Introduction
Hornhindetransplantation er en af de mest vellykkede og almindelige typer af transplantation udføres i mennesker. Hvorfor denne operation udføres, er et resultat af skade, infektionssygdomme 1, eller andre former for ikke-infektiøs corneasygdom 2. Tal fra Eye Bank Association of America viser, at over 46.000 blev udført i 2011 (se hjemmeside på: restoresight.org/eye_banks/eye_banks.html). En indikation af dens succes er at et år fejlrater for allogene hornhinde podninger spænder fra 10 til 15%, og efter 5 år succesen er over 70% 3-8. Så mange undersøgelser har vist, er succes hornhinde allotransplantater direkte relateret til det faktum, at øjet er et immunologisk privilegeret sted. Faktorer, der er ansvarlige for hornhinder status som en immun privilegium websted omfatter manglen på både blod- og lymfekar i hornhinden, en relativ mangel af antigen-præsenterende celler, faktorer produceret af hornhinden at suppress immuneffektorceller funtions 9-15, lav ekspression af MHC antigener 16, og ekspressionen af FasL 17-20.
Men på trods af disse faktorer, som disponerer disse podninger for succes, må de gennemgå afvisning 3-7. Derfor forstå de mekanismer, der medierer denne afvisning samt teste de forskellige behandlingsformer til at forhindre afstødning er af afgørende betydning. Med henblik herpå vi beskriver her en murin model for hornhinde-transplantation, der har været i brug i over 20 år til at undersøge corneal transplantation i et kontrolleret eksperimentelle miljø. Da transplantationscentre reaktioner involverer mange forskellige faktorer, der arbejder i koncert, der vil endelige afgøre, om det transplanterede væv svigter eller lykkes, er det ikke muligt at forstå betydningen af disse faktorer i en in vitro model. Derfor er undersøgelser med anvendelse af levende dyr for at afgøre, hvilke faktorer er vigtige for enten succes eller failure af transplanteret væv.
Mens andre dyrearter er blevet anvendt til at studere hornhindetransplantation den murine model har flere fordele i forhold til anvendelse af andre arter. Den første er, at der findes mange stammer af mus, der udtrykker bestemte transgener eller er blevet gen-målrettede at mangle ekspression af specifikke immunologiske faktorer, hvis funktion i transplantation bedre kan undersøges. Derudover er der mange reagenser (både rekombinante faktorer og antistoffer, der neutraliserer faktorer), der er specifikke for mus, og som ikke findes for mange andre arter af dyr. På grund af eksistensen af disse faktorer, er denne model blevet brugt i udstrakt grad at identificere relevante faktorer involveret i akutte hornhinde allogen svar 15, 17,18,20 -29. Desuden er mange af de faktorer, der er involveret i hornhinde transplantation også kendt for at være funktionelle i transplantation af andre væv.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
BEMÆRK: Alle dyr, der anvendes i denne procedure behandles i overensstemmelse med Foreningen for Forskning i Vision og Oftalmologi redegørelse for brugen af dyr i Ophthalmic og Vision Research samt de retningslinjer, der er fastsat af dyret tilsynsudvalg ved Saint Louis University.
BEMÆRK: Alle kirurgiske instrumenter og opløsninger steriliseres forud for operation for at begrænse mikrobiel infektion i øjet. Det skal bemærkes, at mens dyrene gøre oplever nogen smerte fra denne procedure, vi ikke beskæftiger analgetika. Grunden til dette er, fordi alle analgetika er anti-inflammatorisk og da hornhindetransplantation reaktioner involverer inflammation, ville anvendelsen af anti-inflammatoriske lægemidler kompromittere vores evne til at bestemme, hvilke faktorer er involveret i corneal graft svigt.
1. Anæstesi
- Placer donor- og modtagerlande mus under generel anæstesi ved IP injektioner af ketamin (86.98 mg / kg) og xylazin (13,04 mg / kg).
- Hold modtageren mus under anæstesi hele proceduren tager typisk 30 minutter til en time. Derfor overvåger konstant musen for tegn på at genvinde bevidstheden.
- Anvend puralube salve til øjet som ikke vil undergå operation, efter at dyret er bedøvet at forhindre tørhed.
2. Corneal Podning
- Indhentning donor knappen hornhinde.
- Når dyret er fuldt bedøvet opnå tilstrækkelig mydriasis ved administration af et par øjendråber 1% tropicamid og 2,5% phenylephrin hydrochlorid.
- Placer hovedet donordyrets vandret på et bord placeret på en robust bevægelig støtte. Fastgør hovedet med en strimmel af tape hen over halsen for at sikre, at øjet er i en vandret stilling gennem hele operationen.
- Ved hjælp af en diameter trepan 2 mm, hvis spids blev farvet med methyl blue, udlinje centrale hornhinde implantatstedet.
- Med en skarp kniv, trænge ind i hornhinden og injicere Healon ind i det forreste kammer for at uddybe det at mindske risikoen for beskadigelse af donor endotel og underliggende linse.
- Udskære donor graft med Vännäs saks og anbringes i en skål indeholdende Hanks 'balancerede saltopløsning indtil brug.
- Når donor graft har været fjernet aflive donor mus via CO 2 inhalation.
- Forberedelse af implantatet seng.
- Gentag de samme trin som beskrevet i punkt 2.1.1 gennem 2.1.2 for modtageren.
- Ved hjælp af en diameter trepan 1,5 mm, skitsere modtageren graft site.
- Med en skarp kniv, trænge ind i hornhinden og injicere Healon ind i det forreste kammer for at uddybe det at reducere risikoen for beskadigelse af det underliggende linse.
- Fjern den skitserede centrale hornhinde knap fra modtageren vha Vännäs saks og kassér.
- Sutureringgraft
- Placer donor hornhinden over transplantatet seng i modtagerens hornhinde. Vær sikker på, at tilstrækkelig Healon er under donor hornhinden at beskytte donor endotelceller fra skader ved direkte kontakt med linsen.
- Brug super fin tippet microforceps placere den første bid af 11-0 nylonsutur ind donorsiden gennem donor med 90% dybde af fuld tykkelse på modtagerens side, og derefter binde off.
- Når hornhinden er forankret på plads, udføre midcardinal afbrudte suturer således at hornhinden har 8 til 10 i alt suturer og donor hornhinden er sikkert linet op med og er knyttet til modtageren hornhindetransplantatafstødning seng.
- Uddybning forkammeret
- Uddybe det forreste kammer ved at injicere HBSS eller luftboble ind i det forreste kammer og kontrollere forsigtigt integritet corneal graft for lækage med en cellulosesvamp.
BEMÆRK: Hvis det forreste kammer ikke kan reformeres, så er der en stor sandsynlighed for cataract som vil gøre fremtidige evalueringer af det transplanterede hornhinde meget vanskelig og vil også potentielt føre til donor hornhindeendothel dysfunktion og dermed graftsvigt.
- Uddybe det forreste kammer ved at injicere HBSS eller luftboble ind i det forreste kammer og kontrollere forsigtigt integritet corneal graft for lækage med en cellulosesvamp.
- Afsluttende evaluering
- Observere øjet at fastslå, at eleven er rund og dybden af det forreste kammer er normal.
BEMÆRK: Hvis eleven ikke er runde dette indikerer, at under suturering iris blev beskadiget og dermed graft betragtes som en teknisk fejl. - Påfør antibiotisk salve til øjet. Valgfrit: Luk øjet låg med en 7-0 silke sutur.
- Observere mus, indtil de er helt vågen og derefter individuelt huse dem i mindst to dage efter operationen.
- Observere øjet at fastslå, at eleven er rund og dybden af det forreste kammer er normal.
3. sutur fjernelse
- I de tilfælde, hvor låget sutur anvendes, bedøver mus som beskrevet ovenfor, og fjerne låget sutur på 48 timer.
- Bedøver mus på dag 7 efter operationen. Fjern sutures sikre corneal graft. Når suturerne er fjernet, og dyret har fuldt vækket, returnere det til sit bur.
4. Klinisk Evaluering
- Undersøg øje for indikationer af proceduremæssige komplikationer, som omfatter, grå stær (uklarhed af linsen), hyphema (blod i forkammeret), en forreste kammer, der ikke er i den korrekte dybde, eller betydelig uigennemsigtighed af hornhinden. Overvej dem, der demonstrerer disse komplikationer som "kompromitteret" og aflive dem ved CO 2 inhalation.
- Udfør alle undersøgelser på ubedøvede mus. Holde musen med den ene hånd således fastholdende mus, så den anden side kan proptose øjet for at muliggøre en bedre visning af øjet. Når observationer er afsluttet, sende dyret tilbage til sit bur.
- Har en observatør uvant med behandlingsgrupper evaluere transplanterede hornhinder 2 til 3 gange om ugen for tegn på hornhindetransplantatafstødningafstødningspeosoder eller hornhindetransplantatafstødning fiasko. Brug enten kirurgisk mikroskop eller en horisontal spaltelampe biomikroskop for disse observationer.
- Vurdere hver hornhinden for uklarhed ved hjælp af en skala fra 0 til 5. Skalaen er defineret som følger:
- Tildele en score fra 0 til disse hornhinder, der har ingen tegn på opacitet.
- Tildel en score på 1 til disse hornhinder, der viser minimal overfladisk opacitet.
- Tildel en score på 2 til hornhinder, der viser mild og dybere opacitet men den underliggende elev og iris er stadig mærkbar.
- Tildele en score på 3 til hornhinden, der viser stromal opacitet hvor iris ikke kan ses i detaljer med undtagelse af eleven margener.
- Tildel en score på 4 til hornhinden, der viser tætte stromale opacitet og hvis der ikke underliggende strukturer kan ses.
- Tildel en score på 5 til hornhinden, der viser fuldstændig uigennemsigtighed og intensiv stromal ødem, med elev og iris helt skjult.
- Også evaluere hver hornhinden for graden af blodkar infiltration (neovaskularisering) ved hjælp af en rating skala fra 1 til 8. For at opnå dette, se hornhinden som bestående af 4 lige store kvadranter og bestemme mængden af blodkar i hver af disse kvadranter med et score, der vil spænde fra 0 (ingen fartøjer) til 2 for omfattende vaskularisering af denne kvadrant. Tilsæt de individuelle scores fra hver kvadrant til at beregne den endelige neovaskularisering score.
- Klassificere hornhinder som akut afvist, hvis de har en score på 3 for to på hinanden følgende observationer for tiden peger op til 5 uger.
- Klassificere mus hvis hornhinder var klar ved 5 uger, men udvikle opacifikation til tider> 45 dage poste indpodning, med en score på 3 for to på hinanden følgende tidspunkter, som har undergået en sen sigt hornhinde allograftafstødning. Brug Kaplan-Meier-overlevelseskurver at analysere graft overlevelse.
- Vurdere hver hornhinden for uklarhed ved hjælp af en skala fra 0 til 5. Skalaen er defineret som følger:
5. Manipulation af Model
i venstre: 40px; ">- For at fremstille enkelte celler, først aflive donor mus. Fjern derefter milten.
- Placer milten i en celle si og forstyrre det med en sprøjte stempel fra en 3 ml sprøjte.
- Vask cellerne og resuspenderes i 10 ml Hanks Balanced Salt Solution.
- Fjern 10 pi cellesuspension og tilføje til 10 pi 0,4% trypanblåt og blandes. Tilføje, at hemocytometer og tælle cellerne i det centrale net. Antallet af celler i røret er celletallet x 10 4 x 2 (fortyndingsfaktor trypanblåt) x 10 (volumen i røret).
- Bedøver mus som tidligere beskrevet.
- Udfør injektioner anvender et dissektionsmikroskop. For hver intrakameral injektion, skal du bruge 10 6 miltceller i en 0,005 ml volumen og en 0,25 ml mikroliter sprøjte forsynet med en 33 G kanyle.
BEMÆRK: Andre manipulationeraf modellen kan udføres ved behandling af dyr med reagenser, der virker som enten antagonister eller agonister for at bestemme den rolle, som en bestemt faktor kan spille efter orthotopisk hornhinden allograft kirurgi.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Den murine model af hornhindetransplantation har været anvendt i over 20 år med held karakterisere mekanismer både hornhinde allograftafstødning 19-23 og hornhinden allograft accept 13, 15,16,18, 24-27. Denne model blev brugt til at fastslå betydningen af FasL ekspression i hornhinde allograft accept, i, at dyr, der mangler FasL ikke var i stand til at acceptere hornhinde allografter 15. Det er også blevet anvendt til at påvise, at vaskulær endotel vækstfaktor receptor 1 morpholino behandling øger corneal graft overlevelse 28. I en nylig rapport denne model blev anvendt til at teste, om forbehandling af mus før hornhinde transplantation med kortikosteroider afholdt nogen terapeutiske fordele 29. Forfatterne viste, at en sådan forbehandling gjorde forbedre overlevelsesraten for hornhinde allografter 29. Disse rapporter viser klart, at den primære fordel ved denne model er, atman kan studere i et levende dyr de ting, der menes at være vigtig for succes hornhindetransplantater hos mennesker.
Tidligere undersøgelser fra dette laboratorium har rapporteret, at en af de vigtigste mekanismer, der er ansvarlige for corneal allograftafstødning er oprettelsen af systemiske forsinket hypersensitivitet (DTH) til specifikke alloantigener udtrykt af hornhinde allograft 19, 20. Vi har siden brugt denne model til at teste, om etablering af systemisk alloantigen DTH tolerance over alloantigener udtrykt af donor hornhinde allograft forbedrer overlevelsen af disse transplantater. Som vist i figur 1, BALB / c-mus tolerante til C57BL / 10 (B10) alloantigener ikke forbedre corneal allograft accept som målt ved gennemsnitlige overlevelsestid for disse corneale allotransplantater. Således den gennemsnitlige overlevelsestid for afviste hornhinder var den samme, uanset om mus blev gjort tolerante eller ikke. Vi også udført lignende undersøgelser under anvendelse af hudtransplantation svar som et middelat teste effektiviteten af systemiske DTH tolerisering. Disse undersøgelser viste, at når DTH tolerance blev etableret i BALB / c mus mod B10 alloantigener, podning hud bærer nogle (B10.D2 og C.B10-H-2 b) eller alle B10 alloantigener ikke vise nogen øget gennemsnitlig overlevelsestid ( figur 2). Vi konkluderede fra disse undersøgelser, at BALB / c-mus, der havde etableret antigenspecifikke DTH-responser ikke udlede nogen målelig fordel af en sådan tolerance for enten hornhinden eller hudallotransplantater. Disse data indikerer også, at information, der genereres studere en murin model for hornhinde-transplantation vil til tider direkte anvendelse på andre former for fast væv transplantation.
Figur 1. BALB / c-mus blev injiceret ind i det forreste kammer med 10 6 miltceller fra C57BL / 10 (B10) mus. (p> 0,05).
Figur 2. Injektion af miltceller i forkammeret ikke påvirker overlevelsen af allogene hudtransplantater. BALB / c-mus blev injiceret ind i det forreste kammer med 10 6 miltceller fra C57BL / 10-mus. Efter en uge blev disse mus separat indpodet med hud fra C57BL / 10, n = 10, B10.D2, n = 7, C.B10-H-2 b, n = 7 mus og sammenlignet medmus, der ikke var injiceret og podet med C57BL / 10 hud, n = 10. Resultaterne er udtrykt som den gennemsnitlige overlevelsestid + SEM.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Den murine model af hornhinde transplantation beskrevet her giver investigator for at studere menneskets hornhinde allograftafstødning i en model, der er prædiktive for, hvilke faktorer der bedst forbundet med både afvisning 15,17,18,20, 26-30 og accept 21-25 af hornhinde allografter. I modsætning til den menneskelige hornhinde transplantation, hvor patienterne får enten topisk eller systemisk steroidbehandling til enten at behandle eller forhindre afstødning 31, er denne model anvendes typisk til at bestemme de faktorer, der er relevante for afstødning i mangel af en sådan terapi. I tillæg til en model for akut corneal allotransplantatafvisning, hvilket typisk sker inden for 30 til 40 dage efter transplantationen, vi også præsentere en sen sigt model for en sådan afvisning, der forekommer 45 dage efter indpodning i mus og efterligner mange af funktionerne i sent -term og kronisk afstødning 32,33 som hidtil ikke er blevet modelleret i dyr.
Than modellens styrker er, at man kan dissekere forskellige mekanismer, som er ansvarlige for den relativt høje hornhinde allograft accept samt at afgøre, hvilke mekanismer er mest ansvarlige for corneal allograft fiasko. Denne model gør det også muligt at teste forskellige terapeutiske strategier i et dyr, der har et immunsystem, der er meget lig det humane immunsystem. Med henblik herpå eksistensen af mange reagenser, der reagerer med murine faktorer såvel som transgene og gen-målrettede mus muliggør vurdering af så mange flere faktorer, end det ville være tilfældet med andre arter. Denne evne til at vurdere mange forskellige faktorer, der er vigtige for både succes og fiasko for hornhinden allotransplantater er en signifikant positiv fordel for anvendelse af denne musemodel versus andre dyremodeller, hvor kirurgi er lettere at udføre på grund af den forøgede størrelse af øjne disse arter.
Mens der er flere svagheder i denne model,vi mener styrker langt opvejer dem. En af de mest betydningsfulde, som blev omtalt ovenfor, er det teknisk ekspertise involveret i udførelsen af corneal transplantation i mus. På grund af den lille størrelse af den murine øje kræver dette en person, der er dygtig til mikrokirurgi, både i at udføre transplantation samt fjernelse af suturer. Derfor kræves gentagne praksis at mestre og vedligeholde færdighed på denne teknik. Den anden svaghed er, at mens mus er meget lig mennesker, er de ikke de samme. Disse dyr viser en større tendens til neovaskularisering, end at gøre menneskelige hornhinder. Desuden vil denne model ikke efterligne kirurgiske procedurer beregnet til at behandle endotelcelle dysfunktion som Fuch s dystrofi 2. Forud for de seneste års fuld tykkelse transplantationer som dem, der anvendes i den beskrevne protokol var ansat. I øjeblikket har endotelceller transplantationer, hvori kun endotel del af hornhinden været ansat
For sen sigt afstødning (> 45 dage) to faktorer unikke for denne version af modellen skiller sig ud. Den første svaghed med denne form for modellen er, at musene skal opretholdes i mindst to til tre måneder for at studere sent sigt afvisning. Og for det andet skal de hornhinder først overleve potentielle akutte afstødningsreaktioner. Sådanne akutte afvisninger forekomme i 50 til 70% af modtagerne 17, 20 -24. Således at studere sent sigt afvisning man vil indpode mus hvis transplantationer vil blive afvist akut og vil ikke overleve indtil 45 dage efter indpodning. For at afbøde dette har vi fundet, at afvisningen sats i hanmus, er mindre end den, der blev observeret for hunmus (manuskript under udarbejdelse), og dermed til at studere sent sigt afvisning det tilrådes, at kun mandlige musanvendes. Vi forsøgte også at forlænge hornhinde allotransplantatoverlevelse med steroidbehandling, men dette ikke vise sig at være særlig nyttig (personlige observationer) og således ikke anbefale, at steroid behandling skal anvendes. På trods af disse komplikationer, og det forbehold, at sandsynligvis ca. halvdelen eller lidt mere af dem indpodet med allogene hornhinder vil forblive klar indtil 45 dage efter, er det stadig en meget nyttig model til at studere de faktorer, der er relevante for sent sigt afvisning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Zeiss Surgical Microscope | Zeiss | Rebuilt | |
| 1 ml Syringe | BD | 305122 | |
| 3 ml Syringe | BD | 309657 | |
| 10 ml Syringe | BD | 309602 | |
| Vannus Scissors | Stortz | E-3387 | |
| 11-0 Sutures | Alcon | 717939M | |
| Trephine 2.0 mm | Katena | K 2-7520 | |
| Trephine 1.5 mm | Katena | K 2-7510 | |
| Tricaine Hydrochloride 0.5% | Alcon | NDC 0065-0741-12 | |
| Healon | Abbott | Healon OVD | |
| Forceps | FST | 11251-20 | |
| 7-0 Sutures | Alcon | 8065 | |
| 2.5% Phenylephrine HCl | Alcon | NDC 61314-342-02 | |
| 1% Tropicamide | Bausch & Lomb | NDC-24208-585-59 | |
| Hamilton Syringe | Hamilton | 7654-01 | |
| 33 gauge needle | Hamilton | 90033 | |
| Cell Strainer (100 μm nylon) | BD Falcon | 352360 | |
| Hemocytometer | Cardinal Health | B3175 | |
| Trypan Blue | Sigma | T8154 |
References
- Farooq, A. V., Shukla, D. Herpes simplex epithelial and stromal keratitis: an epidemiologic update. Surv. Ophthalmol. , 448-462 (2012).
- Gipson, I. K. Age-related changes and diseases of the ocular surface and. Invest. Opthlamol. Vis. Sci. 54, 48-53 (2013).
- Edwards, M., et al. Indications for corneal transplantation in New Zealand: 1991-1999. Cornea. 21, 152-155 (2002).
- Thompson, R. W., Price, M. O., Bowers, P. J., Price, F. W. Long-term survival after penetrating keratoplasty. Ophthalmol. 110, 1396-1402 (2003).
- Williams, K. A., Roder, D., Esterman, A., Muehlberg, S. M., Coster, D. J. Factors predictive of corneal graft survival. Report form the Australian Corneal Graft Registry. Ophthalmology. 99, 403-414 (1992).
- Larkin, D. F. Corneal allograft rejection. Br. J. Ophthalmol. 78, 649-652 (1994).
- Boisjoly, H. M., et al. Risk factors of corneal graft failure. Ophthalmol. 100, 1728-1735 (1993).
- Sugar, A., et al. Recipient Risk Factors for Graft Failure in the Cornea Donor Study. Ophthalmol. 116, 1023-1028 (2009).
- Namba, K., Kitaichi, N., Nishida, T., Taylor, A. W. Induction of regulatory T cells by the immunomodulating cytokines alpha-melanocyte-stimulating hormone and transforming growth factor-beta2. J. Leukoc. Biol. 72, 946-952 (2002).
- Taylor, A. W., Yee, D. G., Streilein, J. W. Suppression of nitric oxide generated by inflammatory macrophages by calcitonin gene-related peptide in aqueous humor. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 39, 1372-1378 (1998).
- Wilbanks, G. A., Mammolenti, M., Streilein, J. W. Studies on the induction of anterior chamber-associated immune deviation (ACAID). III. Induction of ACAID depends upon intraocular transforming growth factor-beta. Eur. J. Immunol. 22, 165-173 (1992).
- Volpert, O. V., et al. Inducer-stimulated Fas targets activated endothelium for destruction by anti-angiogenic thrombospondin-1 and pigment epithelium-derived factor. Nat. Med. , 8-349 (2002).
- Apte, R. S., Sinha, D., Mayhew, E., Wistow, G. J., Niederkorn, J. Y. Cutting edge: role of macrophage migration inhibitory factor in inhibiting NK cell activity and preserving immune privilege. J. Immunol. 160, 5693-5696 (1998).
- Kennedy, M. C., et al. Novel production of interleukin-1 receptor antagonist peptides in normal human cornea. J. Clin. Invest. 95, 82-88 (1995).
- Shimmura-Tomita, M., Wang, M., Taniguchi, H., Akiba, H., Yagita, H., Hori, J. Galectin-9-mediated protection from allo-specific T cells as a mechanism of immune privilege of corneal allografts. PLoS One. 8, (2013).
- Goldberg, M. F., Ferguson, T. A., Pepose, J. S. Detection of cellular adhesion molecules in inflamed human corneas. Ophthalmol. 101, 161-168 (1994).
- Stuart, P. M., Griffith, T. S., Usui, N., Pepose, J. S., Yu, X., Ferguson, T. A. CD95 ligand (FasL)-induced apoptosis is necessary for corneal allograft survival. J Clin Invest. 99, 396-402 (1997).
- Yamagami, S., et al. Role of Fas-Fas ligand interactions in the immunorejection of allogeneic mouse corneal transplants. Transplantation. 64, 1107-1111 (1997).
- Stuart, P. M., Pan, F., Plambeck, S., Ferguson, T. A. Fas/Fas ligand interactions regulate neovascularization in the cornea. Invest. Ophthalmmol. Vis. Sci. 44, 93-98 (2003).
- Stuart, P. M., Yin, X. T., Pan, F., Haskova, Z., Plambeck, S., Ferguson, T. A. Inhibitors of matrix metalloproteinases activity prolong corneal allograft acceptance by increasing FasL expression. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 45, 1169-1173 (2004).
- Joo, C. -K., Pepose, J. S., Stuart, P. M. T-cell mediated responses in a murine model of orthotopic corneal transplantation. Invest.Ophthalmol. Vis. Sci. 36, 1530-1540 (1995).
- Sonoda, Y., Sano, Y., Ksander, B., Streilein, J. W. Characterization of cell-mediated immune responses elicited by orthotopic corneal allografts in mice. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 36, 427-434 (1995).
- Sano, Y., Osawa, H., Sotozono, C., Kinoshita, S. Cytokine expression during orthotopiccorneal allograft rejection in mice. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 39, 1953-1957 (1998).
- Haskova, Z., Usui, N., Ferguson, T. A., Pepose, J. S., Stuart, P. M. CD4+ T cells are critical in corneal but not skin allograft rejection. Transplantation. 69, 483-488 (2000).
- Tan, Y., et al. Immunological disruption of antiangiogenic signals by recruited allospecific T cells leads to corneal allograft rejection. J. Immunol. 188, 5962-5969 (2012).
- Dana, M. R., Yamada, J., Streilein, J. W. Topical interleukin-1 receptor antagonist promotes corneal transplant survival. Transplantation. 63, 1501-1507 (1997).
- Cunnusamy, K., Chen, P. W., Niederkorn, J. Y. IL-17A-dependent CD4+CD25+ regulatory T cells promote immune privilege of corneal allografts. J. Immunol. 186, 6737-6745 (2011).
- Fu, H., et al. Arginine depletion as a mechanism for the immune privilege of corneal allografts. Eur. J. Immunol. 41, 2997-3005 (2011).
- Medina, C. A., Rowe, A. M., Yun, H., Knickelbein, J. E., Lathrop, K. L., Hendricks, R. L. Azithromycin treatment increases survival of high-risk corneal allotransplants.Cornea. , 32-658 (2013).
- Cho, Y. K., Zhang, X., Uehara, H., Young, J. R., Archer, B., Ambati, B. Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1 morpholino increases graft survival in a murine penetrating keratoplasty. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 53, 8458-8471 (2012).
- Kim, H. K., Choi, J. A., Uehara, H., Zhang, X., Ambati, B. K., Cho, Y. K. Presurgical corticosteroid treatment improves corneal transplant survival in mice. Cornea. 32, 1591-1598 (2013).
- Yamazoe, K., Yamazoe, K., Shimazaki-Den, S., Shimazaki, J. Prognostic factors for corneal graft recovery after severe corneal graft rejection following penetrating keratoplasty. BMC Ophthalmol. 13, 5 (2013).
- Panda, A., Vanathi, M., Kumar, A., Dash, Y., Priya, S. Corneal graft rejection. Surv. Ophthalmol. 52, 375-396 (2007).
- Patel, S. V. Graft survival and endothelial outcomes in the new era of endothelial keratoplasty. Exp. Eye Res. 95, 40-47 (2012).
- Anshu, A., Price, M. O., Tan, D. T., Price, F. W. Jr Endothelial keratoplasty: a revolution in evolution. Surv. Ophthalmol. 57, 236-252 (2013).
