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Medicine

Permanent Ligation des linken vorderen absteigenden Koronararterie bei Mäusen: Ein Modell der Post-Myokardinfarkt Umbau und Herzinsuffizienz

Published: December 2, 2014 doi: 10.3791/52206

Abstract

Herzinsuffizienz ist ein Syndrom, bei dem das Herz nicht Blut bei einer Rate mit zellulären Sauerstoffbedarf in Ruhe oder unter Belastung zu pumpen. Es wird von Flüssigkeitsretention, Kurzatmigkeit und Müdigkeit, insbesondere bei Belastung gekennzeichnet. Herzinsuffizienz ist ein wachsendes Problem der öffentlichen Gesundheit, die häufigste Ursache für Krankenhausaufenthalt und eine der Hauptursachen der Sterblichkeit. Ischämische Herzerkrankung ist die Hauptursache der Herzinsuffizienz.

Remodeling bezeichnet Änderungen der Struktur, Größe und Form des linken Ventrikels. Diese architektonischen Remodellierung des linken Ventrikels durch Verletzung (zB Myokardinfarkt) induziert, die durch Drucküberlastung (zB arterielle Hypertonie oder Aortenstenose) oder durch Volumenüberlastung. Seit Remodeling wirkt Wandspannung, es hat eine tiefgreifende Wirkung auf die Herzfunktion und auf die Entwicklung einer Herzinsuffizienz. Ein Modell der permanenten Ligatur der linken vorderen descending Koronararterie bei Mäusen wird verwendet, um ventrikuläre Remodeling und die Herzfunktion nach einem Myokardinfarkt zu untersuchen. Dieses Modell ist in Bezug auf die Ziele und die pathophysiologische Relevanz im Vergleich zum Modell der vorübergehenden Unterbindung der linken vorderen absteigenden Koronararterie grundlegend anders. In diesem letzteren Modell der Ischämie / Reperfusionsverletzung, kann das anfängliche Ausmaß des Infarkts durch Faktoren, Myocardial Salvage nach Reperfusion beeinträchtigt moduliert werden. Im Gegensatz dazu ist der Infarktbereich bei 24 Stunden nach der Dauerunterbindung der linken vorderen absteigenden Koronararterie befestigt. Die Herzfunktion in diesem Modell wird durch 1) den Prozess der Infarktausdehnung, Infarkt Heilung und Narbenbildung beeinträchtigt werden; und 2) die gleichzeitige Entwicklung der Dilatation des linken Ventrikels, Herzhypertrophie und Remodeling.

Neben dem Modell der permanenten Ligatur der linken vorderen absteigenden Koronararterie, die Technik der invasive hämodynamische measungen bei Mäusen wird im Detail vorgestellt.

Protocol

HINWEIS: Alle in diesem Abschnitt beschriebenen experimentellen Verfahren wurden von der Institutional Animal Care und Forschung Beirat der Katholieke Universiteit Leuven genehmigt (Projekt: 154/2013-B De Geest).

1. Ständige Ligation des linken vorderen absteigenden Koronararterie

  1. Anesthetize die Maus durch intraperitoneale Verabreichung von 40 mg / kg bis 70 mg / kg Natriumpentobarbital. Stellen Sie sicher, die Maus an ihre richtige Ebene der Anästhesie, wenn es nicht mehr einen festen Zehe Prise reagiert. Überprüfen Sie stets die ordnungsgemäße Betäubung auf diese Weise vor jedem chirurgischen Eingriff oder Intervention. Verwenden Sie Schmieraugensalbe zur Trockenheit der Hornhaut während der Narkose zu verhindern. Bereitzustellen präoperative Analgesie 2-4 h vor dem Start des Verfahrens (Buprenorphin 0,05 mg / kg SQ).
    1. Bewerben konsequente aseptische Technik bei Überleben Chirurgie. Umsetzung von Verfahren, die zu einem maximal möglichen Ausmaß mikrobieller con hemmenVerschmutzung, so dass signifikante Infektion oder Eiterung nicht auftritt. Diese Verfahren umfassen die Verwendung von sterilen Instrumenten und sterilen Materialien, Desinfektion der OP-Bereich, und die Entfernung von Fell / Haar über der Operationsstelle und Desinfektion dieser Website.
  2. Intubieren Sie die Maus mit einem selbst zubereiteten abgestumpft 20-Gauge-Nadel.
    1. Sie mit der Maus in Rückenlage mit Überstreckung des Kopfes.
      1. Stellen Sie das Licht auf den Halsbereich. Heben Sie die Zunge mit einer stumpfen Pinzette. Der Eingang des Kehlkopfes ist deutlich zu erkennen.
      2. Übergeben Sie die stumpfe Nadel durch den Kehlkopf in die Luftröhre unter direkter Sicht. Beurteilen Sie korrekte Intubation, indem Sie die Maus an das Beatmungsgerät (Schlagvolumen in ul: 3 x Körpergewicht (g) + 155; Frequenz: 120 Hübe pro Minute).
    2. Alternativ zu verbessern Visualisierung der Intubation, indem Sie zuerst sorgfältig Freilegung der Luftröhre.
      1. Machen Sie eine 5 mm Mitte der Halsschnitt und einfahrenMuskelgewebe knapp oberhalb der Luftröhre.
      2. Führen Sie die Intubation mit einem OP-Stereomikroskop für die direkte Visualisierung der Luftröhre. Heben Sie die Zunge und geben Sie den selbst zubereiteten abgestumpft 20-Gauge-Nadel in die Luftröhre. Bestätigen der ordnungsgemäßen Intubation, indem Sie die Maus an das Beatmungsgerät (Schlagvolumen in ul: 3 x Körpergewicht (g) + 155; Frequenz: 120 Hübe pro Minute).
  3. Halten Sie die Maus in Rückenlage und fixieren Sie die Maus mit Klebeband. Führen der Operation auf einem Heizkissen zu Unterkühlung zu verhindern.
    1. Rasur und desinfizieren Sie die Haut mit Betadine. Darauf achten, dass der linke Hinterbein kreuzt die rechte Hintergliedmaße, um eine bessere Sicht auf die linke Herzkammer während der Operation zu erhalten.
  4. Machen Sie einen kleinen Querhautschnitt bis zum Brustbein und trennen Sie die darunter liegende Haut und Muskeln.
  5. Ziehen Sie abgesehen von der m. pectoralis minor und m. pectoralis major mit einem 5-0 Seidennaht.
  6. Machen Sie ein incision im dritten Zwischenrippenraum, indem Sie einen stumpfen Pinzette.
  7. Bewegen Sie den pincet unter den Zwischenrippenmuskeln von lateral nach medial, bis das Brustbein erreicht ist. Punktion der Brustwand, indem Sie den pincet von innen auf die Haut. Füllen Sie das Thorakotomie durch vorsichtiges Schneiden der Zwischenrippenmuskel direkt über dem pincet mit einer kleinen Schere. Mit dieser Technik können Punktion der Lunge zu verhindern.
  8. Bringe einen Schwamm in 0,9% NaCl eingetaucht in den Hohlraum, um die Lungen zu schützen. Einführen eines Wundspreizer (Brust Retraktor) in den Interkostalraum, um die Exposition der linken Seite des Herzens zu erhalten. Ab jetzt der linke Vorhof, den linken Ventrikel und die linke vordere absteigende Koronar-Arterie unter dem Stereomikroskop sichtbar.
  9. Durchführen einer Unterbindung der linken vorderen absteigenden Koronararterie mit einem einzigen 6-0 Prolene Ligatur etwa 1 mm unter der Spitze des linken Atriums. Dies ist distal von der ersten Diagonalzweig.
    HINWEIS: Alternativ 7-0 (0.05 Mm Durchmesser) oder 8-0 Fäden (0,04 mm Durchmesser) verwendet werden können. Die Nadel ist ein C-1 13 mm 3/8 Kreis Nadel mit abgeschrägter Spitze. Erfolgreiche Ligation des linken vorderen absteigenden Koronararterie induziert sofortige Entfärbung, was zu einem blasserscheine Myokard in dem betroffenen Gebiet.
  10. Entfernen Sie die Wundspreizer (Brust Aufroller).
    1. Platzieren Sie drei 6-0 Ti-Cron Nähte auf der Zwischenrippenraum. Vor dem Anziehen der Fäden, entfernen Sie den Schwamm aus der Brusthöhle und wieder auszubreiten die Lunge durch die Blockierung der Abfluss von dem Beatmungsgerät. Auf diese Weise verbinden die Lungen mit der Pleura parietalis.
    2. Anschließend eng ziehen die Fäden und wiederholen Wiederausdehnung durch Drücken auf der Brust. Bestätigen den erfolgreichen Abschluss des Thorax unter Verwendung einer kleinen Menge an Salzlösung (keine Luftblasen, wenn Druck auf die Brust zu sehen).
    3. Schauen Sie durch den Zwischenrippenmuskel, um normale Ausdehnung der Lunge zu bestätigen. Positionieren Sie die beiden Brustmuskeln, als dienzusätzliche Barriere für die Verhinderung eines Pneumothorax.
  11. Schließen Sie die Haut mit 5-0 Seidennahtmaterial.
  12. Trennen Sie die Maus vom Beatmungsgerät und eine Wiederherstellung auf dem Heizkissen. Sie ein Tier nicht unbeaufsichtigt lassen, bis er wieder zu sich kam, um ausreichende Brustlage zu halten. Sie ein Tier, das der Operation an die Firma von anderen Tieren unterzogen wurde, bis vollständig erholt nicht zurück.
  13. Konsequent bieten postoperativen Analgesie (Buprenorphin 0,05 mg / kg SQ BID für mindestens 48 Stunden nach der Operation).

2. In-vivo-invasive hämodynamische Messungen an der Maus

  1. Vor dem Eingriff Tauchen Sie das 1.0 Französisch Millar Druckkatheter in sterilem Wasser bei 37 ° C für mindestens 30 Minuten, um die Signaldrift zu minimieren. Elektronisch des Drucksensors bei 0 mm Hg und 100 mm Hg und Aufzeichnungsdaten bei 2.000 Hz kalibrieren.
  2. Führen Anästhesie durch intraperitoneale Verabreichung von 1,4 g / kg Urethan. Überprüfen Sie, obdie Maus an ihre richtige Ebene der Anästhesie, wenn es nicht mehr einen festen Zehe Prise reagiert.
  3. Setzen Sie den narkotisierten Maus in Rückenlage. Sichern Sie ihre Gliedmaßen mit Klebeband. Pflegen Sie die Körpertemperatur mit einem Heizkissen und mit einem rektale Sonde überwachen. Rasieren Sie den Halsbereich und einen Mittellinienschnitt im Halsbereich, um die Schilddrüse aus.
  4. Befestigen Sie den Ausschnitt mit verbogenen Nadeln.
  5. Ziehen Sie abgesehen von der Speicheldrüse und setzen die rechte Arteria carotis communis. Der Vagusnerv, der einen weißen Faden ähnelt, liegt entlang der Arterie. Vorsichtig die Halsschlagader von den Vagusnerv Verwendung eines gebogenen Pinzette.
  6. Übergeben einer gekrümmten Pinzette unter der rechten gemeinsamen Halsschlagader, um sie von anderen Geweben abzutrennen. Entfernen Bindegewebe um die Arterie.
  7. Führen Sie zwei 6-0 Seiden Drähte unter der rechten Halsschlagader. Machen Sie einen festen Knoten auf der obersten Draht, der in Richtung des Kopfes, in der Nähe platziert ist, und befestigen Sie mit einem kocher (distalen Verschlussligation). Übergeben Sie die proximal Draht zweimal von links nach rechts und befestigen Sie sie mit 2 Kochers (proximal nichtokklusiven Draht).
  8. Halten Sie die Halsschlagader feucht durch Fallen steriler 0,9% NaCl. Trocknen Sie die überschüssige Flüssigkeit mit Wattestäbchen.
  9. Einen Einschnitt in die rechte Arteria carotis communis mit einer 26-Gauge-Nadel zwischen dem distalen und dem proximalen Ligierung Nichtokklusives Draht.
  10. Führen Sie den Drucksensor in die Arterie. Stellen Sie sicher, dass es keinen Blutverlust. Schieben Sie die 1,0 Französisch Millar Druckkatheter nach vorne und stellen Sie den proximalen nichtokklusiven Draht in einer Weise, dass der Katheter vorsichtig durch den Draht unter dem Schlüsselbein weiterzugeben.
    1. Minimierung der Blutverlust während der Einstellung des proximalen Nichtokklusives Draht. Den Drucksensor zu viel beim Vorrücken da es sehr instabil nicht komprimieren. Da der proximale Draht muss die Arterie nicht verschließen, sollte das Gefäß mit Blut gefüllt bleiben.
  11. Starten Sie die Aufnahme des Drucksignals. Eine arterielle Drucksignal fluctuates in einer gesunden Maus zwischen einem diastolischen Druck von 60 bis 70 mm Hg und einem systolischen Blutdruck von 100 bis 120 mm Hg.
  12. Lenken des Katheters über den Truncus und über die Aorta in den linken Ventrikel. Der Kammerdruck schwankt zwischen 0 mm Hg und 100 bis 120 mm Hg. Zulassen, dass der Katheter in der linken Herzkammer zu stabilisieren. Nehmen das Signal für 30 min bis 60 min in Abhängigkeit von den experimentellen Anforderungen.
  13. Nach Beendigung des Versuchs, genießen Sie den Katheter in Alconox 1% für 30 min. Den Katheter mit Milli-Q-Wasser waschen. Lagern Sie den Katheter in einer Schaumstoffblock.
  14. Abrufen von Daten von der Software zur weiteren Analyse.
    1. Für die Datenanalyse, halten eine Zeitspanne, wo das Drucksignal stabil ist. Wählen mindestens 10 aufeinanderfolgenden Herzzyklen der aufgezeichneten Daten von Interesse.
    2. Verwenden LabChart Software Version 8.0 oder ähnlich wie die Herzfrequenz, die maximale systolische linksventrikuläre Druck, den minimalen diastolischen linken ventr analysierenicular Druck, die Spitzenrate der isovolumetrischen linken ventrikulären Kontraktion (dP / dt max), der Spitzenrate der isovolumetrischen linksventrikulären Relaxation (dP / dt min), enddiastolischen linksventrikulären Drucks und die Zeitkonstante der linksventrikulären isovolumetrischen Druckabfall (tau) 7.
      HINWEIS: Der enddiastolische Druck entspricht dem Druck, bei dem Zeitpunkt, unmittelbar bevor die Druckwelle durch die isovolumetrischen Kontraktion induziert. Die Berechnung von Tau auf der Montage der linksventrikuläre Druck in einen monoexponentiellen Verlauf basieren, ausgedrückt als P (t) = P 0 e-t / & tau + b, In dieser Formel ist P (t) ist die linke Herzkammerdruck zum Zeitpunkt t nach dem maximalen negativen Wert von dP / dt erreicht wurde. Der Parameter b entspricht der theoretischen Asymptote, die in einem vereinfachten Ansatz kann als Null angenommen werden. Verbesserte isovolumetrischen Entspannung führt zu einem kleineren Wert von tau.
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Representative Results

Das Ausmaß der Myokardinfarkt kann durch Evans blue / 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC) Doppelfärbung beurteilt werden. TTC ist ein Redox-Indikator, der tiefroten 1,3,5-triphenylformazan in lebenden Geweben aufgrund der Aktivität verschiedener Dehydrogenasen in Gegenwart von NADH 8 umgewandelt wird. 1 zeigt einen repräsentativen Abschnitt des Herzens bei 24 h nach der Ligation des linken vorderen absteigenden Koronararterie. Blau gefärbte Bereiche zeigen nicht-ischämischen / normal Regionen. Die Herzmuskelbereich Risiko wird das Herzgewebe in der Perfusion distal von der Ligation der linken vorderen absteigenden Koronararterie Bett definiert. Tiefrot gefärbten Bereiche zeigen ischämische, aber lebensfähige Regionen (nicht Infarktareal in Gefahr) Regionen während negativ gefärbten Bereiche (blass rot) zeigen Infarktregionen. In diesem Modell ist die nicht-Infarktareal mit einem Risiko vernachlässigbar und nicht sichtbar in diesem Bild, das den permanenten Charakter th spiegelte Ligation des linken vorderen absteigenden Koronararterie. Der Infarktbereich liegt typischerweise zwischen 50 bis 60% des gesamten linksventrikulären Wandbereich 9,10. Zwei Komponenten in der Entwicklung der Infarktzone sollte erkannt werden: 1) die dreidimensionale Geometrie des Infarkts kann als eine Folge der Infarkt Expansion führt zu einer dünneren aber ausgedehntere Myokardinfarkt verändern, und 2) das gesamte Volumen des Infarkts abnehmen, was den Heilungsprozess mit Wundkontraktion und Narbenbildung widerspiegeln.

Infarktausdehnung kann durch die Auswertung der Zeitverlauf der Infarkt-Länge und der Infarktdicke 10 quantifiziert werden. Eine repräsentative Siriusrot angefärbt Querschnitt eines Herzens an Tag 28 nach der endgültigen Ligation des linken vorderen absteigenden Koronararterie in Abbildung 2 dargestellt. Das Bild zeigt einen Infarkt, die im wesentlichen gestreckt ist. In einem Querschnitt entspricht dies Expansion zu einer Erhöhung des absolute Infarkt Länge und eine Abnahme der Infarktdicke.

Neben Überlegungen zur dreidimensionalen Geometrie und dem Volumen des Infarkts, sollte eine andere Einschränkung hinsichtlich der Interpretation der Infarktparameter berücksichtigt werden. Da die lebensfähigen Myokardgewebes auch Hypertrophie durchmachen, ist es klar, dass das Verhältnis der Infarktfläche gegenüber dem gesamten linksventrikulären Wandfläche wird in Abhängigkeit von der Zeit abnehmen. Bewertung der Längenänderungen des Infarktzone erfordert daher eine klare Einsicht in den Unterschied zwischen absoluter und relativer Parameter Parameter.

Eine arterielle und ventrikuläre Druckregister in Abbildung 3 dargestellt. Nach der Stabilisierung des Katheters, der Herzfrequenz, maximale systolischer Druck, diastolischer Minimal linksventrikulären Druck die Spitzenrate der isovolumetrischen linken ventrikulären Kontraktion (dP / dt max), dem Ende -diastolic linksventrikuläre Druck und ter Spitzenrate der isovolumetrischen linksventrikuläre Entspannung (dP / dt min) bestimmt. Die Zeitkonstante der isovolumetrischen linksventrikulären Druckabfall (TAU) unter Verwendung des Verfahrens von Weiss et al. 7 quantifiziert.

Figur 1
Abbildung 1. Bewertung der Wohnlage in Gefahr und die Infarktgröße 1 Tag nach Myokardinfarkt. Die Bilder von links nach rechts von der Herzspitze zu gehen, um der Basis des Herzens. 24 h nach der permanenten Ligatur der linken vorderen absteigenden Koronararterie, wurden 2 ml Evans-Blau-Farbstoff als Bolus in die Aorta gespritzt, um das Volumen des perfundierten Myokard quantifizieren. Die Herzen wurden anschließend in der Diastole durch Injektion von CdCl verhaftet (100 ul; 0,1 N) wurden mit physiologischer Kochsalzlösung ausgewaschen werden überschüssiges blauen Farbstoff gespült und wurden in 5% niedriger Geliertemperatur Agarose eingebettet. Afterwards, 500 um dicke Querschnitte wurden unter Verwendung eines HM 650 V Vibration Mikrotom gemacht und Scheiben wurden dann in einem 1,5% 2,3,5-Triphenyltetrazoliumchlorid haltigen isotonischen Phosphatpuffers (pH 7,4) für 30 min bei 37 ° C inkubiert. Bilder wurden mit einem SteREO Lumar V.12 Mikroskop. Die negativ gefärbten Bereich der Infarktgewebe, der rot-gefärbten Nichtinfarktareal in Gefahr, und die blau gefärbten nicht-ischämischen gesunde ventrikuläre Wandbereich wurden mit Hilfe von Image J Software quantifiziert. Maßstabsbalken entspricht 0,5 mm. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieses Bild anzuzeigen.

Abbildung 2
Abbildung 2. Repräsentative Siriusrot angefärbt Querschnitt eines Herzens an Tag 28 nach der Ligation des linken vorderen absteigenden Koronararterie. IMAGes von links nach rechts von der Herzspitze zu gehen, um die Basis des Herzens. Das Standardprotokoll Junqueira et al. 11 wurde für Sirius-Rot-Färbung verwendet. Das histochemische Verfahren färbt fibrotische Infarktgewebe dunkelrot und gesundes Gewebe Orange. Maßstabsbalken entspricht 1 mm. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieses Bild anzuzeigen.

Figur 3
Abbildung 3. arterielle (A) und der linksventrikulären (B) der Druckanzeiger nach Katheterisierung von normalen Mäusen erhalten wurde. Der offensichtliche Unterschied zwischen einem arteriellen Signals und eines ventrikulären Signals ist, dass das letztere Signal fällt auf etwa 0 mm Hg während der Diastole. LVP: linksventrikuläre Druck.

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Discussion

Chronischer Veränderungen der myokardialen Struktur und Funktion, kann die Entwicklung von linksventrikulärer Dysfunktion und Progression von Herzinsuffizienz in verschiedenen Mausmodellen 12 untersucht werden. Kardialen Remodeling und Funktionsstörungen können durch myokardiale Verletzungen oder induziert werden durch Drucküberlastung Sekundär der Quer Aortenkonstriktion, oder in genetischer Modelle der dilatativen Kardiomyopathie 12 untersucht werden. Offensichtlich ist die am stärksten ausgeprägt zugunsten von Mausmodellen die Verfügbarkeit einer großen Anzahl von transgenen und Knock-out Stämme einschließlich zelltypspezifische und induzierbare transgene Modelle. Bewertung der kardialen Remodeling in diesen Modellen wurde stark durch die Entwicklung von Technologien wie Ultrahochauflösung 2D- und 3D-Echokardiographie, Mikrokernspintomographie, hämodynamische Auswertung mit micromanometry und Mikromanometer Leitfähigkeit Technik für Druck-Volumen-Schleife Analysen erleichtert. In diesem Bericht werden wir uns auf die mod konzentriert habenel von Myokardschädigung durch permanente Ligation des linken vorderen absteigenden Koronararterie und Bewertung der linksventrikulären Funktion linksventrikulären micromanometry induziert.

Die erste Mausmodell der Myokardinfarkt wurde 1978 von Zolotareva et al 13 beschrieben. Dieses Modell der permanenten Okklusion sollte klar aus dem murinen Modell der transienten Okklusion der linken vorderen absteigenden Koronararterie, die zuerst von Michael et al 14 beschrieben, wurde festgestellt werden. Diese letztere Modell wird verwendet, um Ischämie-Reperfusionsverletzung und Myocardial Salvage untersuchen während ständigen Ligation wird angewendet, um die Pathophysiologie der Post-Myokardinfarkt kardialen Remodeling zu studieren.

Koronararterienbaumes von Mäusen ist anders im Vergleich zum Menschen 15-17. Die Scheidewand der Herzkranzgefäße in der Maus ist variabel in Herkunft 15-17. Es stellt sich klassisch als ein Zweig der rechten Herzkranz artery 18,19, kann aber auch aus einem separaten Ostium der rechten Sinus Valsalva 17 ergeben, oder in Ausnahmefällen von der linken Koronararterie 16. Die Anatomie der Koronararterien-Baum kann leicht zwischen verschiedenen Stämmen 20 abweichen. Jedoch Bindung der linken vorderen absteigenden Koronararterie, wie sie unmittelbar ergibt, sind die linken Vorhof führt zu reproduzierbaren große Infarkte Einbeziehung der anterolateralen, posterioren und apikalen Bereiche des Herzens, wie durch die Histologie gezeigt und Echokardiographie 15,17. Wichtig ist, dass das Septum aus Hirninfarkt, die die Anwesenheit der unterschiedlichen septalen Koronararterie reflektiert verschont. Im Gegensatz zu Mäusen, wird die Blutversorgung des Septums bei Menschen hauptsächlich durch Zweige der linken vorderen absteigenden Koronararterie 21 vorgesehen. Dieser Unterschied in der Anatomie und die resultierende Aussparung der Trennwand in Mäuse Remodellierung des Herzens beeinflussen.

Wie in der Folge erklärts Abschnitt, Ligation des linken vorderen absteigenden Koronararterie in Mäusen induziert eine große Myokardinfarkt, die 50% bis 60% des linken Ventrikels 9,10 aufweist. Das Auftreten von ventrikulärer Bruch in den ersten zwei Wochen nach Myokardinfarkt bei Mäusen ist häufig 22,23. Diese Komplikation eines Myokardinfarkts ist spannungsabhängig und tritt signifikant häufiger bei männlichen Mäusen als bei weiblichen Mäusen 22. Darüber hinaus geschieht ventrikuläre Bruch häufiger in Hypercholesterinämie Mäusen als unter den Bedingungen des normocholesterolemia 9. Das Auftreten von ventrikulären Bruch bei Mäusen sollte in die richtige Perspektive zu rücken werden. Zunächst ist diese Komplikation eine Manifestation der Infarktexpansion. Diese unverhältnismäßige Ausdünnung und Dilatation des Infarktsegment nicht nur induziert Myokardruptur sondern ist auch ein Auslöser für kardialen Remodeling und Herzinsuffizienz 24-27. Somit ist die Frequenz des Myokardruptureinen Indikator für den Grad der Infarkt Ausdehnung und damit für das Ausmaß der kardialen Remodeling und Entwicklung von Herzdysfunktion in lebenden Mäuse.

Der zweite wichtige Überlegung im Hinblick auf ventrikuläre Bruch ist die Notwendigkeit, das Überleben Bias berücksichtigen, wenn eine funktionale oder strukturelle Daten zwischen zwei Gruppen in einer Interventionsstudie 10 verglichen. Es ist vernünftig, dass Mäuse mit dem ausgeprägtesten Infarkt Expansion ventrikuläre Bruch erliegen nehmen. Im Falle eines signifikanten Unterschied der Überlebensrate zwischen zwei Gruppen, sollte man sich bewusst sein, dass die Mäuse aus der funktionale oder strukturelle Analyse ausgeschlossen gestorben. Folglich wird die Vorspannung bei jedem Vergleich der überlebenden Mäuse zu einem bestimmten Zeitpunkt, eingeführt.

Wie oben erläutert, sind zahlreiche Technologien zur kardialen Remodeling nach Myokardinfarkt zu bewerten. Allerdings ist die Verfügbarkeit von fortschrittlicher und komplexer Technologienmöglicherweise für mehrere Forscher beschränken. Hämodynamische Auswertung mit einem über die Arteria carotis eingeführt Mikromanometer Drucksensor ist relativ einfach und deutlich weniger teuer als andere Technologien. Es sollte jedoch betont werden, dass es inhärente Einschränkungen bei der Auslegung des linksventrikulären micromanometry. Im Gegensatz dazu, die Analyse der ventrikulären Druck-Volumen-Verhältnisse (zB mittels Leitwert micromanometry) bildet die strengsten und umfassendes Konzept für die intakte Herzfunktion 28 zu bewerten. Der einzigartige Vorteil der Druck-Volumen-Methodik, um die Herzfunktion zu messen ist, dass es ermöglicht, genauere Messungen des linksventrikulären Leistung unabhängig von Belastungsbedingungen und der Herzrate 29.

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Buprenorphine (Buprenex) Bedford Laboratories
Sodium Pentobarbital (Nembutal) Ceva
Betadine VWR internationals 200065-400
5 - 0 silk suture Ethicon, Johnson & Johnson Medical K890H
6 - 0 prolene suture  Ethicon, Johnson & Johnson Medical F1832
6 - 0 Ti- Cron suture Ethicon, Johnson & Johnson Medical F1823
Urethane  Sigma 94300
Alconox Alconox Inc.
Ventilator, MiniVent Model 845 Hugo Sachs 73-0043
Chest retractor or Thorax retractor Kent Scientific corporation INS600240 ALM Self-retaining, serrated, 7 cm long, 4 x 4 "L" shaped prongs, 3 mm x 3 mm
1.0 French Millar pressure catheter  Millar Instruments  SPR - 1000/NR
Powerlab ADInstruments Pty Ltd.
LabChart® software ADInstruments Pty Ltd.
Rectal probe ADInstruments Pty Ltd.

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References

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Medicine Ausgabe 94 Myokardinfarkt Herzumbau Infarktexpansion Herzinsuffizienz Herzfunktion invasive hämodynamische Messungen
Permanent Ligation des linken vorderen absteigenden Koronararterie bei Mäusen: Ein Modell der Post-Myokardinfarkt Umbau und Herzinsuffizienz
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Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F.,More

Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F., De Geest, B. Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure. J. Vis. Exp. (94), e52206, doi:10.3791/52206 (2014).

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