Abstract
В естественных условиях биомедицинских исследований имеет решающее значение для перевода в пробирке открытия в клинических достижений. Небольшие учебные заведения с ограниченными ресурсами найти практически невозможно построить и поддерживать типичные объекты грызунов для исследований. Данио рерио исследования было продемонстрировано, что полноценной альтернативой для исследований в области естественных в фармакологии, физиологии, развития и генетических исследований. Эта статья показывает, что функциональная данио объект может быть построен в легкой и доступной форме. Мы показываем, что такой объект мог бы быть построен примерно в один рабочий день с минимальными инструментами и опытом. Стоимость 27 1,8 л аквариума рыбок данио объекта, построенного в данном исследовании составляет примерно $ 1500. Мы считаем, что поддержание первоначального рабочего 150 рыб колонии в течение 3 месяцев составляет $ 1000. Этот проект вовлечены студенты, которые были введены в aquaculturing из рыбок данио для исследования предлагает.
Introduction
В естественных условиях модели имеют важное значение в проведении всеобъемлющего биомедицинских исследований, так как они позволяют в исследовании пробирке для перевода на системы и организменном уровне. Например, исследование с мелких млекопитающих, а именно грызунов, было доказано необходимости в разработке лекарственных средств, и в улучшении доступных препаратов. Тем не менее, сложность (финансовую и материально-) может сделать это практически невозможно построить и поддерживать грызунов возможности для экспериментов предлагает на небольших научно-исследовательских академических институтов. Тем не менее, в естественных условиях исследования могут быть выполнены с использованием других видов животных, которые требуют менее сложной логистики. Данио рерио (Danio rerio), были успешно использованы в качестве модели в естественных условиях для изучения генетики, развития, патофизиологии и фармакологии 1,2,10,11,12. Ресурсы, необходимые для размещения данио для экспериментов относительно просты и значительно дешевле по сравнению с RОден объектов. Ким и др. 3 недавно подробно описаны 80 танка систему данио жилой недвижимости, что может быть построен примерно за $ 1500, которая включает в себя обе части и трудовые затраты. Это находится в резком контрасте с почти $ 8500, которые будут обязаны покупать готовую, система 80 танка из числа коммерческих поставщиков. Тем не менее, описание, данное Ким и др. может быть сложным и трудно следовать для новичков исследования рыбы. Мы считаем, что данио объект может быть построен в упрощенном порядке для инвестиций в размере $ 1500.
Создание объекта в естественных условиях на малых академических институтов обеспечивает свои способности дополнительный инструмент, с помощью которого для получения более мощный и тщательного исследования. Данные в пробирке, поддерживаемые в естественных условиях результаты в целом более полных биомедицинских исследований, чем данными, полученными с использованием только в подходах пробирке. Таким образом,внедрение в естественных условиях научно-исследовательский центр будет существенно улучшить эффективность учреждения в его общих научно-исследовательской деятельности (студент воздействия исследований, публикаций и коммуникаций, достижения внешнего финансирования и т.д.)..
Строительство данио рерио объекта, подобной описанной в данном исследовании, идеально подходит для научно-исследовательских академических учреждений с ограниченными удобствами (или учреждения без в естественных условиях научно-исследовательских учреждений) в течение сжимая Financial Times.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
ПРИМЕЧАНИЕ: Эти протоколы в соответствии с руководящими IACUC пресвитерианской колледжа.
1. Приобретите материалов, перечисленных в таблице 1.
2. Соберите 5 Полка Chrome в соответствии с инструкциями производителя. Эта информация будет использоваться в дом центр.
3. Построить резервуар для воды и системы фильтрации (1А и 2).
- Использование рисунке 1а в качестве руководства, макет 18-галлонов ведро, насос, фильтры и УФ-лампы для определения окончательного места установки и размера.
- После того, как детали изложены, измерить и сократить ¾ "ПВХ труб до длины, необходимой для сборки. Вары длины всех труб в зависимости от конкретных космических потребностей и ограничений.
- Соберите трубы и фитинги, как изложено ранее с использованием праймера и цемента ПВХ, смотрите ниже (3.3.2 и 3.3.3).
- Песок вырезать края трубы с наждачной бумагой, пока они не являются гладкими на ощупь апd нет никакого мусора.
- Председатель пределами трубы и внутри фитинга с приобретенной ПВХ праймера с включенным тампона из ПВХ грунтовки.
- Цемент трубу и фитинг вместе с применением цемента ПВХ к наружной трубе с помощью прилагаемого тампон. Повторите эти действия для всех шагов, которые необходимо цементирования из ПВХ.
- Поместите 18 галлонов ведро с одной стороны конструкции полке.
- Установите разъем перемычки в стороне резервуара.
- Прикрепите ¾ "ПВХ трубы в переборку.
- Подключите другой конец ¾ "трубы к насосу, используя ¾" с резьбой облегчения установки.
- Подключите фильтры для насосу с помощью двух 90 градусов локти и ¾ "ПВХ труб.
- Используйте один бумажный фильтр следует один фильтров с активированным углем для того, чтобы отфильтровать мусор и снижения уровня хлора и химических веществ в воде.
- Подключите УФ-лампы в соответ фильтрынг с инструкциями изготовителя.
- Прикрепите насос и систему фильтров в верхней части первой полке стойки с использованием проводных связей. Измените порядок сборки и монтажа в соответствии с размером и планировкой полка / стойку выбрали.
- Добавить 1 BioBall на литр воды в бак для воды, как только насос и система фильтрации собраны и прикреплены к полке.
4. Построить главной линии (рис 1B и 2).
- Отмерьте и отрежьте кусок ¾ "ПВХ трубы для подключения УФ-лампы к источнику питания
- Используйте ¾ "ПВХ тройник, чтобы начать основную линию подачи путем подключения тройник с ¾" ПВХ выхлопных газов, поступающего из УФ-фильтром. ,
- Добавить на кран в нижней части тройника ПВХ в качестве стока для обслуживания промывки системы.
- Начните основную линию питания от верхней части ¾ "ПВХ тройник путем измерения и резки ¾" ПВХтрубы до нужной длины, чтобы обеспечить подачи трубы для каждого из полок на стеллаже.
- Установите ¾ "ПВХ тройники для горизонтальных линий, которые войдут каждую полку стеллажа.
- При желании (и предложил), добавьте ¾ "включения-выключения клапана для каждой полки линии подачи для обеспечения изоляции каждой полке и модульной конструкции системы.
- Используйте ¾ "ПВХ трубы в редукционного линии на верхней полке. Если эта линия проходит от задней части полки, использовать эту полку для хранения. Конец понижения давления линии в главном выпускном трубопроводе (рис 1б) с ¾ "на кран.
- После того, как эти шаги были завершены, премьер и цементировать трубы ПВХ вместе, как сделано ранее при построении резервуара и система фильтрации.
5. Построить главный выпускной линии (рис 1С и 2).
- Запуск вертикальную длину основной линии выхлопа на другой стороне стойки Fрум главной линии. Используйте 2 "трубы ПВХ для этой вертикальной линии получить основную линию подачи в верхней и дренажных линий от танков рыбы от каждой полке.
- Вырезать куски 2 "трубы ПВХ для основного вертикального выпускного трубопровода, и использовать 2" ПВХ тройники получить аквариум дренажными линиями с каждой полки. Конец основной линии выхлопа в товарной изгнать оборотной воды в течение губкой фильтра.
- Вырезать один дюйм отверстие на всю длину 2 "отрезков труб ПВХ и прикрепить к вертикальной основной линии выхлопа с тройники ПВХ для горизонтальных линий вытекать из аквариумов.
- Крышка "горизонтальные линии слива с 2" 2 ПВХ крышкой.
- Премьер и цемента части, используя необходимые фитинги (соединители, соски или локти).
6. Построить аквариумы (рисунок 3).
- С сверла, вырезать 1 1/8 "отверстие в задней части бака рыбы 1" ниже верхнего края с кольцевой пилы.
- Прикрепите и затяните на 90 градусов 3/4 "с резьбой ПВХ локтем в штырем для создания аквариума выхлопную трубу. Добавить кусочек мелкой сеткой до завинчивания удерживающую гайку, чтобы предотвратить данио, проходящий через систему выпуска отработавших газов.
- Поместите аквариум с его выхлопной трубы окончания в открытое пространство дренажной линии за танками
7. Запуск системы водоснабжения
- В некоторых контейнерах, таких как той, которая используется для резервуара, измерения в три раза больше воды, содержащейся в системе. Пусть эта вода при комнатной температуре для кондиционирования в течение 48 ч.
- Добавить воду в систему и пусть он циркулировать в течение как минимум 3 дней.
- Изменение воды в системе энергично в течение начальных 3 дней циркуляции для того, чтобы избавить систему от загрязнений Тат находятся в трубах.
- Добавить стартера данио и позволяют азотный цикл устроиться. Нормализация рН до постоянной 7. Держите семь данио в 1,8 л, и кормить их два раза в день в течение дней недели и один раз в день в выходные дни как это было предложено LiNbO 4 и МакНабба 6.
- Монитор нитратов (<75 мг / л), нитрит (<10 мг / л), и аммония (0 мг / л) ежедневно в течение первой недели после добавления рыбу, и два раза в неделю После получения желаемого уровня были сохранены с регулярными заменами воды ,
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Строительство насосной системы и Flters
После того, как стойка собраны и создали первый шаг заключается в создании насоса и фильтра системы. Фильтры подключен к системной насоса и расположены выше нижнего уровня первого полке, что позволяет для легкого обслуживания фильтра и замены. Кроме того, УФ-лампа связано с ПВХ трубы к фильтру и удерживается на месте с пластиковыми проволочными стяжками для обеспечения легкой замены УФ-лампы при необходимости (рис 4а). Сразу же после насоса бумажный фильтр, угольный фильтр, и УФ-лампы установлены с помощью ПВХ трубы. Bioballs добавляют в резервуар, чтобы обеспечить поверхность для роста бактерий, который преобразует отходы токсичны аммиака в нитраты. Один BioBall на литр воды в системе достаточно, чтобы площадь бактериальный рост. Крышка пластикового резервуара могут быть установлены таким образом, чтобы в случае переполнения bioballs останется в резервуаре и шансы Загрязнителиции были сведены к минимуму. Даже если событие переполнения весьма маловероятно, система слива (добавление дренажной трубы в верхней части резервуара) является простым дополнением, которые могут быть внесены в систему.
Строительство Главного линии питания
Второй этап заключается в сборке основной линии подачи воды, что будет кормить каждый отсек, который будет содержать данио танков (Рисунок 4б). Эта линия соединена с УФ-лампой с куском трубы ПВХ. Эта линия проходит вертикально и горизонтально в стойку через тройник ПВХ. Нижний конец тройника используется для подключения кусок трубы ПВХ, которая будет служить в качестве дренажного клапана для системы в целом.
Основные направления, которые питаются танки проходят горизонтально четырех отсеков: Начало второй полке, вершина третьей полке, вершина третьей полке, а нижняя часть пятого полка. С верхней части второй, третьей и четвертой строках шельфовых обеспечить водой аквариумы они бегут в midlinе полках. Каждая из этих линий имеют индивидуальные отсекающие клапаны, которые позволяют регулировать отдельные отсеки.
9 порт орошения коллектор присоединен к концу горизонтальных линий, и эти оросители подачи воды в аквариумах с помощью гибкой трубки ¼ "(фиг.4В). Каждый порт орошения многообразии имеет встроенный в на кран. Кроме того, на кран находится в конце трубки, присоединенные к каждому порту, рядом со входом в аквариуме, для легкого доступа и управления потоком воды. Трубка будет вставлен в резервуар через отверстие, просверленное в крышке. Это будет способствовать поддержанию трубку плотно вставлен в резервуар.
Линия, которая проходит от верхней части пятой полке используется как вспомогательный шнур давления и управляется с индивидуальным двухпозиционным клапаном. Рекомендуется, чтобы иметь эту линию запуска на задней пятой полке, так что эта область может быть использована для хранения. С МАИп линия проходит по срединной линии на стороне стойки, он доводится до задней с помощью локоть ПВХ и кусок трубы ПВХ, а затем он работает в продольном направлении (по горизонтали), как питчер давление линии, используя другой локоть ПВХ и кусок ПВХ трубы. Избавления от давления в магистрали заканчивается в основной выпускной трубопровод, который проходит вертикально на другой стороне стойки и заканчивается в резервуар воды (в этом выпускная линия выполнена из 2 "ПВХ трубы, смотри ниже).
Строительство Главного линия выхлопа
На третьем этапе, чтобы собрать систему выпуска, которая проходит в поперечном направлении к стойке, на той стороне, где водоем находится (фиг.4С). Эта система построена с использованием 2 "трубы ПВХ и собирает воду, которая поступает из питчер напорной линии, и от аквариума слива (см строительства аквариума ниже). Основной выхлопных линия проходит вертикально, соединяющий питчер давление линии на верхней части стойки и заканчивая в воду Reservoir. Кроме того, главный линия выхлопа получает Слив воды из аквариумов через горизонтальные трубы 2 "ПВХ, которые подключаются к основной линии выхлопа через тройники ПВХ. Эти горизонтальные дренажные трубы имеют 1 'продольный разрез на получение слить воду из аквариумов (см ниже). Эти горизонтальные дренажные линии работать на спине и на нижних частях полках и имеют незначительную наклон, что позволяет слить воду бежать к главной линии выхлопа под действием силы тяжести. Губка колодки фильтр добавляют в горизонтальных линий слива так, что сливной бак рыб падает на губки и отфильтровывает твердые частицы. Весь собранный система изображена на рисунке 5.
Строительство аквариумы
Представитель аквариума показано на фиг.6. В конце рыбы сливного бака линии помещают в горизонтальную линию сливного (смотри выше разделе, посвященном выпускной трубопровод). Проволочная сетка вставляется в сливной линии в аквариуме, чтобы предотвратитьДанио от плавания из бака. Эти конкретные танки имеют крышки, которые препятствуют рыбу от побега, а также свести к минимуму возможности загрязнения. Если происходит переполнение бака крышки предотвращает рыбы от падения на пол. Емкости с крышками идеально, но если система построена, который содержит баки без крышек, то небольшое отверстие можно просверлить в верхней части бака. Это позволит воде уходить в то время как предотвратить рыбу от побега.
Функционирование
Данио колонии может быть сохранена с помощью имеющихся и установленными протоколами, описанными в других 3- 6. Короче говоря, наше учреждение позволяет насосная система для обеспечения циркуляции системного тома примерно 75 раз в час, регулируя скорость потока для каждого взрослого (или личинок рыб танк) при температуре около 85 мл / мин (или 45 мл / мин в течение личиночной аквариуме) , Качество воды поддерживается активной биологической фильтрации и мелких водных изменений (~ 5% от объема системы) по мере необходимости. Ежедневный мониторингрН, электропроводности, растворенного кислорода (DO) уровнях, и температура необходимо поддерживать условия согласованы. Наборы являются коммерчески доступными для измерения рН и DO уровни. Кондуктометры, также доступны для покупки. Для того чтобы проверить эти переменные в день, удалить 250 мл воды из резервуара и выполнения анализа. Уровень рН следует поддерживать на уровне 7,2, не должно быть меньше, чем 6 мг, и проводимость между 500 мкс и 1300 мкс. (ИСТОЧНИК ЗДЕСЬ) Температура должна поддерживаться на уровне 28,5 ° C. Техническое обслуживание Регулярное система (3 - 4 недель) включает в себя приблизительную замену воды 30% и очистку и замену прокладок фильтров и древесного угля.
Рисунок 1: Три основных компонента данио объекта. А. насосная система и фильтры расположены в нижней части шельфа (в первуюполка) и подключите запаса воды бак с основным линии подачи. B. Основной линией питания происходит от УФ-лампы и поставляет воду в трех верхних полках, которые содержат садки для рыбы. Следует отметить, что каждый отсек полки подается независимо и может быть индивидуальным контролем (включен или выключен) с помощью клапана. Это главное направление также имеет главный выпускной клапан на нижнем конце, а на верхнем конце продолжается как избавления от напорной линии, которая заканчивается в основной выпускной трубопровод. С. Основной выпускная линия получает воду из избавления от давления в трубопроводе и с различными Fish Tank отсеки и заканчивается в запас воды танков. Обратите внимание, что каждой полке есть аквариума выпускной линии, которая ПВХ труб, и в продольном направлении открыт для получения воды для отдельных аквариумах. Эти линии слегка наклонена, чтобы позволить воде течь под действием силы тяжести к основному выхлопной трубе.Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы увидеть увеличенную версию этой цифры.
Рисунок 2:. Три основных компонента данио объекта собранном и легко функциональная Обратите внимание, что запас воды бак уже bioballs. Вода из главной выпускной трубопровод будет падать на губки фильтра размещены на сетке над уровнем воды (для ясности это не показано на чертеже). Обратите внимание, что для ясности на второй полке есть только некоторые аквариумы изображено, ирригатор показано только 4 трубок подачи и бак выхлопных линии рыба является прозрачным. Каждый полка стеллажа может содержать девять 1 L аквариумы и имеют 9 порта ирригатор.
Рисунок 3:. Рыба танковое подразделение аквариум приобретается в обычном магазине для домашних животных и имеет 2 л Емкость A. аквариум дренажной системы строится путем бурения 1 1/8 "отверстие в задней части. танк, а затем 3/4 "ПВХ труб фигуры помещены в виде перевернутой буквы« L »форме, используя 3/4" ПВХ локоть. Это слива системы попадут в открытой части аквариума выхлопных линий, расположенных в задней части аквариумах. B. Изображения, изображающие установку сетки в систему слива аквариума. Сетка предотвращает данио от иссушения на выхлопных системах.
Рисунок 4: строительство Отдельные детали. А. три фильтра и насоса системы на нижней стойке системы. Насос подключается к трем Mechanские фильтры с последующим УФ-фильтром для устранения загрязнений из воды в системе. B. горизонтальная линия питания заканчивается в 9 портов орошения коллектор, который будет поставлять пресную воду и кислород каждом баке. Питающий трубопровод для каждой полки имеет двухпозиционный клапан, который может использоваться, чтобы остановить воду с каждой полки для очистки и карантина целей. С. Рыба выхлопных бак линии впадает в главном выпускном трубопроводе, чтобы повторно кровообращение. Линия сброса давления и впадает в главном выпускном трубопроводе.
Рисунок 5:. Завершенная система завершенная система содержит насос и фильтры системы, основной вертикальную линию питания, горизонтальную линию питания для каждого полка, выхлопной бак линию, линию сброса давления и главный выпускной линии для замкнутую систему циркуляции ,
Рисунок 6:. Представитель аквариума аквариум содержит слива линия, которая соединит с горизонтальными линиями дренирования в системе.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Основная цель этой статьи заключается в демонстрации того, что строительство функционального данио объекта не представляется сложным и может быть построена начинающих рыбы исследователей с минимальными знаниями строительства. Кроме того, эта статья показывает, что материалы для этого функционального данио объекта могут быть приобретены легко и доступно из местных зоомагазинах питания или хозяйственных магазинах. После того, как все материалы и инструменты были приобретены строительство системы и аквариумы занимает около одного рабочего дня. 72 ч первом запуске позволяет любому сбой в системе, например, утечки или низкого давления воды, которые будут определены. Это первый запуск также позволяет загрязняющие вещества в системе должны быть удалены из обращения. Например, ПВХ клей может содержать опасные органического материала, который будет удален в течение первых нескольких часов после обращения. Система имеет основную сливной клапан, который позволяет и облегчает регулировку громкости и воды для замены ухода за кон к цели. Кроме того, система имеет питчер напорный трубопровод, что также облегчает регулировку давления воды. Эта линия является полезным, когда только один или два отсека (полки) будет использоваться, поскольку она позволяет регулировать давление воды.
Объект имеет модульную конструкцию, позволяющую по утилизации 1, 2 или 3 отделения (36 аквариумы 1.8 л) для удовлетворения потребностей в создании потенциала отдельных исследователей. ВКЛ-ВЫКЛ клапаны, размещенные в каждом отсеке способствовать изоляции различных частей системы. Эта система клапан также полезно, чтобы избежать возможных распространения инфекции, а также для облегчения очистки системы отсеками. Кроме того, каждый расходный бак воды рыба имеет два клапана, один на 9 портов ирригатор и один на гибких труб на входе в аквариуме. Эта система двойной клапан для точной настройки давления воды, а также облегчить процедуру очистки или добыча рыбы или манипуляции.
т "> надлежащая документация аммиака, нитритов и нитратов имеет важное значение для нормального функционирования объекта. Для этого, bioballs важны, так как они обеспечивают достаточную поверхность для нитрифицирующих бактерий для роста. После того, как колония рыба является стабильной, объект может легко модифицирован для использования большего или меньшего аквариумы. Кроме того, объект может быть изменен, чтобы разводить данио следующие протоколы, доступные в литературе 5. Кроме того, объект может быть изменен, чтобы добавить другие модули или стеллажи для расширения возможностей системы ,Поток пресной воды в бак обеспечивает достаточно свежий кислород, так что нет необходимости добавлять дополнительный оксигенатор. Воздухообмен, что происходит в водохранилище является достаточным источником кислорода. Если большие баки используются затем может быть добавлен дополнительный источник кислорода. Следует также отметить, что без притока свежей воды в резервуар рыба задохнется, поэтому очень важно, что поток воды бе внимательно следить, чтобы убедиться, что ничего не блокируя линии воды. Очень важно, чтобы температура воды будет поддерживаться на 28,5 ° С. Постоянная температура может быть достигнута при поддержании температуры в помещении, в котором система размещена в 28,5 ° C. С другой стороны, источник нагрева аквариума могут быть приобретены для того, чтобы поддерживать постоянную температуру. Поддержание качества воды имеет важное значение для последовательных экспериментальных результатов. Есть много источников, которые помогут определить точные параметры качества воды на основе экспериментальных условиях.
Аквариумы производится каждые 7 - 10 дней, а затем опрыскивают 70% -ным спиртом перед повторным использованием. Он также предположил, что хром стойку быть очищены и высушены в этой точке, чтобы предотвратить ржавчину и наращивать. Если наблюдаются признаки заражения, отдельные танки дезинфицируют 2% -ным раствором хлорной извести 8. Общее состояние здоровья контролируется с особым вниманием к признаков инфекции (отек, кожные язвы, exolpthalmia, цвет выключен, и т.д..), Газ болезнь пузырь (из-за перенасыщенных концентрациях газа, быстрые изменения в температуре воды, проблемы в гидравлической системе), жаберных гиперплазии (высокий уровень аммиака, меди, цинка или активного хористка в воде) , сколиоз (вследствие дефицита витамина С) или яичного связано воспаления и fibroplasias (из-за женского удержания яиц, что выталкивает брюшной стенки).
Строительство этого объекта является гибкой и позволяет уменьшить или расширенной системы. Принимая основные строительные идеи, эта возможность может быть организована в соответствии базовых потребностей исследования различных размеров. Поскольку строительство может варьироваться в зависимости от учреждения, наиболее важным шагом в Киотском протоколе, 72 ч первом запуске, а ежедневный мониторинг аммония, нитрат и уровни нитрита в течение первой недели строительства. Отличное качество воды с целью поддержания здоровья рыбы. Многие из нынешних протоколов доступны по доступной рыбы противовирусныем требуют под открытым небом потока воды 3. Имея защищен от открытом воздухе воды минимизирует шанс для загрязнения и испарения воды. Обслуживание на закрытой системы является минимальным по сравнению с общим систем под открытым небом.
Если проблемы возникают при построении объекта (утечки, низкого давления воды, и др.), Можно заменить цементируемой трубу, просто срезая проблемную область в объекте и замена детали в одной и той же поэтапно, как указано выше , Эта система может быть уязвима к большой потере воды из-за небольших утечек, которые могут стать опасными для рыбы, если остались незамеченными. Для минимальными инвестициями поплавок запорный элемент будет определять, когда уровень воды упадет ниже безопасного порога и выключать систему. Это может быть необходимо, если рядом мониторинг системы не доступна. При правильной модификации, есть очень мало ограничений эта система сталкивается кроме отсутствия мобильности. После того, как эта система построенияЭД очень трудно передвигаться без резки некоторые части и recementing их на новом месте. Это ограничение подвижности означает, что система будет идеально, их необходимо поддерживать в одной рабочей области. Если подвижность желании есть небольшие модификации, которые могут быть сделаны, чтобы повысить гибкость. Добавить объединение в начале каждого предложения, боковой линии сброса давления, разряда насоса, и над сливным клапаном. Линии для слива может быть сухой устанавливается вместо укрепил на месте. Добавление эластичную муфту к насосной секции также поможет в мобильности. Это дополнительное
Простая конструкция и обслуживание этой системы означает, что настоящие протоколы, найденные в литературе имеются малых научно-исследовательских институтов 1,2,10-12. Обслуживание просто делает это идеальная система для студентов в аспирантуру. Эта система отлично подходит для независимых научно-исследовательских и учебных лабораторий, а также.
В заключение, этот типобъект является доступным, легко построить, и функционал для экспериментов в естественных условиях. Этот объект идеально подходит для организаций с ограниченными ресурсами и ограниченным пространством животноводства. Данио рерио исследования области, которая используется для нескольких видов исследований, в том числе фармакологии, физиологии, развития или даже генетических исследований. В самом деле, большое количество доступных мутанта или трансгенных данио поддерживает инновационные направления исследований практически во всех областях биомедицины. Кроме того, эта система может быть использована для повышения исследовательских возможностей и класс опытом для науки специальностей при малых преимущественно студентов учреждений и вдохновить новое поколение биомедицинских ученых.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы заявляют никакого конфликта интересов в рамках данной статьи.
Acknowledgments
Авторы хотели бы поблагодарить Управление исследований пресвитерианской Колледжа фармации для финансовой поддержки этого проекта через небольшой аптечных наград за исследования и сотрудничество (SPARC) премии. Авторы выражают благодарность г-н Джон Smink, менеджер исследовательской лаборатории водных животных, Клемсон университет, Клемсон, SC за его технической рукописи помощь пересмотра.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Item | Brand | Quantity | |
| 74-in H x 48-in W x 18-in D 5-shelf Steel Freestanding Shelving Unit | Style Selections | 1 | |
| 18-Gallon General Bucket/Tote | Centrex Plastics: LLC Rugged Tote | 1 | |
| 6-Outlet Power Strip With 15-Ft. Cord | Master Electrician | 1 | |
| 9-Watt UV Water Garden Clarifier FiIter and UV lamp | Smartpond | 1 | |
| Whole House Water Replacement Filter | Whirlpool | 6 | |
| Opaque Whole-House Pre-Filtration Housing | Whirlpool | 2 | |
| Thread Seal Tape | William H Harvey | 1 | |
| 8-fl oz LO-VOC PVC Cement | Oatey | 1 | |
| 8-fl oz LO-VOC Primer | Oatey | 1 | |
| 1/4-in x 100-ft Vinyl Drip Irrigation Distribution Tubing | Mister Landscaper | 1 | |
| 1/4-in Barbed Drip Irrigation On/Off Valve | Mister Landscaper | 33 | |
| 9-Port NPT Irrigation Manifold with Filter | Mister Landscaper | 6 | |
| Drop-In Filter with House | Whirlpool | 6 | |
| 2-in Dia 90-Degree PVC Elbow | LASCO | 3 | |
| 2-in Dia 90-Degree Tee | LASCO | 3 | |
| 3/4-in Dia 90-Degree Slip Elbow | LASCO | 15 | |
| 3/4-in Dia PVC Adapter | LASCO | 7 | |
| 3/4-in Dia PVC Tee | LASCO | 12 | |
| 2-in Dia PVC Cap | LASCO | 3 | |
| 1-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter | LASCO | 2 | |
| 3/4-in PVC Socket In-Line Ball Valve | American Valve | 5 | |
| 1/2-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter | Lasco | 8 | |
| 3/4-in Dia PVC Cap | Lasco | 1 | |
| 2-In x 5-Ft Pvc Pipe | Charlotte Pipe | 4 | |
| ¾-In x 10-Ft Pvc pipe | Charlotte Pipe | 3 | |
| 11/16x1-7/80 PVC ring | SXT | 10 | |
| ½” PVC male adapter | SXT | 1 | |
| ¾” PVC coupling | SXT | 1 | |
| ½” PVC female adapter | SXT | 1 | |
| link | |||
| 1.8 L Dual Beta Keeper | Top Fin | 27 | |
| ¾” PVC male adapter (w/ #18 O-ring) | SXT | 28 | |
| 90-degree ¾” threaded PVC elbow | SXT | 27 | |
| Fine Mesh | N/A | 1 yard | |
| Bulkhead Connector | N/A | 1 | |
| Hacksaw | N/A | 1 | |
| Drill | N/A | 1 | |
| Hole saw | N/A | 1 | |
| Adjustable Wrench | N/A | 1 | |
| Pliers | N/A | 1 | |
| Tape Measure | N/A | 1 | |
| Safety Glasses | N/A | 1 | |
| Work Gloves | N/A | 1 |
References
- Detrich, H., Westerfield, M., Zon, L. The Zebrafish: Cellular and Developmental Biology, Part A.. , 3rd ed, Academic Press. New York, New York. (2010).
- Grim, J. M., et al. Hemogen (hemgn), a transcription factor that regulates erythropoiesis and skeletogenesis in zebrafish. Strategic Conference of Zebrafish Investigators Poster Presentation, 2013, Asilimar, CA, , (2013).
- Kim, S., Carlson, R., Zafreen, L., Rajpurohit, S. K., Jagadeeswaran, P.
- Linbo, T. L. Zebrafish (Danio rerio) husbandry and colony maintenance at the Northwest Fisheries Science Center. U.S. Dept. Commer., NOAA Tech. Memo. 62, (2009).
- Avdesh, A., et al. Regular care and maintenance of a zebrafish (Danio rerio) laboratory: an introduction. J Vis Exp. 69, 4196 (2012).
- McNabb, A., Scott, K., Ochsenstein, E., Seufert, K., Carl, M. Don't be afraid to set up your fish facility. Zebrafish. 9 (3), 120-125 (2012).
- Garcia, R. L., Sanders, G. E. Efficacy of cleaning and disinfection procedures in a zebrafish rerio) facility. J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (6), 895-900 (2011).
- Rivas-Boyero, A. A., et al. Pharmacological characterization of a nociceptin receptor from zebrafish (Danio rerio). J Mol Endocrinol. 46 (2), 111-123 (2011).
- Sanchez-Simon, F. M., Zhang, X. X., Loh, H. H., Law, P. Y., Rodriguez, R. E. Morphine regulates dopaminergic neuron differentiation via miR-133b. Mol Pharmacol. 78 (5), 935-942 (2010).
- Velasco, E. M., Law, P. Y., Rodríguez, R. E. Mu opioid from the zebrafish exhibits functional characteristics as those of mammalian mu opioid receptor. Zebrafish. 6 (3), 259-268 (2009).
