Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

Medicine

Farelerde Sistemik ve Karaciğer Hemodinamik Parametrelerin İzleme

doi: 10.3791/51955 Published: October 4, 2014

Summary

Bu film farelerde sistemik ve hepatik hemodinamik kazanmak için nasıl gösterir. Tüm izleme hayati parametrelerin, sistemik kan basıncı, santral venöz basınç, ortak hepatik arter akım hızı ve portal ven basıncı yanı sıra farelerde portal akış hızı edinimini içerir.

Abstract

Deneysel araştırma fare modellerinin kullanımı hepatik fizyolojisi ve patofizyolojik rahatsızlıkların çalışma için çok büyük önem taşıyor. Ancak nedeniyle fare, küçük boyutu, fare için uygun intraoperatif izleme prosedürünün teknik detayları nadiren tarif edildi. Daha önce biz fareler için hemodinamik parametrelerini elde etmek için bir izleme prosedürü bildirdi. Şimdi, farelerde sistemik ve hepatik hemodinamik parametrelerini elde etmek için prosedür, sıçanlar daha küçük on kat bir tür adapte. Bu film, hayvanların aletleri hem de farelerde karaciğer ve sistemik hemodinamikler değerlendirmek için gerekli olan veri toplama işlemini göstermektedir. Vücut ısısı, solunum hızı ve kalp hızı dahil yaşamsal parametreleri, işlem boyunca kaydedildi. Sistemik hemodinamik karotis arter basıncı (CAP) ve santral venöz basınç (CVP) oluşmaktadır. Karaciğer perfüzyon parametreleri portalı v dahilEin basıncı (PVP), köprülü akış hızı hem de ortak hepatik arter (Tablo 1) akış hızı. Enstrümantasyon ve veri toplama normal değerler 1.5 saat içinde tamamlandı kaydetmek için. Sistemik ve hepatik hemodinamik parametreler bu işlem sırasında normal sınırlar içinde kalmıştır.

Bu prosedür zor ama mümkündür. Biz zaten deneyler sıkma normal farelerde olduğu gibi% 70 hepatektomiden sırasında ve karaciğer lobunda hepatik hemodinamikleri değerlendirmek için bu prosedürü uyguladık. Rezeksiyon (n = 20), rezeksiyon (6.87 ± 2.39 cmH2O) daha önce anlamlı derecede yüksek olduğu cmH2O (p <0.05) 11.41 ± 2.94 idi sonra PVP idi. Denemeyi sıkma lob sonuçları bu izleme prosedürü portal basınçta ve portal akış hızında küçük değişiklikler tespit etmek için hassas ve uygun olduğunu belirtti. Sonuç olarak, bu yordamı tecrübeli bir mikro-cerrahın elinde güvenilir ama exp sınırlı olmalıdıreriments farenin kesinlikle nerede ihtiyaç vardır.

Introduction

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Bu videonun genel amacı, sistemik ve hepatik hemodinamik parametrelerini elde etmek için gerçek-zamanlı izleme prosedürü göstermekti. Bu prosedürü geliştirmek için gerekçe sistemik ve hepatik hemodinamik parametrelerin elde edilmesi gerektiren farelerde deneysel müdahaleler için büyük bir değerdir. Prosedür böyle hepatektomiden, portal ven ligasyonu ve karaciğer nakli gibi, naif hayvanlara ve sırasında veya belirli bir hepatobiliyer deneysel cerrahi müdahale sonrasında uygulanabilir.

Kemirgenlerde karaciğer hemodinamik verilerin elde edilmesi önerilen invaziv prosedür gerektirir. Karaciğer perfüzyon non-invaziv elde edilemez. Ancak, sistemik kan basıncı edinimi için alternatifler vardır. Böyle kuyruk manşet tekniği 8 olarak izleme teknikleri sıçan ve farelerde hem de kan basıncını elde etmek için kullanılmıştır. Kuyruk manşet tekniği consci uygulanabilirlı hayvanlar. Kan basıncını ölçerken, hayvan belirli bir rahatsız bir pozisyonda yerleştirilir ve düzeltilmesi gerekiyor. Kuyruk manşet cihaz kılavuzda, üretici farenin sinir olur ve kuyruk dolaşımını azaltabilir hangi vurguladı belirtmektedir. Bu koşullar altında, kuyruk elde edilen periferik kan basıncı merkezi kan basıncından daha düşük olabilir.

Tam izleme prosedürü veri toplama için sensörler bir dizi kullanarak bir tümleşik çoklu-kanal monitör ile gerçekleştirildi. Kan basıncı, mikroskop altında dikkatli bir mikrocerrahi diseksiyon ve maruz kaldıktan sonra söz konusu kabı içine bir kateter sokulması ile elde edilmiştir. Akış hızı, her bir kabın etrafına transonik akış prob yerleştirilmesi ile ölçülmüştür.

Biz zaten SINGL karşılaştırılabilir fizyolojik hemodinamik verileri kapsamlı bir dizi sonuçlanan sıçanlar için benzer intraoperatif izleme prosedürü bildirdiDiğer grup 7 rapor E verileri. Bu nedenle fare, sıçan daha küçük 10-kat bir türe adapte için iyi bir temel temsil etmek için bu prosedürü kabul. Sıçan prosedüre en önemli fark, kan basıncı verileri yerine sıvı tabanlı kateter sistemi elde etmek için Millar kateter kullanılmasıdır. Akış veriler de transonik akış sondaları, gelen sıçan gemiler için daha sadece daha küçük olanlar ile elde edildi.

Nedeniyle hayvanın küçük boyutu, farelerin enstrümantasyon teknik açıdan zorlayıcı, ama mümkündür. Enstrümantasyon tamamlandıktan sonra önceden tanımlanmış bir ayar dosyası kullanılabilir beri, veri toplama ve birincil yaşam veri analizi, basittir. Ayar dosyası bir dizi deney başında bir kez tanımlanması ve bu depolanmış ve daha sonraki deneyler için kullanılabilir sahiptir.

Şimdiye kadar akut deneylerde karaciğer hemodinamik etkilerini değerlendirmek için bu prosedürü uygulanır. Biz CA ölçülenP ve PVP önce ve hemen% 70 parsiyel hepatektomi (PH) sonra ve / de-sıkma deneyler kıstırma. Biz karaciğer kütlesinin tamamen% 90'ını temsil eden kitle medyan kısa (5 dakika) sıkıştırma ve sol lateral lob ardından karaciğer% 20 temsil eden sağ lobunun Hepato-duodenum ligament kenetlenir. De-sıkma medyan ve sol lateral lobu boşaltarak ardından sağ lob kelepçeyi serbest başladı. Maksimum bağlama süresi 10 dakikanın altında idi.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Konut ve yürütülen tüm işlemler Alman Hayvan Refahı Mevzuatına uygun vardı.

1. Sensörler Kalibrasyon (Sensörler Kalibrasyon için üreticinin talimatlarına uyun)

1.1) Millar kateter kalibrasyonu. 30 dakika önce dengelemek için (sıfırlar) ve kalibrasyon için steril su ya da tuzlu su içinde kateterin ucu ön-ıslatma.

  1. Köprü amplifikatör millar1 kanalına millar sensörünü bağlayın ve su sütununa millar sensör ucu takın.
  2. 0 cmH2O O. su sütunu değerini ayarlayın Veri analiz yazılımı penceresinde, yükseltmek köprü seçin ve onu sıfır. Bazal değer 0 cmH2O ayarlanabilir.
  3. 20 cmH2O O. su sütunu değerini ayarlayın Veri analiz yazılımı penceresi ilerlemeyi çalıştırın ve durdurun. Yükseltmek köprü penceresinde "birimleri" seçiniz, 2 O buna göre 0 ve 20 CMH taban ayarlamak. <CMH "birimi" ayarlayınsub> 2 O.
  4. Aynı şekilde CAP ölçülmesi için millar2 kalibre (iki taban hattı 90 ve 110 cmH2O ayarlanır).

1.2) Kan akım probu kalibrasyonu

  1. Iyonu giderilmiş su içine sonda yerleştirin. Transonik akış prob sistemi ile prob bağlayın.
  2. Veri analiz yazılımı penceresinde, Giriş akış probu sıfıra yükseltmek seçin. Birimleri ayarlayın.
  3. "Test kanalı" sinyal toplamak için düğmeye basın: sinyal 3-4 bar varsa, bu sinyalin iyi olduğu anlamına gelir. Iyi bir sinyal elde edilir durumda, prosedür devam edilebilir.
  4. Değeri kalibre edilmiş veya edilmemiş olup olmadığını "sıfır kanal" ve ölçek görmek için kanalı için düğmeye basın.
  5. Daha sonra ölçüm için "tedbir kanal" için düğmeye basın.

2. Cerrahi Prosedür için Fare hazırlayın

  1. Indüksiyon odasında fare yerleştirin ve% 2 izofluran ile fare uyutmak ve0.3 ml / dakika oksijen. Fare ayak parmağı sıkıştırma çekme refleksi mevcut olmaması halinde işlemi gerçekleştirilebilir.
  2. Sol boyun ve karın dahil cerrahi bölgelerde, kürk tıraş.
  3. Ameliyat masasında fare yerleştirin ve kasetleri kullanarak sabitleyin. Işletme süresince kuruluğunu önlemek için gözlerin veteriner merhem kullanın.
  4. Boyun operasyon alanının optimal pozlama için boyun altında bir gazlı bez yastık yerleştirin.
  5. Operasyon alanı dezenfekte edin ve sadece açık cerrahi alanını terk fareyi kapsayacak şekilde sterilize Gauzes yerleştirin.

3. Vital Parametreler Ölçüm

  1. Deri altından fare pençeleri içine EKG iğneler takın.
  2. Fare arkasına altında solunum sensörü yerleştirin.
  3. Fare rektum içine, sıcaklık probu yerleştirin.
  4. Tutanak sıcaklığı, EKG ve veri analizi yazılımı fare solunum hızı.

S 4. Boyun Operasyonuystemic Kardiyovasküler İzleme

4.1) Gemi diseksiyonu

  1. Boyun orta hattı, klavikula orta noktası, mandibulanın açısını tanımlayın.
  2. Orta çizginin sol tarafına 0.5cm olan klavikula orta noktaya mandibula açısı bir 2cm boyuna kesi yapmak.
  3. , Submandibular bez disseke ters çevirin ve tuzlu batırılmış gazlı bez ile örtün.
  4. , Juguler ven tespit teşrih ve daha sonra ligasyon ve sabitleme için ven altına üç 6-0 ipek sütür koyun.
  5. , Sternokleidomastoid kas tespit digastricus'un omohyoid ve arka karnının üstün karnından ayırmak ve karotis arter kolay maruz kalma bir ekartör ile çekin.
  6. Karotis arter incelemek ve daha sonra ligasyon ve sabitleme için arterin altında üç 6-0 ipek sütür koyun.

4.2) Karotis arter kan akım ölçümü

  1. Transonic yerleştirin, karotis arter etrafında soruşturma sabit tutmak ve ultrason jeli veya tuzlu su kullanılarak kişiyi optimize.
  2. Veri analiz yazılımı kullanılarak transonik cihazın küçük ekranda gösterildiği gibi karotis arter rekor kan akım hızı
  3. Ölçümü tamamladıktan sonra probu çıkarın

4.3) Karotis arter basıncı ölçümü (CAP)

  1. Karotid arterin distal ucunu birbirine bağlamak ve yakın uca kelepçe.
  2. Karotis arter etrafında 2 sabitleme sütür koyun. Kalmak dikiş için 10-0 proleni kullanın.
  3. Geminin ön duvarında küçük bir kesi yapmak.
  4. Millar kateter yerleştirin ve önceden yerleştirilmiş dikişler ile sabitleyin.
  5. Veri analizi yazılımı CAP kaydedin.

4.4) Boyun ven kan akımı ölçümü

  1. Juguler ven kaldırın ve akış hızını ölçmek için transonik akış probu yerleştirin.
  2. Veri işleme ve akış hızı kaydedin.

4.5) Santral venöz basınç ölçümü (CVP)

  1. Şahdamarından proksimal ucunu Kelepçe ve distal ucu Arter.
  2. Kabın ön duvar microscissors kullanarak küçük bir kesik kesin.
  3. Sıvı dolu kateter yerleştirin ve önceden yerleştirilmiş dikiş hatları ile sabitleyin.
  4. Veri analizi yazılımı CVP kaydedin.

Karaciğer Hemodinamiğin Edinme 5. Karın Çalışması

5.1) Gemi tanımlama

  1. Karın üzerinde enine kesi yapmak.
  2. Sol tarafa bağırsakları Eventerate ve ıslak bir gazlı bez ile kaplayın.
  3. Inferior vena kava, portal ven, ortak hepatik arter ve uygun hepatik arter tanımlayın.
  4. Bütün izleme işlemi sırasında karın ve bağırsak her 5 dakika yüzeyinde bir ılık tuzlu su bırakın.

Portal kan akışının 5.2) Ölçüm

  1. Portal ven teşrih.
  2. Akış prob yerleştirirken, teknenin kaldırma sağlamak için, portal ven altında 6-0 ipek yerleştirin.
  3. Portal ven etrafında transonik akış probu yerleştirin ve kan akış hızını ölçmek.
  4. Portal ven kan akış hızını kaydedin.

Ortak hepatik arter akış 5.3) Ölçme

  1. Dikkatli ortak hepatik arter ayır.
  2. Teknenin kaldırma sağlamak için teknenin yaklaşık bir 6-0 ipek dikiş yerleştirin.
  3. Arter etrafında akış probu yerleştirin.
  4. Kendi kan akımını ölçmek ve veri elde.

Portal ven basıncı 5.4) Ölçüm (PVP)

  1. Düz portal ven içine akıtır az yan dalları ile mezenterik ven, bir dalı seçin.
  2. Seçilen mezenterik ven uzak ucunu Arter. Ligasyon bağırsak tüp yakın olduğundan emin olun. Onun küçük dalları bağlayan
  3. 2 f yerleştirinven çevresinde 6-0 prolen sütür kullanarak ixing. Bu prosedürün kilit noktası ven bağlanarak zaman mezenterik arter dokunmamak için.
  4. Portal ven proksimal ucunu sıkıştırın.
  5. 10-0 prolen kullanılarak 2 kalmak sütür koyun. Kalmak dikiş ince mezenterik ven damar duvarına nüfuz etmelidir yana bazı kanama meydana gelecektir.
  6. 45 derece açıyla eğik bir microscissor kullanarak ven küçük bir kesi yapmak.
  7. Portal ven içine mezenterik ven aracılığıyla Millar kateter yerleştirin ve bunu düzeltmek
  8. Portal ven basıncını kaydedin. Prosedürün sonunda, anestezi altında kanı akıtılarak kurban fareler.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Böyle solunum hızı ve kalp hızı gibi farelerin hayati parametreleri açıkça sıçan çok daha yüksektir. Ortalama sistemik kan basıncı ve boyun ven basıncı sıçan değerlere benzer ve insan verilerinden bile benzer.

Karaciğer hemodinamik veriler açıkça farklıdır. Biz 8 farelerin normal değerleri elde edilmiştir. Normal farelerde, portal kan akışı 1,6-2,3 ml / dakika arasında değişmektedir. Ortak hepatik arter akış 0.10 0.35 ml / dk arasında değişmektedir. Normal hayvanlarda portal damar basıncı 8,09 ± 2,47 arasında ortalama bir değer cmH2O (Tablo 1) ile O cmH2O 4,4-11,2 geniş aralığı içinde olmuştur. Normal hayvan küçük gruplar ortalama değeriyle karşılaştırarak, bu geniş küçük ama önemli olmayan farklılıklara yol açabilir.

Özellikle portal basınçta önemli bireyler arası farklılıklar gözlenmektedir yana, biz küçük içi bireysel farklılıklar, bu teknoloji ile tespit edilebilir olup olmadığını testnique. Biz iki farklı deneysel ortamlarda bu yordamı değerlendirdi: parsiyel hepatektomi ve karaciğer lobu sıkıştırma / de-kelepçeleme. Portal basınç önce ve hemen sonra aynı hayvanda% 70 parsiyel hepatektomi (n = 20) (= P <0.001) O cmH2O 6.87 ± 2.39 ve 11.41 ± 2.94 2 kat artmıştır (Şekil 1). İnsanlarda 7'de, diğer türleri de 5,12 gözlendi ve Bu sonuçlar benzer bir aralık içinde olmuştur.

Rezeksiyon öncesi Normal portal ven basıncı ve portal basıncı iki farklı grupta (normal denetleme parametreleri gruptan biri,% 70 PH gruptan diğer) satın alındı. 6.87 ± 2.39 CMH karşı (8.09 ± 2.47 cmH2O bizim deneyinde görüldüğü gibi, normal farelerde portal basınçta geniş (4 cmH2O 11), hayvanların küçük gruplar ortalama değerleri, biraz farklı olabilir 2 O). Veriler analiz edildiğinde, ancak, hiçbir 'durağan olduğu bulunduBu iki grup (p = 0.237) arasında olarak anlamlı fark.

Sıkıştırma / de-sıkma deney prosedürü portal basınçta bile küçük değişiklikler algılayabilecek kadar hassas olduğunu göstermek için tasarlanmıştır. Karaciğer kütlesinin% 20'sini temsil eden sağ lob sıkma yaklaşık% 17 oranında bir artışla sonuçlandı. Median daha sıkma ve sol lateral lob başlayan portal basınçta kıyasla en az 2-3 katlık bir artışa neden olmuştur. Karaciğer% 70 sıkıştırma sonuçlanan sağ lob kelepçeyi serbest bırakıldığında portal kan basıncı, başlangıç ​​basıncı aşamalı olarak. Medyan ve sol lateral lobu (Şekil 2 ve Tablo 2) besleyen sol portal ven kelepçeyi çıkarırken basınç başlangıç ​​seviyesine geri döndü. Sham grubunun MAP karın açıldıktan sonra 1 saat içinde sabit kalmıştır. Benzer bir zaman noktasında elde edilen kontrol grubundaki farelerin MAP,sıkma deneyde olduğu gibi, deney grubunun MAP ile karşılaştırıldığında anlamlı bir fark vardı. Her iki deneyin sonuçları az% 20, hatta küçük birey-içi bir değişiklik, bu prosedür ile tespit edilebilir olduğunu göstermiştir.

Şiddetli kanama ve tıkanıklık gibi tipik komplikasyonlar işlem sırasında oluşabilir. Ciddi kan kaybı önemli MAP azalma yanı sıra PVP yol açacağından, bu komplikasyon ile farelerin sonuçları elimine edilmelidir. Biz küçük bir doz heparin (500 U / kg) enjekte öneririz, karaciğer lobu sıkma deneyi gerçekleştirirken ameliyat sıkma öncesi venöz konjesyon ve tromboz riskini. Ortak hepatik arter damar kaldırma ve prob yerleştirilmesi gibi işleme üzerine geçici bir damar spazmı uğrayabilir. Bu, bir karaciğer geçici iskemi kısa yol açabilir. Genel olarak, spazm dakika içinde kendiliğinden çözebilir. CHA bir kısa damar spazmı ciddi bir problem oluşturan değilhepatik iskemi reperfüzyon hasarı odaklanarak zaman hayvanın yaşam, ancak, deneysel sonuçlar ile etkileşebilir.

Sonuç olarak, bu prosedür zor ama mümkündür. Hatta deneyimli mikro cerrahlar için bazı eğitim gerektirir. Nedeniyle müdahaleler öncesi ve sonrasında farklı hayvanlarda elde edilen basınç verilerine yüksek bireyler arası değişkenliği karşılaştırmak için kesin sonuçlara yol olmayabilir. Bu nedenle önce ve aynı hayvanda müdahalesinden sonra verileri alarak akut deneylerde karaciğer hemodinamiklerinin kısa vadeli düzenlenmesini incelemek için bu yordamı öneririz.

Parametreler Kendi verileri elde Parametreler bildirdi
Yaşamsal parametreleri Kalp hızı (n = 8) 418 ± 55 BPM 389 (353-566) BPM 1
162 ± 11 BPM 254 ± 28 BPM 2
Sıcaklık (n = 8) 33.56 ± 0.54 ° C 36,1-36,6 ° C 11
Sistemik kan basıncı (CAP) (n = 8) 130.54 ± 20.47 cmH2O
(= 96,02 ± 15,06 mmHg)
94 ± 15 mmHg 9
Santral venöz basınç (CVP) (n = 2) 8.90 ± 3.25 cmH2O 5.9 ± 2.0 cmH2O 11
Karaciğer hemodinamik Portal ven akım (n = 6) 2.03 ± 0.24 ml / dk 3,0 (2,5-3,1) ml / 1 dak
3.3 ml / dakika 1
Ortak hepatik arter akım (n = 6) 0.20 ± 0.09 ml / dak Fou değil nd
PVP (n = 8) 8.09 ± 2.47 cmH2O (= 5.95 ± 1.82mmHg) 5.3 ± 1.4 cm tuzlu 3
8.7 ± 2.1 mmHg 4
6 4mmHg

. Bu izleme prosedürü TKP kullanılarak elde farelerin Tablo 1. Normal sistemik ve hepatik hemodinamik parametreler: karotid arter basıncı; MAP: ortalama arter basıncı; CVP: Santral venöz basıncı; PVP: portal ven basıncı.

Şekil 1
Şekil 1. PVP önce ve% 70 PH sonra. Vardı Portal ven% 70 hepatektomiden önce ve sonra basınç (n = 20) 6.87 ± 2.39 ve 11.41 ± 2.94 cmH2O O.www.jove.com/files/ftp_upload/51955/51955fig1highres.jpg "target =" _blank "> Bu rakamın büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Parametreler (cmH2O) Operasyon sonrasında Karaciğerin% 20 sıkıştırdıktan sonra (RL) Karaciğerin% 90 sıkıştırdıktan sonra (RL + ML + LLL) Karaciğerin% 70 sıkıştırdıktan sonra (ML + LLL) Sonunda (tüm kıskaçları bırakın)
PVP - Sıkıştırma exp grubu (n = 10) 9.59 ± 4.00 10.45 ± 3.89 25.78 ± 8.99 16.91 ± 9.86 11.14 ± 4.48
Ortalama CAP - Sıkma exp grubu (n = 10) 121.50 ± 18.67 95.89 ± 32.76 74.41 ± 35.35 93.88 ± 42.96 89.44 ± 44.20
Ortalama CAP - Sham grubu (n = 3) 123.33 ± 12.42 121.0 ± 5.57 124.00 ± 8.66 127.33 ± 7.23 123.00 ± 8.89

. Tablo 2. hemodinamik yanıt sıkma ve farklı karaciğer lobu klempin alınması sonrası (n = 10) RL: sağ lob, ML: (sağ median lob ve sol lob olmak üzere medyan) medyan lob, LLL: yanal lob bıraktı.

Şekil 2
Sıkma ve farklı karaciğer lobu klempin alınması sonrası Şekil 2. hemodinamik yanıt (hayvan ID: CHI-108) A.. PVP sağ millar Kateter yerleştirildikten sonra cmH2O O. 8.8 oldu % 20 karaciğer lobu sıkma sonra PVP cmH2O OBPVP% 90 karaciğer lobu sıkma sonra cmH2O 17.5 yükseldi 10.8 idi. Sağ lob kelepçeyi serbest C. PVP O cmH2O 10.3 düşmüştür. D.PVP cmH2O 8.7 geri döndü , bu rakamın büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Hepatik Hemodinamiğin izlenmesi Hepatoloji ve karaciğer cerrahisinde önemli bir araştırma aracı. Hepatik hemodinamik verilerin elde dolaşım sistemi üzerinde hepatobilier prosedürlerin etkisini belirlemek için yardımcı olur. Vazoaktif ilaçlar değerlendiren çalışmalarda gerektiği gibi hepatik hemodinamik verilerin elde edilmesi de, örneğin portal basıncı ve portal akışını etkileyen ilaçların etkilerini incelemek için gereklidir.

Küçük boyutuna rağmen, sistemik yaşamsal parametreleri ve karaciğer hemodinamik farelerde izlenebilir. Aşağıdaki gibi protokol çerçevesinde kritik adımlar vardı: Birincisi, dolaşım disfonksiyonuna yol açabilir hipotermi önlemek için tüm prosedür sırasında bir ısınma pad üzerinde hayvan yerleştirmek önemlidir. Fare damar duvarı çok kırılgan ve ince olduğundan İkincisi, bu, bir fare damarları diseksiyon zaman çok dikkatli olmak önemlidir. Bu th bazı yağ dokusu kapma damar duvarını düzeltmek için en iyi görünüyorYerine, damar duvarı kendini kapma E yüzeyi. Üçüncüsü, bu mezenterik ven çevresinde sabitleme sütür yerleştirirken arteriyel kaynağını bozmayacak için mezenterik arterin yanlışlıkla bağlanmasını önlemek için hayati önem taşımaktadır.

Ancak, invaziv rehberlik tekniği bazı sınırlamalar vardır. İlki kendisi tarafından invaziv olduğunu. Bu izleme tekniği cerrahi müdahale gerektiren invaziv bir yöntemdir. Dolayısıyla, izleme prosedür, hayvanlar için yan etkilere neden olabilir. Bu nedenle, sadece ama hayatta deneylerde, normal hayvanlarda akut deneylerde hemodinamik parametreleri elde etmek için bu prosedürü kullanılır. Bir sonraki adımda, hayatta kalma deneylerde bu tekniği değerlendirmek isterler. Bu prosedürün ikinci sınırlaması önemli mikrocerrahi tecrübe gerektirir. Farelerde Hemodinamik izlem sadece özel eğitimli mikrocerrah tarafından yapılmalıdır. En zor parBu ven son derece kırılgan olduğundan bu izleme sürecinin t, küçük mezenterik ven Millar kateter yerleştirilmesidir. Bizim ellerde, yaklaşık 10 eğitim operasyonları öncesinde teknik bu prosedürü mastering için deneyimli bir microsurgeon için ihtiyaç vardı. Deneyim başarıyla sıçan veya farelerde 50'den fazla vasküler anastomoz (karotis arter, juguler ven) yapılan olmanın tanımlanmıştır. Üçüncü sınırlama, bu yöntem ile elde edilen portal kan basıncı normal hayvan için fizyolojik sınırın altında olabilir olmasıdır. Mezenterik ven ligasyonu ve kateter yerleştirme tahmini% 10 oranında portal ven içine drene kan toplam hacmi azaltabilir. Bununla birlikte, bu fizyolojik aralık mevcut cihazlar kullanılarak elde edilemez. Benzer şekilde, PVP anestezi kendisinin etkisi 13 göz ardı edilemez. Tüm hayvanlar, aynı müdahaleye maruz Ancak, olası hata sistematik bir hata olacaktır. Bu durumda, Data yorumlama dikkatli hayvanlar arasındaki mutlak farkların mutlaka göreceli bir hayvan içinde değişiklikler değil odaklanarak ile yapılmalıdır.

Ancak, kemirgenlerde invaziv hemodinamik az alternatifler vardır. Non-invaziv izleme sistemik kan basıncının satın sınırlıdır. Portal basınç veya portal akım farelerde non-invaziv tespit edilemez. Telemetrik izleme da sistemik kan basıncı özellikleriyle sınırlıdır. Hiçbir raporlar, diğer hemodinamik parametreler telemetrik edinimi ile ilgili bulunmuştur.

Bu, tam intraoperatif izleme prosedürü karaciğer perfüzyon, karaciğer rejenerasyonu ve kapsamlı hepatobilier cerrahi regülasyonu gibi hepatik fizyolojik süreçleri anlamak için gereklidir. Gerçek zamanlı Ameliyatta Laboratuar hayvanlarının verileri izlemek ve toplamak için yeteneği, bu nedenle, karaciğer di çalışmada önemli bir ilerlemeyi temsiliçeriyordu ve portal hipertansiyon.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarlar hiçbir rakip mali çıkarlarının olmadığını beyan ederim.

Acknowledgments

Bu araştırma, "Sanal Karaciğer Ağ" finanse Eğitim ve Araştırma Federal Bakanlığı (Bmbf) tarafından desteklenmiştir. Ben videoyu üreten ve ses kayıt için animasyon ve Isabel Jank yaratarak onların yardım için Jena Üniversitesi Hastanesi medya merkezinden Frank Schubert ve Rene GUMPERT teşekkür etmek istiyorum.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
PowerLab 16/30  ADInstruments PL3516
Quad Bridge Amp ADInstruments FE224 Bridge amplifier 
Animal Bio Amp ADInstruments FE136
Needle Electrodes for FE136 (3 pk) ADInstruments MLA1213
Perivascular Flowmeter Module Transonic TS420
Flowprobe MA0.5PSB/MA1PSB Transonic MA0.5PSB/MA1PSB
SPR-1000 Mouse Pressure Catheter Millar instruments 841-0001
fluid filled catheter  Terumo SR+DU2619PX 26G, 0.64×19mm
micro scissors F·S·L No. 14058-09
micro serrefine F·S·L No.18055-05
Micro clamps applicator F·S·L No. 18057-14
Straight micro forceps F·S·L No. 00632-11
Curved micro forceps F·S·L No. 00649-11
needle-holder F·S·L No. 12061-01
6-0 silk ethicon
6-0 prolene ethicon
7-0 prolene ethicon
10-0 prolene ethicon
Tail cut-off device  Kent Scientific www.kentscientific.com
LabChart7 ADInstruments data  analysis software 

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Albuszies, G., et al. Effect of increased cardiac output on hepatic and intestinal microcirculatory blood flow, oxygenation, and metabolism in hyperdynamic murine septic shock. Crit Care Med. 33, (10), 2332-2338 (2005).
  2. Bernhard, W., et al. Phosphatidylcholine molecular species in lung surfactant: composition in relation to respiratory rate and lung development. Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 25, (6), 725-731 (2001).
  3. Cheever, A. W., Warren, K. S. Portal vein ligation in mice: portal hypertension, collateral circulation, and blood flow. 18, 405-407 (1963).
  4. Costa, G., Aguiar, B. G., Coelho, P. M., Cunha-Melo, J. R. On the increase of portal pressure during the acute and chronic phases of murine schistosomiasis mansoni and its reversibility after treatment with oxamniquine. Acta Trop. 89, (1), 13-16 (2003).
  5. Cui, S., Shibamoto, T., Zhang, W., Takano, H., Kurata, Y. Venous resistance increases during rat anaphylactic shock. Shock. 29, (6), 733-739 (2008).
  6. Geerts, A. M., et al. Comparison of three research models of portal hypertension in mice: macroscopic, histological and portal pressure evaluation. Int. J. Exp. Pathol. 89, (4), 251-263 (2008).
  7. Huang, H., Deng, M., Jin, H., Dirsch, O., Dahmen, U. Intraoperative vital and haemodynamic monitoring using an integrated multiple-channel monitor in rats. Lab Anim. 44, (3), 254-263 (2010).
  8. Krege, J. H., Hodgin, J. B., Hagaman, J. R., Smithies, O. A noninvasive computerized tail-cuff system for measuring blood pressure in mice. Hypertension. 25, (5), 1111-1115 (1995).
  9. Kuga, N., et al. Rapid and local autoregulation of cerebrovascular blood flow: a deep-brain imaging study in the mouse. J. Physiol.. 587, (Pt 4), 745-752 (2009).
  10. Muraki, T., Strain Kato, R. difference in the effects of morphine on the rectal temperature and respiratory rate in male mice. Psychopharmacology (Berl). 89, (1), 60-64 (1986).
  11. Nielsen, J. M., et al. Left ventricular volume measurement in mice by conductance catheter: evaluation and optimization of calibration. Am. J. Physiol Heart Circ. Physiol. 293, (1), H534-H540 (2007).
  12. Sakamoto, M., et al. Improvement of portal hypertension and hepatic blood flow in cirrhotic rats by oestrogen. Eur. J. Clin. Invest. 35, (3), 220-225 (2005).
  13. Reverter, E., et al. Impact of deep sedation on the accuracy of hepatic and portal venous pressure measurements in patients with cirrhosis. Liver Int. 34, (1), 16-25 (2014).
Farelerde Sistemik ve Karaciğer Hemodinamik Parametrelerin İzleme
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Xie, C., Wei, W., Zhang, T., Dirsch, O., Dahmen, U. Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice. J. Vis. Exp. (92), e51955, doi:10.3791/51955 (2014).More

Xie, C., Wei, W., Zhang, T., Dirsch, O., Dahmen, U. Monitoring of Systemic and Hepatic Hemodynamic Parameters in Mice. J. Vis. Exp. (92), e51955, doi:10.3791/51955 (2014).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter