Summary
Protocol
Protocollo per la dissezione dell'ovaio Drosophila
- Alimentazione vola con lievito 1-2 giorni prima del loro dissezione per ingrassare le ovaie.
- Anestetizzare vola utilizzando flusso di anidride carbonica.
- Utilizzando un paio di pinzette, selezionare una mosca femmina.
- Immergere al volo femminile in PBS 1X.
- Prendete al volo al suo torace inferiore con un paio di pinzette.
- Tug dolcemente al basso ventre con un altro paio di pinzette fino a quando gli organi interni dell'addome sono esposti.
- Cercare la coppia di ovaie e staccarlo da altri organi (ad esempio l'intestino).
- A parte i stuzzicare ovarioles (se ovaie sono da utilizzare per immunocolorazione o ibridazione in situ).
- Mantenere le ovaie in gelide PBS 1X mentre dissezione al volo successivo.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Qui mostriamo un metodo di dissezione ovaie in Drosophila. Come metodo di coltura del diversi tipi di cellule presenti nelle ovaie Drosophila è stato ancora definito, questo è un metodo rapido per ottenere il tessuto ovarico Drosophila. In sostanza, abbiamo dimostrato che la dissezione Drosophila ovaie comporta una semplice a due o tre fasi. Il successivo trattamento di questi ovaie sezionato dipendono gli esperimenti a valle che verrà eseguita.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Forceps | Tool | Sigma-Aldrich | T43537 | |
| Glass dissecting dish | Tool | Pyrex | 7220-85 |
References
- Costa, A., et al. The Drosophila fragile X protein functions as a negative regulator in the orb autoregulatory pathway. Dev Cell. 8, 331-342 (2005).
- Tan, L., et al. An autoregulatory feedback loop directs the localized expression of the Drosophila CPEB protein Orb in the developing oocyte. Development. 128, 1159-1169 (2001).
