Introduction
Retinitis pigmentosa (RP) är en ärftlig sjukdom som orsakar omfattande förluster av fotoreceptorer, som är de celler i det yttersta lagret av näthinnan som ansvarar för att omvandla ljus, i form av fotoner, i neural aktivitet. Viktigt patienter med RP har vanligtvis rest nervceller i de andra lagren i deras näthinnan som fortfarande funktionell. Retinal proteser är kapabla att återställa viss begränsad vision att dessa patienter genom att rikta dessa överlevande nervceller med elektrisk stimulering för att aktivera sin visuella väg 1,2. Perceptuella utfall från kliniska prövningar har visat lovande tidiga resultat och nyligen vissa enheter har godkänts för kommersiell användning. För närvarande finns det tre huvudsakliga anatomiska platser där kliniska retinala proteser har positione: epiretinally 3,4, subretinally 5,6 och suprachoroidally 7,8. Olika enheter använder olika material och deras form är anpassadtill den plats där de är implanterade. Men de har alla skapar visuella percepts genom att aktivera de kvarvarande neuronerna i näthinnan med elektriska pulser.
Det finns potential för någon medicinsk protes att skada omgivande vävnad på grund av mekaniska effekter av den initiala placeringen eller efterföljande pågående krafter. I fallet med implanterbara stimulatorer, såsom retinal proteser, det finns det tilläggsköpeskilling att de elektriska parametrarna ska vara inom säkra gränser. Patientsäkerhet är av största vikt, så enheterna måste vara rigoröst testade i prekliniska studier innan avancera till en klinisk inställning 9-15. I vår följeslagare artikel beskrev vi en metod för att bedöma den lokaliserade histopatologi av ögat som omger ett implantat placeras i suprakoroidala utrymmet 16. I föreliggande manuskript beskriver vi en teknik för visualisering av ögonvävnad som omger elektrodbäraren uppsatt på näthinnan epiretinally, i en preklinisk (feline) modell (Figur 1).
Den Epiretinal platsen är den mest utnyttjade läge för att lokalisera en visuell protes. Elektrod arrayer belägna här är normalt fästs på näthinnan med en metall please som penetrerar alla lager i ögat 17-20. Före de tekniker som beskrivs i föreliggande manuskript var det svårt att exakt bedöma retinal och andra vävnader som omedelbart omger en klibb. Standardögonfixering med neutralt buffrad formalin gav arte retinal skada på grund av den differentiella rörelsen av näthinnan och sklera mot den fasta punkten på klibb. Därför någon faktisk skada som orsakats av klibbighet och Epiretinal array inte kunde exakt observeras. Dessutom kunde sektioneögonvävnaden inte utföras med näthinnans klibb in situ såsom metallföremål inte lätt kan skäras med traditionell histologisk anordningen; avlägsna please innan histologiska behandling var ocksåönskvärt eftersom detta ledde också till artefaktuell retinal skador.
Syftet med den aktuella studien var tvåfaldigt: 1) att minska näthinneavlossning artefakt så att skada som orsakats av halshornet och Epiretinal implantat array tillförlitligt kan bedömas; och 2) att visualisera näthinnan arkitekturen intill please utan att ta bort den. För att uppnå målet 1, var en ny bindningsteknik används (enligt beskrivningen i följeslagare artikel 16), vilket minskar arte retinal delaminering. För att uppnå målet 2, modifierad vi en inbäddning, slipning och polering teknik, som ursprungligen utvecklades för in situ observation av cochleaimplantat elektroder 21-23. De metoder som beskrivs i detta manuskript tillåter visualisering av näthinnan som omger och intill ett slag på plats samtidigt minimera arte retinal skada och därmed möjliggör noggrann bedömning av eventuella skador som orsakats av klibbighet och Epiretinal array.
Protocol
OBS: Alla förfaranden godkändes av The Royal Victorian öga och öra Hospitals Animal Research & etikkommitté (RVEEH AEC; # 10-199AB). Ämnena behandlades enligt National hälsa och medicinsk forskning Rådets "svenska uppförandekod för skötsel och användning av djur för vetenskapliga ändamål" (2013) och "Förebyggande av djurplågeri Act" (1986; och ändringar). Alla kirurgiska, klinisk bedömning och elektrofysiologiska förfaranden utfördes under narkos och alla ansträngningar gjordes för att minimera lidandet.
1. Enucleation och Fixering
OBS: Följ enucleation och fixeringsförfarande som beskrivs i detalj i följeslagare manuskript 16, med extra omsorg runt enhets kablar eller vitrektomi portar, om närvarande. I korthet handlar det om:
- Transcardially BEGJUTA ämnet med varm saltlösning följt av kall neutral bufferöd formalin.
- Knyt suturer till ögongloben för att tjäna som landmärken.
- Enucleate ögat 16, upprätthålla kablarna enhets och eventuella fäst patchar / flikar.
- Efter fixera ögat i Davidson lösning för 18-36 timmar.
- Överföring till 50% etanol under 6-8 h.
- Överföring till 70% etanol och kyla (4 ° C) tills dissekering.
2. Elektrod Borttagning och Dissection.
OBS: Inte alla Epiretinal implantat kommer att ha samma formfaktor, men i allmänhet kommer det att finnas en elektrod array och någon form av flexibla och formbart bärarmaterial. Enheter som är uppsatt på näthinnan utrustade med ett klibb hål där metall klibb penetrerar matrisen och den bakre delen av ögat, att hålla dessa samman.
- Visualisera implantatet och den punkt där den är fäst till näthinnan.
- Med hjälp av en 15 graders blad gör en periferitrans korneal snitt och ta bort hornhinnan locket till expose underliggande iris och lins.
- Med användning av en 15 graders blad, disinsert de zonular fibrer av linsen och avlägsna linsen i sin helhet, att exponera den bakre kammaren med den Epiretinal implantatet och metall klibb in situ.
- Beroende på implantatet och studien utförs, ta bort ovidkommande komponenter innan ytterligare dissekering.
OBSERVERA: I föreliggande exempel, den Epiretinal arrayen som utvärderas bestod av en prototyp hermetisk diamantelektrod och elektronikförpackning inrymd i ett konformt silikonbärare (som produceras i huset, se 20).- Här, försiktigt extrahera diamantelektrodpaketet från fina dissektion med en skalpell. Lämna silikonkropp av implantatet tillsammans med retinal klibbighet och resterna av ledningar platina (Figur 2). Om en inbäddad array / bostäder är inte en del av enhetens utformning under utredning, sedan hoppa över detta steg (2,2).
- Noggrantdissekera ett prov som inkluderar klibbighet och omgivande vävnad i önskad riktning. Använd fina dissektion sax för att klippa full tjocklek remsor från bakre delen av ögat, inklusive sklera, åderhinnan och näthinnan. Ta ett prov, som ger ett längsgående tvärsnitt av den klibbighet, som visar alla retinaskikt intill klibb (Figur 2)
OBS: Den önskade orienteringen för provet kan variera beroende på det speciella resultat önskas. Till exempel, om man önskar undersöka närheten till klibb skador synnervspapillen sedan synnervspapillen bör ingå i provet.
3. Uttorkning, inbäddning, Montering, Slipning, Färgning och Imaging
- Torka provet över tre dagar i progressiva stadier etanol:
- Torka provet i 70% etanol under 2 h två gånger.
- Torka provet i 80% etanol under 2 timmar två gånger och sedan O / N.
- Torka provet i 90% etanol under 2 h TWICe.
- Torka provet i 100% etanol under 2 h två gånger och sedan O / N.
- Torka provet i 100% aceton under 2 h två gånger.
- Ta provet från aceton och observera den under ett ljusmikroskop som luftkonditione torkar vid RT. Överför provet till epoxi (se steg 3.4) strax innan det börjar krypa / kollaps.
OBS: avlägsnande av vätska från de mjuka vävnaderna ger kollapsade celler och krympning. En uppskattning av när vävnaden curling / kollaps inträffar är utvecklad med erfarenhet.
- Ta provet från aceton och observera den under ett ljusmikroskop som luftkonditione torkar vid RT. Överför provet till epoxi (se steg 3.4) strax innan det börjar krypa / kollaps.
- Förbered medicinsk kvalitet epoxiharts enligt tillverkarens anvisningar. Att härda hartset, använda antingen 55 ° C under 1 h eller 24 h vid RT. Placera i en vakuumkammare för ~ 5 min vid ~ 50 mbar för att avlägsna luftbubblor. Reglera vakuumet manuellt som en överdriven vakuum gör att epoxi blandningen koka och avgasning kommer inte att ske på ett effektivt sätt
OBS: Utför steg 3,3 samtidigt med steg 3.2. - Infoga den SAMPle i klar epoxiharts. Doppa ögonvävnaden i avgasad epoxi i en lämplig förslutbar behållare och lämna O / N vid RT att bota.
- Var noga med att bädda in provet i önskad orientering (Figur 2) genom att ändra storlek och åter inbäddning av härdad epoxi blocket. Åter bädda med ändrad storlek block som innehåller ögonvävnaden så att den långa axeln av klibbighet är orienterad parallellt med botten av formen (gul kopp - figur 3A).
- Montera hartset i en slipprovhållare och slipa provet (230-250 rpm med vatten på, manuell slipning) använder kiselkarbid papper (med början 800 rutnät, Figurerna 3C och 3E).
- För färgning, doppa markytan i toluidinblå fläck i 3 - 5 min, eller tills fläcken utvecklas (Figur 3F).
- Skölj med kranvatten (figur 3G).
- Bild markytan av provet med en hög effekt dissektion utrymme att visualisera de cellulära skikten avnäthinnan (Figur 3H). Applicera en droppe destillerat vatten på den övre ytan av epoxi ovanför prov att jämna diffraktionen vid luft-epoxi gränssnitt. Använd en optisk fiber "svanhals" ljuskälla för att belysa provet.
- Upprepa steg 3,6-3,9, varje gång slipning bort en förinställd tjocklek prov (minst exakt och reproducerbar slipning ökning av provhållare är 20 pm).
Representative Results
Fixeringen Protokollet minskade väsentligt artefaktuella detachement och delaminering av näthinnan 16. Orientering av provet inom epoxi blocket konsekvent uppnås med den beskrivna tvåstegs inbäddning process. Den inkrementella slipning förfarande krävs en måttlig nivå av fingerfärdighet för att uppnå bästa möjliga resultat, men fick hjälp av den justerbara provhållare som gav fina kontroll över stegupplösning. I samtliga fall (n = 5) klibbig var belägen och jord / pole med önskvärda och konsekventa resultat. Den retinae intill nubb var upplösningen och färgas på lämpligt sätt. Polering av ytan av epoxihartset block med ett betyg P # 800 kiselkarbid papper var tillräcklig för att bilden den cellulära makrostrukturen av den inbäddade vävnaden. Högre grader papper, eller diamantslurry kan användas för att ytterligare polera ytan vid varje givet djup, om så önskas. En dissektion mikroskop och optisk fiber "svanhals" light källa befanns vara lämplig för avbildning av ytan av markblocket och den inbäddade vävnadsprovet. Positionen för ljuskällan varierades genom trial and error för att hitta en plats och vinkel som gav den bästa belysningen och kontrast genom mikroskopet. Lägga till en droppe destillerat vatten på ytan av blocket, ovanför provet, var användbara för att reducera ljusbanan diffraktion och / eller släta snedvridningar vid epoxi luftgränssnittet. Figur 4 visar exempelbilder av näthinnevävnad visualiseras omedelbart intill en titan retinal please att använda denna teknik. Icke-arte näthinneavlossning och vikning kan ses på vardera sidan av silikon (Figur 4A). Slagaxeln syns inbäddad i silikon; chefen för please trängt näthinnan och sklera. Det finns icke-arte näthinneavlossning i ofärgade näthinnan endera sidan av silikon (Figur 4C). Tekniken har visat att, i detta fall, there är retinal desorganisation intill please och kompression av näthinnan vid ena sidan på grund av en sned införvinkel. Notera att bilderna som presenteras är enbart illustrationer av framgången av tekniken, inte representativa för klibb-skada histopatologi i allmänhet.
Figur 1. Placering av en Epiretinal elektrodgrupp. (A) Schematisk beskrivning av ögat som visar en förstorad tvärsektion av den bakre sklera, åderhinnan och degenererade näthinnan (saknar fotoreceptorer). En elektrod array visas i blått, fäst epiretinally. (B) för datorstödd ritning av en Epiretinal elektroduppsättning. a, integrerad krets ("chip") och elektrodpaketet; B, titan retinal klibb; c, medicinsk silikon hölje; d, bly utgång. Panel En modifierad från ett original illustratiPå förutsatt artighet av Bionic Vision Australia, upphovsrätt Beth Croce. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 2. Elektrod borttagning och dissektion i ögat. High dynamic range makrofotografier av en enukleerat kattdjur ögat med Epiretinal tack på plats. (A) Post fixering med Davidsons fixativ för att bevara retinal arkitektur 16 ades enukleerat ögat dissekeras. Elektroduppsättningen paketet avlägsnades från silikonbäraren (streckad fyrkant disposition indikerar ursprungliga platsen för elektrodgruppen) med halshornet (pil) och silikonkropp av implantatet återstår. (B) Ögat dissekerades med det längsgående tvärsnittet i anslutning till klibb(Streckad linje). Slag förblir inbäddade i den bakre väggen av ögonmusslan (pilen), stabiliserades övervägande av sklera. Avsnittet vävnad som innehåller hals förbereddes för harts inbäddning och slipning (höger segment), medan den del som innehåller näthinnan under den borttagna elektroduppsättningen förbereddes för standard histologisk bearbetning 16 (vänster segment). En linjal med steg 0,5 mm visas på den nedre kanten av varje panel. Klicka här för att se en större version av denna siffra.
Figur 3. Epoxi ingjutning och slipning av klibbighet och näthinnevävnad. Fotografier av epoxi inbäddade och inriktade vävnadsprov, slipning, färgning och bild av klibbighet och retinal vävnad. (A) TAC k prov inbäddad i ett epoxiharts blocket. Använda formen ades provet orienterat så det längsgående planet är parallellt med botten av formen. (B) Den härdade epoxi blocket innehållande klibbigprovet. (C) Den epoxi blocket monterades i en slipprovhållare, redo för slipning . (D) Provet orienterade så avbildade delar av marken vävnaden innehåller retinala cellulära lager och längdaxel please. (E) Provet var marken med hjälp av kiselkarbid papper på en roterande slipmaskin. (F) Mark yta blocket färgades med toluidinblått för att identifiera de retinaskikt. (G) Blocket sköljdes i kranvatten för att avlägsna överflödig färg. (H) Den toluidin blåfärgade retinaskikt och klibb avbildades med användning av en hög effekt dissektion omfattning.
ad / 52.348 / 52348fig4highres.jpg "/>
Figur 4. Höga och låga effekt bilder av klibbighet och näthinnan. Vid olika punkter under slipprocessen bilderna togs med en dissekera omfattning, visar längdsnitt av halshornet (asterisk) tränger genom ögat och spännande sklera ("S" ), angränsande silikon (hash) och toluidinblått färgade och ofärgade näthinnan ("R"). Notera dessa är exempelbilder bara för att visa den nuvarande visualiseringsteknik, och är inte representativa för alla Epiretinal implantat eller please insättnings histologisvar. Mark resterna av ledningar platina är synliga i paneler AD ("W"). (A) Låg effekt, ofärgade bild av please tränga näthinnan och senhinnan. (B) Hög motordriven bild av näthinneavlossning och vikning i ofärgade näthinnan intill till silikonbäraren i bild A. (C) Låg effektbild i mitten av slagaxeln.
Discussion
Standard histologiska tekniker kan inte behandla hårdmetallimplantat på plats på grund av begränsningar i att skära dessa objekt med metall, glas eller ens diamantklingor. I vår följeslagare papper 16, visade vi att användningen av en modifierad hel-eye bindningsteknik kan minska arte retinal delaminering. I den aktuella manuskriptet, en etablerad slipning och polering teknik för att visualisera cochleaimplantat 21-23 på plats var modifierade för retinal proteser. En titan klibb, används för att säkra en elektroduppsättning till näthinnan, epiretinally, inbäddades i epoxi tillsammans med den omgivande ögonvävnad. Denna hartsblocket därefter orienterad på lämpligt sätt och successivt slipas / poleras för att avslöja den vävnadsmorfologi omedelbart intill metall klibb. Bilder av den polerade ytan hos blocket vid olika djup togs med en kraftfull dissektionsmikroskop. Denna teknik är användbar för: visualisering och evaluating vävnadssvaret intill den Epiretinal implantatet; att bedöma den kirurgiska trauma i samband med implantationen av implantatet; för att bestämma den biologiska reaktionen till hårdmetallkomponenterna; och för att mäta avståndet mellan implantatet och ytan av näthinnan.
Denna teknik kommer att vara användbart i framtida säkerhetsstudier för in situ visualisering av området intill en retinal klibb eller andra hårda (t.ex. metall) objekt i ögat. Detta har direkt tillämpning i bedömningen av prekliniska säkerhets av proteser uppsatt på näthinnan epiretinally. Det kan också vara användbart för att utvärdera vävnadsskada i retinala regioner i kontakt med implantaten belägna i sub-retinala läge.
Det finns flera sätt att kontrollera att tekniken har utförts på rätt sätt. Vid varje steg, bör näthinnan förbli fäst till de yttre skikten av ögat. Om det finns grov arte näthinneavlossning, kan detta Indicåt ett problem med fixering. När provet är inbäddad och omorienteras i det slutliga hartset blockera näthinnan ska vara nära ortogonala med slip ansikte av blocket; Detta kommer att minimera snedskärning. Det är nyttigt att kontrollera att antalet enskilda slipsteg (med känd stegstorlek) som krävs för att passera ett objekt (till exempel en retinal please) korrelerar således med dimensionerna av objektet.
Tekniken kan optimeras på flera sätt. Repor på ytan av epoxi blocket associerat med slipprocessen kan reduceras med progressivt finare polering. För föreliggande studie använde vi 800, 1000, 1200, 2400, och 4000 kiselkarbid papper. Diamant pastan skulle också kunna användas för att förbättra ytfinishen. En finare ytfinish ger högre bildkvalitet, men till priset av ytterligare polering tid. En annan kritisk fråga för att förbättra resultatet av denna teknik är valet och kvaliteten på optics och belysning som används för bildfångst. Andra grundläggande histologiska fläckar - särskilt Nissl fläckar, kan användas i stället för toluidinblått, men kan kräva ytterligare optimering. Vissa fläckar färgar hartset liksom vävnaden (t.ex. eosin), alltså en grund polish kan krävas efter färgning för att ta bort bakgrunds missfärgning. Specialiserade fläckar, fluorescerande färger och immunhistokemisk färgning inte försökt, men om ett mycket specifikt resultat önskas, kommer sannolikt att vara oöverkomliga den tid som krävs för att utföra dessa fläckar vid varje slipning nivå. Det kan emellertid vara möjligt att färga vävnaden som helhet före inbäddning steget (steg 3.4) 24.
Den största begränsningen med denna teknik är att när regionen av intresse har slipas bort, det kan inte hämtas, därför är det klokt att fånga många (möjligen redundanta) bilder på en mängd olika förstoringar i varje skede av slipning och polering. Det ärockså viktigt att använda små steg för varje slipning djupjustering. En annan begränsning hos denna teknik är att den optiska förstoringen och upplösning jämfört med vävnad monterad på ett objektglas och betraktades med en standard (transmission) ljusmikroskop. Vid tillämpning av prototyper och bedöma säkerheten hos en ny implantatanordning, är den patologisk utvärdering av primärt intresse. Denna teknik tillhandahåller en effektiv metod för att observation kliniskt relevant skada som associeras med en retinal klibb. Med övning, den totala tid som krävs för att samla grind, polska och fotografera ett givet prov (en gång inbäddade) är jämförbar med den tid det skulle ta att avsnittet en paraffinblock eller fryst avsnitt.
Det finns också potential för de nuvarande teknikerna som ska utvidgas till att ansökningarna inte omfattas av retinala implantat. Denna teknik lämpar sig för att utvärdera vävnaden intill en hård implantat, där implantat extraktion är inte feasible eller skulle skada gränssnittet. Till exempel, skulle denna teknik kunna utvidgas för att utvärdera implantat gjorda av metall (t.ex. platina, nitinol, etc.) som inte kan skäras med konventionella histologiska tekniker, såsom några djupa hjärnan eller perifera nervelektroder, kanyler för läkemedelstillförsel, vaskulära stentar eller ortopediska proteser.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Acetone | Chem-Supply | AA008 | Propanone BHD Medical grade |
| Epo-Tek 301 Epoxy | Epoxy Technology | Part A 1675-54-3 Part B 9046-10-0 | |
| Ethanol 70-75% v/v | Merck PTY LTD | 4.10261 | Alcohol |
| Ethanol | Merck PTY LTD | 90143 | Alcohol |
| Toluidine blue O | Sigma-Aldrich | T3260 | |
| Ethylenediamine Tetraacetic Acid | Sigma-Aldrich | ||
| TegraPol grinding/polishing machine | Struers | TegraPol-25 | |
| AccuStop specimen holder | Struers | Accustop | |
| Light microscope | Leica | MZ16 | |
| Objective lens | Leica | 2.0x Planapo Objective | |
| Digital Microscope Camera | Leica | DFC-420C | |
| Microscope Software | Leica | Application Suite v4.1.0 |
References
- Shepherd, R. K., Shivdasani, M. N., Nayagam, D. A., Williams, C. E., Blamey, P. J. Visual prostheses for the blind. Trends Biotechnol. 31, 562-571 (2013).
- Santos, A., et al. Preservation of the inner retina in retinitis pigmentosa. Arch Ophthalmol. 115, 511-515 (1997).
- Humayun, M. S., et al. Visual perception in a blind subject with a chronic microelectronic retinal prosthesis. Vision Res. 43, 2573-2581 (2003).
- Roessler, G., et al. Angiographic findings folowing tack fixation of a wireless epiretinal retina implant device in blind RP patients. Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 249, 1281-1286 (2011).
- Chow, A. Y., et al. The artificial silicon retina microchip for the treatment of vision loss from retinitis pigmentosa. Arch Ophthalmol. 122, 460-469 (2004).
- Zrenner, E., et al. Subretinal electronic chips allow blind patients to read letters and combine them to words. Proc Biol Sci. 278, 1489-1497 (2011).
- Fujikado, T., et al. Testing of semichronically implanted retinal prosthesis by suprachoroidal-transretinal stimulation in patients with retinitis pigmentosa. Invest Ophthalmol Vis Sci. 52, 4726-4733 (2011).
- Saunders, A. L., et al. Development of a surgical procedure for implantation of a prototype suprachoroidal retinal prosthesis. Clin Experiment Ophthalmol. , (2013).
- Lee, S. W., et al. Development of microelectrode arrays for artificial retinal implants using liquid crystal polymers. Invest Ophthalmol Vis Sci. 50, 5859-5866 (2009).
- Sakaguchi, H., et al. Transretinal electrical stimulation with a suprachoroidal multichannel electrode in rabbit eyes. Jpn J Ophthalmol. 48, 256-261 (2004).
- Majji, A. B., et al. Long-term histological and electrophysiological results of an inactive epiretinal electrode array implantation in dogs. Invest Ophthalmol Vis Sci. 40, 2073-2081 (1999).
- Walter, P., et al. Successful long-term implantation of electrically inactive epiretinal microelectrode arrays in rabbits. Retina. 19, 546-552 (1999).
- Ray, A., Chan, L., Thomas, B., Weiland, J. D. Effects of prolonged stimulation at the electrode-retina interface. Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. 1, 1285-1287 (2006).
- Colodetti, L., et al. Pathology of damaging electrical stimulation in the retina. Experimental eye research. 85, 23-33 (2007).
- Nayagam, D. A. X., et al. Chronic Electrical Stimulation with a Suprachoroidal Retinal Prosthesis: A Preclinical Safety and Efficacy Study. PLoS One. 9, e97182 (2014).
- Nayagam, D. A. X., et al. Techniques for Processing Eyes Implanted With a Retinal Prosthesis for Localized Histopathological Analysis. Journal of visualized experiments : JoVE. , e50411 (2013).
- Laube, T., et al. Development of surgical techniques for implantation of a wireless intraocular epiretinal retina implant in Gottingen minipigs. Graefe's Archive For Clinical And Experimental Ophthalmology = Albrecht von Graefes Archiv fur klinische und experimentelle Ophthalmologie. 250, 51-59 (2012).
- Gerding, H., et al. Successful long-term evaluation of intraocular titanium tacks for the mechanical stabilization of posterior segment ocular implants. Mat.-wiss. u. Werkstofftech. 32, 903-912 (2001).
- Seo, J. -M., et al. Silicon retinal tack for the epiretinal fixation of the polyimide electrode array. Current Applied Physics. 6, 649-653 (2006).
- Hadjinicolaou, A. E., et al. Electrical stimulation of retinal ganglion cells with diamond and the development of an all diamond retinal prosthesis. Biomaterials. 33, 5812-5820 (2012).
- Briggs, R. J., et al. Comparison of round window and cochleostomy approaches with a prototype hearing preservation electrode. Audiol Neurootol. 11, Suppl 1. 42-48 (2006).
- Shepherd, R., et al. An improved cochlear implant electrode array for use in experimental studies. Hear Res. 277, 20-27 (2011).
- Tykocinski, M., et al. Comparison of electrode position in the human cochlea using various perimodiolar electrode arrays. Am J Otol. 21, 205-211 (2000).
- Hardie, N. A., MacDonald, G., Rubel, E. W. A new method for imaging and 3D reconstruction of mammalian cochlea by fluorescent confocal microscopy. Brain Res. 1000, 200-210 (2004).
