Introduction
각막 이식은 인간에서 수행 이식의 가장 성공적이고 일반적인 유형 중 하나입니다. 이 수술을 행하는 이유는 부상 한 감염성 질환, 또는 비 - 감염성 질환 각막이 다른 형태의 결과이다. 미국의 안구 은행 협회 숫자는 46,000 이상이 (: restoresight.org/eye_banks/eye_banks.html에서 웹 사이트 참조) 2011 년에 수행 된 것을 나타냅니다. 성공의 표시는 동종 각막 이식 1 년 고장율 10-15%과 성공이 70 % 3-8 초과 5 년 범위 것입니다. 많은 연구가 도시 한 바와 같이, 각막 동종 이식의 성공은 직접 눈 면역 특권 사이트 것과 관련되어있다. 면역 특권 사이트와 각막 상태에 책임 요소는 suppres 각막 의해 생성 각막 모두 혈액 및 림프 혈관 부족, 항원 제시 세포의 상대적인 부재, 요소를 포함면역 이펙터 funtions에게 9-15이야, MHC의 낮은 발현은 16 항원 및 FasL의 17 ~ 20의 발현.
그러나 성공이 이식을 걸리기 이러한 요인에도 불구하고, 그들은 거절 3-7를 받아야 않습니다. 따라서,이 거절을 매개 이러한 메커니즘을 이해뿐만 아니라 거부를 방지하기 위해 다양한 치료법을 테스트하는 것은 매우 중요하다. 이를 위해, 우리는 여기에 통제 된 실험 환경에서 각막 이식을 연구하기 위해 20 년 이상 사용되었습니다 각막 이식의 쥐 모델을 설명합니다. 이식 응답은 궁극적가 이식 된 조직이 실패 또는 성공 여부를 확인할 수 콘서트에서 일하는 많은 다른 요소들을 포함하기 때문에, 어느 하나의 시험 관내 모델에서 이들 요소의 중요성을 이해하는 것은 불가능하다. 따라서, 그대로 동물을 사용하는 연구가 성공 또는 failu 중 하나에 중요한 요인이 무엇인지를 결정해야한다이식 조직의 재.
동물의 다른 종 각막 이식을 연구하는 데 사용되었지만, 다른 종을 사용하는 것에 비해, 뮤린 모델은 몇 가지 장점을 갖는다. 첫 번째는 특정 유전자를 발현 또는 기능 이식의 더 나은 연구 할 수있는 특정 면역 인자의 발현을 부족한 유전자를 대상으로 한 마우스의 여러 변종의 존재입니다. 또한, 동물의 많은 다른 종의 존재하지 않는 마우스에 대한 특정 많은 시약 (요인을 중화 재조합 요인과 항체 모두)이 있습니다. 때문에 이들 인자의 존재,이 모델은 급성 각막 동종 이식 반응 15 17,18,20 -29 관련된 관련 요소를 식별하는 데 광범위하게 사용되어왔다. 또한, 각막 이식과 관련된 많은 요인은 다른 조직 이식 기능적 것으로 알려져있다.
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Protocol
참고 :이 절차에 사용 된 모든 동물 비전 연구 협회와 안과 문 안과 및 비전 연구에서 동물의 사용에 대한뿐만 아니라 세인트 루이스 대학의 동물 감독위원회에 의해 아래로 설정 한 지침에 따라 처리됩니다.
참고 : 모든 수술 장비 및 솔루션은 눈의 세균 감염을 제한하기 위해 수술 전에 소독한다. 그것은 동물이 과정에서 약간의 통증을 경험 수행하면서, 우리는 진통제를 사용하지 않는다는 것을 주목해야한다. 모든 진통제는 소염이고 각막 이식 염증 반응을 수반하기 때문에, 항염증제의 사용은 각막 이식 실패에 관여하는 요인이 무엇인지를 결정하는 능력을 손상 때문에 이것에 대한 이유이다.
1. 마취
- 케타민 ((86)의 IP 주사하여 전신 마취 하 기증자와받는 사람 마우스를 놓습니다.98 ㎎ / ㎏)과 자일 라진 (xylazine) (13.04 ㎎ / ㎏).
- 일반적으로 시간에 30 분 걸리는 절차 전반에 걸쳐 마취받는 사람 마우스를 유지합니다. 결과적으로, 지속적으로 의식을 회복의 징후가 마우스를 모니터링 할 수 있습니다.
- 동물 건조를 방지하기 위해 마취 후에 수술을하지 않습니다 눈에 puralube 연고를 적용합니다.
2. 각막 이식술
- 기증자의 각막 버튼을 얻었다.
- 동물이 완전히 마취되면, 1 % tropicamide와 2.5 % 페닐에 염산염의 눈에 몇 방울의 투여에 의한 적절한 산동을 얻을 수 있습니다.
- 수평 튼튼한 이동 지원에 배치 보드에 공여 동물의 머리를 놓습니다. 눈 전체 동작 걸쳐 수평 위치에 있도록 목 걸쳐 테이프의 스트립을 고정 헤드.
- 아웃, 선단 메틸 블루로 염색 하였다 2mm 직경 트레를 사용하여,중앙 각막 이식 사이트 라인.
- 날카로운 블레이드로, 각막을 침투 도너 내피 기본 렌즈의 손상의 가능성을 줄일를 깊게하는 전방 내로 주입 결과 Healon.
- vannas 가위와 기증자 이식을 절제하고 사용까지 행크스 '균형 염 용액을 포함하는 접시에 놓습니다.
- 공여자 이식편을 제거 한 후, CO 2 흡입 통해 도너 마우스를 안락사.
- 이식 침대를 준비.
- 수신자 2.1.2 통해 2.1.1에 설명 된 것과 동일한 단계를 반복한다.
- 1.5 mm 직경 트레를 사용하여 수신자 그래프트 사이트를 개요.
- 날카로운 블레이드와, 각막을 침투 기본 렌즈에 손상의 가능성을 줄일를 심화하기 위해 전방에 결과 Healon를 주입.
- vannas 가위를 사용하여받는 사람의 설명 중심 각막 버튼을 제거하고 폐기합니다.
- 봉합이식
- 받는 사람의 각막에 침대 이식을 통해 기증자의 각막을 놓습니다. 적절한 결과 Healon 렌즈와 직접 접촉에 의한 손상으로부터 기증자의 내피 세포를 보호하기 위해 기증자의 각막 아래에 있는지 확인합니다.
- 슈퍼 뾰족한 microforceps를 사용하여 한 묶어,받는 사람의 편에 전체 두께의 90 % 깊이와 기증자를 통해, 기증자 측에 11-0 나일론 봉합사의 첫 번째 바이트를 배치합니다.
- 각막 제자리에 고정되면, 각막 8~10 총 봉합사를 가지며 공여 각막 안전하게 줄 지어 수신자 각막 이식 침대에 부착되도록 midcardinal 단속 봉합을 수행한다.
- 전방 심화
- 전방에 HBSS 또는 공기 방울을 주입하여 전방 깊어 부드럽게 셀룰로오스 스폰지로 누출 각막 이식의 무결성을 확인합니다.
주 : 전방을 개질 할 수없는 경우 (c)의 높은 확률이 존재이식 된 각막의 미래 평가가 매우 어려운 것 또한 잠재적 기증자의 각막 내피 세포의 기능 장애 때문에 이식 실패로 이어질 것입니다 ataract.
- 전방에 HBSS 또는 공기 방울을 주입하여 전방 깊어 부드럽게 셀룰로오스 스폰지로 누출 각막 이식의 무결성을 확인합니다.
- 최종 평가
- 동공은 원형이며, 전방의 깊이가 정상이 있는지 결정하기 위해 눈을 관찰한다.
참고 :이 조리개를 봉합 중에 손상되었음을 나타냅니다 따라서 이식은 기술적 인 문제로 간주됩니다 둥근 눈동자가 아닌 경우. - 눈에 항생제 연고를 적용합니다. 옵션 : 7-0 실크 봉합사로 눈 뚜껑을 닫습니다.
- 그들이 완전히 깨어 후 개별적으로 수술 후 이틀 최소를 수용 할 때까지 쥐를 관찰한다.
- 동공은 원형이며, 전방의 깊이가 정상이 있는지 결정하기 위해 눈을 관찰한다.
3. 봉합 제거
- 뚜껑 봉합사가 사용되는 이러한 경우에, 전술 한 바와 같이 마우스를 마취하고 48 시간에 뚜껑 봉합사를 제거.
- 수술 후 7 일째에 쥐를 마취. sutur 제거ES 각막 이식을 확보. 봉합사를 제거하고, 동물이 완전히 깨어 나면, 케이지로 복귀.
4. 임상 평가
- (전방에있는 혈액) 백내장 (렌즈의 흐림), 전방 출혈을 포함하는 절차 적 합병증의 지시 사항에 대해 눈, 적절한 깊이, 또는 각막의 중요한 불투명이 아닌 전방을 검사합니다. "손상"이러한 합병증을 보여 그 사람들을 고려하고 CO 2 흡입을 안락사.
- unanesthetized 쥐에 모든 검사를 수행합니다. 다른 한편으로는 눈에 더 잘 볼 수 있도록 눈을 proptose 할 수 있도록 한 손 따라서 마우스를 억제하여 마우스를 잡습니다. 관찰이 완료되면, 그 케이지에 동물을 반환합니다.
- 치료 그룹에 익숙하지 않은 관찰자는 각막 이식의 흔적을 각막을 2 ~ 3 회 이식 평가했다거부 에피소드 또는 각막 이식 실패. 수술 현미경이 관찰을위한 수평 세극등 생체 현미경 하나를 사용하십시오.
- 다음과 같이 규모가 정의 5. 10-0의 규모를 사용하여 불투명도마다 각막을 평가 :
- 불투명의 흔적이없는 사람들 각막 0의 점수를 할당합니다.
- 최소한의 표면 불투명도를 보여 그 각막 1의 점수를 할당합니다.
- 온화하고 깊은 불투명도를 표시하지만 기본 동공과 홍채가 여전히 뚜렷한이다 각막 2의 점수를 할당합니다.
- 홍채는 동공 마진 제외 상세히 볼 수없는 특징 간질 불투명도를 표시 각막 3의 점수를 할당한다.
- 조밀 한 기질 불투명도를 표시하고 어떤 기본 구조를 볼 수 없습니다 경우 각막 4의 점수를 할당합니다.
- 완전히 가려 동공과 홍채와 완전한 불투명도 및 집중적 인 간질 부종을 표시 각막 5의 점수를 할당합니다.
- 또한, 혈관의 침윤 (혈관 신생)이를 위해 1 내지 8의 평가 척도를 이용하는 정도마다 각막 평가 4 동일한 사분면 이루어진으로 각막을 확인하고 이들 사분면 각각에서 혈관의 양을 결정 그 사분면의 광범위한 혈관에 대한 2 0 (선박)에서 그 의지의 범위를 점수. 최종 신생 혈관 점수를 계산하기 위해 각 사분면에서 개별 점수를 추가합니다.
- 그들은 오주 포인트 최대 시간 동안 두 개의 연속적인 관찰 3의 점수가있는 경우로 급성 거부 각막을 분류.
- 누구의 각막 오주에서 분명했다 쥐를 분류하지만받은 말기 각막 이식 거부 반응이있는 것으로,> 사십오일 연속 2 시점 3의 점수, 생착을 게시 시간에 혼탁을 개발한다. 이식편 생존을 분석하는 카플란 - 마이어 생존 곡선을 사용한다.
- 다음과 같이 규모가 정의 5. 10-0의 규모를 사용하여 불투명도마다 각막을 평가 :
모델 5. 조작
에서 왼쪽 : 40px; ">- 하나의 세포를 준비하려면, 먼저 기증자 마우스를 안락사. 그런 다음, 비장을 제거합니다.
- 셀 스트레이너에 비장을 배치하고는 3 ML의 주사기에서 주사기 플런저 방해.
- 행크스 균형 소금 용액 10 mL의 세포에 resuspend을 씻으십시오.
- 세포 현탁액 10 μl를 제거하고 0.4 % 트리 판의 10 μL에 파란색을 추가하고 혼합한다. 중앙 그리드의 세포를 혈구에 그를 추가하고 계산합니다. 튜브의 셀의 수는 세포 수 × 104 × 2 (트립 판 블루 희석 계수) (10) (튜브의 부피) ×이다.
- 전술 한 바와 같이 쥐를 마취.
- 해부 현미경을 사용하여 주사를 수행합니다. 각각의 전방 내 주입의 경우, 10 6 0.005 ml의 볼륨에 비장 세포와 33 G 바늘 장착 된 0.25 ML의 마이크로 리터 주사기를 사용합니다.
참고 : 다른 조작모델의 특정 요인 동소 각막 이식 수술 후 재생 될 수 역할을 결정하거나 길항제 또는 작용제로서 작용 시약으로 동물을 처리함으로써 수행 될 수있다.
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Representative Results
각막 이식의 쥐 모델을 성공적으로 각막 이식 거부 19-23 각막 이식 수용 13, 15, 16, 18, 24 ~ 27 두의 메커니즘을 특성화하기 위해 20 년 이상 사용되어왔다. 이 모델은 FasL의 결여 즉 동물에서 각막 이식에서 수용 FasL의 발현의 중요성을 설정하는 데 사용 된 각막 동종 이식 (15)을 받아 들일 수 없었다. 이는 또한 혈관 내피 성장 인자 수용체 1 모르 처리 크게 각막 이식 생존 (28)을 증가 입증하기 위해 사용되었다. 코르티코 스테로이드는 어떤 치료 효과 29 개최와 아주 최근의 보고서에서이 모델은 각막 생착하기 전에 마우스의 전처리 여부를 테스트하는 데 사용되었다. 저자들은 이러한 전처리 각막 동종 이식 (29)의 생존율을 개선했다는 것을 보여 주었다. 이 보고서는 명확하게이 모델의 가장 큰 장점이 있다는 것을 보여하나는 살아있는 동물에서 인간의 각막 이식의 성공에 중요하다고 생각되는 것들을 공부할 수 있습니다.
이 실험에서 이전 연구 각막 이식 거부 반응에 대한 책임 주요한 메커니즘 중 하나가 각막 이식 19, 20로 표시되는 특정 alloantigens에 전신 지연 형 과민 (DTH)의 설립이 없다고보고했다. 우리는 이후 기증자의 각막 이식으로 표현 alloantigens에 전신 alloantigen DTH 관용의 설립은 이식의 생존율을 향상 여부를 테스트하기 위해이 모델을 사용하고 있습니다. 도 1에 도시 된 바와 같이, BALB / c 마우스는 이러한 각막 동종 이식에 대한 평균 생존 기간에 의해 측정 된 각막 동종 이식 수용 개선되지 않았다 C57BL / 10 (B10)에 alloantigens tolerized. 따라서 거부 각막 평균 생존 시간은 쥐 tolerized 여부되었는지 동일하다. 또한 수단으로서 피부 그래프트 반응을 이용한 유사한 연구를 수행전신의 DTH tolerization의 효과를 테스트. 이러한 연구는 DTH 허용 오차가 B10 alloantigens으로 BALB / c 마우스에 설립되었을 때, 피부 베어링 이식 시연 일부 (B10.D2 및 C.B10-H-2 B) 또는 표시되지 않았습니다 B10 alloantigens 모든 (평균 생존 기간 증가 그림 2). 우리는 항원 특이 DTH 반응을 설립했다 BALB / C 마우스는 각막이나 피부 동종 이식 중 하나에 대한 이러한 허용 오차에서 측정 가능한 이익을 도출하지 않았다 이러한 연구에서 결론을 내렸다. 이러한 데이터는 또한 각막 이식 뮤린 모델 공부 생성 된 정보는, 시간, 고체 조직 이식의 다른 형태에 직접 적용 할 것을 나타낸다.
그림 1. BALB / c 마우스는 C57BL / 10 (B10) 마우스에서 10 6 비장 세포와 전방에 주입했다. (p> 0.05)을 보여주지 않았다.
전방에 비장 세포의 그림 2. 주입 동종 피부 이식의 생존에 영향을주지 않습니다. BALB / c 마우스는 C57BL / 10 쥐 10 6 비장 세포와 전방에 주입했다. 일주일이 지난 뒤이 마우스는 별도로 N = 10, B10.D2, N = 7, C.B10-H-2, B, N = 7 마우스, C57BL / 10에서 피부에 접목과 비교 하였다주입 및 C57BL / 10 피부에 접목, N = 10 결과 평균 생존 기간 + SEM로 표현되지 않은 마우스.
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Discussion
여기에 설명 된 각막 이식의 쥐 모델 요인이 가장 모두 거부 15,17,18,20, 26 ~ 30 각막의 수용 21-25과 관련된 무엇을 예측하는 모델에서 각막 이식 거부 반응을 연구하기 위해 연구자 수 있습니다 동종 이식. 환자를 치료하거나 예방하거나 거부 (31)에 어느 국소 또는 전신적 스테로이드 치료를 부여하는 각막 이식, 달리이 모델은 일반적으로 치료의 부재에서 거부 동종 관련된 그러한 요인을 결정하기 위해 사용된다. 일반적으로 이식 30-40 일 이내에 발생하는 급성 각막 이식 거부 반응에 대한 모델 외에, 우리는 또한 마우스와 후반의 많은 기능을 모방에서 사십오일 후 생착을 발생하는 등 거절의 말기 모델을 제시 지금까지 동물에서 모델링되지 않은 -TERM 및 만성 거부 (32, 33).
티그는 모델의 강점은 하나의 각막 이식 수용의 상대적으로 높은 비율에 대한 책임뿐만 아니라 메커니즘은 각막 이식 실패에 대한 가장 책임있는 결정되어 다양한 메커니즘을 해부 할 수 있습니다. 이 모델은 또한, 하나의 인간 면역 시스템과 매우 유사하다 면역계를 소유 동물의 다양한 치료 전략을 시험 할 수있다. 이를 위해, 뮤린 요인뿐만 아니라 형질 전환 유전자 타겟팅 생쥐와 반응 많은 시약의 존재는, 다른 종의 경우 것보다 더 많은 요소의 평가를 허용한다. 각막 동종 이식의 성공 및 실패를 모두에게 중요한 많은 다른 인자를 평가하는 능력으로 인해의 눈의 대형화 수술을 수행하기 쉽다되는 다른 동물 모델 대이 쥐 모델을 사용하는 대신에 상당한 양의 이 종.
이 모델의 여러 가지 단점이 있지만,우리는 강점까지 그들을 능가 믿습니다. 상기 언급 된, 가장 중요한 하나는, 생쥐 각막 이식을 수행에 관련된 기술적 전문성이다. 때문에 쥐 눈의 작은 크기에, 이는 미세에서 두 봉합 이식뿐만 아니라 제거를 수행하기에 능숙한 사람을 요구한다. 따라서, 반복 연습은 마스터와이 기술에 능력을 유지하기 위해 필요합니다. 제 약점은 생쥐 인간과 매우 비슷한 반면, 동일한 아니라는 것이다. 이 동물들은 인간의 각막을보다, 신생 혈관으로 더 큰 경향을 표시합니다. 또한,이 모델은 Fuch의 영양 장애 2처럼 내피 세포 기능 장애를 치료하는 데 의미가 수술을 모방하지 않습니다. 설명 된 프로토콜에 사용되는 것과 같은 최근 연도의 전체 두께 이식에 앞서 사용 하였다. 현재, 각막 내피의 단지 부분을 포함하는 내피 세포 이식이 사용되어왔다
말기 거부 (> 사십오일)의 모델이 버전에 고유 한 두 가지 요소는 눈에 띄는. 생쥐가되는 모델이 양식을 사용하여 첫 번째 약점은 말기 거부를 연구하기 위해 2-3개월 최소 유지해야합니다. 둘째, 각막 먼저 잠재적 인 급성 거부 반응을 생존해야합니다. 급성 거부 50받는 사람 17의 70 %, 20 -24에 발생합니다. 따라서 누구의 이식 급성 거부됩니다 마우스를 접목 것이다 말기 거부 하나를 연구하고 사십오일 후 생착 될 때까지 살아남지 못할 것이다. 이 문제를 완화하기 위해 우리는 수컷 마우스의 배제 율이는 수컷 마우스 것이 좋습니다 늦은 용어 거부를 연구하는 여성 마우스 (준비 원고)에 대한 관찰보다 작은 때문에 것으로 나타났습니다사용. 우리는 또한 스테로이드 치료 각막 이식 생존을 연장하려고 시도했지만이 스테로이드 치료를 사용하지 않는 것이 좋습니다 때문에 특히 유용 (개인 관찰)로 증명하지 않았다. 이러한 합병증 가능성이 절반 정도 또는 동종 각막과 접목 사람들의 다소 45 일 후까지 선명하게 유지됩니다 경고에도 불구하고, 이것은 여전히 말기 거부와 관련된 그 요인을 연구하는 매우 유용한 모델이다.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Zeiss Surgical Microscope | Zeiss | Rebuilt | |
| 1 ml Syringe | BD | 305122 | |
| 3 ml Syringe | BD | 309657 | |
| 10 ml Syringe | BD | 309602 | |
| Vannus Scissors | Stortz | E-3387 | |
| 11-0 Sutures | Alcon | 717939M | |
| Trephine 2.0 mm | Katena | K 2-7520 | |
| Trephine 1.5 mm | Katena | K 2-7510 | |
| Tricaine Hydrochloride 0.5% | Alcon | NDC 0065-0741-12 | |
| Healon | Abbott | Healon OVD | |
| Forceps | FST | 11251-20 | |
| 7-0 Sutures | Alcon | 8065 | |
| 2.5% Phenylephrine HCl | Alcon | NDC 61314-342-02 | |
| 1% Tropicamide | Bausch & Lomb | NDC-24208-585-59 | |
| Hamilton Syringe | Hamilton | 7654-01 | |
| 33 gauge needle | Hamilton | 90033 | |
| Cell Strainer (100 μm nylon) | BD Falcon | 352360 | |
| Hemocytometer | Cardinal Health | B3175 | |
| Trypan Blue | Sigma | T8154 |
References
- Farooq, A. V., Shukla, D. Herpes simplex epithelial and stromal keratitis: an epidemiologic update. Surv. Ophthalmol. , 448-462 (2012).
- Gipson, I. K. Age-related changes and diseases of the ocular surface and. Invest. Opthlamol. Vis. Sci. 54, 48-53 (2013).
- Edwards, M., et al. Indications for corneal transplantation in New Zealand: 1991-1999. Cornea. 21, 152-155 (2002).
- Thompson, R. W., Price, M. O., Bowers, P. J., Price, F. W. Long-term survival after penetrating keratoplasty. Ophthalmol. 110, 1396-1402 (2003).
- Williams, K. A., Roder, D., Esterman, A., Muehlberg, S. M., Coster, D. J. Factors predictive of corneal graft survival. Report form the Australian Corneal Graft Registry. Ophthalmology. 99, 403-414 (1992).
- Larkin, D. F. Corneal allograft rejection. Br. J. Ophthalmol. 78, 649-652 (1994).
- Boisjoly, H. M., et al. Risk factors of corneal graft failure. Ophthalmol. 100, 1728-1735 (1993).
- Sugar, A., et al. Recipient Risk Factors for Graft Failure in the Cornea Donor Study. Ophthalmol. 116, 1023-1028 (2009).
- Namba, K., Kitaichi, N., Nishida, T., Taylor, A. W. Induction of regulatory T cells by the immunomodulating cytokines alpha-melanocyte-stimulating hormone and transforming growth factor-beta2. J. Leukoc. Biol. 72, 946-952 (2002).
- Taylor, A. W., Yee, D. G., Streilein, J. W. Suppression of nitric oxide generated by inflammatory macrophages by calcitonin gene-related peptide in aqueous humor. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 39, 1372-1378 (1998).
- Wilbanks, G. A., Mammolenti, M., Streilein, J. W. Studies on the induction of anterior chamber-associated immune deviation (ACAID). III. Induction of ACAID depends upon intraocular transforming growth factor-beta. Eur. J. Immunol. 22, 165-173 (1992).
- Volpert, O. V., et al. Inducer-stimulated Fas targets activated endothelium for destruction by anti-angiogenic thrombospondin-1 and pigment epithelium-derived factor. Nat. Med. , 8-349 (2002).
- Apte, R. S., Sinha, D., Mayhew, E., Wistow, G. J., Niederkorn, J. Y. Cutting edge: role of macrophage migration inhibitory factor in inhibiting NK cell activity and preserving immune privilege. J. Immunol. 160, 5693-5696 (1998).
- Kennedy, M. C., et al. Novel production of interleukin-1 receptor antagonist peptides in normal human cornea. J. Clin. Invest. 95, 82-88 (1995).
- Shimmura-Tomita, M., Wang, M., Taniguchi, H., Akiba, H., Yagita, H., Hori, J. Galectin-9-mediated protection from allo-specific T cells as a mechanism of immune privilege of corneal allografts. PLoS One. 8, (2013).
- Goldberg, M. F., Ferguson, T. A., Pepose, J. S. Detection of cellular adhesion molecules in inflamed human corneas. Ophthalmol. 101, 161-168 (1994).
- Stuart, P. M., Griffith, T. S., Usui, N., Pepose, J. S., Yu, X., Ferguson, T. A. CD95 ligand (FasL)-induced apoptosis is necessary for corneal allograft survival. J Clin Invest. 99, 396-402 (1997).
- Yamagami, S., et al. Role of Fas-Fas ligand interactions in the immunorejection of allogeneic mouse corneal transplants. Transplantation. 64, 1107-1111 (1997).
- Stuart, P. M., Pan, F., Plambeck, S., Ferguson, T. A. Fas/Fas ligand interactions regulate neovascularization in the cornea. Invest. Ophthalmmol. Vis. Sci. 44, 93-98 (2003).
- Stuart, P. M., Yin, X. T., Pan, F., Haskova, Z., Plambeck, S., Ferguson, T. A. Inhibitors of matrix metalloproteinases activity prolong corneal allograft acceptance by increasing FasL expression. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 45, 1169-1173 (2004).
- Joo, C. -K., Pepose, J. S., Stuart, P. M. T-cell mediated responses in a murine model of orthotopic corneal transplantation. Invest.Ophthalmol. Vis. Sci. 36, 1530-1540 (1995).
- Sonoda, Y., Sano, Y., Ksander, B., Streilein, J. W. Characterization of cell-mediated immune responses elicited by orthotopic corneal allografts in mice. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 36, 427-434 (1995).
- Sano, Y., Osawa, H., Sotozono, C., Kinoshita, S. Cytokine expression during orthotopiccorneal allograft rejection in mice. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 39, 1953-1957 (1998).
- Haskova, Z., Usui, N., Ferguson, T. A., Pepose, J. S., Stuart, P. M. CD4+ T cells are critical in corneal but not skin allograft rejection. Transplantation. 69, 483-488 (2000).
- Tan, Y., et al. Immunological disruption of antiangiogenic signals by recruited allospecific T cells leads to corneal allograft rejection. J. Immunol. 188, 5962-5969 (2012).
- Dana, M. R., Yamada, J., Streilein, J. W. Topical interleukin-1 receptor antagonist promotes corneal transplant survival. Transplantation. 63, 1501-1507 (1997).
- Cunnusamy, K., Chen, P. W., Niederkorn, J. Y. IL-17A-dependent CD4+CD25+ regulatory T cells promote immune privilege of corneal allografts. J. Immunol. 186, 6737-6745 (2011).
- Fu, H., et al. Arginine depletion as a mechanism for the immune privilege of corneal allografts. Eur. J. Immunol. 41, 2997-3005 (2011).
- Medina, C. A., Rowe, A. M., Yun, H., Knickelbein, J. E., Lathrop, K. L., Hendricks, R. L. Azithromycin treatment increases survival of high-risk corneal allotransplants.Cornea. , 32-658 (2013).
- Cho, Y. K., Zhang, X., Uehara, H., Young, J. R., Archer, B., Ambati, B. Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1 morpholino increases graft survival in a murine penetrating keratoplasty. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 53, 8458-8471 (2012).
- Kim, H. K., Choi, J. A., Uehara, H., Zhang, X., Ambati, B. K., Cho, Y. K. Presurgical corticosteroid treatment improves corneal transplant survival in mice. Cornea. 32, 1591-1598 (2013).
- Yamazoe, K., Yamazoe, K., Shimazaki-Den, S., Shimazaki, J. Prognostic factors for corneal graft recovery after severe corneal graft rejection following penetrating keratoplasty. BMC Ophthalmol. 13, 5 (2013).
- Panda, A., Vanathi, M., Kumar, A., Dash, Y., Priya, S. Corneal graft rejection. Surv. Ophthalmol. 52, 375-396 (2007).
- Patel, S. V. Graft survival and endothelial outcomes in the new era of endothelial keratoplasty. Exp. Eye Res. 95, 40-47 (2012).
- Anshu, A., Price, M. O., Tan, D. T., Price, F. W. Jr Endothelial keratoplasty: a revolution in evolution. Surv. Ophthalmol. 57, 236-252 (2013).
