Summary
Protocol
Protocolo para Drosophila dissecção dos ovários
- Alimentar moscas com fermento 1-2 dias antes dissecá-los para engordar os ovários.
- Anestesiar voa usando fluxo de dióxido de carbono.
- Usando um par de pinças, selecione uma mosca fêmea.
- Submergir voar a fêmea em 1X PBS.
- Agarre a voar em sua menor tórax com um par de pinças.
- Puxe gentilmente a parte inferior do abdome com outro par de pinças, até os órgãos internos no abdome estão expostos.
- Olhe para o par de ovários e retirá-la de outros órgãos (por exemplo, os intestinos).
- Separar os ovaríolos (se os ovários estão a ser utilizado para a imunocoloração ou hibridização in situ).
- Mantenha ovários nas gelada 1X PBS enquanto dissecar a mosca que vem.
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Discussion
Aqui demonstramos um método de dissecação ovários em Drosophila. Como o método de cultivo a diferentes tipos de células que existem no ovário Drosophila foi ainda definido, este é um método rápido para obter o tecido ovariano Drosophila. Essencialmente, nós mostramos que dissecar Drosophila ovários envolve um simples procedimento de dois ou três etapas. Tratamento posterior dos ovários dissecados dependem os experimentos a jusante, que será realizada.
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Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Forceps | Tool | Sigma-Aldrich | T43537 | |
| Glass dissecting dish | Tool | Pyrex | 7220-85 |
References
- Costa, A., et al. The Drosophila fragile X protein functions as a negative regulator in the orb autoregulatory pathway. Dev Cell. 8, 331-342 (2005).
- Tan, L., et al. An autoregulatory feedback loop directs the localized expression of the Drosophila CPEB protein Orb in the developing oocyte. Development. 128, 1159-1169 (2001).
