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आधुनिक ट्री-रिंग रिसर्च में एक तकनीकी दृष्टिकोण - Dendroecological और लकड़ी शारीरिक चुनौतियों पर काबू पाने के लिए कैसे

Published: March 5, 2015 doi: 10.3791/52337
Automatic Translation
1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1, 1
1Landscape Dynamics / Dendroecology, Swiss Federal Research Institute WSL

Abstract

Dendroecological अनुसंधान एकल पेड़ और यहाँ तक कि पूरे वन पारिस्थितिकी प्रणालियों पर्यावरण परिवर्तन करने के लिए प्रतिक्रिया व्यक्त की और अंत में इस तरह के बदलाव को फिर से संगठित करने के लिए समझने के लिए कैसे पेड़ के छल्ले में संग्रहीत जानकारी का उपयोग करता है। इस बार में वापस वृद्धि विविधताओं का विश्लेषण और (उदाहरण के लिए) तापमान रिकॉर्ड करने के लिए विभिन्न पौधों के विशिष्ट मापदंडों correlating द्वारा किया जाता है। इन विश्लेषण में लकड़ी संरचनात्मक मापदंडों का घालमेल भी इंट्रा-वार्षिक संकल्प करने के लिए नीचे, पुनर्निर्माण और मजबूत होंगे। इसलिए हम बाद के सूक्ष्म विश्लेषण के लिए भी, नमूना तैयार है, और आम स्थूल विश्लेषण के लिए लकड़ी के नमूना विश्लेषण है, लेकिन करने के लिए पर एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत करते हैं। इसके अलावा हम समय श्रृंखला विश्लेषण करती है समर्थन करने के लिए आम छोटे और बड़े नमूनों से उत्पन्न डिजिटल छवियों का विश्लेषण करने के लिए एक संभावित हल परिचय। वे वर्तमान में इस्तेमाल किया जा सकता है के रूप में प्रोटोकॉल बुनियादी कदम प्रस्तुत करता है। इस के अलावा, एक चल रही मौजूदा तकनीक में सुधार के लिए की जरूरत है, और नए टी का विकास होता हैechniques, रिकॉर्ड और अतीत और चल रहे पर्यावरण प्रक्रियाओं यों की। पारंपरिक लकड़ी संरचनात्मक अनुसंधान अनुसंधान के इस क्षेत्र को पारिस्थितिक जानकारी शामिल करने के लिए विस्तार किया जाना चाहिए। इस नए मापदंडों का विश्लेषण और वुडी पौधों की शारीरिक रचना पर विशिष्ट पर्यावरणीय कारकों की छोटी और लंबी अवधि के प्रभाव को समझने के लिए नए तरीके विकसित करने का इरादा है जो dendro-वैज्ञानिकों का समर्थन करेगी।

Introduction

पेड़, साथ ही झाड़ियाँ, बौना झाड़ियाँ, और यहां तक ​​कि जड़ी बूटी, अपने वातावरण में परिवर्तन से संबंधित कई गुना प्रतिक्रिया पैटर्न दिखा। इन नमूनों के मध्य 19 वीं सदी के बाद से वनस्पति विज्ञान और प्लांट फिजियोलॉजी के अधीन कर दिया गया है। वापस तो, वुडी पौधों पर अनुसंधान ज्यादातर पेड़ और एक पारिस्थितिकी संदर्भ 1 में संरचना और वार्षिक छल्ले की परिवर्तनशीलता के एक वर्णनात्मक विश्लेषण पर ध्यान केंद्रित किया। एंड्रयू Ellicott डगलस पेड़-अंगूठी अनुसंधान 2 के लिए पार से डेटिंग तकनीक का आविष्कार किया है, इस पारिस्थितिक संदर्भ कम या ज्यादा सटीकता से पुरातत्व में लकड़ी के निष्कर्षों की तारीख के लिए नई क्षमता से दबा दिया गया था। पहली बार के लिए क्रॉस-डेटिंग कैलेंडर वर्ष के लिए पेड़ के छल्ले के सटीक डेटिंग सक्षम है और अब तक अपने आवेदन 1 के सभी क्षेत्रों में पेड़-अंगूठी अनुसंधान की रीढ़ के रूप में माना जाता है।

समानांतर में, 19 वीं सदी के अंत के बाद से, लकड़ी शरीर रचना एक महत्वपूर्ण अनुसंधान अनुशासन में संबंधित हैं विकसितप्राकृतिक और व्यावहारिक विज्ञान 3 के कई अन्य क्षेत्रों के लिए डी। दो मुख्य डोमेन के स्थापित कर रहे हैं: लकड़ी प्रौद्योगिकी, फिजियोलॉजी, पैथोलॉजी, और पारिस्थितिकी 3,5 से संबंधित पुरातत्व 4 में लकड़ी की पहचान करने के लिए आधार है, जो व्यवस्थित लकड़ी शरीर रचना विज्ञान, और लागू लकड़ी शरीर रचना विज्ञान,।

पेड़-अंगूठी अनुसंधान में, dendroecology आजकल ऐसे भू-आकृतिक प्रक्रियाओं (dendrogeomorphology), तापमान और वर्षा के पुनर्निर्माण (dendroclimatology), जल स्तर में परिवर्तन (dendrohydrology) या भी ग्लेशियर के उतार चढ़ाव (के रूप में पर्यावरण के अध्ययन पर ध्यान केंद्रित कर पेड़-अंगूठी संबंधित अध्ययन को शामिल एक विषय के रूप में परिभाषित किया गया है dendroglaciology) 6। इस परिभाषा इंगित करता है, पेड़-अंगूठी विश्लेषण इस तरह के (i) के रिंग चौड़ाई 7,8, लकड़ी घनत्व 9 में वार्षिक विविधताओं का विश्लेषण करके अतीत जलवायु स्थितियों के रूप में डेटिंग और पर्यावरण प्रक्रियाओं के पुनर्निर्माण के क्षेत्र में तेजी से महत्वपूर्ण हो या 10 आइसोटोप, या है (द्वितीय) टीवह भू-आकृतिक प्रक्रियाओं 11 के अंतराल की पुनरावृत्ति। रिंग चौड़ाई विविधताओं और उनके समस्थानिक सामग्री के बारे में ये बहुत विस्तृत अध्ययन के छल्ले की शारीरिक संरचना का अध्ययन करने के लिए और अधिक विस्तार, IE में छल्ले विश्लेषण करने की जरूरत प्रदर्शित करता है। हालांकि, पर्यावरण परिवर्तन से संबंधित वार्षिक छल्ले के भीतर लकड़ी संरचनात्मक सुविधाओं का विस्तृत अध्ययन 12,13 दुर्लभ हैं। इन सूक्ष्म सुविधाओं 14 में जाना जाता है, वे शायद ही कभी dendroecological अनुसंधान के लिए एक सूक्ष्म स्तर पर लागू किया गया है। इसके अलावा, सटीक डेटिंग प्रयोजनों के लिए आवश्यक स्वाभाविक रूप से बड़े पेड़ों में इन विकास प्रतिक्रियाओं का सही समय, शायद ही कभी हाल ही में 15 प्रलेखित किया गया है।

ग्लोबल वार्मिंग से 16 के प्रभाव के बारे में, मौजूदा और नई तकनीकों के विकास के सुधार के लिए विशेष रूप से जलवायु प्रभाव अनुसंधान 11 के संदर्भ में, रिकॉर्ड और आवश्यक है अतीत और चल रहे पर्यावरण प्रक्रियाओं यों की।एक पारिस्थितिकी आधारित लकड़ी शरीर रचना से 17 परंपरागत लकड़ी संरचनात्मक अनुसंधान के विस्तार से, dendro-वैज्ञानिकों नए मापदंडों का विश्लेषण और वुडी पौधों 18 वर्ष की शारीरिक रचना पर विशिष्ट पर्यावरणीय कारकों की छोटी और लंबी अवधि के प्रभाव को समझने के लिए नए तरीके विकसित कर सकते हैं। विशिष्ट ड्राइवरों (उदाहरण के लिए, यांत्रिक बलों, जलवायु विविधताओं) से संबंधित व्यक्ति के छल्ले के भीतर अलग-अलग सेल मानकों में बदलाव के बारे में विस्तृत ज्ञान वृक्ष अंगूठी गठन में परिवर्तनशीलता को समझने के लिए बुनियादी आवश्यकता है। आम रिंग चौड़ाई माप की तुलना में, लकड़ी संरचनात्मक विविधताओं की पहचान श्रम और समय की बहुत आवश्यकता है कि और अधिक जटिल और विशाल तैयार करने की तकनीक की आवश्यकता है। नमूना काटने, धुंधला, और एम्बेडिंग की विस्तृत प्रक्रियाओं कई गुना कर रहे हैं और हमेशा अध्ययन 19 के उद्देश्य पर निर्भर हैं।

संख्या, आकार या distr के लिए कोनिफर या यहां तक ​​कि संरचनाओं में अंगूठी चौड़ाई के macroscopic विश्लेषण के लिएहार्डवुड में जहाजों की ibution, एक नमूना की सतह सामान्यतः ठीक घर्षण कागज या विशेष पीस मशीनों 20 का उपयोग कर पॉलिश है। इस प्रक्रिया का एक नुकसान यह है कि आगे semiautomatic सूक्ष्म विश्लेषण 21 से बचाता है कि धूल के साथ व्यक्ति की कोशिकाओं के भरने है। नमूना की सतह एक रेजर ब्लेड या किसी अन्य तेज चाकू का उपयोग कर काट रहे हैं जब स्थूल नमूना तैयार करने के लिए सबसे अच्छा परिणाम प्राप्त कर रहे हैं।

छोटे नमूनों के लिए करते हैं, रेज़र ब्लेड एक उत्तम साधन हैं; कोर के रूप में बड़ा नमूने कोर की सारी हद से अधिक विमान सतहों के काटने की आवश्यकता है। Sanding के लिए इसके विपरीत, कोशिकाओं लगातार छवि विश्लेषण के लिए आगे की तैयारी के लिए सक्षम बनाता है, जो धूल से भरा नहीं कर रहे हैं। इसके अलावा, खुला सेल लुमेन, ठीक से कट सेल दीवारों, और पूरे नमूना के विमान सतह कोर के पूरे हद तक उच्च आवृत्ति densitometry 22 के आवेदन कर सकें। छवि के नमूने की सतह (सेल विश्लेषण के लिएदीवारों) अंधेरे स्याही का उपयोग दाग जा सकता है और खुले सेल लुमेन बाद में सेल की दीवार और लुमेन क्षेत्र 19,23 के बीच इसके विपरीत बढ़ाने के लिए सफेद चाक से भरा जा सकता है। इस बल्कि सरल तकनीक पोत आकार माप के लिए बड़ा सेल संरचनाओं की एक बुनियादी स्थूल आकलन सक्षम बनाता है।

विमान सतहों को काटने के लिए इन तकनीकों में स्थूल विश्लेषण के लिए पर्याप्त हैं। एक विस्तृत लकड़ी संरचनात्मक के लिए (यानी, सूक्ष्म) विश्लेषण, प्रेषित प्रकाश माइक्रोस्कोपी dendro विज्ञान में लागू सबसे आम तरीका है। जाइलम कोशिकाओं सेल प्रकार दृढ़ संकल्प, कोशिका विभाजन, सेल भेदभाव को शामिल जटिल प्रक्रियाओं के माध्यम से अंतर है, और कोशिका मृत्यु 24 क्रमादेशित। इन प्रक्रियाओं सेल संरचनात्मक विशेषताओं का निर्धारण होते हैं, जिस पर समय और दर के बाद से, इन प्रक्रियाओं को प्रभावित करने वाले पर्यावरणीय परिस्थितियों अंगूठी संरचना में संरचनात्मक विचलन उत्पन्न कर सकते हैं। इन विश्लेषण के लिए एक महत्वपूर्ण पूर्व शर्त के रूप मेंएस, माइक्रो वर्गों एक सूक्ष्म 19 के साथ तैयार रहने की जरूरत है। सेक्शनिंग के लिए नमूने की तैयारी, tracheid या फाइबर दिशा की दृश्यता महत्वपूर्ण है। microtomes फिसलने संचालित हाथ का उपयोग छवि के लिए आवश्यक 19 का विश्लेषण करती है के रूप में इस तकनीक को उच्च गुणवत्ता वाले वर्गों की सुविधा है, क्योंकि सूक्ष्म वर्गों में कटौती करने की सिफारिश की है। एक निश्चित अध्ययन के विशिष्ट उद्देश्य पर निर्भर करता है, सूक्ष्म वर्गों कोशिकाओं के अनुदैर्ध्य हद तक सीधा या समानांतर काट रहे हैं। इन वर्गों तो एक खुर्दबीन के नीचे फोटो खिंचवाने कर रहे हैं और विशेष छवि का उपयोग करके मापा सेल आयाम सॉफ्टवेयर का विश्लेषण करती है।

अभी हाल तक, सूक्ष्म वर्गों को तैयार करने की क्षमता छोटा सा नमूना आकार केवल (लगभग 1 सेमी एक्स 1 सेमी) करने के लिए प्रतिबंधित किया गया था। इस विशिष्ट वर्षों में गड़बड़ी के रूप में एकल घटनाओं का विश्लेषण करने के लिए स्वीकार्य है, लेकिन इस तकनीक पर्यावरण के पुनर्निर्माण के लिए आवश्यक विस्तारित समय श्रृंखला विश्लेषण की अनुमति नहीं है। यह प्रयास केवल महसूस किया जा सकता, नई कुशल और आर्थिक तैयारी प्रक्रियाओं और विश्लेषणात्मक तकनीकों के विकास के माध्यम से होगी। हाल के वर्षों में, स्विट्जरलैंड में स्विस फेडरल अनुसंधान संस्थान WSL पर पेड़-अंगूठी प्रयोगशाला के सदस्यों ने इस विषय पर गहन काम शुरू कर दिया है। नतीजतन, नए उपकरणों और विश्लेषण तकनीक पर्यावरण अनुसंधान विषयों की एक व्यापक श्रेणी के लिए लकड़ी संरचनात्मक सुविधाओं को एकीकृत करने के विचार का समर्थन करने के लिए विकसित किया गया है।

Protocol

1. नमूना तकनीक

  1. कोर नमूना
    1. नमूना पेड़ उपजी के लिए, प्रत्येक इसके विकास के विकास का विश्लेषण करने के तने से एक वेतन वृद्धि कोरर का उपयोग करते हुए कम से कम दो कोर निकाल सकते हैं। आम जलवायु पुनर्निर्माण ढलान के लिए कोर समानांतर लेने के लिए, उदाहरण के लिए, अनुसंधान कार्य पर नमूने की स्थिति बदलती हैं। उष्णकटिबंधीय प्रजातियों के साथ काम करते हैं, तो कम से कम तीन या अधिक कोर ले।
    2. एक तेज वेतन वृद्धि कोरर (व्यास में 5, 10 या 12 मिमी) प्रयोग करें और स्टेम की बढ़ती अक्ष को सीधा कोरर जगह है।
      नोट: पेड़ में यह ड्रिलिंग जब अपनी रोटेशन के अलावा अन्य कोरर के आंदोलनों से बचने के लिए एक ढकेलने का उपयोग करें, कोरर की एक नियंत्रित और स्थिर स्थिति है। में और मज्जा के माध्यम से स्टेम में सभी तरह से बोर। कोर बहुत घना लकड़ी (यानी, उष्णकटिबंधीय प्रजातियों) करने के लिए, Diospyrus ebenum के रूप में कोर भी घने जंगल करने की अनुमति है, जो वेतन वृद्धि कोर के एक एडाप्टर (आबनूस) के साथ विशेष फिर विन्यस्त Chainsaw निकायों का उपयोग करें। </ ली>
    3. एक चिमटा का प्रयोग करें और पेड़ से उत्पन्न कोर को हटा दें। कोरर बाहर बारी और स्टेम से हटा दें।
    4. तो कोर पर सीधे रखा गया है जो एक टेप, पर लिख कर एक नरम पेंसिल का उपयोग कर निकाला कोर करने के लिए एक विशिष्ट आईडी जोड़ें। स्टेम के विपरीत दिशा में प्रक्रिया को दोहराएं।
    5. किसी भी नुकसान को रोकने के लिए प्लास्टिक या कागज ट्यूब या विशेष बक्से में पेड़ के दो नमूनों की दुकान।
      नोट: वे ढलाई से कोर को रोकने क्योंकि कागज तिनके उष्णकटिबंधीय वातावरण में विशेष रूप से फायदेमंद होते हैं।
    6. अंत में, लकड़ी के समर्थन बीम पर कोर (फाइबर दिशा ईमानदार) माउंट। ठंडे पानी प्रतिरोधी लकड़ी गोंद का प्रयोग करें और उन्हें दो सूखी।
      नोट: अध्ययन का उद्देश्य आगे रासायनिक, आइसोटोप या घनत्व विश्लेषण शामिल हो लकड़ी के समर्थन करता है पर कोर माउंट कभी नहीं। इन उद्देश्यों के लिए, खुली केबल नाली या एक भी सामना करना पड़ा नालीदार बोर्ड में कोर तय कर लो।
  2. माइक्रो-कोर नमूना
    1. एक विशेष छिद्रण डिवाइस का प्रयोग करेंया 2 मिमी की एक खोलने के साथ सुई। छाल मोटाई पर निर्भर करता छाल का एक जरूरी हिस्से को हटाने के लिए एक छेनी का उपयोग करें।
    2. ऊपर वर्णित के रूप में स्टेम पर बढ़ती अक्ष को सीधा डिवाइस प्लेस, और गहराई में लगभग 2 सेमी करने के लिए स्टेम की जाइलम घुसना करने के लिए एक हथौड़ा का उपयोग करें।
    3. उपकरण के अंदर जिसके परिणामस्वरूप सूक्ष्म कोर तोड़ने के लिए और स्टेम से इसे हटाने के लिए सुई मुड़ें। Microcentrifuge शीशियों में सूक्ष्म कोर दुकान और उन्हें लेबल।
  3. डिस्क नमूने
    1. स्टंप और गिर के पेड़ या जब भी संभव हो नमूने जब ​​विशेष मामलों में (और विशेष रूप से उष्णकटिबंधीय में), उदाहरण के लिए, एक चेन देखा के साथ (बढ़ रही अक्ष को सीधा पार वर्गों) डिस्क ले। बस डिस्क लेबल और आगे के विश्लेषण के लिए जब तक उन्हें दुकान।
      नोट: इस नमूने की प्रक्रिया आमतौर पर सबसे अधिक वेतन वृद्धि corers का उपयोग करने की अनुमति नहीं है कि सब-सूखी मृत, ऐतिहासिक, पुरातात्विक और उप-जीवाश्म सामग्री के रूप में अच्छी तरह से बहुत ही घने हार्डवुड के लिए लागू किया जाता है।

    2. नमूना तैयार

    1. डिस्क Sanding
      1. एक sanding मशीन पर डिस्क प्लेस और 120, 220, 300-धैर्य द्वारा पीछा 80-धैर्य की sandpaper के साथ शुरू, तेजी से ठीक abrasives के एक दृश्य का उपयोग कर सतह पीस। 400-धैर्य के साथ एक अंतिम चमकाने सबसे कोनिफर के लिए पर्याप्त है। Hardwoods और विशेष रूप से उष्णकटिबंधीय प्रजातियों, के लिए उपयोग विकास अंगूठी सीमाओं भेद करने के लिए 1200 के लिए जई का आटा ऊपर sanding।
    2. कोर पर विमान सतहों काटना
      1. अपनी पूरी हद से अधिक कोर पर विमान सतहों में कटौती करने के लिए सक्षम एक नव विकसित कोर microtome के मुख्य धारक में वेतन वृद्धि कोर को ठीक करें।
        नोट: सूक्ष्म की चाकू लिए एक सही कोण में है जो ईमानदार नमूना, फाइबर दिशा है करने के लिए धारक के भीतर कोर के उन्मुखीकरण ठीक कर लें।
      2. यह थोड़ा ब्लेड से छू तक कोर लिफ्ट। घन करने के लिए कोर की हद से अधिक गेंद असर मार्गदर्शन पर तय हो गई है, जो ब्लेड, खींचोशीर्ष के पहले भाग में बंद टी।
      3. कोर के पीछे चाकू वापस धक्का कोर के साथ के बारे में 10 माइक्रोन नमूना धारक उठा और काटने की प्रक्रिया को दोहराएँ। कोर के व्यास का लगभग एक तिहाई एक सतत विमान सतह में जिसके परिणामस्वरूप नीचे कट जाता है जब तक यह मत करो।
    3. मकई स्टार्च समाधान जोड़कर सूक्ष्म वर्गों की तैयारी।
      1. शारीरिक संरचना की विस्तृत छवि विश्लेषण के लिए, कोर या अन्य नमूनों एक सूक्ष्म धारक में डिस्क से अलग तय कर लो। नमूने के ऊपरी छोर पर एक नव विकसित स्लेज सूक्ष्म की एक गेंद असर मार्गदर्शन द्वारा निर्देशित सूक्ष्म ब्लेड, स्थिति और इस पर खींच।
      2. के बारे में 20 माइक्रोन से 30 से नमूना उठा और फिर नमूना भर में ब्लेड खींचने के लिए ब्लेड वापस धक्का। नमूना के शीर्ष पर एक सतत सतह बनाई गई है जब तक इस प्रक्रिया को दोहराएं।
      3. जिसके परिणामस्वरूप एक cornstarch के समाधान के साथ सतह (cornstarch के 10 ग्राम, पानी की 8 मिलीलीटर, और 100% glycero के 7 जी को कवरएक आम ब्रश के साथ एल)।
        नोट: स्टार्च अनाज पतली वर्गों के बाद काटने के लिए संरचना स्थिर करने के लिए नमूना के खुले कोशिकाओं को भरने के।
      4. 15 माइक्रोन से नमूना लिफ्ट नमूना की सतह पर एक ब्रश जगह और (ब्रश) से नीचे एक पतली धारा काट करने के लिए शुरू नमूना की ओर धीरे-धीरे ब्लेड खींच। जबकि काटने, जिसके परिणामस्वरूप अनुभाग ब्रश द्वारा निर्देशित ब्लेड पर स्लाइड।
      5. पूरे खंड में कटौती की जाती है, एक ब्रश और पानी के साथ ब्लेड से सूक्ष्म खंड हटाने के लिए (घर्षण को कम करने के लिए) और आगे की तैयारी के लिए एक गिलास स्लाइड पर खंड जगह है। सुखाने से उन्हें रोकने के लिए, ग्लिसरॉल की एक छोटी राशि (33% = 100% ग्लिसरॉल का एक हिस्सा है और पानी के दो भागों) का उपयोग कर उन्हें कवर।

    3. Microslide तैयारी

    1. स्थायी स्लाइड के निम्नलिखित तैयारी के लिए, पहले एक पिपेट और पानी के साथ सूक्ष्म अनुभाग से दूर ग्लिसरॉल धो लें।
    2. एसई गीला आवरणSafranin की कुछ बूंदों के साथ ction है और Astrablue (+2 एमएल 100% एसिटिक एसिड पानी की 100 मिलीलीटर की एस्ट्रा नीला पाउडर की 0.5 ग्राम) (Safranin पाउडर पानी की 100 मिलीलीटर की एक छ) lignified और गैर lignified के बीच भेद करने के लिए संरचनाओं, लेकिन यह भी बाद में छवि विश्लेषण के लिए इसके विपरीत बढ़ाने के लिए।
    3. डाई द्वारा कवर 5 मिनट के लिए खंड आराम करने दो और फिर एक पिपेट और पानी के साथ इसे दूर धोने।
    4. जैसे ही अत्यधिक डाई निकाल दिया जाता है, के रूप में एक पतला 75%, 96% के अनुक्रम और अंत में 100% इथेनॉल के साथ उन्हें धोने से pipettes के साथ खंड निर्जलीकरण।
    5. इस्तेमाल की pipettes के बजाय पूरे निर्जलीकरण की प्रक्रिया के बारे में दो मिनट से 3 करने के लिए प्रसंस्करण के समय को कम करने के लिए एक स्नान में नमूने रखने का गिलास स्लाइड पर नमूने कुल्ला करने के लिए।
      नोट: इथेनॉल के साथ निर्जलीकरण टूटने से कमजोर नमूनों को रोकता है।
    6. इसके बाद 100% xylol साथ खंड कुल्ला।
      नोट: XYLENE कैंसर है और जब यह प्रयोग वेंटिलेशन प्रयोगशाला में अनिवार्य है। अन्यउत्पादों xylol जगह मौजूद हैं, लेकिन एक संभावित पुनर्विश्लेषण के लिए अब समय अवधि (वर्षों, दशकों) से अधिक नमूने संग्रहीत करने के लिए उद्देश्य न हो, कनाडा Balsam (कदम 3.5.2) समय के साथ रंग बदलने के बिना स्पष्ट रहता है कि केवल embedding माध्यम है। दुर्भाग्य से कनाडा Balsam xylol साथ संयोजन में उपयोग किया जाना चाहिए।
    7. यह पर्याप्त निर्जलित नहीं है के रूप में लंबे समय के रूप xylol (सफेद) दूधिया हो जाता है, के रूप में निर्जलीकरण प्रक्रिया को दोहराएँ।
    8. जैसे ही xylol स्पष्ट रहता है, के रूप में 100% कनाडा Balsam की एक बूंद के साथ अनुभाग को कवर किया और अनुभाग के कम से कम आकार का एक गिलास को कवर के साथ कवर।
      नोट: धीरे नीचे कवर गिलास दबाकर हवाई बुलबुले को दूर करने के बारे में पता है।
    9. गर्मी प्रतिरोधी प्लास्टिक की दो पट्टियों के बीच जिसके परिणामस्वरूप सूक्ष्म स्लाइड प्लेस और एक धातु की थाली पर जगह है। निम्नलिखित सुखाने की प्रक्रिया के दौरान फ्लैट खंड रखने के लिए इसे नीचे प्रेस करने के लिए स्लाइड के शीर्ष पर (जैसे, एक चुंबक) एक वजन रखें।
    10. एक ओवन पर में स्लाइड्स रखेंके बारे में 12 घंटे के लिए 60 डिग्री सेल्सियस। 12 घंटे के बाद, ओवन से बाहर स्लाइड लेते हैं और उन्हें आरटी (लगभग 20 डिग्री सेल्सियस) के लिए शांत हो जाने के लिए एक शेल्फ पर उन्हें जगह है। जब शांत, वजन और प्लास्टिक की पट्टी को हटाने और अधिशेष कनाडा Balsam दूर करने के लिए रेज़र ब्लेड का उपयोग स्लाइड साफ।

    4. सेल सामग्री Visualizing

    1. Nawashin समाधान 25 तैयार करते हैं।
      1. क्रोमिक एसिड की 5 ग्राम, 96% एसिटिक एसिड के 50 मिलीलीटर, और विआयनीकृत पानी की 320 मिलीलीटर के साथ एक समाधान (ए) तैयार करें। विआयनीकृत पानी की 175 मिलीलीटर के साथ formalin के 200 मिलीलीटर के साथ एक और समाधान (बी) तैयार करें।
      2. Nawashin समाधान बनाने के लिए: 1 के अनुपात में एक 1 में समाधान के लिए एक और समाधान बी मिलाएं।
    2. 10 मिनट कोशिका के भीतर सब गिरावट प्रक्रियाओं को रोकने के लिए के लिए सेल सामग्री कल्पना, Nawashin समाधान के साथ नमूना तय कर लो।
      नोट: निर्धारण सेल दीर्घायु (सेल दीर्घायु = उपस्थित नाभिक / नाभिक अनुपस्थित के एक अनुमान के लिए अनुमति सेल नाभिक को बरकरार रखता है; उपस्थिति ओसेल) जीवित या मृत है कि क्या नाभिक के आर अभाव को दर्शाता है।
    3. निर्धारण के बाद, पूरी तरह से Safranin-एस्ट्रा नीले और अतिरिक्त Picric-एनिलिन नीले रंग के साथ उन्हें धुंधला से पहले साथ (1 भाग संतृप्त पानी में घुलनशील anilin 10% Picric एसिड के नीले 4 भागों) उन्हें धुंधला पहले Nawashin समाधान निकालने के लिए पानी के साथ वर्गों धोने ।
    4. ध्यान से धुंधला प्रक्रिया में तेजी लाने के लिए (उबलते बिंदु से नीचे किसी भी मामले में) के बारे में 80 डिग्री सेल्सियस के लिए नमूना गर्मी। नमूने के निर्जलीकरण और embedding के लिए प्रोटोकॉल 3.4-3.8 चरणों का पालन करें।

    5. शारीरिक विशेषताओं की डिजिटल छवियों की तैयारी

    1. पोत के विश्लेषण के लिए कोर सतहों के डिजिटल छवियों बनाएँ।
      1. कोर सूक्ष्म का उपयोग करते हुए कोर सतह विमान काटें और बस एक लगा मार्कर का उपयोग करके जिसके परिणामस्वरूप सतह काला दाग।
      2. जैसे ही डाई सूख जाता है, के रूप में सफेद चाक के साथ कोर की सतह रगड़ें। बस पर चाक रगड़ से कोशिकाओं में चाक प्रेसएक उंगली का उपयोग कर सतह। इसके अलावा इस प्रक्रिया द्वारा चाक अधिशेष को हटा दें।
        नोट: सेल दीवारों काले होते हैं और जहाजों के लुमेन भागों सफेद होते हैं एक परिणाम के रूप में। इस विपरीत एक स्वचालित छवि विश्लेषण के लिए एक पूर्व शर्त है।
      3. एक डिजिटल कैमरा के साथ सुसज्जित एक दूरबीन खुर्दबीन के नीचे तैयार कोर रखें। थोड़ा ओवरलैपिंग के एक दृश्य ले लो (लगभग। 10%) पूरी सतह पर कब्जा कर लिया है जब तक छवियों कोर के एक तरफ शुरू। कोर सतह की एक पूरी छवि बनाने के लिए एकल छवियों सिलाई।
    2. सूक्ष्म स्लाइड से डिजिटल छवियों बनाएँ
      1. एक खुर्दबीन के नीचे साफ सूक्ष्म स्लाइड प्लेस और पूरे खंड से छवियों अतिव्यापी ले।
      2. संरचनाओं के आधार पर एक विशिष्ट बढ़ाई परिभाषित 40X और 1,000X बढ़ाई बीच लेकर विश्लेषण किया जा सके।
      3. खंड की एक पूरी छवि बनाने के लिए एकल छवियों सिलाई। सिलाई की प्रक्रिया के दौरान संभव विकृतियों से बचने के लिए, "का उपयोग; योजना "माइक्रोस्कोप के साथ उद्देश्य लेंस प्रकार।

    6. बढ़ाता शारीरिक विशेषताओं

    1. छवि विश्लेषण उपकरण ROXAS18 या इसी तरह के सॉफ्टवेयर का उपयोग कोशिकाओं और अंगूठी सीमाओं का पता लगाने के लिए, एक माइक्रो अनुभाग और मीट्रिक इकाइयों में मात्रात्मक परिणाम प्राप्त करने के लिए जुड़े स्थानिक अंशांकन की एक पूरी छवि को लोड। एक ही बढ़ाई पर ले लिया है और मीट्रिक इकाइयों में बड़े पैमाने रिक्ति द्वारा प्राप्त मूल्य विभाजित एक माइक्रोमीटर चरण छवियों के तराजू के बीच पिक्सेल की संख्या (उदाहरण के लिए 1000 माइक्रोन) को मापने के द्वारा स्थानिक अंशांकन गणना।
    2. (सॉफ्टवेयर में प्रदान की) प्रदान की गई सूची के विश्लेषण के स्वत: भाग शुरू करने से पहले एक उपयुक्त विन्यास से चुनें।
      ध्यान दें: एक विन्यास उदाहरण के लिए, पता लगाया जा खाते में नमूना और कोशिकाओं के आकार और आकार सीमा से धुंधला रंग लेता है, इस कार्यक्रम के लिए सेटिंग्स का एक पहले से अनुकूलित सेट है। इस प्रकार अनुरूप विन्यासविभिन्न प्रजातियों और छवि गुणों के लिए इष्टतम मान्यता परिणाम का उत्पादन करने के लिए अनुमति देते हैं।
      1. इस तरह, शामिल है या बचने के लिए बाहर रखा जा रहे हैं कि छवि में क्षेत्रों के उपयोग के रूप में आगे विकल्पों का चयन करें जैसे, नमूने में रिक्त छवि मार्जिन या दरारें, यदि आवश्यक हो।
    3. विश्लेषण करें बटन धक्का द्वारा विश्लेषण शुरू करो। विकल्प चुना है, तो शामिल या बहुभुज, आयत या सर्कल उपकरण का उपयोग कर बाहर रखा जा रहे हैं कि छवि में क्षेत्रों को परिभाषित। निम्नलिखित स्वचालित विश्लेषण छवि की गुणवत्ता के आधार पर इसके विपरीत कुछ छवि की कमी (जैसे, गरीब विपरीत) सही है और सुधार करने के लिए लचीला एल्गोरिदम का उपयोग करता है।

Representative Results

सभी dendroecological विश्लेषण सटीक नमूनों पर निर्भर करती है, कोई फर्क नहीं पड़ता डिस्क, कोर, या सूक्ष्म कोर ले रहे हैं। इस के लिए, उपकरणों लकड़ी नमूना भीतर सूक्ष्म दरारें से बचने के लिए (सही ढंग से बढ़ाई) एकदम सही हालत में होना चाहिए। वेतन वृद्धि कोर पर सतहों की तैयारी करते हैं, तो एक कोर microtome के उपयोग के लिए आवश्यक है। आगे छवि का विश्लेषण करती है और पोत आकार माप (चित्रा 1) के लिए इसके विपरीत बढ़ाने के लिए इलाज किया जा सकता है, जो खुले कोशिकाओं, की क्षमता श्रृंखला का विश्लेषण करती है समय में शारीरिक संरचनाओं के रूपांतरण की दिशा में पहला महत्वपूर्ण कदम है। कभी कभी एक दृढ़ लकड़ी नमूना का घनत्व एक सूक्ष्म के उपयोग से बचाता है। उस मामले में एक उचित चमकाने और एक कंप्रेसर या वैक्यूम के साथ जहाजों से अत्यधिक चूरा के बाद हटाने का सबसे अच्छा विकल्प है।

Earlywood और conifers में latewood ट्रेकीड के रूप में छोटे सेल संरचनाओं के अधिक विस्तृत विश्लेषण के लिए, उच्च गुणवत्ता वाले माइक्रो वर्गों की जरूरत है। इधर, potentiऐसे माध्यमिक सेल दीवारों के रूप में अल कलाकृतियों प्राथमिक दीवार की जरूरत को टाला जा सकता है (चित्रा 2) से छीन लिया जा रहा है। इन कलाकृतियों डिजिटल छवियों में होते हैं, तो सेल आयामों की एक स्वचालित विश्लेषण संभव नहीं रह गया है। कलाकृतियों तो स्वयं समय लगता है और सेल आयामों की गलत माप में ज्यादातर मामलों परिणामों में है, जो सही करने की जरूरत है। (चित्रा 2) 26 एक न्यूनतम करने के लिए कलाकृतियों की घटना को कम करते हुए नमूने के शीर्ष करने के लिए एक गैर-न्यूटन द्रव, यानी, एक मकई स्टार्च समाधान की साधारण आवेदन संरचना की स्थिरता का समर्थन करता है। उष्णकटिबंधीय प्रजातियों सहित सभी लकड़ी के नमूनों के लिए उपयुक्त मकई स्टार्च, के इस आवेदन, निरर्थक काटने से पहले नमूने के एम्बेडिंग प्रक्रिया का आवेदन करता है।

माइक्रो वर्गों वार्षिक छल्ले की एक अधिक सुरक्षित दृढ़ संकल्प कर सकें। यह विशेष रूप से कोनिफर यानी उनके प्राकृतिक सीमा पर बढ़ के लिए मामला है </ Em> उच्च अल्पाइन क्षेत्रों में पेड़ लाइन पर। अत्यंत संकीर्ण छल्ले (चित्रा 3) macroscopically का पता लगाने के लिए लगातार और मेहनत कर रहे हैं। चरम मामलों में, अंगूठियां earlywood कोशिकाओं के एक या दो पंक्तियों और गाढ़ा सेल दीवारों (आम latewood कोशिकाओं के विपरीत) की कमी है जो चपटा latewood कोशिकाओं की एक पंक्ति से मिलकर बनता है। माइक्रो वर्गों का उपयोग करते समय इस बात के लिए वे बेहतर या यहां तक ​​कि केवल दिखाई दे रहे हैं। इसके अलावा, घनत्व उतार चढ़ाव विशेष रूप से भूमध्य और उष्णकटिबंधीय (चित्रा 3) में वार्षिक छल्ले का पता लगाने के जो सरल, अधिक स्पष्ट रूप से अंगूठी सीमाओं से भेदभाव किया जा सकता है।

40X या अधिक की एक बढ़ाई छवियों का विश्लेषण, एकल कक्षों दिखाई दे रहे हैं और उनके सेल दीवारों की मोटाई भी detectable है। अर्द्ध स्वचालित विश्लेषण सॉफ्टवेयर उनकी अस्थायी और स्थानिक विकास (चित्रा 4) के दिशा निम्नलिखित परिभाषित रास्तों साथ विशिष्ट मानदंडों की माप के लिए सक्षम बनाता है। इस के साथ, चानइस तरह के सेल लुमेन या सेल दीवार मोटाई के रूप में एकल मापदंडों के GES एक वार्षिक अंगूठी (चित्रा 4) की पूरी सीमा पर निर्धारित किया जा सकता है। इस छवि के भीतर दिखाई दे सभी के छल्ले के लिए किया जा सकता है और यह पूरी तरह से एक विस्तारित समय श्रृंखला विश्लेषण के लिए की जरूरत का समर्थन करता है।

छवि का विश्लेषण भी वनस्पति अवधि (चित्रा 5) के भीतर वार्षिक छल्ले के विकास के चरणों का निर्धारण करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। Safranin और एस्ट्रा-नीले माध्यमिक सेल दीवार से भरा lignification तक सेल दीवारों की सबसे बाहरी कोनों में शुरुआत, ध्रुवीकृत प्रकाश, lignification की भी विभिन्न चरणों का उपयोग कर के साथ दाग एक खंड की छवि का विश्लेषण करते हैं, तो दिखाई देने लगते हैं। Lignified (परिपक्व) सेल दीवारों ध्रुवीकृत प्रकाश (चित्रा 5) में चमक इसका कारण यह है। विस्तृत जानकारी उदाहरण के एक अधिक विस्तृत जलवायु विकास relati के लिए निर्धारित करने के लिए संबंधित वनस्पति अवधि के लिए दस्तावेज पर्यावरण डेटा से संबंधित हो सकता है जहाज पर।

चित्र 1
चित्रा 1. एक माइक्रो खंड के उदाहरण और अंगूठी-चौड़ाई और पोत आकार माप सहित एक ओक के लिए तैयार विमान सतह वाम:। एक ओक वेतन वृद्धि कोर की सबसे बाहरी हिस्सा है। 5 मिमी व्यास कोर एक कोर सूक्ष्म का उपयोग कर काट दिया गया। सतह तो एक लगा मार्कर का उपयोग करते हुए काला दाग था और दाग सूखा था के बाद कोशिकाओं सफेद चाक से भर गया। अधिकार: ग्राफ बाईं तरफ दिखाया कोर की सतह पर किया अंगूठी-चौड़ाई और पोत आकार माप का संकेत है। कोई सूक्ष्म वर्गों की वजह से (21 के बाद संशोधित) कोर सूक्ष्म द्वारा बनाई स्पष्ट सतह के लिए इन मापों क्या करने की जरूरत थी। नीचे: माइक्रो खंड निर्जलित, दाग और कनाडा Balsam में तय, एक वेतन वृद्धि कोर काट दिया। मोटाई: 20 माइक्रोन, लंबाई: 25 सेमी। जी "लक्ष्य =" _blank "> इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र 2
चित्रा सूक्ष्म वर्गों के 2. छवियाँ मकई स्टार्च समाधान का उपयोग कर एक खंड में कटौती बनाम स्थिरीकरण के बिना कटौती वाम:। माइक्रो खंड एक शंकुवृक्ष की earlywood ट्रेकीड में कलाकृतियों को काटने दिखा। नमूना embedding के बिना काट दिया गया है और एक परिणाम के रूप में earlywood कोशिकाओं की बल्कि पतली माध्यमिक दीवारों प्राथमिक दीवार (नीले तीर) से विभाजित किया गया था। अधिकार: एक शंकुवृक्ष की earlywood ट्रेकीड में किसी भी कलाकृतियों के बिना माइक्रो अनुभाग। यह खंड (बाईं ओर दिखाया गया के रूप में ही नमूना) नमूना की सतह के शीर्ष पर एक ब्रश के साथ cornstarch के समाधान को लागू करने के बाद काट दिया गया। इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

ove_content "के लिए: रख-together.within पृष्ठ =" हमेशा "> चित्र तीन
। चित्रा शायद ही पता लगाने योग्य वार्षिक अंगूठी सीमाओं 3. उदाहरण वाम: सेल दीवारों के किसी भी उमड़ना बिना चपटा latewood कोशिकाओं का एक ही पंक्ति ने संकेत दिया एक अंगूठी सीमा (काला तीर) दिखा रहा है: (Larix पतनिका यहाँ) एक वेतन वृद्धि कोर के माइक्रो अनुभाग। इस अंगूठी macroscopically दिखाई नहीं होगा। अधिकार: इंट्रा-वार्षिक घनत्व उतार चढ़ाव (सफेद तीर) भूमध्य प्रजातियों में आम हैं (सूक्ष्म धारा: Quercus इलेक्स)। वापस earlywood संरचना (सफेद तीर) को latewood और दिशा कोशिका संरचना का क्रमिक परिवर्तन असली अंगूठी सीमाओं से घनत्व के उतार चढ़ाव (काला तीर) फर्क के लिए अनुमति देता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।


चित्रा एक शंकुवृक्ष की वार्षिक रिंग के भीतर लुमेन क्षेत्र और दीवार मोटाई माप 4. चित्रण ऊपर:। Pinus sylvestris (स्कॉट्स पाइन) के एक पेड़ की अंगूठी में रॉक्सास विश्लेषण का एक अनुकरणीय परिणाम दिखा कट आउट छवि। रिंग सीमाओं पीले रंग में दिखाया गया है और सियान में tracheid Lumina की रूपरेखा कर रहे हैं। एक रेडियल फ़ाइल (नीला tracheid Lumina) के लिए मापा सेल दीवार मोटाई लाल हलकों का प्रतिनिधित्व करती है। काला पैमाने बार = 100 माइक्रोन। नीचे:। Tracheid लुमेन क्षेत्र और पूरे वार्षिक की अंगूठी के लिए tracheid सेल दीवार मोटाई में इंट्रा-वार्षिक परिवर्तन यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 5
चित्रा 5. examplएक के गठन वार्षिक अंगूठी के ई। छवि में बढ़ रहा है एक Larix पतनिका से 7 वें, 2007 जुलाई को जांचा एक माइक्रो-कोर से प्राप्त एक Safranin और एस्ट्रा-नीला दाग माइक्रो-धारा से ध्रुवीकृत प्रकाश के साथ एक प्रकाश माइक्रोस्कोप के तहत लिया गया है Lötschental समुद्र स्तर से ऊपर 1300 मीटर की ऊंचाई पर। इस माइक्रो-खंड पर cambial कोशिकाओं, इज़ाफ़ा चरण में कोशिकाओं, दीवार उमड़ना चरण में कोशिकाओं और परिपक्व कोशिकाओं को पहचानने योग्य होते हैं। छवि की स्पर्शरेखा चौड़ाई जाइलम पार अनुभाग की ~ 1 मिमी शामिल किया गया है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Discussion

dendroecological अनुसंधान में लकड़ी शरीर रचना विज्ञान के एक सफल और टिकाऊ एकीकरण की चुनौतियों के अलावा कई गुना विश्लेषणात्मक समस्याओं से ज्यादातर के कारण तकनीकी पहलुओं को, कर रहे हैं। सिद्धांत नमूने उच्च गुणवत्ता माइक्रो वर्गों और उनके बाद के विश्लेषण के 19 बनाने के दृष्टिकोण से इन चुनौतियों को लेकर।

पहली नज़र में, कोर या यहां तक ​​कि डिस्क के नमूने अब कई वर्षों के लिए जाना जाता रहा है कि एक साधारण प्रक्रिया है। गलत किया जा सकता है और नमूने में एक छोटा सा अशुद्धि बाद तैयारी और विश्लेषण चरणों के दौरान गंभीर समस्याओं में परिणाम कर सकते हैं कि कई चीजें हैं। अध्ययन का उद्देश्य माप-चौड़ाई की अंगूठी के लिए प्रतिबंधित है अगर ऐसी स्टेम अक्ष करने के लिए या एक अपूर्ण बढ़ाई कोरर का उपयोग कर सीधा बिल्कुल नहीं है कि Coring के रूप में लघु अशुद्धियों एक मुद्दा नहीं हैं। नमूनों की सूक्ष्म विश्लेषण के लिए लक्ष्य हालांकि, जब एक गलत नमूना दिशा की ऑप्टिकल विकृतियों में परिणाम हो सकता हैसेल दीवारों, कोर के भीतर सूक्ष्म दरारें में कुंद corers परिणामों का उपयोग करते हैं। इन कोर के सूक्ष्म वर्गों में कटौती करने की कोशिश कर रहा है जब एक परिणाम के रूप में, पतली वर्गों सिर्फ अलग गिर जाते हैं और एक कुशल तैयारी नहीं रह गारंटी है। एक ही माइक्रो-कोर नमूना लेने के लिए सच है। पंचर स्टेम लकड़ी में अंकित किया जाता है जब एक कुंद टिप उच्च दबाव का परिणाम देगा। नतीजतन cambial परत संकुचित हो जाएगा। cambial कोशिकाओं (चित्रा 5) फलस्वरूप निचोड़ा जाता है और विश्लेषण नहीं किया जा सकता है।

डिस्क नमूना वास्तव में विकास के रूपांतरों का विश्लेषण पर्यावरण परिवर्तन करने के लिए उन्हें संबंधित करने के लिए सबसे अच्छा है जब रणनीति है। दुर्भाग्य से यह आगे के विश्लेषण के लिए जांचा जा करने का इरादा सभी पेड़ों से डिस्क लेने के लिए बस असंभव है। फिर भी, विशेष रूप से उष्णकटिबंधीय वृक्षवलय कालक्रम के मामले में, स्टेम डिस्क की एक निश्चित राशि वेतन वृद्धि कोर के साथ संयोजन में की जरूरत है। डिस्क अंगूठी सीमाओं को परिभाषित करने के लिए एक आधार के रूप में इस्तेमाल कर रहे हैं और इस बात के लिए boundar समर्थन करने के लिएएँ वेतन वृद्धि कोर 12,27,28 का विश्लेषण के आधार पर परिभाषित किया।

काटने बनाम sanding के पेशेवरों और विपक्ष अक्सर 1,11,21 चर्चा कर रहे हैं। यह ऊपर उल्लेख किया है, सबसे अच्छा प्रक्रिया हमेशा अनुसंधान के सवाल पर निर्भर करता है और मानकों (स्थूल या सूक्ष्म) का विश्लेषण किया जाना है। समस्थानिक या रासायनिक विश्लेषण में एक और काम कर कदम में पेश कर रहे हैं, तो यह पूरे नमूना भर में सेल Lumina में भर सकते हैं कि sanding द्वारा बनाई गई घर्षण धूल, ध्यान से vacuuming या दबाव हवा से निकाल दिया जाता है कि अत्यंत महत्व का है।

सभी सूक्ष्म आगे के विश्लेषण के लिए नमूने तैयार करने के लिए सबसे उपयुक्त तरीका विश्लेषण के लिए माइक्रो वर्गों काट रहा है। सबसे पहले, अनुभाग तो संभावित आगे विश्लेषण के लिए किसी भी संदूषण के बिना रखा जा सकता है नमूना है, जो काट रहा है। दूसरा, इन वर्गों एकल कोशिका मापदंडों के उच्च संकल्प मापन के लिए अनुमति देते हैं। इसके अलावा, समय लेने वाली एम्बेडिंग से परहेजकोशिकाओं को स्थिर करने के लिए एक cornstarch के समाधान 26 का उपयोग करके तकनीक माइक्रो सेक्शनिंग में एक बड़ा लाभ है।

माइक्रो सेक्शनिंग का एक नुकसान यह है कि अभी भी लंबी तैयारी के समय में जिसके परिणामस्वरूप सीमित नमूना आकार है। वास्तविक समय श्रृंखला सदियों से या यहाँ तक कि सदियों से अधिक समय में वापस जा रहा विश्लेषण के लिए, आगे भी मौजूदा काटने उपकरणों 17,19, लेकिन इमेज प्रोसेसिंग और विश्लेषण के 18 विकसित करने की आवश्यकता नहीं है। इस दिशा में पहले कदम के शुरू में कोर पर विमान सतहों (चित्रा 1) में कटौती करने के लिए निर्मित कोर सूक्ष्म 21 का विकास होता है। हाल के परीक्षणों में इस डिवाइस (चित्रा 1) का उपयोग करते हुए पूरे कोर के सूक्ष्म वर्गों में कटौती करने की क्षमता का पता चला।

उच्च गुणवत्ता माइक्रो वर्गों के लिए एक प्रभावी छवि विश्लेषण के लिए बुनियादी सिद्धांत प्रदान करते हैं। एक खुर्दबीन के नीचे छवियों को लेने के लिए एक सामान्य प्रक्रिया 19 है, लेकिन उनके प्रभावी विश्लेषण अभी भी जरूरत है कि एक काम हैआगे 17 विकसित किया जाना है। सभी मौजूदा छवि विश्लेषण प्रणाली है कि वे और अधिक या कम तीव्रता तकनीशियन द्वारा नियंत्रित होने की जरूरत है, यानी अर्द्ध स्वचालित रहे हैं। कई मामलों में, छवियों को सही करने की जरूरत है या यहां तक ​​कि नए छवियों छवि के भीतर सेल दीवार मोटाई बदलने के बिना सॉफ्टवेयर के द्वारा संरचनाओं का एक बेहतर पंजीकरण के लिए इसके विपरीत बढ़ाने के लिए किया जा सकता है।

ऐसे रॉक्सास 18, WinCell या ImageJ 29 के लिए विशिष्ट लिपियों के रूप में विशिष्ट छवि विश्लेषण उपकरणों जैसे सेल नंबर, सेल आयाम, सेल दीवार मोटाई और वार्षिक रिंग के भीतर सेल स्थिति के रूप में बुनियादी संरचनात्मक डेटा प्रदान करने में सक्षम हैं। एक dendroecological संदर्भ में प्रासंगिक हैं कई अतिरिक्त संरचनात्मक मेट्रिक्स ऐसी सबसे बड़ी नाली के आकार, नाली के आकार के वितरण, earlywood या नाली की पहली पंक्ति के आकार, (ऑप्टिकल) लकड़ी घनत्व, इंट्रा-वार्षिक रूप में इन बुनियादी माप से गणना की जा सकती नाली आकार और कोशिका दीवार की प्रोफाइलमोटाई, और नाली (एकान्त, गुणकों, आदि) के समूह के पैटर्न।

सॉफ्टवेयर रॉक्सास 18 का उपयोग करना, नाली Lumina (यानी, पानी का आयोजन सेल) और वार्षिक अंगूठी सीमाओं की रूपरेखा स्वचालित रूप से मान्यता प्राप्त है और नेत्रहीन मूल छवि पर ओवरले के रूप में प्रतिनिधित्व कर रहे हैं। मुहैया कराने का साधन का पता लगाने एल्गोरिदम रंग, आकार और आकार के बारे में जानकारी, प्रत्येक नाली का स्थानीय संदर्भ पर अंगूठी की सीमाओं के लिए पता लगाने एल्गोरिदम के आधार पर कर रहे हैं। एक Toolbox हमें मैन्युअल रूप से सीधे, यानी, ओवरले सुविधाओं का संपादन को हटाने, जोड़ने और अंगूठी सीमाओं को संशोधित करने और नाली की रूपरेखा द्वारा इन परिणामों में सुधार करने के लिए अनुमति देता है। संपादन के बाद, सेल दीवार मोटाई (कोनिफर) सहित अंतिम डेटा उत्पादन, स्वचालित रूप से उत्पन्न होता है और एक स्प्रेडशीट में बचाया। पूरी तरह से स्वचालित प्रणाली वर्तमान में एक भी नहीं अपेक्षाकृत सरल संरचना दिखा कोनिफर के लिए उपलब्ध नहीं हैं, लेकिन यह भविष्य के विकास के लिए एक लक्ष्य है। यह दृढ़ता से फू का समर्थन करेगीसमय श्रृंखला में लकड़ी संरचनात्मक मापदंडों के डालूँगा एकीकरण का विश्लेषण करती है।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Increment corer http://www.haglofinc.com/index.php?option=com_content&view=article
&id=57&Itemid=88&lang=en
Core-Microtome http://www.wsl.ch/dendro/products/microtomes/index_EN
Laboratory microtome http://www.wsl.ch/dendro/products/microtomes/index_EN
Trephor micro corer http://intra.tesaf.unipd.it/Sanvito/trephorEn.asp
Nawashin solution Ten parts 1% chromic acid, four parts 4% formaldehyde and one part acetic acid
Picric-Anilin blue One part saturated aniline blue and four parts Trinitrophenol dissolved in 95% ethanol
Safranin Empirical Formula (Hill Notation) C20H19ClN4 
Astra-blue Empirical Formula (Hill Notation) C47H52CuN14O6S3 
Ethanol Linear Formula CH3CH2OH 
Xylol (Xylene) Linear Formula C6H4(CH3)2 
Canada Balsam Embedding solution for microscopy
Roxas Software http://www.wsl.ch/dienstleistungen/produkte/software/roxas/index_EN
ImageJ Software http://imagej.nih.gov/ij/
WinCell http://imagej.nih.gov/ij/

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