Introduction
Sıvı ile çalışan cihaz boyut küçültme "lab-on-a-chip" platformlar gelişimi için büyük önem taşımaktadır. Bu doğrultuda, son iki yıl çeşitli uygulamalar ile, Mikroakiskan alanında önemli ilerlemeler kaydedilmiştir. 1-5 kapalı kanallarda (kanal Mikroakiskan) sıvı taşınması ile zıt, DMF elektrotlar diziler üzerinde damlacıklar yönetir. Bu tekniğin en cazip yararları biri sıvıları taşımak üzere hareket edebilen parçaların olmaması ve hareket anında elektrik sinyallerini kapatarak durdurulur.
Ancak, damlacık hareket evrensel bir "lab-on-a-chip" platformu için kesinlikle istenmeyen bir özellik, damlacık içeriğine bağlıdır. Proteinler ve diğer analitlerinin içeren damlacıklar kımıldamaz hale, cihaz yüzeylere sopa. Muhtemelen, bu DMF uygulamaların kapsamının genişletilmesi için önemli bir sınırlama olmuştur; 6-8İstenmeyen yüzey tıkanmayı en aza indirmek için alternatifler, potansiyel olarak damlacık içeriğini etkileyebilecek damlacık ya da çevresi ile ilave kimyasal türlerin eklenmesini içerir.
Daha önce, bir grup ilave katkı maddeleri (alan-DW cihazlar olmadan), DMF içinde hücreleri ve proteinlerin taşınmasını sağlamak için bir cihaz geliştirdiler. 9 bu damlacık haddeleme çıkaran bir elemanın geometrisine sahip mum is, 10 dayalı bir yüzey birleştirilmesi ile elde edilmiştir ve daha fazla damlacık yüzey etkileşimi azaltmak, damla üstünde yukarı doğru kuvvete yol açar. Bu yaklaşımda, damlacık hareket yüzey ıslaklığı ile ilişkili değildir. 11
Aşağıda tarif edilen ayrıntılı yöntemin amacı, ilave katkı maddesi olmadan proteinleri, hücreleri ve bütün organizmaları içeren damlacıkların taşıma yeteneğine sahip bir DMF cihazı üretmektir. Saha-DW cihazlar damlacık kimyager büyük ölçüde bağımsız çalışan tam kontrollü platformları için önünügelmelidir.
Burada, aynı zamanda bu simülasyonlar cihazın çalışması için gerekli yüksek gerilim rağmen gösteren, damlacık boyunca gerilim düşüşü damlacık içinde bioanalytes üzerinde ihmal edilebilir etkilere işaret, uygulanan voltajın bir küçük bir bölümünü oluşturur. Aslında, Caenorhabditis elegans (C. elegans), biyolojide çalışmaların çeşitli için kullanılan bir nematod ile ön testler, gerilimler uygulandığı gibi solucanlar rahatsız yüzmek olduğunu göstermektedir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
NOT: Aşağıda açıklanan prosedürlerde, laboratuvar güvenlik kurallarına mutlaka uyulmalıdır. Özel öneme sahip yüksek gerilim (> 500 V) ve taşıma kimyasallar ile ilgili güvenliğidir.
Mum İs ile İletken Yüzey 1. Kaplama
- Dikdörtgenler halinde kesilmiş bakır metal (0,5 mm kalınlığında 75 x 43 mm). , Yaklaşık 30 saniye boyunca bakır dağlayıcıda batırılarak her bakır yüzeyin temizliği yaklaşık 20 saniye musluk suyu ile yıkayın ve kağıt ile kurulayın.
NOT: Yöntem 1 altında kullanılıyorsa, makinenin içine sığacak şekilde 75 x 25 mm boyutları değiştirin. - (Yaklaşık 40 mikron kalınlığında) yaklaşık olarak eşit kurum kaplama elde etmek için, 30-45 saniye boyunca bakır tabaka altında yanan parafin mum süpürün. Alev içine ~ 1 cm tabakayı tutun. Kırılgan kurum yüzeyine dokunmayın.
2. Kaplama ile Kurum Tabakasının Korunmasına
NOT: is tabakası çok kırılgan olduğunuVe korunması için kaplanabilir. İki basit alternatifleri (yöntemleri 1 ve 2) Burada önerilen, ancak daha sağlam protokoller şu anda geliştirilme aşamasındadır.
- Yöntem 1
- Metal buharlaştırıcı veya püskürtme sistemine örnek yükleyin. Sistemin çalışma prosedürleri izlenerek, bölmeyi tahliye ve kurum katman (150-200 nm) üzerinde altın depozisyonu başlar. Cihazın oda sıcaklığına kadar soğumasını bekleyin.
- Dip kaplama, kimyasal bir bölme içine 10 dakika süre ile (% 95 etanol, ACS / USP olarak% 1 h / h) 1-dodekantiol çözelti içinde metalize tabaka. Daha sonra, 60 ° ye yakın bir açı ile tutucularına, hafifçe ancak etanolün büyük damlacıklar ile yüzeyini yıkamak. Gecede, cihazlar kurumaya bırakın.
- Yöntem 2
- Taban madde mum alevden sıcakken kimyasal bir kaput, derhal kurum ile kaplanmasından sonra, bir tarafında fluorlu bir miktar sıvı damlalarını bırakmak vesubstrat ve 90 ° yakın bir açıya tabakayı eğin. Daha damlalarını bırakmak ve onları tüm kurum yüzey üzerinde çevirelim.
NOT: damlacık bir nokta üzerine düştüğünde, kurum uzakta o bölgeden yıkanmış olur. Mümkün olan fluorlu yayılmış sıvının damlacıklar kadar bildirin. - Kimyasal bir kaput içerisinde sıcak bir plaka (15 dakika boyunca 160 ° C) üzerindeki alt-tabaka pişirin.
- Alt-tabaka kullanımdan önce gece boyunca oda sıcaklığında bekletin. Süresiz saklayın.
- Taban madde mum alevden sıcakken kimyasal bir kaput, derhal kurum ile kaplanmasından sonra, bir tarafında fluorlu bir miktar sıvı damlalarını bırakmak vesubstrat ve 90 ° yakın bir açıya tabakayı eğin. Daha damlalarını bırakmak ve onları tüm kurum yüzey üzerinde çevirelim.
3. Üst Elektrotlar Fabrikasyon (Abdelgawad ark uyarlanmıştır. 12)
- Grafik tasarım yazılımları kullanarak elektrotları çizin. Her bir elektrot 0.3 mm genişliğinde, 2 mm uzunluğunda ve elektrot arasındaki fark 0.3 mm'dir. Rehber (aşağıya bakınız, konnektörüne oturana) arasındaki boşluk 2.3 mm (Şekil 1).
- Monarch formatında (3.87 x 7.5 inç) bir esnek bakır laminat (kalın 35 mikron) Trim. Diğer boyutları kullanın iyazıcıyla uyumlu f. Renkli yazıcının elle besleme tepsisine laminat yükleyin.
- Bakır levha üzerine baskı yaparken, dağlama sırasında baskılı desen koruyan, bakır tabaka üzerine siyah mürekkep yoğun bir tabaka sağlamak için "zengin siyah", ya da "kayıt siyah" kullanmak için emin olun (detaylar için Abdelgawad ve ark. 12 bakınız) olun . Gecede, tamamen basılı tabaka kurumasını bekleyin.
- Kimyasal bir kaput içinde, (40 ° C) bakır dağlayıcıda 50 ml ile bir beher ısınmak. Beher içinde baskılı laminat Dip ve bu, hafifçe yaklaşık 10 dakika boyunca çözelti içinde sallayın. Dağlama zaman bakır dağlayıcıları çözümüne bağlıdır. Her birkaç dakikada, korozyon kontrol ve desen sağlam olup olmadığını görmek.
- Dikkatle su ile laminat yıkayın ve kimyasal kaput aseton ve etanol ile kaplama çıkarın. Bir kez daha yıkayın ve yavaşça kağıt havlu ile laminat kurulayın.
- Dikkatli bir GLA için elektrotlar ile laminat takmakss slayt (75 x 25 mm kalınlığı ~ 1 mm), çift taraflı bant kullanarak. Hava cepleri kaçının.
- Bant kullanarak elektrotlara perfloroalkoksi PFA bir film takın. Bu damlacık ile elektrotların yanlışlıkla temas önlemek için hizmet eden dolayı kısa devre zararlar üst elektrotlar.
4. (Şekil 2'de devre) elektronik arabirim
- Evrensel bir devre kartına röleleri ve kapasitörler C lehim.
- Elektronik devreler için bir kaynaksız breadboard üzerinde 10 röle sürücüleri kalanını birleştirin.
- Tel kumanda panosunda bir kanala her röle sürücü girişi.
- Dikkatlice bir bağlantı yerine (Şekil 3) üst elektrotlar oturtun. Tel Şekilde gösterildiği gibi bir üst elektrot her röle sürücü çıkışı. Elektriksel gürültüyü en aza indirmek için, röleleri teller bir çift arasında bir topraklı konnektör temas olduğunu unutmayın.
NOT: konnektör t kontrol ayarlanabilir bir platform üzerinde otururüst ve alt (kurum-kaplamalı) alt tabaka arasındaki o mesafe (0.1-0.5 mm). - Daha sonra 2345, 3456, vb; 0.8 sn, actuate 1234, yani hareket (yönünde 1 elektrot kayması, aynı anda 4 elektrotlara yüksek voltaj (HV) uygulama (yaklaşık 0.8 sn) için zamanlama kontrol etmek için bir programı kullanın ., 0.8 her bir grup için sn ve daha sonra geriye doğru ters yönde çok damlacık hareket de).
5. Damlacık Görselleştirme ve Taşıma
- CCD kamera ile kombine 96x büyütme montaj - damlacık hareketini kaydetmek için, bir 24X oluşan görselleştirme sistemi kullanırlar. S-video kullanarak kameraya video kaydedici bağlayın.
- C ihtiva eden, 4 ul damlacık Pipet kurum kaplanmış alt-tabakanın altındaki ortam elegans'da.
- ~ Damlacık üzerinde 0.3 mm için üst elektrotlar getirin. Damlacık daha kolay işlem için, beşinci elektrotun altında ortadan yakın olmalıdır.
- Elektronik arayüzü ve yüksek gerilim (500 V RMS) açın ve hareket başlayana kadar damlacık üst elektrot mesafeyi ayarlayın. Üst elektrotlar damlacık dokunmasına izin vermeyin.
- Elektrik darbeleri yanıt cihaz üzerinde başarılı damlacık transferlerin sayısını kaydederek verileri toplayın. Başarılı bir deney, en az 700 damlacık transferi ile karakterize, yani her elektrik nabız sonra bir transferi.
- Damlacık 5-10 darbeleri yanıt artık hareket etmiyor kadar, sürekli veri toplamak.
NOT: Yüzey aşağılamak başladığında, hareket yakın damlacık üst elektrotlar getirerek restore edilebilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Daha önce, DMF içinde proteinlerin hareketini sağlamak için alan-DW cihazları kullanılmıştır. Özellikle, sığır serumu albümini (BSA) ile damlacıklar daha önce başka yazarlar tarafından (katkı maddesi olmadan) rapor 2.000 kat daha yüksek bir konsantrasyonda taşınmış olabilir. Bu damlacık ve yüzey arasındaki azaltılmış etkileşim nedeniyle oldu; Şekil 4 (. Bakınız Freire ve ark 9 deneyler hakkında daha fazla bilgi için) floresan etiketli BSA içeren bir damlacık gösterir. Soldaki ilk resim kurum kaplı yüzey üzerine oturan damlacık göstermektedir; Ortadaki, damlacık haddeleme üretilmesi için ek olarak, daha da yüzey ile etkileşimi azaltır damla üstünde yukarı doğru bir kuvvet uygulayan, elektrik alanı etkisi. Sadece (mum is olmadan) fluorinatlı sıvı ile kaplanmış bir yüzeyi olan DMF içinde yaygın olarak kullanılan bir alternatif, kesme kontrastı (sağ) not edin; alt temas ile belirtilen yüzey ile güçlü etkileşim,ngle, oldukça sık hareketi engellemektedir.
Burada, şimdi daha büyük organizmaları içeren damlacıkların taşınması, solucan C. bu cihazlar ile testlere devam etmek deneysel set-up (Şekil 3) kullanın elegans, biyolojik deney bakımından çeşitli kullanılan bir nematodu.
Solucanlar ile damlacıkları başarılı kurum kaplı yüzeylerde harekete edildi. Özellikle, Movie 1 her gerilim darbesi (~ 0.8 sn aralıklarla) yanıt olarak hareket eden bir damlacık gösterir (hiçbir kurum ile bir yere sıkışmış sıvı kısmı, damlacık yolun dışında olduğunu unutmayın). Deneylerden sonra Teftiş hiçbir solucanlar, enkaz, ya da sıvı artıkları, damlacık ve yüzey arasındaki azaltılmış etkileşimi gösteren, deneylerden sonra damlacıkların yollar üzerinde kaldığını ortaya çıkardı.
Elektronik arayüz (Şekil 2) elektrot grupları aynı anda harekete geçirilen (Şekil 1, çünkü otomasyon ve hareket daha iyi kontrol edilmesine izin verir) Ayrıca yüzeyi ile etkileşimi azaltmak, yukarı doğru bir kuvvet artar.
Farklı deneyler solucanlar biyolojik tür taşınırken için cihazın çalışması için gerekli yüksek gerilim (~ 500 V RMS) zararlı olmadığını belirten, damlacık hareket (20 dk toplam harekete zaman) olarak rahatsız yüzmek olduğunu göstermiştir. Bu damlacık boyunca gerilim düşüşü işlemi (Şekil 5'te gösterildiği gibi, düzlem bir üst nokta ve alt arasındaki potansiyel farkı için gerekli olan voltajın önemsiz bir fraksiyon (10% 6) olduğunu göstermiştir simülasyonları tarafından desteklenmektedir damlasının orta); Aslında, Jurkat T-hücreleri içeren damlacıklar, diğer yazarlar 13 tarafından yapılan önceki çalışmalar gibi minimal gerilim düşer, hücre canlılığı, çoğalmasını ve biyokimya etkilemez öneririz. Ileri geçerlilik için, ancak, biz uzun vadeli etkileri değerlendirmek için deneyler tasarlama sürecinde şu andaC üzerindeki voltajın elegans. Burada tarif edilen simülasyon için, ~ 2 ul damlacık is, 30 mikron kalınlığında bir tabaka üzerinde oturan, PBS (fosfat tamponlu salin) içinde olduğu kabul edilmiştir. Üst ve alt elektrotlar bakır gibi modellenmiştir ve 500 V RMS eşit uygulanan gerilim (simülasyonları ile ilgili ayrıntılar için bkz Freire ve ark. 9).
Şekil 1:. Üst elektrotlar Resim 10 Her biri 2 mm uzunluğunda ve 0.3 mm genişliğindedir. 2 elektrotlar arasındaki boşluk da 0.3 mm'dir ve kontakları (alt) arasındaki aralık 2.3 mm'dir.
Şekil 2:. Üst elektrotlar için kontrol sisteminin şematik, 10 röle sürücüleri 1 detaylandırma Her üst elektrot iya da gerilime maruz ya da bir kapasitör bağlanır s. Sağ, röleleri ile kurulu bir resim üzerinde. Işlem için gerekli yüksek gerilim aygıtının kontrol kartı (beyaz baz) sol tarafta tutulur unutmayın. Damlacık diyagramı (Orta) Freire ve ark izni ile uyarlanmıştır. 9 , bu rakamın büyük halini görmek için buraya tıklayınız.
Şekil 3: Deneysel set-up görünümü. Üst ve alt (is-kaplamalı) alt-tabaka arasındaki mesafe ayarlanabilmektedir. Üst elektrotlar kişileri bir bağlacın içine tersledi. Sağdaki şekilde gösterildiği gibi (burada 10 teller sadece Aşama 1, 2 ve 3 gösterilmektedir) rölelerden telleri konektöre lehimlenmiştir. (Bir topraklı konnektör temas olduğunu unutmayınörneğin, bağlayıcı, 2 ya da 4) röleleri (örneğin, 1 veya 3), elektriksel gürültü en aza indirmek için. teller bir çift arasında bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 4:. Floresan etiketli BSA (10 g / L) ile damlalar (4 ul), ayrılma, bir is-bazlı alt-tabaka üzerinde oturan; Orta, elektrik alanının etkilerinin bir başka alt-tabaka ile etkileşimi en aza indirerek, damlacık üzerinde yukarı doğru bir kuvvet uygulamak için olduğu; doğru bir yüzey üzerinde damlacık sadece fluorlu bir sıvı (, is) ile kaplanmıştır. Freire ve ark izni ile uyarlanmıştır. 9
Film 1 . C ile Damlacık Her voltaj darbesi (~ 0.8 sn aralıklarla) yanıt olarak hareket eden bir Saha-DW cihazda elegans. Videonun sol alt gösterilen sıvı kısmı damlacık yolunda değildir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Protokolün en önemli nokta doğrudan damlacıkları hareketli başarı ile ilişkili kurum tabakanın korumasıdır. Kurum katmanı (yukarıdaki yöntem 1) metallenmesi fabrikasyon başarı% 100'e yakın verir. Bununla birlikte, maksimum işletim süresi yaklaşık 10 dakikadır; muhtemelen, damlacık fraksiyonlar metal katmandaki delikler içinden kurum ıslatma edilir. Florlu sıvı ile kurum tabakayla kaplanması kolay ve hızlı bir alternatif olduğunu ve en az kaynak gerektirir, ancak fabrikasyon yüzeylerde çalışma (20 dk maksimum) sadece% 40-50 - ve kaplama tekdüze değildir. Aslında, kurum tabaka çok kırılgan olduğu ve viskoz florinlenmiş sıvı kolaylıkla zarar verir. Şu anda cihazın çalışma süresini artıracaktır kurum tabakasını korumak için daha sağlam alternatifler üzerinde çalışıyoruz. Bununla birlikte, önemli bir yönü yüzeyine damlacık içeriğinin adsorpsiyon. Daha önce, 9 Ama att proteinin miktarının sayısalcihazın çalışması esnasında yüzeye ağrıyordu ve korelasyon devam eden hareketi ve sığır serum albümini (BSA) düşük yüzey adsorpsiyonunun arasında bulunmuştur. Rağmen, biyolojik kirlenmeye karmaşık bir konudur, ve hatta bazı yazarlar tamamen etkisini bastırmak için imkansız olabileceğini düşündürmektedir; yalnızca tek bir protein, bir yüzeye yapışan Teorik olarak, daha çok bu siteye çekici olacaktır. Aslında, (Diğer yazarlar 6) tarafından dijital mikroakışkan cihazlar için bildirilen en yüksek işlem süresi yaklaşık 40 dakika olmuştur. Bu nedenle, yüzey sağlamlığı çok önemli bir nokta ve hala devam eden bir çalışmadır.
Katkı maddeleri kullanıldığı sürece bu, electrowetting içinde, gerilim uygulama genellikle tamamen hareketi engelleyen, yüzeyde analitlerle damlacığı yayılır edin. Bununla birlikte, bazı katkı maddeleri toksik olabilir, veya yalnızca damlacık analit konsantrasyon aralığında çalışabilir. Saha-DW cihazlar Analitlerin taşıma fro değişen izinekstra katkı olmadan tek hücreler ve tüm organizmalar, m proteinler. Buna ek olarak, cihaz özellikleri kalınlığı, bütünlüğü ve kurum tabakanın elektriksel özellikleri büyük ölçüde bağımsız olarak (bakınız Freire, ve ark. Daha fazla bilgi için, 9).
Bu nedenle, burada açıklanan yöntemin önemi o damlacık kimyanın büyük ölçüde bağımsız çalışan tam kontrollü lab-on-a-chip platformlarının geliştirilmesi için önünü, DMF uygulamalarının kapsamını genişletiyor olmasıdır.
Üst elektrotların boyutları yazıcının çözünürlüğü ile uyumlu ve benzersiz değildir; dar ve yakın elektrotlar da işe yarayabilir. Gerçekte, elektronik baskılı devre levhalarının imalatı için diğer yöntemler de kullanılabilir. Önemli olan damlacık düzgün olmayan bir elektrik alanına maruz bırakılır ve alan daha yoğun olduğu bu bölgesine doğru hareket edecek olmasıdır. Ancak, bakım alınmalıdırtasarım kıvılcım çıkmasını engellemek için 3 MV / m altında enerjik ve yüzer elektrotlar arasında elektrik alanı tutmak için; Burada, alan keskin kenarları olmayan, yaklaşık 1.7 PD / m'dir.
Aşağıdaki şekilde, elektronik devrelere işlemdir. Her bir üst elektrot, bir röle kontağı vasıtasıyla, bir yüksek voltaj yükselticinin çıkışı bağlanır, ya da bir kapasitör (C), elektriksel gürültüyü en aza indirmek için. Transistörü T çalıştırmak için röle bobini için gerekli olan daha büyük bir akımını kontrol etmek için, R direnci ve kapasitör C1 yoluyla, kumanda panosu ile dış kaynaklı düşük akım sağlar. Diyod D (bileşenler listesi için maddeler listesine bakınız) bağlı olarak bobinin değişken akıma devre hasar görmesini önler. Sadece bir kontrol kartı tüm elektrotlar tek tek adresleme sağlar ve sadece bir YG güç kaynağı gereklidir (Şekil 2), hangi çıkış gerilimleri (8-18 kHz, 500-660 V RMS) bir gener tarafından sağlanan sinüs dalgayı yükseltmek sonraator. Gürültü ve olası devre arıza en aza indirmek için, HV olabildiğince uzak olarak kontrol sisteminden tutulur unutmayın.
Burada bildirilen deneyler, sadece daha küçük olması nedeniyle damlacıklar C ihtiva eden gerçeği, 4 ul damlalar kullanılan C. elegans pipet daha zordur. C. kültürü elegans burada ele olmayacak, ve okuyucu başka protokoller için bakmak gerekir (örn., Brenner 14).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Biz C ile yardım için mali destek için Lindback Vakfı, Dr. Alexander Sidorenko ve verimli tartışmalar ve teknik yardım için Elza Chu, ve Profesör Robert Smith'e teşekkür C. elegans deneyleri.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Paraffin candle | Any paraffin candle | ||
| Sputtering system | Denton Vacuum, Moorestown, NJ | Sputter coater Desk V HP equipped with an Au target. | |
| 1-dodecanethiol | Sigma-Aldrich | 471364 | |
| Teflon | Dupont | AF-1600 | |
| Fluorinert FC-40 | Sigma-Aldrich | F9755 | Fluorinated liquid: Prepare Teflon-AF resin in Fluorinert FC-40, 1:100 (w/w), to create the hydrophobic coating. |
| Graphic design software -Adobe Illustrator | Adobe Systems | Other softwares might be used as well. | |
| Copper laminate | Dupont | LF9110 | |
| Laser Printer | Xerox | Phaser 6360 or similar | Check for the compatibility with "rich black" or "registration black" (see text). |
| Copper Etchant | Transene | CE-100 | |
| Perfluoroalkoxy (PFA) film | McMaster-Carr | 84955K22 | |
| Breadboard | Allied Electronics | 70012450 or similar | Large enough to allow the assemble of 10 drivers. |
| Universal circuit board | Allied Electronics | 70219535 or similar | |
| Connector | Allied Electronics | 5145154-8 or similar | |
| Control board and control program (LabView software) | National Instruments | NI-6229 or similar | |
| High-voltage amplifier | Trek | PZD700 | |
| Capacitors C and C1, 100 nF, 60 V | Allied | 8817183 | |
| Transistor T, NPN | Allied | 9350289 | |
| Diode D, 1N4007 | Allied | 2660007 | |
| Relay | Allied | 8862527 | |
| Visualization system | Edmund Optics | VZM 200i or similar | System magnification 24X – 96X. It is combined with a Hitachi KP-D20B 1/2 in CCD Color Camera. |
| Recorder | Sony | GV-D1000 NTSC or similar | It is connected to the camera by an S-video cable. |
| Simulations | COMSOL Multiphysics | V. 4.4 |
References
- Fair, R. B. Digital microfluidics: is a true lab-on-a-chip possible. Microfluid Nanofluid. 3 (3), 245-281 (2007).
- Gupta, S., Alargova, R. G., Kilpatrick, P. K., Velev, O. D. On-Chip Dielectrophoretic Coassembly of Live Cells and Particles into Responsive Biomaterials. Langmuir. 26 (5), 3441-3452 (2009).
- Shih, S. C., et al. Dried blood spot analysis by digital microfluidics coupled to nanoelectrospray ionization mass spectrometry. Anal Chem. 84 (8), 3731-3738 (2012).
- Gorbatsova, J., Borissova, M., Kaljurand, M. Electrowetting-on-dielectric actuation of droplets with capillary electrophoretic zones for off-line mass spectrometric analysis. J Chromatogr. 1234 (0), 9-15 (2012).
- Qin, J., Wheeler, A. R. Maze exploration and learning in C. elegans. Lab Chip. 7 (2), 186-192 (2007).
- Koc, Y., de Mello, A. J., McHale, G., Newton, M. I., Roach, P., Shirtcliffe, N. J. Nano-scale superhydrophobicity: suppression of protein adsorption and promotion of flow-induced detachment. Lab Chip. 8 (4), 582-586 (2008).
- Perry, G., Thomy, V., Das, M. R., Coffinier, Y., Boukherroub, R. Inhibiting protein biofouling using graphene oxide in droplet-based microfluidic microsystems. Lab Chip. 12 (9), 1601-1604 (2012).
- Kumari, N., Garimella, S. V. Electrowetting-Induced Dewetting Transitions on Superhydrophobic Surfaces. Langmuir. 27 (17), 10342-10346 (2011).
- Freire, S. L. S., Tanner, B. Additive-Free Digital Microfluidics. Langmuir. 29 (28), 9024-9030 (2013).
- Deng, X., Mammen, L., Butt, H. -J., Vollmer, D. Candle Soot as a Template for a Transparent Robust Superamphiphobic Coating. Science. 335, 67-70 (2011).
- Kang, K. H. How Electrostatic Fields Change Contact Angle in Electrowetting. Langmuir. 18 (26), 10318-10322 (2002).
- Abdelgawad, M., Watson, M. W. L., Young, E. W. K., Mudrik, J. M., Ungrin, M. D., Wheeler, A. R. Soft lithography: masters on demand. Lab Chip. 8 (8), 1379-1385 (2008).
- Barbulovic-Nad, I., Yang, H., Park, P. S., Wheeler, A. R. Digital microfluidics for cell-based assays. Lab Chip. 8 (4), 519-526 (2008).
- Brenner, S. The genetics of Caenorhabditis elegans. Genetics. 77 (1), 71-94 (1974).
