Summary
이 프로토콜은 쥐의 경동맥에 관내 부상의 원인이 이제부터는 신생 내막의 증식을 유도하는 풍선 카테터를 사용합니다. 이 부상에 대한 응답으로 혈관 재 형성의 메커니즘을 연구하는 잘 확립 된 모델입니다. 또한 널리 잠재적 인 치료 방법의 유효성을 결정하는데 사용된다.
Abstract
쥐의 경동맥 풍선 손상 모델이 아니라 20 년 이상 설립되었습니다. 이는 혈관 평활근 탈분화, 신생 혈관 내막 형성 및 혈관 재 형성에 관여하는 분자 세포 메커니즘을 연구하는 중요한 방법 남아있다. 수컷 스프 라그 - 돌리 래트 모델에 대한 가장 자주 사용되는 동물이다. 여성 호르몬은 혈관 질환에 대한 보호하고, 따라서이 절차에 변화를 소개로 여성 쥐 바람직하지 않다. 좌측 경동맥은 전형적 우측 경동맥은 음성 대조군으로서의으로 부상된다. 왼쪽 경동맥 손상은 내피 세포를 denudes과의에게 혈관 벽을 넓히다 팽창 된 풍선에 의해 발생합니다. 손상 후, 이러한 화합물 및 약학 적 유전자 또는 shRNA를 전송 중의 사용과 같은 잠재적 인 치료 전략을 평가할 수있다. 일반적으로 유전자 또는 shRNA를 전송, 혈관 내강의 손상된 부분은 로컬 V를 30 분 동안 형질 도입한다손상된 혈관 벽에 전달 및 발현 단백질 또는 shRNA를 하나를 인코딩 iral 입자. 증식 성 혈관 평활근 세포를 나타내는 신생 내막 비후 보통 손상 후 이주에서 봉우리. 용기는 주로 세포 및 분자 세포 신호 전달 경로의 분석뿐만 아니라 유전자 및 단백질 발현이 시점에서 수확. 용기는 또한 의도 된 실험 목적에 따라, 특정 단백질 또는 경로의 발현 및 / 또는 활성의 개시를 결정하기 위해 이전의 시점에서 수확 될 수있다. 혈관 조직 학적 염색, 면역 단백질 / mRNA의 분석, 및 활성 분석을 사용하는 것을 특징으로하고 평가할 수있다. 같은 동물에서 그대로 오른쪽 경동맥 이상적인 내부 통제이다. 분자 세포 매개 부상 유발 변화는 내부 우측 제어 동맥 동맥 부상을 비교함으로써 평가 될 수있다. 마찬가지로, 치료 양식은이 다칠를 비교함으로써 평가할 수있다컨트롤에 D 및 치료 동맥은 동맥 부상.
Introduction
풍선 카테터는 혈관에서의 혈전이나 죽종 막혀 사이트 (들)를 확대 할 목적으로, 혈관 성형술 절차에서 사용하는 의료 장치이다. 좁아진 혈관 내강이 팽창 된 풍선에 의해 강제로 개방되고, 혈액 공급은 협심증, 심근 경색, 다리 통증 등의 다운 스트림 허혈 증상을 완화하기 위해 순차적으로 복원 할 것입니다. 그럼에도 불구하고, 혈관 성형술의 큰 성공은 혈관 내강 (재 협착) 1의 재 협착 혈관 압력 손상 (풍선 부상), 즉 혈관 벽 리모델링을 일으키는 힘의 결과로 많은 경우에 수술 후 합병증으로 감소하고있다.
동물 모델의 수는 연구자가 풍선 부상 관련 혈관 벽 리모델링 (2) 기본 메커니즘을 이해하는 데 도움 혈관 성형술 절차를 흉내 개발되었다. 모델링에 이용 모든 동물 종 중에서, 래트는 가장 자주 사용되는 하나이다. C토끼, 개, 돼지에 ompared, 쥐의 장점은 낮은 비용, 사용의 상대적 용이성과 쥐의 생리의 현재 지식입니다. 마우스는 유전자 조작 된 균주의 넓은 범위에서 추가적인 장점을 가지고 있지만, 쥐 용기를 풍선 카테터를 삽입하기에는 너무 작다. 지난 3 년 동안 실험 쥐 연구자들은 3-6 리모델링 신생 내막 형성과 혈관의 토대 분자 및 세포 메커니즘을보다 잘 이해할 수있게되었다. 풍선 부상을 넘어, 혈관 재는 또한 죽상 동맥 경화증 7, 8, 고혈압 9 및 동맥류 (10) 등 대부분의 주요 혈관 질환에 참여하고 있습니다. 따라서, 지식 풍선 손상 모델을 통해 얻은 일반적으로 전체 혈관 벽 질환 연구에 도움이됩니다.
쥐 벌룬 손상 모델의 전체적인 목적은 단지 혈관 질환을 더욱 이해하기 위해뿐만 아니라, 신규 한 제제의 효능을 테스트하는 것이다질병 관리 (11, 12). 재 협착에 현재 임상 약물 치료 바로 혈관 성형술 후 혈관 내강을 통해 배치 약물 방출 스텐트에 의해 적용됩니다. 동물 모델에서 새 에이전트 시험을위한 효율적인 아직 더 경제적 인 방법은 잘 발달 된 지역 관내 관류 방법이다. 이 방법을 통해 테스트 한 후보 에이전트는 작은 분자 약물 복용 13, 14, 사이토 카인을 포함하거나 성장, 15, 16 인자 유전자 조작 에이전트 (의 cDNA 클론의 siRNA 등) 17 ~ 20, 및 새로운 의약품 제제 (21, 22).
지금까지 쥐 벌룬 손상 모델 혈관 질환 / 질병을 연구하는데 가장 유용한 모델의 하나로 남아있다. 이 첫 번째 단계는 생체 내에서 시험 관내에서 이동하는 일반적으로, 베드 사이드에서 벤치에 기초 단계이지만 마지막이어야한다. 쥐 실험의 결과는 더욱 심의 인간 번역 전에 특성화 될 필요때문에 혈관 침대와 혈관 해부학뿐만 아니라 인간과 쥐의 23 ~ 26 사이의 고유 종의 차이의 차이에 임상 적으로 사용. 그럼에도 불구하고, 여전히 병진 의학 연구에 필수적인 도구이다. 이러한 연구는 유전자 변형 된 쥐의 부족에 의해 제한하기 위해 사용하는 한편 징크 핑거로서 신규 게놈 접근법 29 녹아웃 생쥐는 쉽게 액세스 가능하게 한 27 클레아 TALENs 28 CRISPR-캐스 때문에 더 이상 문제가 없었다.
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Protocol
참고 : 다음과 같은 실험 동물의 사용을 검토하고 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)에 의해 승인되었다.
1. 수술 전 절차
- 사용하기 전에 수술 도구를 소독.
- 모든 수술기구를 수술 전 24 시간 이하 압력솥. 여러 수술 당일이 수행되는 경우, 수술 사이에서 건조 비드 멸균기로 멸균 악기.
- 필터 사용 전에 멸균 식염수.
- 쥐를 달아 마취제 (케타민 80 ㎎ / kg과 자일 라진 (xylazine) 7 ㎎ / ㎏)의 용량을 계산한다.
- 내 복강 (IP) 마취제를 관리.
- 5 ~ 10 분에 발가락 핀치에 의한 진정 작용의 적합성을 확인합니다. 진정 작용이 완료되지 않은 경우 약물 (케타민 7 ㎎ / kg과 자일 라진 (xylazine) 0.6 ㎎ / ㎏)의 추가 작은 복용량을 관리합니다.
- 확인 바늘이 배달 약물 내 당에 충분한 깊이itoneally 복강에 전체 약물 솔루션을 제공하는 실패는 부적절한 진정 발생할 수 있기 때문이다.
주 : 주사 부위 피부 궤양과 탈모 인한 부주의 피하 (SC) 약액 주입 수술 후 수일 가시적 일 것이다.
- 3 ml의 멸균 생리 식염수를 피하 (SC)를 주입한다. 멸균 면봉을 사용하여 건조되는 것을 방지하기 위해 각막을 양쪽 눈에 안연고 소량의 적용.
- 난방 기기를 준비합니다. 전자 레인지 또는 물을 욕조에 의해 사전 온열 패드.
- 수술 플랫폼 드러 동물을 넣습니다.
- 복부 목 지역에서 머리를 제거합니다. , 면봉으로 머리 제거제를 적용 30 초 정도 기다린 후 거즈로 완전히 닦아.
- 포비돈 요오드 스크럽 70 % 에탄올 목 면봉.
- 가운, 헤어 커버, 수술 마스크, 안경을 포함한 개인 보호 장비를 착용 할 것. 아이돌 착용무균 수술 장비 및 소모품을 취급하기 전에 끝에 수술 장갑을 ILE.
- 노출 만 목 영역과 멸균 수술 시트와 쥐 드레이프.
2. 외과 적 치료
- 수술하는 동안 15 분마다 발가락 핀치에 의해 동물의 진정 깊이를 확인합니다. 동물 발가락 핀치에 응답하는 경우, 케타민과 자일 라진의 추가 작은 용량 (초기 용량의 10 %)를 추가합니다.
- 왼쪽 경동맥을 해부 (CCA)
- 목의 중앙에 직선 세로 절개를 만들기 위해 메스를 사용합니다. 피부 절개의 길이는 대략 동맥 1.5-2 cm의 부분을 분리 할 목적으로, 1.5 cm이다. 다를 수 있습니다 길이는 연구의 목적에 따라 달라집니다.
- 무디게 피부 결합 조직의 해부. 집게 팁을 유지하고 피부 또는 하부 조직에 구멍을하지 않도록하십시오.
- 길이 방향 아론 근육 층을 해부하다g 기관의 왼쪽.
- 근육 층을 열 때, 밀착 미주 신경과 왼쪽 CCA를 시각화. 극단주의와 왼쪽 경동맥이 최소한의 스트레칭으로 미주 신경을 분리와 함께 퉁명스럽게 해부.
- 분기까지 원심 CCA를 해부하다. 내 경동맥 (ICA) 및 외부 경동맥 (ECA) - 조심스럽게 분기 두 가지를 해부하다.
- 동맥 1.5-2 cm 정도의 부분이 주변 조직으로부터 분리 될 때까지, CCA 주위 해부 유지.
- 풍선 부상
- 영구적으로 약 5mm 떨어진 분기점에서 ECA에 합자을합니다. 영구적으로 ECA와 ICA의 분기점에 가까운 ECA의 후두 분기를 결찰. 또한 영구적으로 분기 및 ECA 합자 사이에 위치, 다른 지점을 결찰있는 경우 - 예를 들어, 우수한 갑상선 분기를. 모든 합자에 사용되는 봉합사는 4-0 검은 색실크. CCA의 기단부 및 ICA의 선단부에 클립.
참고 : 자, 혈액의 흐름이 정지 된 영구적으로 결찰을 통해 (ECA)에 또는 일시적으로 (CCA와 ICA에) 클리핑을 통해. 분기 지역에서 내강 내용은 전신 순환에서 고립되었다. - 작은 마이크로 가위로 ECA에서 arteriotomy의 절개를합니다. 절개 말단 봉합 매듭 가까이 있는지 확인합니다. 식염수 면봉으로 닦아 혈액.
- ECA 루멘으로 불지 2 층 풍선 카테터를 삽입합니다. CCA 루멘에 근위 풍선 카테터를 전진. 클립이 유지 곳의 끝이 도달 할 때까지 근위 카테터를 전진하십시오.
- 3 방향 꼭지에 여성 루어 잠금으로 풍선 팽창 장치를 연결하고 풍선 카테터에 3 방향 스톱 콕의 남성 루어 잠금 장치를 연결합니다.
- 천천히 직경의 1.5 배에 경동맥 넓히다하기 위해, 약 1.5 기압의 압력으로 풍선을 팽창. 부드럽게 회전 다시 분기에 풍선을 잡아 당깁니다.
- 풍선을 수축하고 기단부에 다시 진행합니다. 다시 팽창하고 당김 절차를 두 번 더 반복한다.
- 동맥 내강에서 풍선 카테터를 철회.
- 영구적으로 약 5mm 떨어진 분기점에서 ECA에 합자을합니다. 영구적으로 ECA와 ICA의 분기점에 가까운 ECA의 후두 분기를 결찰. 또한 영구적으로 분기 및 ECA 합자 사이에 위치, 다른 지점을 결찰있는 경우 - 예를 들어, 우수한 갑상선 분기를. 모든 합자에 사용되는 봉합사는 4-0 검은 색실크. CCA의 기단부 및 ICA의 선단부에 클립.
- 시약의 관내 관리 (예를 들어, siRNA를, 마약)
주 : 여기에서, 사용 된 시약은 하나의 shRNA 기질 상호 작용은 분자 1 (STIM1) 또는 비 - 타겟팅 shRNA를 제어 대상으로 인코딩 렌티 바이러스 입자를 함유하는 용액이었다. STIM1이 세포막 칼슘 이온 채널의 활성화를 제어 ER 칼슘 센서이며 이동성 증식 표현형 12,30-33으로 혈관 평활근 탈분화 동안 조절 달려 단일 경막 소포체 (ER) 단백질이다.- 주사기 (24 G, 1.6 cm)에 혈관 이상 - 더 - 니들 카테터를 연결합니다. 테스트 reag 기음 30 μL의 용액을엔트. ECA의 같은 절개에 카테터를 삽입합니다.
- CCA에 카테터 팁을 발전 카테터를 수정하고 일시적으로 절개를 닫습니다 ECA에 하나의 매듭 봉합의 조각을 묶어.
- CCA의 루멘 내로 테스트 시약 용액을 주입한다. 30 분 동안 혈관의 루멘 유지 용액. 식염수로 습기 노출 된 조직을 유지하고 젖은 거즈로 덮어.
- 배양 후, 남은 용액을 대기음. 그 하나의 매듭을 풀고 카테터를 철회.
- arteriotomy 절개에 근접하게 봉합의 조각으로 ECA 넥타이. 분기에 가능한 한 가깝게 매듭을 확인합니다.
- 상처를 닫습니다.
- 풍선 부상과 카테터 도입 혈관의 누출 또는 구멍을 일으킬 수 있기 때문에, ICA의 클립을 제거하고 누출이 있는지 확인합니다. 출혈이 관찰되는 경우, 거즈를 적용하고 출혈을 멈추게하기 위해 부드러운 압력을 적용합니다.
- 제거CCA의 다른 클립.
- 출혈의 흔적이 없는지 확인하고 모든 클램프 및 기타 수술 도구를 제거합니다. 초과 봉합을 잘라.
- 닫기 상처 사용하여 피부 봉합 (4-0 블랙 실크). Povidon - 요오드 또는 다른 항 패혈증 / 살균제 / virucide 에이전트 폐쇄 상처의 모든 측면에 면봉. 멸균 식염수 (SC)의 3 ㎖를 주입
3. 수술 후 절차
- 수술 후 열 패드에 쥐를 유지합니다. 쥐에 근육 주사 (IM)를 통해 0.05 ㎎ / ㎏ 부 프레 노르 핀 중 하나 복용량을 관리합니다. 복구 절차 동안 촉촉한 동물의 눈과 입을 유지합니다. 이 깨어 보행이 될 때까지 동물을 모니터링합니다.
- 완전히 복구 될 때까지 모든 침구없이 깨끗한 케이지에서 동물을 놓습니다. 복구 후, 동물은 동물의 방으로 돌아 개별적으로 보관됩니다.
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Representative Results
두 주 부상 후, 경동맥은 수확 단면 및 형태 학적 분석을 실시한다. 동맥이 교차 절단 및 H & E 염색있다 (그림 1, 2B, C 3). 쥐 경동맥 벽 분홍색 선으로 표시 탄성 얇은 판의 4 개의 레이어가 포함되어 있습니다. 라미 최 외부 탄성 박판 (EEL)과 최 박판 사이의 영역은, 내부 탄성 박판 (IEL)이 미디어 평활근 층 (도 1)이다. IEL 내부 영역 내막 그대로, 혈관 내피 세포의 단층이고; 부상당한 선박 또는 신생 내막의 증식. 부상 경동맥에서, 미디어는 평활근 세포의 증식에 의한 제어 배보다 두껍다. 신생 내막의 두께는 동일한 동맥 매체의 두께보다 비슷하거나 더 크다. 외막은 강력한 콜라겐 증착 (도 1b, D)으로 두껍게된다. REA 처리 용 동맥겐트 신생 혈관 내막 형성을 억제하는 능력에 대해 시험 (이 경우, shRNA를 STIM1), 단면의 신생 내막 면적을 작게 제어 부상 동맥 (도 2)와 비교된다. STIM1 발현 수준이 크게 부상 제어 용기에 비하여 부상 혈관 신생 내막 및 미디어 감소와 같은 shRNA를 녹다운 STIM1의 유효성이 분명했다.
토론 섹션에서 언급 한 바와 같이, 외과 의사들은 풍선을-팽창을 통해 과도하게 배를 손상에주의하지해야합니다. 이것은 혈관 벽이도 3에 도시 된 바와 같이, 동맥 내강과의 외면에 모두 혈액 누출 및 강력한 혈전 형성의 원인이되는, 파열 될 것이다.
그림 1 : 쥐의 경동맥 단면은 헤 마톡 실린 염색 정상 쥐의 경동맥의 및 에오신 (H & E). (A) 부상 (왼쪽) CCA의 정상 / 손상 (오른쪽) CCA. (B) 형태학의 형태, 신생 내막 형성과 외막 / 미디어 비후을 표시합니다. (C) 구조 동맥 벽. 내막은 내부 탄성 박판 (IEL)에서 내피 세포의 단일 층이다. 미디어 평활근 세포 및 IEL와 외부 탄성 얇은 판 (EEL) 사이의 탄성 조직이다. 외막은 외층이다. (D) 쥐 경동맥 벽 강력한 부상 후 육화 이주. 평활근 세포의 증식과 이주 신생 내막 형성 및 미디어 육화 이어질. 일반적인 동심 신생 내막 포맷 및 미디어 / 외막 풍선 부상 표현형의 성공적인 발전을 보여 두꺼워. 빨간색 (에오신) 염색으로 인해 강력한 콜라겐 합성, 외막으로 강화된다. 스케일 바는 100 ㎛이다.
그림 2 : shRNA를-STIM1 또는 shRNA를 제어의 치료와 쥐의 경동맥의 크로스 섹션, 2 주 부상을 게시 (A) 두 그룹의 단면에 핵의 STIM1 및 DAPI 염색의 면역 형광 염색법.. shRNA를-STIM1 처리 동맥 부분에 STIM1 및 신생 내막 형성 전시의 감쇠 식입니다. (B) shRNA를-STIM1 동맥 부분의 H & E 염색. 신생 내막 테두리, IEL와 장어의 C. 디지털 추적, 측정 영역의 목적 루멘, 신생 내막의 미디어. 스케일 바는 100 ㎛이다.
그림 3 : 차선 또는 신생 내막 모델링을 생성하는 실패의 예 (A) 대신 동심 신생 내막의 편심 형성.부적절한 열기구로 인해. (B) (과도하게 팽창 된 풍선으로) 과도한 손상은 심각한 혈관 손상과 불연속 탄성 LAMINAS에 의해 분명하다 혈관벽의 파열을 일으키는 원인이되었다. 심각한 부상은 전체 혈관 내강을 차단하고 외막에 밖으로 확대하고있다 혈전을 발생합니다. 또한, 밀착성 향상 및 외막 주위의 지방 조직 사이에 일어났다. 스케일 바는 100 ㎛이다.
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Discussion
쥐의 경동맥 풍선 손상은 잘. 2007 34 Tulis에 의해 기술 된 포괄적으로 박사 Tulis이 절차의 모든 세부 사항을 논의하고있다. 이 절차를 수행하기에 관심이있는 독자는 매우 Tulis '프로토콜을 읽을 것을 권장합니다. 그러나, 우리는 박사 Tulis으로 동의하지 않는 한 가지가 대신 식염수 또는 액체의 종류와 풍선을 팽창, 우리는 공기와 함께 팽창 제안했다. 우리의 개인적인 경험에 따르면, 액체로 팽창하는 것은 거의 공기 방울을 피할 수 없다. 또한, 유연하게 부상 과정 중에 압력을 조절하고 동맥에 여분의 스트레스와 부상을 초래할 수 더욱 어렵다. 또 다른 기술적 인 팁은 수술 중 동물의 목을 지원하기 위해 (종이 수건이나 거즈로 만든) 작은 "베개"를 사용하는 것입니다.
이전보고 랫트 성형술 절차와 몇 년간의 경험을 바탕으로, 저자는 약간 수정 simplifie를 생성 한D 프로토콜 (35). 또한, 오른쪽 손상 후 치료제의 관내 주입이 증명되었다. 이 약이 생존 수술 절차의 시간을 두 배로 때문에 추가로 실무 경험을 필요로하고있다. 오랜 기간 동안의 주요 관심사는 마취제 평면이다. 마취 약물의 초기 용량은 30 ~ 45 분 동안 쥐의 진정 작용을 유지할 수있다 그래서 동물은 자주, 특히 30 분 주입 시간 동안, 발가락 핀치에 의해 확인되어야한다. 이 특정 수술 대신 흡입 마취 주사 마취제를 사용하는 이유는 쥐의 머리의 방향으로 인해 majorly입니다. 저자의 경험에 따르면, 경동맥에 풍선 삽입 쥐의가 외과 의사를 향해 머리 거짓말 할 때 수행하는 것이 훨씬 쉽다. 수술을 수행하는 동안, 그것은 매우 흄 후드 아래에 그것을 할 것을 권장 또는 바이오 안전성 캐비닛 렌티 바이러스 선물 (잠재적 인 알레르기를 방지하기 위해). 이 경우, I 벌키nhalation 콘 및 튜브 후드의 공기 흐름을 방해하고, 또한 액세스 외과 영역 어렵게 만들 것입니다. 그러나, 여전히 높은 외과 의사가 아니라 동물의 머리의 반대 방향으로 수술을 할 수있는 경우 흡입 마취를 사용하는 것이 좋습니다.
주입시 혈관 내강에 공기 방울을 피하기 위해주의하시기 바랍니다.
다른 설치류 수술과 마찬가지로, 저체온증은 전체 과정에 걸쳐 주요 관심사입니다. 죽음으로 이어질 수 있습니다 저체온증에서 동물의 고통을 피하기 위해 적절한 난방 기기를 사용합니다. 한편, 과열 / 고열증도 피해야한다. 열 패드를 사용하는 경우, 수건의 과열 동물을 방지하기 위해 열 패드와 동물의 몸 사이에 배치하는 것이 좋습니다.
두 솔루션, 식염수 및 리도카인 염산염 (1 %), 높은 수술시 필요한 노출 된 조직에 적용 할 것을 권장합니다. 아르 조직수술 중 노출은 멸균 생리 식염수에 의해 습기가 유지되어야한다. 외과 스트레칭 자주 근육 경련과 경동맥의 혈관 수축이 발생합니다. 계약 동맥에 풍선 카테터의 삽입이 실패하는 경향이있다; 풍선 삽입 이러한 조건 하에서 성공적인되면 중증 신장 또는 동맥에 손상을 줄 것이다. 국소 마취 약물로 리도카인 편안한 휴식과 혈관을 팽창하는 데 사용할 수 있습니다.
풍선이 약 1.5 기압의 압력으로 팽창되고, 적절한 조정으로 인해 (재사용하는 경우) 세 풍선의 가소성 변화와 CCA 직경의 변동, 각 수술 요구된다. 또한, 때문에 일부 동맥의 강성 풍선이 비정상적으로 과도하지만 볼 수없는 수있다. 이 경우, 풍선이 팽창 할 때, 외과의 사는 약간 동맥의 저항을 확인하고 그에 따라 풍선 압력을 조절하기 위해 카테터를 당겨한다. 강력한의 심각한 손상이나 파열의 원인이됩니다 당기는rtery, 혈액 누출, 그리고 실험 모델의 실패. 풍선 카테터 풍선만큼 여전히 잘 작동으로 여러 번 재사용 될 수있다. 재사용을 목적으로 사용 Cidex 풍선 카테터 소독. 풍선 카테터, 천연 고무 라텍스 및 폴리에틸렌 재료, Cidex 호환되도록 승인되었다. Cidex를 사용하는 의료 기기를 소독에 대한 자세한 프로토콜 37을 설명 하였다. 외과 의사가 사용 전에 벌룬 누설 때마다 확인하는 것이 중요하다.
연속 봉합 패턴은 일반적으로 피부 폐쇄에 사용하지 않는 것이 좋습니다. 대신, 상처 클립 및 중단 봉합 패턴은 일반적으로 권장합니다. 절개 고도로 민감한 활성 부위에있는 경우에는, 목,이 경우가 아닐 수도있다. 우리의 경험에 따르면, 클립 상처 및 중단 봉합 패턴은 폐쇄 실패의 높은 비율로 끝났다. 동물 긁힘에 의해 고장 손실 클립 또는 봉합 절 일때문에 금속 클립 또는 여러 봉합 끝으로 인한 더 가려움에 대부분이었다, 자주 ERY. 연속 봉합 패턴을 이용하면, 불량률은 래트 수백 우리 실험실에서 단지 1 %였다. 우리가 비디오를 표시 할 수 없었다하더라도 또한, 피부에 닫는 가장 좋은 방법은, 아마도 피내 봉합 패턴이다.
조직 절편의 조직 학적 염색 가능한 다양한 방법들이있다. H & E 염색은 가장 일반적으로 사용되는 것입니다. 독자가 더 읽기, Tulis으로, 종합적으로 논의 제 36 조라고합니다. 판상 구조의 더 정확한 정보를 얻기 위해, 반 Gieson Counterstain과 (VVG 염색)와 Verhoeff의 탄력 조직 얼룩 좋습니다.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Fogarty balloon embolectomy catheters, 2 French | Edwards Lifesciences, Germany | 120602F | |
| Deltaphase Operating Board - Includes 2 Pads & 2 Insulators | Braintree Scientific, Inc. | 39OP | |
| LED light source | Fisher Scientific | 12-563-501 | |
| Hartmann Mosquito Forceps 4” curved | Apiary Medical, Inc. San Diego, CA | gS 22.1670 | |
| Crile Retractor 4” double ended | Apiary Medical, Inc. | gS 34.1934 | |
| Other surgical instruments | Roboz Surgical Instrument Company, Inc., Gaithersburg, MD | ||
| Peripheral Intravenous (I.V.) Cannula, 24 G | BD | 381312 | |
| Ketamine HCl, 100 mg/ml, 10 ml | Ketaset- Patterson Vet | 07-803-6637 | |
| Xylazine (AnaSed), 20 mg/ml, 20 ml | Ketaset- Patterson Vet | 07-808-1947 | |
| Buprenex, 0.3 mg/1 ml (5 Ampules/Box) | Ketaset- Patterson Vet | 07-850-2280 | |
| Nair Baby Oil Hair Removal Lotion - 9 oz | Amazon/Walmart/CVS | N/A | |
| Inflation Device | Demax Medical | DID30 | |
| D300 3-way Stopcock | B.Braun Medical Inc. | 4599543 | |
| Artificial Tears Ointment | Rugby Laboratories, Duluth, GA | N/A |
References
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