Introduction
Korneal transplantasjon er en av de mest vellykkede og vanlige typer transplantasjon utført i mennesker. Årsakene til at denne operasjonen er utført er et resultat av skade, smittsomme sykdommer 1, eller andre former for ikke-smittsomme hornhinnesykdommer 2. Tall fra Eye Bank Association of America viser at over 46.000 ble utført i 2011 (se nettside på: restoresight.org/eye_banks/eye_banks.html). En indikasjon på suksessen er at ett års feilrater for allogene hornhinne grafts varierer fra 10 til 15%, og på fem år suksessen er i overkant av 70% 3-8. Som mange studier har vist, er suksess for corneale allotransplantater direkte relatert til det faktum at øyet er et immunologisk privilegert sted. Faktorer ansvarlig for hornhinner status som et immun privilegium nettstedet inkluderer mangel på både blod og lymfeårer i hornhinnen, en slektning fravær av antigenpresenterende celler, faktorer produsert av hornhinnen som suppress immuneffektorceller funtions 9-15, lav ekspresjon av MHC-antigener 16, og ekspresjonen av Fasl 17-20.
Men på tross av disse faktorer som disponerer disse transplantater for suksess, har de gjennomgår avvisning 3-7. Følgelig forstå de mekanismer som medierer denne avvisningen, samt å teste ulike behandlinger for å forhindre avstøtning er av avgjørende betydning. For dette formål, beskriver vi her en murin modell av korneal transplantasjon som har vært i bruk i over 20 år for å studere korneal transplantasjon i et kontrollert miljø eksperimentelt. Siden transplantasjons svar involvere mange ulike faktorer som arbeider i konsert som vil ultimate avgjør om det transplanterte vevet mislykkes eller lykkes, er det ikke mulig å forstå betydningen av disse faktorene i noen in vitro modell. Følgelig er studier med intakte dyr nødvendig for å fastslå hvilke faktorer som er viktige for enten suksess eller failure av transplantert vev.
Mens andre arter av dyr har blitt brukt til å studere korneal transplantasjon, har den murine modellen flere fordeler sammenlignet med bruk av andre arter. Den første er at det finnes mange stammer av mus som uttrykker visse transgener eller har vært gen-målrettede å mangle uttrykk for spesifikke immunologiske faktorer som har funksjon i transplantasjon kan bedre undersøkt. I tillegg er det mange reagenser (både rekombinante faktorer og antistoffer som nøytraliserer faktorer) som er spesifikke for mus og som ikke finnes for mange andre arter av dyr. På grunn av eksistensen av disse faktorene, har denne modellen vært brukt mye til å identifisere relevante faktorer involvert i akutte hornhinnen leverallograft svar 15, 17,18,20 -29. Videre er mange av de faktorene som er involvert i hornhinnetransplantasjon også kjent for å være funksjonelle i transplantasjon av andre vev.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
MERK: Alle dyr som brukes i denne prosedyren blir behandlet i henhold til Association for Research in Vision og Ophthalmology statement for bruk av dyr i Ophthalmic og Vision forskning samt retningslinjene satt ned av dyret forglemmelse utvalget ved Saint Louis University.
NOTE: Alle kirurgiske instrumenter og løsninger er sterilisert før kirurgi for å begrense mikrobiell infeksjon i øyet. Det bør bemerkes at mens dyrene gjør oppleve noen smerte fra denne prosedyren, kan vi ikke ansette analgetika. Grunnen til dette er fordi alle smertestillende midler er anti-inflammatorisk, og siden hornhinnen transplantasjons reaksjoner involverer inflammasjon, ville bruken av anti-inflammatoriske legemidler kompromiss vår evne til å finne ut hvilke faktorer som er involvert i cornea graft svikt.
1. Anestesi
- Plasser giver- og mottaker mus under narkose ved IP-injeksjoner av ketamin (86.98 mg / kg) og xylazin (13,04 mg / kg).
- Hold mottakeren mus under narkose gjennom hele prosedyren som vanligvis tar 30 minutter til en time. Følgelig kontinuerlig overvåke musen for tegn på å gjenvinne bevissthet.
- Påfør puralube salve for øyet som ikke vil gjennomgå kirurgi etter at dyret er bedøvet for å hindre tørrhet.
2. Hornhinnen Negl
- Innhenting av donor hornhinnen knappen.
- Når dyret er bedøvet fullt, oppnå tilstrekkelig mydriasis ved administrering av et par øyedråper av 1% og 2,5% tropikamid fenylefrin hydroklorid.
- Plasser leder av donor dyret horisontalt på et bord plassert på en solid bevegelig støtte. Feste hode med en stripe av tape over halsen for å sikre at øyet er i en horisontal stilling gjennom hele operasjonen.
- Ved hjelp av en 2 mm diameter trephine, hvis Tipset ble farget med metyl blå, utlinje sentrale hornhinnen pode nettstedet.
- Med et skarpt blad, trenge inn i hornhinnen og Healon injisere inn i det fremre kammer for å utdype den for å redusere muligheten for skade på donor endotel og underliggende linse.
- Eksisere donor pode med Vännäs saks og legg inn en skål med Hanks 'balanserte saltløsning inntil bruk.
- Etter donor pode har vært fjernet, avlive donor mus via CO 2 inhalering.
- Forbereder pode seng.
- Gjenta den samme fremgangsmåten som er beskrevet i punkt 2.1.1 gjennom 2.1.2 for mottakeren.
- Ved hjelp av en 1,5 mm diameter trephine, skissere mottakeren pode nettstedet.
- Med et skarpt blad, trenge inn i hornhinnen og Healon injisere inn i det fremre kammer for å utdype den for å redusere sjansen for skade på den underliggende linsen.
- Fjern den skisserte sentral hornhinne knappen fra mottaker ved hjelp Vännäs saks og kast.
- Suturinggraft
- Plasser donorhornhinnen over graft seng i mottakerens hornhinnen. Vær sikker på at tilstrekkelig Healon er under donor hornhinnen for å beskytte donor endotelceller fra skade ved direkte kontakt med linsen.
- Ved hjelp av super fin tippet microforceps, plasserer den første bitt av 11-0 nylon sutur i giversiden, gjennom donor med 90% dybde på full tykkelse til mottakerens side, deretter feste.
- Når hornhinnen er forankret på plass, å utføre midcardinal avbrutte suturer slik at hornhinnen inneholder 8 til 10 og den totale suturer donorhornhinnen er skikkelig på linje med og festet til mottakeren corneale transplantatet seng.
- Utdype den fremre kammer
- Utdype fremre kammer ved å injisere HBSS eller luft boble inn i det fremre kammer og forsiktig kontrollere integriteten til det corneale transplantatet for lekkasje med en cellulosesvamp.
MERK: Hvis fremre kammer ikke kan reformeres så er det en stor sannsynlighet for cataract som vil gjøre fremtidige vurderinger av transplantert hornhinnen svært vanskelig og vil også potensielt føre til donor hornhinneendotelet dysfunksjon og dermed pode svikt.
- Utdype fremre kammer ved å injisere HBSS eller luft boble inn i det fremre kammer og forsiktig kontrollere integriteten til det corneale transplantatet for lekkasje med en cellulosesvamp.
- Sluttevaluering
- Observer øyet å bestemme at eleven er rund og dybden av fremre kammer er normalt.
MERK: Hvis eleven ikke er rundt dette indikerer at under sy iris ble skadet og dermed pode er ansett som en teknisk svikt. - Påfør antibiotisk salve til øyet. Valgfritt: Lukk øyelokket med en 7-0 silke sutur.
- Legg merke til mus før de er helt våken og deretter individuelt huse dem i minst to dager etter kirurgi.
- Observer øyet å bestemme at eleven er rund og dybden av fremre kammer er normalt.
3. Sutur fjerning
- I slike tilfeller hvor lokk sutur blir anvendt, bedøve mus som beskrevet ovenfor, og fjerne lokket sutur ved 48 timer.
- Bedøve mus på dag 7 etter operasjonen. Fjern sutures sikre hornhinnetransplantasjon. Når suturene er fjernet, og dyret har fullt vekket, returnere det til buret sitt.
4. Klinisk Evaluering
- Undersøke øyet for indikasjoner på komplikasjoner som inkluderer, katarakt (uklarhet i linsen), hyphema (blod i fremre kammer), en fremre kammer som ikke er av riktig dybde, eller betydelig tetthet av hornhinnen. Tenk de som demonstrerer disse komplikasjonene som "kompromittert" og avlive dem ved CO 2 innånding.
- Utfør alle eksamener på ubedøvede mus. Hold musen med den ene hånden og dermed dempe musen slik at den annen side kan proptose øyet for å muliggjøre en bedre oversikt over øyet. Så snart observasjonene er fullført, returnerer dyret til sitt bur.
- Har en observatør ukjent med behandlingsgruppene evaluere transplantert hornhinner 2 til 3 ganger i uken for tegn på hornhinnetransplantasjonavstøtningsepisoder eller hornhinnetransplantasjon svikt. Bruk enten kirurgisk mikroskop eller en horisontal spaltelampe biomicroscope for disse observasjonene.
- Evaluere hver hornhinnen for opasitet ved hjelp av en skala fra 0 til 5. Skalaen er definert som følger:
- Tildele en score fra 0 til disse hornhinner som ikke har noen tegn på gjennomsiktighet.
- Tildele en score på 1 til disse hornhinner som viser minimal overfladisk opasitet.
- Tildele en score på 2 til hornhinner som viser mild og dypere dekkevne, men den underliggende eleven og iris er fortsatt merkbar.
- Tildele en score på 3 til hornhinnen som viser stromal opacity der iris ikke kan sees i detalj med unntak av elev marginer.
- Tildele en score på 4 til hornhinnen som viser tette stromal opasitet og hvis ingen underliggende strukturer kan sees.
- Tildele en score på 5 til hornhinnen som viser komplett opasitet og intensiv stromal ødem, med eleven og iris helt skjult.
- Evaluere også hver hornhinnen for graden av blodkar infiltrasjon (neovascularization) med en karakterskala fra 1 til 8. For å oppnå dette, se hornhinnen som består av 4 like kvadranter og bestemme mengden av blodårer i hver av disse kvadranter med en scorer som vil variere fra 0 (ingen fartøy) til 2 for omfattende vaskularisering av at kvadranten. Legg de individuelle poengsummer fra hver kvadrant for å beregne den endelige neovascularization score.
- Klassifisere hornhinner som akutt avvist hvis de har en score på 3 for to påfølgende observasjoner for tiden peker opp til fem uker.
- Klassifisere mus som hornhinner var klar på fem uker, men utvikle opasifikasjon til tider> 45 dager etter engraftment, med en score på 3 for to påfølgende tidspunkter, som å ha gjennomgått sent sikt hornhinne allograft avvisning. Bruk Kaplan-Meier overlevelseskurver for å analysere graft overlevelse.
- Evaluere hver hornhinnen for opasitet ved hjelp av en skala fra 0 til 5. Skalaen er definert som følger:
5. Manipulering av Model
i-left: 40px; ">- For å forberede enkeltceller, først avlive donor musen. Deretter fjerner milten.
- Plasser i en miltcellefilter og forstyrre den med en sprøytestemplet fra en 3 ml sprøyte.
- Vask cellene og resuspender i 10 ml Hanks balanserte saltløsning.
- Fjern 10 ul av cellesuspensjonen og tilsett til 10 ul av 0,4% trypanblått og bland. Legg så til hemocytometer og telle cellene i sentralnettet. Antallet av celler i røret er tellecelle x 10 4 x 2 (fortynningsfaktor i trypanblått) x 10 (volumet i røret).
- Bedøve mus som tidligere beskrevet.
- Utfør injeksjoner ved hjelp av en disseksjonsmikroskop. For hver intracameral injeksjon, bruker 10 6 miltceller i en 0,005 ml volum og en 0,25 ml mikroliter sprøyte utstyrt med en 33 G nål.
MERK: Andre manipulasjonerav modellen kan bli utført ved å behandle dyr med reagenser som virker enten som agonister eller antagonister for å bestemme hvilken rolle at en bestemt faktor kan spille etter ortotopisk korneal allograft-kirurgi.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Muse-modell av hornhinnetransplantasjon har vært brukt i over 20 år for å kunne karakterisere mekanismer for både hornhinnen allograftrejeksjon 19-23 og hornhinne allograft aksept 13, 15,16,18, 24-27. Denne modellen ble brukt til å etablere betydningen av Fasl uttrykk i hornhinnen allograft aksept, ved at dyr som mangler Fasl var ikke i stand til å akseptere hornhinne allografter 15. Det har også blitt brukt for å demonstrere at vaskulær endotelial vekstfaktor reseptor 1 morfolino behandling øker betydelig korneal transplantatoverlevelse 28. I en svært fersk rapport denne modellen ble brukt til å teste om forbehandling av mus før hornhinne engraftment med kortikosteroider holdt noen terapeutisk effekt 29. Forfatterne viste at en slik forbehandling ble bedre overlevelsesraten til hornhinne allografter 29. Disse rapportene viser tydelig at den primære fordelen med denne modellen er atman kan studere i et levende dyr de tingene som antas å være viktig for å lykkes med hornhinnetransplantasjoner hos mennesker.
Tidligere studier fra dette laboratoriet har rapportert at en av de viktigste mekanismene som er ansvarlig for hornhinne allograftrejeksjon er etablering av systemisk forsinket hypersensitivitet (DTH) til bestemte alloantigener uttrykt av hornhinnen allograft 19, 20. Vi har siden brukt denne modellen for å teste om etablering av systemisk alloantigen DTH toleranse for alloantigener uttrykt av donor hornhinnen allograft forbedrer overlevelsen av slike grafts. Som vist i figur 1, BALB / c-mus toleriserte til C57BL / 10 (B10) alloantigener forbedret ikke korneal allograft aksept som målt ved midlere overlevelsestid for disse corneale allografter. Dermed den midlere overlevelsestid for avviste hornhinner var den samme enten mus ble toleriserte eller ikke. Vi har også gjennomført tilsvarende studier med hud pode svar som et middelfor å teste effektiviteten til systemisk DTH tolerisering. Disse studiene viste at når DTH toleranse ble etablert i BALB / c mus mot B10 alloantigener, grafts huden bærer noen (B10.D2 og C.B10-H-2 b) eller alle B10 alloantigener ikke vise noen økt bety overlevelse ( Figur 2). Vi konkluderte fra disse studier som BALB / c-mus som hadde etablert antigen-spesifikke DTH responser ikke utlede noen målbar nytte av en slik toleranse for enten hornhinnen eller hud allografter. Disse data tyder også på at informasjon som genereres studere en murine modell av hornhinnetransplantasjon vil til tider være direkte relevant for andre former for fast vev transplantasjon.
Figur 1. BALB / c-mus ble injisert inn i det fremre kammer 10 med 6 miltceller fra C57BL / 10 (B10) mus. (p> 0,05).
Figur 2. Injeksjon av miltceller inn i det fremre kammer ikke påvirke overlevelsen av allogene hudtransplantater. BALB / c-mus ble injisert inn i det fremre kammer 10 med 6 miltceller fra C57BL / 10 mus. Etter en uke disse mus ble innpodet separat folie fra C57BL / 10, n = 10, B10.D2, n = 7, C.B10-H-2 B, n = 7 mus og sammenlignetmus som ikke ble injisert og innpodet med C57BL / 10 huden, n = 10. Resultater er uttrykt som midlere overlevelsestid + SEM.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Muse-modell av hornhinnetransplantasjon beskrevet her gjør at etterforsker for å studere menneskelig hornhinnen rejeksjon ved en modell som er prediktive for hvilke faktorer som er best assosiert med både avvisning 15,17,18,20, 26-30 og aksept 21-25 av hornhinnen allografter. I motsetning til menneske korneal transplantasjon, hvor pasientene er gitt enten topisk eller systemisk steroidbehandling til enten å behandle eller forhindre avstøtning 31, er denne modellen vanligvis brukt for å bestemme de faktorer som er relevante for allograft-avvisning i fravær av slik behandling. I tillegg til en modell for akutt hornhinne allograft avvisning, noe som vanligvis skjer innen 30 til 40 dager etter transplantasjonen, presenterer vi også en sen-term-modell av en slik avvisning som oppstår 45 dager etter engraftment hos mus og etterligner mange av funksjonene i sent -term og kronisk avvisning 32,33 som så langt ikke har blitt modellert i dyr.
Than modellens styrke er at man kan dissekere ulike mekanismer som er ansvarlig for den relativt høye frekvensen av hornhinnen allograft aksept samt bestemme hvilke mekanismer som er mest ansvarlig for hornhinne allograftsvikt. Denne modellen tillater også en for å teste ulike terapeutiske strategier i et dyr som besitter et immunsystem som er meget lik det menneskelige immunsystem. For dette formål eksistensen av flere reagenser som reagerer med murine faktorer såvel som transgene og gen-rettet mus, tillater for evaluering av så mange flere faktorer enn det som ville være tilfelle med andre arter. Denne evnen til å evaluere så mange forskjellige faktorer som er viktige for både suksess og svikt av corneale allotransplantater er en signifikant positiv i favør av å bruke denne murin modell versus andre dyremodeller hvor operasjonen er lettere å utføre på grunn av den økte størrelsen på øynene til disse artene.
Mens det er flere svakheter ved denne modellenvi tror de sterke langt oppveier dem. En av de mest betydelige, noe som ble antydet ovenfor, er den teknisk ekspertise er involvert i å utføre korneal transplantasjon i mus. På grunn av den lille størrelsen av den murine øyet, dette krever en som er dyktig til mikrokirurgi, både i å utføre transplantasjon samt fjernelse av suturer. Følgelig blir gjentatt praksis kreves for å beherske og opprettholde ferdigheter i denne teknikken. Den andre svakhet er at mens mus som er meget like mennesker, de er ikke den samme. Disse dyrene vise en større tendens til neovascularization, enn de menneskelige hornhinner. Videre vil denne modellen ikke etterligne de kirurgiske prosedyrer ment å behandle endotelceller dysfunksjon som Fuch sin dystrofi to. Før siste års full tykkelse transplantasjoner som de som brukes i den beskrevne protokollen ble ansatt. For tiden har endoteliale transplantasjoner involverer kun den endoteliale delen av hornhinnen blitt benyttet
For sen-term avvisning (> 45 dager) to faktorer som er unike for denne versjonen av modellen skiller seg ut. Den første svakhet med denne formen av modellen er at musene må opprettholdes i minst to til tre måneder for å studere sen sikt avvisning. Og for det andre, må de hornhinner først overleve potensielle akutte avvisning reaksjoner. Slike akutte avvisninger forekommer i 50 til 70% av mottakere 17, 20 -24. Dermed for å studere sent sikt avvisning vil innpode mus som transplantasjoner vil bli avvist akutt og vil ikke overleve til 45 dager etter engraftment. For å dempe dette har vi funnet ut at avslagsprosenten i hannmus er mindre enn det som ble observert for hunnmus (manuskript under utarbeidelse) og dermed å studere sent sikt avvisning det anbefales at bare hannmusanvendes. Vi har også forsøkt å forlenge hornhinne allograft overlevelse med steroidbehandling, men dette viste seg ikke å være spesielt nyttige (personlige observasjoner) og dermed ikke anbefale at steroidbehandling brukes. På tross av disse komplikasjoner og det forbeholdet at sannsynligvis omtrent halvparten eller noe mer av dem innpodet med allogene hornhinner vil forbli klart før etter 45 dager, er dette fortsatt et svært nyttig modell for å studere de faktorer som er relevante for sent sikt avvisning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Zeiss Surgical Microscope | Zeiss | Rebuilt | |
| 1 ml Syringe | BD | 305122 | |
| 3 ml Syringe | BD | 309657 | |
| 10 ml Syringe | BD | 309602 | |
| Vannus Scissors | Stortz | E-3387 | |
| 11-0 Sutures | Alcon | 717939M | |
| Trephine 2.0 mm | Katena | K 2-7520 | |
| Trephine 1.5 mm | Katena | K 2-7510 | |
| Tricaine Hydrochloride 0.5% | Alcon | NDC 0065-0741-12 | |
| Healon | Abbott | Healon OVD | |
| Forceps | FST | 11251-20 | |
| 7-0 Sutures | Alcon | 8065 | |
| 2.5% Phenylephrine HCl | Alcon | NDC 61314-342-02 | |
| 1% Tropicamide | Bausch & Lomb | NDC-24208-585-59 | |
| Hamilton Syringe | Hamilton | 7654-01 | |
| 33 gauge needle | Hamilton | 90033 | |
| Cell Strainer (100 μm nylon) | BD Falcon | 352360 | |
| Hemocytometer | Cardinal Health | B3175 | |
| Trypan Blue | Sigma | T8154 |
References
- Farooq, A. V., Shukla, D. Herpes simplex epithelial and stromal keratitis: an epidemiologic update. Surv. Ophthalmol. , 448-462 (2012).
- Gipson, I. K. Age-related changes and diseases of the ocular surface and. Invest. Opthlamol. Vis. Sci. 54, 48-53 (2013).
- Edwards, M., et al. Indications for corneal transplantation in New Zealand: 1991-1999. Cornea. 21, 152-155 (2002).
- Thompson, R. W., Price, M. O., Bowers, P. J., Price, F. W. Long-term survival after penetrating keratoplasty. Ophthalmol. 110, 1396-1402 (2003).
- Williams, K. A., Roder, D., Esterman, A., Muehlberg, S. M., Coster, D. J. Factors predictive of corneal graft survival. Report form the Australian Corneal Graft Registry. Ophthalmology. 99, 403-414 (1992).
- Larkin, D. F. Corneal allograft rejection. Br. J. Ophthalmol. 78, 649-652 (1994).
- Boisjoly, H. M., et al. Risk factors of corneal graft failure. Ophthalmol. 100, 1728-1735 (1993).
- Sugar, A., et al. Recipient Risk Factors for Graft Failure in the Cornea Donor Study. Ophthalmol. 116, 1023-1028 (2009).
- Namba, K., Kitaichi, N., Nishida, T., Taylor, A. W. Induction of regulatory T cells by the immunomodulating cytokines alpha-melanocyte-stimulating hormone and transforming growth factor-beta2. J. Leukoc. Biol. 72, 946-952 (2002).
- Taylor, A. W., Yee, D. G., Streilein, J. W. Suppression of nitric oxide generated by inflammatory macrophages by calcitonin gene-related peptide in aqueous humor. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 39, 1372-1378 (1998).
- Wilbanks, G. A., Mammolenti, M., Streilein, J. W. Studies on the induction of anterior chamber-associated immune deviation (ACAID). III. Induction of ACAID depends upon intraocular transforming growth factor-beta. Eur. J. Immunol. 22, 165-173 (1992).
- Volpert, O. V., et al. Inducer-stimulated Fas targets activated endothelium for destruction by anti-angiogenic thrombospondin-1 and pigment epithelium-derived factor. Nat. Med. , 8-349 (2002).
- Apte, R. S., Sinha, D., Mayhew, E., Wistow, G. J., Niederkorn, J. Y. Cutting edge: role of macrophage migration inhibitory factor in inhibiting NK cell activity and preserving immune privilege. J. Immunol. 160, 5693-5696 (1998).
- Kennedy, M. C., et al. Novel production of interleukin-1 receptor antagonist peptides in normal human cornea. J. Clin. Invest. 95, 82-88 (1995).
- Shimmura-Tomita, M., Wang, M., Taniguchi, H., Akiba, H., Yagita, H., Hori, J. Galectin-9-mediated protection from allo-specific T cells as a mechanism of immune privilege of corneal allografts. PLoS One. 8, (2013).
- Goldberg, M. F., Ferguson, T. A., Pepose, J. S. Detection of cellular adhesion molecules in inflamed human corneas. Ophthalmol. 101, 161-168 (1994).
- Stuart, P. M., Griffith, T. S., Usui, N., Pepose, J. S., Yu, X., Ferguson, T. A. CD95 ligand (FasL)-induced apoptosis is necessary for corneal allograft survival. J Clin Invest. 99, 396-402 (1997).
- Yamagami, S., et al. Role of Fas-Fas ligand interactions in the immunorejection of allogeneic mouse corneal transplants. Transplantation. 64, 1107-1111 (1997).
- Stuart, P. M., Pan, F., Plambeck, S., Ferguson, T. A. Fas/Fas ligand interactions regulate neovascularization in the cornea. Invest. Ophthalmmol. Vis. Sci. 44, 93-98 (2003).
- Stuart, P. M., Yin, X. T., Pan, F., Haskova, Z., Plambeck, S., Ferguson, T. A. Inhibitors of matrix metalloproteinases activity prolong corneal allograft acceptance by increasing FasL expression. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 45, 1169-1173 (2004).
- Joo, C. -K., Pepose, J. S., Stuart, P. M. T-cell mediated responses in a murine model of orthotopic corneal transplantation. Invest.Ophthalmol. Vis. Sci. 36, 1530-1540 (1995).
- Sonoda, Y., Sano, Y., Ksander, B., Streilein, J. W. Characterization of cell-mediated immune responses elicited by orthotopic corneal allografts in mice. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 36, 427-434 (1995).
- Sano, Y., Osawa, H., Sotozono, C., Kinoshita, S. Cytokine expression during orthotopiccorneal allograft rejection in mice. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 39, 1953-1957 (1998).
- Haskova, Z., Usui, N., Ferguson, T. A., Pepose, J. S., Stuart, P. M. CD4+ T cells are critical in corneal but not skin allograft rejection. Transplantation. 69, 483-488 (2000).
- Tan, Y., et al. Immunological disruption of antiangiogenic signals by recruited allospecific T cells leads to corneal allograft rejection. J. Immunol. 188, 5962-5969 (2012).
- Dana, M. R., Yamada, J., Streilein, J. W. Topical interleukin-1 receptor antagonist promotes corneal transplant survival. Transplantation. 63, 1501-1507 (1997).
- Cunnusamy, K., Chen, P. W., Niederkorn, J. Y. IL-17A-dependent CD4+CD25+ regulatory T cells promote immune privilege of corneal allografts. J. Immunol. 186, 6737-6745 (2011).
- Fu, H., et al. Arginine depletion as a mechanism for the immune privilege of corneal allografts. Eur. J. Immunol. 41, 2997-3005 (2011).
- Medina, C. A., Rowe, A. M., Yun, H., Knickelbein, J. E., Lathrop, K. L., Hendricks, R. L. Azithromycin treatment increases survival of high-risk corneal allotransplants.Cornea. , 32-658 (2013).
- Cho, Y. K., Zhang, X., Uehara, H., Young, J. R., Archer, B., Ambati, B. Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1 morpholino increases graft survival in a murine penetrating keratoplasty. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 53, 8458-8471 (2012).
- Kim, H. K., Choi, J. A., Uehara, H., Zhang, X., Ambati, B. K., Cho, Y. K. Presurgical corticosteroid treatment improves corneal transplant survival in mice. Cornea. 32, 1591-1598 (2013).
- Yamazoe, K., Yamazoe, K., Shimazaki-Den, S., Shimazaki, J. Prognostic factors for corneal graft recovery after severe corneal graft rejection following penetrating keratoplasty. BMC Ophthalmol. 13, 5 (2013).
- Panda, A., Vanathi, M., Kumar, A., Dash, Y., Priya, S. Corneal graft rejection. Surv. Ophthalmol. 52, 375-396 (2007).
- Patel, S. V. Graft survival and endothelial outcomes in the new era of endothelial keratoplasty. Exp. Eye Res. 95, 40-47 (2012).
- Anshu, A., Price, M. O., Tan, D. T., Price, F. W. Jr Endothelial keratoplasty: a revolution in evolution. Surv. Ophthalmol. 57, 236-252 (2013).
