Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Neuroscience

שיטה של ​​הזרקת Nodose הגרעינים בSprague-Dawley עכברוש

Published: November 25, 2014 doi: 10.3791/52233

Protocol

כל הנהלים והפרוטוקולים אושרו על ידי ועדת הטיפול ושימוש בבעלי חיים המוסדיים של אוניברסיטת אילינוי בשיקגו. ניסויים שתוארו כאן הם ניסויים אי-הישרדות חריפות, ולא היה שום שימוש במשחת עיניים. תחזוקה של תנאים סטריליים מתרחשת רק כאשר מכשירי ניתוח נשטפים עם אתנול 70% בDiH 2 O. הקרבה של חולדות בסוף הניסוי התרחשה באמצעות מנת יתר של קטמין / xylazine IV.

1. הכנה של מכשירים וכימיקלים

  1. הכן פתרון מניות של 0.05 M של 5-HT HCl בPBS. ואז לדלל מניות עם PBS לריכוז 5-HT סופי של .203 מ"מ.
  2. לדלל דרונאבינול בשמן שומשום בריכוז של 20 מיקרוגרם / μl.
  3. לחתוך 20 סנטימטר אורך של פוליאתילן (PE) -50 צינורות (מ"מ ID 0.58, OD .965 מ"מ). בקצה אחד של הצינור, לחתוך קצה פוע באמצעות מספריים, ובסופו של הדבר המרובע האחר, להכניס מחט 23 גר '. חבר מחט 23 גרם זה ל1 מיליליטרמזרק, ולמלא אותו עם 0.3 מיליליטר של 50 u / הפרין מיליליטר.
  4. חותך ארבע חתיכות של חוט משי 4-0 קלוע ולהגדיר לצד.
  5. לעקר מספריים כירורגיות, 2 מלקחיים מעוקלים גרף, ו -3 מהדק מיקרו עם 70% אתנול בdiH 2 O.

2. צנתור של עצם הירך וריד

פרוטוקול לצנתור הוא שונה מאל Jespersen et. 21

  1. הרדימי עכברוש Sprague-Dawley עם intraperitoneal (IP) קטמין / xylazine (100 מ"ג / קילוגרם: 10 מ"ג / קילוגרם). לצבוט את הבוהן של החולדה ולבחון כל תנועה כדי לאשר רמה נאותה של הרדמה. לגלח את היבט הגחון של ירך השמאל, והיבט הגחון של הצוואר. במידת צורך על ידי ועדת הטיפול ושימוש בבעלי חיים המוסדיים המקומית, יחול משחה העין כדי למנוע יובש.
  2. עכברוש מאובטח במצב שכיבה על לוח כירורגית. השתמש במספריים כירורגית לחתוך את עור בירך האחורית השמאלית.
  3. , Dissectio בוטה התנהגות בעזרת מלקחייםn של השריר השטחי לחשוף את וריד הירך. השתמש במלקחיים כדי להפריד את הווריד מעורק הירך, ולמקם את 2 אשכולות סביב וריד הירך.
  4. השתמש במלקחיים המעוקלים גרף למשוך למעלה את הווריד כדי לעצור את זרימת דם. באמצעות מחט מזרק G 22, לנקב את וריד הירך ולאחר מכן הכנס את הקצה המשופע של צינורות PE-50 לווריד.
  5. בדקו אם צינורות PE-50 הוכנס בצורה נכונה על ידי חוזר בי הבוכנה של המזרק. דם צריך להיות נראה נכנס לצינורות PE-50. לקשור 2 קשרים סביב הווריד וPE-50 צינורות באמצעות 2 האשכולות.

3. 5-HT-induced דום נשימה באמצעות עירוי

  1. מניחים מד לחץ פיזואלקטריים סביב החולדה למדוד נשימה.
  2. שינוי הגדרות עבור רמת הגברה של המגבר האלקטרוני באמצעות תוכנת מגבר במחשב: כדי להגביר (100x) ומסנן להקה עוברת (1-10 הרץ) אותות הנשימה המתקבלים ממד הלחץ, להגדיר "מסנן highpas" ב& #8220; AC @ HZ 1 "ו-" מסנן Lowpass "ב" 10 הרץ," ולהגדיר את ההגברה על ידי הזנה "10" של "רווח הראשוני" ו- "100" עבור "סה"כ רווח"..
  3. לשנות את ההגדרות לקצב דגימה על ידי הפתיחה "כניסה אנלוגית" באמצעות תוכנת הקלטה במחשב. לספרת (קצב דגימת Hz 500) באמצעות ממיר אנלוגי לדיגיטלי, "מדגם" ב" Hz 1000 "ו-" לדלג "כל נקודה אחרת על ידי הקלטה (Hz 500 קצב דגימה יעיל)" 1 ", ולאחר מכן לרשום את האות שימוש בתוכנת הקלטה.
  4. הסר את מזרק 1 מיליליטר מקטטר ולהכניס מזרק זכוכית דיוק 500 μl מלא ב.203 מ"מ של 5-HT לקטטר.
  5. מניחים את מזרק זכוכית דיוק 500 μl למשאבת עירוי. להשרות 12.5 מיקרוגרם / קילוגרם לμl 350 / קילוגרם של פתרון 5-HT בשיעור של 63 מיליליטר / שעה. דום נשימה לבצע חליטות מרובות ולהתבונן בחולדה, אשר נתפסהsa להשהות בנשימה (≥ 2.5 שניות) באותות בדרכי הנשימה נרשמו על צג המחשב.
  6. לפני שתמשיך בניתוח צוואר, לפקח נשימת דפוס ולבדוק לרפלקס כאב מקמצוץ הבוהן בחולדה. אם הנשימה לא סדירה, או אם יש רפלקס כאב מקמצוץ הבוהן, לנהל קטמין / xylazine IP (100 מ"ג / קילוגרם: 5 מ"ג / קילוגרם) ולאחר מכן לאשר מחדש על רמה נאותה של הרדמה.

4. ניתוח צוואר ללחשוף Nodose הגרעינים

  1. עכברוש מאובטח במצב שכיבה על לוח כירורגית. ביצוע חתך אורכי קו האמצע באמצעות מספריים כירורגיות בצוואר.
  2. באמצעות לנתיחה בוטה על שריר platysma (באמצעות 2 ווי התלייה מיקרו כדי לשמור על שריר זה ברור של האתר כירורגית), לחשוף את שרירי sternohyoideus וomohyoideus. הפרד את השרירים האלה כדי לחשוף את עורק התרדמה הפנימי ואחד מענפיו, עורק pterygopalatine.
  3. שים לב לעצב התועה כפי שהוא פועל לאורך עורק התרדמה הפנימי ולאחר מכן לאורך ה עורק pterygopalatine דואר. שים לב כיצד העצב התועה ועורק pterygopalatine, יחד עם העצב של הלשון או הלוע (IX עצב גולגולת) והעצב בעמוד השדרה האבזר (XI עצב גולגולת), להיכנס נקב שסע האחורי בבסיס הגולגולת.
  4. שים לב שגנגליון nodose מוצג כנפיחות של העצב התועה תקין לפני שהוא נכנס הנקב האחורי שרט. שימו לב גם שענפי בלוע ועצב בגרון יורדים היבטים הקדמי ואחוריים, בהתאמה, של גנגליון nodose. 5
  5. באמצעות המלקחיים גרפו, להפריד את העצב התועה מהעורקים, ולמקם את חתיכת החוט סביב העצב התועה. הנח מהדק על החוט כדי להחיל מתח קל על העצב התועה, ולנקות את הגנגליון nodose של כל רקמת חיבור לספק פחות התנגדות בעת הזרקה.
  6. חזור דום נשימה 5-induced HT כאמור בסעיף 3 כדי לוודא שלא נגרמו ניזק לגרעיני nodose.
itle "> 5. הזרקת Intranodose הגרעינים של דרונאבינול

  1. ממלאי מזרק זכוכית 10 μl דיוק gastight המודבק עם מחט מחוייט 28 גרם חצי אינץ 'מזרק עם 35 מעלות משופעים קצה עם 5 μl של דרונאבינול בשמן שומשום.
  2. הנח מהדק מיקרו על החוט להחיל מתח קל על העצב התועה, ולנקב את טיפול גנגליון לוקח nodose לא לנקב דרכו. לדכא את המזרק באיטיות (≥ 60 שניות) להזריק את כל התוכן של המזרק. שים לב שחלק מתוכן המזרק ידלוף החוצה של גנגליון.
  3. חזור על 5-HT-induced דום נשימה כאמור בסעיף 3.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

איור 1 מייצג מדגם הקלטת נשימה בחולדות שהיו עירוי של 5-HT לגרום לדום נשימה לפני ואחרי זריקות גרעיני intranodose של דרונאבינול. 5-HT מפעיל 5-HT 3 קולטנים על גרעיני nodose שתורמים לרפלקס Bezold-Jarisch של ברדיקרדיה, ירידה בלחץ דם, ודום נשימה ב. 11,17-19 זריקות גרעיני Intranodose של דרונאבינול להפעיל קולטני CB מעכב, או allosterically מודולציה 5-HT 3 קולטנים המעכבים את עירור 5-induced HT של העצב התועה. 16,17,20,22 לפני (איור 1, פנל עליון) ואחרי עירוי ניתוח צוואר של 5-HT (איור 1, פנל באמצע) (איור 1 , הואשם על ידי קו אדום) מעורר תגובת apneic ראתה כחוסר תנועת בטן שנמדד על ידי מד לחץ פיזואלקטריים. לאחר זריקות גרעיני intranodose של דרונאבינול (איור 1, פנל תחתון), עירוי 5-HT לא לעוררתגובת apneic. לאחר זריקות שמן שומשום (מידע לא מוצג) לגרעיני nodose של חולדות שליטה ברכב, עירוי 5-HT עורר תגובת apneic דומה לערכי בסיס. 17

איור 1
איור 1:. הקלטות לדוגמא מניסויים דום נשימה ב5-HT-indudced החריף לפני ואחרי 100 מיקרוגרם דרונאבינול ב 5 זריקות שמן שומשום μl לגרעיני nodose של העצבים התועה 17 הקלטות נשימה נלקחו לפני הניתוח (פנל עליון), לאחר הניתוח ( פנל באמצע), ולאחר זריקות גרעיני nodose (פנל תחתון). קו אדום מסמן עירוי 5-HT IV כדי לגרום לדום נשימה. לאחר זריקות שמן שומשום (מידע לא מוצג) לגרעיני nodose של חולדות שליטה ברכב, עירוי 5-HT עורר תגובת apneic דומה לערכי בסיס. 17 נתון זה שונה מet al Calik. 17AU = יחידות שרירותיות; שו"ת = נשימה.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

הצעדים הקריטיים לזריקה מוצלחת של neurochemicals לגרעיני nodose הם: 1) זיהוי וניקוי רקמות חיבור מגרעיני nodose; 2) המאשר את תקינותו של גרעיני nodose לפני ההזרקה; 3) ובאמצעות מחט מד קטנה להזריק בעדינות לתוך, אבל לא ניקוב באמצעות לחלוטין, גרעיני nodose.

העצב התועה מעצבב איברים רבים בצוואר ובבטן, ומעביר מידע חשוב כגון קצב לב, לחץ דם, גירוי bronchopulmonary, והתנפחות של קיבה ומעיים למערכת העצבים המרכזית. גרעיני nodose של העצב התועה מכילים מערך מגוון של קולטנים לחומצות אמינו, מוניו-אמינות, נוירו, וneurochemicals אחרת. 1 זריקות גרעיני Intranodose של neurochemicals לקולטנים אלה כדי לשנות את הפעילות של העצב התועה שנעשו בעבר, 16,17 ומייצג מודל ניסיון מצוין להבהיר pharmacologi ההיקפיהשפעות cal על העצב התועה שיכול לשנות מחלות כגון דום נשימה בשינה, מחלת החזר הוושטי, או שיעול כרוני. 2-4

לחשוף את גרעיני nodose, ניתוח צוואר מתנהל ושרירי הצוואר מופרדים לחשוף את התרדמה הפנימית. העצבים התועה נראים רצו לאורך התרדמה הפנימית ועורקי pterygopalatine. גופי התא של העצבים התועה חד קוטביים נמצאים בגרעיני nodose וpetrosal, שנתפסים כנפיחות בעצבים התועה לפני הכניסה לגולגולת בforamens האחורית שסע. 5

מניפולציות של גרעיני nodose חשובות ככל שגרעיני nodose ועצבים התועה לא ניזוקו במהלך ניתוח. טכניקה ניתוחית פסולה וגסה עלולה לגרום נזק לגרעינים nodose וענפי העצב שלה, יחד עם העורקים ועצבי גולגולת האחרים. בפרוטוקול זה, על מנת לייצב את העצב התועה, אנו מספקים מתח קל לvaguעצב של באמצעות חוט משי מצורף לסרטון מיקרו. זה מאפשר לנו לנקות את כל רקמת חיבור שעלול להקשות להזריק לתוך הגנגליון nodose כראוי. יתר על כן, אנו מאשרים כי גרעיני nodose הם שלמים לפני שתמשיך עם ההזרקה על ידי גרימה דום נשימה על ידי עירוי 5-HT. להזריק לגנגליון nodose, השתמשנו מד קטן זול (28 G, OD 362 מיקרומטר) מחטים מצורפות מזרק זכוכית דיוק. מאז עומק באתר הזרקה כדי למנוע ניקוב באמצעות גרעיני nodose הייתה דאגה, הטיפים המשופעים של המזרקים נעשו מותאם אישית עם זווית אנכית יותר של 35 °. זה שונה מטכניקות microinjection אחרות שבה נמצא בשימוש micropipettes זכוכית 8-10,14-16 היתרון של micropipettes הזכוכית הוא בקוטר טיפ קטן.; עם זאת, קיים סיכון של שבירת הקצה במהלך ההליך בשל השבירות של זכוכית. יתר על כן, יש צורך בציוד יקר כדי למשוך את micropipette הזכוכית, שלא בכל מעבדה עשויה להחזיק. יש לי המחטים מותאמות אישית ללא סיכון של שבירה, ואף על פי שהם היו בקוטר גדול יותר (362 מיקרומטר) 17 בהשוואה לmicropipettes זכוכית (20-100 μl), 8,9,14-16 המחטים היו עדיין קטנות מספיק לגרעיני nodose זריקות. יתר על כן, המחטים אלה היו רב פעמיים לניסויים רבים והיו פחות הוצאות ניכרות מאשר ציוד המשמש למשוך micropipettes.

בשל גודלו של המנהג-מחטים המשמשות להזרקה לגרעיני nodose, חשוב לאמוד את הנזק, אם בכלל, לגרעיני nodose. אחת שיטות להערכת נזק לגרעיני nodose היא דרך עיבוד ומיקרוסקופיה היסטולוגית של גרעיני nodose. 6-9,13,15 שיטה שנייה, בו נעשה שימוש בפרוטוקול זה, כדי להעריך את התפקוד מביא מחנק משווה תוצאות אלקטרו או התנהגות בין קבוצות הזרקה ניסיוניות ושליטה. זריקות 14-17 דרונאבינול הוכחו להחליש 5-induced HT דום נשימה בהשוואה לגontrol זריקות, 17 מסמנים שאם היה קצת נזק מהמחטים מותאמות אישית בקוטר הגדולה יותר, עדיין היו מספיק תאי גרעיני nodose פונקציונליים שמעוכבים על ידי דרונאבינול. באופן דומה, כימות ההיקף של דיפוזיה של μl 5 של דרונאבינול בשמן אין צורך מאז תוצאות תפקודיות (כלומר, דום נשימה ב) היו המדד החשוב של פרוטוקול זה. נפח שימוש בפרוטוקול זה נבחר כדי להבטיח דיפוזיה הרחבה של הפתרון מוזרק לתוך גרעיני nodose. בפרוטוקולים דומים אחרים, הזריק כמויות לא היו שונות באופן מוגזם ונע 0.1-3 μl. 8,9,14-16 של דיפוזיה של דרונאבינול נפט המידה הייתה מספיק כדי להחליש 5-induced HT דום נשימה. 17

שינויים בפרוטוקול זה אפשריים. ראשית, אם מניעת נזק לגרעיני nodose הוא הכרח, מחטי מד קטנות (G 33 הקטן ביותר) ניתן להשתמש בפרוטוקול זה. החסרון בשימוש בגאה קטןמחטי ge היא: 1) הם יכולים להיות שבורים או כפופים בקלות; 2) הם הקוטר הפנימי הוא קטן מכדי לאפשר להזרקת נוזלים צמיגים כמו שמן שומשום. יתר על כן, אם הזרקת אתר עומק חשובה, יותר מחטי זווית אנכיות (עד 45 מעלות) ניתן לרכוש. עם זאת, זווית אנכית יותר תקשה יותר לנקב את גרעיני nodose. במהלך ההזרקה של גרעיני nodose, מתח שינוי של העצב התועה ניתן לשנות על ידי הצבת מהדק מיקרו בגדלים שונים. אם נזק לעצבים התועה / גרעיני nodose צריך למנוע, ולאחר מכן באמצעות מהדק מיקרו קטן הוא אידיאלי. לבסוף, הזרקת נוזלים המכילים neurochemicals ניתן לשנות באמצעות נפח וריכוז של נוזל מוזרק. בפרוטוקול זה, 5 μl היה יותר ממספיק כדי להרוות את גרעיני nodose.

מגבלה העיקרית של פרוטוקול זה היא האפשרות של ניקוב באמצעות גרעיני nodose. במקרה זה, ואז שוב אישור של שלמות sho גרעיני nodoseuld להיעשות. אם שלמות גרעיני nodose הוא אישר, אז הזרקת גרעיני nodose ניתן לחזור. עם זאת, אם יש ספק בנוגע ליושרה של גרעיני nodose, אז ניסוי עם חולדה חדשה אמור להסתיים. 17

הגיוון של קולטנים על גרעיני nodose יכול להגדיל או לעכב פעילות עצבית מביא. ראיות מצביעות על כך שהגדלה מביא לעולם פעילות ממלאת תפקיד חשוב במחלות בבני אדם. 2-4,23 פרוטוקול זה מספק שיטה זולה של ממשל המקומי של neurochemicals לגרעיני nodose ללמוד את השפעתן על פעילות עצבית מביא.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgments

מחקר זה נתמך על ידי המכונים הלאומי לבריאות (גרנט 1UM1HL112856).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
5-HT HCl MP Biomedicals 215376591 12.5 µg/kg per 350 µl/kg
Dronabinol (Marinol) 10 mg Capsules (80 µg/µl) AbbVie NDC 0051-0023-21 Dilute with sesame oil to 20 µg/µl
Sesame Oil Sigma-Aldrich S3547
Intramedic Polyethylene-50 BD 427411 Ordered from VWR (Cat. # 63019-047)
Graefe Forceps Roboz RS-5138 Two are needed
Johns Hopkins Bulldog Clamp Roboz RS-7441 Three are needed
Piezoelectric Strain Gauge Ambu 813255-100
Data Acquisition USB Subsystems DataWave Technologies
Sciworks Experimenter Software
CyberAmp Axon Instruments
Syringe, 500 µl, Model 1750 TLL Hamilton Company 81220
Syringe, 10 µl, Model 1801 RN 7659-01
Needle, 28 G, Small Hub RN 7803-02 Point Style 4, Angle 35, Length 0.5 in

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Zhuo, H., Ichikawa, H., Helke, C. J. Neurochemistry of the nodose ganglion. Prog. Neurobiol. 52 (2), 79-107 (1997).
  2. Carley, D. W., Radulovacki, M. Pharmacology of vagal afferent influences on disordered breathing during sleep. Respir. Physiol. Neurobiol. 164 (1-2), 197-203 (2008).
  3. Kuo, P., Holloway, R. H. Beyond acid suppression: new pharmacologic approaches for treatment of GERD. Curr. Gastroenterol. Rep. 12 (3), 175-180 (2010).
  4. Maher, S. A., Dubuis, E. D., Belvisi, M. G. G-protein coupled receptors regulating cough. Curr. Opin. Pharmacol. 11 (3), 248-253 (2011).
  5. Greene, E. C. Anatomy of the rat. , Hafner. (1963).
  6. Li, Y., Wu, X., Zhou, S., Owyang, C. Low-affinity CCK-A receptors are coexpressed with leptin receptors in rat nodose ganglia: implications for leptin as a regulator of short-term satiety. Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 300 (2), 217-227 (1152).
  7. Powley, T. L., et al. Vagal afferent innervation of the lower esophageal sphincter. Auton. Neurosci. 177 (2), 129-142 (2013).
  8. Neuhuber, W. L. Sensory vagal innervation of the rat esophagus and cardia: a light and electron microscopic anterograde tracing study. J. Auton. Nerv. Syst. 20, 243-255 (1987).
  9. Rogers, R. C., Nasse, J. S., Hermann, G. E. Live-cell imaging methods for the study of vagal afferents within the nucleus of the solitary tract. J. Neurosci. Methods. 150 (1), 47-58 (2006).
  10. Wan, S., et al. Presynaptic melanocortin-4 receptors on vagal afferent fibers modulate the excitability of rat nucleus tractus solitarius neurons. J. Neurosci. 28 (19), 4957-4966 (2008).
  11. Verberne, A. J., Lewis, S. J., Jarrott, B., Louis, W. J. Bezold-Jarisch reflex is inhibited by excitotoxin-induced destruction of vagal primary afferent neurons. Eur. J. Pharmacol. 139 (3), 365-367 (1987).
  12. Lewis, S. J., et al. Excitotoxin-induced degeneration of rat vagal afferent neurons. Neuroscience. 34 (2), 331-339 (1990).
  13. Wallick, D. W., Dunlap, M. E., Stuesse, S. S., Thames, M. D. Denervation of vagal cardiopulmonary receptors by injection of kainic acid into the nodose ganglia in dogs. Auton. Neurosci. 102 (1-2), 85-89 (2002).
  14. Muroi, Y., et al. Selective inhibition of vagal afferent nerve pathways regulating cough using Nav 1.7 shRNA silencing in guinea pig nodose ganglia. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 304 (11), 1017-1023 (2011).
  15. Kollarik, M., et al. Transgene expression and effective gene silencing in vagal afferent neurons in vivo using recombinant adeno-associated virus vectors. J. Physiol. 588 (21), 4303-4315 (2010).
  16. Zhang, Z., Zhang, C., Zhou, M., Xu, F. Activation of opioid mu-receptors, but not delta- or kappa-receptors, switches pulmonary C-fiber-mediated rapid shallow breathing into an apnea in anesthetized rats). Respir. Physiol. Neurobiol. 183 (3), 211-217 (2012).
  17. Calik, M. W., Radulovacki, M., Carley, D. W. Intranodose ganglion injections of dronabinol attenuate serotonin-induced apnea in Sprague-Dawley rat. Respir. Physiol. Neurobiol. 190, 20-24 (2014).
  18. Yoshioka, M., Goda, Y., Togashi, H., Matsumoto, M., Saito, H. Pharmacological characterization of 5-hydroxytryptamine-induced apnea in the rat. J. Pharmacol. Exp. Ther. 260 (2), 917-924 (1992).
  19. Kopczynska, B., Szereda-Przestaszewska, M. 5HT2 and 5HT3 receptors' contribution to modeling of post-serotonin respiratory pattern in cats. Life Sci. 75 (19), 2281-2290 (2004).
  20. Fan, P. Cannabinoid agonists inhibit the activation of 5-HT3 receptors in rat nodose ganglion neurons. J. Neurophysiol. 73 (2), 907-910 (1995).
  21. Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. Femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements. J. Vis. Exp. (59), (2012).
  22. Barann, M., et al. Direct inhibition by cannabinoids of human 5-HT3A receptors: probable involvement of an allosteric modulatory site. Br. J. Pharmacol. 137 (5), 589-596 (2002).
  23. Bonaz, B., Picq, C., Sinniger, V., Mayol, J. F., Clarencon, D. Vagus nerve stimulation: from epilepsy to the cholinergic anti-inflammatory pathway. Neurogastroenterol. Motil. 25 (3), 208-221 (2013).

Tags

Neuroscience גיליון 93 מדעי המוח גרעיני nodose עצב התועה EMG סרוטונין דום נשימה ב genioglossus קנבינואידים
שיטה של ​​הזרקת Nodose הגרעינים בSprague-Dawley עכברוש
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Calik, M. W., Radulovacki, M.,More

Calik, M. W., Radulovacki, M., Carley, D. W. A Method of Nodose Ganglia Injection in Sprague-Dawley Rat. J. Vis. Exp. (93), e52233, doi:10.3791/52233 (2014).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter