Introduction
Retinitis pigmentosa (RP) er en arvelig lidelse, der forårsager omfattende tab af fotoreceptorer, som er de celler i det yderste lag af nethinden er ansvarlig for transduktion af lys i form af fotoner, i neural aktivitet. Vigtigere er det, patienter med RP typisk resterende neuroner i andre lag af nethinden, som er stadig funktionel. Retinale proteser er i stand til at genoprette en vis begrænset udsyn til disse patienter ved at målrette disse overlevende neuroner med elektrisk stimulation til at aktivere deres visuelle pathway 1,2. Sanselig resultater fra kliniske forsøg har vist lovende tidlige resultater og for nylig nogle enheder er blevet godkendt til kommerciel brug. I øjeblikket er der tre væsentlige anatomiske steder, hvor kliniske retinale proteser er placeret: epiretinally 3,4, subretinalt 5,6 og suprachoroidally 7,8. Forskellige enheder anvender forskellige materialer og deres form, er tilpassettil det sted, hvor de er implanteret. Men de alle skabe visuelle percepter ved at aktivere de resterende neuroner i nethinden med elektriske impulser.
Der er potentiale for en medicinsk protese at skade omkringliggende væv som følge af mekanisk virkning af den oprindelige placering eller efterfølgende igangværende kræfter. I tilfælde af implanterbare stimulatorer, såsom retinale proteser, der er den yderligere betragtning, at de elektriske parametre bør være inden for sikre grænser. Patientsikkerhed er altafgørende, så enheder skal være grundigt testet i prækliniske studier, før videre til en klinisk indstilling 9-15. I vores følgesvend artiklen, beskrev vi en metode til at vurdere den lokaliserede histopatologi af øjet der omgiver et implantat placeret i suprachoroidale rum 16. I den foreliggende manuskript, beskriver vi en teknik til visualisering af øjenvæv omgiver en elektrodesæt hæftet til nethinden epiretinally i en præklinisk (Felinje) model (figur 1).
Den Epiretinal placering er den mest almindeligt anvendte position til lokalisering af en visuel protese. Elektrodesæt beliggende her er typisk fastgjort til nethinden med en metal tack som trænger alle lag i øjet 17-20. Forud for de teknikker, der er beskrevet i den foreliggende manuskript, var det vanskeligt nøjagtigt at vurdere retinal og andre væv, der omgiver en tack. Standard øje fiksering ved hjælp af neutral bufret formalin resulterede i kunstig retinal skade som følge af forskellen bevægelse af nethinden og senehinden mod det faste punkt i tack. Derfor nogen egentlig skade som følge af kurs og Epiretinal matrix kunne ikke nøjagtigt overholdes. Desuden kunne sektionering øjenvævet ikke udføres med retinal tack in situ som metalgenstande ikke let kan skæres med traditionelle histologiske apparat; fjerne tack før histologiske behandling var ogsåuønsket, da det førte også til kunstig retinal skade.
Formålet med denne undersøgelse var dobbelt: 1) at reducere nethindeløsning artefakt, så skader forårsaget af kurs og den Epiretinal implantat matrix kan opgøres pålideligt vurderes; og 2) at visualisere retinal arkitektur støder op til tack uden at fjerne det. For at opnå mål 1 blev en ny fiksering anvendte teknik (som beskrevet i den ledsagende artikel 16), hvilket reducerer artefakter retinal delaminering. For at opnå målet 2, modificerede vi en indlejring, slibning og polering teknik, der oprindeligt blev udviklet til in situ overvågning af cochlear implant elektroder 21-23. Beskrevet i dette manuskript metoder tillader visualisering af nethinden omkring og støder op til en kurs på stedet og samtidig minimere kunstig retinal skader og derfor giver præcis vurdering af eventuelle skader forårsaget af kurs og Epiretinal array.
Protocol
BEMÆRK: Alle procedurer blev godkendt af Royal Victorian øjet og øret Hospital Udvalg Animal Research & Etik (RVEEH AEC; # 10-199AB). Forsøgspersonerne blev behandlet i overensstemmelse med National Health og Medical Research Council 's "australske adfærdskodeks for pasning og anvendelse af dyr til videnskabelige formål" (2013) og "Forebyggelse af dyremishandling Act" (1986, og ændringer). Alle kirurgiske, medicinske votering og elektrofysiologiske procedurer blev udført under anæstesi og blev gjort alt for at minimere dyrenes lidelser.
1. Enucleation og fiksering
BEMÆRK: Følg enucleation og fiksering, der er beskrevet i detaljer i følgesvend manuskript 16, idet ekstra pleje omkring enhedens kabler eller vitrektomi havne, hvis den findes. Kort fortalt indebærer dette:
- Transkardialt perfundere emnet med varmt saltvand efterfulgt af koldt neutral bufferød formalin.
- Bind suturer til øjeæblet for at fungere som vartegn.
- Enucleate øjet 16, opretholdelse af enhedens kabler og eventuelle vedhæftede patches / faner.
- Post-fix øjet i Davidson løsning for 18-36 timer.
- Overførsel til 50% ethanol til 6 - 8 timer.
- Overførsel til 70% ethanol og opbevares i køleskab (4 ° C), indtil dissektion.
2. Elektrode Fjernelse og dissektion.
BEMÆRK: Ikke alle Epiretinal implantater vil have den samme form faktor, men generelt vil der være en elektrode-array og en form for fleksibel og komfortabel bæremateriale. Enheder, der er tidsmæssigt på nethinden har en tack hul, hvor metallet tack trænger arrayet og bagsiden af øjet, at holde disse sammen.
- Visualisere implantatet og det punkt, hvor det er fastgjort til nethinden.
- Ved hjælp af en 15 graders klinge gør en periferisk trans-hornhinde snit og fjern hætten corneal at expose de underliggende iris og linse.
- Ved hjælp af en 15 graders kniv, afkoble de zonulære fibre af linsen og tag linsen i toto, udsætter det bageste kammer med Epiretinal implantat og metallet tack på stedet.
- Afhængigt af implantatet og undersøgelsen skal udføres, fjerne uvedkommende komponenter før yderligere dissektion.
BEMÆRK: I det foreliggende eksempel Epiretinal matrix evalueres bestod af en prototype hermetisk diamant elektrode og elektronik pakke anbragt i en konform silikone bærer (fremstillet i huset, se 20).- Her forsigtigt udpakke diamant elektrode pakke med bøde dissektion med en skalpel. Lad silicone implantatets legeme sammen med retinal klæbeevne og resterne af platin ledninger (figur 2). Hvis en indlejret matrix / boliger er ikke en del af enheden design, der undersøges, og derefter udelade dette trin (2.2).
- Omhyggeligtdissekere en prøve, der omfatter klæbeevne og omgivende væv i den ønskede orientering. Brug fine dissektion saks til at klippe fuld tykkelse strimler fra bagsiden af øjet, herunder sclera, choroidea og retina. Tag en prøve, som giver et langsgående tværsnit af klæbeevne, der viser alle de retinale lag støder op til tack (figur 2)
BEMÆRK: Den ønskede orientering for prøven kan variere afhængigt af den særlige resultat ønskes. For eksempel, hvis man ønsker at undersøge nærhed af tack beskadigelse af optisk disk derefter optisk disk bør medtages i prøven.
3. Dehydrering, Embedding, Montage, slibning, farvning og Imaging
- Dehydrer prøven over tre dage i progressive ethanol faser:
- Dehydrere prøven i 70% ethanol i 2 timer to gange.
- Dehydrere prøven i 80% ethanol i 2 timer to gange og derefter O / N.
- Dehydrere prøven i 90% ethanol i 2 timer TWICe.
- Dehydrere prøven i 100% ethanol i 2 timer to gange og derefter O / N.
- Dehydrere prøven i 100% acetone i 2 timer to gange.
- Fjern prøven fra acetone og observere den under et lysmikroskop, da det luft-tørrer ved stuetemperatur. Overfør prøven til epoxy (se trin 3.4) lige før det begynder at krølle / skjul.
BEMÆRK: Fjernelse af væske fra det bløde væv resulterer i kollapsede celler og krympning. En vurdering af, når vævet curling / kollaps indtræffer er udviklet med erfaring.
- Fjern prøven fra acetone og observere den under et lysmikroskop, da det luft-tørrer ved stuetemperatur. Overfør prøven til epoxy (se trin 3.4) lige før det begynder at krølle / skjul.
- Forbered medicinsk kvalitet epoxyharpiks i henhold til producentens anvisninger. At hærde harpiksen, bruge enten 55 ° C i 1 time eller 24 timer ved stuetemperatur. Anbringes i et vakuumkammer for ~ 5 min ved ~ 50 mbar til fjernelse af luftbobler. Reguler vakuum manuelt som en for stor tomrum vil få epoxy blandingen i kog og afgasning vil ikke ske en effektiv
BEMÆRK: Udfør trin 3.3 samtidig med trin 3.2. - Integrer den SAMPle i klar epoxy harpiks. Nedsænk øjenvæv i afgasset epoxy i en passende forseglbar beholder og forlade O / N ved stuetemperatur til at hærde.
- Vær omhyggelig med at indlejre prøven i den ønskede retning (figur 2) ved at ændre størrelsen og re-embedding den hærdede epoxy blok. Re-indlejre skaleret blokken med øjenvævet, således at den lange akse af halsen er orienteret parallelt med bunden af formen (gul kop - figur 3A).
- Monter harpiksen i en slibning prøveholder og male prøven (230-250 rpm med vand på, manuel slibning) ved hjælp af siliciumcarbid papir (begyndende med 800 grid, figur 3C og 3E).
- For farvning, dyppe jordoverfladen i toluidinblå plet i 3 - 5 min, eller indtil pletten udvikler (figur 3F).
- Skyl med vand fra hanen (figur 3G).
- Billede jordoverfladen af prøven med en høj effekt dissektion omfang til at visualisere de cellulære lag afnethinden (figur 3H). Påfør en dråbe destilleret vand på den øverste overflade af epoxy over prøven for at udjævne diffraktion ved luft-epoxy interface. Brug et optisk fiber "svanehals" lyskilde til at belyse prøven.
- Gentag trin 3,6-3,9, hver gang slibe væk en forudindstillet tykkelse prøve (minimum præcis og reproducerbar slibning tilvækst af præparatholderen er 20 pm).
Representative Results
Fikseringen protokol væsentligt reduceret kunstig løsgørelse og delaminering af nethinden 16. Orientering af prøven inden for epoxy blok blev opnået konsekvent anvendelse af metoden beskrevet i to trin indlejring proces. Den trinvise Slibeproceduren krævede et moderat niveau af håndelag at opnå optimale resultater, men blev hjulpet af den justerbare præparatholderen som forudsat fin kontrol over tilvækst opløsning. I alle tilfælde (n = 5) halsbarmen var placeret og jord / poleret med ønskelige og ensartede resultater. Den retinae støder op til stifter var opløselige og farvet hensigtsmæssigt. Polere overfladen af epoxyharpiksen blok med en klasse P # 800 siliciumcarbid papir var tilstrækkelig til at afbilde cellulære makrostrukturen af den indlejrede væv. Højere kvalitet papir eller diamant opslæmning kan anvendes til at polere yderligere overfladen ved en given dybde, hvis det ønskes. En dissektion mikroskop og optisk fiber "svanehals" light kilde blev fundet at være egnet til at afbilde overfladen af jorden blok og den indlejrede vævsprøve. Positionen af lyskilden blev varieret ved trial and error at finde en placering og vinkel, der gav den bedste belysning og kontrast gennem mikroskopet. Tilføjelse af en dråbe destilleret vand på overfladen af blokken, over prøven, var nyttigt at reducere lysbanen diffraktion og / eller glatte forvridninger på epoxy luftgrænseflade. Figur 4 viser eksempel billeder af retinavæv visualiseret umiddelbart støder op til en titanium retinal tack med denne teknik. Ikke-kunstig nethindeløsning og foldning kan ses på begge sider af silicone (figur 4A). Den tack aksel er synlig indlejret i silikone; lederen af tack er trængt nethinden og sclera. Der er ikke-kunstig nethindeløsning i ufarvet retina hver side af silicone (figur 4C). Teknikken har vist, at i dette tilfælde, there er retinal desorganisering støder op til klæbeevne og komprimering af nethinden ved den ene side på grund af en skrå indføring vinkel. Bemærk, at billederne præsenteres blot illustrationer af succes teknik, ikke repræsenterer tack-skader histopatologi i almindelighed.
Figur 1. Placering af en Epiretinal elektrodesæt. (A) Skematisk diagram af øjet der viser en forstørret tværsnit af den bageste sclera, choroidea og degenererede retina (mangler fotoreceptorer). En elektrode-array er vist i blå, anbringes epiretinally. (B) Computer-aided-tegning af et Epiretinal elektrodesæt. a, integreret kredsløb (chip) og elektrode-pakken; B, titan retinal tack; c, medicinsk silikone boliger; d, bly udgangsstedet. Panel A modificeret fra en original illustratipå forudsat høflighed af Bionic Vision Australia, copyright Beth Croce. Klik her for at se en større udgave af dette tal.
Figur 2. Elektrode fjernelse og dissektion af øjet. High Dynamic Range makro fotografier af en kerneløs katte øje med Epiretinal tack på stedet. (A) Indlæg fiksering med Davidson fixativ for at bevare retinal arkitektur 16 blev den kerneløs øje dissekeret. Elektrodesættet pakken blev fjernet fra silikone bærer (stiplet firkant omrids angiver oprindelige placering af elektroden array) med tack (pil) og silikone implantatets legeme tilbage. (B) Øjet blev dissekeret med langsgående tværsnit støder op til tack(Stiplet linie). Halsbarmen forbliver indlejret i den bageste væg af øjestykket (pil), stabiliseret overvejende af sclera. Vævssnittet indeholdende tack blev fremstillet for harpiks indlejring og formaling (højre segment), mens afsnittet med nethinden under den fjernede elektrodesæt blev fremstillet for standard histologisk behandling 16 (venstre segment). En lineal med intervaller på 0,5 mm er vist nederst kant af hver panel. Klik her for at se en større udgave af dette tal.
Figur 3. Epoxy indlejring og formaling af klæbeevne og retinavæv. Fotografier af epoxy indlejret og tilpasset vævsprøve, slibning, farvning og billeddannelse af klæbeevne og retinal væv. (A) TAC k prøve blev indlejret i en epoxyharpiks blok. Ved hjælp af formen blev prøven orienteret så det langsgående plan er parallelt med bunden af formen. (B) den hærdede epoxy blok indeholdende tack prøven. (C) epoxy blok blev monteret i en slibning prøveholder, klar til slibning . (D) Prøven blev orienteret så afbildes dele af jorden væv indeholder retinale cellulære lag og længdeakse halsen. (E) Stikprøven blev jorden ved hjælp af siliciumcarbid papir på en roterende mølle. (F) Jorden overflade blokken blev farvet med toluidinblåt til identifikation af retinale lag. (G) Blokken blev skyllet i ledningsvand for at fjerne overskydende farve. (H) toluidinblåt farvede retinale lag og tack blev afbildet under anvendelse af en høj strøm dissektion omfang.
annonce / 52348 / 52348fig4highres.jpg "/>
Figur 4. Høje og lave power billeder af klæbeevne og nethinden. På forskellige punkter under slibeprocessen billeder blev taget med et dissektionsmikroskop, viser længdesnit af halsbarmen (asterisk) trænger gennem øjet og spændende sclera (»S« ), tilstødende silicone (hash) og toluidinblåt farvede og ufarvede nethinden (R). Bemærk disse er eksempler kun billeder til at demonstrere den nuværende visualisering teknik, og er ikke repræsentative for alle Epiretinal implantat eller tack indsættelse histologiske resultater. Ground rester af platin ledninger er synlige i paneler AD ('W'). (A) Lavt strømforbrug, uplettet billede af tack trænge ind i nethinden og sclera. (B) høj powered billede af nethindeløsning og folde i uplettet nethinden tilstødende til silicone bæreren i billede A. (C) Low power billedet i midten af tack akslen.
Discussion
Standard histologiske teknikker ikke er i stand til at behandle hårdt metal implantater i stedet på grund af begrænsninger i at skære disse objekter med metal, glas eller endog diamantklinger. I vores companion papir 16 viste vi, at anvendelsen af en modificeret hel-eye fiksering teknik kan reducere kunstig retinal delaminering. I den nuværende manuskript, der er etableret en slibning og polering teknik til visualisering cochlear implantater 21-23 in situ blev modificeret til retinale proteser. En titan tack, anvendes til at sikre en elektrodesæt til nethinden, epiretinally blev indlejret i epoxy sammen med det omgivende øjenvæv. Denne harpiks blok blev derefter orienteret korrekt og gradvist jord / poleret for at afsløre vævsmorfologi umiddelbart op til metallet tack. Billeder af den polerede overflade af blokken i forskellige dybder blev taget med en kraftig dissektion mikroskop. Denne teknik er nyttig til: visualisere og evaluating vævet reaktion støder op til Epiretinal implantat; at vurdere den kirurgiske traume associeret med implantation af implantatet; at bestemme den biologiske reaktion på hårdt metal; og at måle afstanden mellem implantatet og overfladen af nethinden.
Denne teknik vil være nyttigt i fremtidige sikkerhedsundersøgelser til in situ visualisering af regionen støder op til en retinal tack eller andre hårde (fx metallisk) objekter i øjet. Dette har direkte anvendelse ved vurderingen af prækliniske sikkerhed af proteser tidsmæssigt til nethinden epiretinally. Det kan også være nyttige til evaluering af vævsskade i retinale regioner i kontakt med implantater placeret i sub-retinal placering.
Der er flere måder at kontrollere, at teknikken er blevet udført korrekt. På hvert trin skal nethinden forblive fastgjort til de ydre lag af øjet. Hvis der er grov kunstig nethindeløsning, kan dette indiskspiste et problem med fiksering. Når prøven er indlejret og re-orienteret i den endelige harpiks blokere nethinden bør være tæt på vinkelret med slibning ansigt af blokken; dette vil minimere skrå skæring. Det er nyttigt at kontrollere, at antallet af enkeltprøver slibning trin (med kendt trin), der skal til at krydse en genstand (såsom en retinal tack) korrelerer derfor med dimensionerne af objektet.
Teknikken kan optimeres på flere måder. Ridser på overfladen af epoxy blok er forbundet med slibeprocessen kan reduceres med gradvis finere kvalitet polering. For nærværende undersøgelse, brugte vi 800, 1000, 1200, 2400, og 4000 siliciumcarbid papir. Diamant pasta kan også bruges til at forbedre overfladekvalitet. En finere overfladefinish giver et billede af højere kvalitet, men på bekostning af ekstra polering tid. En anden kritisk overvejelse for at forbedre resultatet af denne teknik er valget og kvaliteten af optics og belysning bruges til billedoptagelse. Andre grundlæggende histologiske pletter - især Nissl pletter, kan anvendes i stedet for toluidinblå, men kan kræve yderligere optimering. Nogle pletter vil plette harpiksen samt væv (f.eks Eosin) derfor en lavvandet polish kan være påkrævet efter farvning for at fjerne baggrund misfarvning. Specialiserede pletter, fluorescerende farvestoffer og immunhistokemisk farvning blev ikke forsøgt, men medmindre et meget specifikt resultat ønskes, den nødvendige tid til at udføre disse pletter på hver slibning niveau vil sandsynligvis være uoverkommelige. Det kan imidlertid være muligt at plette væv som en helhed, før indlejring (trin 3.4) 24.
Den største begrænsning ved denne teknik er, at når området af interesse er blevet slebet væk, det kan ikke hentes, derfor er det klogt at fange mange (eventuelt overflødige) billeder på en række forstørrelser på hvert trin af slibning og polering. Det erogså vigtigt at bruge små trin for hver slibning dybdejustering. En anden begrænsning ved denne teknik er, at den optiske forstørrelse og opløsning sammenlignet med væv monteret på et objektglas og ses med en standard (transmission) lysmikroskop. Med henblik på prototyping og vurdere sikkerheden ved en ny implantat-enhed, brutto patologisk vurdering er af primær interesse. Denne teknik tilvejebringer en effektiv metode til iagttagelse klinisk relevant skade forbundet med en retinal tack. Med praksis, den samlede tid, der kræves til at indsamle sliber, polerer og fotografere en given prøve (når indlejret) er sammenlignelig med den tid, det ville tage at afsnittet en paraffin blok eller frosset sektion.
Der er også potentialet for de nuværende teknikker udvides til anvendelser uden for omfanget af retinale implantater. Denne teknik er velegnet til evaluering af væv støder op til en hård implantat, hvor implantatet ekstraktion er ikke feasible eller vil skade grænsefladen. For eksempel kan denne teknik udvides til at evaluere implantater fremstillet af metal (f.eks platin, nitinol, etc.), der ikke kan skæres med konventionelle histologiske teknikker, såsom nogle dybe hjerne eller perifere nerve elektroder, kanyler for drug delivery, vaskulære stents eller ortopædiske proteser.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Acetone | Chem-Supply | AA008 | Propanone BHD Medical grade |
| Epo-Tek 301 Epoxy | Epoxy Technology | Part A 1675-54-3 Part B 9046-10-0 | |
| Ethanol 70-75% v/v | Merck PTY LTD | 4.10261 | Alcohol |
| Ethanol | Merck PTY LTD | 90143 | Alcohol |
| Toluidine blue O | Sigma-Aldrich | T3260 | |
| Ethylenediamine Tetraacetic Acid | Sigma-Aldrich | ||
| TegraPol grinding/polishing machine | Struers | TegraPol-25 | |
| AccuStop specimen holder | Struers | Accustop | |
| Light microscope | Leica | MZ16 | |
| Objective lens | Leica | 2.0x Planapo Objective | |
| Digital Microscope Camera | Leica | DFC-420C | |
| Microscope Software | Leica | Application Suite v4.1.0 |
References
- Shepherd, R. K., Shivdasani, M. N., Nayagam, D. A., Williams, C. E., Blamey, P. J. Visual prostheses for the blind. Trends Biotechnol. 31, 562-571 (2013).
- Santos, A., et al. Preservation of the inner retina in retinitis pigmentosa. Arch Ophthalmol. 115, 511-515 (1997).
- Humayun, M. S., et al. Visual perception in a blind subject with a chronic microelectronic retinal prosthesis. Vision Res. 43, 2573-2581 (2003).
- Roessler, G., et al. Angiographic findings folowing tack fixation of a wireless epiretinal retina implant device in blind RP patients. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 249, 1281-1286 (2011).
- Chow, A. Y., et al. The artificial silicon retina microchip for the treatment of vision loss from retinitis pigmentosa. Arch Ophthalmol. 122, 460-469 (2004).
- Zrenner, E., et al. Subretinal electronic chips allow blind patients to read letters and combine them to words. Proc Biol Sci. 278, 1489-1497 (2011).
- Fujikado, T., et al. Testing of semichronically implanted retinal prosthesis by suprachoroidal-transretinal stimulation in patients with retinitis pigmentosa. Invest Ophthalmol Vis Sci. 52, 4726-4733 (2011).
- Saunders, A. L., et al. Development of a surgical procedure for implantation of a prototype suprachoroidal retinal prosthesis. Clin Experiment Ophthalmol. , (2013).
- Lee, S. W., et al. Development of microelectrode arrays for artificial retinal implants using liquid crystal polymers. Invest Ophthalmol Vis Sci. 50, 5859-5866 (2009).
- Sakaguchi, H., et al. Transretinal electrical stimulation with a suprachoroidal multichannel electrode in rabbit eyes. Jpn J Ophthalmol. 48, 256-261 (2004).
- Majji, A. B., et al. Long-term histological and electrophysiological results of an inactive epiretinal electrode array implantation in dogs. Invest Ophthalmol Vis Sci. 40, 2073-2081 (1999).
- Walter, P., et al. Successful long-term implantation of electrically inactive epiretinal microelectrode arrays in rabbits. Retina. 19, 546-552 (1999).
- Ray, A., Chan, L., Thomas, B., Weiland, J. D. Effects of prolonged stimulation at the electrode-retina interface. Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. 1, 1285-1287 (2006).
- Colodetti, L., et al. Pathology of damaging electrical stimulation in the retina. Experimental eye research. 85, 23-33 (2007).
- Nayagam, D. A. X., et al. Chronic Electrical Stimulation with a Suprachoroidal Retinal Prosthesis: A Preclinical Safety and Efficacy Study. PLoS One. 9, e97182 (2014).
- Nayagam, D. A. X., et al. Techniques for Processing Eyes Implanted With a Retinal Prosthesis for Localized Histopathological Analysis. Journal of visualized experiments : JoVE. , e50411 (2013).
- Laube, T., et al. Development of surgical techniques for implantation of a wireless intraocular epiretinal retina implant in Gottingen minipigs. Graefe's Archive For Clinical And Experimental Ophthalmology = Albrecht von Graefes Archiv fur klinische und experimentelle Ophthalmologie. 250, 51-59 (2012).
- Gerding, H., et al. Successful long-term evaluation of intraocular titanium tacks for the mechanical stabilization of posterior segment ocular implants. Mat.-wiss. u. Werkstofftech. 32, 903-912 (2001).
- Seo, J. -M., et al. Silicon retinal tack for the epiretinal fixation of the polyimide electrode array. Current Applied Physics. 6, 649-653 (2006).
- Hadjinicolaou, A. E., et al. Electrical stimulation of retinal ganglion cells with diamond and the development of an all diamond retinal prosthesis. Biomaterials. 33, 5812-5820 (2012).
- Briggs, R. J., et al. Comparison of round window and cochleostomy approaches with a prototype hearing preservation electrode. Audiol Neurootol. 11, Suppl 1. 42-48 (2006).
- Shepherd, R., et al. An improved cochlear implant electrode array for use in experimental studies. Hear Res. 277, 20-27 (2011).
- Tykocinski, M., et al. Comparison of electrode position in the human cochlea using various perimodiolar electrode arrays. Am J Otol. 21, 205-211 (2000).
- Hardie, N. A., MacDonald, G., Rubel, E. W. A new method for imaging and 3D reconstruction of mammalian cochlea by fluorescent confocal microscopy. Brain Res. 1000, 200-210 (2004).
