Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove

Medicine

Een chirurgische ingreep voor resecting de muis Rib: Een Model Grootschalige Long Botherstel

doi: 10.3791/52375 Published: January 21, 2015
* These authors contributed equally

Abstract

Dit protocol introduceert onderzoekers om een ​​nieuw model voor grootschalige botherstel gebruik te maken van de muis rib. De procedure beschrijft het volgende: bereiding van het dier voor een operatie, het openen van de borstkas lichaamswand, waardoor de gewenste rib van de omringende intercostale spieren, uitsnijden van het gewenste gedeelte van de rib zonder induceren van een pneumothorax en sluiten van de insnijdingen. Vergeleken met de botten van de appendicular skelet, de ribben zijn zeer toegankelijk. Bovendien, geen interne of externe fixator is noodzakelijk omdat de aangrenzende ribben zorgen voor een natuurlijke fixatie. De operatie gebruikt commercieel beschikbare voorraden, is eenvoudig te leren en goed verdragen door het dier. De werkwijze kan met of zonder de omringende periosteum worden uitgevoerd, en derhalve de bijdrage van het periost te herstellen kunnen worden beoordeeld. De resultaten geven aan dat als de periosteum wordt gehandhaafd, robuust herstel optreedt in 1-2 maanden. We verwachten dat het gebruik van dit protocol zalonderzoek naar rib herstel te stimuleren en dat de resultaten van de ontwikkeling van nieuwe manieren om botherstel op andere plaatsen in het lichaam te stimuleren zal vergemakkelijken.

Introduction

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Slopende skelet verwondingen, chronische artrose, en de ernstige problemen in verband met reconstructieve chirurgie invloed van de economische productiviteit, familie welzijn en kwaliteit van leven. Terwijl scheurtjes en letsels kan redelijk goed genezen, mensen niet kunnen herstellen grote gebreken en moeten daarom vertrouwen op reconstructieve procedures tot de structuur en functie te herstellen. Reconstructie kan allogene of heterogeneic enten, morcellized bot, geïmplanteerd steigers, of distractieosteogenese betrekken. Helaas, niet alleen is er blijvende morbiditeit factoren in verband met deze behandelingen maar de oorspronkelijke sterkte van het gerepareerde bot zelden bereikt. Zo worden nieuwe klinische benaderingen nodig.

One-way om innovatieve methoden om segmentale defecten ontwikkelen voor de behandeling is om situaties waarin grootschalige reparatie van nature voorkomt bestuderen. Amfibieën beroemde kan skeletelementen regenereren, terwijl zoogdieren beperkt in Th worden beschouwdis het vermogen. Aangezien het begin van de 20e eeuw, enkele gevallen van regeneratie in de menselijke rib gepubliceerd suggereren dat mensen niet worden beperkt 1-4. Momenteel wordt dit verschijnsel is bekend door plastisch chirurgen die rib materiaal voor kaak, gezicht en oor reconstructie, maar is niet breder gesteld 5. Om deze reparatie in meer detail te onderzoeken, hebben we een chirurgische model met de muis ontwikkeld. Met behulp van dit protocol, kunnen onderzoekers de aangeboren factoren te identificeren en deze informatie gebruiken om het skelet genezing in andere locaties te vergemakkelijken.

Er zijn vele voordelen aan het gebruik van de ribben als een model voor de studie skelet reparatie. Ten eerste, de omliggende ribben natuurlijke fixator (vergeleken met resectie van de femur 6,7). Dit vermindert de morbiditeit risico van interne en externe fixators en vereenvoudigt de chirurgische ingreep. Ten tweede, de dunne gespierde lagen van de borst wall zorgen voor een gemakkelijke toegang en een uitstekende zichtbaarheid die de test te vergelijken met het gemak van calvarial resecties 8 te maken. Ten derde, in tegenstelling tot de calvaria welke vorm van intramembraneuze ossificatie de ribben van endochondrale ossificatie en groeien in lengte via verlenging bij kweekplaten gelegen aan weerszijden van een centrale diafyse. Daarom kan de reparatie van de ribben meer te vergelijken met de reparatie van de lange botten van de appendiculair skelet zijn. Verder hebben we gevonden dat in vergelijking met het dijbeen, het periosteum van de rib dikker en kan gemakkelijker worden gemanipuleerd. Aldus kunnen onderzoekers die willen botherstel te testen ten behoeve van de studie periosteum of testen celtherapie, farmacologische agentia, en / of weefsel scaffolds vindt chirurgische model nuttig. Kortom, dit rib resectie model biedt een kader waarbinnen de natuurlijke grootschalige botherstel studeren bij zoogdieren als geen dergelijk model in algemeen gebruik op dit moment bestaat.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

OPMERKING: Alle procedures zijn in overeenstemming met een dier protocol door de Institutional Animal Care en gebruik Comite (IACUC) aan de Universiteit van Zuid-Californië goedgekeurd.

1. Voorbereiding voor Heelkunde

  1. Lay-out van de noodzakelijke chirurgische instrumenten en benodigdheden (gesteriliseerd, artikelen 1-18 in Materials lijst) en regelen een dissectiemicroscoop en een glasvezel trans-hulplicht in een kap of op een afzuigtafel.
  2. Plaats een seksueel volwassen muis (20 - 30 g, 1-3 maanden oud) in een inductie kamer met 4% isofluraan anesthesie.
  3. Bevestig anesthesie met een poot en / of staartknijptest.
  4. Breng zalf ogen van de muis om droge ogen tijdens de operatie te voorkomen.
  5. Beweeg de muis om de microscoop podium. Plaats de muis in de neuskegel van het onderhoud slang en positioneren lateraal. Geef een opwarming zak grenzend aan het dier te helpen handhaven lichaamstemperatuur.
    NIETE:. Positie van de muis is afhankelijk van persoonlijke voorkeur en / of de handigheid van de chirurg, ofwel links of rechts is prima.
  6. Pas isofluraan tot 2-3% voor onderhoud, en let op de ademhaling.
  7. Injecteer buprenorfine (0,05 mg / kg) subcutaan (zijdelingse flank van de poot) voor postoperatieve pijn met een 25 G naald. Het been kan trillen wat een normale reactie.

2. openingssnede

  1. Detecteren de gewenste rib door palpatie, en duidelijk het gebied van haar met een scheerapparaat.
    OPMERKING: Ribs 8-10 aanbevolen omdat ribben 1-7 dichter bij de longen en 11-13 zijn aanzienlijk korter. Het tellen van de ribben moet beginnen met de meest rostrale rib als nummer 1.
  2. Bereid de met afwisselende povidonjood en isopropanol (70%) zwabberen (3x wordt vaak aanbevolen door toepassing dierlijke protocollen).
  3. Snijd een 2 cm incisie door de huid, direct boven en parallel aan de gewenste rib met middelgrote microchirurgie schaar. Incise door de onderliggende spieren en vet lagen.
  4. Plaats alle 3 lagen (huid, spier, vet) in een oprolmechanisme aan het operatiegebied bloot, terwijl het minimaliseren van de incisie.

3. wegsnijden van de Rib

  1. Dwars door de intercostale spieren bovenop de gewenste gedeelte van rib met een 5,0 mm scalpel. Plaats deze incisie ongeveer 5 mm proximaal van de chondrocostale gewricht aangezien dit is waar de rib niet zo sterk gebogen. Haal voorzichtig de spier van het bot met fijne tip pincet.
  2. Een resectie maken met behoud van de periost in het dier, snijd het periosteum langs de lengte van de rib met een 5,0 mm scalpel. Haal voorzichtig het periost van het onderliggende bot zijdelings met fijne tip pincet. Behoedzaam, als periost is zeer delicaat en een gelatineachtige consistentie.
  3. Vervolgens maakt een dwarsdoorsnede door het bot aan één uiteinde met fijne micro-schaar. Indien nodig, meet de resectie meteen dradenkruis in de microscoop of een soort liniaal meter. Dan til het bot uit het beenvlies en snijd de andere kant.
    LET OP: Ga voorzichtig te werk. Dit is de meest delicate stap, zo omhoog te trekken zonder het uitknippen van de rib onder de pleura membraan scheuren en leiden tot een pneumothorax. Als de pleurale membraan gescheurd deze gemakkelijk duidelijk zal zijn als het inwendige van de borstholte zichtbaar wordt.
  4. Als bloeden optreedt als gevolg van het snijden het bot passen druk aan het afgesneden uiteinde met een wattenstaafje gedurende 4-5 seconden om het bloeden te stoppen.
    Opmerking: In het zeldzame geval dat bloeden blijft, kan het nodig zijn om te stoppen en inslapen het dier aanzienlijk bloedverlies recovery beschadigen (zonder vloeistof substitutie, de maximale hoeveelheid bloed die veilig kan verloren 10% van het totale bloedvolume of 7,7 -. 8 gl / g voor 25 g muis, komt dit overeen met ongeveer 180-200 pl 9).
  5. Plaats onmiddellijk de verwijderde rib in4% PFA voor toekomstige analyse.
    OPMERKING: Als de resectie van zowel het bot en het periost moet worden uitgevoerd, laat de periost incisie en scheiding (stap 3.2). Aangezien het periost is zeer strak gehecht aan de pleura membraan voorzichtigheid te betrachten, plagen de rib uit de buurt van de pleura membraan met een tang om scheuren te voorkomen.

4. Het sluiten van de incisie

  1. Hecht de intercostale spieren over de bovenkant van de overblijvende periosteale huls met 9-0 hechtingen (2 hechtingen zijn meestal voldoende). Plaats de hechtingen direct boven de afgesneden einden van de rib, om als indicatoren voor chirurgie locatie.
  2. Verwijder het oprolmechanisme. Hechten de bovenliggende spieren en vet met 9-0 hechtingen (3-4 hechtingen zijn meestal voldoende). Bij muizen met een bijzonder dikke lagen spier- en / of vet, hechtdraad elke laag afzonderlijk (bijvoorbeeld 1 laag hechtingen voor de spierlaag en 1 laag van hechtingen voor de vetlaag).
  3. Sluitenhuid met 7-0 hechtingen (4-5 hechtingen zijn meestal voldoende).
  4. Bevestig de incisie met hechtdraad lijm, knijpen de randen samen met grote tang.
  5. Langzaam afkicken van de muis af isofluraan door eerst aan te passen aan 1% voor enkele minuten en dan uit te schakelen.
  6. Plaats de muis onder een warmtelamp en verlaten totdat het bewustzijn wordt herwonnen, 5-10 min. Na het bewustzijn wordt herwonnen en gedurende de genezing periode, moet de muis te bewegen en ambulate normaal en vertonen geen tekenen van nood.

5. Herstel en Analyse

  1. Zorg voor postoperatieve pijnbestrijding inclusief de toediening van buprenorfine in een orale gelatine formulier op 0,5 mg / kg om de 12 uur gedurende 48 uur. Orale toediening niet nodig beteugeling van het dier dat pijn zou kunnen veroorzaken aan de thoracale regio.
  2. Houd de muis in een kooi met vrije toegang tot voedsel en water tijdens de genezing periode. Na de incisie droog is, vrouwelijke dieren kan mede worden ondergebracht, terwijl de mannelijkes moet geïsoleerd blijven om gevechten te voorkomen.
  3. Na de genezing periode, volgt de goedgekeurde procedure voor euthanasie. Verwijder de ribbenkast voor bevestiging en analyse.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Dieren typisch snel te herstellen van deze procedure, de incisie geneest goed, en de dieren vertonen normaal gedrag. De procedure maakt gebruik van commercieel beschikbare voorraden en na praktijk kan worden voltooid in minder dan 1 uur. Alvorens deze procedure experimentele data genereren, is het belangrijk om de resectie te analyseren dag 0 tijdstip te bepalen of er grote botfragmenten in het resectie gebied zijn achtergebleven. Een manier om de juiste procedure te beoordelen is om de dieren door de X-ray of microCT beeldvorming postoperatief te beoordelen, hoewel dit meestal speciale straling veiligheid goedkeuringen vereist. In plaats daarvan kan een eenvoudige evaluatie voltooid door het uitvoeren van een skelet kleuring preparaat zoals geïllustreerd in figuur 1A. Het gaat om het verzamelen van de ribbenkast, de vaststelling van het in EtOH, en kleuring met alizarinerood behulp van een standaard protocol 11. Het kan nuttig zijn om de kaliumhydroxide (gebruikt om weg te verteren de zachte weefsels) zo tha weglatent het monster nog achteraf worden gebruikt voor histologische analyse indien gewenst. Het monster kan nog worden gevisualiseerd zonder kaliumhydroxide stappen clearing in 80% glycerol omdat de bovenliggende lichaamswand spierlaag dun. Of als alternatief, kunnen deze spieren verwijderd handmatig vóór fixatie / kleuring zoals hier getoond (Figuur 1A).

Het gedeelte van bot verwijderd kan worden geanalyseerd. Als het doel was de periosteum van het dier te houden, moet het been gedeelte een glad oppervlak zoals gevisualiseerd door lichtmicroscopie en histologische analyse (Figuur 1B, B '). Een bot gedeelte verwijderd met het periost moet een duidelijk haveloze oppervlak en bij histologisch onderzoek hebben hebben een intacte bovenliggende periostale laag, die de kenmerken van een dichte onregelmatig bindweefsel (figuur 1C, C ') heeft.

Afhankelijk van het doel van het experiment, kan genezingbeoordeeld op verschillende tijdstippen. Waarnemingen geven aan dat 3 mm resecties waarbij het periost wordt vastgehouden in het dier gewoonlijk volledig genezen binnen 1-2 maanden. Reparatie vindt plaats via de vorming van een zachte en harde callus, en hermodellering. Een voorbeeld van volledige reparatie bij 2 maanden wordt getoond in figuur 2A, A '; reparatie kan worden beoordeeld door skelet bereiding (figuur 2A) en histologische analyse (Figuur 2A). Als het periost ook wordt verwijderd, wordt de resectie gat niet ingevuld. Figuur 2B toont een voorbeeld waarin sommige reparatie opgetreden aan één einde, is het echter typischer om stompe uiteinden te observeren. Bij histologisch onderzoek, wordt de resectie zone gevuld met vet, granulatieweefsel, en spier (figuur 2B).

Figuur 1
(A) Illustratie van een rib resectie (4,5 mm) onmiddellijk na de operatie verzameld. Geen botfragmenten zijn achtergelaten. Monster werd gekleurd met alizarinerood (met behulp van een standaard protocol, maar het weglaten van alle maatregelen met kaliumhydroxide om het monster voor toekomstige histologische analyse te bewaren) en ontruimd in 80% glycerol. Pijlpunten geven de locatie van de afgesneden einden. (B) verwijderd ribbe van ribbenkast weergegeven in (A) zonder het periost bevestigd. (B) histologische doorsnede van minimaal periosteum aan het bot (gele pijlpunten, links) en geen periosteum rechts (doorsnede, gekleurd met hematoxyline en eosine). De gele sterretje geeft het beenmerg holte. Muis ribben niet over omvangrijke trabeculae. (C) verwijderd rib gedeelte toont het periost er nog aan. (C ') Histologische sectie shovleugel van de intacte periost bovenop de aangegeven door een gele beugel (langsdoorsnede, gekleurd met hematoxyline en eosine) bot. Een gele sterretje geeft het beenmerg holte. Schaalbalken: A, B, C = 1 mm; B ', C' = 100 micrometer. Klik hier om een grotere versie van deze afbeelding te bekijken.

Figuur 2
Figuur 2. Rib reparatie na de genezing in resecties met en zonder het periost. (A) Skeletal preparaat volgende ~ 2 maanden van genezing na resectie, behouden de intacte periosteum in de muis (bereid zoals in figuur 1A). Volledig herstel van de regio kan worden waargenomen. (A) Histologische deel B toont een herstel van het lamellair bot wanden en debeenmerg holte (hematoxyline en eosine). (B) Skeletal voorbereiding (alizarinerood) volgende ~ 3 maanden van genezing na het verwijderen van zowel een rib gedeelte en de omliggende periost. Er was slechts een minimale herstel aan het afgesneden uiteinde getoond aan de linkerzijde van het paneel. Een gele pijlpunt wijst naar de chondrocostale gewricht. (B) Histologische deel B tonen granulatieweefsel, vet- en spiercellen invullen van de plaats van resectie (hematoxyline en eosine). Schaalbalken: A, B = 1 mm; B = 500 urn; C '= 200 micrometer. Klik hier om een grotere versie van deze afbeelding te bekijken.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Als eerste het leren van dit protocol, het bepalen waar de eerste incisie te lokaliseren kan een uitdaging zijn. Echter, de praktijk op geëuthanaseerd muizen helpt de chirurg leren waar de eerste incisie te plaatsen en de gewenste rib te worden gereseceerd bloot. Werken aan kadavers verbetert ook de fijne motoriek om de rib gedeelte te verwijderen met of zonder het periost. Bovendien zou iemand nieuw deze procedure te manipuleren fijne gereedschappen en dun hechtingen moeilijk. Terwijl koppelverkoop af, teveel trekken aan de hechtdraad kan het weefsel scheuren. Zo zouden sommige praktijk hechten ook op lijken nuttig zijn. Tenslotte indien de chirurg nieuwe chirurgische procedures knaagdieren, kan het nuttig zijn om iemand te helpen bij de controle en aanpassing van de anesthesie tijdens de eerste operaties.

De meest kritische fase van dit protocol is het uitsnijden van het bot zonder het induceren van een pneumothorax (een abnormale collectie van lucht in de pleura space), die moeilijk te behandelen zijn muis de pleura membraan te dun chirurgisch sluiten. De spierlaag en pariëtale pleura inferieur aan de rib is erg dun en gevoelig; vandaar, zijn nauwkeurige bewegingen vereist om een ​​lek in de pleura membraan dat onder de resectie gebied ligt te voorkomen. Dit gebeurt meestal in stappen 3.1 en 3.3. In stap 3.1 (scheiden van het bot van de omringende intercostale spieren), zal de scherpe scalpel en pincet moeilijk door de pleurale laag als het punt niet oppervlakkig wordt gehouden. In stap 3.3 (uitsnijden van het bot met fijne micro-schaar) kan de plaatsing van het schaarmechanisme onder het bot kan de treksterkte van de pleurale membraan of de handeling van het breken van het bot overwinnen het einde van het botfragment veroorzaken het perforeren pleurale membraan. We hebben gevonden dat het gebruik van fijn microscharen die een gebogen tip gunstig. Bovendien, zoals hierboven, kan ook nuttig om eerst praktijk protocol muizen geëuthanaseerd. Ultidelijk, maar we hebben gemerkt dat dit probleem eenvoudig kan worden overwonnen met geduld en oefening.

Hoewel de rib is een endochondriale bot, kunnen er een aantal potentieel belangrijke verschillen tussen de rib skelet en de lange botten van de appendiculair skelet. Vanuit een embryologische perspectief wordt de rib skelet afgeleid van een andere mesodermaal compartiment (somiet) dan de appendiculair skelet (laterale plaat mesoderm) 12. Zo is het mogelijk dat er eigenschappen die uniek zijn voor de rib skelet progenitoren dat dit verschil in ontstaansgeschiedenis weerspiegelen. Daarom is in de lange termijn, kan het nodig zijn om te bepalen wat deze unieke eigenschappen zijn en dan gebruiken deze informatie om de voorlopers in de ledematen skelet aan te moedigen om de reparatie te bemiddelen met de zelfde faciliteit zoals te zien in de rib.

Een ander aspect dat een rol speelt betreft de locatie van de ribben ten opzichte van de ademhalingswegen. Alhoewel de flankerende ribben voldoende stabiliteit rond de resectie zodanig dat er geen externe fixator nodig is, de reparatie zone is onder de constante beweging en de stam van de long inflatie / deflatie. Men heeft erkend dat gedurende botherstel, te veel beweging remmend genezing terwijl enige beweging blijkt belangrijk voor het genereren van kraakbeen tussenproduct 13,14 te zijn. Op dit moment is het niet duidelijk, maar het is mogelijk dat de vorming van kraakbeen tussenproduct een essentiële stap voor doeltreffende grootschalige reparatie zijn. Zo zou beweging van de ribben tijdens de ademhaling reparatie, de mogelijkheid (wanneer de periosteum achterblijft in het dier). Aangezien beweging bijzonder belang hierbij kan ontwikkelen een methode om een ​​fixator plaatsen bruikbaar voor het bestuderen van de biomechanische invloeden op reparatie in de toekomst zou kunnen zijn.

Door het uitvoeren van een rib reparatie test bij de muis, kan men gebruik maken van krachtige genetische hulpmiddelen die ont geweestkeld. Bijvoorbeeld, transgene merktekens, de oorsprong van de reparatie cellen kan worden geëvalueerd. Transgene verslaggevers voor botvorming (interessante nieuwe instrumenten in de ontwikkeling van Gazit et al. 15,16), de endochondrale proces, en het uitlezen van belangrijke signaaltransductie kan worden benut 12,17. Daarnaast kunnen muizen met verlies-van-functie allelen worden om de signaalwegen moeten worden onderzocht. Momenteel geen andere gewervelde modelorganisme maakt zo'n grote verscheidenheid van genetische technieken om de fundamentele onderliggende biologie van dit proces probe.

Bovendien, terwijl andere uitstekende modellen voor skeletale reparatie zijn ontwikkeld en zijn in gebruik voor enige tijd, een context te testen steigers, samenstellingen, celtherapie gezien de kenmerken van rib reparatie kan gunstig zijn. De oprichting van een standaard rib reparatie model een aanvulling op bestaande modellen als de ribben niet nodig zijn om het lichaam en de reparatie te ondersteunengebeurt zonder stabilisatie. Bovendien kan de bijdrage van het periost te herstellen gemakkelijk worden beoordeeld. Bovendien waren omdat de rib zowel kraakbeen en bot segmenten vergelijkingen tussen de genezing van deze verschillende, maar verwante weefseltypen kan een gemeenschappelijk kenmerk van doeltreffende reparatie 18 identificeren.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Medium sized micro-dissection scissors (Vannas-Tübingen Spring Scissors 5 mm) Fine Science Tools 15003-08
Fine micro-dissection scissors (Vannas Spring Scissors - 2mm Cutting Edge) Fine Science Tools 15000-04 curved tip is beneficial
Micro-scalpel 5.0 mm Fine Science Tools 10315-12 other fine scalpels can be substituted
Dumont 55 forceps Fine Science Tools 11295-51
Retractor  Fine Science Tools 17004-05 adjustability is convenient
Micro-needle holders Fine Science Tools 12060-01
9.0 nylon sutures (Ethilon), taper point best Ethicon 2819G or similar taper point best but reverse cutting is also good
7.0 prolene sutures (Prolene) Ethicon 8700H or similar 6-0 can be used too, needle point can vary
Large forceps (Adson Forceps) Fine Science Tools 11006-12 other brands are fine
Lubricant Eye Ointment (Akwa Tears) Akorn 17478-062-35
Suture glue (GLUture Topical Tissue Adhesive) Abbot 32046-01 has excellent working time
Shaver Wahl 9918-6171 or similar
Clamp lamp Zoo Med LF-5
Infrared Bulb, 75W Zoo Med RS-75
RC2 Rodent Anesthesia System VetEquip  922100
IsoFlo (Isoflurane) Abbot 05260-05
Buprenorphine (Buprenex) Reckitt Benckiser 12496-0757-1
Betadine Purdue Frederick 67618015017
Flavored Gelatin, raspberry Jell-O B000E1FYL0 made up firm, to the consistency of 'jigglers'

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Philip, S. J., Kumar, R. J., Menon, K. V. Morphological study of rib regeneration following costectomy in adolescent idiopathic scoliosis. Eur Spine J. 14, (8), 772-776 (2005).
  2. Munro, I. R., Guyuron, B. Split-rib cranioplasty. Ann Plast Surg. 7, (5), 341-346 (1981).
  3. Taggard, D. A., Menezes, A. H. Successful use of rib grafts for cranioplasty in children. Pediatric neurosurgery. 34, (3), 149-155 (2001).
  4. Head, J. R. Prevention of Regeneration fo the Ribs: A problem in thoracic surgery. Archives of Surgery. 14, (6), 1215-1221 (1927).
  5. Kawanabe, Y., Nagata, S. A new method of costal cartilage harvest for total auricular reconstruction: part I. Avoidance and prevention of intraoperative and postoperative complications and problems. Plastic and reconstructive surgery. 117, (6), 2011-2018 (2006).
  6. Cheung, K. M., et al. An externally fixed femoral fracture model for mice. Journal of orthopaedic research : official publication of the Orthopaedic Research Society. 21, (4), 685-690 (2003).
  7. Matthys, R., Perren, S. M. Internal fixator for use in the mouse. Injury. 40, Suppl 4. S103-S109 (2009).
  8. Cooper, G. M., et al. Testing the critical size in calvarial bone defects: revisiting the concept of a critical-size defect. Plastic and reconstructive surgery. 125, (6), 1685-1692 (2010).
  9. Ask the Vet. JAX NOTES. 499, Available from: http://jaxmice.jax.org/jaxnotes/archive/499c.html (2005).
  10. Flecknell, P. A., Roughan, J. V., Stewart, R. Use of oral buprenorphine ('buprenorphine jello') for postoperative analgesia in rats--a clinical trial. Laboratory animals. 33, (2), 169-174 (1999).
  11. Rigueur, D., Lyons, K. M. Whole-mount skeletal staining. Methods in molecular biology. 1130, 113-121 (2014).
  12. Evans, D. J. Contribution of somitic cells to the avian ribs. Developmental biology. 256, (1), 114-126 (2003).
  13. Colnot, C., Thompson, Z., Miclau, T., Werb, Z., Helms, J. A. Altered fracture repair in the absence of MMP9. Development. 130, (17), 4123-4133 (2003).
  14. Lu, C., et al. Cellular basis for age-related changes in fracture repair. Journal of orthopaedic research : official publication of the Orthopaedic Research Society. 23, (6), 1300-1307 (2005).
  15. Zilberman, Y., Gafni, Y., Pelled, G., Gazit, Z., Gazit, D. Bioluminescent imaging in bone. Methods in molecular biology. 455, 261-272 (2008).
  16. Pelled, G., Gazit, D. Imaging using osteocalcin-luciferase. Journal of musculoskeletal. 4, (4), 362-363 (2004).
  17. Elefteriou, F., Yang, X. Genetic mouse models for bone studies--strengths and limitations. Bone. 49, (6), 1242-1254 (2011).
  18. Srour, M. K., et al. Natural large-scale regeneration of rib cartilage in a mouse. J. Bone Miner. (2014).
Een chirurgische ingreep voor resecting de muis Rib: Een Model Grootschalige Long Botherstel
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Tripuraneni, N., Srour, M. K., Funnell, J. W., Thein, T. Z. T., Mariani, F. V. A Surgical Procedure for Resecting the Mouse Rib: A Model for Large-Scale Long Bone Repair. J. Vis. Exp. (95), e52375, doi:10.3791/52375 (2015).More

Tripuraneni, N., Srour, M. K., Funnell, J. W., Thein, T. Z. T., Mariani, F. V. A Surgical Procedure for Resecting the Mouse Rib: A Model for Large-Scale Long Bone Repair. J. Vis. Exp. (95), e52375, doi:10.3791/52375 (2015).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter