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Medicine

기존의 폐쇄 가슴 기술에 의해 쥐의 심실 세동의 모델 및 소생

Published: April 26, 2015 doi: 10.3791/52413

Introduction

미국 (1)에서 36 만에 가까운 개인보다 전 세계적으로 2 많은 사람들이 갑자기 심장 마비의 에피소드 매년 겪고 있습니다. 해당 심장 활동을 다시 설정해야하지만, 중요한 장기에 그 손상 방지를 최소화하거나 취소 할 수 없습니다 필요 삶을 복원하려고 시도합니다. 현재 심폐 소생 기술은 약 30 %의 초기의 호흡 속도를 수득; 그러나 퇴원 생존율은 5 % 1입니다. 심근 기능 장애, 신경 장애, 전신 염증, 병발 질환, 또는 순환의 초기 수익률에도 불구하고 사망 환자의 큰 비율에 대한 사후 소생 계정을 발생 이들의 조합. 따라서, 기본적인 병태 생리 및 신규 한 접근법의 소생 큰 이해 절실히 초기 소생 및 장기의 기능은 그대로 후속 생존율을 증가시킬 필요가있다.

동물 모드심장 마비의 LS는 심장 정지와 소생의 병태 생리에 대한 통찰력을 제공하고 개념화하고 인간 3에서 테스트하기 전에 새로운 개입을 테스트하기 위해 실용적인 수단을 제공함으로써 새로운 인공 호흡 치료법의 개발에 중요한 역할을한다. 닫힌 가슴 심폐 소생술의 쥐 모델 (CPR)는 여기에 설명 중요한 역할을하고있다. 늦은 교수 맥스 해리 웨일 MD, 박사의 실험실에서 4와 그녀의 협력자 - 당시 연구원 - 모델은 아이린 폰 란타에 의해 1988 년에 개발되었다 보건 과학 대학 (2004 년 의학 및 과학의 로잘린 프랭클린 대학 이름을 변경) 및 광범위 주로 교수 웨일과 연수생의 동료에 의해 소생의 분야에서 이용되고있다.

이 모델은 기존의 CPR 기술에 의해 시도 소생술과 갑작스러운 심장 마비의 에피소드를 시뮬레이션하고, 따라서 입회를 포함부수적으로 산소가 풍부한 가스를 양압 환기를 제공하면서 공압 구동 피스톤 장치에 의해 우심실 내막 닫힌 가슴 CPR의 규정에 전류를 제공함으로써 심실 세동 (VF)의 이온. VF의 종료는 전기 충격의 흉부 전달하여 수행됩니다. 래트 모델은 작은 동물에서 개발 큰 동물 (예를 들면, 돼지) 및 모델 개발 모델 간의 균형을 (예를 들어, 마우스) 강력한에 액세스 할 수있는, 잘 표준화 재현하고 효율적인 방식으로 새로운 연구 개념의 탐사를 허용 관련 측정의 재고. 이 모델은하지만 더 큰 번역 미치는 영향, 더 비용이 많이 드는 큰 동물 모델에서 연구를 수행하기 전에 혼란 변수의 영향을 새로운 개념을 탐구하고 조사하는 연구의 초기 단계에 특히 유용하다.

모든 피어 리뷰 기사로보고이 지났지 검색가 처음 1988 4 년에 출판 된 이후 심장 마비의 메커니즘과 폐쇄 가슴 소생의 형태로 VF를 가진 imilar 쥐 모델은 모델을 사용하여 69 추가 원래 연구를 한 것으로 밝혀졌습니다. 연구 분야는 인공 호흡 5-17의 병태 생리 학적 측면을 포함, 결과 18-30 영향을 미치는 요인, 혈압 상승 제 31-43, 완충제를 검사 약리 개입의 역할 (44), 수축 촉진제 (45), 심근이나 뇌 보호 46-70을 목표로 에이전트, 또한 중간 엽 줄기 세포를 71 ~ 73의 효과.

이 문서에서 설명하는 모델과 프로토콜은 현재 소생술 연구소에서 사용되고있다. 그러나, 개별 연구자와 연구 목적에 사용 가능한 기능에 기초하여 상기 모델을 "사용자 정의"를 경험할 수있는 기회가있다.

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Protocol

참고 :이 프로토콜은 의학 및 과학의 로잘린 프랭클린 대학에서 기관 동물 케어 및 사용위원회에 의해 승인되었다. 모든 절차는 국가 연구위원회에 의해 출판 된 실험 동물의 관리에 대한 가이드에 따라 및 사용에 있었다.

1. 실험 설정 및 마취

  1. 다양한 신호의 교정을 수행하여 데이터 수집 시스템 (압력, 온도, 피스톤 변위 심전도 [ECG], 호 기말 이산화탄소 분압 등)를 사용하여 캡처된다.
  2. 실험이 생존 수술을 포함하는 경우 (카테터를위한 장비 및 산화 에틸렌 살균을위한 오토 클레이브에서 예) 악기와 카테터를 소독하고 gowned과 마스크, 모자를 쓰고, 운영 및 멸균 장갑. 면도 수술 악기 카테터하지만 비 생존 수술 용 멸균 할 필요가 없다.
  3. 준비 카테터는 후술과 인터넷에 도시0.45 kg 0.55 kg 사이의 무게 쥐에 대한 gure 1.
    1. 마크 2 층 T 형 열전대 카테터, 크기가 0.6 mm 외경 (2 층), 흉부 대동맥에 발전을위한 영구 마커 팁, 3, 5, 8cm에서. 온도와 심 박출량을 측정하기 위해이 카테터를 사용합니다.
    2. 컷 폴리에틸렌 튜브, 크기 0.46 mm ID와 0.91 mm 외경 (PE25) 길이 ≈ 25cm, 우심방에 발전을위한 흉부 대동맥과 다른에 발전을위한 하나.
    3. 각각 PE25 카테터 팁의 단부를 절단하는 90 ° 각도로 용기에 삽입한다.
      참고 : PE 튜브를 사용하는 경우 45 ° 각도로 경 사진 팁 혈관 천공의 원인이 될 수 있습니다. 그러나, 경 사진 선단 그 선명도를 감소시키기 사포 다운 트리밍 할 수있다.
    4. 각 PE25 카테터의 기단부에 26 게이지 여성 루어 스텁 어댑터를 연결합니다.
    5. 3, 5, 8 cm이고, 3, 5, 8, 10에서 우심방 카테터 선단으로부터 12cm에서 대동맥 카테터를 표시한다. AO를 사용하여RTIC 카테터 대동맥 압력과 혈액 샘플링을 측정합니다. 우심방 압력을 측정 할 수있는 권한 심방 카테터를 사용합니다.
    6. 3 방향 스톱 콕이 부착 압력 변환기에 각각 루어 스텁 어댑터를 연결.
    7. 우심방으로 발전을위한 45 ° 각도로, 3 층 폴리 우레탄 소아 정맥 카테터, 크기 0.6 mm ID와 1.0 mm OD (3 층)의 끝을 잘라.
    8. 끝에서 4cm의 3 층 외부 경정맥 카테터를 표시합니다. 약물 전달과 혈액 샘플링을 위해 사용할 수있는 다음 옵션 VF의 전기 유도 우심실에 가이드 와이어를 사전에이 카테터를 사용합니다. 카테터에 3 방향 꼭지를 연결합니다.
      참고 : 카테터가 진행되는 것과 카테터에 만든 마크는 외과 의사의지도를위한 것입니다. 카테터에 3cm의 표시는 대퇴 혈관 경고를 통해 흉부 지역을 향해 곡선으로 시작하는 선박으로 인한 잠재적 인 저항의 영역의 외과 의사를 고급. 8cm 마르대동맥 카테터 및 열전대 카테터에 KS는 끝이 하행 흉부 대동맥에 나타냅니다. 오른쪽 심방 카테터에 12cm 표시가 끝이 우심방에있는 것입니다. 카테터가 진행되는대로 중간 마크는 가이드입니다. 오른쪽 외부 경정맥 카테터에 4cm 표시는 끝이 우심방에있는 것입니다.
    9. 프라임 헤파린의 10 IU / ㎖를 포함 식염수 각 카테터 (자신의 개통을 보장하기 위해) 및 폐쇄 위치에 해당 마개를 켭니다.
    10. 무딘 팁을 만드는 길이 ≈ 8cm로, 1.6 mm의 OD (5 층) stylette에 장착 된 5 층 플루오르 에틸렌 프로필렌 정맥, 크기 1.1 mm ID와 컷. 동안 심장 소생술 후 양압 환기 카리나로부터 팁 ≈에게 2cm를 배치하는 기관으로 발전을위한이 캐뉼라를 사용합니다.
      참고 : 캐 뉼러의 금속 stylette는 기관으로 발전에 도움이 끝에서 145 ° 각도 ≈ 3cm에서 구부러 질 필요가있다.
  4. 수술 장비에 대한 쥐를 준비합니다.
    1. 펜 토바 비탈 나트륨의 복강 내 주사 (45 ㎎ / kg)에 의해 래트를 마취. 필요한 경우, 추가로 정맥 내 투여 (10 ㎎ / kg), 수술 적 단계의 마취를 유지하도록 (혈관 통로를 설정 한 후) 30 분 간격으로 제공한다.
      참고 : 대부분의 연구 남성 은퇴 개종 흰쥐를 사용 하였다.
    2. 전기 충격이 전달 될 수술 영역과 영역에서 헤어 클립; 이는 흉부의 지느러미 흉부 영역, 왼쪽과 오른쪽 사타구니, 목, 및 전방 표면을 포함한다.
    3. 진통제 부 프레 노르 핀 피하 0.02 ㎎ / ㎏ (1 ㎖ / ㎏)을 관리합니다.
    4. 전면 테이핑하여 수술 보드에 앙와위에서 쥐를 수정하고 중간 선에서 45 ° 각도로 뒷다리.
    5. 베타 딘 스​​크럽 스크럽 절개 지역은 70 % 에탄올을 3 회 하였다.
    6. 각막에 항균 안과 연고의 박막을 적용합니다.
    7. 직장 서미스터 ≈에게 직장에 4cm를 삽입하고 수술 보드에 서미스터를 고정합니다.
    8. 실험을하는 동안 가열 백열 램프를 이용하여 C 36.5 ° 및 37.5 ° C 사이의 코어 체온을 유지한다.
    9. 피하 우측 상지에 배치 ECG 바늘, 상지, 오른쪽 뒷다리를 왼쪽과 실험을하는 동안 심전도를 기록합니다.

2. 혈관 삽관

2.1) 하행 흉부 대동맥에 T 형 열전대 카테터를 전진에 대한 대퇴 동맥을 왼쪽

  1. 그 숲에 90 ° 각도로 왼쪽 서혜부에 2cm의 절개를합니다.
  2. 지혈제의 쌍을 사용하여 주변 결합 조직의 박리 (blunt dissection)에 의해 대퇴부 혈관과 신경을 노출.
  3. 곡선 마이크로 해부 집게를 사용하여 혈관 주위의 혈관 칼집을 노출.
    주 : 선박 또는 북동를 천공 피RVE.
  4. 대퇴 동맥, 정맥, 신경 아래 마이크로 해부 집게 여행 및 선박에 90 ° 각도로를 지원합니다. 모두 용기 및 지원하는 신경으로, 곡선 마이크로 해부 포셉 또 한 쌍을 사용하여 신경 및 혈관의 동맥의 분리를 시작합니다.
    참고 :이 분리되어있어 혈관과 신경 손상의 위험을 최소화하기 위해 선박 아래 병렬에서 수행됩니다.
  5. 지원 집게 위치를 조정; 신경을 해제 만 정맥과 동맥을 지원합니다.
  6. 동맥과 정맥 사이에 집게를 끼운 ≈ 1cm의 길이로 구분합니다.
  7. 부드럽게 지원 집게에서 고립 된 정맥을 해제, 만 동맥을 지원 남아있다.
  8. 두 실크 3-0 꼰 비 흡수성 합자 및 말단 위치 하나 떨어져 1cm ≈ 하나의 근위부를 삽입합니다.
  9. 동맥이 여전히 외과 의사의 매듭 & #을 사용하여 지원되는 동안 단단히 말초 합자를 조(160)는 2 개의 단일 노트 하였다. 느슨한 외과 의사의 매듭 근위 끈을 조입니다.
  10. 약 ¼ 그 단면적의 절삭 용기에 60 ° 각도로 원위 봉합사 근처 미세 해부 가위를 이용하여 용기에 작은 절개 부위를 만든다.
    참고 : 루멘에 도달 한 컷 신호에서 나오는 혈액의 작은 방울.
  11. 카테터의 매끄러운 삽입을 허용하도록 상기 용기 상에 헤파린 염수 드립.
    주 : 1 % 리도카인 용액을 1 ~ 2 방울은 또한 혈관 경련을 방지 할 수있다.
  12. 선단 사용자 지정 70 ° 각도로 구부러되었으며 사포 (즉, 도입부)를 사용하여 무딘 - - 부드럽게 혈관을 안정화 지혈제와 말초 합자를 당기면서 용기 구멍에 22 게이지 바늘을 삽입합니다.
  13. 제거, 루멘을 노출 부드럽게 도입기를 들어 올리고 도입부에서 T 형 열전대 카테터 가이드이는 카테터 팁이 삽입 된 후.
  14. 편안한 자세로 다른 손을 수용하는 카테터를 전진하면서 한 손으로 카테터를 잡습니다.
  15. 지원 집게를 닫고 카테터가 전진으로 원심으로 이동합니다.
    참고 : 어떤 저항이 카테터를 진행하는 동안 충족되면; 중지 철수와 다른 각도로 삽입합니다.
  16. 하행 흉부 대동맥의 끝 위치를 8cm 표시 될 때까지 카테터를 전진.
  17. 근위 합자를 체결하고 두 개의 추가 하나의 매듭을 추가하여 혈관에 카테터를 고정합니다.
    참고 : 카테터 및 부주의 변위 주위에 출혈을 막을 정도로 꽉 보안 노트; 재배치에 필요한 경우 아직 충분히 느슨한 앞뒤로 움직임을 활성화합니다.
  18. 집게와 지혈제 부드럽게를 제거합니다.

2.2) 우심방에 PE25 카테터를 전진에 대한 대퇴 정맥을 왼쪽

  1. 리프트 t그는 대퇴 동맥은 이미 조심스럽게 끈을 당겨와 인접 대퇴 정맥을 노출하여 T 형 열전대 카테터와 유관.
  2. 집게를 사용하여 정맥에서 여행과 정맥을 지탱하기를 엽니 다.
  3. 단계 2.1.18를 통해 2.1.8를 따라하지만 12cm의 표시로 (대신 T 형 열전대) PE25 카테터를 진행하는 것은 우심방 근처의 팁을 위치.
  4. 확인 혈액은 관내 장애물의 위치를​​ 확인하고 헤파린 식염수 0.2 ml로 카테터를 세척하기 위해 카테터를 통해 취소 될 수 있습니다.
  5. 하나의 외과 의사의 매듭 수술 절개를 닫습니다.

하행 흉부 대동맥에 PE25 카테터를 전진 2.3)을 마우스 오른쪽 대퇴 동맥

  1. 단계 2.1.18를 통해 2.1.1를 따라하지만 8cm 표시로 PE25 카테터를 진행하는 것은 하행 흉부 대동맥의 팁을 위치.
  2. 반복 2.2.4와 2.2.5 단계를 반복합니다.

2.우심방에 3 층 폴리 우레탄 소아 정맥 카테터를 전진을위한 4) 오른쪽 외부 경정맥

  1. 1.5 cm 긴 절개 목, 단지 갑상선 아래 끝 기관의 오른쪽에 1cm의 기본에서 시작합니다.
    참고 : 부상 또는 갑상선을 노출시키지 마십시오.
  2. 부드럽게 외부 경정맥을 노출 지혈제의 쌍을 사용하여 주변 결합 조직을 해부.
  3. 집게를 사용하여 정맥에서 여행과 정맥을 지탱하기를 엽니 다.
  4. 반복 정맥 카테터에 대한 2.1.18를 통해 2.1.8 단계,하지만 우심방에있는 그것의 끝 위치 4cm 표시로 3 층 카테터를 전진.
  5. 단계를 반복 2.2.4.
  6. 3 방향 스톱 콕이 카테터를 캡과 폐쇄 위치로 설정.

3. 기관 흡인 삽관

3.1) 기관 노출

  1. 지혈제를 사용하여 중간 선을 향해 이전에 수행 목 절개를 확장합니다.
  2. DISS 요법 기관을 노출하고 조직 확장기를 이용하여 드러내는 개최 cleidocephalic 근육의 sternohyoid, sternothyroid 및 유양 돌기 부분을 무딘 기술을 이용하여 지혈 겸자와.

3.2) 기관 내 삽관

  1. 기도를 스트레칭 혀를 빼냅니다. 5 층 카테터를 전진 (즉, 기관 캐뉼라)는 stylette에 장착. 끝이 위쪽을 가리키는 사전 상부기도, 성대, 기관지를 입력 추구와 함께 진행하는 동안 단단히 캐 뉼러를 개최합니다.
  2. 그것은 적절한 위치로 안내를 전진으로 기관 캐뉼라를 트랜스는-시각화.
  3. 정맥에서 stylette를 제거하고 캐 뉼러의 말단부에 적외선 CO 2 분석기 어댑터를 연결합니다.
  4. 특성 capnographic 파형을 인식하여 성공적으로 기관 삽관을 확인, 즉,기도 CO 2가 만료 동안 증가와 영감 동안 감소.
베이스 라인의 안정성 ove_title "> 4. 확인

  1. 수술 장비 및 다양한 카테터, 캐 뉼러의 연결을 완료하고, 심전도 데이터 수집 시스템에 해당 센서 및 신호 컨디셔너를 통해 리드, 혈액을 측정하여 심 박출량과 혈압 meaurements 및 대사 안정성 (권장)를 기반으로 혈역학 적 안정성을 확인 가스 및 젖산 수준.
    주 : 심 박출량 우심방에 실온에서 0.9 % NaCl을 200 μL 루스 주사 후에 열전대 통하여 하행 대동맥에 기록 thermodilution 곡선의 컴퓨터 분석에 의해 측정된다.
  2. 관심있는 다양한 매개 변수에 대한 특정 기준 참조 값을 정의합니다; 이는 쥐의 변형, 성별, 체중에 파견 다를 수 있습니다. 여기에 기술 된 쥐 모델을 사용하는 대표적인 실험에서 기준 및 사후 소생 참조 값은 표 1에 나열되어 있습니다.

5. 실험 프로토콜

심실 세동 5.1) 유도 (VF)

  1. 전류 (AC) 발전기 (0-12mA)를 교대로, 60 Hz에서의 음극에 연결된 쥐의 복부 벽에 바늘 피하에 삽입합니다. 내부 장기 실수로 부상을 방지하기 위해 복강에 피하 조직 이상으로 바늘을 진행하지 마십시오.
  2. precurved 0.38 mm 외경의 한쪽 끝과 교류 발전기의 양극에 40cm (와이어 커넥터를 통해) 긴 가이드 와이어를 연결합니다. 극성이 반전되지 않았는지 확인합니다; 그렇지 않으면 VF가 유발되지 않을 수 있습니다.
  3. 오른쪽 외부 경정맥에 삽입 된 3 층 폴리 우레탄 카테터의 3 방향 꼭지를 제거하고 가이드 와이어 ECG 및 대동맥 압력을 모니터링하면서 우심실를 입력하고자하는 약 7cm의 부드러운 팁을 진행합니다.
    참고 : 가이드 와이어의 정확한 위치는 자궁외 ventr에 의해 제안 될 것이다icular 비트는 ECG 및 대동맥 압력에서 관찰.
  4. 60 Hz에서 교류 발전기 전원을 켜고 대동맥 압력을 모니터링하면서 점차적으로 전류를 증가.
    참고 : 2.0 mA 전류는 일반적으로 VF를 유도하기에 충분하지만 우심실에 가이드 와이어의 상대적 위치에 우발 다릅니다. 끝 위치에 약간의 조정은 낮은 전류 레벨에서 VF를 유도해야 할 수 있습니다.
  5. 그림 2와 같이, ≈ 오초와 ECG에서 조직적 전기 활동 (2) 외관에서 ≈ 20mm 수은에 (1) 대동맥 맥동의 중단과 대동맥 압력 지수 붕괴를 문서화하여 VF의 유도를 확인합니다.
  6. VF를 유도하기 위해 필요한 대략 절반 수준으로 제 분 후에 휘도의 저감 3 분간 부단 전류 유지한다.
  7. VF는 전류를 적용 할 필요없이 계속 3 분 및 문서 후에 현재의 전원을 끄십시오.
    참고 : 작은 마음 자발적 제세동fibrillatory 앞의 리딩 엣지가 재입국 배제 내화물 기간에 후행 끝에 도달함으로써 단락 회로 길이 주어진. 만 심근 허혈의 기간 후에;. 즉, 충분히 3 분, 재입국은 그림 2와 같이 VF가, 자기 유지되고 있다는 것입니다 수 있도록 전도 속도가 느려질 수 있습니다.
  8. , 3 방향 스톱 콕이 가이드 와이어, 다시 캡을 경정맥 카테터를 제거 지상 바늘을 제거하고, VF 출판을 기반으로 (즉, 4-15 분을 소생 개입을 시작하기 전에 프로토콜의 욕망 기간 동안 자발적으로 계속할 수 연구).

5.2) 가슴 압박과 양압 환기

참고 :이 책에 등장하는 가슴 압축기는 맞춤형 공압 구동 전자 제어 피스톤 장치입니다. 인공 호흡기는 시중에서 판매하는 장치입니다.

  1. 액션 B에 대한 설명 미처리 VF의 시간을 사용elow; 그들은 VF를 유도하기 전에 수행 될 수 있지만.
  2. 2.8 cm와 칼 모양의 프로세스의 기지에서 4.2 cm에 가슴을 표시합니다. 흉부 압박을 시작하기위한 최적의 지역은 일반적으로이 두 표시 사이 발견된다.
  3. 제세동 패들에 전도성 젤을 적용하고 수술 보드에 패들을 확보, 쥐의 가슴 아래에 밀어 넣습니다.
  4. 약간 가슴을 만지고 두 가슴 마크의 가슴 압축기의 피스톤을 배치합니다.
  5. 분당 200 압박을 제공하고 0mm에 초기 피스톤 변위를 설정하는 압축기를 설정합니다.
    주 : 압축률은 350 분의 자연 심장 박동수와 작은 동물 적합한 -1 있지만 정의되지 않은 래트 모델에 대한 최적의 압축 비율로 변할 수있다.
  6. 25 분에 인공 호흡기를 설정 -1 가슴 C에 동기화 1.0의 6 ㎖ / ㎏의 호흡량과 영감 산소의 일부 (FIO 2) 제공ompression.
  7. 기관 캐 뉼러 떠나기 (흡기 및 호기 사지를 연결하는 Y 어댑터로 끝나는 지) 인공 호흡기 튜브를 부착하면 적외선 CO 2 분석기 어댑터를 삽입.
  8. 인공 호흡기의 전원을 켜고 점차적으로 처음 1 분 동안 10mm에 0mm에서 압축 깊이를 증가시켜 흉부 압박을 시작합니다. 측방 약간 피스톤을 이동하고 가장 높은 대동맥 확장기 혈압을 산출 위치를 찾기 위해 노력 rostrocaudal (즉, 압박 사이에 압력) 지정된 압축 깊이.
    참고 : 압축 깊이의 점진적 증가는 소생 연구소에 고유; 대부분의 연구자들은 최대 압축 깊이로 시작합니다.
  9. 타겟 대동맥 확장기 혈압이 달성 될 때까지 상기 제 분 동안 압축 깊이를 계속 증가.
    참고 : 24 mmHg의 이상의 타겟 이완기 대동맥 압력을 뺀 후 20 mmHg의 이상의 관상 동맥 관류 압력을 수득우심방 이완기 혈압; 이 쥐 모델 4 resuscitability 임계 값에 해당. 타겟 대동맥 확장기 혈압 - resuscitability 임계 값을 초과 할 수있다 - 연구 목적에 기초하여 결정 조사관한다. 그러나, 그것은 가슴 벽과 흉부 장기에 손상을 방지하기 위해 17mm의 압박 깊이를 초과하지 않는 것이 좋습니다.
  10. 제세동을 시도하기 전에 원하는 기간 동안 흉부 압박을 유지한다.
    참고 : 흉부 압박의 6 분의 최소 성공적으로 제세동 (26)에 유리한 심근 조건을 만드는 데 필요한 것 같습니다. 그러나, 증가 지속 시간, 혈역학 흉부 압박 감소의 효과와 대부분의 연구는 6에서 10 분까지의 기간을 사용합니다.

5.3) 제세동

  1. 시작과 내부 제세동을위한 능력 시판 이상성 파형 제세동기를 사용쥐에 맞게 사용자 정의 패를 갖춘 5 J의 전달 에너지,.
  2. 제세동 패드에 전도성 젤을 적용합니다.
  3. 흉부 압박의 소정의 기간을 완료하기 전에 즉시 제세 동기를 충전합니다.
  4. 흉부 압박을 중단하고 심장이 심전도를 검사 VF에 남아 있는지 확인합니다.
  5. VF가있는 경우 오초 떨어져 가슴 벽에서 5 J 각각 두 개의 전기 충격까지 제공 및 대동맥 펄스와 평균 동맥압 ≥25 mmHg로와 전기적으로 조직 된 ECG의 반환을 관찰합니다.
  6. 또 다른 30 ​​초 60초 평균 동맥압 25 mmHg 이상에 관계없이 전기 리듬의 <인 경우 (특정 프로토콜에 파견)에 대한 흉부 압박을 다시 시작합니다.
  7. 특정 프로토콜 만 초기 5 J 충격이 VF를 종료하지 않을 경우 7 J로 제세동 에너지를 고조에 우발 최대 5 회 5.3.6에 5.3.4에서 단계를 반복합니다. 그림 3은 제세동 프로 묘사로토콜 심폐 연구소에서 사용하고도 4는 제세동 단계 동안 대표적인 실험을 도시한다.
  8. VF가있는 경우에만 전기 충격을 전달; 그렇지 않으면 전기 충격을 선행하지 않고 흉부 압박을 다시 시작하고 심장이 맥박 전기 활동 또는 무 수축에 가정합니다.
  9. 제세동 압축 사이클의 완성 (그림 3)에서 소생 결과를 확인합니다.

5.4) 후 소생

  1. 자연 순환의 복귀 후 -1 60 분 -1 25 분에서 환기 속도를 높이고 자연 순환 15 분 후 1.0-0.5 FIO 2를 내립니다.
  2. VF가 다시 발생하면 마지막 쇼크 같은 에너지를 전기 충격을 전달합니다. 그러나, VF는 일반적으로 몇 초 이내에 동 율동에 자발적으로 반전.
    참고 : VF의 재발은 곧 재관류 부정맥의 일환으로 발생할 수 있습니다자연 순환의 복귀 후 드물게 15 분 이상.
  3. 연구자에 의해 결정 특정 포스트 소생술 프로토콜에 따라 동물을 관찰; 안락사 전에 마취에서 회복하지 않고 급성 실험에서 일반적으로 180-240 분. 급성 실험의 전형적인 타임 라인은도 5에 도시된다.
  4. 실험이 잘못 렌더링 할 수있는 내부 장기에 카테터의 위치와 부상을 문서화하는 급성 실험에서 부검을 수행합니다.
  5. 모든 카테터를 제거하고 혈관을 결찰하고, 금속 클립과 상처를 닫고 생존 실험에서 아래의 단계를 수행합니다.
  6. 튜브를 빼내 동물은 자발적으로 호흡 할 수있다 제공.
  7. 지느러미 드러 누움에서 완전하고 보조를받지 않는자가 바로 잡기에 의해 입증 마취에서 회복 후 깨끗한 케이지에 동물을 반환합니다.
  8. 를 주입은 0.9 %의 NaCl (1 ㎖ / 100g의 체중)을 복강 저체온증와 D의 위험을 줄이기 위해를 따뜻하게ehydration.
  9. 피하 4시간 회 최대 72 시간 동안은 1 mg / kg 피하 투여 한 다음 진통제의 투여 후 멜 록시 캄 (2 ㎎ / ㎏)의 피하 투여를 관리.
  10. 하우스 안전한 복구를 위해 최대 48 시간 동안 농축 혼자 동물과 수술 후 관리 및 모니터링을위한 제도 표준 운영 절차를 사용합니다.

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Representative Results

여기에 설명 된 래트 모델은 최근에 흉부 압박 및 사후 61시 심근 소생 혈역학 함수에 sarcolemmal 나트륨 수소 교환기 이성체 1 (NHE-1)의 두 억제제의 효과를 비교하기 위해 사용되었다. 그것은 이전에 NHE-1 억제제는 나트륨에 의한 세포질과 미토콘드리아 칼슘 과부하를 제한하여 심근 재관류 손상을 감쇠하고, 이에 흉부 압박시 좌심실 팽창성을 보존하는 데 도움이 및 사후 소생 심근 기능 장애 (12)를 감쇠 것으로 알려졌다. 본 연구에서 광범위 과거에 연구되었던 NHE-1 억제제 cariporide (1 ㎎ / kg)을, 10 마리씩 세 그룹의 새로운 화합물 AVE4454B (1 ㎎ / kg) 및 비히클 대조군과 비교하여, 모든 전기 충격을 전달하기 전에 흉부 압박의 8 분 미처리 VF의 10 분을 실시. 어느 화합물 또는 차량 제어로 관리를 위해 무작위로했다즉시 조사관과 흉부 압박을 시작하기 전에 우심방은 할당에 장님. NHE-1 억제제의 효과는 개별적으로 분석하고 (즉, 제어에 대한) 결합되었다. 도 6에 도시 된 바와 같이, NHE-1 억제 좌심실 팽창성의 보존과 일치 압축 덜 깊이 (26mm 수은 및 수은 28mm 사이) 소정 대동맥 확장기 혈압을 달성 가능. 좌심실 팽창성의 인덱스 - - 관상 동맥 관류 압력이 압축의 깊이 (CPP / 깊이 비율)에 연동 될 때 cariporide 치료 만 쥐를 통계적 유의성을 달성. 포스트 소생 두 화합물은 심근 기능 장애, 개선 및도 7에 도시 된 바와 같이,이 효과는 더욱 생존 연관되었다. 그것은 cariporide이 쥐 모델에서 심장 마비에서 소생 용 AVE4454B보다 더 효과적이라는 것을 본 연구에 기초하여 체결 하였다.


그림 1 : 쥐 계측. VF를 유도하고 심장 소생을 수행 할 모델에 사용 된 측정 장치 및 각종 장치를 개략적 VF의 쥐 모델을 연출 및 폐쇄 - 가슴 소​​생. AC = 교류, ECG = 심전도.

그림 2
그림 2 : 심실 세동의 대표 유도. ECG 및 VF를 유도하는 60 Hz의 교류 전송의 시작에서, VF 유도 전 및 3 분 이상 전류 전원을 끈 후 기준선 6 분으로 동맥압을 묘사 실험. 현재 배송은 일반적으로 마스크 더 이상 CURREN 전원을 끈 후 볼 60 Hz의 파형을 중첩 VF 파형을,t, 문서화는 VF를 유지.

그림 3
그림 3 : 제세동 프로토콜. 알고리즘 때 전기 충격을 전달하는 안내 사용하면 전기 심장 리듬과 평균 동맥압 (MAP) 수준에 따라 흉부 압박 (CC)를 다시 시작합니다. VF = 심실 세동, 충격 = 전기 충격의 전달. 가능한 소생되는 결과물은 다음을 포함한다 : (1) 자발 순환 회복, MAP ≥40 mmHg로 지속적인> 5 분으로 정의 자연 순환의 반환; (2) ROCA, 대동맥 펄스 압력으로 조직 리듬으로 정의 심장 활동의 반환 ≥5 mmHg로하지만 MAP <40mm 수은; (3) 융점 VF, 5 번째주기의 완료시 VF의 지속성으로 정의; (4) PEA, 대동맥 펄스 압력으로 조직 심장 전기 활동으로 정의 맥박 전기 활동 <5mm수은; 및 (5) 무 수축, 전기 및 기계 심장 활동의 부재로 정의.

그림 4
그림 4 : 대표 제세동 프로토콜. ECG, 동맥압을 묘사 한 실험 및 흉부 압박 및 하나의 부가적인 사이클의 단부에서 변위 피스톤 (깊이). 심장이 초기 전기 충격을 전달하기 위해 흉부 압박의 간격으로 VF에있는 동안 대동맥 압력에 흉부 압박 (CC)의 효과를 보이고있는 바와 같다. 충격, 타악기를 산출이 시간이 빠르게 복귀와에> 40mm 수은의 일관성을 증가 동맥압> 25mm 수은을 의미 VF를 종료하지만 흉부 압박의 재개를하라는 평균 동맥압 ≥25 mmHg로 유지 할 수없는 약한 심장의 활동 결과 자연 순환 (ROSC).


그림 5 : 실험 타임 라인. 개입 및 측정을 보여주는 전형적인 급성 쥐 실험 타임 라인. 아오 = 대동맥, BG = 혈액 가스, 공동 소띠 = 공동 산소 측정기, ECG = 심전도, FIO 2 = 영감 산소, 락 = 락 테이트, RA는 = 우심방의 분수.

그림 6
그림 6 : CPR 효율성에 NHE-1 억제제의 효과. 흉부 압박 전에 흉부 압박 (깊이) 및 AVE4454B (AVE)과 cariporide (CRP)과 대조 용액 (C) 비교 관상 동맥 관류 압력 및 압축 깊이 (CPP / 깊이) 사이의 비의 깊이. NHEI = AVE와 CRP 그룹은 결합했다. 선 그래프 컨트롤 (●)와 NHEI (O)를 비교 흉부 압박을 통해 깊이와 CPP / 깊이를 묘사. B의 숫자라켓은 심실 세동에 남아있는 쥐를 나타낸다. 막대 그래프는 흉부 압박의 마지막 분에서 같은 변수를 묘사한다. 값은 평균 ± SEM이다. † P <0.01, ‡ P는 <학생의 t- 시험에 의해 제어 0.001 일원 분산 분석에 의한 제어 대 P <0.05; P <0.01, P <0.001 여러 비교에 대한 홀름 - Sidak의 테스트를 사용하여 일원 분산 분석에 의한 제어 여러 비교에 던의 테스트를 사용하여 (이 수치는 라 다카시 난 등. (61)에서 수정 된).

그림 7
그림 7 : 생존에 NHE-1 억제제의 효과. cariporide를받은 쥐에서 카플란 - 마이어 곡선 (CRP), AVE4454B (AVE), 또는 차량 제어 솔루션입니다. 모든 쥐 만 retu을 가지고 그 사람들을 오른쪽에 생존 곡선은 왼쪽에있는 바와 같다자연 순환 (ROSC)의 RN. 위 그래프는 결합 AVE와 CRP 그룹에 대한 개별 중재 아래 그래프 생존 (NHEI)에 대한 생존을 묘사 P <0.01를 여러 비교를 위해 홀름 - Sidak의 테스트를 사용 Gehan-Breslow 분석에 의해 제어 대.;P = Gehan-Breslow 분석에 의해 제어 0.01 (이 그림은 라 다카시 난 등. (61)에서 수정 된).

변수 기준 포스트 소생술
-5 분 60 분 120 분 180 분
온도 (° C) 36.9 ± 0.3 [12] 36.9 ± 0.4 [6] 37.0 ± 0.6 [5]
HR (분 -1) 379 ± 30 334 ± 27 346 ± 21 370 ± 35
심 박출량 (㎖ / 분) 87 ± 13 48 ± 11 33 ± 11 30 ± 10
심장 지수 (㎖ / kg ∙ 분 -1) 175 ± 28 93 ± 22 65 ± 20 58 ± 19
아오 Sysolic 압력 (mmHg로) 162 ± 15 108 ± 19 107 ± 24 102 ± 20
아오 이완기 압력 (mmHg로) 130 ± 13 84 ± 13 86 ± 21 82 ± 16
아오 평균 압력 (mmHg로) 141 ± 13 92 ± 15 93 ± 22 89 ± 17
RA 평균 압력 (mmHg로) 0 ± 1 2 ± 1 2 ± 2 1 ± 2
호 기말 이산화탄소 (mmHg로) 37 ± 10 34 ± 14 24 ± 16 24 ± 17
산도, 대동맥 (단위) 7.40 ± 0.04 7.28 ± 0.11 7.36 ± 0.10 7.34 ± 0.08
젖산, 대동맥 (밀리몰 / L) 0.56 ± 0.32 5.68 ± 2.64 3.24 ± 1.63 3.38 ± 2.15
PO 2, 대동맥 (mmHg로) 84 ± 8 178 ± 18 206 ± 9 206 ± 25
PCO 2, 대동맥 (mmHg로) 40 ± 6 30 ± 11 29 ± 9 24 ± 10

표 1 : 대표 혈역학 및 대사 값. 기준 값은 수술 계측 완료 후 심실 세동의 유도 전에 12 남성 은퇴 개종 흰쥐 얻었다. 후속 값은 포스트 - 소생 60, 120, 180 분을 얻었다. 괄호 안의 숫자는 후 소생 간격으로 살아 남아 쥐를 나타낸다. 데이터는 평균 ± 표준 편차로 표시됩니다. 아오 = 대동맥, HR = 심장 박동, RA = 우심방.

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Discussion

프로토콜의 중요한 단계

프로토콜의 중요한 단계가 있습니다. 마스터하면, 준비 및 프로토콜은 간결하게 설명 진행합니다. 수술 준비는 단일 또는 소수의 시도 (들) 후 성공적으로 기관 삽관 다음,없이 또는 최소한의 혈관 경련을 유발 의도 한대로 카테터 팁을 위치 작은 절개를 통해 신속하게 카테터를 진행, 신속한입니다; 따라서, 기준값 내 측정 기준 (표 1)과 VF 유도 초기에 펜토 바르 비탈 도즈 ≈에서 90 분의 준비를 완료한다. VF 전기적 최고의 모든 경우 유도에 자발적으로 인스턴스> 95 %에서 중단 전기 자극의 3 분 후 VF를 지속. 흉부 압박, 대동맥 확장기 혈압 중 ≥24 mm 수은과 기말 CO 2는 수은 17mm의 압축 깊이를 초과하지 않고 생성된다 ≥10 mm깊이와 흉부 장기 부상없이. (그림 3과 같이 예) 제세동 프로토콜의 구현은 쉽게 및 흉부 압박에 <5 초 중단 발생합니다. 마지막으로, 자연 순환의 수익은 240 분의 생존> 40 % 및 심장 마비 동안 발생하는 전신 산소 결핍을 나타내는 대사 이상과 후 소생 심근 기능 장애로 이어지는 본 프로토콜을 사용하여 실험 또는 유사한 것들> 60 %에서 발생 표 1과 같이하고, 생존자의 사후 소생술 단계에서 반전.

수정 및 문제 해결

모델 연구는 특정 목표를 달성하기 위해 비교적 간단한 적응을 허용, 범용성이 높은 것이다. 최근에, 크기 PE25 튜브의 사용은 다른 연구자들에 의해 이전에 사용 된 사이즈 PE50 튜브,보다 바람직하고,보다 쉽게​​ 진행였다압력 측정치 충실도를 손상시키지 않고 적절한 위치로. 좌심실 좌심실 기능을 평가하기 위해 34,61 또는 지역 기관 6,55 혈액 흐름을 측정하기위한 마이크로 주입하는 경동맥으로부터 카테터되어있다. 더 많은 도전 - - 마취에서 회복하지 않고, 특히 급성 실험에서,이 문서에 등장하는 기술 기관은 기관 절개 대신 구두를 통해 직접 캐 뉼러를 삽입 할 수있다. VF를 유도하는 다른 방법은 경피적 전기 자극 (74) 심장 외막, 심장 (75)에 상대 정맥의 입구 전류 전달 및 페이싱 전극 (76)을 이용하여 전기 자극 식도 포함 설명되었다. 흉부 압박의 다른 방법은 속도와 듀티 사이클에서 압축 측면을 구속하여, 최대 깊이 압축 개시함으로써 변경 될 수 있고, 또한 수동 기술을 이용하여 instea피스톤 장치 (D). 환기는 또한 변할 수있다; 원래 설명의 호흡 속도를 사용 100 분 -1 : 1 동기화되어 본 모델이 25 분의 호흡 속도는 사용하는 반면 압축에 2 -1 압박에 동기화; 보안기도를 설립 한 후 압축을 위해 일시 중지에 대한 CPR (77)의 감소 환기 요구와 현재 임상 권장 사항에 따른 것입니다. 환기는 수동 및기도 특허 20 개 기관 (25)에 직접 산소를 투여하면서 없어진다 제공 흉부 압박에 의해 촉진 될 수있다. 실험 동물의 혈액 용적에 혈족 다량의 제거가 필요한 경우 [BV (ML) = 0.06 X 체중 (g) + 0.77] 78; 예를 들면, 혈액 수집 용 미세 6,55와 장기 혈액 유동을 결정하거나 혈액 분석의 반복 측정, 혈액은 같은 C에서 기증자 쥐에서 수혈 할 수있다olony 6,55. 현재의 분석 기법, 그러나, 작은 샘플 및 생리 식염수 또는 다른 용액을 허용 혈관 동량의 투여에 여러 분석 물질의 측정은 작은 혈액 손실을 보상 할 수 있습니다. 모델은 또한 일반적으로 신경근 차단을 유발하고기도 폐색을 정지함으로써 달성된다 (9)의기구로 질식을 연구하는데 사용될 수있다.

기술의 한계

기본 모델은 관상 동맥 질환이 부족하며 급성 관상 동맥 폐색을 유발하는 것은 기술적으로 곤란하다; 조건은 가장 일반적으로 인간의 갑작스러운 심장 마비와 관련. 필요 VF를 유도 전류가 이상적이지 심근 손상에 대한 잠재적 인 문제를 제기 유지한다. 전류 전달의 사이트에서 실제로 부 열적 손상은 원래 연구에서 인식하고, 그것을을 감소시킴으로써 최소화 될 수 있음을 지적 하였다유도 자립적 VF 사에 필요한 3 분 간격 동안 최소 요구 사항에 현재. 또한, 전류는 unintendedly 락트산 제조에 기여할 수 골격근 수축을 트리거한다. 다른 포유 동물에 비해 쥐의 심장의 칼슘 순환 생리는 쥐 심장 생리학의 이러한 측면을 고려해야 나트륨 - 칼슘 교환기 (79) 및 관련 치료의 해석에 덜 의존한다. 압축 및 환기의 비율은 인간의 사용이 관련 연구 결과의 직접적인 추정을 배제 있음을 초과합니다. 세포 보호 효과 연구 결과를 해석 할 때이 펜 토바 비탈 당황 연구 결과는 심장 보호 효과 (81)이 흡입 마취제에 비해 분명하지 않지만 (81)가 고려되어야한다을 포함하여 마취 (80)의 효과. 문헌에보고 된 대부분의 연구가 가능 expe의 최소화하기위한 수컷 래트에서 수행되었다발정주기 내에서 서로 다른시기에 따른 rimental 혼란 변수. 또한 작업은 인공 호흡 생리학과 결과에 대한 성별의 효과를 평가하기 위해 필요합니다. 또 하나의 중요한 한계는 유전 물질 (예를 들면, 바이러스 벡터 및 안티센스 올리고 뉴클레오티드)의 도입을 통해 정의 유전 공학 또는 성인 동물 표적 유전자 조작에 의지 갖는 마우스에 대해 유전자 변형 쥐의 가용성 감소이다.

기존의 / 대안적인 방법에 대한 기술의 의의

이 모델은 가장 새로운 개념, 새로운 개입을 탐구하고, 결국 인간의 임상 시험 전에 같은 돼지와 같은 큰 동물 모델에 초점을 맞춘 연구를 포함하는 더 큰 병진 전략의 일환으로 기존의 패러다임에 도전하기에 적합합니다. 작은 동물 (예를 들어, 마우스)의 연구는 VF, 제한된 수술 instrumentat을 유도에 어려움 복잡이온, 반복적 혈액 분석을 배제 작은 혈액량.

이 기술을 마스터 한 후 미래 응용 프로그램이나 방향

래트 모델은 원래 갑작스런 심정지 CPR 후 인간의 다양한 측면을 시뮬레이션하기 위해 개발되었다. 도입에 강조로, 모델은 생리학, 결과의 기존 결정하고,이 문서에 언급 된 설립 및 새로운 치료 개입의 대부분 효과를 포함 심장 소생술의 여러 측면을 해결하기 위해 연구자에 의해 사용되어왔다. 소생 연구소는 독자가 영감을 현재 소생술 방법과 실망스러운 결과 주어진 추가 탐사가 필요 소생술 연구에 많은 질문을 해결하기 위해 모델을 사용 될 것으로 기대하고있다.

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Sodium pentobarbital Sigma Aldrich P3761 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/p3761?lang=en&region=US
Rectal thermistor BIOPAC Systems, INC TSD202A http://www.biopac.com/fast-response-thermistor
Needle electrode biopolar concentric 25 mm TP BIOPAC Systems, INC EL451 http://www.biopac.com/needle-electrode-concentric-25mm
PE25 polyethylene tubing  Solomon Scientific BPE-T25 http://www.solsci.com/products/polyethylene-pe-tubing
26GA female luer stub adapter Access Technologies LSA-26 http://www.norfolkaccess.com/needles.html
Stopcocks with luer connections; 3-way; male lock, non-sterile Cole-Parmer UX-30600-02 http://www.coleparmer.com/Product/Large_bore_3_way
_male_lock_stopcocks
_10_pack_Non_sterile/EW-30600-23
TruWave disposable pressure transducer Edwards Lifesciences PX600I  http://www.edwards.com/products/pressuremonitoring/Pages/truwavemodels.aspx?truwave=1
Type-T thermocouple Physitemp Instruments IT-18 http://www.physitemp.com/products/probesandwire/flexprobes.html
Central venous pediatric catheter  Cook Medical  C-PUM-301J https://www.cookmedical.com/product/-/catalog/display?ds=cc_pum1lp_webds
Abbocath-T subclavian I.V. catheter (14 g x 5 1/2") Hospira 453527 http://www.hospira.com/products_and_services/iv_sets/045350427
Novametrix Medical Systems, Infrared CO2 monitor Soma Technology, Inc. 7100 CO2SMO  http://www.somatechnology.com/MedicalProducts/novametrix_respironics_co2smo_
7100.asp
Harvard Model 683 small animal ventilator Harvard Apparatus 555282 http://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/haisku2_10001_11051_44453_-1_
HAI_ProductDetail_N_37322_37323
Double-flexible tipped wire guides Cook Medical  C-DOC-15-40-0-2 https://www.cookmedical.com/product/-/catalog/display?ds=cc_doc_webds
High accuracy AC LVDT displacement sensor Omega Engineering LD320-25 http://www.omega.com/pptst/LD320.html
HeartStart XL defibrillator/monitor Phillips Medical Systems M4735A http://www.healthcare.philips.com/main/products/resuscitation/products/xl/
Graefe micro dissection forceps 4 inches Roboz  RS-5135 http://shopping.roboz.com/Surgical-Instrument-Online-Shopping?search=RS-5135
Graefe micro dissection forceps 4 inches with teeth Roboz  RS-5157 http://shopping.roboz.com/Surgical-Instrument-Online-Shopping?search=RS-5157
Extra fine micro dissection scissors 4 inches Roboz  RS-5882 http://shopping.roboz.com/micro-scissors-micro-forceps-groups/micro-dissecting-scissors/Micro-Dissecting-Scissors-4-Straight-Sharp-Sharp
Heiss tissue retractor Fine Science Tools  17011-10 http://www.finescience.com/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=321&CategoryId=134&
lang=en-US
Crile curve tip hemostats Fine Science Tools  13005-14 http://www.finescience.com/Special-Pages/Products.aspx?ProductId=372
Visistat skin stapler  Teleflex Incorporated 528135 http://www.teleflexsurgicalcatalog.com/weck/products/9936
Braided silk suture, 3-0 Harvard Apparatus 517706 http://www.harvardapparatus.com/webapp/wcs/stores/servlet/haisku2_10001_11051_43051_-1_
HAI_ProductDetail_N_37916_37936
Betadine solution Butler Schein 3660 https://www.henryscheinvet.com/
Sterile saline, 250 ml bags Fisher 50-700-069 http://www.fishersci.com/ecomm/servlet/itemdetail?catnum=50700069&storeId=10652
Heparin sodium injection, USP Fresenius Kabi 504201 http://fkusa-products-catalog.com/files/assets/basic-html/page25.html
Loxicom (meloxicam) Butler Schein 045-321 https://www.henryscheinvet.com/
Thermodilution cardiac output computer for small animals N/A N/A Custom-developed at the Resuscitation Institute using National Instruments hardware and LabVIEW software
Analog-to-digital data acquisition and analysis system N/A N/A Custom-developed at the Resuscitation Institute using National Instruments hardware and LabVIEW software
Pneumatically-driven and electronically controlled piston device for chest compression in small animals N/A N/A Custom-developed at the Weil Institute of Critical Care Medicine
60 Hz alternating current generator N/A N/A Custom-developed at the Weil Institute of Critical Care Medicine

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Lamoureux, L., Radhakrishnan, J.,More

Lamoureux, L., Radhakrishnan, J., Gazmuri, R. J. A Rat Model of Ventricular Fibrillation and Resuscitation by Conventional Closed-chest Technique. J. Vis. Exp. (98), e52413, doi:10.3791/52413 (2015).

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