Summary
Protocol
果蝇卵巢清扫的议定书
- 饲料苍蝇与酵母1-2天前,解剖他们催肥卵巢。
- 麻醉苍蝇使用二氧化碳流。
- 使用镊子,选择雌蝇。
- 淹没到1X PBS雌蝇。
- 抓斗的镊子在其较低的胸部的飞行。
- 拖轮在小腹与另一个镊子轻轻接触,直到在腹部的内脏器官。
- 寻找一双卵巢和其他器官(如肠子)脱离。
- 梳理除了卵巢管(如果卵巢被用于免疫或原位杂交)。
- 保持在冰冷的1X PBS卵巢在解剖未来飞。
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Discussion
在这里,我们展示了一个在果蝇卵巢解剖的方法。作为培养不同类型的细胞在果蝇卵巢中存在的方法尚未确定,这是一个快速的方法来获得果蝇卵巢组织。从本质上讲,我们表明,解剖果蝇卵巢涉及一个简单的两或三个步骤的过程。这些解剖卵巢的后续治疗,取决于将要执行的下游实验。
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Materials
Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
Forceps | Tool | Sigma-Aldrich | T43537 | |
Glass dissecting dish | Tool | Pyrex | 7220-85 |
References
- Costa, A., et al. The Drosophila fragile X protein functions as a negative regulator in the orb autoregulatory pathway. Dev Cell. 8, 331-342 (2005).
- Tan, L., et al. An autoregulatory feedback loop directs the localized expression of the Drosophila CPEB protein Orb in the developing oocyte. Development. 128, 1159-1169 (2001).