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Neuroscience

Sprague-Dawley चूहा में ग्रंथिल गैन्ग्लिया इंजेक्शन की एक विधि

Published: November 25, 2014 doi: 10.3791/52233
Automatic Translation
1,3, 1,2, 1,3
1Center for Narcolepsy, Sleep and Health Research, University of Illinois at Chicago, 2Department of Pharmacology, University of Illinois at Chicago, 3Department of Biobehavioral Health Science, University of Illinois at Chicago

Protocol

सभी प्रक्रियाओं और प्रोटोकॉल शिकागो में इलिनोइस विश्वविद्यालय की संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया। यहाँ वर्णित प्रयोगों तीव्र गैर अस्तित्व के प्रयोग कर रहे हैं, और आंख मरहम का कोई फायदा नहीं था। शल्य चिकित्सा उपकरणों DIH 2 ओ में 70% इथेनॉल के साथ धो रहे हैं जब बाँझ शर्तों का रखरखाव केवल तब होता है प्रयोग के अंत में चूहों का बलिदान चतुर्थ ketamine / xylazine की अधिक मात्रा के माध्यम से हुई।

उपकरण और रसायन की 1. तैयारी

  1. पीबीएस में 0.05 एम 5 हिंदुस्तान टाइम्स की एचसीएल के शेयर समाधान तैयार है। तब 0.203 मिमी की एक अंतिम 5 हिंदुस्तान टाइम्स एकाग्रता के लिए पीबीएस के साथ शेयर पतला।
  2. 20 माइक्रोग्राम प्रति / μl की एकाग्रता में तिल के तेल में dronabinol पतला।
  3. (पीई) -50 ट्यूबिंग (आईडी 0.58 मिमी, आयुध डिपो 0.965 मिमी) पॉलीथीन के 20 सेमी लंबाई में कटौती। ट्यूबिंग के एक छोर पर, कैंची का उपयोग कर एक बेवल टिप में कटौती, और अन्य वर्ग के अंत में, एक 23 जी सुई डालें। 1 मिलीलीटर करने के लिए इस 23 जी सुई कनेक्टसिरिंज, और 50 यू / एमएल हेपरिन की 0.3 मिलीलीटर के साथ इसे भरने।
  4. 4-0 लट में रेशम के धागे के चार टुकड़े काटें और टीम के लिए निर्धारित किया है।
  5. DIH 2 ओ में, 70% इथेनॉल के साथ दो घुमावदार Graefe संदंश, और 3 सूक्ष्म clamps के शल्य कैंची जीवाणुरहित

ऊरु नस 2. कैथीटेराइजेशन

कैथीटेराइजेशन के लिए प्रोटोकॉल Jespersen एट अल से संशोधित किया गया है। 21

  1. (: 10 मिलीग्राम / किग्रा 100 मिलीग्राम / किग्रा) intraperitoneal (आईपी) ketamine / xylazine के साथ एक Sprague-Dawley चूहे anesthetize। चूहे के पैर के अंगूठे चुटकी और संज्ञाहरण का एक उचित स्तर पुष्टि करने के लिए किसी भी आंदोलन का पालन। बाईं जांघ के उदर पहलू है, और गर्दन के उदर पहलू दाढ़ी। स्थानीय संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा आवश्यक हो, सूखापन को रोकने के लिए नेत्र मरहम लागू होते हैं।
  2. एक शल्य चिकित्सा बोर्ड पर एक लापरवाह स्थिति में सुरक्षित चूहा। बाईं हिंद जांघ में त्वचा दूर कटौती करने के लिए शल्य कैंची का प्रयोग करें।
  3. संदंश का प्रयोग, आचरण कुंद dissectioसतही पेशी के एन ऊरु नस को बेनकाब करने के लिए। ऊरु नस के आसपास दो धागे और्विक धमनी से नस को अलग, और जगह संदंश का प्रयोग करें।
  4. पुल अप करने के लिए नस में रक्त के प्रवाह को रोकने के लिए घुमावदार Graefe संदंश का प्रयोग करें। एक 22 जी सिरिंज सुई का प्रयोग, ऊरु नस पंचर और फिर नस में पीई 50 टयूबिंग की beveled अंत डालें।
  5. पीई 50 टयूबिंग सिरिंज के सवार retracting द्वारा सही ढंग से डाला गया था तो चेक करें। रक्त पीई 50 ट्यूबिंग में प्रवेश कर देखा जाना चाहिए। दो धागे का उपयोग नस और पीई 50 टयूबिंग लगभग 2 गांठ बांध।

3. चतुर्थ आसव के माध्यम से एपनिया 5 हिंदुस्तान टाइम्स प्रेरित

  1. श्वसन मापने के लिए चूहे के चारों ओर एक piezoelectric तनाव गेज रखें।
  2. कंप्यूटर पर एम्पलीफायर सॉफ्टवेयर के माध्यम से इलेक्ट्रॉनिक एम्पलीफायर के प्रवर्धन स्तर के लिए सेटिंग्स बदलें: बढ़ाना (100x) और बैंड पास फिल्टर (1-10 हर्ट्ज) तनाव गेज से प्राप्त श्वसन का संकेत है, पर & # "highpas फिल्टर" स्थापित करने के लिए8220;। कुल लाभ "के लिए" 10 हर्ट्ज, "और inputting द्वारा प्रवर्धन सेट" 10 प्रारंभिक लाभ "के लिए" "और" 100 "" में "एसी @ 1 हर्ट्ज" और "Lowpass फ़िल्टर।
  3. कंप्यूटर पर रिकॉर्डिंग सॉफ्टवेयर के माध्यम से "एनालॉग इनपुट" खोलने के द्वारा नमूना दर के लिए सेटिंग्स बदलें। "1000 हर्ट्ज" और पर, "नमूना" एक एनालॉग से डिजिटल कनवर्टर का उपयोग (500 हर्ट्ज नमूना दर) digitize करने के लिए "एक" (प्रभावी नमूना दर 500 हर्ट्ज) द्वारा हर दूसरे रिकॉर्डिंग बिंदु "छोड़", और फिर संकेत रिकॉर्ड रिकॉर्डिंग सॉफ्टवेयर का उपयोग कर।
  4. कैथेटर से 1 मिलीलीटर सिरिंज निकालें और कैथेटर में 5 हिंदुस्तान टाइम्स की 0.203 मिमी के साथ भरा एक 500 μl प्रेसिजन कांच सिरिंज डालें।
  5. एक प्रेरणा पंप में 500 μl प्रेसिजन कांच सिरिंज रखें। 63 मिलीग्राम / घंटा की दर से 350 μl / 5 हिंदुस्तान टाइम्स के समाधान के प्रति किलो 12.5 माइक्रोग्राम प्रति किग्रा / दिखे। एक में देखा जाता है, जो चूहे में कई लेनी प्रदर्शन और निरीक्षण एपनिया,कंप्यूटर मॉनीटर पर दर्ज श्वसन संकेतों में (≥ 2.5 सेकंड) साँस लेने में ठहराव सा।
  6. गर्दन की सर्जरी के साथ आगे बढ़ने से पहले, पैटर्न साँस लेने की निगरानी और चूहे में पैर की अंगुली चुटकी से दर्द पलटा लिए जाँच करें। साँस लेने अनियमित है, या पैर के अंगूठे चुटकी से एक दर्द पलटा अगर वहाँ, आईपी ketamine / xylazine प्रशासन यदि (100 मिलीग्राम / किग्रा: 5 मिलीग्राम / किग्रा) और फिर संज्ञाहरण का एक उचित स्तर फिर से पुष्टि करें।

4. गर्दन के सर्जरी ग्रंथिल गैन्ग्लिया का पर्दाफाश करने के लिए

  1. एक शल्य चिकित्सा बोर्ड पर एक लापरवाह स्थिति में सुरक्षित चूहा। गर्दन में शल्य कैंची का उपयोग कर एक midline अनुदैर्ध्य काट कर।
  2. (शल्य साइट के स्पष्ट इस मांसपेशी रखने के लिए 2 माइक्रो clamps के उपयोग करते हुए) platysma पेशी पर कुंद विच्छेदन का उपयोग करना, sternohyoideus और omohyoideus मांसपेशियों को बेनकाब। आंतरिक मन्या धमनी और इसकी शाखाओं में से एक, pterygopalatine धमनी बेनकाब करने के लिए इन मांसपेशियों को अलग करें।
  3. यह वें के साथ फिर आंतरिक मन्या धमनी के साथ चलाता है और के रूप में वेगस तंत्रिका का निरीक्षण ई pterygopalatine धमनी। जिह्वा-ग्रसनी तंत्रिका (कपाल तंत्रिका नौवीं) और रीढ़ की हड्डी में गौण तंत्रिका (कपाल तंत्रिका इलेवन) के साथ वेगस तंत्रिका और pterygopalatine धमनी, खोपड़ी के आधार पर पीछे लुंज रंध्र दर्ज निरीक्षण कैसे।
  4. ग्रंथिल नाड़ीग्रन्थि यह पीछे लुंज रंध्र में प्रवेश करती है ठीक पहले वेगस तंत्रिका की सूजन के रूप में प्रदर्शित किया जाता है कि नोटिस। इसके अलावा ग्रसनी और laryngeal तंत्रिका शाखाओं ग्रंथिल नाड़ीग्रन्थि की, क्रमशः, पूर्वकाल और कूल्हों पहलुओं उतर आया है कि नोटिस। 5
  5. Graefe संदंश का प्रयोग, धमनियों से वेगस तंत्रिका अलग, और वेगस तंत्रिका चारों ओर धागे का एक टुकड़ा रखें। वेगस तंत्रिका पर मामूली तनाव लागू होते हैं, और इंजेक्शन लगाने जब कम प्रतिरोध प्रदान करने के लिए किसी भी संयोजी ऊतक के ग्रंथिल नाड़ीग्रन्थि साफ करने के लिए थ्रेड पर एक क्लैंप रखें।
  6. कोई नुकसान ग्रंथिल गैन्ग्लिया के लिए किया गया था कि इस बात की पुष्टि करने के लिए धारा 3 में कहा गया है के रूप में 5 हिंदुस्तान टाइम्स प्रेरित एपनिया दोहराएँ।
Dronabinol की itle "> 5। Intranodose गैन्ग्लिया इंजेक्शन

  1. तिल के तेल में dronabinol के 5 μl के साथ टिप beveled एक 35 डिग्री के साथ एक कस्टम निर्मित 28 जी आधा इंच सिरिंज सुई के साथ चिपका एक 10 μl gastight प्रेसिजन कांच सिरिंज भरें।
  2. वेगस तंत्रिका पर मामूली तनाव लागू होते हैं, और इसके माध्यम से पंचर नहीं ग्रंथिल नाड़ीग्रन्थि देखभाल पंचर करने के लिए थ्रेड पर एक माइक्रो दबाना रखें। सिरिंज की संपूर्ण सामग्री इंजेक्षन करने के लिए धीरे धीरे सिरिंज (≥ 60 सेकंड) दबाना। सिरिंज सामग्री में से कुछ नाड़ीग्रन्थि से बाहर रिसाव जाएगा कि ध्यान दें।
  3. धारा 3 में कहा गया है के रूप में दोहराएँ एपनिया 5 हिंदुस्तान टाइम्स प्रेरित।

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Representative Results

चित्रा 1 dronabinol की intranodose गैन्ग्लिया इंजेक्शन से पहले और बाद एपनिया प्रेरित करने के लिए 5 हिंदुस्तान टाइम्स के अर्क था कि चूहों में नमूना साँस लेने की रिकॉर्डिंग का प्रतिनिधित्व करता है। 5 हिंदुस्तान टाइम्स 5 हिंदुस्तान टाइम्स मंदनाड़ी, हाइपरटेंशन, और एपनिया के Bezold-Jarisch पलटा कि योगदान करने ग्रंथिल गैन्ग्लिया पर तीन रिसेप्टर्स को सक्रिय करता है। Dronabinol की 11,17-19 Intranodose गैन्ग्लिया इंजेक्शन निरोधात्मक सीबी रिसेप्टर्स को सक्रिय करने, या allosterically 5 हिंदुस्तान टाइम्स modulates (चित्रा 1, शीर्ष पैनल) से पहले और बाद वेगस तंत्रिका की। 16,17,20,22 5 हिंदुस्तान टाइम्स प्रेरित उत्तेजना बाधित कि तीन रिसेप्टर्स (चित्रा 1, मध्यम पैनल) 5 हिंदुस्तान टाइम्स की गर्दन सर्जरी अर्क (चित्रा 1 ,) लाल रेखा द्वारा अभ्यारोपित पीजोइलेक्ट्रिक तनाव गेज मापा द्वारा पेट आंदोलन की कमी के रूप में देखा एक apneic प्रतिक्रिया elicits। Dronabinol की intranodose गैन्ग्लिया इंजेक्शन (चित्रा 1, नीचे पैनल) के बाद, चतुर्थ 5 हिंदुस्तान टाइम्स निषेचन नहीं बटोरएक apneic प्रतिक्रिया। वाहन नियंत्रण चूहों के ग्रंथिल गैन्ग्लिया में तिल का तेल इंजेक्शन (नहीं दिखाया डेटा) के बाद, चतुर्थ 5 हिंदुस्तान टाइम्स अर्क baselines के लिए तुलनीय एक apneic प्रतिक्रिया हासिल। 17

चित्रा 1
चित्रा 1:। पहले और वेगस नसों के ग्रंथिल गैन्ग्लिया में 100 माइक्रोग्राम प्रति dronabinol 5 में μl तिल का तेल इंजेक्शन के बाद तीव्र 5 हिंदुस्तान टाइम्स-indudced एपनिया प्रयोगों से नमूना रिकॉर्डिंग 17 श्वसन रिकॉर्डिंग सर्जरी के बाद, सर्जरी (शीर्ष पैनल) से पहले लिया गया था ( मध्यम पैनल), और ग्रंथिल गैन्ग्लिया इंजेक्शन के बाद (नीचे पैनल)। रेड लाइन एपनिया प्रेरित करने के लिए चतुर्थ 5 हिंदुस्तान टाइम्स अर्क का प्रतीक है। वाहन नियंत्रण चूहों के ग्रंथिल गैन्ग्लिया में तिल का तेल इंजेक्शन (नहीं दिखाया डेटा) के बाद, चतुर्थ 5 हिंदुस्तान टाइम्स अर्क baselines के लिए तुलनीय एक apneic प्रतिक्रिया हासिल। 17 यह आंकड़ा Calik एट अल से संशोधित किया गया है। 17ए.यू. = मनमाना इकाइयों; Resp = सांस।

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Discussion

ग्रंथिल गैन्ग्लिया में neurochemicals के सफल इंजेक्शन के लिए महत्वपूर्ण कदम उठाए हैं: 1) की पहचान करने और ग्रंथिल गैन्ग्लिया बंद संयोजी ऊतक सफाई; 2) इंजेक्शन से पहले ग्रंथिल गैन्ग्लिया की अखंडता की पुष्टि; 3) और नाजुक में इंजेक्षन करने के लिए एक छोटे गेज सुई का उपयोग, लेकिन पूरी तरह से, ग्रंथिल गैन्ग्लिया के माध्यम से puncturing नहीं।

वेगस तंत्रिका गर्दन और पेट में कई अंगों innervates, और इस तरह के सीएनएस को हृदय गति, रक्तचाप, bronchopulmonary जलन, और जठरांत्र बढ़ाव के रूप में महत्वपूर्ण जानकारी रिले। वेगस तंत्रिका की ग्रंथिल गैन्ग्लिया अमीनो एसिड, monoamines, neuropeptides, और अन्य neurochemicals के लिए रिसेप्टर्स की एक विविध सरणी होते हैं। उन रिसेप्टर्स के लिए neurochemicals की एक Intranodose गैन्ग्लिया इंजेक्शन वेगस तंत्रिका की गतिविधि को संशोधित करने के लिए, 16,17 से पहले किया गया है और परिधीय pharmacologi स्पष्ट करने के लिए एक उत्कृष्ट प्रयोगात्मक मॉडल का प्रतिनिधित्वऐसे स्लीप एपनिया, gastroesophageal भाटा रोग, या पुरानी खांसी जैसे रोगों को संशोधित कर सकते हैं कि वेगस तंत्रिका पर काल प्रभाव। 2-4

ग्रंथिल गैन्ग्लिया का पर्दाफाश करने के लिए, गर्दन सर्जरी आयोजित किया जाता है और गर्दन की मांसपेशियों आंतरिक मन्या का पर्दाफाश करने के लिए अलग हो रहे हैं। वेगस नसों आंतरिक मन्या और pterygopalatine धमनियों के साथ चल देखा जाता है। एकध्रुवीय वेगस नसों के सेल शरीर पीछे लुंज foramens पर खोपड़ी प्रवेश करने से पहले वेगस नसों की सूजन के रूप में देखा जाता है जो ग्रंथिल और petrosal गैन्ग्लिया में स्थित हैं। 5

ग्रंथिल गैन्ग्लिया की जोड़तोड़ ग्रंथिल ganglia और वेगस नसों की सर्जरी के दौरान क्षतिग्रस्त नहीं कर रहे हैं जहां तक ​​कि महत्वपूर्ण हैं। अनुचित और कच्चे तेल की शल्य चिकित्सा तकनीक धमनियों और अन्य कपाल नसों के साथ ग्रंथिल गैन्ग्लिया और उसके तंत्रिका शाखाओं, नुकसान पहुंचा सकता है। इस प्रोटोकॉल में, वेगस तंत्रिका स्थिर करने के लिए, हम vagu के लिए एक मामूली तनाव प्रदानरेशम के धागे के माध्यम से एस तंत्रिका एक माइक्रो क्लिप से जुड़ी। यह पर्याप्त रूप से इसे और अधिक कठिन ग्रंथिल नाड़ीग्रन्थि में इंजेक्षन करने के लिए कर सकता है कि किसी भी संयोजी ऊतक को साफ करने के लिए सक्षम बनाता है। इसके अलावा, हम ग्रंथिल गैन्ग्लिया 5 हिंदुस्तान टाइम्स आसव द्वारा एपनिया उत्प्रेरण द्वारा इंजेक्शन के साथ आगे बढ़ने से पहले बरकरार हैं कि इस बात की पुष्टि। ग्रंथिल नाड़ीग्रन्थि में इंजेक्षन करने के लिए, हम (28 जी, आयुध डिपो 362 माइक्रोन) एक सटीक कांच सिरिंज से जुड़ी सुइयों सस्ती छोटे गेज का इस्तेमाल किया। इंजेक्शन साइट गहराई ग्रंथिल गैन्ग्लिया के माध्यम से puncturing को रोकने के लिए के बाद से एक चिंता का विषय है, सीरिंज की beveled सुझावों कस्टम 35 डिग्री के एक अधिक ऊर्ध्वाधर कोण के साथ किए गए था। यह कांच micropipettes उपयोग किया जाता है, जिसमें अन्य Microinjection तकनीक से अलग 8-10,14-16 कांच micropipettes का लाभ एक छोटे टिप व्यास है। हालांकि, कांच की कमजोरी को प्रक्रिया के दौरान टिप तोड़ने का खतरा नहीं है। इसके अलावा, महंगे उपकरण नहीं हर प्रयोगशाला के अधिकारी हो सकता है, जो कांच micropipette, पुल करने की जरूरत है। कस्टम बनाया सुइयों को तोड़ने का कोई खतरा नहीं है, और वे कांच micropipettes (20-100 μl) की तुलना में बड़ा व्यास (362 माइक्रोन) 17 के थे, हालांकि 8,9,14-16 सुइयों ग्रंथिल गैन्ग्लिया के लिए अभी भी काफी छोटे थे इंजेक्शन। इसके अलावा, इन सुइयों कई प्रयोगों के लिए पुन: प्रयोज्य थे और micropipettes खींचने के लिए इस्तेमाल किया उपकरणों की तुलना में काफी कम खर्च कर रहे थे।

कारण ग्रंथिल गैन्ग्लिया में इंजेक्शन के लिए प्रयोग किया जाता कस्टम सुइयों के आकार के लिए, यह ग्रंथिल गैन्ग्लिया के लिए, यदि कोई हो, नुकसान का आकलन करने के लिए महत्वपूर्ण है। ग्रंथिल गैन्ग्लिया को नुकसान का आकलन करने की एक विधि ग्रंथिल गैन्ग्लिया के histological प्रसंस्करण और माइक्रोस्कोपी के माध्यम से है। 6-9,13,15 vagal अभिवाही समारोह का आकलन करने के लिए, इस प्रोटोकॉल में प्रयोग किया जाता है जो एक दूसरी विधि के बीच electrophysiological या व्यवहार के परिणामों की तुलना है प्रयोगात्मक और नियंत्रण इंजेक्शन समूहों। 14-17 Dronabinol इंजेक्शन सी की तुलना में 5 हिंदुस्तान टाइम्स प्रेरित एपनिया attenuate दिखाया गया हैontrol इंजेक्शन, बड़ा व्यास कस्टम सुइयों से कुछ नुकसान अगर वहाँ था, dronabinol से हिचकते थे कि अभी भी पर्याप्त कार्यात्मक ग्रंथिल गैन्ग्लिया कोशिकाओं है कि वहाँ थे वाचक 17। कार्यात्मक परिणामों (यानी, एपनिया) इस प्रोटोकॉल के महत्वपूर्ण मीट्रिक थे के बाद से इसी तरह, तेल में dronabinol के 5 μl के प्रसार की हद तक बढ़ाता आवश्यक नहीं है। इस प्रोटोकॉल में इस्तेमाल मात्रा ग्रंथिल गैन्ग्लिया में इंजेक्शन समाधान की व्यापक प्रसार की गारंटी करने के लिए चुना गया था। अन्य इसी तरह के प्रोटोकॉल में, वॉल्यूम्स जरूरत से ज्यादा अलग नहीं थे इंजेक्शन और 0.1 से 3 μl से बताया गया। 8,9,14-16 तेल की dronabinol के प्रसार की हद तक 5 हिंदुस्तान टाइम्स प्रेरित एपनिया attenuate करने के लिए पर्याप्त था। 17

इस प्रोटोकॉल के लिए संशोधन संभव हो रहे हैं। ग्रंथिल गैन्ग्लिया को होने वाले नुकसान की रोकथाम के एक जरूरत है, छोटे गेज सुई (सबसे छोटी 33 जी) है, तो सबसे पहले, इस प्रोटोकॉल में इस्तेमाल किया जा सकता है। एक छोटे गऊ का उपयोग करने के दोषजीई सुइयों है: 1) वे आसानी से टूट गया या तुला किया जा सकता है; 2) वे भीतरी व्यास तिल के तेल की तरह चिपचिपा तरल पदार्थ के इंजेक्शन के लिए अनुमति देने के लिए बहुत छोटा है। गहराई साइट इंजेक्शन महत्वपूर्ण है इसके अलावा, अगर, (45 डिग्री तक) अधिक ऊर्ध्वाधर कोण सुइयों खरीदा जा सकता है। हालांकि, एक अधिक ऊर्ध्वाधर कोण इसे और अधिक कठिन ग्रंथिल गैन्ग्लिया पंचर करने के लिए कर देगा। ग्रंथिल गैन्ग्लिया के इंजेक्शन के दौरान, वेगस तंत्रिका की संशोधित तनाव विभिन्न आकारों की सूक्ष्म clamps रखकर बदला जा सकता है। वेगस तंत्रिकाओं / ग्रंथिल गैन्ग्लिया को क्षति तो छोटे सूक्ष्म clamps के उपयोग करते हुए, रोका जा करने की जरूरत है आदर्श है। अन्त में, neurochemicals युक्त तरल पदार्थ का इंजेक्शन की मात्रा और तरल पदार्थ की एकाग्रता इंजेक्शन के माध्यम से संशोधित किया जा सकता है। इस प्रोटोकॉल में, 5 μl ग्रंथिल गैन्ग्लिया तर करने के लिए पर्याप्त से अधिक था।

इस प्रोटोकॉल के एक प्रमुख सीमा ग्रंथिल गैन्ग्लिया के माध्यम से puncturing की संभावना है। यदि ऐसा होता है, तो ग्रंथिल गैन्ग्लिया थानेदार की अखंडता की पुष्टि पुन:ULD किया जाए। ग्रंथिल गैन्ग्लिया की अखंडता की पुष्टि की है, तो ग्रंथिल गैन्ग्लिया इंजेक्शन दोहराया जा सकता है। संदेह ग्रंथिल गैन्ग्लिया के बारे में अखंडता अगर वहाँ हालांकि, एक नया चूहे के साथ तो एक प्रयोग पूरा किया जाना चाहिए। 17

ग्रंथिल गैन्ग्लिया पर रिसेप्टर्स की विविधता को बढ़ाने या अभिवाही तंत्रिका गतिविधि को बाधित कर सकते हैं। बढ़ती सबूत अभिवाही कभी नहीं गतिविधि मानव रोगों में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है कि पता चलता है। 2-4,23 इस प्रोटोकॉल अभिवाही तंत्रिका गतिविधि पर उनके प्रभाव का अध्ययन करने ग्रंथिल गैन्ग्लिया को neurochemicals के स्थानीय प्रशासन के लिए एक सस्ता तरीका प्रदान करता है।

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Acknowledgments

इस अध्ययन में राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान (अनुदान 1UM1HL112856) द्वारा समर्थित किया गया।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
5-HT HCl MP Biomedicals 215376591 12.5 µg/kg per 350 µl/kg
Dronabinol (Marinol) 10 mg Capsules (80 µg/µl) AbbVie NDC 0051-0023-21 Dilute with sesame oil to 20 µg/µl
Sesame Oil Sigma-Aldrich S3547
Intramedic Polyethylene-50 BD 427411 Ordered from VWR (Cat. # 63019-047)
Graefe Forceps Roboz RS-5138 Two are needed
Johns Hopkins Bulldog Clamp Roboz RS-7441 Three are needed
Piezoelectric Strain Gauge Ambu 813255-100
Data Acquisition USB Subsystems DataWave Technologies
Sciworks Experimenter Software
CyberAmp Axon Instruments
Syringe, 500 µl, Model 1750 TLL Hamilton Company 81220
Syringe, 10 µl, Model 1801 RN 7659-01
Needle, 28 G, Small Hub RN 7803-02 Point Style 4, Angle 35, Length 0.5 in

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Calik, M. W., Radulovacki, M.,… More

Calik, M. W., Radulovacki, M., Carley, D. W. A Method of Nodose Ganglia Injection in Sprague-Dawley Rat. J. Vis. Exp. (93), e52233, doi:10.3791/52233 (2014).

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