Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

نموذج الجلد ماوس الجنين من إصلاح الجرح Scarless

Published: January 16, 2015 doi: 10.3791/52297
* These authors contributed equally

Introduction

جروح الجلد الجنين تلتئم بسرعة وscarlessly حتى وقت متأخر من الحمل 1. يتميز الجنين إصلاح الجرح scarless التي كتبها تجديد العمارة الأنسجة الطبيعية وظيفة. الانتقال من scarless الى ظهور ندوب النمط الظاهري يحدث في الثلث الثالث من الحمل في البشر وحول يوم الجنينية 18 (E18) في الفئران 2،3. وبالمقارنة مع الكبار، وتتميز إصلاح الجرح الجنين قبل الاندمال بتشكل النسيج الظهاري السريع، وترسب النسيج الضام، والهجرة الخلايا الليفية.

وعرضت العديد من الدراسات التفسيرات المحتملة لظاهرة scarless التئام الجروح أثناء التطور الجنيني المبكر. التهاب هو عنصر أساسي للإصلاح الجرح البالغين. ومع ذلك، وتتميز الجروح الجنين بسبب عدم وجود التهاب حاد 4. إذا كان هذا هو نتيجة لعدم النضج الوظيفي لجهاز المناعة خلال مراحل الجنين لا يزال غير واضح. اقترحت دراسة حديثة أن الخلافات في وفرة، وحصيرةurity، ووظيفة الخلايا البدينة في E15 E18 مقابل الجلد الجنين قد تكون مسؤولة عن الانتقال من النمط الظاهري scarless، على الأقل في الماوس 3. دراسات أخرى يفترض أن الاختلافات في خصائص وفرة من الضامة الجرح الجنين وتعليم الكبار هي المسؤولة عن إعادة تشكيل المصفوفة خارج الخلية العادية (ECM) خلال إصلاح الجرح الجنين 5.

قد تؤثر الاختلافات في العوامل البيئية أثناء التطور الجنيني والكبار أيضا إصلاح الجرح. أظهر Longaker وزملاؤه أن السائل الجرح من الجنين يمتلك مستويات عالية من النشاط تحفيز حمض الهيالورونيك مقارنة مع لا شيء في الكبار الجرح السائل 6. ونتيجة لذلك، مستويات أعلى من حمض الهيالورونيك، وهو جلايكان أن يعزز المكروية مواتية لحركية الخلية والانتشار، في بيئة الجرح الجنين قد تكون مسؤولة عن النمط الظاهري scarless ينظر أثناء التطور الجنيني المبكر. خطوط أخرى من نقطة دليل على حقيقة أن الفيتاالبيئة ل الجرح هي hypoxemic نسبيا وغارقة في السائل الذي يحيط بالجنين معقم غنية عوامل النمو 7. ومع ذلك، فقد تم تقديم أي إجابة شافية لحدث بالغ الأهمية أو عامل خلال مرحلة التطور الجنيني الذي يقوم بتشغيل الانتقال من تجديد scarless لإصلاح متليفة.

فهم الآليات المسؤولة عن الشفاء scarless في الجنين يتطلب نموذجا دقيقا وقابلة للتكرار. نحن هنا التفاصيل نموذجا استنساخه من الجنين scarless التئام الجروح في ظهر E16.5 (scarless) والأجنة E18.5 (تندب) الماوس. بالإضافة إلى ذلك، اختلافات طفيفة من هذا النموذج يمكن استخدامها لتنفيذ عدد من إجراء المزيد من الدراسات، مثل تحليل التعبير الجيني للجروح الجنين و8،9 الجلد. وبالنظر إلى أن الحمل توقيتها بدقة بالغة الأهمية بالنسبة لخلاصة الناجح لهذا الجنين scarless الجرح نموذج الشفاء، ونحن أيضا بالتفصيل بروتوكول لدينا لفرط الإباضة توقيت الحمل.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

ملاحظة: يتم تنفيذ كافة الإجراءات الموضحة في هذه الورقة وفقا للمبادئ التوجيهية التي وضعتها لوحة الإدارية ستانفورد على رعاية الحيوان المعملية (APLAC).

1. موقوت الحمل - تقنية فرط الإباضة (الشكل 1)

ملاحظة: بالضبط توقيت عمر الحمل من أجنة الفئران لجراحة الجنين في E16.5 وE18.5 هي ذات أهمية حاسمة. في هذا القسم ونحن بالتفصيل بروتوكول لدينا لتوقيت الحمل الماوس باستخدام الأفراس الحوامل المصل (PMS) وموجهة الغدد التناسلية المشيمية البشرية (HCG) الحقن للحث على فرط الإباضة.

  1. حقن الفئران الإناث (<5 في قفص) داخل الصفاق (IP) مع 3،0-5،0 وحدة دولية (IU) من PMS في حجم 100 ميكرولتر PBS 1:00 حتي 03:00 ليوم 1.
  2. بين 12:00 و 14:00 من يوم 3 (خمسة وأربعين إلى 47 ساعة بعد الحقن PMS)، حقن الفئران الإناث IP مع 3،0-5،0 وحدة دولية من HCG في حجم 100 ميكرولتر PBS.
    ملاحظة: الحث حقن HCG التبويض ما يقرب من 12 ساعة بعد الحقن.
  3. بعد الحقن HCG على الفور، تتزاوج الإناث مع الذكور الذين تتراوح أعمارهم بين 8-16 أسابيع.
    ملاحظة: نحن عادة وضع أنثيين في قفص من الذكور الفردية.
  4. الإناث منفصلة عن الذكور في صباح يوم 4 (6:00 حتي 10:00) وسجل على الجنين E0.5 العمر.
    ملاحظة: يمكن التحقق من المقابس المهبلية في هذا الوقت. ومع ذلك، فإن المراقبة من المكونات المهبلي لا يضمن الحمل، ويمكن أن الإناث تصبح حاملا عندما لوحظ عدم وجود المكونات. وبالنظر إلى أن الحمل يمكن ملاحظته عادة عن طريق التفتيش البصري و / أو الجس في سن الحمل وE16.5 E18.5، التحقق من وجود المقابس المهبلية في صباح يوم 4 ليس من الضروري بدقة. في تجربتنا، واعتمادا على سلالة، ما يقرب من 30-50٪ من الإناث-مبيض فائقة تصبح الحوامل باستخدام تقنية الموضحة هنا.

خريج "/>
الشكل 1. تخطيطي لفرط الإباضة تقنية. الإجراء عرض تخطيطي لفرط الإباضة توقيت الحمل في الفئران. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

2. الفئران الجنين الجراحة (الظهرية إصابة) على E16.5 وE18.5 الأجنة (الشكل 2)

  1. قبل الإجراء، وتنظيف جميع الأسطح من غرفة العمليات والمعدات مع 70٪ ايزوبروبيل. وبالإضافة إلى ذلك، وتعقيم جميع اللوازم والأدوات الجراحية التي سيتم استخدامها في إجراء التعقيم لهم. بعض المؤسسات قد تسمح استخدامه لاحقا من حبة تعقيم الساخن. لكل عملية، استخدم حزم العقيمة التي تشمل الشاش والأدوات الجراحية.
  2. لحث التخدير في الأمهات الحوامل (الجنين E16.5 العمر أو E18.5) أقل من 2.5٪ خليط الأيزوفلورين / الأكسجين في 2 L لكل دقيقة تليها التخدير الصيانة في 1 L لكل دقيقة.
  3. ليخدعالتخدير السليم ثابت، وضمان يتم منع ردود الفعل دواسة عميقة من الفأرة ووضع الماوس في وضعية الانبطاح.
  4. تطبيق مرهم للعين طبيب بيطري مثل Puralube لمنع تهيج العين أو جفاف أثناء العملية.
  5. إعداد البطن بالإدارة تطبيق خفيفة من كريم مزيل الشعر لمدة لا تزيد عن 30 ثانية (الشكل 2A).
  6. إعداد البطن لجراحة العقيم مع بوفيدون اليود والكحول (الشكل 2B و2C).
  7. أداء خط الوسط البطن تحت المجهر باستخدام مقص المجهرية (الشكل 2D و 2E).
  8. فضح بلطف الرحم والجنين اختيار لعملية جراحية (الشكل 2F).
  9. ري الجراحي الميداني مع دافئ (38 درجة مئوية) الفوسفات مخزنة المالحة (PBS) باستخدام إبرة حادة طرف
    ملاحظة: واحد يمكن أن يتم عن طريق الانحناء بعناية غيض من إبرة كبيرة الجوف. (الشكل 2G و 2H).
  10. وضع الجنين بطريقة تسمحليالي الوصول الكامل إلى ظهر.
  11. تمرير غرزة سلسلة محفظة باستخدام النايلون 7-0 خياطة من خلال الرحم التي تغمر موقع المقصود الظهرية جرح (الشكل 2I). سلسلة موقف مال أكثر من منطقة ظهر إلى اليسار أو اليمين من الحبل الشوكي، وفي منطقة جدار الرحم خال من الأوعية الدموية الكبيرة.
  12. جعل 3 مم شق من خلال جدار الرحم والكيس الذي يحيط بالجنين في وسط سلسلة محفظة (الشكل 2J).
  13. ري موقع شق مع دافئ (38 درجة مئوية) في برنامج تلفزيوني.
  14. باستخدام مقص المجهرية، وقطع الجرح استئصالية كامل سمك واحد، ما يقرب من 1 ملم في الطول، في ظهر الجنين.
  15. بلطف موقع شق لطخة تجف مع القطن طرف قضيب.
  16. ضخ 3 ميكرولتر حجم الهند تحت الجلد الحبر في موقع الجرح للاحتفال موقع الجرح (الشكل 2K).
  17. ري مع دافئ (38 درجة مئوية) في برنامج تلفزيوني لضمان تم الاحتفاظ الحبر داخل الجرح.
  18. هل لديك الجراحي مساعد طnject دافئ (38 درجة مئوية) PBS من خلال صريحا طرف G 10 حقنة في الكيس السلوي كسلسلة محفظة مغلق (الشكل 2L). التراجع عن حقنة للإقفال سلسلة محفظة تقترب من الانتهاء (الشكل 2M).
  19. العودة بلطف الرحم في تجويف البطن (الشكل 2N).
  20. إيفرت الجلد أو الغشاء البريتوني.
  21. وقد مساعد الجراحية لري تجويف البطن مع دافئ (38 درجة مئوية) في برنامج تلفزيوني.
  22. وثيق البطن بسرعة عن طريق تدبيس الجلد أو الغشاء البريتوني مغلق (الشكل 2O). يتم تنفيذ إغلاق قياسي في طبقتين. البريتوني وعضلات البطن في طبقة واحدة، الأنسجة تحت الجلد والجلد في الطبقة الثانية. للتضحية وحصاد الجنين فورا، وتبين مظاهرة لدينا الإغلاق في طبقة واحدة.
  23. وضع الحيوان تحت الملاحظة في حاضنة دافئة وضعت في 37 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة أو حتى الحيوان يستعيد وعيه كافية للحفاظ على الاستلقاء القصية.
  24. لا متقاعدجرة الحيوان للشركة من الحيوانات الأخرى حتى أنه قد تعافى تماما من الإجراء.
  25. على الاستيقاظ من التخدير وخلال ال 48 ساعة اللاحقة، إدارة حقن تحت الجلد البوبرينورفين (0.05 ملغ / كلغ) كل 12 ساعة لتسكين حسب الحاجة على أساس تقييم الألم. إدارة كاربروفين (5 ملغ / كلغ) عن طريق الحقن تحت الجلد لإضافية لتخفيف الآلام بعد العمليات الجراحية حسب الحاجة.
  26. العودة إلى قفص الحيوانات وتزويدهم بالمال وبالشهرة أيضا الطعام والماء الإعلانية.
  27. مراقبة عن كثب بحثا عن مظاهر الألم.
  28. 48 ساعة بعد الجراحة، وتضحية الأم الحامل مع جرعة زائدة من الأيزوفلورين والحصاد الجرحى الجنين. من أجل القيام بذلك، وضبط تركيز الأيزوفلورين إلى 5٪ أو أعلى والحفاظ على التعرض لمدة 1 دقيقة بعد التوقف عن التنفس. تأكيد القتل الرحيم مع خلع عنق الرحم. حصاد الجنين المعافين من أجل السيطرة العمر المتطابقة. وينبغي أن يكون الأجنة أواخر طريقة منفصل القتل الرحيم يتفق مع توصيات IACUC، مثل ديالرؤوس، خلع عنق الرحم، أو الحقن الكيميائي.

الشكل 2
الشكل 2. تخطيطي لجراحة الفئران الجنين. الخطوات العامة لالظهرية اصابة في E16.5 وأجنة الفئران E18.5. (A) إزالة الشعر من الماوس البطن. (B و C) إعداد الماوس البطن. (D) المجاهر المستخدمة في العمليات الجراحية الإجراء. (E) خط الوسط البطن. (F) تعرض الرحم. (G) إنشاء حادة طرف الإبرة. (H) الري الرحم مع المياه المالحة الدافئة. (I) إنشاء سلسلة محفظة خياطة. (J) شق من خلال الرحم جدار و1 ملم الجيل الجرح استئصالية سمك الكامل. (K) الحقن تحت الجلد من الهند الحبر. (L و M) اختتام سلسلة محفظة خياطة. (N و O)إغلاق البطن. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

لتحليل نسيجية، والجروح الجلدية في الجلد الظهري من E16.5 وE18.5 أجنة الفئران يجب حصاد 48 ساعة بعد إصابة، ثابتة في 4٪ PFA، وجزءا لا يتجزأ من البارافين. في النماذج المعدلة وراثيا الفلورسنت، والحفظ بالتبريد مع أكتوبر قد يكون مناسبا. هناك العديد من البقع التي يمكن استخدامها لتصور بنية الأنسجة الخلوية والضام. الهيماتوكسيلين ويوزين وصمة اللونين أن البقع نوى الزرقاء والهياكل الاتهاب (أي.، السيتوبلازم والكولاجين خارج الخلية) ظلال مختلفة من الأحمر والوردي، والبرتقالي. بالترسيب مالوري هو وصمة عار ثلاثة ألوان تتكون من الأنيلين الأزرق، fuschin الحامض والبرتقال G، الأنسب للتمييز الخلايا من الأنسجة المحيطة الضام.

الشكل (3)
الشكل 3. الأنسجة من الجروح Scarless E16.5 الجنين. (A) الهيماتوكسيلين ويوزين وصمة عار إعادةveals عودة التظهرن كاملة وزيادة طفيفة في عدد الخلايا الالتهابية الحالية (السهام). (100X، بار = 100 ميكرون) (B) يوزين وصمة عار يظهر الحبر الهند (السهام) حول تجديد بصيلات الشعر (السهم) (400X، بار = 25 . ميكرون) (بالترسيب وصمة عار C) مالوري تكشف عن نمط شبكي عن طريق الجلد الكولاجين بشكل جيد مع وجود بصيلات الشعر (400X، بار = 25 ميكرون). أعيد طبعها بإذن من كولويل وآخرون 10 الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

إذا الجروح استئصالية الظهرية ذات الحجم المناسب (1 مم) وعمق (سمك كامل)، سوف الهيماتوكسيلين ويوزين تلطيخ تكشف عن أن يشفي الجلد E16.5 مع الحد الأدنى من تندب، وعودة التظهرن كاملة، وفقط زيادة طفيفة في عدد التهابات الخلايا (الشكل 3A). وعلاوة على ذلك، فإن هذه wounيجب أن س تشفى مع بنية الجلد العادية وتحتوي على ما يقرب من تجديد بصيلات الشعر داخل موقع الإصابة (السهام، الشكل 3B). التطبيق السليم للحبر الهند على الجرح تم إنشاؤها حديثا ينبغي أن يؤدي إلى ترسب الحبر في موقع الإصابة (رؤساء السهم، الشكل 3B). وأخيرا، ينبغي بالترسيب تلطيخ تكشف عن وجود غرامة شبكي عن طريق الجلد نمط الكولاجين سمة من الأدمة غير مخدوش (الشكل 3C).

الشكل (4)
الشكل 4. الأنسجة من الجروح تندب E18.5 الجنين. (A) الهيماتوكسيلين ويوزين وصمة عار يكشف زيادة في يوزين تلطيخ في الأدمة في موقع الإصابة (السهام). (200X، بار = 50 ميكرون) (B) معارض بالترسيب وصمة عار مالوري الكولاجين كثيفة الجلدي (السهام) (400X، شريط = 25 ميكرون). أعيد طبعها بإذن من كولويل وآخرون.10

وبالمقارنة مع الجروح التي قدمت في E16.5، الهيماتوكسيلين ويوزين تلطيخ الجروح الظهرية التي قدمت في E18.5 وتحصد 48 ساعة بعد إصابة يجب أن تكشف عن وجود ندبة كثيفة مع فقدان العمارة الجلد الطبيعية في موقع الإصابة (الشكل 4A). وبالمثل، بالترسيب تلطيخ يكشف عن نمط كثيف من ترسب الكولاجين غير منظم (الأسهم، الشكل 4B). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

بروتوكول الجراحية المقدمة هنا يصف نموذج استئصالية من الجنين الشفاء scarless الفئران نشرت لأول مرة في عام 2006 من قبل لدينا مختبر 10. بالإضافة إلى نماذج أخرى أنشئت من جرح استئصالية 11، ونماذج الجراحي من الجنين الفئران scarless الشفاء موجودة فضلا 12،13. تم الإبلاغ عن التحقيقات في الجنين scarless التئام الجروح في القرد، والضأن، أرنب، الأبوسوم، والفئران 14-17. ومع ذلك، الفئران تمثل نموذجا مثاليا لاستكشاف الجنين scarless التئام الجروح بسبب مستواها المتدني نسبيا تكلفة القفص لكل اليومي والجينوم تتميز بشكل جيد. وعلاوة على ذلك، لا يمكن تحقيق الزمني والمكاني وراثي خسارة / ربح من وظيفة أثناء التطور الجنيني باستخدام فرص أنظمة المعدلة وراثيا الطرح الفئران فك بالضبط آليات إصلاح scarless.

وعلى الرغم من هذه المزايا، الفئران تمثل تحديات فنية معينة أثناء الجراحة الجنين بسبب صغر حجمها. نظرا إلىالإجهاد التخدير على الأم الحامل، ينبغي أن تؤخذ بعناية كبيرة لرصد مستوى الأيزوفلورين / الأكسجين تدار. مزيج من 2.5٪ الأيزوفلورين / الأكسجين في 2 L لكل دقيقة تليها التخدير الصيانة في 1 L لكل دقيقة ينبغي التقيد بعناية ل. يمكن الانحرافات أو تقلبات في هذا عاملا حاسما يؤثر بشكل كبير الاعتلال. تحديد المكان المناسب للخياطة سلسلة محفظة يمثل الجانب الأكثر تحديا تقنيا من الجراحة. والفشل في وضع هذا غرزة بشكل صحيح يؤدي إلى تسرب السائل الذي يحيط بالجنين وPBS ما بعد الإغلاق. ويبلغ حجم كاف من السوائل في الرحم يؤدي إلى الصدمة إلى الأجنة وربما تتسبب في انكماش الرحم سابقا لأوانه. استبدال السائل الذي يحيط بالجنين فقدت عند فتح الرحم لهذا السبب، هو أيضا خطوة حاسمة في هذا النموذج الجراحي. يجب الحرص على إخراج باستمرار PBS الدافئ كما يتم إغلاق سلسلة محفظتك. هذه العوامل المطلوبة استكشاف الأخطاء وإصلاحها كبير، ونحن نؤكد أن الانتباه إلى هذه التفاصيلسيزيد من احتمال وقوع عملية جراحية ناجحة. ومع ذلك، وحتى تلك الأيدي الجراحية ذوي الخبرة أن تخطط لمعدل الاعتلال ما يقرب من 40٪ في الأجنة E16.5.

فهم الجنين scarless التئام الجروح يحمل قيمة للطب متعدية تستهدف في الجسم الحي تعديل السلوك التليف خلال مراحل الكبار للتنمية. وبالمقارنة مع الجلد للبالغين، والجلد الجنين لديه الأدمة النامية، خفض قوة الشد، بصيلات الشعر الوليدة، ومكونات ECM مختلفة 2،4. الجلد الجنين لديه نسبة مرتفعة من نوع الكولاجين الثالث إلى النوع الأول بالمقارنة مع الجلد البالغين، والخلايا البدينة أقل وأقل نضجا والتعبير عن Keratins 8 و 19، ومستويات أعلى من حمض الهيالورونيك بالمقارنة مع البالغين 4،9 الجلد. قبل فك رموز الآليات الكامنة scarless الشفاء في الجنين، يمكننا أن نبدأ في توجيه المسارات الجزيئية والخلوية المسؤولة عن تليف في البالغين نحو النمط الظاهري التجدد. س ظهورو النسب البحث عن المفقودين وأدوات وراثية أخرى في الماوس وفتحت آفاقا جديدة واعدة للتحقيق في الجنين scarless التئام الجروح. ونظرا لارتفاع معدلات بطبيعتها للمراضة وانكماش الرحم من السابق لأوانه المرتبطة جراحة الجنين، الجرح التحقيقات في الجلد scarless الجنين الشفاء في الجسم الحي تتطلب نموذجا جراحية دقيقة وقابلة للتكرار. نحن هنا التفاصيل نموذجا استنساخه من الجنين scarless التئام الجروح في ظهر E16.5 (scarless) والأجنة E18.5 (تندب) الماوس.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Acknowledgments

وأيد هذا العمل في جزء من منحة مقدمة من المعاهد الوطنية للصحة منح R01 GM087609 (لهبل)، وهي هدية من إنغريد لاي وبيل شو تكريما لأنتوني شو (لHPL)، NIH منحة U01 HL099776 (لMTL)، ومختبر Hagey ل أطفال التجديدي الطب ومؤسسة أوك (لMTL وHPL). وأيد GGW من قبل كلية ستانفورد للطب، وبرنامج التدريب ستانفورد عالم الطبية، ومنحة التدريب NIGMS GM07365. وأيد MSH التي كتبها CIRM السريرية التدريب زميل غرانت TG2-01159. وأيد WXH من خلال تمويل من مؤسسة سارنوف القلب والأوعية الدموية.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
7-O MONOSOF Suture eSuture SN-1647G
Surgical Forceps Kent Scientific INS650916
Micro-scissors Kent Scientific INS600127
Autoclip 9 mm Texas Scientific Instruments 205060
Insulin Syringe Thermo Fisher Scientific 22-272-382
Black Pigment AIMS 242
BD Safety-Lok 3 ml Syringe BD Biosciences 309596
Phosphate Buffered Saline Life Technologies 10010-049
OPMI-MD Surgical Microscope Carl Zeiss Surgical Inc
Pregnant Mares Serum (PMS) Millipore 367222
Human Chorionic Gonadotropin (HCG) Sigma-Aldrich CG10
Povidone Iodine Prep Solution Dynarex 1415
Nair (depilatory cream) Church and Dwight Co. 22600267058

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Larson, B. J., Longaker, M. T., Lorenz, H. P. Scarless fetal wound healing: a basic science review. Plastic and reconstructive surgery. 126, 1172-1180 (2010).
  2. Wilgus, T. A. Regenerative healing in fetal skin: a review of the literature. Ostomy/wound management. 53, 16-31 (2007).
  3. Wulff, B. C., et al. Mast cells contribute to scar formation during fetal wound healing. The Journal of investigative dermatology. 132, 458-465 (2012).
  4. Lorenz, H. P., Adzick, N. S. Scarless skin wound repair in the fetus. The Western journal of medicine. 159, 350-355 (1993).
  5. Longaker, M. T., et al. Wound healing in the fetus. Possible role for inflammatory macrophages and transforming growth factor-beta isoforms. Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 2, 104-112 (1994).
  6. Longaker, M. T., et al. Studies in fetal wound healing. IV. Hyaluronic acid-stimulating activity distinguishes fetal wound fluid from adult wound fluid. Annals of surgery. 210, 667-672 (1989).
  7. Colombo, J. A., Napp, M., Depaoli, J. R., Puissant, V. Trophic influences of human and rat amniotic fluid on neural tube-derived rat fetal cells. International journal of developmental neuroscience : the official journal of the International Society for Developmental Neuroscience. 11, 347-355 (1993).
  8. Colwell, A. S., Longaker, M. T., Peter Lorenz, H. Identification of differentially regulated genes in fetal wounds during regenerative repair. Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 16, 450-459 (2008).
  9. Hu, M. S., et al. Gene expression in fetal murine keratinocytes and fibroblasts. The Journal of surgical research. , (2014).
  10. Colwell, A. S., Krummel, T. M., Longaker, M. T., Lorenz, H. P. An in vivo mouse excisional wound model of scarless healing. Plastic and reconstructive surgery. 117, 2292-2296 (2006).
  11. Wilgus, T. A., et al. The impact of cyclooxygenase-2 mediated inflammation on scarless fetal wound healing. The American journal of pathology. 165, 753-761 (2004).
  12. Iocono, J. A., Ehrlich, H. P., Keefer, K. A., Krummel, T. M. Hyaluronan induces scarless repair in mouse limb organ culture. Journal of pediatric surgery. 33, 564-567 (1998).
  13. Chopra, V., Blewett, C. J., Krummel, T. M. Transition from fetal to adult repair occurring in mouse forelimbs maintained in organ culture. Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 5, 47-51 (1997).
  14. Adzick, N. S., Longaker, M. T. Animal models for the study of fetal tissue repair. The Journal of surgical research. 5, 47-51 (1991).
  15. Block, M. Wound healing in the new-born opossum (Didelphis virginianam). Nature. 187, 340-341 (1960).
  16. Longaker, M. T., Dodson, T. B., Kaban, L. B. A rabbit model for fetal cleft lip repair. Journal of oral and maxillofacial surgery : official journal of the American Association of Oral and Maxillofacial Surgeons. 48, 714-719 (1990).
  17. Longaker, M. T., et al. A model for fetal cleft lip repair in lambs. Plastic and reconstructive surgery. 90, 750-756 (1992).

Tags

الطب، العدد 95، جراحة الجنين، scarless، ندبة، التئام الجروح، وتجديد، والجلد، والتليف
نموذج الجلد ماوس الجنين من إصلاح الجرح Scarless
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Walmsley, G. G., Hu, M. S., Hong, W. More

Walmsley, G. G., Hu, M. S., Hong, W. X., Maan, Z. N., Lorenz, H. P., Longaker, M. T. A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair. J. Vis. Exp. (95), e52297, doi:10.3791/52297 (2015).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter