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Medicine

परम्परागत बंद छाती तकनीक द्वारा एक चूहा ventricular fibrillation के मॉडल और पुनर्जीवन

doi: 10.3791/52413 Published: April 26, 2015

Introduction

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संयुक्त राज्य अमेरिका 1 में 360,000 व्यक्तियों के करीब है और अधिक दुनिया भर में दो कई अचानक हृदय की गिरफ्तारी के एक प्रकरण में हर साल ग्रस्त हैं। केवल यह है कि हृदय की गतिविधि पुनर्स्थापना हो लेकिन महत्वपूर्ण अंगों को नुकसान है कि, रोका कम से कम, या उलट नहीं किया जा आवश्यकता होती है जीवन बहाल करने के लिए प्रयास करता है। वर्तमान कार्डियोपल्मोनरी पुनर्जीवन तकनीक लगभग 30% की एक शुरुआती पुनर्जीवन दर उपज; हालांकि, अस्पताल के निर्वहन के लिए अस्तित्व केवल 5% एक है। मायोकार्डियल रोग, मस्तिष्क संबंधी रोग, प्रणालीगत सूजन, अंतवर्ती बीमारियों या संचलन के प्रारंभिक वापसी के बावजूद मरने वाले रोगियों के बड़े अनुपात के लिए पोस्ट-पुनर्जीवन खाता होने वाली एक संयोजन क्या है। इस प्रकार, अंतर्निहित pathophysiology और उपन्यास पुनर्जीवन दृष्टिकोण के अधिक से अधिक समझ तत्काल प्रारंभिक पुनर्जीवन और बरकरार अंग समारोह के साथ बाद जीवित रहने की दर को बढ़ाने की जरूरत है।

पशु मोडहृदय की गिरफ्तारी की रास हृदय की गिरफ्तारी और पुनर्जीवन के pathophysiology पर अंतर्दृष्टि प्रदान करने और conceptualize और वे मनुष्यों 3 में परीक्षण किया जा सकता से पहले नए हस्तक्षेप परीक्षण करने के लिए व्यावहारिक अर्थ की पेशकश के द्वारा नए पुनर्जीवन उपचारों के विकास में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाते हैं। बंद छाती कार्डियोपल्मोनरी पुनर्जीवन के चूहे मॉडल (सीपीआर) यहाँ वर्णित एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाई है। देर प्रोफेसर मैक्स हैरी वेल एमडी, पीएच.डी. की प्रयोगशाला में चार और उसके सहयोगियों - समय पर एक रिसर्च फेलो - मॉडल आइरीन वॉन Planta के द्वारा 1988 में विकसित किया गया था स्वास्थ्य विज्ञान विश्वविद्यालय में (2004 में चिकित्सा और विज्ञान के रॉसलिंड फ्रैंकलिन विश्वविद्यालय का नाम बदलकर) और बड़े पैमाने पर मुख्य रूप से प्रोफेसर वेल और उनके प्रशिक्षुओं के साथियों द्वारा पुनर्जीवन के क्षेत्र में इस्तेमाल किया गया है।

मॉडल पारंपरिक सीपीआर तकनीक द्वारा की कोशिश पुनर्जीवन के साथ अचानक हृदय की गिरफ्तारी के एक प्रकरण simulates और इस तरह प्रतिष्ठापित शामिलसमन्वित रूप से ऑक्सीजन समृद्ध गैस के साथ सकारात्मक दबाव वेंटिलेशन पहुंचाने जबकि एक pneumatically संचालित पिस्टन डिवाइस के द्वारा सही निलय endocardium और बंद छाती सीपीआर का प्रावधान करने के लिए एक बिजली के वर्तमान देने से वेंट्रिकुलर फिब्रिलेशन (VF) के आयन। VF की समाप्ति बिजली के झटके के ट्रांस्थोरासिक प्रसव के द्वारा पूरा किया है। चूहे मॉडल छोटे जानवरों में विकसित बड़े जानवरों (जैसे, सूअर) और मॉडल में विकसित मॉडलों के बीच संतुलन बनाता है (उदाहरण के लिए, चूहों) एक मजबूत करने के लिए उपयोग के साथ एक अच्छी तरह से मानकीकृत प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य है, और कुशल तरीके से नए शोध अवधारणाओं की अनुमति की खोज उचित माप की सूची। मॉडल लेकिन अधिक से अधिक translational प्रभाव की है, और अधिक महंगी हैं कि बड़े पशु मॉडल में अध्ययन के संचालन से पहले confounders के प्रभाव को नई अवधारणाओं का पता लगाने और जांच करने के लिए अनुसंधान के प्रारंभिक दौर में विशेष रूप से उपयोगी है।

सभी सहकर्मी की समीक्षा लेख के रूप में रिपोर्टिंग के लिए एक मेद्लिने खोजयह पहली बार 1988 4 में प्रकाशित किया गया था के बाद से हृदय की गिरफ्तारी के तंत्र और बंद छाती पुनर्जीवन के कुछ फार्म के रूप में VF होने imilar चूहे मॉडल मॉडल का उपयोग कर 69 अतिरिक्त मूल पढ़ाई की कुल पता चला। अनुसंधान क्षेत्रों पुनर्जीवन 17/05 के pathophysiological पहलुओं में शामिल हैं, परिणामों 18-30 को प्रभावित करने वाले कारकों, vasopressor एजेंटों 31-43, बफर एजेंटों की जांच औषधीय हस्तक्षेप की भूमिका 44, inotropic एजेंट 45, दौरे या मस्तिष्क संरक्षण 46-70 के उद्देश्य से एजेंटों, और भी mesenchymal स्टेम कोशिकाओं 71-73 का प्रभाव।

इस आलेख में वर्णित मॉडल और प्रोटोकॉल वर्तमान में पुनर्जीवन संस्थान में इस्तेमाल किया जा रहा है। फिर भी, व्यक्तिगत जांचकर्ताओं और अध्ययन के लक्ष्यों के लिए उपलब्ध क्षमताओं पर आधारित मॉडल "अनुकूलित" करने के लिए कई अवसर हैं।

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Protocol

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नोट: प्रोटोकॉल चिकित्सा और विज्ञान के रॉसलिंड फ्रैंकलिन विश्वविद्यालय में संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था। सभी प्रक्रियाओं राष्ट्रीय अनुसंधान परिषद द्वारा प्रकाशित प्रयोगशाला पशुओं की देखभाल के लिए गाइड के अनुसार और उपयोग में थे।

1. प्रयोगात्मक सेटअप और संज्ञाहरण

  1. विभिन्न संकेतों के प्रदर्शन करना calibrations के एक डाटा अधिग्रहण प्रणाली (दबाव, तापमान, पिस्टन विस्थापन, आदि इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम [ईसीजी], Capnography,) का उपयोग कर लिया जाए।
  2. प्रयोग अस्तित्व सर्जरी शामिल है (कैथेटर के लिए उपकरणों और ethylene ऑक्साइड अजीवाणु के लिए एक आटोक्लेव में जैसे,) यंत्र और कैथेटर जीवाणुरहित और gowned और एक मुखौटा, टोपी पहने हुए काम करते हैं, और बाँझ दस्ताने। स्वच्छ शल्य चिकित्सा उपकरणों और कैथेटर लेकिन गैर अस्तित्व सर्जरी के लिए बाँझ होने की कोई जरूरत नहीं है।
  3. तैयार करें कैथेटर नीचे वर्णित है और फाई में दर्शाया0.45 किलो और 0.55 किलो के बीच वजन एक चूहे के लिए gure 1।
    1. मार्क एक 2 एफ टी प्रकार thermocouple कैथेटर, आकार 0.6 मिमी आयुध डिपो (2 एफ), वक्ष महाधमनी में उन्नति के लिए स्थायी मार्कर के साथ टिप, से 3, 5, और 8 सेमी। तापमान और हृदय उत्पादन को मापने के लिए इस कैथेटर का प्रयोग करें।
    2. कट पॉलीथीन ट्यूबिंग, आकार 0.46 मिमी आईडी और 0.91 मिमी आयुध डिपो (PE25) लंबाई में ≈ 25 सेमी, सही आलिंद में उन्नति के लिए वक्ष महाधमनी और दूसरे में उन्नति के लिए एक।
    3. प्रत्येक PE25 कैथेटर टिप के अंत में कटौती एक 90 डिग्री के कोण पर बर्तन में डाला जाएगा।
      नोट: पीई ट्यूबिंग का उपयोग करते समय 45 डिग्री के कोण पर Beveled सुझावों पोत वेध का कारण बन सकता है। हालांकि, beveled टिप इसकी तीव्रता कम करने के लिए sandpaper के साथ नीचे छंटनी की जा सकती है।
    4. प्रत्येक PE25 कैथेटर के समीपस्थ अंत करने के लिए एक 26 गेज महिला luer ठूंठ एडाप्टर संलग्न।
    5. 3, 5, और 8 सेमी और 3, 5, 8, 10 पर सही आलिंद कैथेटर और टिप से 12 सेमी में महाधमनी कैथेटर निशान। ए ओ का प्रयोग करेंrtic कैथेटर महाधमनी दबाव और रक्त नमूना लेने के लिए उपाय करने के लिए। सही आलिंद दबाव मापने के लिए सही आलिंद कैथेटर का प्रयोग करें।
    6. एक 3 तरह पानी निकलने की टोंटी के साथ लगे एक दबाव transducer के लिए प्रत्येक luer ठूंठ एडाप्टर संलग्न।
    7. सही अलिंद में उन्नति के लिए एक 45 डिग्री के कोण पर, एक 3F polyurethane के बाल चिकित्सा शिरापरक कैथेटर, आकार 0.6 मिमी आईडी और 1.0 मिमी आयुध डिपो (3F) की नोक काटें।
    8. टिप से 4 सेमी पर 3F बाहरी कंठ कैथेटर के निशान। दवा वितरण और रक्त नमूना लेने के लिए इसका इस्तेमाल करने के बाद विकल्प के साथ VF के विद्युत चुम्बकीय प्रेरण के लिए सही वेंट्रिकल में एक गाइड तार अग्रिम करने के लिए इस कैथेटर का प्रयोग करें। कैथेटर के लिए एक 3 तरह पानी निकलने की टोंटी संलग्न।
      नोट: कैथेटर उन्नत कर रहे हैं के रूप में कैथेटर पर किए गए मार्क्स सर्जन के मार्गदर्शन के लिए कर रहे हैं। कैथेटर पर 3 सेमी पर निशान और्विक जहाजों अलर्ट के माध्यम से वक्ष क्षेत्र की ओर वक्र करने के लिए शुरुआत जहाजों से उत्पन्न संभावित प्रतिरोध का एक क्षेत्र के सर्जन उन्नत। 8 सेमी मार्चमहाधमनी कैथेटर और thermocouple कैथेटर पर केएस टिप उतरते वक्ष महाधमनी में है का संकेत मिलता है। सही आलिंद कैथेटर पर 12 सेमी निशान टिप सही अलिंद में है इंगित करता है। कैथेटर उन्नत कर रहे हैं के रूप में अंतरिम निशान मार्गदर्शक हैं। सही बाहरी कंठ कैथेटर पर 4 सेमी निशान टिप सही अलिंद में है इंगित करता है।
    9. प्रधानमंत्री हेपरिन के 10 आइयू / एमएल युक्त नमक के साथ प्रत्येक कैथेटर (उनके प्रत्यक्षता सुनिश्चित करने के लिए) और बंद की स्थिति के लिए इसी stopcocks बारी है।
    10. एक पा टिप बनाने लंबाई में ≈ 8 सेमी होना करने के लिए, 1.6 मिमी आयुध डिपो (5F) एक stylette पर मुहिम शुरू की एक 5F fluorinated ईथीलीन Propylene प्रवेशनी, आकार 1.1 मिमी आईडी और कटौती। के दौरान और हृदय पुनर्जीवन के बाद सकारात्मक दबाव वेंटिलेशन के लिए Carina से इसकी टिप ≈ 2 सेमी रखकर श्वासनली में उन्नति के लिए इस प्रवेशनी का प्रयोग करें।
      नोट: प्रवेशनी की धातु stylette श्वासनली में उन्नति में सहायता करने के लिए टिप से एक 145 डिग्री कोण ≈ 3 सेमी पर आमादा हो की जरूरत है।
  4. सर्जिकल उपकरण के लिए चूहा तैयार करें।
    1. सोडियम pentobarbital की intraperitoneal इंजेक्शन (45 मिग्रा / किग्रा) द्वारा चूहे anesthetize। यदि आवश्यक हो, अतिरिक्त नसों खुराक (10 मिलीग्राम / किग्रा) संज्ञाहरण के एक शल्य चिकित्सा विमान बनाए रखने के लिए (नाड़ी पहुंच स्थापित करने के बाद) हर 30 मिनट दे।
      नोट: अधिकांश अध्ययन पुरुष सेवानिवृत्त ब्रीडर Sprague-Dawley चूहों का इस्तेमाल किया है।
    2. बिजली के झटके से वितरित किया जाएगा, जहां सर्जिकल क्षेत्रों और क्षेत्रों से बाल क्लिप; जो छाती के पृष्ठीय वक्ष क्षेत्र, बाएँ और दाएँ कमर, गर्दन, और पूर्वकाल सतह शामिल हैं।
    3. Analgesia के लिए buprenorphine subcutaneously 0.02 मिलीग्राम / किग्रा (1 मिलीग्राम / किग्रा) प्रशासन।
    4. सामने टेप से एक शल्य चिकित्सा बोर्ड पर एक लापरवाह स्थिति में चूहे फिक्स और midline से एक 45 डिग्री के कोण पर अंग हिंद।
    5. Betadine के हाथ धोने के साथ रगड़ो चीरा क्षेत्रों में 70% इथेनॉल 3 बार द्वारा पीछा किया।
    6. कॉर्निया को जीवाणुरोधी नेत्र मरहम की एक पतली फिल्म को लागू करें।
    7. एक गुदा thermistor ≈ मलाशय में 4 सेमी डालें और शल्य चिकित्सा बोर्ड के लिए thermistor सुरक्षित।
    8. प्रयोग के दौरान एक गरमागरम हीटिंग दीपक का उपयोग कर 36.5 डिग्री सेल्सियस और 37.5 डिग्री सेल्सियस के बीच मुख्य शरीर का तापमान बनाए रखें।
    9. Subcutaneously सही ऊपरी अंग पर प्लेस ईसीजी सुई, ऊपरी अंग है, और सही हिंद अंग छोड़ दिया, और प्रयोग के दौरान ईसीजी रिकॉर्ड है।

2. संवहनी Cannulations

2.1) उतरते वक्ष महाधमनी में टी प्रकार thermocouple कैथेटर को आगे बढ़ाने के लिए और्विक धमनी वाम

  1. इसके ग्रोव के लिए एक 90 डिग्री के कोण रिश्तेदार पर छोड़ दिया वंक्षण क्षेत्र पर एक 2 सेमी चीरा बनाओ।
  2. Hemostats की एक जोड़ी का उपयोग आसपास के संयोजी ऊतक की कुंद विच्छेदन द्वारा और्विक वाहिकाओं और तंत्रिका बेनकाब।
  3. एक घुमावदार माइक्रो विच्छेदन संदंश का उपयोग वाहिकाओं के आसपास संवहनी म्यान बेनकाब।
    नोट: इस पोत या पूर्वोत्तर या तो puncturing से बचेंRVE।
  4. और्विक धमनी, नस, और तंत्रिका नीचे माइक्रो विच्छेदन संदंश के साथ यात्रा करते हैं और जहाजों के लिए एक 90 डिग्री के कोण रिश्तेदार पर उन्हें समर्थन करते हैं। दोनों जहाजों और समर्थित तंत्रिका के साथ, घुमावदार माइक्रो विच्छेदन संदंश की एक और जोड़ी का उपयोग करके तंत्रिका और नस से धमनी की जुदाई शुरू करते हैं।
    नोट: पृथक्करण वाहिकाओं और तंत्रिका चोट के जोखिम को कम करने के लिए जहाजों के नीचे और समानांतर से किया जाता है।
  5. समर्थन कर संदंश का स्थान बदलें; तंत्रिका रिहा केवल नस और धमनी का समर्थन है।
  6. धमनी और शिरा के बीच एक संदंश धागा और ≈ 1 सेमी की लंबाई के लिए उन्हें अलग।
  7. धीरे समर्थन कर संदंश से पृथक नस जारी है, और केवल धमनी समर्थन कर रहते हैं।
  8. दो रेशम 3-0 लट गैर absorbable संयुक्ताक्षर और distally स्थिति एक और अलग एक सेमी ≈ एक समीपस्थ डालें।
  9. धमनी अभी भी एक सर्जन की गाँठ & # का उपयोग कर समर्थन किया है, जबकि दृढ़ता से बाहर का संयुक्ताक्षर कस160, दो सिंगल समुद्री मील द्वारा पीछा किया। एक ढीला सर्जन की गाँठ के साथ समीपस्थ संयुक्ताक्षर कस लें।
  10. लगभग एक चौथाई इसके पार अनुभागीय क्षेत्र के काटने पोत के लिए एक 60 डिग्री के कोण रिश्तेदार को बाहर का संयुक्ताक्षर के पास सूक्ष्म विच्छेदन कैंची की एक जोड़ी का उपयोग पोत पर एक छोटा सा चीरा बनाओ।
    नोट: लुमेन पहुँच गया था कटौती संकेतों से उभर रक्त की एक छोटी सी बूंद।
  11. कैथेटर की चिकनी प्रविष्टि के लिए अनुमति देने के लिए पोत पर heparinized खारा ड्रिप।
    नोट: 1% lidocaine के समाधान में से एक दो बूँदें भी पोत ऐंठन को रोकने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है।
  12. जिसका टिप कस्टम एक 70 डिग्री के कोण पर मुड़े कर दिया गया है और sandpaper (यानी, परिचयकर्ता) का उपयोग कर पा - - धीरे पोत को स्थिर करने के लिए hemostats के साथ बाहर का संयुक्ताक्षर खींच जबकि पोत खोलने में एक 22 गेज सुई डालें।
  13. हटाने, लुमेन बेनकाब करने के लिए धीरे परिचयकर्ता लिफ्ट और परिचयकर्ता के तहत टी प्रकार thermocouple कैथेटर के लिए गाइडयह कैथेटर टिप सम्मिलित किया गया है एक बार।
  14. एक आरामदायक स्थिति में दूसरी ओर मिलनसार कैथेटर अग्रिम करने के लिए, जबकि एक हाथ से जगह में कैथेटर पकड़ो।
  15. समर्थन कर संदंश बंद करो और कैथेटर उन्नत है के रूप में distally उन्हें स्थानांतरित।
    नोट: किसी भी प्रतिरोध कैथेटर को आगे बढ़ाने, जबकि पूरा किया जाता है; बंद करो, वापस खींचने के लिए और एक वैकल्पिक कोण पर डालें।
  16. उतरते वक्ष महाधमनी में इसकी टिप स्थिति के लिए 8 सेमी निशान तक कैथेटर अग्रिम।
  17. समीपस्थ संयुक्ताक्षर कस और दो अतिरिक्त एकल समुद्री मील जोड़कर पोत को कैथेटर सुरक्षित।
    नोट: कैथेटर और अनजाने विस्थापन के आसपास खून बह रहा रोकने के लिए पर्याप्त तंग सुरक्षित समुद्री मील; repositioning के लिए यदि आवश्यक हो, अभी तक काफी ढीला आगे और पीछे आंदोलन को सक्षम करने के लिए।
  18. संदंश और hemostats धीरे निकालें।

2.2) सही अलिंद में PE25 कैथेटर को आगे बढ़ाने के लिए ऊरु नस वाम

  1. लिफ्ट टीवह और्विक धमनी पहले से ही धीरे संयुक्ताक्षर पर खींच और आसन्न ऊरु नस उजागर द्वारा टी प्रकार thermocouple कैथेटर के साथ cannulated।
  2. संदंश का उपयोग नस के तहत यात्रा और नस को सहारा करने के लिए उन्हें खुला।
  3. चरणों 2.1.18 के माध्यम से 2.1.8 का पालन करें लेकिन 12 सेमी चिह्नित करने के लिए (बजाय टी प्रकार thermocouple के) PE25 कैथेटर को आगे बढ़ाने का अधिकार आलिंद के पास इसकी टिप की स्थिति है।
  4. सत्यापित रक्त इसकी intraluminal अबाधित स्थिति की पुष्टि करें और heparinized खारा के 0.2 मिलीलीटर के साथ कैथेटर फ्लश करने के लिए कैथेटर के माध्यम से वापस लिया जा सकता है।
  5. एक भी सर्जन की गाँठ के साथ शल्य चीरा बंद करें।

उतरते वक्ष महाधमनी में PE25 कैथेटर को आगे बढ़ाने के लिए 2.3) राइट और्विक धमनी

  1. चरणों 2.1.18 के माध्यम से 2.1.1 पालन करें, लेकिन 8 सेमी निशान को PE25 कैथेटर को आगे बढ़ाने उतरते वक्ष महाधमनी में इसकी टिप की स्थिति है।
  2. दोहराएँ 2.2.4 और 2.2.5 कदम।

2।सही अलिंद में 3F polyurethane के बाल चिकित्सा शिरापरक कैथेटर को आगे बढ़ाने के लिए 4) सही बाहरी गले नस

  1. एक 1.5 सेमी लंबा चीरा गर्दन, बस थायराइड नीचे न खत्म होने वाली श्वासनली के अधिकार के लिए एक सेमी, के आधार पर शुरू करें।
    नोट: घायल या थायरॉयड ग्रंथि को प्रकाश में लाने से बचें।
  2. धीरे बाहरी गले नस को बेनकाब करने के लिए hemostats की एक जोड़ी का उपयोग आसपास के संयोजी ऊतक काटना।
  3. संदंश का उपयोग नस के तहत यात्रा और नस को सहारा करने के लिए उन्हें खुला।
  4. दोहराएँ नस कैथीटेराइजेशन के लिए 2.1.18 के माध्यम से 2.1.8 कदम है, लेकिन सही अलिंद में अपनी टिप स्थिति 4 सेमी चिह्नित करने के लिए 3F कैथेटर को आगे बढ़ाने के।
  5. दोहराएँ चरण 2.2.4।
  6. 3 तरह पानी निकलने की टोंटी के साथ कैथेटर कैप और बंद की स्थिति के लिए बदल जाते हैं।

3. Tracheal इंटुबैषेण

3.1) Tracheal जोखिम

  1. Hemostats का उपयोग कर के midline की ओर पहले की गर्दन चीरा का विस्तार करें।
  2. Diss ect के ट्रेकिआ बेनकाब और यह एक ऊतक स्प्रेडर का उपयोग करते हुए उजागर धारण करने के लिए cleidocephalic मांसपेशियों के sternohyoid, sternothyroid, और कर्णमूल हिस्सा कुंद तकनीक का उपयोग कर hemostats और संदंश के साथ।

3.2) Tracheal इंटुबैषेण

  1. वायु-मार्ग फैलाने के लिए जीभ बाहर खींच लें। 5F कैथेटर अग्रिम (यानी, सांस की नली प्रवेशनी) stylette पर मुहिम शुरू की। टिप ऊपर की ओर इशारा करते हुए और अग्रिम ऊपरी airway, मुखर रस्सियों, और श्वासनली में प्रवेश की मांग के साथ आगे बढ़ रहा है, जबकि मजबूती प्रवेशनी पकड़।
  2. यह उचित स्थिति में मार्गदर्शन के लिए अग्रिम के रूप में सांस की नली प्रवेशनी ट्रांस-कल्पना।
  3. प्रवेशनी से stylette निकालें और प्रवेशनी के बाहर का अंत करने के लिए एक अवरक्त सीओ 2 विश्लेषक एडाप्टर देते हैं।
  4. विशेषता capnographic तरंग पहचानने से सफल सांस की नली इंटुबैषेण की पुष्टि करें, यानी, airway के सीओ 2 समाप्ति के दौरान बढ़ रही है और प्रेरणा के दौरान कम।
बेसलाइन स्थिरता के ove_title "> 4। पुष्टिकरण

  1. सर्जिकल उपकरण और विभिन्न कैथेटर, cannulas के कनेक्शन को पूरा करें, और ईसीजी एक डाटा अधिग्रहण प्रणाली के लिए उनके इसी transducers और संकेत कंडीशनर के माध्यम से होता है, और रक्त को मापने के द्वारा हृदय उत्पादन और रक्तचाप meaurements और चयापचय स्थिरता (उचित) के आधार पर hemodynamic स्थिरता की पुष्टि गैसों और लैक्टेट स्तरों।
    नोट: कार्डियक आउटपुट सही अलिंद में कमरे के तापमान पर 0.9% NaCl के 200 μl सांस में इंजेक्शन के बाद thermocouple के माध्यम से उतरते वक्ष महाधमनी में दर्ज thermodilution वक्र के कंप्यूटर विश्लेषण द्वारा मापा जाता है।
  2. ब्याज की विभिन्न मापदंडों के लिए विशिष्ट आधारभूत संदर्भ मूल्यों को परिभाषित; जो चूहा तनाव, लिंग और वजन पर आकस्मिक भिन्न हो सकते हैं। इस के साथ साथ वर्णित चूहे मॉडल का उपयोग कर एक प्रतिनिधि प्रयोग से आधारभूत और बाद के पुनर्जीवन संदर्भ मूल्यों 1 टेबल में सूचीबद्ध हैं।

5. प्रायोगिक प्रोटोकॉल

निलय fibrillation के 5.1) प्रेरण (VF)

  1. वर्तमान (एसी) जनरेटर (0-12 मा) बारी, एक 60 हर्ट्ज के नकारात्मक पोल से जुड़ा चूहे के पेट की दीवार में एक सुई subcutaneously डालें। आंतरिक अंगों को अनजाने चोट से बचने के लिए उदर गुहा में चमड़े के नीचे ऊतक परे सुई को आगे बढ़ाने से बचें।
  2. एक precurved 0.38 मिमी आयुध डिपो के एक छोर और एसी जनरेटर के सकारात्मक पोल करने के लिए 40 सेमी (एक तार योजक) के माध्यम से लंबे समय से गाइड तार संलग्न। Polarity उलट नहीं है कि सुनिश्चित करना; अन्यथा VF प्रेरित नहीं किया जा सकता है।
  3. सही बाहरी गले नस में डाला 3F पोल्यूरिथेन कैथेटर से 3 तरह पानी निकलने की टोंटी निकालें और गाइड तार ईसीजी और महाधमनी दबाव की निगरानी, ​​जबकि सही वेंट्रिकल में प्रवेश की मांग लगभग 7 सेमी की नरम टिप अग्रिम।
    नोट: गाइड तार का सही स्थान अस्थानिक ventr द्वारा सुझाव दिया जाएगाicular धड़कता ईसीजी और महाधमनी दबाव में मनाया।
  4. 60 हर्ट्ज एसी जनरेटर चालू करें और महाधमनी दबाव की निगरानी करते हुए धीरे-धीरे वर्तमान में वृद्धि।
    ध्यान दें: एक 2.0 मा वर्तमान आम तौर पर VF के लिए प्रेरित करने के लिए पर्याप्त है, लेकिन यह सही वेंट्रिकल के लिए गाइड तार रिश्तेदार के स्थान पर आकस्मिक बदलता रहता है। टिप स्थान को मामूली समायोजन कम मौजूदा स्तरों पर VF के लिए प्रेरित करने के लिए आवश्यक हो सकता है।
  5. चित्रा 2 में दिखाया गया है, ≈ 5 सेकंड और ईसीजी में असंगठित विद्युत गतिविधि (2) उपस्थिति के भीतर ≈ 20 मिमी पारा (1) महाधमनी स्पंदन की समाप्ति और महाधमनी दबाव के घातीय क्षय का दस्तावेजीकरण द्वारा VF के शामिल होने की पुष्टि करें।
  6. VF के लिए प्रेरित करने के लिए आवश्यक लगभग आधे स्तर को पहले मिनट के बाद तीव्रता को कम करने के तीन मिनट के लिए अनवरत चालू बनाए रखें।
  7. VF के मौजूदा लागू करने की आवश्यकता के बिना जारी है कि 3 मिनट और दस्तावेज़ के बाद चालू बंद कर दें।
    नोट: छोटे दिल अनायास defibrillatefibrillatory सामने की अग्रणी धार reentry precluding आग रोक की अवधि में इसके पीछे चल अंत तक पहुँचता है जिसके तहत एक शॉर्ट सर्किट की लंबाई दी। केवल myocardial ischemia की अवधि के बाद;। यानी, पर्याप्त 3 मिनट, reentry चित्रा 2 में दिखाया गया है VF, आत्मनिर्भर हो जाता है कि अनुमति देने के लिए चालन धीमा करने के लिए।
  8. , 3 तरह पानी निकलने की टोंटी के साथ गाइड तार, फिर से टोपी कंठ कैथेटर निकालें जमीन सुई निकालने के लिए, और VF प्रकाशित पर आधारित है (यानी, 4-15 मिनट के पुनर्जीवन हस्तक्षेप शुरू करने से पहले प्रोटोकॉल की इच्छा अवधि के लिए अनायास जारी करने की अनुमति अध्ययन)।

5.2) सीने compressions और सकारात्मक दबाव वेंटिलेशन

नोट: इस प्रकाशन में विशेष रुप से छाती कंप्रेसर एक कस्टम बनाया pneumatically संचालित और इलेक्ट्रॉनिक नियंत्रित पिस्टन डिवाइस है। वेंटीलेटर एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध उपकरण है।

  1. कार्यों में वर्णित बी के लिए अनुपचारित VF के समय का उपयोगelow; वे VF के उत्प्रेरण से पहले किया जा सकता है।
  2. 2.8 सेमी और असिरूप प्रक्रिया के आधार से 4.2 सेमी छाती निशान। सीने compressions की शुरुआत के लिए इष्टतम क्षेत्र आम तौर पर इन दो अंक के बीच पाया जाता है।
  3. एक defibrillation चप्पू के लिए प्रवाहकीय जेल लागू करें और शल्य चिकित्सा बोर्ड के लिए चप्पू हासिल करने, चूहे की छाती के नीचे स्लाइड।
  4. थोड़ा छाती को छू दो छाती के निशान के बीच सीने कंप्रेसर के पिस्टन स्थिति।
  5. प्रति मिनट 200 compressions के उद्धार और 0 मिमी करने के लिए प्रारंभिक पिस्टन विस्थापन सेट करने के लिए कंप्रेसर सेट।
    नोट: संपीड़न दर 350 मिनट की एक सहज दिल की दर के साथ एक छोटे पशु के लिए उपयुक्त है -1 लेकिन इसे परिभाषित नहीं किया गया है चूहे मॉडल के लिए इष्टतम संपीड़न दर के रूप में अलग किया जा सकता है।
  6. 25 मिनट में वेंटीलेटर सेट -1 सीने सेल्सियस के लिए अनसिंक्रनाइज़्ड 1.0 के 6 मिलीग्राम / किलो का एक ज्वार की मात्रा और प्रेरित ऑक्सीजन का एक अंश (FIO 2) पहुंचानेompression।
  7. सांस की नली प्रवेशनी छोड़ने के लिए (नि: श्वसन और निःश्वास अंगों को जोड़ने के लिए एक वाई-अनुकूलक में समाप्त) वेंटीलेटर ट्यूबिंग संलग्न अवरक्त सीओ 2 विश्लेषक एडाप्टर interposed।
  8. वेंटीलेटर पर मुड़ें और धीरे-धीरे पहले मिनट के दौरान 10 मिमी 0 मिमी से संपीड़न गहराई में वृद्धि से छाती संपीड़न शुरू करते हैं। Sidewise थोड़ा पिस्टन ले जाएँ और उच्चतम महाधमनी डायस्टोलिक दबाव पैदावार एक स्थिति है कि खोजने की मांग rostrocaudal (यानी, compressions के बीच दबाव) एक दिया संपीड़न गहराई के लिए।
    नोट: संपीड़न गहराई में क्रमिक वृद्धि पुनर्जीवन संस्थान के लिए अद्वितीय है; सबसे जांचकर्ताओं अधिकतम संपीड़न गहराई के साथ शुरू करते हैं।
  9. एक लक्ष्य महाधमनी डायस्टोलिक दबाव हासिल की है, जब तक दूसरे मिनट के दौरान संपीड़न गहराई में वृद्धि जारी है।
    नोट: 24 मिमी पारा या अधिक की एक लक्ष्य महाधमनी डायस्टोलिक दबाव घटाने के बाद 20 मिमी पारा या अधिक की एक कोरोनरी छिड़काव दबाव पैदावारसही आलिंद डायस्टोलिक दबाव; इस चूहे मॉडल 4 के लिए resuscitability दहलीज करने के लिए इसी। लक्ष्य महाधमनी डायस्टोलिक दबाव - resuscitability सीमा को पार कर सकते हैं - जो अध्ययन उद्देश्य के आधार पर अन्वेषक द्वारा निर्णय लिया जाना है। फिर भी, यह छाती दीवार और intrathoracic अंगों को चोट से बचने के लिए 17 मिमी की एक संपीड़न गहराई पार करने के लिए उचित नहीं है।
  10. Defibrillation प्रयास करने से पहले वांछित अवधि के लिए सीने compressions बनाए रखें।
    नोट: छाती संपीड़न के छह मिनट के न्यूनतम सफल defibrillation 26 के लिए अनुकूल दौरे की स्थिति पैदा करने के लिए आवश्यक प्रतीत हो रहा है। हालांकि, बढ़ती अवधि के साथ, hemodynamic छाती संपीड़न गिरावट की प्रभावकारिता और ज्यादातर अध्ययनों में 6 से 10 मिनट से लेकर एक अवधि का उपयोग करें।

5.3) defibrillation

  1. एक प्रारंभिक के साथ आंतरिक defibrillation के लिए क्षमता के साथ एक व्यावसायिक रूप से उपलब्ध Biphasic तरंग defibrillator का प्रयोग करेंचूहे के लिए अनुकूलित paddles के साथ सुसज्जित 5 जम्मू के वितरित ऊर्जा,।
  2. Defibrillation चप्पू के लिए प्रवाहकीय जेल लागू करें।
  3. सीने compressions के पूर्व निर्धारित अवधि पूरा करने से पहले तुरंत defibrillator के प्रभारी।
  4. छाती संपीड़न बीच में है और दिल ईसीजी की जांच VF में रहता है सत्यापित करें।
  5. VF मौजूद है, तो 5 सेकंड के अलावा छाती दीवार के पार 5 जम्मू प्रत्येक के दो बिजली के झटके देने अप करने और महाधमनी दालों और एक मतलब महाधमनी दबाव ≥25 मिमी पारा के साथ एक विद्युत संगठित ईसीजी की वापसी के लिए निरीक्षण करते हैं।
  6. एक और 30 सेकंड या 60 सेकंड मतलब महाधमनी दबाव 25 मिमी पारा परवाह किए बिना बिजली के ताल की <अगर (विशिष्ट प्रोटोकॉल पर आकस्मिक) के लिए सीने compressions फिर से शुरू करें।
  7. विशिष्ट प्रोटोकॉल लेकिन प्रारंभिक 5 जम्मू झटके VF को समाप्त करने में विफल अगर सात जम्मू के लिए defibrillation ऊर्जा में वृद्धि पर आकस्मिक ऊपर से 5 बार के लिए 5.3.6 करने के लिए 5.3.4 से चरणों को दोहराएँ। चित्रा 3 defibrillation समर्थक दर्शाया गया हैtocol पुनर्जीवन संस्थान में इस्तेमाल किया और चित्रा 4 defibrillation चरण के दौरान एक प्रतिनिधि प्रयोग को दर्शाया गया है।
  8. VF मौजूद है केवल जब बिजली के झटके देने; अन्यथा बिजली के झटके पूर्ववर्ती बिना छाती संपीड़न को फिर से शुरू करने और हृदय स्पंदन रहित बिजली की गतिविधि या asystole में है मान।
  9. Defibrillation संपीड़न चक्र के पूरा होने (चित्रा 3) में पुनर्जीवन परिणाम तय।

5.4) के बाद पुनर्जीवन

  1. सहज परिसंचरण की वापसी के बाद -1 60 मिनट के लिए -1 25 मिनट से वेंटिलेशन की दर में वृद्धि और सहज परिसंचरण के 15 मिनट के बाद 1.0-0.5 FIO दो कम है।
  2. VF बारंबार अगर पिछले सदमे से ही ऊर्जा पर एक बिजली के झटके देने। हालांकि, VF के लिए आम तौर पर कुछ सेकंड के भीतर साइनस लय को अनायास उलट जाती है।
    नोट: VF पुनरावृत्ति शीघ्र ही reperfusion की arrhythmias के भाग के रूप में हो सकता हैसहज परिसंचरण की वापसी के बाद, लेकिन शायद ही कभी 15 मिनट से परे।
  3. अन्वेषक द्वारा निर्णय लिया विशिष्ट पद के पुनर्जीवन प्रोटोकॉल के अनुसार पशु निरीक्षण करें; इच्छामृत्यु से पहले संज्ञाहरण से वसूली के बिना तीव्र प्रयोगों में आम तौर पर 180-240 मिनट। एक ठेठ तीव्र प्रयोग के समय चित्रा 5 में दिखाया गया है।
  4. एक प्रयोग के अवैध प्रदान कर सकते हैं कि आंतरिक अंगों को कैथेटर की स्थिति और चोट करने के लिए दस्तावेज़ तीव्र प्रयोगों में शव-परीक्षा प्रदर्शन करते हैं।
  5. , सभी कैथेटर निकालें जहाजों ligate, और धातु क्लिप के साथ घावों को बंद करने और अस्तित्व के प्रयोगों में नीचे सूचीबद्ध चरणों का पालन करें।
  6. Extubate जानवर यह अनायास साँस लेने में सक्षम है प्रदान की है।
  7. पृष्ठीय लेटना से पूर्ण और बेबस स्वयं को ठीक इसका सबूत है संज्ञाहरण से वसूली के बाद एक साफ पिंजरे में पशु लौटें।
  8. इंजेक्षन 0.9% सोडियम क्लोराइड (1 मिलीग्राम / 100 ग्राम शरीर के वजन) intraperitoneally हाइपोथर्मिया और डी के जोखिम को कम करने के लिए गरमehydration।
  9. Subcutaneously चार घंटे में एक बार दैनिक अप करने के लिए 72 घंटे के लिए एक 1 मिलीग्राम / किग्रा चमड़े के नीचे खुराक द्वारा पीछा एनलजेसिया की खुराक के बाद meloxicam (2 मिलीग्राम / किग्रा) के एक चमड़े के नीचे खुराक प्रशासन।
  10. सभा को सुरक्षित वसूली के लिए साइन अप करने के लिए 48 घंटे के लिए संवर्धन के साथ अकेले जानवर और पोस्ट ऑपरेटिव केयर और निगरानी के लिए संस्थागत मानक संचालन प्रक्रिया का उपयोग करें।

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Representative Results

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यहाँ वर्णित चूहे मॉडल ने हाल ही में छाती संपीड़न और बाद के पुनर्जीवन 61 के दौरान दौरे और hemodynamic समारोह पर sarcolemmal सोडियम हाइड्रोजन एक्सचेंजर isoform 1 (Nhe-1) के दो अवरोधकों के प्रभाव की तुलना करने के लिए इस्तेमाल किया गया था। यह पहले Nhe-एक अवरोधकों सोडियम प्रेरित साइटोसोलिक और mitochondrial कैल्शियम अधिभार को सीमित करके दौरे reperfusion की चोट attenuate, और इस तरह छाती संपीड़न के दौरान बाएं निलय distensibility बनाए रखने में मदद और बाद पुनर्जीवन दौरे में शिथिलता 12 attenuate कि सूचना मिली थी। इस अध्ययन में, बड़े पैमाने पर अतीत में जांच की गई थी जिसमें Nhe-एक अवरोध करनेवाला cariporide (1 मिलीग्राम / किग्रा), 10 चूहों प्रत्येक के तीन समूहों में नए परिसर AVE4454B (1 मिलीग्राम / किग्रा) और वाहन पर नियंत्रण के साथ तुलना में था, सभी बिजली के झटके देने से पहले छाती संपीड़न के 8 मिनट के द्वारा पीछा अनुपचारित VF के 10 मिनट के अधीन है। या तो परिसर या वाहन नियंत्रण में प्रशासन के लिए बेतरतीब किया गया थातुरंत जांचकर्ताओं के साथ छाती संपीड़न शुरू करने से पहले सही आलिंद असाइनमेंट के लिए अंधा। Nhe-एक अवरोधकों के प्रभाव को व्यक्तिगत रूप से विश्लेषण किया और (यानी, नियंत्रण) के खिलाफ संयुक्त थे। चित्रा 6 में दिखाया गया है, Nhe-एक निषेध बाएं निलय distensibility के संरक्षण के साथ संगत संपीड़न की कम गहराई के साथ (26 मिमी पारा और 28 मिमी पारा के बीच) एक पूर्वनिर्धारित महाधमनी डायस्टोलिक दबाव को प्राप्त करने में सक्षम बनाया। बाएं निलय distensibility का एक सूचकांक - - कोरोनरी छिड़काव दबाव संपीड़न की गहराई (सीपीपी / गहराई अनुपात) में सूचीबद्ध किया गया था जब cariporide के साथ इलाज केवल चूहों सांख्यिकीय महत्व प्राप्त कर ली। पोस्ट-पुनर्जीवन, दोनों यौगिकों दौरे में शिथिलता ameliorated और 7 चित्र में दिखाया के रूप में इस आशय का अधिक से अधिक जीवित रहने के साथ जुड़े थे। यह cariporide इस चूहे मॉडल में हृदय की गिरफ्तारी से पुनर्जीवन के लिए AVE4454B की तुलना में अधिक प्रभावी है कि इस अध्ययन के आधार पर यह निष्कर्ष निकाला गया था।


चित्रा 1: चूहा इंस्ट्रुमेंटेशन। VF के लिए प्रेरित और हृदय पुनर्जीवन प्रदर्शन करने के लिए मॉडल में इस्तेमाल विभिन्न instrumentations और उपकरणों illustrating योजनाबद्ध VF के चूहे मॉडल के गायन और बंद छाती पुनर्जीवन। एसी = बारी वर्तमान, ईसीजी = इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम।

चित्र 2
चित्रा 2: ventricular fibrillation के प्रतिनिधि प्रेरण। ईसीजी और VF, प्रेरित करने के लिए 60 हर्ट्ज बारी वर्तमान वितरण की शुरुआत में, VF के उत्प्रेरण से पहले और तीन मिनट बाद में चालू बंद करने के बाद आधारभूत 6 मिनट में महाधमनी दबाव चित्रण प्रयोग। वर्तमान वितरण आम तौर पर मास्क नहीं रह कुरेन बंद करने के बाद देखा जाता है, जो एक 60 हर्ट्ज तरंग superimposing VF तरंग,T, दस्तावेजीकरण VF के निरंतर।

चित्र तीन
चित्रा 3: defibrillation प्रोटोकॉल। एल्गोरिथ्म जब बिजली के झटके देने के लिए मार्गदर्शन करने के लिए इस्तेमाल किया और जब बिजली के हृदय ताल और मतलब महाधमनी दबाव (एमएपी) के स्तर के आधार पर छाती संपीड़न (सीसी) को फिर से शुरू करने के लिए। VF = वेंट्रिकुलर फिब्रिलेशन, सदमे = बिजली के झटके का वितरण। संभव पुनर्जीवन परिणामों में शामिल हैं: (1) ROSC, एक नक्शा ≥40 मिमी पारा स्थायी> 5 मिनट के रूप में परिभाषित किया सहज परिसंचरण की वापसी; (2) Roca, एक महाधमनी नाड़ी दबाव के साथ एक संगठित ताल के रूप में परिभाषित हृदय गतिविधि की वापसी ≥5 मिमी पारा लेकिन नक्शा <40 मिमी पारा; (3) आग रोक VF, 5 वें चक्र के पूरा होने पर VF की दृढता के रूप में परिभाषित; (4) मटर, एक महाधमनी नाड़ी दबाव के साथ एक संगठित कार्डियक बिजली की गतिविधि के रूप में परिभाषित स्पंदन रहित बिजली की गतिविधि <5 मिमीपारा; और (5) asystole, विद्युत और यांत्रिक हृदय गतिविधि के अभाव के रूप में परिभाषित किया।

चित्रा 4
चित्रा 4: प्रतिनिधि defibrillation प्रोटोकॉल। ईसीजी, महाधमनी दबाव चित्रण प्रयोग, और छाती संपीड़न और एक अतिरिक्त चक्र के अंत में पिस्टन विस्थापन (गहराई)। दिल प्रारंभिक बिजली के झटके देने के लिए छाती संपीड़न में एक ठहराव के द्वारा पीछा VF में है, जबकि महाधमनी दबाव पर छाती संपीड़न (सीसी) के प्रभाव को दिखाया गया। सदमा, एक गुणवाला उपज इस समय तेजी से वापसी के साथ करने के लिए> 40 मिमी पारा लगातार वृद्धि हुई है जो महाधमनी दबाव> 25 मिमी पारा मतलब VF समाप्त हुई लेकिन छाती संपीड़न की बहाली उत्साह एक मतलब महाधमनी दबाव ≥25 मिमी पारा बनाए रखने में असमर्थ कमजोर हृदय की गतिविधि में हुई सहज परिसंचरण की (ROSC)।


चित्रा 5: प्रायोगिक टाइमलाइन। हस्तक्षेप और माप दिखा एक ठेठ तीव्र चूहा प्रयोग के समय। ए ओ = महाधमनी, बीजी = रक्त गैसों, सह-बैल = सह ओक्सिमेट्री, ईसीजी = इलेक्ट्रोकार्डियोग्राम, FIO 2 = प्रेरित ऑक्सीजन, लैक = लैक्टेट, आरए = सही आलिंद के अंश।

चित्रा 6
चित्रा 6: सीपीआर क्षमता पर Nhe-एक inhibitors का प्रभाव। छाती संपीड़न से पहले छाती संपीड़न (गहराई) और AVE4454B (AVE) और cariporide (सीआरपी) के साथ नियंत्रण समाधान (सी) की तुलना कोरोनरी छिड़काव दबाव और संपीड़न की गहराई (सीपीपी / गहराई) के बीच अनुपात की गहराई। NheI = एवेन्यू और सीआरपी समूहों संयुक्त। लाइन ग्राफ नियंत्रण (●) के साथ NheI (ओ) की तुलना छाती संपीड़न भर में गहराई और सीपीपी / गहराई को दर्शाती है। बी में नंबररैकेट वेंट्रिकुलर फिब्रिलेशन में शेष चूहों को निरूपित। बार रेखांकन छाती संपीड़न के अंतिम मिनट में एक ही चर को दर्शाती है। मूल्यों में SEM ± साधन हैं। † पी <0.01, ‡ पी <छात्र टी परीक्षण द्वारा नियंत्रण बनाम 0.001, एक तरह से एनोवा द्वारा नियंत्रण बनाम पी <0.05, पी <0.01, पी <0.001 एकाधिक तुलना के लिए होल्म-सिदक के परीक्षण का उपयोग कर एक तरह से एनोवा द्वारा नियंत्रण बनाम एकाधिक तुलना के लिए डन के परीक्षण का उपयोग (यह आंकड़ा राधाकृष्णन एट अल। 61 से संशोधित किया गया है)।

चित्रा 7
चित्रा 7: अस्तित्व पर Nhe-एक inhibitors का प्रभाव। Cariporide प्राप्त किया है कि चूहों में कापलान-मायर घटता (सीआरपी), AVE4454B (AVE), या वाहन नियंत्रण समाधान। सभी चूहों के लिए और केवल retu था कि उन लोगों के अधिकार पर अस्तित्व घटता बाईं तरफ दिखायासहज परिसंचरण (ROSC) की आर.एन.। अपर रेखांकन संयुक्त एवेन्यू और सीआरपी समूहों के लिए व्यक्तिगत हस्तक्षेप और नीचे रेखांकन अस्तित्व (NheI) के लिए अस्तित्व को दर्शाती पी <0.01 एकाधिक तुलना के लिए होल्म-सिदक के परीक्षण का उपयोग Gehan-Breslow विश्लेषण द्वारा नियंत्रण बनाम।पी = Gehan-Breslow विश्लेषण द्वारा नियंत्रण बनाम 0.01 (यह आंकड़ा राधाकृष्णन एट अल। 61 से संशोधित किया गया है)।

चर बेसलाइन पोस्ट-पुनर्जीवन
-5 मिनट 60 मिनट 120 मिनट 180 मिनट
तापमान (डिग्री सेल्सियस) 36.9 ± 0.3 [12] 36.9 ± 0.4 [6] 37.0 ± 0.6 [5]
मानव संसाधन (मिनट -1) 379 ± 30 334 ± 27 346 ± 21 370 ± 35
कार्डियक आउटपुट (मिलीग्राम / मिनट) 87 ± 13 48 ± 11 33 ± 11 30 ± 10
कार्डिएक इंडेक्स (मिलीग्राम / किग्रा ∙ मिनट -1) 175 ± 28 93 ± 22 65 ± 20 58 ± 19
ए ओ Sysolic दबाव (एमएमएचजी) 162 ± 15 108 ± 19 107 ± 24 102 ± 20
ए ओ डायस्टोलिक दबाव (एमएमएचजी) 130 ± 13 84 ± 13 86 ± 21 82 ± 16
ए ओ मीन दबाव (एमएमएचजी) 141 ± 13 92 ± 15 93 ± 22 89 ± 17
आरए मीन दबाव (एमएमएचजी) 0 ± 1 2 ± 1 2 ± 2 एक ± 2
अंत ज्वारीय सीओ 2 (एमएमएचजी) 37 ± 10 34 ± 14 24 ± 16 24 ± 17
पीएच, महाधमनी (इकाई) 7.40 ± 0.04 7.28 ± 0.11 7.36 ± 0.10 7.34 ± 0.08
लैक्टेट, महाधमनी (mmol / एल) 0.56 ± 0.32 5.68 ± 2.64 3.24 ± 1.63 3.38 ± 2.15
पीओ 2, महाधमनी (एमएमएचजी) 84 ± 8 178 ± 18 206 ± 9 206 ± 25
पीसीओ 2, महाधमनी (एमएमएचजी) 40 ± 6 30 ± 11 29 ± 9 24 ± 10

तालिका 1: प्रतिनिधि hemodynamic और मेटाबोलिक मूल्यों। आधारभूत मूल्यों सर्जिकल उपकरण के पूरा होने के बाद और वेंट्रिकुलर फिब्रिलेशन के शामिल होने से पहले 12 पुरुष सेवानिवृत्त ब्रीडर Sprague-Dawley चूहों में प्राप्त किया गया। इसके बाद मूल्यों के बाद पुनर्जीवन 60, 120, और 180 मिनट पर प्राप्त किया गया। कोष्ठक में संख्या के बाद पुनर्जीवन अंतराल में जीवित बने रहे कि चूहों को निरूपित। डेटा मतलब ± एसडी के रूप में दिखाया जाता है। ए ओ = महाधमनी, मानव संसाधन = दिल की दर, आरए = सही आलिंद।

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Discussion

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प्रोटोकॉल में महत्वपूर्ण कदम

प्रोटोकॉल में महत्वपूर्ण कदम उठाए हैं। महारत हासिल करते हैं, तैयारी और प्रोटोकॉल के रूप में संक्षेप में नीचे वर्णित है आगे बढ़ना। शल्य चिकित्सा की तैयारी एक एकल या कुछ प्रयास (एस) के बाद सफल सांस की नली इंटुबैषेण द्वारा पीछा किया, कम या कोई पोत ऐंठन ट्रिगर और उद्देश्य के रूप में कैथेटर सुझावों स्थिति छोटे चीरों के माध्यम से तेजी से कैथेटर को आगे बढ़ाने, शीघ्र होता है; इस प्रकार, संदर्भ मूल्यों के भीतर आधारभूत माप (तालिका 1) के साथ VF के शामिल होने के लिए प्रारंभिक pentobarbital खुराक से ≈ 90 मिनट में तैयारी को पूरा करने। VF विद्युत अग्रणी हर उदाहरण में प्रेरित किया है करने के लिए अनायास उदाहरण के> 95% में निर्बाध बिजली की उत्तेजना के तीन मिनट के बाद VF के निरंतर। छाती संपीड़न, एक महाधमनी डायस्टोलिक दबाव के दौरान ≥24 मिमी पारा और अंत ज्वारीय सीओ 2 पारा 17 मिमी की एक संपीड़न गहराई से अधिक के बिना उत्पन्न होता है ≥10 मिमीगहराई और intrathoracic अंगों घायल हुए बिना। (चित्रा 3 में दिखाया गया है जैसे,) एक defibrillation प्रोटोकॉल के कार्यान्वयन के लिए आसानी से और छाती संपीड़न में <5 सेकंड रुकावट के साथ होता है। अंत में, सहज परिसंचरण की वापसी एक 240 मिनट अस्तित्व> 40% और हृदय की गिरफ्तारी के दौरान होता है कि प्रणालीगत ऑक्सीजन घाटे का संकेत चयापचय असामान्यताएं के साथ पोस्ट-पुनर्जीवन दौरे में शिथिलता के लिए अग्रणी वर्तमान प्रोटोकॉल का उपयोग प्रयोगों या इसी तरह के लोगों की> 60% में होता है 1 टेबल पर दिखाया गया है और बचे पोस्ट-पुनर्जीवन चरण में उलट जाती है।

संशोधन और समस्या निवारण

मॉडल विशिष्ट अनुसंधान उद्देश्यों को पूरा करने के लिए अपेक्षाकृत सरल रूपांतरों के लिए अनुमति देता है, अत्यधिक बहुमुखी है। हाल ही में, PE25 आकार ट्यूबिंग का उपयोग अन्य जांचकर्ताओं द्वारा अतीत में इस्तेमाल किया गया है जो PE50 आकार ट्यूबिंग, अधिक पसंद है, और यह आसान करने के लिए अग्रिम पाया गया थादबाव माप की निष्ठा समझौता किए बिना उचित स्थिति में। बाएं वेंट्रिकल बाएं निलय समारोह 34,61 का आकलन करने के लिए या क्षेत्रीय अंग रक्त 6,55 प्रवाह को मापने के लिए microspheres के इंजेक्षन करने के लिए एक मन्या धमनी से catheterized गया सकते हैं। अधिक चुनौतीपूर्ण - - संज्ञाहरण से वसूली के बिना विशेष रूप से गंभीर प्रयोगों में, इस लेख में चित्रित तकनीक श्वासनली रक्ताधान के बजाय मौखिक के माध्यम से सीधे cannulated जा सकता है। VF के लिए प्रेरित करने के लिए अन्य तरीकों Transcutaneous विद्युत epicardium उत्तेजना 74, दिल 75 में बेहतर रग कावा के प्रवेश द्वार के लिए वर्तमान वितरण, और एक पेसिंग इलेक्ट्रोड 76 का उपयोग कर घेघा की बिजली की उत्तेजना सहित वर्णित किया गया है। छाती संपीड़न की विधि अन्य दरों और कर्तव्य चक्र में compressing, पार्श्व मजबूरी का उपयोग करते हुए अधिक से अधिक गहराई पर संपीड़न शुरू करने से अलग किया जा सकता है, और भी मार्गदर्शन तकनीक Instea का उपयोग करकेएक पिस्टन डिवाइस के डी। वेंटिलेशन भी अलग किया जा सकता है; मूल विवरण की एक जीवन रक्षक दर इस्तेमाल किया 100 मिनट -1 एक सिंक्रनाइज़: वर्तमान मॉडल 25 मिनट की एक जीवन रक्षक दर का उपयोग करता है, जबकि compressions के लिए 2 -1 compressions के लिए अनसिंक्रनाइज़्ड; एक सुरक्षित airway के स्थापित होने के बाद compressions के लिए रोक के खिलाफ सीपीआर 77 के कम जीवन रक्षक मांगों और वर्तमान नैदानिक ​​सिफारिशों के अनुरूप। वेंटिलेशन भी निष्क्रिय और airway पेटेंट 20 या ट्रेकिआ 25 में सीधे ऑक्सीजन का प्रबंध करते हुए नहीं रही है प्रदान की छाती संपीड़न द्वारा पदोन्नत किया जा सकता है। एक प्रयोग जानवर के रक्त की मात्रा को रक्त रिश्तेदार की बड़ी मात्रा को हटाने की आवश्यकता है [बी.वी. (एमएल) = 0.06 एक्स शरीर के वजन (छ) + 0.77] 78; जैसे, रक्त संग्रह के लिए microspheres के 6,55 के साथ अंग रक्त के प्रवाह को निर्धारित करने के लिए या रक्त analytes की दोहराए माप के लिए, खून एक ही सी से एक दाता चूहे से चढ़ाया जा सकता हैolony 6,55। वर्तमान विश्लेषणात्मक तकनीकों, हालांकि, छोटे नमूने और सामान्य नमक या किसी अन्य को स्वीकार कर लिया intravascular समाधान के बराबर मात्रा के प्रशासन में कई analytes की दृढ़ संकल्प छोटे रक्त नुकसान के लिए क्षतिपूर्ति की अनुमति देते हैं। मॉडल भी आम तौर पर न्यूरोमस्कुलर नाकाबंदी उत्प्रेरण और airway occluding द्वारा पूरा किया है जो गिरफ्तारी के 9 की व्यवस्था है, के रूप में श्वासावरोध अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है।

तकनीक की सीमाएं

मॉडल अंतर्निहित कोरोनरी धमनी की बीमारी का अभाव है और यह तीव्रता से कोरोनरी धमनी रोड़ा प्रेरित करने के लिए तकनीकी रूप से कठिन है; शर्तों के सबसे आम तौर पर मनुष्यों में अचानक हृदय की गिरफ्तारी के साथ जुड़े। जरूरत के VF के लिए प्रेरित करने के लिए वर्तमान आदर्श नहीं है और मायोकार्डियम के लिए संभावित चोट की चिंताओं को बढ़ा बनाए रखने के लिए। वर्तमान वितरण के स्थल पर दरअसल नाबालिग थर्मल चोट मूल अध्ययन में मान्यता प्राप्त है, और इसे कम करने के द्वारा कम किया जा सकता है कि नोट किया गया थाप्रेरित आत्मनिर्भर VF 4 के लिए आवश्यक 3 मिनट के अंतराल के दौरान न्यूनतम आवश्यकता के लिए वर्तमान। इसके अलावा, बिजली चालू unintendedly लैक्टिक एसिड के उत्पादन में योगदान कर सकता है, जो कंकाल की मांसपेशी संकुचन, चलाता है। अन्य स्तनधारियों की तुलना में चूहे दिल की कैल्शियम साइक्लिंग शरीर क्रिया विज्ञान चूहा हृदय शरीर क्रिया विज्ञान के इस पहलू पर विचार करना चाहिए सोडियम-कैल्शियम एक्सचेंजर 79, और संबंधित चिकित्सा की व्याख्या पर कम निर्भर है। संपीड़न और वेंटिलेशन की दर इंसानों में इस्तेमाल संबंधित निष्कर्षों के प्रत्यक्ष एक्सट्रपलेशन precluding कि अधिक है। सेल सुरक्षात्मक प्रभाव निष्कर्षों की व्याख्या जब यह pentobarbital अंधेरा निष्कर्षों cardioprotective प्रभाव 81 है जो inhalant एनेस्थेटिक्स की तुलना में है कि स्पष्ट नहीं है, हालांकि 81, विचार किया जाना चाहिए सहित संज्ञाहरण 80 का प्रभाव। साहित्य में रिपोर्ट के अध्ययन के अधिकांश संभव अनुभव को कम से कम करने के उद्देश्य से नर चूहों में आयोजित किया गया हैमद चक्र के भीतर अलग-अलग समय से stemming rimental confounders के। इसके अलावा काम पुनर्जीवन शरीर विज्ञान और परिणामों पर लिंग के प्रभाव का आकलन करने के लिए आवश्यक है। एक अन्य महत्वपूर्ण सीमा आनुवंशिक सामग्री (जैसे, वायरल वैक्टर और antisense oligonucleotides) की शुरूआत के माध्यम से अनुकूलित जेनेटिक इंजीनियरिंग या वयस्क जानवरों के लक्षित जीन में गड़बड़ी का सहारा होने चूहों के सापेक्ष अनुवांशिक इंजीनियर चूहों की कम उपलब्धता है।

मौजूदा / वैकल्पिक तरीकों के संबंध में तकनीक का महत्व

मॉडल सर्वश्रेष्ठ नई अवधारणाओं, नई हस्तक्षेप का पता लगाने के लिए, और अंत में मानव परीक्षण से पहले इस तरह सूअर के रूप में बड़ा पशु मॉडल में केंद्रित अध्ययन, भी शामिल है कि एक बड़ा translational रणनीति के हिस्से के रूप में मौजूदा मानदंड को चुनौती देने के लिए अनुकूल है। छोटे जानवरों (उदाहरण के लिए, चूहों) में अध्ययन VF, सीमित शल्य instrumentat उत्प्रेरण में कठिनाइयों से जटिल कर रहे हैंआयन, और दोहराव रक्त विश्लेषण precludes कि छोटे रक्त की मात्रा।

इस तकनीक के माहिर के बाद भविष्य अनुप्रयोगों या दिशा-निर्देश

चूहे मॉडल मूल रूप से अचानक हृदय की गिरफ्तारी के बाद मानव सीपीआर के विभिन्न पहलुओं को अनुकरण करने के लिए विकसित किया गया था। शुरूआत में प्रकाश डाला के रूप में, मॉडल अपने शरीर क्रिया विज्ञान, परिणामों की पारंपरिक निर्धारक, और इस लेख में संदर्भित के रूप में स्थापित किया है और उपन्यास उपचारात्मक उपायों के ज्यादातर प्रभाव सहित हृदय पुनर्जीवन के कई पहलुओं को संबोधित करने के लिए जांचकर्ताओं द्वारा इस्तेमाल किया गया है। पुनर्जीवन संस्थान पाठक को प्रेरित किया और वर्तमान पुनर्जीवन के तरीकों के साथ निराशाजनक परिणामों को देखते हुए आगे की खोज की जरूरत है कि पुनर्जीवन अनुसंधान के क्षेत्र में कई सवालों का पता करने के लिए मॉडल का उपयोग किए जाने की उम्मीद है।

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Sodium pentobarbital Sigma Aldrich P3761 http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/p3761?lang=en&region=US
Rectal thermistor BIOPAC Systems, INC TSD202A http://www.biopac.com/fast-response-thermistor
Needle electrode biopolar concentric 25 mm TP BIOPAC Systems, INC EL451 http://www.biopac.com/needle-electrode-concentric-25mm
PE25 polyethylene tubing  Solomon Scientific BPE-T25 http://www.solsci.com/products/polyethylene-pe-tubing
26GA female luer stub adapter Access Technologies LSA-26 http://www.norfolkaccess.com/needles.html
Stopcocks with luer connections; 3-way; male lock, non-sterile Cole-Parmer UX-30600-02 http://www.coleparmer.com/Product/Large_bore_3_way
_male_lock_stopcocks
_10_pack_Non_sterile/EW-30600-23
TruWave disposable pressure transducer Edwards Lifesciences PX600I  http://www.edwards.com/products/pressuremonitoring/Pages/truwavemodels.aspx?truwave=1
Type-T thermocouple Physitemp Instruments IT-18 http://www.physitemp.com/products/probesandwire/flexprobes.html
Central venous pediatric catheter  Cook Medical  C-PUM-301J https://www.cookmedical.com/product/-/catalog/display?ds=cc_pum1lp_webds
Abbocath-T subclavian I.V. catheter (14 g x 5 1/2") Hospira 453527 http://www.hospira.com/products_and_services/iv_sets/045350427
Novametrix Medical Systems, Infrared CO2 monitor Soma Technology, Inc. 7100 CO2SMO  http://www.somatechnology.com/MedicalProducts/novametrix_respironics_co2smo_
7100.asp
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Lamoureux, L., Radhakrishnan, J., Gazmuri, R. J. A Rat Model of Ventricular Fibrillation and Resuscitation by Conventional Closed-chest Technique. J. Vis. Exp. (98), e52413, doi:10.3791/52413 (2015).More

Lamoureux, L., Radhakrishnan, J., Gazmuri, R. J. A Rat Model of Ventricular Fibrillation and Resuscitation by Conventional Closed-chest Technique. J. Vis. Exp. (98), e52413, doi:10.3791/52413 (2015).

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