Introduction
Die Hauptfunktion der Lunge ist für Sauerstoff und Kohlendioxid Austausch zwischen einem Organismus und der Atmosphäre bereitzustellen. Beim Menschen eine Vielzahl von angeborenen und erworbenen Bedingungen führen zu verminderter Lungenfläche, die zu einer Beeinträchtigung der Lungenfunktion führt. Dh Lungen - Obwohl eine Vielzahl von Therapien wie inhalativen Kortikosteroiden, Bronchodilatatoren, zusätzlichen Sauerstoff und chronische mechanische Belüftung verwendet werden, um die Folgen der Beeinträchtigung der Lungenfunktion 1-3 abzuschwächen, wäre die ideale Therapie für diesen Bedingungen Nachwachsen der funktionellen Lungengewebe zu fördern Regeneration.
Säugetiergeweberegeneration ist gut dokumentiert worden. Die Afrikanische Stachelmaus können große Bereiche der Haut ohne Narbenbildung 4 zu regenerieren. Die Phalanx beim Menschen nach einer Verletzung oder Amputation 5-7 regenerieren. Nach Pneumonektomie (PNX) tritt Ausgleichslungenwachstum bei Mäusen, 8, 9 Ratten, zu tungs 10 und 11 Menschen. Per Definition beinhaltet Ausgleichslungenwachstum nicht nur Ausbau der bestehenden Lufträume, aber erneut Septierung dieser vergrößerten Lufträume mit der Expansion des zugehörigen Mikrozirkulation 12. Genexpressionsanalyse hat gezeigt, dass dieses Modell rekapituliert viele der Signalwege der Lungenentwicklung 13. Vier Wochen nach der Maus PNX ist Alveolaroberfläche äquivalent zu der scheinoperierten Tieren 14. In diesem Manuskript beschreiben wir die Maus PNX und Schein PNX Verfahren.
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Protocol
HINWEIS: Tier Verwendung Aussage: Alle Verfahren in dieser Studie wurden mit Genehmigung und nach den Richtlinien der Institutional Animal Benutzung und Pflege Committee (IACUC) in Cincinnati Kinderklinik durchgeführt. Acht Wochen alte C57BL / 6J männliche Mäuse wurden von Jackson Laboratories (Bar Harbor, ME) erhalten und man ließ sie für eine Woche vor dem Gebrauch akklimatisieren. Bis der Operation wurden die Tiere in einem pathogenfreien Barriere Anlage untergebracht und zur Verfügung gestellt autoklaviert Chow und gefiltertes Wasser ad libdium. Jede Maus Käfig wurde mit einer dedizierten Luft und Wasser versorgt, und die Zimmer wurden auf einem 12 Stunden Tag-Nacht-Zyklus gehalten. Nach Erholung von der Operation wurden die Mäuse in Käfigen mit gefiltertem Spitzen aufrechterhalten, sofern autoklaviert Futter ad libidum und sofern aus einer Wasserflasche gefiltertes Wasser.
1. Herstellung des Instruments
- Stellen Sie 6 Haut Wundhaken mit Büroklammern und Pins. Twist bogene Büroklammern auf den Schäften der Papier-Pins, lTraufe eine 5 cm gerader Stahldraht an einem Ende und machen eine einzige 0,5 cm "U" förmigen Haken am Ende des Drahtes.
- Stellen ca. 15 x 15 cm im Quadrat-OP-Abdeckungen mit Plastikfolie. Bereiten Sie eine Umkleide pro Maus. Setzen Sie ein Papierturm zwischen den einzelnen Wickel.
- Sterilisieren Sie alle chirurgische Instrumente zusammen mit einem Stapel von 12 x 12 Zoll Korkplatten, Gaze, und Wattestäbchen.
2. Maus Vorbereitung
- Induzieren Anästhesie mit 2% Isofluran. Wiegen Tier.
- In einem speziellen Operationsvorbereitungsbereich rasieren linken Brust und Nackenbereich mit elektrischen Rasierer.
- Geben Sie einen Tropfen der künstliche Tränen Salbe die Augen die Maus.
- Dekontaminieren Hals und linken Brust mit Chlorhexidin und Isopropylalkohol. Wiederholen Sie zweimal.
3. Maus-Oro-Intubation und Beatmung
- Haben Sie ein nicht-sterilen OP-Techniker statt mit der Maus auf dem Rücken in der vorgewärmten OP-Bereich.
- Narkosetiefe Bestätigen Dokumentation Fehlen einer Reaktion auf die Pfote Prise.
- Nach dem Waschen der Hände und das Anziehen OP-Kleidung, Maske und Hut, don sterile Handschuhe.
- Nach Drapierungen und unter aseptischen Bedingungen, machen Sie einen 1 cm vertikale Inzision über der vorderen Mitte Nacken, den Kehlkopf freizulegen. Leicht einfahren Halsmuskulatur mit gebogenen, gezackten 10 cm Pinzette und setzen den Kehlkopf und Luftröhre durch die Streuung der Halsmuskulatur mit der Spitze einer geraden Schere.
- Oral legen Sie eine 22 G stumpfen Spitze Angiokatheter in die Mitte der Luftröhre (1A) und optisch Platzierung (1B) zu bestätigen. Pflegen Anästhesie und belüften mit 1-3% Isofluran durch Nagetierventilator (225 ul pro Hub; 200 Stokes pro min). Verwenden Sie ein Druckgrenze von 15 cm H 2 O
4. Maus Pneumonektomie
- Legen Sie die Maus in die richtige Seitenlage mit der Maus den Rücken vorder Betreiber (links oben). Verwenden Sie einen selbstdichtenden Plastikfolie als sterilen Tuch. Schneiden durch den Faltenwurf, verwenden stumpfer Spitze gebogene Schere, einen 2 cm langen Schnitt parallel zu den Rippen auf der 4. und 5. Zwischenrippenraum zu machen. Legen Sie die stumpfe Spitze gebogene Schere und sezieren die Haut von den zugrunde liegenden Rippen und Rippenmuskeln.
- Ziehen Sie die Haut mit vier Wundhaken, um ein Quadrat aussetzen 1,5 x 1,5 cm Operationsfenster (Abbildung 2A). Sichern Sie die Wundhaken an den Kork Bord.
- Präparieren Sie auf Rippen mit einer gebogenen Pinzette, und verwenden Sie eine Spitze der gebogenen Pinzette, um die Brusthöhle zu gelangen.
- Mit Hilfe der stumpfen Spitze Mikroscheren, verwenden Sie die Untermesser, um die Brusthöhle zu gelangen. Machen Sie eine 0,5 cm Einschnitt zwischen den Rippen, und wiederholen Sie in die entgegengesetzte Richtung.
- Mit den beiden verbleibenden Wundhaken, öffnen Sie den Brustkorb in der Vorwärts-Rückwärts-Achse und die sichere die Retraktoren mit dem Kork Bord (2B). <li> Mit gebogenen stumpfen Pinzette in der linken Hand das linke Lunge und verdrängen den oberen Teil der linken Lunge seitlich und unten durch die Thorakotomie, bis die linke Lungenarterie und Bronchien ausgesetzt sind (3A, B).
- Halten Sie die geladenen Titan Gefäßmikroclip Applikator in die rechte Hand mit dem Körper des Applikators in der Handfläche und gebogene Spitze nach weg von der Handfläche (3C), schieben Sie die Applikatorspitze in den Brustkorb entlang der Krümmung der hinteren Seite des linken Lunge und Clip der linken Bronchus und Lungenschlagader (3D).
- Entfernen Sie den Applikator aber halten Sie die linke Lunge eingefahren. Fassen Sie die stumpfe Spitze Mikro-Schere mit der rechten Hand und schneiden Sie die Bronchien und Lungenarterie distal der Clip und entfernen linken Lunge (3E).
- Entfernen Sie die Rippenspreizer.
- Mit den gebogenen stumpfen Pinzette zu kneifen bis 1 cm von der Haut schlechter als die incisiauf, sondern über dem Niveau der Membran und setzen Sie eine 24 G Angiokatheter durch die Haut und in die linke Brusthöhle (4A, B).
- Verwenden Sie 5-0 Prolene Naht zu zwei Knopfnähten auf der 4. und 5. Rippen platzieren, um die Brusthöhle zu schließen.
- Entfernen Sie die Haut Wundhaken. Verwenden Sie zwei Sätze von Pinzette, um die Haut entlang der Länge des Einschnitts nähern und kleben die Haut verschlossen.
- Schließen Sie einen 3 ml Luer-Lock-Spritze mit dem Angiokatheter und entfernen Restluft durch leichten Ansaugen und Zurückziehen des Angiokatheter.
- Kleben Sie den Halsschnitt geschlossen mit zwei Sätzen von Zangen wie zuvor.
5. Maus Sham Pneumonektomie
- Setzen Sie die linke Lunge wie in "Maus Pneumonektomie" Protokoll vermerkt. Heben Sie den Brustkorb mit gebogenen stumpfen Pinzette, um Luft in die linke Brusthöhle zu ermöglichen (5A, B).
- Legen Sie eine 24 G Angiokatheter in die linke thoRacic Hohlraum wie oben darauf achten, daß die linke Lunge schädigen.
- Mit 5-0 Prolene Nahtmaterial und darauf achten, daß die Lunge (5C) durchstoßen, indem Sie zwei Längen von Nahtmaterial in der 3. / 4 und 5. / 6. Rippenzwischenräumen (5D). Gebe beide Längen von Nahtmaterial vor den Bund, um die Risiken der linken Lunge Herniation zu verringern. Binden Sie die Nahtmaterial zu zwei unterbrochenen Stichen (5E) zu machen.
- Kleben Sie die Haut über der Brust-Schnitt, entfernen Sie Restluft mit dem Angiokatheter und kleben Sie den Halsschnitt wie oben.
6. Wiederbelebung, Analgesie und Wiederherstellung
- Schalten Sie die Isofluran und Verwalten 0,1 mg / kg von Buprenorphin und 0,5 ml physiologischer Kochsalzlösung subkutan.
- Wenn spontane Atmung wieder aufzunehmen, entfernen Sie den Endotrachealtubus.
- Beachten Maus, bis es wieder ambulante ist. Wandern in der Regel Resum¯es mehrere Minuten nach der Entfernung des Endotrachealtubus.
- Platzieren Sie die Maus in einem 27 ° C Inkubator (befeuchteten, Sauerstoff 25%) zu erholen O / N.
HINWEIS: Legen Sie mehrere Pellets von Chow mit Wasser für die ersten 24 Stunden nach der Operation benetzt auf dem Käfigboden. - Verabreichen 0,1 mg / kg Buprenorphin durch intraperitoneale Injektion zweimal täglich für drei Tage nach der Operation. Darauf achten, dass die Operationsstelle beim Umgang mit Tieren zu öffnen.
7. Maus-Überwachung
- Wiegen Mäusen nach 1, 3, 5 und 7 Tage nach der Operation.
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Representative Results
. Ein Grundstück von PNX und scheinoperierten Maus Gewichte ist in Abbildung 6 vorgesehen In unseren Händen, ist das Überleben konsequent 95-100% für beide PNX und Schein Pneumonektomie. Eine Beschreibung, wie die rechte Lunge wieder wächst in diesem Modell und dem erwarteten zeitlichen Verlauf, verweisen wir den Leser auf Manuskripte Gibney et al. 15 und Wang et al. 14
Einige häufige Fehler zu vermeiden, um die Maus PNX und Maus Schein Pneumonektomie Verfahren erfolgreich durchzuführen.
Intubation: Viele Forscher lernen Sie die Maus PNX Technik haben Schwierigkeiten mit Intubation. Da die Maus Kehlkopf vorderen und der Endotrachealkatheters muss durch die Stimmbänder übergeben werden, ist es leicht für den Katheter in die Speiseröhre gelangen. Wie in 1A gezeigt, sollte der stumpfen Katheter vorderen wie möglich nach curva abgewinkelt werdentur der Zunge entlang der Mittellinie und dann übergeben in die Luftröhre mit sanft Druck. Mid-Trachealkatheter Position sollte visuell bestätigt werden (Abbildung 1B). Endotracheal Plazierung kann durch leichtes Verschieben des Katheters Seite zur anderen und die Beobachtung für die Bewegung der Trachea zu bestätigen. Die richtige Positionierung wird durch die Beobachtung der bilateralen Brustkorb hebt bestätigt. Eine alternative Technik ist unten beschrieben.
Operationsfeld Schöpfung: Eine zweite Fallstrick ist das Versagen, eine angemessene Thorakotomie Fenster erstellen. Wie in 2A und 2B dargestellt ist, muss der Thorakotomie Fenster ausreichend groß und posterior, um eine angemessene Darstellung der linken Lungenarterie und linken Hauptbronchus ermöglichen. Die unerfahrenen Operator häufig machen seine Thorakotomie zu klein, zu vorderen, oder zu unterlegen leicht einfahren linken Lunge und auf die linke Hilus.
Vascular Clip Applicatiauf: Wenn der Kreislauf-Clip richtig anwenden wird in Blutleere führen. Ordnungsgemäße Identifizierung des Hilus ist entscheidend (3A). Wie in 3B und 3C gezeigt ist, wenn die Klammer von der Halterung durch den Clipapplikator entfernt gezeigt, ist das Ende der Klammer bündig mit der Spitze des Klippapplikators und dem Körper des Clips im Körper des gekrümmten Applikatorspitze . Gentle Schließung des Applikatorgriff wird der Clip zu schließen. Jede Änderung in Clip Orientierung kann zu einer unzureichenden Clipverschluss führen; Daher sollte ein neuer Clip geladen werden, wenn ein Clip wird aus dem Applikator verdrängt. Ebenso sollte die Traktion auf der linken Lunge sanft sein, um nicht den Hilus proximal der Klammer reißen. Die gekrümmte Spitze des Applikators sollte die Kurve der Oberrand der linken Lunge nach links folgen Hilus (3D) zu ligieren. Ein häufiger Fehler ist Unterbindung der Speiseröhre. Wie in 3E gezeigt,
Vermeiden Left Lung Injury Während Sham PNX: Wahrscheinlich die häufigste Falle von erfahrenen und unerfahrenen Operatoren Lungenschädigung bei Schein PNX verlassen. Wie in 5 gezeigt, muss der Bediener vorsichtig während Thorakotomie Verschluss sein, nicht die Lunge mit der Nähnadel durchstechen oder Einschließen von Band Lunge ermöglichen. Es ist wichtig, die Rippen zu heben, wenn sie den Retraktor, das 24 G Angiokatheter für die Luftabführung, und die Naht (5A-D). Während Thorakotomie Verschlusses man beide Stränge des Fadens vor Kopplung minimiert das Risiko einer Lungeneinschluss (5E). Unser Labor wird üblicherweise durchgeführt vier Scheinverfahren durch vier folgen PNX, so dass wir eine Schein-Maus in einen PNX Maus sollten wir verletzen die linke Lunge zu konvertieren. Es sei darauf hingewiesen, dass nicht alle Gruppen Evakuierung von Rest linken Thorax Luft durchzuführen. Um das Beste aus unserem Wissen gibt es keine Daten verglichen PNX mit und ohne Restluftevakuierung.
Mit etwas Übung und Erfahrung, sollten beide PNX und Scheinverfahren in 10 min erreicht werden, so dass bis zu zwei Dutzend Maus-Operationen in einer einzigen Sitzung durchgeführt werden.
Abbildung 1. Maus Intubation. (A) Die oraltrachealen Katheter sollte Mittellinie und verwendet, um die Zunge zu drücken, wie es erweiterte und abgewinkelt nach vorne in Richtung auf den Kehlkopf (B) eine korrekte Positionierung des Katheters in der Mitte der Luftröhre ist. Visuell bestätigt werden."Target =" _ blank "> Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieses Bild anzuzeigen.
Abbildung 2. Maus Thorakotomie. (A) Nach dem Schnitt und der Freisetzung von der Haut von der darunter liegenden Brustkorb, ein 1,5 x 1,5 cm Operationsfenster am 4. und 5. Zwischenrippenraum zentriert ist. (B) Nach dem Anlegen eines Thorakotomie in der 4. und 5. erstellt th Rippenzwischenrippenraum, sind Wundhaken verwendet, um die Lunge zu visualisieren. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieses Bild anzuzeigen.
Abbildung 3. Pneumonektomie. (A) Die linke l ung mit einer gebogenen Pinzette durch die Thorakotomie, um die linke Hilus (weißer Pfeil) zeigen ergriffen und angehoben werden. (B) Die Gefäßklemme sollte bündig mit der Spitze des Gefäß Clipapplikator und innerhalb der gekrümmten Applikatorspitze sitzen. (C) Der Applikator soll mit dem rechten Daumen und 4. Finger mit dem Körper des Applikators sitzt längs der Handfläche der rechten Hand mit der gebogenen Spitze abgewinkelt weg von der Handfläche gehalten werden. (D) Nach der Kurve des linken oberen Lappens, das Gefäßclip zur linken Hilus angewendet. (E) Wie folgenden Links PNX gesehen wird die Speiseröhre (zwischen den weißen Pfeile) befindet sich nur hinter dem linken Hilus (Gefäßclip mit weißen Kasten umrandet). Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version zu sehen diese Zahl.
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Abbildung 4. Platzierung Angiokatheter Für die Luftabführung. (A) Die Angiokatheter Spitze durchsticht die Haut. (B) Die Angiokatheter wird über der Membran in die Brusthöhle eingesetzt. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieses Bild anzuzeigen.
Abbildung 5. Maus Sham Pneumonektomie. (A) Bei der Scheinverfahren, Aufhebung der Rippenkante vor der Platzierung Aufroller minimiert das Risiko der Lungenschädigung. (B) die Gurtstraffer sollte an Ort und Stelle belassen werden, wie sie für den PNX sind. (C) Der untere Rand des Brustkorbs sollte erhöht werden, wenn Sie den 24 G Angiokatheter zur Restluft ansaugen nach der Stilllegung des Thorax und übering Haut. (D) Der Brustkorb sollte auch für Nahtplatzierung angehoben werden. (E) Durch die beiden Stränge der Faden über die Thorakotomie vor Ort zu binden, das Risiko von Lungenkrebs Einschlüsse minimiert. Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version zu sehen diese Zahl.
Abbildung 6. Erwartete Gewichtsverlust. Mit fünf Mäuse pro Gruppe haben wir gezeigt, dass 24 Stunden nach der Operation, wird PNX Mäuse durchschnittlich 1,5 g (7,2%) zu verlieren, und der Schein-Mäusen wird durchschnittlich 1,1 g (5,2%) zu verlieren. Beide Gruppen wieder ihre präoperative Gewicht von postoperativen Tag 3.
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Discussion
Wir haben die detaillierte Beschreibung der Maus PNX und Maus Schein PNX Verfahren bis heute berichtet vorgesehen. Wir haben die Leser bewusst einige der häufigsten Fallstricke, dass die Ermittler das Erlernen der häufigsten Verfahren stoßen gemacht, und wir haben verschiedene Techniken, die von unserem Labor entwickelt, um gegen diese Gefahren zu mildern skizziert. Andere Labors nutzen dieses Modell können andere Technik Modifikationen entwickelt haben, oder verwenden Sie verschiedene Instrumente. Bei der Bewertung der Unterschiede in den Techniken, werden einzelne Ermittler müssen sich entscheiden, ob diese Unterschiede wesentlich beeinflussen Versuchsergebnisse.
Die Maus PNX Modell der Ausgleichslungenwachstum hat viele Vorteile gegenüber anderen Tiermodellen der Lunge Reparatur und Regeneration. Die große Zahl der transgenen Mäusen zur Verfügung Make Linie Tracing, Gen-Überexpression und allgemeine gezielter Gendeletion Experimente erreichbar für die meisten Labors 16. Zweitens morphometric Techniken zur Quantifizierung von alveolären erneute Wachstum sind gut beschrieben 17. Drittens sind die Kosten für die Annahme dieses Modell moderat. Die einzige spezielle Ausrüstung erfordern diese Verfahren ist Gefäßclip Applikatoren und stumpfe Spitze Cohan-Vannas Frühjahr Schere. Alle anderen Geräte werden häufig in einem Maus-Chirurgie-Kit oder zur Verfügung über eine Maus chirurgischen Kernanlage zur Verfügung gestellt werden. Viertens, mit der Erfahrung, die Maus PNX und Schein PNX Verfahren werden relativ schnell so dass für viele Operationen zum am selben Tag durchgeführt werden. Schließlich ist die geringe Größe der Maus im Vergleich zu anderen Tiermodellen, bescheidenen Wohnbedürfnisse und die Leichtigkeit, mit der sie auch gezüchtet werden machen das Mausmodell einfacher zu verwalten als andere Tiermodelle.
Es gibt auch einige Nachteile bei der Maus PNX Modell im Vergleich zu anderen Modellen von Lungenregeneration. Während der Maus Ausgleichslungenwachstum ist weitgehend abhängig von Strecke 18, Ausgleichs Lunge wachsenten in höheren Säugetieren hängt sowohl dehnen und erhöhten pulmonalen Blutfluss 19. Da menschliche Lungenregeneration wird wahrscheinlich mehr ähnlich wie die regenerative Mechanismen dieser höheren Säugetieren, sollte der Prüfer darauf achten, Extrapolation Ergebnisse in der Maus direkt an den Menschen. Maus Atemmechanik sind anders als die menschliche Atemmechanik. Beim Menschen wird Ende der Ausatmung durch eine Pause, in der kein Luftstrom begleitet. Am Ende der Ausatmung bei Menschen, ist Lungenrekrutierung durch die radiale Zugkraft eines niedrigen Compliance Brustkorb gehalten. Die Maus Atmungszyklus fehlt diese Ausatmungspause was zu einer kleinen Menge von Lufteinschlüssen aufgrund unvollständiger Ausatmung. Da die Maus hat eine viel höhere Compliance Brustkorb, ist es diese Lufteinschlüssen, die Lungenrekrutierungs 20 hält. Der dritte Nachteil des Mausmodells ist seine Anatomie. Da die Maus hat nur einen einzigen linken Lungenlappen ist links Teil PNX nicht möglich, da es in anderen istSpezies.
Einige Fallstricke müssen an mehreren kritischen Momenten vermieden werden, um die Maus PNX und Scheinverfahren erfolgreich durchzuführen. Diese kritischen Momenten sind Intubation, die Schaffung des Operationsfeldes, Gefäßclips Anwendung und Vermeidung von linken Lungenschädigung bei Scheinoperation.
Nekropsie irgend Mäuse, um diese chirurgischen Verfahren überleben nicht wesentlich zur Verbesserung der Operationstechniken in der Zukunft. Im Folgenden haben wir einige allgemeine Schwierigkeiten beheben und bieten alternative Techniken, die ein höheres Maß an Erfolg liefern können.
Nichtbestehen kanülieren die Luftröhre: Andere Labors nutzen Federung und transLuftRöhrenBeleuchtung für oro-Intubation, die die Notwendigkeit für eine direkte Visualisierung 21 entfällt.
Schwierigkeitsgrad Visualisierung Hilum: Das Erstellen einer großen, richtig platziert Thorakotomie Fenster notwendig in Um den linken Hilus zu visualisieren. Wenn während des Verfahrens Visualisierung unzureichend oder nicht genügend Platz zum Einsetzen der Gefäßclip Applikatoren sollte die Thorakotomie verlängert werden und Retraktoren neu positioniert. Es sollte keine Ansammlung von Blut während dieser Prozedur können. Wenn ja, sollte der Prüfer festzustellen, ob er zu sehr zu Spannung auf der linken Lunge und Reißen der linken Lungenarterie.
Blutungen nach Entfernung der linken Lunge: Es sollte wenig Blutungen während dieses Verfahrens sein. Ein nicht richtig eingelegt oder angewendet Gefäßclip ist die häufigste Ursache von Blutungen, und eine Maus mit Blutungen aus der linken Lungenarterie sollte eingeschläfert werden. Wenn diese Art von Blutungen, ordnungsgemäße Ladung des Gefäßklemme und die Anwendung von festen, gleichmäßigen Druck während der Anwendung sollte, bevor Sie den Vorgang erneut bestätigt werden. Ebenso ist die postoperative Tod mit der Feststellung von Blut in der linken Brustwahrscheinlich durch unsachgemäße Gefäßclip-Anwendung. Eine Alternative zu unseren Gefäßclip-Technik ist Ligatur mit Seidenfaden.
Links Lung Injury In Sham Surgery: In vielerlei Hinsicht erfordert das unechte Verfahren einen höheren Grad von chirurgischen Fähigkeiten als das PNX Verfahren. Die linke Lunge kann während Thorakotomie verletzt werden, während der Einführung der 24 G Angiokatheter unterhalb der Operationsstelle oder während des Schließens der Thorakotomie. Je nach Versuchs Bedarf können Mäuse unterzogen Scheinoperation zu PNX umgewandelt werden. Eine weitere mögliche Ursache von links Lungenschädigung ist Inhaftierung von Band linken Lunge während der Thorakotomie Standortschließung. Sham-Mäusen mit linken Lungenschädigung sollten entweder getötet oder ihre chirurgische Verfahren geändert werden, um PNX werden.
Respiratory Distress Nach Wiederherstellung: Atemnot nach Erwachen aus der Narkose kann von Schwellung der Stimmritze durch traumatische Intubation, unzureichende Schmerzkontrolle oder unreco kommengnized Lungenschädigung. In der Regel, wenn die Not durch die Verabreichung von zusätzlichen Schmerzmittel erleichtert, sollten die Tiere eingeschläfert werden und dazu führen, bestimmt. Mehrere Intubationsversuchen könnte in Glottis oder subglottischen Schwellungen mit den daraus resultierenden Schwierigkeiten mit Inspiration führen. Auf der Autopsie wird Fehlen eines Patent Glottisöffnung offensichtlich, nachdem die Stimmritze wird aus dem Hypopharynx getrennt. Alternative Ansätze zur endotrachealen Kanülierung sind oben beschrieben. Unzureichende Schmerzkontrolle mit zusätzlichen Dosen von Schmerzmitteln behandelt werden. Wie oben erwähnt, ist ein unbeabsichtigtes linken Lungenschädigung häufig, wenn das Erlernen der operativen Scheinverfahren und kann unerkannt zu Atemnot und Änderung von experimentellen Ergebnissen führen.
Übermäßige Gewichtsverlust und Dehydrierung: Mäuse, die übermäßiger Gewichtsverlust oder Dehydrierung nach der Operation auftreten können einen ligierten Speiseröhre, unzureichende Schmerzkontrolle, oder die Unfähigkeit, zu füttern oder zu trinken. Die Speiseröhre liegt just hinter dem linken Hilus und Unterbindung der Speiseröhre sollten bei dehydrierten Maus vermutet werden. Unzureichende Schmerztherapie sollte bei Mäusen mit Piloerektion, erhöhte Aggressivität oder reduziert Gehfähigkeit vermutet werden. Der Thorakotomie können Mäuse vor Erreichen Nahrung und Wasser aus dem Kabinendach an dem ersten postoperativen Tag suspendiert verhindern. Mäuse, die nicht essen und trinken nach dem Erwachen aus der Narkose wird erst mehr schwach und dehydriert. Wir empfehlen, angefeuchtet Essen auf dem Boden des Käfigs für 24 Stunden nach der Operation.
Im Ergebnis ist die Maus Pneumonektomie Modell der Ausgleichslungenwachstum ist ein wertvolles Modell für die Aufklärung der zugrunde liegenden Mechanismen der Lungenregeneration.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 6 inch Vascular clip applicator | Teleflex Medical (WECK) | 137062 | |
| Horizon small titanium red clip | Teleflex Medical (WECK) | 1201 | |
| Narrow pattern 12 cm curved forceps | Fine Science Tools | 11003-12 | |
| Curved serrated 10 cm Graefe forceps | Fine Science Tools | 11052-10 | |
| Castroviejo needle holder | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| Straight 9 cm Strabismus scissors (blunt tip) | Fine Science Tools | 14075-09 | |
| Straight 8.5 cm hardened fine scissors | Fine Science Tools | 14090-09 | |
| Straight, blunt tip Cohan-Vannas spring scissors | Fine Science Tools | 15000-12 | |
| Skin glue | Gluture | 32046 | |
| 22 G Angiocatheter | |||
| 24 G Angiocatheter | |||
| 3 ml Luer lock syringe | |||
| 4 Short retractors | |||
| 2 Long retractors | |||
| 5-0 Prolene on curved cutting needle | Ethicon | 8698G | |
| 0.5 ml Syringe on 27 G needle | |||
| Normal saline | |||
| Buprenorphine | |||
| Press-n-Seal wrap | Glad Products Company | ||
| 12 x 12 inch Cork board stack | Office Depot | ||
| 70% Ethanol | |||
| Betadine | |||
| Mouse ventilator | Hugo Sachs Elektronnik | Minivent Type 845 | |
| Isoflurane vaporizer | OHMEDA | Excel 210 SE | |
| Artificial tear ointment | Puralube | NDC: 17033-211-38 |
References
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