Introduction
Hornhinnetransplantation är en av de mest framgångsrika och vanliga typer av transplantation som utförts på människor. Orsakerna till att denna operation utförs är en följd av skada, infektionssjukdomar 1, eller andra former av icke-infektiös hornhinnans sjukdomar 2. Siffror från Eye Bank Association of America visar att över 46.000 utfördes under 2011 (se hemsida: restoresight.org/eye_banks/eye_banks.html). En indikation på dess framgång är att ett år felfrekvens för allogena hornhinnan transplantat varierar från 10 till 15% och 5 år framgången är över 70% 3-8. Eftersom många studier har visat, är framgången för korneala allogena transplantat direkt relaterad till det faktum att ögat är ett immunologiskt privilegierat ställe. Faktorer som ansvarar för hornhinnor status som en immun privilegium anges med brist på både blod- och lymfkärl i hornhinnan, en relativ brist på antigenpresenterande celler, faktorer som produceras av hornhinnan som suppress immuneffektorfunktioner funktionerna här 9-15, lågt uttryck av MHC-antigener 16, och uttrycket av FasL 17-20.
Men trots dessa faktorer predisponerande dessa transplantat för framgång, de genomgår avslag 3-7. Därför att förstå de mekanismer som förmedlar denna avvisande samt testa olika behandlingar för att förhindra avstötning är av avgörande betydelse. Därför beskriver vi här en musmodell av hornhinnetransplantation som har varit i bruk i över 20 år för att studera hornhinnetransplantation i en kontrollerad experimentell miljö. Sedan transplantationssvar involverar många olika faktorer som arbetar i konsert som kommer ultimata avgör om den transplanterade vävnaden misslyckas eller lyckas, är det inte möjligt att förstå vikten av dessa faktorer i några in vitro-modell. Därför är studier med intakta djur som krävs för att avgöra vilka faktorer som är viktiga för antingen framgång eller failure av transplanterad vävnad.
Medan andra arter av djur har använts för att studera hornhinnetransplantation, har den murina modellen flera fördelar vid jämförelse med användning av andra arter. Den första är att det finns många stammar av möss som uttrycker vissa transgener eller har gen-inriktade sakna uttryck av specifika immunologiska faktorer vars funktion i transplantation bättre kan studeras. Dessutom finns det många reagens (både rekombinanta faktorer och antikroppar som neutraliserar faktorer) som är specifika för möss och som inte finns för många andra djurarter. På grund av förekomsten av dessa faktorer, har denna modell använts i stor utsträckning för att identifiera relevanta faktorer som akuta hornhinnan transplantations svar 15, 17,18,20 -29. Dessutom har många av de faktorer som hornhinnetransplantation är också kända för att vara funktionell i transplantation av andra vävnader.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
OBS: Alla djur som används i detta förfarande behandlas i enlighet med Föreningen för forskning i Vision och Ögon uttalande för användning av djur i oftalmisk och Vision Research samt de riktlinjer som fastställts av djurtillsynsutskott vid Saint Louis University.
Anmärkning: Alla kirurgiska instrument och lösningar steriliseras före kirurgi för att begränsa mikrobiell infektion i ögat. Det bör noteras att medan djuren upplever viss smärta från detta förfarande har vi inte anställer analgetika. Anledningen till detta beror på att alla analgetika är anti-inflammatoriska och sedan hornhinnetransplantation svar involverar inflammation, skulle användningen av anti-inflammatoriska läkemedel äventyra våra möjligheter att bestämma vilka faktorer som är inblandade i korneal transplantat misslyckande.
1. Anestesi
- Placera givar- och mottagarländerna möss under allmän anestesi genom IP-injektioner av ketamin (86.98 mg / kg) och xylazin (13,04 mg / kg).
- Håll mottagaren musen under narkos under hela förfarandet som normalt tar 30 minuter till en timme. Följaktligen ständigt övervaka musen för eventuella tecken på att återfå medvetandet.
- Applicera puralube salva på ögat som inte kommer att genomgå en operation efter att djuret bedövas att förhindra torrhet.
2. Korneal Ympning
- Skaffa givarknappen hornhinnan.
- När djuret är helt sövda, uppnå adekvat mydriasis genom administrering av ett par ögondroppar 1% tropikamid och 2,5% fenylefrinhydroklorid.
- Placera huvudet av donatordjuret horisontellt på en bräda placeras på en stadig rörligt stöd. Fixera huvudet med en tejpremsa över halsen för att säkerställa att ögat är i ett horisontellt läge under hela operationen.
- Med hjälp av en trefin 2 mm i diameter, vars spets färgades med metyl blå, utlinje den centrala hornhinnan transplantationsstället.
- Med en vass kniv, penetrerar hornhinnan och injicera Healon in i den främre kammaren för att fördjupa den för att minska risken för skada på donator endotelium och underliggande lins.
- Excidera donatortransplantat med Vannas sax och placera i en skål innehållande Hanks 'balanserade saltlösning tills användning.
- Efter givar transplantat har varit borttagna, avliva givaren musen via CO2 inhalation.
- Framställning av transplantatbädden.
- Upprepa samma steg som beskrivs i 2.1.1 till 2.1.2 för mottagaren.
- Med hjälp av en trefin 1,5 mm diameter, beskriva det mottagande transplantationsstället.
- Med en vass kniv, penetrerar hornhinnan och injicera Healon in i den främre kammaren för att fördjupa den för att minska risken för skador på den underliggande linsen.
- Ta bort skissemittknappen hornhinnan från mottagaren använder Vannas sax och kasta.
- Suturering avtransplantat
- Placera givaren hornhinnan över transplantatet säng i mottagarens hornhinnan. Se till att tillräcklig Healon är under givaren hornhinnan för att skydda donator endotelceller från skador genom direkt kontakt med linsen.
- Använda super fin spets microforceps, placera den första tuggan av 11-0 nylonsutur i givarsidan, genom donator med 90% djup av full tjocklek på mottagarens sida, sedan fästa.
- När väl hornhinnan är förankrat på plats, utför midcardinal avbrutna suturer, så att hornhinnan har 8-10 totala suturer och donatorhornhinnan är ordentligt uppradade med och anslutna till mottagarens korneal transplantatbädden.
- Fördjupa den främre kammaren
- Fördjupa den främre kammaren genom injicering av HBSS eller luftbubbla i den främre kammaren och försiktigt kontrollera integriteten av hornhinnans transplantat för läckage med en cellulosasvamp.
OBS: Om den främre kammaren inte kan reformeras så finns det en hög sannolikhet för cataract som kommer att göra framtida utvärderingar av det transplanterade hornhinnan mycket svårt och kommer också kunna leda till donator hornhinneendotel dysfunktion och därmed transplantat misslyckande.
- Fördjupa den främre kammaren genom injicering av HBSS eller luftbubbla i den främre kammaren och försiktigt kontrollera integriteten av hornhinnans transplantat för läckage med en cellulosasvamp.
- Slutlig utvärdering
- Observerar ögat för att bestämma att pupillen är rund och djupet av den främre kammaren är normalt.
OBS: Om eleven inte är runt detta indikerar att under suturering iris var skadad och därmed transplantatet anses vara ett tekniskt fel. - Tillämpa antibiotisk salva i ögat. Valfritt: Stäng locket ögat med en 7-0 silkessutur.
- Observera möss tills de är helt vaken och sedan individuellt hus dem under minst två dagar efter kirurgi.
- Observerar ögat för att bestämma att pupillen är rund och djupet av den främre kammaren är normalt.
3. Sutur Borttagande
- I de fall då locket sutur används, söva möss såsom beskrivits ovan och ta bort locket suturen vid 48 h.
- Söva möss på dag 7 efter operationen. Ta bort sutures säkra hornhinnans transplantatet. När suturerna avlägsnas och djuret har helt vaknat, återlämna den till sin bur.
4. Klinisk utvärdering
- Undersök öga för tecken på behandlingskomplikationer som inkluderar, katarakt (grumling av linsen), hyphema (blod i främre kammaren), en främre kammare som inte är av rätt djup, eller betydande opacitet av hornhinnan. Tänk de som demonstrerar dessa komplikationer som "äventyras" och avliva dem genom CO2 inhalation.
- Utför alla undersökningar på unanesthetized möss. Håll musen med ena handen på så sätt hålla fast musen så att den andra sidan kan proptose ögat för att möjliggöra en bättre bild av ögat. När observationer är avslutade, tillbaka djuret till sin bur.
- Har en observatör som inte känner till behandlingsgrupperna utvärderar transplanterade hornhinnor 2 till 3 gånger i veckan efter tecken på hornhinnan transplantatavstötningsepisoder eller hornhinnan transplantat misslyckande. Använd antingen operationsmikroskop eller en horisontell spaltlampa biomikroskop för dessa observationer.
- Utvärdera varje hornhinna för opacitet med användning av en skala från 0 till 5. Skalan definieras enligt följande:
- Tilldela ett resultat på 0 till de hornhinnor som inte har några tecken på opacitet.
- Tilldela ett resultat på 1 till de hornhinnor som visar minimal ytlig opacitet.
- Tilldela ett resultat på 2 till hornhinnor som visar milda och djupare opacitet men den underliggande pupillen och iris är fortfarande märkbara.
- Tilldela ett resultat på 3 till hornhinnan som visar stromal opacitet där iris inte kan ses i detalj med undantag för elevmarginalerna.
- Tilldela ett resultat på 4 till hornhinnan som visar tät stromal opacitet och om inga underliggande strukturer kan ses.
- Tilldela en poäng av 5 i hornhinnan som visar fullständig opacitet och intensiv stromal ödem, med eleven och iris helt skymd.
- Utvärderar också varje hornhinnan för graden av blodkärls infiltration (kärlnybildning) med hjälp av en bedömningsskala från 1 till 8. För att åstadkomma detta finns i hornhinnan som består av 4 lika kvadranter och bestämma mängden blodkärl i varje av dessa kvadranter med summan som kan sträcker sig från 0 (inga fartyg) till 2 för omfattande vaskularisering av denna kvadrant. Lägg de individuella poängen från varje kvadrant för att beräkna den slutliga kärlnybildning poäng.
- Klassificera hornhinnor som akut förkastats om de har en poäng på 3 för två på varandra följande observationer för tidpunkter upp till 5 veckor.
- Klassificera möss vars hornhinnor var klara på 5 veckor, men utvecklar opacifiering ibland> 45 dagar efter ympning, med ett resultat på 3 för två på varandra följande tidpunkter, ha genomgått sent sikt korneal allograftavstötning. Använd Kaplan-Meier överlevnadskurvor för att analysera graft överlevnad.
- Utvärdera varje hornhinna för opacitet med användning av en skala från 0 till 5. Skalan definieras enligt följande:
5. Manipulering av modell
i-left: 40px; ">- För att framställa enstaka celler, först avliva donator mus. Ta sedan bort mjälten.
- Placera mjälten i en cell sil och störa den med en sprutkolv från en 3 ml spruta.
- Tvätta celler och återsuspendera i 10 ml av Hanks balanserade saltlösning.
- Avlägsna 10 pl av cellsuspensionen och lägg till 10 | il av 0,4% trypanblått och blanda. Lägg till att hemocytometer och räkna cellerna i det centrala elnätet. Antalet celler i röret är cellantalet x 10 4 x 2 (utspädningsfaktor i trypanblått) x 10 (volym i röret).
- Söva möss som tidigare beskrivits.
- Utför injektioner med en dissekera mikroskop. För varje intrakameral injektion, använder 10 6 mjältceller i en 0,005 ml volym och en mikroliter spruta 0,25 ml försedd med en 33 G nål.
OBS: Andra manipulationerav modellen kan utföras genom att behandla djur med reagens som fungerar som antingen antagonister eller agonister för att avgöra vilken roll en viss faktor kan spela efter orthotopic hornhinnan allograft kirurgi.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Den murinmodell av hornhinnetransplantation har använts i över 20 år för att framgångsrikt karakterisera mekanismer både hornhinnan allograftavstötning 19-23 och hornhinnans allograft acceptans 13, 15,16,18, 24-27. Denna modell användes för att fastställa betydelsen av FasL uttryck i hornhinnan allograft acceptans, genom att djur som saknar FasL inte kunde acceptera hornhinnan allografter 15. Den har också använts för att visa att vascular endothelial growth factor receptor 1 morpholino behandling signifikant ökar korneal transplantatöverlevnad 28. I en mycket färsk rapport denna modell användes för att testa om förbehandling av möss innan hornhinnan ympning med kortikosteroider höll någon terapeutisk fördel 29. Författarna visade att en sådan förbehandling gjorde förbättra överlevnaden av hornhinnan allografter 29. Dessa rapporter visar tydligt att den främsta fördelen med denna modell är attman kan studera i ett levande djur de saker som anses vara viktiga för framgången för hornhinnetransplantationer hos människor.
Tidigare studier från detta laboratorium har rapporterat att en av de viktigaste mekanismer som ansvarar för hornhinnans allograftavstötning är inrättandet av systemisk fördröjd hypersensitivitet (DTH) till specifika alloantigener som uttrycks av hornhinnans allograft 19, 20. Vi har sedan använt denna modell för att testa om etablering av systemalloantigen DTH tolerans mot alloantigener som uttrycks av donatorhornhinnan allograft förbättrar överlevnaden av sådana transplantat. Såsom visas i fig 1, BALB / c-möss toleranta till C57BL / 10 (B10) alloantigener inte förbättrade korneal allograft accept mätt genom medelöverlevnadstid för dessa korneala allogena transplantat. Således den genomsnittliga överlevnadstiden för avvisade hornhinnorna var densamma oavsett om möss toleranta eller inte. Vi utförde också liknande studier med hjälp av svaren hudtransplantation som ett medelatt testa effektiviteten av systemisk DTH tolerans. Dessa studier visade att när DTH tolerans ades i BALB / c-möss mot B10 alloantigener, ympar huden bär vissa (B10.D2 och C.B10-H-2b) eller alla B10 alloantigener inte visa någon ökad genomsnittlig överlevnadstid ( Figur 2). Vi drog slutsatsen från dessa studier att BALB / c-möss som hade etablerade svar antigenspecifika DTH inte erhöll någon mätbar nytta av sådan tolerans för antingen hornhinnan eller hudallotransplantat. Dessa data indikerar också att information som genereras studerar en musmodell av hornhinnetransplantation kommer ibland att vara direkt tillämpliga på andra typer av fasta vävnadstransplantation.
Figur 1. BALB / c-möss injicerades in i den främre kammaren med 10 6 mjältceller från C57BL / 10 (B10) möss. (p> 0,05).
Figur 2. Injektion av mjältceller in i den främre kammaren, inte påverkar överlevnaden för allogena hudtransplantat. BALB / c-möss injicerades in i den främre kammaren med 10 6 mjältceller från C57BL / 10-möss. Efter en vecka dessa möss separat inympade med hud från C57BL / 10, n = 10, B10.D2, n = 7, C.B10-H-2 b, n = 7 möss och jämfördes medmöss som inte injicerades och inympas med C57BL / 10 hud, n = 10. Resultaten uttrycks som medelöverlevnadstiden + SEM.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Den murinmodell av hornhinnetransplantation beskrivs här gör det möjligt för forskaren att studera mänsklig hornhinnan allograftavstötning i en modell som förutsäger vilka faktorer som bäst förknippas med både avslag 15,17,18,20, 26-30 och acceptans 21-25 av hornhinnan allotransplantat. Till skillnad från människa hornhinnetransplantation, där patienterna får antingen lokal eller systemisk behandling steroid antingen behandla eller förhindra avstötning 31, är denna modell som vanligtvis används för att fastställa de faktorer som är relevanta för allograftavstötning i avsaknad av sådan terapi. Förutom en modell för akut hornhinnans allograftavstötning, vilket vanligtvis sker inom 30 till 40 dagar efter transplantation redovisar vi också ett sent sikt modell för ett sådant avslag som inträffar 45 dagar efter ympning i möss och härmar många av funktionerna i slutet -TERM och kronisk avstötning 32,33 vilket hittills inte har modellerats hos djur.
THan modellens styrka är att man kan dissekera olika mekanismer som är ansvariga för den relativt höga andelen hornhinnans allograft acceptans samt avgöra vilka mekanismer som är mest ansvariga för hornhinnans allograft misslyckande. Denna modell möjliggör också en för att testa olika terapeutiska strategier i ett djur som uppvisar ett immunsystem som är mycket likt det mänskliga immunsystemet. För detta ändamål, förekomsten av många reagens som reagerar med murina faktorer såväl som transgena och genmodifierade möss, tillåta för utvärdering av så många fler faktorer än vad som skulle vara fallet med andra arter. Denna förmåga att värdera så många olika faktorer som är viktiga för både framgång och misslyckande hornhinnan allografter är en betydande positiv till förmån för att använda denna musmodell kontra andra djurmodeller där kirurgi är lättare att utföra på grund av den ökade storleken på ögon dessa arter.
Även om det finns flera svagheter i denna modell,vi tror styrkorna uppväger dem. En av de mest betydelsefulla, som nämndes ovan, är den tekniska sakkunskap på utförande hornhinnetransplantation hos möss. På grund av den lilla storleken av den murina ögat, kräver detta någon som är skicklig på mikrokirurgi, både i utförande transplantationen samt avlägsnande av suturer. Därför upprepas praxis som krävs för att behärska och bibehålla kunskaper på denna teknik. Den andra svagheten är att medan möss är mycket lika till människor, är inte de samma. Dessa djur uppvisar en större tendens till kärlnybildning, än vad mänskliga hornhinnor. Dessutom kommer denna modell inte efterlikna de kirurgiska ingrepp avsedda för behandling av endotelceller dysfunktion som Fuchs dystrofi 2. Före senaste årens full tjocklek transplantationer som de som används i den beskrivna protokollet användes. För närvarande har endotelceller transplantationer involverar endast endotel delen av hornhinnan varit anställd
För sent sikt avslag (> 45 dagar) två faktorer som är unika för den här versionen av modellen sticker ut. Den första svagheten med denna form av modellen är att mössen måste upprätthållas i minst två till tre månader för att studera sent sikt avslag. Och för det andra, måste hornhinnorna först överleva potentiella akuta avstötningsreaktioner. Sådana akut rejektion inträffa i 50-70% av mottagarna 17, 20 -24. Alltså att studera sent sikt avslag kommer ympas möss vars transplantationer kommer att avvisas akut och kommer inte att överleva till 45 dagar efter ympning. För att mildra detta har vi funnit att detta procenttal hos hanmöss är mindre än den som observerades för honmöss (manuskript under utarbetande) och på så sätt att studera begreppet avslag sen det rekommenderas att endast hanmössanvändas. Vi försökte också att förlänga hornhinnans allograftöverlevnad med steroidbehandling, men detta inte visar sig vara särskilt användbara (personliga observationer) och därför inte rekommendera att steroidbehandling användas. Trots dessa komplikationer och den varning som sannolikt ungefär hälften eller något mer av dem som inympad med allogena hornhinnor kommer förbli klar förrän efter 45 dagar, är det fortfarande en mycket användbar modell för att studera de faktorer som är relevanta för sent sikt avslag.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Zeiss Surgical Microscope | Zeiss | Rebuilt | |
| 1 ml Syringe | BD | 305122 | |
| 3 ml Syringe | BD | 309657 | |
| 10 ml Syringe | BD | 309602 | |
| Vannus Scissors | Stortz | E-3387 | |
| 11-0 Sutures | Alcon | 717939M | |
| Trephine 2.0 mm | Katena | K 2-7520 | |
| Trephine 1.5 mm | Katena | K 2-7510 | |
| Tricaine Hydrochloride 0.5% | Alcon | NDC 0065-0741-12 | |
| Healon | Abbott | Healon OVD | |
| Forceps | FST | 11251-20 | |
| 7-0 Sutures | Alcon | 8065 | |
| 2.5% Phenylephrine HCl | Alcon | NDC 61314-342-02 | |
| 1% Tropicamide | Bausch & Lomb | NDC-24208-585-59 | |
| Hamilton Syringe | Hamilton | 7654-01 | |
| 33 gauge needle | Hamilton | 90033 | |
| Cell Strainer (100 μm nylon) | BD Falcon | 352360 | |
| Hemocytometer | Cardinal Health | B3175 | |
| Trypan Blue | Sigma | T8154 |
References
- Farooq, A. V., Shukla, D. Herpes simplex epithelial and stromal keratitis: an epidemiologic update. Surv. Ophthalmol. , 448-462 (2012).
- Gipson, I. K. Age-related changes and diseases of the ocular surface and. Invest. Opthlamol. Vis. Sci. 54, 48-53 (2013).
- Edwards, M., et al. Indications for corneal transplantation in New Zealand: 1991-1999. Cornea. 21, 152-155 (2002).
- Thompson, R. W., Price, M. O., Bowers, P. J., Price, F. W. Long-term survival after penetrating keratoplasty. Ophthalmol. 110, 1396-1402 (2003).
- Williams, K. A., Roder, D., Esterman, A., Muehlberg, S. M., Coster, D. J. Factors predictive of corneal graft survival. Report form the Australian Corneal Graft Registry. Ophthalmology. 99, 403-414 (1992).
- Larkin, D. F. Corneal allograft rejection. Br. J. Ophthalmol. 78, 649-652 (1994).
- Boisjoly, H. M., et al. Risk factors of corneal graft failure. Ophthalmol. 100, 1728-1735 (1993).
- Sugar, A., et al. Recipient Risk Factors for Graft Failure in the Cornea Donor Study. Ophthalmol. 116, 1023-1028 (2009).
- Namba, K., Kitaichi, N., Nishida, T., Taylor, A. W. Induction of regulatory T cells by the immunomodulating cytokines alpha-melanocyte-stimulating hormone and transforming growth factor-beta2. J. Leukoc. Biol. 72, 946-952 (2002).
- Taylor, A. W., Yee, D. G., Streilein, J. W. Suppression of nitric oxide generated by inflammatory macrophages by calcitonin gene-related peptide in aqueous humor. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 39, 1372-1378 (1998).
- Wilbanks, G. A., Mammolenti, M., Streilein, J. W. Studies on the induction of anterior chamber-associated immune deviation (ACAID). III. Induction of ACAID depends upon intraocular transforming growth factor-beta. Eur. J. Immunol. 22, 165-173 (1992).
- Volpert, O. V., et al. Inducer-stimulated Fas targets activated endothelium for destruction by anti-angiogenic thrombospondin-1 and pigment epithelium-derived factor. Nat. Med. , 8-349 (2002).
- Apte, R. S., Sinha, D., Mayhew, E., Wistow, G. J., Niederkorn, J. Y. Cutting edge: role of macrophage migration inhibitory factor in inhibiting NK cell activity and preserving immune privilege. J. Immunol. 160, 5693-5696 (1998).
- Kennedy, M. C., et al. Novel production of interleukin-1 receptor antagonist peptides in normal human cornea. J. Clin. Invest. 95, 82-88 (1995).
- Shimmura-Tomita, M., Wang, M., Taniguchi, H., Akiba, H., Yagita, H., Hori, J. Galectin-9-mediated protection from allo-specific T cells as a mechanism of immune privilege of corneal allografts. PLoS One. 8, (2013).
- Goldberg, M. F., Ferguson, T. A., Pepose, J. S. Detection of cellular adhesion molecules in inflamed human corneas. Ophthalmol. 101, 161-168 (1994).
- Stuart, P. M., Griffith, T. S., Usui, N., Pepose, J. S., Yu, X., Ferguson, T. A. CD95 ligand (FasL)-induced apoptosis is necessary for corneal allograft survival. J Clin Invest. 99, 396-402 (1997).
- Yamagami, S., et al. Role of Fas-Fas ligand interactions in the immunorejection of allogeneic mouse corneal transplants. Transplantation. 64, 1107-1111 (1997).
- Stuart, P. M., Pan, F., Plambeck, S., Ferguson, T. A. Fas/Fas ligand interactions regulate neovascularization in the cornea. Invest. Ophthalmmol. Vis. Sci. 44, 93-98 (2003).
- Stuart, P. M., Yin, X. T., Pan, F., Haskova, Z., Plambeck, S., Ferguson, T. A. Inhibitors of matrix metalloproteinases activity prolong corneal allograft acceptance by increasing FasL expression. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 45, 1169-1173 (2004).
- Joo, C. -K., Pepose, J. S., Stuart, P. M. T-cell mediated responses in a murine model of orthotopic corneal transplantation. Invest.Ophthalmol. Vis. Sci. 36, 1530-1540 (1995).
- Sonoda, Y., Sano, Y., Ksander, B., Streilein, J. W. Characterization of cell-mediated immune responses elicited by orthotopic corneal allografts in mice. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 36, 427-434 (1995).
- Sano, Y., Osawa, H., Sotozono, C., Kinoshita, S. Cytokine expression during orthotopiccorneal allograft rejection in mice. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 39, 1953-1957 (1998).
- Haskova, Z., Usui, N., Ferguson, T. A., Pepose, J. S., Stuart, P. M. CD4+ T cells are critical in corneal but not skin allograft rejection. Transplantation. 69, 483-488 (2000).
- Tan, Y., et al. Immunological disruption of antiangiogenic signals by recruited allospecific T cells leads to corneal allograft rejection. J. Immunol. 188, 5962-5969 (2012).
- Dana, M. R., Yamada, J., Streilein, J. W. Topical interleukin-1 receptor antagonist promotes corneal transplant survival. Transplantation. 63, 1501-1507 (1997).
- Cunnusamy, K., Chen, P. W., Niederkorn, J. Y. IL-17A-dependent CD4+CD25+ regulatory T cells promote immune privilege of corneal allografts. J. Immunol. 186, 6737-6745 (2011).
- Fu, H., et al. Arginine depletion as a mechanism for the immune privilege of corneal allografts. Eur. J. Immunol. 41, 2997-3005 (2011).
- Medina, C. A., Rowe, A. M., Yun, H., Knickelbein, J. E., Lathrop, K. L., Hendricks, R. L. Azithromycin treatment increases survival of high-risk corneal allotransplants.Cornea. , 32-658 (2013).
- Cho, Y. K., Zhang, X., Uehara, H., Young, J. R., Archer, B., Ambati, B. Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1 morpholino increases graft survival in a murine penetrating keratoplasty. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 53, 8458-8471 (2012).
- Kim, H. K., Choi, J. A., Uehara, H., Zhang, X., Ambati, B. K., Cho, Y. K. Presurgical corticosteroid treatment improves corneal transplant survival in mice. Cornea. 32, 1591-1598 (2013).
- Yamazoe, K., Yamazoe, K., Shimazaki-Den, S., Shimazaki, J. Prognostic factors for corneal graft recovery after severe corneal graft rejection following penetrating keratoplasty. BMC Ophthalmol. 13, 5 (2013).
- Panda, A., Vanathi, M., Kumar, A., Dash, Y., Priya, S. Corneal graft rejection. Surv. Ophthalmol. 52, 375-396 (2007).
- Patel, S. V. Graft survival and endothelial outcomes in the new era of endothelial keratoplasty. Exp. Eye Res. 95, 40-47 (2012).
- Anshu, A., Price, M. O., Tan, D. T., Price, F. W. Jr Endothelial keratoplasty: a revolution in evolution. Surv. Ophthalmol. 57, 236-252 (2013).
