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चूहे में वाम पूर्वकाल अवरोही कोरोनरी धमनी के स्थायी Ligation: पोस्ट-रोधगलन पुनर्गठन और दिल की विफलता का एक मॉडल

Published: December 2, 2014 doi: 10.3791/52206
Automatic Translation
1, 1, 1, 1
1Department of Cardiovascular Sciences, Centre for Molecular and Vascular Biology, Catholic University of Leuven

Abstract

दिल की विफलता दिल आराम में या तनाव के दौरान सेलुलर ऑक्सीजन आवश्यकताओं के अनुरूप दर से रक्त पंप करने में विफल रहता है, जिसमें एक सिंड्रोम है। यह परिश्रम पर विशेष रूप से तरल पदार्थ प्रतिधारण, सांस की तकलीफ, और थकान, की विशेषता है। दिल की विफलता एक से बढ़ सार्वजनिक स्वास्थ्य समस्या है, अस्पताल में भर्ती का प्रमुख कारण है, और मृत्यु दर का एक प्रमुख कारण है। इस्कीमिक हृदय रोग दिल की विफलता का मुख्य कारण है।

वेंट्रिकुलर remodeling के बाएं वेंट्रिकल की संरचना, आकार, और आकार में परिवर्तन को दर्शाता है। बाएं वेंट्रिकल की यह वास्तु remodeling के (जैसे, प्रणालीगत धमनी उच्च रक्तचाप या महाधमनी एक प्रकार का रोग), या मात्रा अधिभार द्वारा दबाव अधिभार से, चोट (जैसे, रोधगलन) से प्रेरित है। वेंट्रिकुलर remodeling के दीवार तनाव को प्रभावित करता है, यह हृदय समारोह पर और दिल की विफलता के विकास पर गहरा प्रभाव पड़ता है। बाईं पूर्वकाल descendin की स्थायी बंधाव का एक मॉडलचूहों में जी कोरोनरी धमनी वेंट्रिकुलर remodeling और हृदय समारोह के बाद रोधगलन जांच करने के लिए प्रयोग किया जाता है। इस मॉडल को कोरोनरी धमनी उतरते बाईं पूर्वकाल के क्षणिक बंधाव के मॉडल की तुलना में उद्देश्यों और pathophysiological प्रासंगिकता के संदर्भ में मौलिक रूप से अलग है। Ischemia / reperfusion की चोट के बाद इस मॉडल में, रोधगलितांश की प्रारंभिक हद reperfusion की निम्नलिखित दौरे निस्तारण को प्रभावित करने वाले कारकों द्वारा संग्राहक जा सकता है। इसके विपरीत, कोरोनरी धमनी उतरते बाईं पूर्वकाल की स्थायी बंधाव के बाद 24 घंटे में रोधगलितांश क्षेत्र तय हो गई है। इस मॉडल में हृदय समारोह 1) रोधगलितांश विस्तार, रोधगलितांश चिकित्सा, और निशान गठन की प्रक्रिया से प्रभावित हो जाएगा; और 2) बाएं निलय फैलने, हृदय अतिवृद्धि, और वेंट्रिकुलर remodeling के सहवर्ती विकास।

कोरोनरी धमनी, आक्रामक hemodynamic विदेश मंत्रालय की तकनीक उतरते बाईं पूर्वकाल की स्थायी बंधाव के मॉडल के अलावाचूहों में surements विस्तार से प्रस्तुत किया है।

Protocol

नोट: इस खंड में वर्णित सभी प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं संस्थागत पशु की देखभाल और कथोलिएके युनिवार्सिटीट लोवेन के अनुसंधान सलाहकार समिति द्वारा अनुमोदित किया गया (परियोजना: 154/2013-बी डी गीस्ट)।

वाम पूर्वकाल अवरोही कोरोनरी धमनी के 1. स्थायी Ligation

  1. / किलोग्राम सोडियम pentobarbital के 70 मिलीग्राम से 40 मिलीग्राम / किग्रा की intraperitoneal प्रशासन द्वारा माउस anesthetize। यह अब एक फर्म पैर के अंगूठे चुटकी प्रतिक्रिया करता है जब माउस संज्ञाहरण की अपनी उचित विमान तक पहुँच जाता है सुनिश्चित करें। हमेशा उचित anesthetization किसी भी शल्य प्रक्रिया या हस्तक्षेप करने से पहले इस तरह की पुष्टि करें। संज्ञाहरण के तहत जबकि कॉर्निया का सूखापन को रोकने के लिए नेत्र मरहम चिकनाई का प्रयोग करें। प्रक्रिया (buprenorphine 0.05 मिलीग्राम / किग्रा वर्ग) के शुरू होने से पहले preoperative analgesia के 2-4 घंटा प्रदान करें।
    1. अस्तित्व सर्जरी के दौरान लगातार सड़न रोकनेवाला तकनीक को लागू करें। एक ज़्यादा से ज़्यादा जहां तक ​​संभव हो माइक्रोबियल चोर को रोकना है कि प्रक्रियाओं को लागूtamination महत्वपूर्ण संक्रमण या पीप आना उत्पन्न नहीं होती हैं। इन प्रक्रियाओं को इस साइट की शल्य साइट और कीटाणुशोधन से अधिक बाँझ उपकरणों और बाँझ सामग्री के उपयोग, शल्य चिकित्सा क्षेत्र की कीटाणुशोधन, और फर / बालों को हटाने शामिल हैं।
  2. एक स्वयं तैयार पा 20 गेज सुई के साथ माउस Intubate।
    1. सिर की hyperextension साथ लापरवाह स्थिति में माउस रखो।
      1. गर्दन क्षेत्र पर प्रकाश ध्यान दें। एक पा pincet साथ जीभ लिफ्ट। गला के प्रवेश द्वार स्पष्ट रूप से देखा जा सकता है।
      2. प्रत्यक्ष दृष्टि के तहत श्वासनली में गला के माध्यम से पा सुई से गुजरती हैं। वेंटीलेटर करने के लिए माउस को जोड़ने के द्वारा सही इंटुबैषेण आकलन (μl में स्ट्रोक मात्रा: 3 एक्स शरीर के वजन (छ) + 155; आवृत्ति: प्रति मिनट 120 स्ट्रोक)।
    2. वैकल्पिक रूप से, पहले ध्यान से श्वासनली उजागर द्वारा अंतःश्वासनलीय इंटुबैषेण के दृश्य में वृद्धि।
      1. एक 5 मिमी के मध्य गर्दन चीरा और वापस लेनाबस श्वासनली से ऊपर मांसपेशियों के ऊतकों।
      2. श्वासनली के प्रत्यक्ष दृश्य के लिए एक शल्य stereomicroscope का उपयोग इंटुबैषेण प्रदर्शन करते हैं। जीभ लिफ्ट और श्वासनली में स्वयं तैयार पा 20 गेज सुई दर्ज करें। वेंटीलेटर करने के लिए माउस को जोड़ने के द्वारा सही इंटुबैषेण पुष्टि (μl में स्ट्रोक मात्रा: 3 एक्स शरीर के वजन (छ) + 155; आवृत्ति: प्रति मिनट 120 स्ट्रोक)।
  3. लापरवाह स्थिति में माउस रखें और टेप के साथ माउस को ठीक। हाइपोथर्मिया को रोकने के लिए एक हीटिंग पैड पर सर्जरी प्रदर्शन।
    1. दाढ़ी और betadine के साथ त्वचा कीटाणुरहित। बाएं पिछले अंग सर्जरी के दौरान बाएं वेंट्रिकल पर एक बेहतर विचार प्राप्त करने के लिए सही हिंद अंग पार कि अपना ध्यान रखना।
  4. उरोस्थि अप करने के लिए एक छोटा सा अनुप्रस्थ त्वचीय चीरा और अंतर्निहित त्वचा और मांसपेशियों को अलग।
  5. एम तरफ खींच लें। वक्षपेशी नाबालिग और एम। 5-0 रेशम सीवन के साथ प्रमुख वक्षपेशी।
  6. एक मैं बनाओएक पा pincet डालने से तीसरे पसलियों के बीच अंतरिक्ष में ncision।
  7. उरोस्थि तक पहुँच जाता है जब तक औसत दर्जे के लिए पार्श्व से पसलियों के बीच मांसपेशियों के तहत pincet ले जाएँ। त्वचा के लिए अंदर से pincet धक्का द्वारा वक्ष दीवार पंचर। ध्यान से बस एक छोटी सी कैंची के साथ pincet से ऊपर पसलियों के बीच मांसपेशियों में कटौती करके thoracotomy को पूरा करें। फेफड़ों के puncturing रोकने के लिए इस तकनीक का प्रयोग करें।
  8. फेफड़ों की रक्षा के लिए गुहा में 0.9% सोडियम क्लोराइड में डूबे एक स्पंज डाल दिया। दिल की बाईं ओर के लोगों तक पहुंचाने के प्राप्त करने के लिए पसलियों के बीच अंतरिक्ष में एक घाव स्प्रेडर (छाती प्रतिकर्षक) परिचय। अब के रूप में, बाएं आलिंद, बाएं वेंट्रिकल, और कोरोनरी धमनी उतरते बाईं पूर्वकाल stereomicroscope के तहत दिखाई दे रहे हैं।
  9. बाएं आलिंद की नोक के तहत 1 मिमी के बारे में एक भी 6-0 Prolene संयुक्ताक्षर साथ कोरोनरी धमनी उतरते बाईं पूर्वकाल के बंधाव प्रदर्शन करते हैं। यह पहला विकर्ण शाखा से बाहर का है।
    नोट: वैकल्पिक रूप से, 7-0 (00.05 मिमी व्यास) या 8-0 धागे (0.04 मिमी व्यास) का इस्तेमाल किया जा सकता है। सुई एक सी एक 13 मिमी 08/03 सर्कल टेपर प्वाइंट सुई है। कोरोनरी धमनी उतरते बाईं पूर्वकाल के सफल बंधाव प्रभावित क्षेत्र में एक पीला दिखने के मायोकार्डियम, जिसके परिणामस्वरूप तत्काल मलिनकिरण लाती है।
  10. घाव स्प्रेडर (छाती प्रतिकर्षक) निकालें।
    1. पसलियों के बीच अंतरिक्ष के चारों ओर तीन 6-0 तिवारी क्रॉन टांके रखें। टांके कस पहले, छाती गुहा से स्पंज को हटाने और वेंटीलेटर की बहिर्वाह अवरुद्ध करके फेफड़ों फिर से विस्तार। ऐसा करके, फेफड़ों पार्श्विका फुस्फुस का आवरण के साथ जोड़ने।
    2. इसके बाद, तंग टांके खींचने के लिए और छाती पर नीचे दबाने से फिर से विस्तार दोहराएँ। (छाती पर दबाव लागू करने के लिए जब कोई हवाई बुलबुले में देखा जाना चाहिए) खारा की एक छोटी राशि का उपयोग कर छाती के सफल बंद होने की पुष्टि करें।
    3. फेफड़े के सामान्य विस्तार पुष्टि करने के लिए पसलियों के बीच मांसपेशियों के माध्यम से देखो। , दोनों वक्षपेशी मांसपेशियों का स्थान बदलें एक के रूप में सेवारतएक वातिलवक्ष की रोकथाम के लिए अतिरिक्त बाधा।
  11. 5-0 सिल्क sutures के साथ त्वचा को बंद करें।
  12. वेंटीलेटर से माउस डिस्कनेक्ट और हीटिंग पैड पर वसूली की अनुमति है। यह sternal अवलंबन बनाए रखने के लिए पर्याप्त होश आ गया है जब तक पहुंच के बाहर एक जानवर मत छोड़ो। पूरी तरह से ठीक है जब तक अन्य जानवरों की कंपनी के लिए सर्जरी आया है कि एक जानवर वापस नहीं करते।
  13. लगातार पश्चात analgesia (सर्जरी के बाद कम से कम 48 घंटे के लिए buprenorphine 0.05 मिलीग्राम / किग्रा वर्ग बोली) प्रदान करते हैं।

चूहे में 2. में विवो इनवेसिव hemodynamic माप

  1. प्रक्रिया से पहले, संकेत बहाव को कम करने के लिए कम से कम 30 मिनट के लिए 37 डिग्री सेल्सियस पर बाँझ पानी में 1.0 फ्रेंच मिलर दबाव कैथेटर डूब। इलेक्ट्रॉनिक रूप से 2000 हर्ट्ज पर 0 मिमी पारा और 100 मिमी पारा पर दबाव सेंसर और डेटा रिकॉर्ड जांचना।
  2. 1.4 ग्राम / किलो urethane की intraperitoneal प्रशासन द्वारा संज्ञाहरण प्रदर्शन करते हैं। जाँच करें कियह अब एक फर्म पैर के अंगूठे चुटकी प्रतिक्रिया करता है जब माउस संज्ञाहरण की अपनी उचित विमान तक पहुँचता है।
  3. लापरवाह स्थिति में anesthetized माउस रखें। टेप के साथ अपने अंगों को सुरक्षित करो। एक हीटिंग पैड के साथ शरीर के तापमान को बनाए रखने और एक गुदा जांच के साथ निगरानी। गर्दन क्षेत्र दाढ़ी और थायरॉयड ग्रंथि को बेनकाब करने के लिए गर्दन के क्षेत्र में एक midline चीरा बनाते हैं।
  4. तुला सुइयों के साथ गर्दन को ठीक करें।
  5. लार ग्रंथि एक तरफ खींचने के लिए और सही आम मन्या धमनी बेनकाब। एक सफेद धागा जो जैसा दिखता है वेगस तंत्रिका, धमनी के साथ निहित है। ध्यान से एक घुमावदार संदंश का उपयोग वेगस तंत्रिका से कैरोटिड धमनी अलग।
  6. अन्य ऊतकों से अलग करने का अधिकार आम मन्या धमनी के तहत एक घुमावदार संदंश गुजरती हैं। धमनी के आसपास संयोजी ऊतक निकालें।
  7. सही आम मन्या धमनी के तहत दो 6-0 रेशम के तारों से गुजरती हैं। करीब सिर, की दिशा में रखा गया है, जो शीर्ष तार, पर एक तंग गाँठ बना है, और एक कोचर (डिस्टल पूर्णावरोधक बंधाव) के साथ तय कर लो। Proxi दर्रामल तार दो बार से सही करने के लिए छोड़ दिया और दो kochers (समीपस्थ गैर पूर्णावरोधक तार) के साथ तय कर लो।
  8. बाँझ 0.9% सोडियम क्लोराइड छोड़ने के द्वारा नम मन्या धमनी रखें। रुई से अतिरिक्त तरल बंद सूखी।
  9. बाहर का बंधाव और समीपस्थ गैर पूर्णावरोधक तार के बीच एक 26 गेज सुई के साथ सही आम मन्या धमनी में एक चीरा बनाओ।
  10. धमनी में प्रेशर सेंसर का परिचय। कोई खून की कमी है कि वहाँ की जाँच करें। धीरे आगे 1.0 फ्रेंच मिलर दबाव कैथेटर धक्का और कैथेटर हंसली के तहत तार के माध्यम से ध्यान से पारित कर सकते हैं कि इस तरह से समीपस्थ गैर पूर्णावरोधक तार समायोजित करें।
    1. समीपस्थ गैर पूर्णावरोधक तार के समायोजन के दौरान रक्त नुकसान को कम। इसे बहुत ही कमजोर है के बाद से आगे बढ़ रहा है, जबकि बहुत अधिक दबाव सेंसर सेक मत करो। समीपस्थ तार धमनी रोक देना नहीं चाहिए, पोत खून से भरा रहना चाहिए।
  11. दबाव संकेत रिकॉर्डिंग शुरू करो। एक धमनी दबाव संकेत fluctuat70 मिमी पारा और 100 का एक सिस्टोलिक दबाव - - 120 मिमी पारा 60 के एक डायस्टोलिक दबाव के बीच एक स्वस्थ माउस में तों।
  12. अनामी धमनी के माध्यम से और बाएं वेंट्रिकल में महाधमनी के माध्यम से कैथेटर प्रत्यक्ष। 120 मिमी पारा - निलय दबाव 0 मिमी पारा और 100 के बीच उतार चढ़ाव होता रहता। कैथेटर बाएं वेंट्रिकल के अंदर स्थिर करने की अनुमति दें। प्रयोगात्मक आवश्यकताओं के आधार पर 60 मिनट के लिए 30 मिनट के लिए संकेत रिकॉर्ड।
  13. प्रयोग के पूरा होने के बाद, 30 मिनट के लिए Alconox 1% में कैथेटर लेना। मिल्ली क्यू पानी के साथ कैथेटर धो लें। एक फोम ब्लॉक में कैथेटर स्टोर।
  14. आगे के विश्लेषण के लिए रिकॉर्डिंग सॉफ्टवेयर से डेटा प्राप्त करें।
    1. डेटा विश्लेषण के लिए, दबाव संकेत स्थिर है, जहां एक समय अंतराल पर विचार करें। ब्याज की दर्ज आंकड़ों के कम से कम लगातार 10 हृदय चक्र चुनें।
    2. दिल की दर, अधिक से अधिक सिस्टोलिक बाएं निलय दबाव, कम से कम डायस्टोलिक बाईं ventr विश्लेषण करने के लिए LabChart सॉफ्टवेयर संस्करण 8.0 या इसी तरह का प्रयोग करेंicular दबाव, isovolumetric बाएं निलय संकुचन (डी पी / डीटी अधिकतम), isovolumetric बाएं निलय छूट (डी पी / डीटी मिनट), अंत डायस्टोलिक बाएं निलय दबाव के शिखर दर की उच्चतम दर है, और isovolumetric बाएं निलय के निरंतर समय दबाव गिरावट (ताऊ) 7।
      नोट: अंत डायस्टोलिक दबाव तुरंत isovolumetric संकुचन से प्रेरित दबाव भारी उछाल से पहले समय-बिंदु पर दबाव से मेल खाती है। ताऊ की गणना एक monoexponential क्षय की अवस्था में बाएं निलय दबाव ढाले पर आधारित है, पी (टी) के रूप में व्यक्त इस सूत्र में, पी 0 ई आयकर / ताऊ + ख =, पी (टी) समय पर बाएं निलय दबाव है डी पी / डीटी के अधिक से अधिक नकारात्मक मूल्य के बाद टी पर पहुंच गया है। पैरामीटर बी एक सरलीकृत दृष्टिकोण में शून्य माना जा सकता है जो सैद्धांतिक asymptote, से मेल खाती है। बढ़ी isovolumetric छूट ताऊ के एक छोटे मूल्य में यह परिणाम है।

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Representative Results

रोधगलन की हद तक इवांस नीले / 2,3,5-triphenyltetrazolium क्लोराइड (टीटीसी) डबल धुंधला द्वारा मूल्यांकन किया जा सकता है। टीटीसी एनएडीएच 8 की उपस्थिति में विभिन्न dehydrogenases की गतिविधि के कारण ऊतकों रहने में गहरे लाल 1,3,5-triphenylformazan में बदल जाती है, जो एक redox सूचक है। 1 24 घंटा के बाद कम से दिल के एक प्रतिनिधि खंड से पता चलता है कोरोनरी धमनी उतरते बाईं पूर्वकाल के बंधाव। ब्लू-दाग क्षेत्रों गैर इस्कीमिक / सामान्य क्षेत्रों से संकेत मिलता है। खतरे में दौरे क्षेत्र कोरोनरी धमनी उतरते बाईं पूर्वकाल के बंधाव से distally बिस्तर छिड़काव के भीतर दौरे ऊतक के रूप में परिभाषित किया गया है। नकारात्मक दाग क्षेत्रों (लाल पीला) infarcted क्षेत्रों से संकेत मिलता है जबकि गहरे लाल दाग क्षेत्रों इस्कीमिक लेकिन व्यवहार्य क्षेत्रों (जोखिम में गैर infarcted क्षेत्र) क्षेत्रों से संकेत मिलता है। इस मॉडल में, खतरे में गैर infarcted क्षेत्र वीं की स्थायी चरित्र को दर्शाता है जो इस छवि में नगण्य है और नहीं दिख रहा हैकोरोनरी धमनी उतरते बाईं पूर्वकाल के ई बंधाव। कुल बाएं निलय दीवार क्षेत्र 9,10 के 60% - infarcted क्षेत्र आमतौर पर 50 के बीच है। रोधगलितांश क्षेत्र के विकास में दो घटकों discerned किया जाना चाहिए: 1) रोधगलितांश के तीन आयामी ज्यामिति) रोधगलितांश की कुल मात्रा एक पतली लेकिन और अधिक बढ़ाया रोधगलन के लिए अग्रणी रोधगलितांश विस्तार का एक परिणाम के रूप में परिवर्तन, और 2 मई घाव संकुचन और निशान गठन के साथ चिकित्सा की प्रक्रिया को दर्शाता है, जो कम हो सकती है।

रोधगलितांश विस्तार रोधगलितांश लंबाई और रोधगलितांश मोटाई 10 की समय-कोर्स का मूल्यांकन द्वारा मात्रा निर्धारित किया जा सकता है। चित्रा 2 में दिखाया गया है एक प्रतिनिधि सीरियस लाल कोरोनरी धमनी उतरते बाईं पूर्वकाल की स्थायी बंधाव के बाद 28 दिन में एक दिल के पार अनुभाग दाग। छवि काफी हद तक बढ़ाया गया है कि एक रोधगलितांश पता चलता है। एक पार अनुभाग में, इस विस्तार Absolu की वृद्धि से मेल खाती हैते रोधगलितांश लंबाई और रोधगलितांश मोटाई की कमी आई।

तीन आयामी ज्यामिति और रोधगलितांश की मात्रा पर विचार करने के अलावा, रोधगलितांश मानकों की व्याख्या करने के संबंध में एक और चेतावनी माना जाना चाहिए। व्यवहार्य दौरे ऊतक भी अतिवृद्धि से गुजरना होगा के बाद से, यह कुल बाएं निलय दीवार क्षेत्र बनाम रोधगलितांश क्षेत्र के अनुपात समय के एक समारोह के रूप में कम हो जाएगा कि स्पष्ट है। रोधगलितांश क्षेत्र के अनुदैर्ध्य परिवर्तन का आकलन इसलिए निरपेक्ष मापदंडों और रिश्तेदार मापदंडों के बीच के अंतर में एक स्पष्ट जानकारी की आवश्यकता है।

एक धमनी और निलय दबाव रजिस्टर में 3 चित्र में दिखाया गया है। कैथेटर, हृदय गति, अधिक से अधिक सिस्टोलिक बाएं निलय दबाव, कम से कम डायस्टोलिक बाएं निलय दबाव, isovolumetric बाएं निलय संकुचन (डी पी / डीटी अधिकतम) के शिखर दर, अंत के स्थिरीकरण के बाद -diastolic बाएं निलय दबाव, और टीisovolumetric बाएं निलय छूट (डी पी / डीटी मिनट) का वह शिखर दर निर्धारित कर रहे हैं। isovolumetric बाएं निलय दबाव गिरावट (ताऊ) के समय लगातार वेइस एट अल। 7 की विधि का उपयोग मात्रा निर्धारित है।

चित्रा 1
चित्रा जोखिम और रोधगलितांश आकार में क्षेत्र के 1. आकलन रोधगलन के बाद एक दिन। बाएं से छवियों को सही दिल के आधार पर हृदय शीर्ष से चले जाओ। 24 घंटा कोरोनरी धमनी उतरते बाईं पूर्वकाल की स्थायी बंधाव के बाद, इवांस नीले रंग के 2 मिलीलीटर perfused मायोकार्डियम की मात्रा यों को महाधमनी में एक सांस के रूप में इंजेक्ट किया गया था। दिल बाद में CdCl का इंजेक्शन द्वारा पाद लंबा में (100 μl; 0.1 एन) को गिरफ्तार किया गया, अतिरिक्त नीले रंग की डाई बाहर धोने के लिए शारीरिक खारा के साथ प्लावित कर रहे थे, और 5% कम बीच बढ़िया तालमेल तापमान agarose में एम्बेडेड थे। वायु सेनाterwards, 500 माइक्रोन मोटी पार वर्गों एक एचएम 650 वी कंपन microtome का उपयोग किया गया और स्लाइस फिर 37 डिग्री सेल्सियस पर 30 मिनट के लिए आइसोटोनिक फॉस्फेट बफर (7.4 पीएच) युक्त एक 1.5% 2,3,5-triphenyltetrazolium क्लोराइड में incubated रहे थे। छवियाँ एक स्टीरियो Lumar V.12 माइक्रोस्कोप का उपयोग किए गए थे। infarcted ऊतक, खतरे में लाल दाग गैर infarcted क्षेत्र है, और नीले रंग से सना हुआ गैर इस्कीमिक स्वस्थ निलय दीवार क्षेत्र के नकारात्मक दाग क्षेत्र छवि जम्मू सॉफ्टवेयर का उपयोग मात्रा निर्धारित किया गया। स्केल बार 0.5 मिमी का प्रतिनिधित्व करता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 2
चित्रा 2. प्रतिनिधि सीरियस लाल कोरोनरी धमनी उतरते बाईं पूर्वकाल के ligation के बाद 28 दिन में एक दिल के पार अनुभाग दाग। Imagबाएं से तों सही दिल के आधार पर हृदय शीर्ष से चले जाओ। Junqueira एट अल। 11 के मानक प्रोटोकॉल सीरियस लाल धुंधला के लिए लागू किया गया था। इस histochemical विधि तंतुमय रोधगलितांश ऊतक गहरे लाल और स्वस्थ ऊतकों को नारंगी दाग। स्केल बार 1 मिमी का प्रतिनिधित्व करता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 3
सामान्य चूहों की कैथीटेराइजेशन के बाद प्राप्त चित्रा 3. धमनी (ए) और बाएं निलय (बी) के दबाव रजिस्टरों। एक धमनी संकेत और एक निलय संकेत के बीच स्पष्ट अंतर उत्तरार्द्ध संकेत पाद लंबा दौरान लगभग 0 मिमी पारा की बूँदें है। LVP: बाएं निलय दबाव।

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Discussion

दौरे संरचना और समारोह में लगातार परिवर्तन, दिल की विफलता के लिए बाएं निलय में शिथिलता के विकास, और प्रगति के कई murine मॉडल 12 में जांच की जा सकती है। कार्डिएक remodeling और शिथिलता दौरे चोट से प्रेरित या दबाव से महाधमनी कसना अनुप्रस्थ करने के लिए माध्यमिक अधिभार, या फैली हुई cardiomyopathy 12 के आनुवंशिक मॉडल में जांच की जा सकती है किया जा सकता है। जाहिर है, murine मॉडल की सबसे स्पष्ट लाभ ट्रांसजेनिक और सेल प्रकार विशिष्ट और inducible ट्रांसजेनिक मॉडल सहित नाक आउट उपभेदों की एक बड़ी संख्या की उपलब्धता है। इन मॉडलों में कार्डियक remodeling के मूल्यांकन काफी दबाव मात्रा पाश विश्लेषण के लिए ultrahigh संकल्प 2D- और 3 डी-इकोकार्डियोग्राफी, माइक्रो-चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग, micromanometry का उपयोग कर hemodynamic मूल्यांकन, और micromanometer प्रवाहकत्त्व प्रौद्योगिकी जैसी प्रौद्योगिकियों के विकास के द्वारा सुविधा दी गई है। इस रिपोर्ट में, हम आधुनिक विपणन पर ध्यान केंद्रित किया हैदौरे की चोट के एल बाएं निलय micromanometry द्वारा कोरोनरी धमनी और बाएं निलय समारोह के मूल्यांकन उतरते बाईं पूर्वकाल की स्थायी बंधाव द्वारा प्रेरित किया।

रोधगलन के पहले murine मॉडल Zolotareva एट अल 13 द्वारा 1978 में वर्णित किया गया था। स्थायी रोड़ा का यह मॉडल स्पष्ट रूप से पहले माइकल एट अल 14 द्वारा बताया गया था कि कोरोनरी धमनी उतरते बाईं पूर्वकाल के क्षणिक रोड़ा की murine मॉडल से discerned किया जाना चाहिए। यह बाद मॉडल स्थायी बंधाव के बाद रोधगलन हृदय remodeling के pathophysiology अध्ययन करने के लिए लागू किया जाता है, जबकि ischemia-reperfusion चोट और मायोकार्डियल उबार जांच करने के लिए प्रयोग किया जाता है।

चूहों की कोरोनरी धमनी पेड़ मनुष्य 15-17 की तुलना में अलग है। माउस में सेप्टल कोरोनरी धमनी की मूल 15-17 में चर रहा है। यह सही कोरोनरी की गिरफ्तारी की एक शाखा के रूप में प्रतिष्ठित उठता18,19 tery, लेकिन यह भी, या असाधारण बाईं कोरोनरी धमनी 16 से Valsalva 17 का सही साइनस में एक अलग ओस्तियम से उत्पन्न हो सकती है। कोरोनरी धमनी पेड़ की शारीरिक रचना से थोड़ा अलग उपभेदों के बीच 20 अलग हो सकता है। हालांकि, यह अग्रपाश्विक, पीछे, और प्रोटोकॉल के द्वारा प्रदर्शन किया और 15,17 इकोकार्डियोग्राफी के रूप में दिल के शिखर क्षेत्रों को शामिल प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य बड़े infarctions में बाईं अलिंद परिणामों के तहत तुरंत उभर के रूप में कोरोनरी धमनी उतरते बाईं पूर्वकाल के बंधाव। महत्वपूर्ण बात है, पट अलग सेप्टल कोरोनरी धमनी की उपस्थिति को दर्शाता है जो रोधगलन, से बच रहा है। चूहों के विपरीत, मानव में पट की रक्त की आपूर्ति मुख्य रूप से कोरोनरी धमनी 21 उतरते बाईं पूर्वकाल की शाखाओं द्वारा प्रदान की जाती है। शरीर रचना विज्ञान में यह अंतर और चूहों में पट के परिणामस्वरूप बख्शते दिल के पुनर्गठन को प्रभावित करेगा।

परिणाम में कहा गया हैएस अनुभाग, चूहों में कोरोनरी धमनी उतरते बाईं पूर्वकाल के बंधाव बाएं वेंट्रिकल 9,10 के 50% से 60% शामिल है कि एक बड़े रोधगलन लाती है। चूहों में रोधगलन के बाद पहले दो हफ्तों में निलय टूटना की घटना 22,23 अक्सर होता है। रोधगलन की इस जटिलता तनाव पर निर्भर है और मादा चूहों 22 में से नर चूहों में काफी अधिक अक्सर होता है। इसके अलावा, निलय टूटना normocholesterolemia 9 की शर्तों के तहत की तुलना में hypercholesterolemic चूहों में अधिक बार होता है। चूहों में निलय टूटना की घटना को सही परिप्रेक्ष्य में रखा जाना चाहिए। सब से पहले, इस जटिलता रोधगलितांश विस्तार की एक मिसाल है। रोधगलितांश सेगमेंट की यह आय से अधिक thinning और फैलने न केवल दौरे टूटना लाती है लेकिन यह भी हृदय remodeling के लिए और congestive दिल की विफलता 24-27 के लिए एक ट्रिगर है। इस प्रकार, दौरे टूटना की आवृत्ति हैरोधगलितांश विस्तार की डिग्री के लिए और इस तरह चूहों जीवित में कार्डियक remodeling और हृदय रोग के विकास की हद तक के लिए एक संकेतक।

निलय टूटना के संबंध में दूसरा महत्वपूर्ण विचार कार्यात्मक या संरचनात्मक डेटा एक हस्तक्षेप अध्ययन 10 में दो समूहों के बीच तुलना कर रहे हैं जब खाते में अस्तित्व पूर्वाग्रह लेने की आवश्यकता है। यह निलय टूटना का शिकार होगा सबसे स्पष्ट रोधगलितांश विस्तार के साथ चूहों कि कल्पना करने के लिए उचित है। दो समूहों के बीच जीवित रहने की दर की एक महत्वपूर्ण अंतर के मामले में, एक चूहों कार्यात्मक या संरचनात्मक विश्लेषण से बाहर रखा गया है कि मारे गए बारे में पता होना चाहिए। नतीजतन, पूर्वाग्रह एक विशिष्ट समय-बिंदु पर जीवित चूहों के किसी भी तुलना में पेश किया है।

ऊपर चर्चा की, कई विभिन्न प्रौद्योगिकियों रोधगलन के बाद हृदय की remodeling के मूल्यांकन करने के लिए उपलब्ध हैं। हालांकि, उन्नत और जटिल प्रौद्योगिकियों की उपलब्धताकई जांचकर्ताओं के लिए सीमित किया जा सकता है। आम मन्या धमनी के माध्यम से शुरू की एक micromanometer दबाव सेंसर का उपयोग hemodynamic मूल्यांकन अपेक्षाकृत सरल और अन्य प्रौद्योगिकियों की तुलना में काफी कम खर्चीला है। हालांकि, यह बाएं निलय micromanometry की व्याख्या करने के लिए निहित सीमाएं हैं कि जोर दिया जाना चाहिए। इसके विपरीत, निलय दबाव मात्रा रिश्तों के विश्लेषण (जैसे, प्रवाहकत्त्व micromanometry का उपयोग) बरकरार हृदय समारोह 28 मूल्यांकन करने के लिए सबसे कठोर और व्यापक दृष्टिकोण का गठन किया। हृदय समारोह को मापने के लिए दबाव मात्रा कार्यप्रणाली का अनूठा लाभ यह है कि स्वतंत्र रूप से लदान की स्थिति की और हृदय की दर 29 से बाएं निलय प्रदर्शन के अधिक विशिष्ट माप सक्षम बनाता है।

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Buprenorphine (Buprenex) Bedford Laboratories
Sodium Pentobarbital (Nembutal) Ceva
Betadine VWR internationals 200065-400
5 - 0 silk suture Ethicon, Johnson & Johnson Medical K890H
6 - 0 prolene suture  Ethicon, Johnson & Johnson Medical F1832
6 - 0 Ti- Cron suture Ethicon, Johnson & Johnson Medical F1823
Urethane  Sigma 94300
Alconox Alconox Inc.
Ventilator, MiniVent Model 845 Hugo Sachs 73-0043
Chest retractor or Thorax retractor Kent Scientific corporation INS600240 ALM Self-retaining, serrated, 7 cm long, 4 x 4 "L" shaped prongs, 3 mm x 3 mm
1.0 French Millar pressure catheter  Millar Instruments  SPR - 1000/NR
Powerlab ADInstruments Pty Ltd.
LabChart® software ADInstruments Pty Ltd.
Rectal probe ADInstruments Pty Ltd.

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References

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चिकित्सा अंक 94 रोधगलन हृदय remodeling रोधगलितांश विस्तार दिल की विफलता हृदय समारोह आक्रामक hemodynamic माप
चूहे में वाम पूर्वकाल अवरोही कोरोनरी धमनी के स्थायी Ligation: पोस्ट-रोधगलन पुनर्गठन और दिल की विफलता का एक मॉडल
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Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F.,… More

Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F., De Geest, B. Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure. J. Vis. Exp. (94), e52206, doi:10.3791/52206 (2014).

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