkendelse fra University of L'Aquila Animal Ethics Committee og Australian National University Dyreforsøg Ethics Committee. Voksne rotter (P100-200) blev anvendt i hele denne undersøgelse.
1. Forbered copolymerharpiks Pellets
- Placer 20 Elvax 40W piller i et lille bægerglas i stinkskab.
- Fyld bægerglasset med 100% ethanol sikrer at dække alle pellets.
- Bægerglasset dækkes med parafilm, og suge pillerne i 100% ethanol ved stuetemperatur i 7-10 dage. BEMÆRK: Fra dette trin og frem, skal du ikke bruge metal eller plastic til at håndtere eller opbevare harpiksen.
2. Forbered Drug løsning til Loading
- Opløs lægemidlet valg i 0,1% dimethylsulfoxid (DMSO). Gør medikamentopløsningen op til 40 ul i volumen.Læg harpiksen med tre gange den koncentration af lægemiddel, som ville blive givet i en enkelt dosis.
3. Forbered og Load Drug-harpiks Complex
- Overfør 20 vaskede pellets anden lille bægerglas. Opløs pillerne i 4 ml dichlormethan i ca 45 min. Bægerglasset dækkes med Parafilm mens pellets opløse.
- Der fremstilles en opløsning af Fast Green FCF ved opløsning i 0,1% DMSO til en koncentration på 0,001 mg / ml.
- Tag en pipette og udarbejde 40 ul af lægemidlet løsning udarbejdet tidligere. Læg endnu en pipette med 40 ul Fast Green løsning.
- De to opløsninger samtidigt ned i bægerglasset. Bland hurtigt ved hjælp af en glasstav, indtil den grønne farve er ensartet fordelt i hele blandingen.
- Straks overføre bægerglasset på tøris i 10 minutter til hurtigt fryse harpiksen.
- Oprette et "fordampningsemissioner kammer" for at fordampe opløsningsmidlet. Fyld enstørre beholder op til en tredjedel med kalciumsulfat småsten. Opret en brønd i småsten, og anbring forsigtigt bægerglasset i brønden, så småsten nå op til halvdelen af bægeret, for at stabilisere bægerglasset i kammeret.
- Dække større uden beholder med Parafilm.
- Overfør fordampningsemissioner kammer til fryseren. Opbevares ved -20 ° C i 2-3 uger.
4. Forbered Drug-harpiks Complex til kirurgisk implantation
- Fjern fordampningsemissioner kammer fra fryseren. Overfør faste lægemiddel-harpiks blok til en glasskål holdt på is.
- Ved hjælp af et mikroskop eller lup, skære et stykke cirka 0,05 mm i diameter og 0,1 mm i længden fra blokken ved hjælp af en trepanen eller stanseværktøjet.
- Pak resten af blokken i fryse-bevis materiale (f.eks aluminiumfolie) og hold ved -20 ° C, indtil de skal.
5. Kirugisk implantat Drug-harpiks Complex i rotteøjet
BEMÆRK: Lidocain hydrochlorid minimizes lokal ubehag.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Fuld-felt elektroretinografi (ERG) blev anvendt til at påvise virkningen af APB på nethinden. For detaljer om hvordan ERG blev udført, henvises til følgende undersøgelser 33,34. I korte træk, efter at bedøve dyret, blev en guldelektrode placeret på hornhinden af øjet, og henvisningen elektrode blev anbragt i den forreste hovedbunden mellem øjnene, til at optage den elektriske aktivitet af nethinden. Stimuli blev genereret ved hjælp af et elektronisk flashenhed og intensiteten varierede fra 10 til 10 Juni fotoisomerisering, som repræsenterer antallet af lysfølsomme molekyler aktiveret pr stang. I disse eksperimenter blev ERG optagelser taget på 1 og 7 dage efter proceduren. Det højre øje af hvert dyr blev implanteret med lægemiddel-harpikskompleks, mens fyr venstre øje blev anvendt som en ubehandlet intern kontrol.
Figur 1 viser ændringer i amplituden af b-bølge med en stigning i fotoisomerisering pr stang(Φ). I kontrolgruppen øjet, amplituden af B-bølgen stiger, flash intensiteten. I figur 1A er retinale respons optagelser givet 1 dag efter implantation. Den implanterede øje viste en lignende amplitude mønster til kontrol øjet. Amplituden Forskellen mellem de to øjne blev signifikant forskellige ved 10 6 φ (p <0,0001). Dette indikerer, at på dette tidlige tidspunkt har lægemiddel-harpiks-kompleks ikke har en effekt på retinale respons, indtil man kommer højere flash intensiteter. Figur 1B viser ændringer i ERG respons på 7 dage efter implantation. B-bølge afskaffes på alle niveauer af flash-intensitet i det implanterede øje, når sammenlignet med kontrollen øjet, der har amplituder svarende til de 1 dag optagelser. Dette er signifikant forskellig for alle amplituder for det implanterede øje på 1 dag (p <0,0001). Dette viser, at det retinale respons har afskaffet (en uge) efter implantatipå af den lægemiddel-harpikskomplekset i øjet.
Figur 1. Amplituden af b-bølge på 1 dag og 1 uge efter implantation af lægemiddel-harpikskomplekset. For begge paneler er kontrol øje vist i orange (firkanter), mens det implanterede øje er vist i grønt ( cirkler). Symbolet * repræsenterer betydning på dette punkt mellem de to øjne, hvor p <0,0001. For alle grupper, n = 5. (A) amplituden af b-bølge 1 dag efter implantation af lægemiddel-harpikskomplekset i øjet. Amplituden af b-bølge i forhold til flashintensiteten (fotoisomerisering pr stang φ) er en indikator for retinale respons. Der er ingen signifikant forskel i b-bølge amplitude mellem øjnene på alle flash intensiteter undtagen ved 10 6 φ, hvor den implanterede øjehar en lavere amplitude. (B) Amplituden af b-bølge 1 uge (7 dage) efter implantation. Amplituderne optaget fra begge øjne er signifikant forskellige på alle flash intensiteter. I den implanterede nethinden, amplituden af B-bølge var ikke måles på nogen stimulus intensiteter.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Dette papir påvises, at anvendelse af et lægemiddel-harpikskompleks til langsom frigivelse levering af lægemidler til nethinden. Vi havde til formål at præsentere en metode, som er relativt billigt og let at anvende i en lille dyremodel.
Eftersom funktionen af APB er at fungere som en glutamat-analog, vil det blokere den retinale respons i øjet. Resultaterne viser, at APB forårsagede blokering af retinale respons med en uge implantation. Dette indikerer, at APB held blev frigivet i glaslegemet og nethinden, og at dens virkninger var begrænset til øjet, at lægemiddel-harpiks-komplekset blev implanteret i. Den fulde effekt af lægemidlet blev tydeligt en uge efter implantation (figur 1B). Figur 1A viser, at 1 dag efter implantation, en betydelig reduktion af b-bølge kun var til stede i 10 6 φ intensitet i det implanterede øje. Dette kan indikere, at på dette tidlige tidspunkt, kunkegle vej, som reagerer højere lysintensiteter, blev påvirket. For at bestemme den tid, at harpiksen kan levere APB til retina, bør yderligere tidspunkter undersøges. Det foreslås, at optagelser på yderligere tidspunkter inden for 0-7 dage span bør tages, for eksempel, ved 3 og 5 dage efter implantation, at bestemme præcist, når det retinale respons er helt afskaffet. Derudover bør optagelser tages ud over 7 dage, for at bestemme hvor længe APB er frigivet til. Dette ville være indlysende som det retinale respons fortsat ville blive afskaffet, hvis APB løbende bliver frigivet langsomt ind i glaslegemet.
I denne undersøgelse blev det lægemiddel-harpiks kompleks fundet at være sikkert for levering til nethinden. APB blev opløst i 0,1% DMSO. Ved koncentrationer lig med eller højere end 0,6%, kan DMSO forårsage retinal toksicitet. Men 0,1% DMSO har vist sig at være et sikkert middel til levering af forbindelserne tilrotteøjet 35, og denne koncentration blev anvendt i alle eksperimenter i dette studie. Implantaterne blev indsat transclerally i corpus vitreum-hulen på ora serrata. Implantaterne blev observeret at forblive på ora serrata i snit af rotte øjet, som blev opsamlet efter ERG optagelserne blev foretaget. Denne placering af implantatet sikrer, at lægemiddel-harpikskompleks ikke forårsager synsnedsættelse. Denne metode involverer narkotika-harpiks-kompleks er blevet testet med andre forbindelser (offentliggørelse forberedelse), og det blev konstateret, at ingen strukturel eller funktionel øjenskader blev observeret op til to måneder efter implantation. I alt 60 dyr blev implanteret, og i 90% af tilfældene implantatet stilling forblev uændret.
Adskillige modifikationer kan foretages til teknik, hvis det er nødvendigt. I disse eksperimenter blev tre gange koncentrationen af en enkelt dosis af APB indlæst i harpiksen (50 uM x 3 = 150 uM), og dette shoULD bruges som guideline for udarbejdelse af lægemidlet løsning til læsning. Varierer imidlertid den effektive koncentration af lægemidlet i harpiksen, og skal afprøves og ændres i overensstemmelse hermed. De tidspunkter, hvor analysen er udført, kan også modificeres, for at bestemme, hvor længe harpiksen er effektiv til at frigive lægemidlet. I disse eksperimenter blev det vist, at den stabile effektiv dosis af lægemidlet indgives gennem den lægemiddel-harpikskomplekset i mindst en uge, så anbefales det, at analyse af vævet udføres mindst en uge efter implantering. Under medikamentindhold trin blev Fast Green anvendes til at sikre, at blandingen var homogeniseret. Andre biologisk sikre farve farvestoffer kan anvendes som et alternativ til Fast Green, at visualisere ensartetheden af lægemidlet i harpiksen. En begrænsning ved denne fremgangsmåde er, at Fast Green farvestof er den eneste foranstaltning af ensartet blanding. Denne teknik kan også blive testet ved hjælp af alternative dyremodeller og narkotika, med kun mindre annoncereguleringer til metoden. Hvis en større mængde af medikamentet skal leveres, kan en større størrelse implantat være nødvendig. Hvis det lykkes i disse modeller, kan denne copolymerharpiks betragtes som en terapeutisk mulighed for at levere lægemidler langsomt til nethinden for at have en fortsat effekt over tid.
Der er flere kritiske trin i protokollen, hvor ekstra pleje bør træffes. Plast og metal instrumenter bør ikke anvendes i hele syntesen og håndtering af harpiksen. Dette forhindrer forurening af polymeren, dichlormethan kan opløse plast og korrodere metal. Korrekt tørhed af lægemiddel-harpiks blok bør opnås før du bruger den til kirurgisk implantation. Kontroller, at bæger indeholdende lægemidlet og harpiksen er fuldt eksponeret for calciumsulfat med henblik på at fordampe opløsningsmidlet. Alternativt kan en frysetørrer anvendes til frysetørres lægemiddel-harpiks. Lægemiddel-harpiks blok er klar til brug, når opløsningsmidlet er fordampet, ogkun en solid blålig blok forbliver i bægeret. Når der skæres et stykke fra blokken til implantation, bør hvert stykke først tilberedes umiddelbart før operationen, da stykkerne er meget små og vanskelige at opbevare. En trepanen eller stanseværktøjet bør bruges til at skære stykker af samme størrelse, der sikrer, at hvert stykke indeholder omtrent den samme mængde af lægemidlet. Endelig, når du sætter brik i punktering sår, som den 25 G kanyle, bruger fine, spidse pincet til forsigtigt at lede stykke ind i såret. Et operativsystem mikroskop eller høj effekt lup bør anvendes som en visuel støtte.
Kun hydrofile lægemidler og forbindelser er blevet testet ved hjælp af denne metode. Den lægemiddel-harpiks-komplekser ikke vist nogen uønsket udfældning eller biprodukt dannelse, når lægemidlet blev blandet med polymeren og dichlormethan. Det foreslås, at hvert nyt lægemiddel koncentrationen halveringstid virkning, og eventuelle reaktioner med harpiksblandingen børafprøves af brugeren for at afgøre, om metoden er egnet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ikke noget at offentliggørelse.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Elvax 40W Pellets | Du Pont, DE, USA | ||
| Dimethyl sulfoxide (DMSO) | Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA | ||
| 2-amino-4-phosphonobutyric acid (APB) | Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA | A1910 | |
| Dichloromethane | Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA | 34856 | |
| Fast Green FCF | Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA | ||
| Drierite, calcium sulfate | Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA | 238910 | |
| Ketamine, Ilium Ketamil | Troy Laboratories Pty. Ltd., NSW, Australia | ||
| Xylazine, Ilium Xylazil-20 | Troy Laboratories Pty. Ltd., NSW, Australia | ||
| Atropine sulphate, Minims eye drops | Bausch & Lomb Pty. Ltd., NSW, Australia | ||
| Tetracaine hydrochloride, Minims eye drops | Bausch & Lomb Pty. Ltd., NSW, Australia | ||
| Chloramphenicol, Chlorsig ointment | Aspen Pharma Pty. Ltd., NSW, Australia | ||
| Pentobarbital, Lethabarb | Virbac Australia Pty. Ltd., NSW, Australia | ||
| Lidocaine hydrochloride, Ilium Lignocaine-20 | Troy Laboratories Pty. Ltd., NSW, Australia | ||
| Uni-Core Punch Tool | World Precision Instruments Inc., FL, USA | ||
| Curved Forceps | World Precision Instruments Inc., FL, USA | ||
| Operating Microscope, Zeiss OPMI 99 | Zeiss, West Germany | ||
| 25 G Insulin needle | Terumo Corp., Tokyo, Japan | ||
| Dumont tweezers | World Precision Instruments Inc., FL, USA |
References
- Access Economics, The global economic cost of visual impairment. AMD Alliance International. , 26-27 (2010).
- Jager, R., Aiello, L., Patel, S., Cunningham, E. Risks of intravitreous injection: A comprehensive review. Retina. 24 (5), 676-698 (2004).
- Rosenfeld, P. J., et al. Ranibizumab for neovascular age-related macular degeneration. New England Journal of Medicine. 355 (14), 1419-1431 (2006).
- Cunningham, M. A., Edelman, J. L., Kaushal, S. Intravitreal steroids for macular edema: The past, the present, and the future. Survey of Ophthalmology. 53 (2), 139-149 (2008).
- Folkman, J., Long, D. M. The use of silicone rubber as a carrier for prolonged drug therapy. Journal of Surgical Research. 4 (3), 139-142 (1964).
- Herrero-Vanrell, R., Refojo, M. F. Biodegradable microspheres for vitreoretinal drug delivery. Advanced Drug Delivery Reviews. 52 (1), 5-16 (2001).
- Kim, E., et al. Human scleral diffusion of anticancer drugs from solution and nanoparticle formulation. Pharmaceutical Research. 26 (5), 1155-1161 (2009).
- Bochot, A., et al. Intravitreal delivery of oligonucleotides by sterically stabilized liposomes. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 43 (1), 253-259 (2002).
- Bochot, A., Fattal, E. Liposomes for intravitreal drug delivery: A state of the art. Journal of Controlled Release. 161 (2), 628-634 (2012).
- Okabe, K., Kimura, H., Okabe, J., Kato, A., Kunou, N., Ogura, Y. Intraocular tissue distribution of betamethasone after intrascleral administration using a non-biodegradable sustained drug delivery device. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 44 (6), 2702-2707 (2003).
- Langer, R., Folkman, J. Polymers for the sustained release of proteins and other macromolecules. Nature. 263 (5580), 797-800 (1976).
- Silberstein, G. B., Daniel, C. W. Elvax 40P implants: Sustained, local release of bioactive molecules influencing mammary ductal development. Developmental Biology. 93 (1), 272-278 (1982).
- Smith, A. L., et al. An investigation of the role of auditory cortex in sound localization using muscimol-releasing Elvax. European Journal of Neuroscience. 19 (11), 3059-3072 (2004).
- Anomal, R., De Villers-Sidani, E., Merzenich, M. M., Panizzutti, R. Manipulation of BDNF signaling modifies the experience-dependent plasticity induced by pure tone exposure during the critical period in the primary auditory cortex. PloS one. 8 (5), e64208 (2013).
- Tu, S., Butt, C. M., Pauly, J. R., Debski, E. A. Activity-dependent regulation of substance P expression and topographic map maintenance by a cholinergic pathway. The Journal of Neuroscience. 20 (14), 5346-5357 (2000).
- Sernagor, E., Grzywacz, N. M. Influence of spontaneous activity and visual experience on developing retinal receptive fields. Current Biology. 6 (11), 1503-1508 (1996).
- Leitch, E., Coaker, J., Young, C., Mehta, V., Sernagor, E. GABA type-A activity controls its own developmental polarity switch in the maturing retina. The Journal of Neuroscience. 25 (19), 4801-4805 (2005).
- Park, C. M., Hollenberg, M. J. Basic fibroblast growth factor induces retinal regeneration in vivo. Developmental Biology. 134 (1), 201-205 (1989).
- Whitsel, A. I., Johnson, C. B., Forehand, C. J. An in ovo chicken model to study the systemic and localized teratogenic effects of valproic acid. Teratology. 66 (4), 153-163 (2002).
- Prusky, G. T., Ramoa, A. S. Novel method of chronically blocking retinal activity. Journal of Neuroscience Methods. 87 (1), 105-110 (1999).
- Colonnese, M. T., Constantine-Paton, M. Chronic NMDA receptor blockade from birth increases the sprouting capacity of ipsilateral retinocollicular axons without disrupting their early segregation. The Journal of Neuroscience. 21 (5), 1557-1568 (2001).
- Oliveira-Silva, P., et al. Matrix metalloproteinase-9 is involved in the development and plasticity of retinotectal projections in rats. Neuroimmunomodulation. 14 (3-4), 144-149 (2007).
- Trindade, P., et al. Evidence for a role of calcineurin in the development of retinocollicular fine topography. Neuroscience Letters. 487 (1), 47-52 (2011).
- Kauper, K., et al. Two-year intraocular delivery of ciliary neurotrophic factor by encapsulated cell technology implants in patients with chronic retinal degenerative diseases. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 53 (12), 7484-7491 (2012).
- Birch, D. G., Weleber, R. G., Duncan, J. L., Jaffe, G. J., Tao, W. Randomized of ciliary neurotrophic factor delivered by encapsulated cell intraocular implants for retinitis pigmentosa. American Journal of Ophthalmology. 156 (2), 283-292 (2013).
- Rauck, B. M., et al. Biocompatible reverse thermal gel sustains the release of intravitreal bevacizumab in vivo. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 55 (1), 469-476 (2014).
- Liu, Y. C., Peng, Y., Lwin, N. C., Venkatraman, S. S., Wong, T. T., Mehta, J. S. A biodegradable, sustained-released, prednisolone acetate microfilm drug delivery system effectively prolongs corneal allograft survival in the rat keratoplasty model. PloS one. 8 (8), e70419 (2013).
- Slaughter, M. M., Miller, R. F. 2-amino-4-phosphonobutyric acid: a new pharmacological tool for retina research. Science. 211 (4478), 182-185 (1981).
- Bodnarenko, S., Jeyarasasingam, G., Chalupa, L. Development and regulation of dendritic stratification in retinal ganglion cells by glutamate-mediated afferent activity. The Journal of Neuroscience. 15 (11), 7037-7045 (1995).
- Deplano, S., Gargini, C., Maccarone, R., Chalupa, L. M., Bisti, S. Long-term treatment of the developing retina with the metabotropic glutamate agonist APB induces long-term changes in the stratification of retinal ganglion cell dendrites. Dev Neurosci. 26 (5-6), 396-405 (2004).
- Horton, J., Sherk, H. Receptive field properties in the cat's lateral geniculate nucleus in the absence of on-center retinal input. The Journal of Neuroscience. 4 (2), 374-380 (1984).
- Smith, A. L., Cordery, P. M., Thompson, I. D. Manufacture and release characteristics of Elvax polymers containing glutamate receptor antagonists. Journal of Neuroscience Methods. 60 (1), 211-217 (1995).
- Gargini, C., Bisti, S., Demontis, G. C., Valter, K., Stone, J., Cervetto, L. Electroretinogram changes associated with retinal upregulation of trophic factors: observations following optic nerve section. Neuroscience. 126 (3), 775-783 (2004).
- Maccarone, R., Di Marco, S., Bisti, S. Saffron supplement maintains morphology and function after exposure to damaging light in mammalian retina. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 49 (3), 1254-1261 (2008).
- Tsai, T., Bui, B., Vingrys, A. Dimethyl sulphoxide dose-response on rat retinal function. Documenta Ophthalmologica. 119 (3), 199-207 (2009).
