Abstract
Инфаркт миокарда остается основной причиной смерти в западных странах, несмотря на значительный прогресс в области развития стента в последние десятилетия. Для выяснения основных механизмов и разработке новых терапевтических стратегий, наличие действительных животных моделях являются обязательными. Так как нам нужно новое понимание pathomechanisms сердечно-сосудистых заболеваний в естественных условиях в условиях борьбы с инфарктом миокарда, действия животной модели является важным аспектом. Тем не менее, защита животных весьма актуальны в этом контексте. Таким образом, мы устанавливаем минимально инвазивной и простую модель инфаркта миокарда у мышей, которая гарантирует высокую воспроизводимость и выживаемость животных. Таким образом, это модели соответствует требованиям принципа 3R (Замена, изысканности и сокращения) для экспериментов на животных и обеспечить научную информацию, необходимую для дальнейшей разработки терапевтических стратегий для cardiovascular заболевания.
Introduction
Инфаркт миокарда является одним из основных причин смерти в промышленно развитых странах. Несмотря на очевидный прогресс диагностических и терапевтических подходов, сердечно-сосудистые заболевания по-прежнему основной причиной смертности. Учитывая улучшение продолжительности жизни и жизни рисков, связанных с, постоянный рост заболеваемости сердечно-сосудистых заболеваний, как ожидается, в будущем. Таким образом, существует настоятельная необходимость в создании и проверить новые подходы для лечения сердечно-сосудистых заболеваний. Информация о клинических исследованиях страдают от ее ограничений, эти исследования, как правило, недостаточно, чтобы объяснить и понять механизмы на молекулярном уровне, будучи не в состоянии обеспечить решение этих основных проблем со здоровьем.
Кроме того, базовые исследования было ограничено из-за сложности и трудности, чтобы воспроизвести механизмы сердечно-сосудистых заболеваний в лаборатории. Поэтому, чтобы увеличить наши знания о патофизиологии сердечнососудистые заболевания, важно, чтобы проверить животных моделей 1,2. Тем не менее, чтобы идентифицировать все каскады молекулярных событий, участвующих в заживлении после инфаркта миокарда, анализа в различные моменты времени необходимо, в результате чего большое количество животных экспериментов.
Инфаркт миокарда эксперименты часто выполняются с помощью животных моделей. Стимулирование инфаркт миокарда у мелких животных 3-11 является наиболее подходящим и эффективным модель, используемая для расследования клеточные и молекулярные события, чем больших моделей животных. Кроме того, никакие другие виды не представляет наличие трансгенных или нокаутных мышей штаммов, как 12. Эти мышиные модели весьма полезны в других заболеваний, в том числе сердечно-сосудистых патологий (например, атеросклероза, рестеноза стента в) 13,14. Кроме того, низкий период беременности и большое количество потомков право мышиных моделей как наиболее привлекательную систему для изучения молекулярных механизмов инфаркта инфаrction 12.
Тем не менее, размер сердца у мышей ожидает высокую точность манипуляций при микрохирургии. Обучение таких квалифицированных и опытных кадров хирургия времени и трудоемкий процесс. Таким образом, мы здесь, представить подробную процедуру микрохирургии, в том числе советы и уловки, чтобы направлять коллаборационистов даже со средним квалификации, такие как студентов и техников для выполнения сложной миокарда модель миокарда у мышей.
Первоначально интубации выполняется посредством короткого канюли без использования трахеотомии. Грудной разрез расположен в межреберной области, избежать травм ребер или / и окружающие ткани. Этот подпункт шаг имеет большое значение для обеспечения быстрого восстановления и исцеления 15. Лигатуры сделал дифференциал для хронической ишемии и ишемии / реперфузии моделей, для высокой выживаемости при сохранении значительных размеров инфаркта. Наш опыт показывает, THAт с помощью шелковой нити обеспечивает более высокий воспроизводимость по сравнению с крио-травмы 16.
В заключение, способ, описанный здесь, применима как в хронической ишемии и моделей ишемии / реперфузии в мелких животных. Советы и приемы, представленные в этой процедуре, предназначены для того, чтобы персонал с низкой или даже средней квалификации, чтобы применять его в небольших моделях животных.
Protocol
ПРИМЕЧАНИЕ: Эксперименты, представленные в этой статье, выполняются соответственно Немецкий низким и руководящих принципов европейских уходу за животными. Животные разводятся в животных объекта Института лабораторных животных науки, Universiy больницы Аахен, Германия, под руководством профессора д-ра Р. Толбе и д-р А. Teubner (благосостояния офицерского животных).
1. Уход за животными
- Держите мышей в блоке специализированной помощи, уверяя надлежащий доступ к пище и специализированных ветеринарного контроля и лечения. Если животные будут перемещены или приобрести извне, пожалуйста, заверить одну неделю проживания перед прохождением процедуры.
2. Интубация
- Обезболить 8-10 недель самцов C57BL / 6 мышей дикого типа, 25-27 г с помощью внутрибрюшинного введения 100 мг / кг кетамина и 10 мг / кг ксилазина. Контроль за уровнем анестезии ног прижимных рефлексов. Поместите ветеринар мазь на глаз, чтобы предотвратить сухость во время процедуры.
- Убедитесь, поддержание стерильных условиях, чтобы избежать инфекции во время операции с помощью стерильных материалов и инструментов.
- Поместите под наркозом мыши в лежачем положении на столе с подогревом хирургии. Удалить волосы с обеих вентральной области шеи и левой половине грудной клетки с помощью небольшого бритвы и дезинфицировать 70% спиртом до разреза.
- Выполнение небольшой средний разрез 0,5 см с использованием хирургических ножниц в центре шеи. Под кожу, пройти 2 жирных тел с стерильных щипцов изогнутых и визуализировать трахею под стереомикроскопа через прозрачность покрывающего мышцы.
- Представьте устно интубации канюли в трахее под видом с помощью стереомикроскопа (рис 1А). Различают металлический катетер беспересадочныйтьфу прозрачную ткань. И проверить, положение и расположение во время операции в любой момент (Фиг.1В).
- Подключите канюли небольшого животного вентилятора и регулировать настройки вентиляции в соответствии производит руководящие принципы (дыхательный объем между 100-150 мкл и скорости дыхания между 100-150 в минуту).
3. Инфаркт миокарда Индукционная
- Выполните разрез кожи менее 0,5 см в середине линии между xyphoid и левой axila. Используйте пинцет, чтобы отделить мышечный слой из нижележащих ребер.
- Выполнение небольшой разрез между ребрами с помощью небольшого ножницами до грудной полости не будет открыта 17. Для хронического миокарда, выполните разрез в 5 м межреберье (рис 1С) и / или для модели ишемии / реперфузии, в 4-м межреберье (рис 1D): для облегчения ряда подход снизу-го 2 и 3-й
- Поместите втягивающие в разрез, чтобы открыть грудной полости и визуализировать сердце.
- Осторожно снимите перикарда, чтобы предотвратить чрезмерное фиброзные процессы.
- Представьте левой нисходящей коронарной артерии (LAD) в качестве глубоко расположенным светло-красный судна. Если ЛАД не могут быть визуализированы, рассмотрим некоторые ориентиры для повышения воспроизводимости.
- Для модели хронического инфаркта, место лигатуры в середине вентральной стороне сердца (между ушной раковины и верхушки), имеющие в качестве ссылки вены, как показано на рисунке 1С. Привязать обе ветви артерии с использованием 0/7 шелковой нити, чтобы получить трансмурального переднего и заднего миокарда. Серый цвет указывает положение лигатуры и может быть повторена, если необходимо (рис 1С).
- Для ишемии / реперфузии модели, поместите лигатуру под ушной раковины, на основной части LAD (Рис 1D). Лигратура находится за силиконовой трубки для защиты целостности судна. Серый цвет указывает на зоны инфаркта и должны появиться по всей сердца (рис 1D). Поместите временные швы на бок в период ишемии и увлажнить с помощью компресс, чтобы избежать ткани сушку. После ишемии, удалить силиконовую трубку и сократить шов с маленькими ножницами для визуализации реперфузии.
- Кроме анестетики и анальгетики, используемые в начале процедуры (шаги 2.1 и 2.2), использовать 0,5% изофлуран во время операции, чтобы обеспечить надлежащий комфорт животного, или следовать рекомендациям по уходу животное вашего учреждения.
4. Шов и восстановление
- Устранение остаточного воздуха из грудной клетки, заполнив теплой изотонического солевого раствора.
- Закройте грудную клетку с 3 швами 0/6 (как показано на фиг.2А и 2В). Расположите медиальной швов под углом 90 °, чтобы обеспечить, какealed закрытие ребер, как показано на рисунке 2 (2А, В).
- Закрыть мышечного слоя с 2 швами (рис 2С) и кожи с 3-4 швами 0/6 (рис 2D). Выполните эти швы отдельно, чтобы получить надлежащее окно для дальнейшего эхокардиографического измерения.
- Отключите интубации канюли с вентилятором и позволяют спонтанное дыхание. Для последующей идентификации, отметьте мышкой, используя локальную систему (спросить благосостояния офицера животных от вашего учреждения).
- Лягте мыши на левой стороне под красной лампой, пока он не проснется. Не оставляйте животное без присмотра, пока он не пришел в сознание достаточно. Не позволяйте животное, которое претерпела операцию, чтобы быть в компании других животных до полного восстановления.
- Управление боли терапии бупренорфина 0,1 мг / кг массы тела, подкожно в течение следующих 3 дней, следуя указаниям по уходу за животными в вашей организации.
5. Анализ инфаркта миокарда
- Регулярно контролировать функцию сердца с помощью эхокардиографии (рис 3а): фракция выброса, фракции укорочения, сердечного выброса и размеров сердца.
- Обезболить животных с помощью внутрибрюшинной инъекции 100 мг / кг кетамина и 10 мг / кг ксилазина. Подтвердите правильное обезболивания до операции из-за отсутствия рефлексов.
- Откройте грудной полости и вырезать сердце, помещая его в стерильного раствора PBS, мойки широкой оставшейся крови.
- При необходимости, собирают кровь непосредственно из сердца, избегая травм из infracted регионах, или после удаления сердца, из грудной полости.
- После промывки, остановки сердца в diastola в насыщенном растворе KCl (стерильные фильтруется 3M KCl в PBS). Для гистологического анализа исправить сердце в 10% формалине и перейдите к шагу 5.7.
- При необходимости, определения жизнеспособности автомобиляDiac клетки по Эванс-синий / трифенилолово тетразолий хлорида окрашивания (TTC). После восстановления лигатуры на начальном месте, заливать сердце с 200 мкл 1% -ный раствор синего Эванса с использованием аорты канюли и заморозить сердце в небольшой пластиковый пакет при -20 ° С, без промывки.
- Через 2 ч, выполнить 5 трансверсально слайдов с использованием острым скальпелем и инкубируют их в течение 10-15 мин в растворе ТТС при 37 ° С, как описано изготовлены. Fix слайды в течение 10 мин в 10% формалине и положить их между микроскопическими слайдами для дальнейшего анализа.
- Встроить ткани сердца в парафин, путем размещения сердце на кончике, чтобы выполнить поперечное секционирование. Выполнение последовательного раздел 5 мкм. Соберите первые 20 разделов и отказаться от очередной 300 мкм. Продолжить протокол раздел до митрального клапана уровень не достигнут (3А, Б). Серийные срезы, 400 мкм друг от друга вдоль всей сердце собраны и могут быть окрашены Fили качественный и количественный анализ.
- Измерьте размер инфаркта с помощью один шаг Гомори в окрашивания 6-8.
- Анализ ангиогенеза, содержание коллагена или воспалительных клеток набор в серийное разделе помощи обычной иммуногистологического окрашивание.
Representative Results
Процедура инфаркт миокарда происходит в течение 25-30 мин и показывает смертность на 10%. После операции у мышей отойти от анестезии в течение следующих 15 мин. Нет физического обесценения не наблюдалось эксплуатируемых мыши. Тем не менее, есть высокий риск разрыва сердца через неделю после пост-хронической инфаркта миокарда, если ремонт процессы нарушаются во время воспалительной фазы. Так сердце способно существенно изменить свои размеры во время накачки, важно, чтобы все собранные сердца должен быть остановлен в таком же положении, например, в diastola. Это может быть достигнуто путем перфузии сердца насыщенным раствором KCl. Увеличение внеклеточной концентрации блоки K + ионных насосов, снижает мембранный потенциал покоя сердечных клеток, в результате чего диастолического ареста сердечной деятельности.
Область миокарда можно увидеть в ультразвукового исследования (Фиг.3А, нижняя панель). По сравнению снормальный миокард, ишемическая регионы появляются тонкие и гипокинетический (рис 3а, верхняя панель). В зависимости от используемой модели, размер миокарда будет отличаться. Модель хронического миокарда вызывает круговую, трансмурального инфаркта апекса (фиг.3В), в то время как при ишемии / реперфузии вызывает тонкий, среднего стенку и по всей сердца (рис 3C). Есть много методов, чтобы определить размер инфаркта. Если цель заключается в анализе прямое влияние на сердечную жизнеспособности, Эванс-синий / ТТК окрашивания 18 указывается быть выполнены, по крайней мере 2 часа после реперфузии, чтобы быть в состоянии видеть любые изменения в миокарде. Разделы могут быть проанализированы немедленно (рисунок 3B, средняя панель) после окрашивания или могут быть между стеклами в формалине в течение 2-3 дней (рис 3C, средняя панель). Синяя область представляет собой здорового миокарда, не влияет ишемии. Красная зона представляет собой жизнеспособного миокарда внутри йе ишемическая площадь (миокард риск), и белая область представляет собой мертвую ткань. Как правило, размер инфаркта выражают в виде процентов от зоны риска.
Зрелая шрам в результате после реконструкции процессов может быть легко измерить с помощью immunohistolgy один шаг окрашивание Гомори в. Синие окрашенных инфаркта и красные пятнами здоровые участки желудочка (3В и С, правая панели) определяются в первом разделе из каждого уровня до митрального клапана. Чтобы избежать изменения за счет связывания LAD на разных уровнях, от всего миокарда разделе рассматривается и выражали в процентах от общего объема левого желудочка. Объем инфаркта 15-20% в хронической модели инфаркта и 10-15% после ишемии / реперфузии модели может быть достигнуто. Кроме того, модель хронического миокарда будет индуцировать акцентировал дилатацию, не наблюдается в ишемической реперфузии / модели (3В и С Рогт панель).
Обычные методики окрашивания могут быть использованы, например: CD31 окрашивание, используемого для выявления ангиогенеза (красный, рис 4а) или гладкой мышцы окрашивания актина, чтобы определить, миофибробласты (зеленые, 4Б). Двойное окрашивание флуоресценции можно также применять для идентификации различных молекул-мишеней в зоне инфаркта, так как отсутствие кардиомиоцитов не дает автоматического иммунофлюоресценции (фиг.4С).
Фигура 1: Медиальной разрез и введение канюли интубации (A). Stereomicroscopic визуализация металлической канюли через прозрачность ткани (B). В кольца трахеи (синие стрелки) и канюли (черная стрелка), указаны. Межреберная разрез для хронического инфаркта месдель и вязь ЛАД (С). Лигатура находится в середине сердца (между предсердием и вершиной, черный в нижней панели), используя в качестве ссылки конец вены (схема синим, нижняя панель). Обе ветви артерии должны быть связаны (красный нижней панели). Серый цвет указывает области инфаркта и, кажется, в нижней половине части сердца (правый нижний панели). Вязь для модели ишемии / реперфузии производится по ушной раковине, связывание основного тела ЛАД (красный в нижней панели) в течение силиконовой трубки (правая сторона) (D). Серый цвет указывает на infracted область, которая присутствует на всей сердце (справа внизу). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 2: (А) и при ишемии / реперфузии модели (B, слева). В естественных изображений ребер шва (С, левая панель ), мышечная шов (С, средняя панель) и шов кожи (С, правая панель). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 3: Эхокардиографические изображения. Изображения нормальной (А, верхняя панель) и инфарктом областях (A, нижняя панель), которые приобретены в длинной оси (продольные, оставленные панели) или в короткой оси (поперечной, правая панели) .. миокарда индуцированных хроническим лигатуры(Б) и от одного часа ишемии с последующей реперфузией (C). Evans Blue / Окрашивание ТТК позволяет идентифицировать перфузии (синий) / Non-перфузии зоны, а также жизнеспособным (красный) / мертвых (белый) миокарда (B, C, средний панелей). Один шаг окрашивание Гомори позволяет выявить инфарктом областях (синий), и отличает их от обычных регионах (красный) (B, C, правая панели). Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы посмотреть большую версию этой фигуры.
Рисунок 4: Различные окрашивание может быть выполнена в infracted области, таких как CD31, описанного в нео-ангиогенеза (А, красный, простые стрелки), или гладкой актин для миофибробластами (B, GReen, простые стрелки), а также двойного окрашивания (С, CD31-красный / актин гладких мышц-зеленый), контрастно DAPI для ядер (синий). Миофибробласты можно легко отличить от гладких мышечных клеток из малых или больших артерий, которые всегда сопровождаются эндотелиальной слоя (С, стрелки). Двойные стрелки указывают аутофлюоресценция эритроцитов. Масштаб бары 50 мкм.
Discussion
Во время процедуры, есть некоторые критические точки, чтобы отметить: интубации, открывая грудной полости и ЛАД лигатуры. Первый критический шаг интубации животного перед experiements. Многие группы используют вертикальную поддержку фиксации мыши и источник света, чтобы вставить канюли непосредственно в трахею. Этот метод имеет неопределенность в отношении правильной вставки канюли в трахею и наиболее склонны к отказу от начинающих. Создание небольшой разрез, положение канюли может контролироваться в течение всего маневра, таким образом уменьшая скорость по умолчанию. Кроме того, трахеотомия превзойден, тем самым уменьшая осложнений и сократить время операции.
Следующим важнейшим шагом является открытие грудной полости. Средний стернотомия представляет собой маневр с высоким риском задерживает восстановление животных. Боковая левая Разрез подразумевая резку 2-3 ребер 15
Сама лигатура представляет собой наиболее важный шаг. Левой нисходящей артерии трудно быть визуализированы, и часто требуется, чтобы быть связанным без вида. Таким образом, некоторые анатомические ориентиры указаны, чтобы помочь хирургу выполнять правильный перевязка. Для хронической модели инфаркта, лигатуру помещают в середине вентральной стороне сердца, между ушной раковиной и вершины, над окончанием основной передней вены (фиг.2В). Эффективность может быть Controзаполненной визуализируя появление серого цвета в пострадавших районах. Если зоны инфаркта появляется передний и не включает в себя заднюю стенку, новый шов может быть помещен слева от первого шва. Основной корень ЛАД всегда видна под ушной раковины 18, и, следовательно, не представляет серьезные проблемы в обнаружении этой части. Тем не менее, ушная раковина представляет серьезную опасность кровотечения и должен быть осторожно.
Процедура ограничивается наличием соответствующего оборудования. Вентилятор и соответствующая система анестезии для мелких животных являются дорогостоящими и требуют подключения к газовой и вентиляции помещения. Кроме того, тщательное наблюдение за животными необходимо в первую неделю после процедуры для выявления возможное клиническое. Чтобы исследовать функцию сердца во время эксперимента с высоким разрешением УЗИ, комплекс Langendorf перфузии-системы или небольшие интравентрикулярные измерения катетер требуется, инвolving высокие затраты и дополнительные знания.
Учитывая инфаркта миокарда, нет альтернативных методов, доступных для воспроизведения сложность событий в пробирке. В зависимости от точки интереса, экс естественных условиях перфузии изолированного сердца в системе Лангендорфа предоставляет информацию о сократительной функции сердца, и жизнеспособности миокарда в ответ на различные раздражители или наркотиков. Тем не менее, это исключает все помехи компонентов крови и иммунной системы, и это не указывается для длинных исследований ремоделирования и исцеления после инфаркта миокарда.
После выполнения процедуры инфаркт миокарда, все остальные функциональный анализ может быть осуществлен, например, измерений внутрижелудочкового давления, ультразвука (ультразвуковой небольшое животное систем) или изолированного сердца Лангендорфа-перфузии. Кроме того, все биологические и молекулярно-анализ может быть проведен для выявления клеток, белки, мРНК микроРНК, GENES или других биомаркеров, которые могут быть использованы в качестве терапевтических мишеней для разработки новых стратегий лечения инфаркта миокарда.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Stereomicroscope | Olympus | SZ/X9 | |
| Mouse ventilator | Harvard Apparatus | 730043 | Model Minient 845 |
| Dual Anesthesia System (Tabletop Version) | Harvard Apparatus | Selfcontained isofluranebased anesthesia unit for use on lab tables, with a compact 8" x 11" footprint. | |
| Intubation cannula | Harvard Apparatus | 732737 | |
| Forceps | FST, Germany | 9119700 | standard tip curved 0.17 mm x 0.1 mm |
| Scissors | FST, Germany | 9146011 | straight |
| Vannas scissor | Aesculap, Germany | OC 498 R | |
| Retractors | FST, Germany | 1820010 | 2.5mm wide |
| Retractors | FST, Germany | 1820011 | 5 mm wide |
| Wire handles | FST, Germany | 1820005 | 10 cm |
| Wire handles | FST, Germany | 1820006 | 14 cm |
| Ketamine 10% | CEVA, Germany | ||
| Xylazine 2% | Medistar, Germany | ||
| Bepanthene eye and nose cream | Bayer, Germany | ||
| Silicon tube | IFK Isofluor, Germany | custommade product | diameter 500 µm |
| section thickness 100 µm | |||
| polytetrafluorethylene catheter | |||
| PROLENE Suture 6/0 | ETHICON | 8707H | polypropylene monofilament suture, unresorbable, needle CC1, 13 mm, 3/8 Circle |
| 7/0 Silk | Seraflex | IC 1005171Z | |
| Ultrasound | Vevo, Canada | 770 Vevo |
References
- Liehn, E. A., Postea, O., Curaj, A., Marx, N. Repair after myocardial infarction, between fantasy and reality: the role of chemokines. J Am Coll Cardiol. 58 (23), 2357-2362 (2011).
- Liehn, E. A., Radu, E., Schuh, A. Chemokine contribution in stem cell engraftment into the infarcted myocardium. Curr Stem Cell Res Ther. 8 (4), 278-283 (2013).
- Alexander, S., et al. Repetitive transplantation of different cell types sequentially improves heart function after infarction. J Cell Mol Med. 16 (7), 1640-1647 (2012).
- Liehn, E. A., et al. Compartmentalized protective and detrimental effects of endogenous macrophage migration-inhibitory factor mediated by CXCR2 in a mouse model of myocardial ischemia/reperfusion. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 33 (9), 2180-2186 (2013).
- Liehn, E. A., et al. Ccr1 deficiency reduces inflammatory remodelling and preserves left ventricular function after myocardial infarction. J Cell Mol Med. 12 (2), 496-506 (2008).
- Liehn, E. A., et al. A new monocyte chemotactic protein-1/chemokine CC motif ligand-2 competitor limiting neointima formation and myocardial ischemia/reperfusion injury in mice. J Am Coll Cardiol. 56 (22), 1847-1857 (2010).
- Liehn, E. A., et al. Double-edged role of the CXCL12/CXCR4 axis in experimental myocardial infarction. J Am Coll Cardiol. 58 (23), 2415-2423 (2011).
- Oral, H., et al. CXC chemokine KC fails to induce neutrophil infiltration and neoangiogenesis in a mouse model of myocardial infarction. J Mol Cell Cardiol. 60, 1-7 (2013).
- Projahn, D., et al. Controlled intramyocardial release of engineered chemokines by biodegradable hydrogels as a treatment approach of myocardial infarction. J Cell Mol Med. 18 (5), 790-800 (2014).
- Schuh, A., et al. Novel insights into the mechanism of cell-based therapy after chronic myocardial infarction. Discoveries. 1 (2), e9 (2014).
- Schuh, A., et al. Effect of SDF-1 alpha on Endogenous Mobilized and Transplanted Stem Cells in Regeneration after Myocardial Infarction. Curr Pharm Des. 20 (12), 1964-1970 (2013).
- Zaragoza, C., et al. Animal models of cardiovascular diseases. J Biomed Biotechnol. 2011, 497841 (2011).
- Kanzler, I., Liehn, E. A., Koenen, R. R., Weber, C. Anti-inflammatory therapeutic approaches to reduce acute atherosclerotic complications. Curr Pharm Biotechnol. 13 (1), 37-45 (2012).
- Liehn, E. A., Zernecke, A., Postea, O., Weber, C. Chemokines: inflammatory mediators of atherosclerosis. Arch Physiol Biochem. 112 (4-5), 229-238 (2006).
- Kolk, M. V. V., et al. LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction. J. Vis. Exp. (32), 1438 (2009).
- Ryu, J. H., et al. Implantation of bone marrow mononuclear cells using injectable fibrin matrix enhances neovascularization in infarcted myocardium. Biomaterials. 26 (3), 319-326 (2005).
- Frobert, A., Valentin, J., Cook, S., Lopes-Vicente, J., Giraud, M. N. Cell-based Therapy for Heart Failure in Rat: Double Thoracotomy for Myocardial Infarction and Epicardial Implantation of Cells and Biomatrix. J. Vis. Exp. (91), e51390 (2014).
- Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery. J. Vis. Exp. (86), e51329 (2014).
