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Medicine

चूहा Heterotopic पेट दिल / एक मात्रा से भरी हुई विन्यास में एकल फेफड़ों प्रत्यारोपण

Published: May 29, 2015 doi: 10.3791/52418

Protocol

सभी जानवरों रखे और राष्ट्रीय और देखभाल और प्रयोगशाला पशुओं के इस्तेमाल के लिए संस्थागत दिशा निर्देशों के साथ में अनुसार के लिए परवाह कर रहे थे। इस प्रोटोकॉल के लिए आचार अनुमोदन ब्रिटिश कोलंबिया के पशु की देखभाल समिति के विश्वविद्यालय द्वारा प्रदान की गई थी। 300 के बीच वजन नर, Sprague-Dawley चूहों - 450 ग्राम इस प्रोटोकॉल के लिए इस्तेमाल किया गया।

1. दाता ऑपरेशन

  1. एक 3-तरह पानी निकलने की टोंटी से लंबे अंतःशिरा (चतुर्थ) कैथेटर ट्यूबिंग से जुड़ा एक बेलनाकार फ्लास्क में हृदय का पक्षाघात (आरटी) के लगभग 100 मिलीलीटर है। गुरुत्वाकर्षण के द्वारा हृदय का पक्षाघात से वितरण सक्षम, लगभग 80cm ऑपरेटिव सतह से ऊपर के लिए कुप्पी तरक्की के लिए एक स्टैंड का प्रयोग करें।
  2. पर्याप्त रूप से संरचनाओं कल्पना, शल्य loupes की एक जोड़ी या एक विदारक माइक्रोस्कोप का उपयोग करें।
    नोट: वर्तमान में हम 3.4 के साथ एक दूरबीन ऑपरेटिंग माइक्रोस्कोप का उपयोग करें - 21.3X बढ़ाई।
  3. एक संवेदनाहारी कक्ष में दाता प्लेस और 4 के साथ संज्ञाहरण प्रेरित - 5 isoflurane%। एक ऑपरेटिंग मंच करने के लिए चूहे स्थानांतरण और 1 के साथ नाक-कोन से संज्ञाहरण बनाए रखने - 2 isoflurane%। सूखापन को रोकने के लिए जानवर की आँखों के लिए पशु चिकित्सक मरहम लागू करें। एक 25 जी सुई के साथ midazolam (2 मिलीग्राम / किग्रा) इंट्रा-peritoneally प्रशासन।
  4. शल्य क़ैंची का उपयोग, जबड़ा को xiphisternum से दाता दाढ़ी। (बाद में चतुर्थ पहुँच के लिए) बाएं कमर के एक छोटे से क्षेत्र दाढ़ी। ऑपरेटिव सतहों के लिए एक depilating एजेंट लागू करें, लगभग 5 मिनट प्रतीक्षा करें, और धुंध का एक टुकड़ा के साथ बाल हटा दें।
  5. एक povidone आयोडीन या chlorexidine आधारित समाधान के साथ शल्य साइटों (हम केवल chlorhexidine का उपयोग करें) तैयारी। 0.5% lidocaine के subcutaneously - 0.1 के साथ incisional साइटों घुसपैठ।
  6. संवेदनाहारी गहराई और महत्वपूर्ण संकेत की निगरानी के लिए नि: शुल्क सही hindlimb छोड़ रहा है, चिपकने वाला टेप के साथ ऑपरेटिंग मंच करने के लिए forelimbs और छोड़ दिया hindlimb सुरक्षित।
  7. पेडल चुटकी द्वारा उचित संवेदनाहारी गहराई सुनिश्चित करने के बाद, का उपयोग करते हुए बाएं कमर क्रीज में एक चीरा बनानेएक 22 ब्लेड स्केलपेल। कुंद विच्छेदन के द्वारा छोड़ दिया है, आम ऊरु नस बेनकाब और इस प्रकार चतुर्थ पहुँच प्राप्त:
    1. धीरे ऊरु नस overlying ऊतक वापस लेना, और 24 जी चतुर्थ के साथ नस cannulate। खारा से भरे चतुर्थ टयूबिंग की एक छोटी लंबाई के लिए चतुर्थ कनेक्ट करें, और चिपकने वाला टेप के साथ जगह में ट्यूबिंग सुरक्षित।
      नोट: चूहों में ऊरु शिरापरक केन्युलेशन के लिए प्रक्रिया Jespersen और उनके सहयोगियों ने 14 से कहीं वर्णित है।
    2. चतुर्थ की सही स्थिति सुनिश्चित करने के लिए रक्त महाप्राण धीरे चतुर्थ टयूबिंग के लिए एक नमकीन से भरे 10 मिलीलीटर सिरिंज कनेक्ट करें, और।
    3. चतुर्थ ट्यूबिंग के माध्यम से unfractionated हेपरिन के 500 आइयू, और बाद में 3 के साथ ट्यूबिंग फ्लश - - 300 इंजेक्षन खारा के 5 मिलीलीटर।
  8. इस प्रकार के रूप अगला, दाता tracheotomize:
    1. एक 22 ब्लेड स्केलपेल का उपयोग कंठ पायदान और जबड़ा के बीच मुलायम ऊतकों में एक midline चीरा बनाओ। Metzen का उपयोग कर midline में थायरॉयड ग्रंथि के कैप्सूल का छेदनकुंद विच्छेदन का उपयोग कर बौम कैंची, और अलग अपनी पालियों।
    2. कुंद विच्छेदन का उपयोग करना, श्वासनली के पूर्वकाल सतह को बेनकाब करने के midline में गर्दन की मांसपेशियों का पट्टा अलग।
    3. दो टूक श्वासनली के चारों ओर एक परिधीय विमान काटना करने के लिए एक घुमावदार संदंश का प्रयोग करें। 4-0 रेशम टाई के साथ श्वासनली घेरना।
    4. आईरिस कैंची का प्रयोग, थायराइड उपास्थि के लिए लगभग 5 मिमी हीन, पूर्वकाल श्वासनली में एक अनुप्रस्थ चीरा बनाते हैं। धीरे सांस की नली प्रवेशनी (एक 14 जी चतुर्थ) को लागू करने और 4-0 रेशम टाई का उपयोग कर यह जगह में सुरक्षित।
    5. एक यांत्रिक वेंटीलेटर की सांस की नली प्रवेशनी कनेक्ट करें। वेंटीलेटर सर्किट के माध्यम से ऑक्सीजन और isoflurane के प्रवाह पुन: निर्देशित करें, और एक दर और इसका वजन 13 ने भविष्यवाणी की ज्वार की मात्रा में दाता हवादार।
  9. Xipisternum नीचे करने के लिए कंठ पायदान पर चीरा बढ़ा है, (एक 22 ब्लेड स्केलपेल का उपयोग) छाती के midline में एक चीरा बनाओ।
  10. Midline में बने रहनाएक हड्डी कटर का उपयोग करते हुए एक औसत sternotomy प्रदर्शन करते हैं। एक स्वयं को बनाए रखना है प्रतिकर्षक साथ उरोस्थि के किनारों वापस लेना। पेरीकार्डियम और फुफ्फुस cavities को दर्ज करें।
  11. एक thymectomy प्रदर्शन करते हैं। यह पहली बार दो टूक midline में थाइमस विभाजित है, और फिर कुंद और तेज विच्छेदन के संयोजन का उपयोग आसपास के ढांचे से अलग करने के लिए सबसे आसान है।
    नोट: थाइमस दूर बेहतर sternal किनारों से विदारक जब आंतरिक वक्ष धमनियों की मूल रूप से घायल हो सकता है। रक्तस्राव को रोकने के लिए, hemostatic क्लिप इन बिंदुओं पर थाइमस हटाने से पहले लागू किया जा सकता है।
  12. Metzenbaum कैंची का प्रयोग और / या एक तेज Lauer, अवर रग Cava (आईवीसी) से दूर वसा पेरी-caval काटना। आईवीसी inferiorly डायाफ्राम के लिए, ऊंचा cavo-आलिंद जंक्शन से वसा और संयोजी ऊतक के अपेक्षाकृत मुक्त है कि सुनिश्चित करें।
  13. एक तेज Lauer, circumferentially मुक्त बेहतर रग कावा (एसवीसी) का उपयोग करना और एक 4-0 रेशम टाई के साथ यह घेरना।
  14. अगला, काटनाआसपास के ढांचे से मुक्त वेना कावा छोड़ दिया, और proximally और distally 4-0 रेशम संबंधों के साथ यह ligate। बाएं अवजत्रुकी धमनी का पर्दाफाश करने के कावा की दरमियानी हिस्से को बांटना।
  15. Circumferentially मुक्त एक तेज Lauer का उपयोग कर महाधमनी चाप वाहिकाओं। अनामी धमनी को प्रॉक्सिमल और बाहर शल्य क्लिप लागू करें, और क्लिप के बीच विभाजित करते हैं। बाईं आम मन्या धमनी और बाएं अवजत्रुकी धमनी संयुक्त राष्ट्र के काटा छोड़ दें।
  16. इसके बाद, एक 24 जी चतुर्थ कैथेटर के साथ एसवीसी cannulate। पहले से रखा 4-0 रेशम टाई के साथ कैथेटर सुरक्षित।
  17. एक समीचीन है, लेकिन कोमल भ्रष्टाचार फसल के लिए तैयार करें।
  18. तेज कैंची का प्रयोग, मध्यपटीय सतह के लिए आईवीसी सिर्फ बेहतर विभाजित करते हैं। आस-पास के वायु-मार्ग संरचनाओं घायल नहीं कर रहे हैं, यह सुनिश्चित करना है अपने केन्युलेशन साइट के लिए एसवीसी बेहतर फूट डालो।
  19. वेंटीलेटर बंद करें और सांस की नली प्रवेशनी काट। Proximally श्वासनली आड़ा काट।
  20. संदंश के साथ transected श्वासनली समझ, और दिल को दूरऔर फेफड़ों के एन ब्लॉक। दिल फेफड़ों भ्रष्टाचार निकाल दिया जाता है के रूप में इस तेज विच्छेदन के साथ कोमल कर्षण की आवश्यकता होगी। अंतर्निहित घेघा से श्वासनली अलग करें। इसके बारे में एक लंबे हिस्से को फसल के बाद भी बरकरार है, ताकि उतरते महाधमनी घायल करने से बचें।

दिल फेफड़ों भ्रष्टाचार के 2. तैयारी

नोट: प्रक्रिया के इस भाग को पूरा करते हुए, एक सहायक प्राप्तकर्ता कृंतक anesthetizing और भ्रष्टाचार के आरोपण के लिए तैयार हो जाना चाहिए।

  1. नीचे का सामना करना पड़ दिल के पूर्वकाल सतह के साथ शल्य धुंध पर दिल फेफड़ों भ्रष्टाचार रखें। तेज विच्छेदन का उपयोग करना, पीछे एयरवेज को चोट से बचने के लिए, किसी भी अवशिष्ट घेघा को हटा दें।
  2. उतरते वक्ष महाधमनी जानें और एक 16 जी कुंद इत्तला दे दी प्रवेशनी डालें। 4-0 रेशम टाई के साथ जगह में प्रवेशनी सुरक्षित।
  3. महाधमनी चाप जहाजों का पता लगाएँ, और बाईं अवजत्रुकी धमनी के लिए एक शल्य क्लिप लागू होते हैं। संयुक्त राष्ट्र के काटा छोड़ दिया मन्या धमनी छोड़ दो उप लिएसिलसिलेवार डे-प्रसारण।
  4. 16 जी महाधमनी प्रवेशनी के लिए हृदय का पक्षाघात ट्यूबिंग जोड़ने के द्वारा हृदय का पक्षाघात की पहली खुराक प्रशासन। कैरोटिड धमनी अस्थायी रूप से हृदय का पक्षाघात की पर्याप्त वितरण सुनिश्चित करने के लिए संदंश के साथ occluded किया जाना चाहिए।
    नोट: संलग्न महाधमनी प्रवेशनी होने के लिए एक लाभ के रूप में वांछित हृदय का पक्षाघात लगातार और / या रहकर प्रशासित किया जा सकता है। 45 सेकंड - 30 से अधिक 5 मिलीलीटर boluses में 15 मिनट - रुक-रुक कर खुराक के लिए, हम आम तौर पर हृदय का पक्षाघात हर 10 पहुँचा।
  5. Metzenbaum कैंची का प्रयोग और / या एक तेज Lauer, दूर महाधमनी से पेरी-महाधमनी वसा काटना। महाधमनी अपने केन्युलेशन साइट के लिए छोड़ दिया अवजत्रुकी धमनी (डिस्टल आर्क) से वसा और संयोजी ऊतक के अपेक्षाकृत मुक्त है कि सुनिश्चित करें।
  6. इसके बाद, एक तेज Lauer का उपयोग कर छोड़ दिया mainstem श्वसनी पर्दाफाश, और 4-0 रेशम टाई के साथ proximally यह ligate। आईरिस कैंची का उपयोग संयुक्ताक्षर के लिए छोड़ दिया श्वसनी बाहर का आड़ा काट। छोड़ दिया फेफड़े ligating से एक को छोड़ दिया न्यूमोनेक्टॉमी सम्पन्न4-0 रेशम संबंधों के साथ धमनी और शिरा। संयुक्ताक्षर को बाहर का आड़ा काट और बाएं फेफड़े को हटा दें।
  7. जैसा कि ऊपर, सही ऊपरी और मध्यम पालियों के अपवाद के साथ अन्य सभी फेफड़ों की पालियों को हटा दें। Lobectomies प्रदर्शन करने की प्रक्रिया में आईवीसी को घायल करने से बचें।
  8. महाधमनी प्रवेशनी के लिए हृदय का पक्षाघात ट्यूबिंग कनेक्ट और प्राप्तकर्ता तैयार किया जा रहा है, जबकि निरंतर हृदय का पक्षाघात प्रशासन। एक बाँझ कंटेनर (जैसे, एक बीकर) में दिल फेफड़ों भ्रष्टाचार रखें।

3. प्राप्तकर्ता ऑपरेशन

  1. ऊपर, दाता आपरेशन के अनुसार प्राप्तकर्ता anesthetize। सूखापन से जानवर की आंखों की रक्षा करने के लिए पशु चिकित्सक मरहम का प्रयोग करें। पेडल चुटकी द्वारा अक्सर संज्ञाहरण की पुष्टि करें।
  2. महत्वपूर्ण संकेत है और संवेदनाहारी गहराई पर नजर रखने के लिए स्वतंत्र सही forelimb छोड़ रहा है, दाता आपरेशन के अनुसार इस समय पशु स्थिति।
  3. Xiphisternum से लिंग को पेट दाढ़ी। (बाद में चतुर्थ पहुँच के लिए) बाएं कमर के एक छोटे से क्षेत्र दाढ़ी। लागूऑपरेटिव सतहों के लिए एजेंट depilating, लगभग 5 मिनट प्रतीक्षा करें, और धुंध का एक टुकड़ा के साथ बाल हटा दें।
  4. एक povidone आयोडीन या chlorexidine आधारित समाधान के साथ शल्य साइटों तैयारी। 0.5% lidocaine के subcutaneously - 0.1 के साथ incisional साइटों घुसपैठ।
  5. Tracheotomize और इसके बाद के संस्करण के रूप में निर्देशित प्राप्तकर्ता हवादार। वैकल्पिक रूप से, नाक-शंकु संज्ञाहरण के तहत प्राप्तकर्ता बनाए रखें।
  6. जैसा कि ऊपर वर्णित ऊरु नस में एक कैथेटर का परिचय। चतुर्थ ट्यूबिंग के माध्यम से unfractionated हेपरिन के 500 आइयू, और बाद में 3 के साथ ट्यूबिंग फ्लश - - 300 इंजेक्षन खारा के 5 मिलीलीटर।
  7. लिंग के लिए xiphisternum से एक 22 ब्लेड स्केलपेल के साथ एक midline पेट चीरा बनाकर एक laparotomy प्रदर्शन करते हैं। एक स्वयं को बनाए रखना है प्रतिकर्षक का उपयोग कर पेट की दीवार वापस लेना। इसके बाद, ऊंचा और चूहे के बाईं ओर आंत वापस लेना। गर्म, खारा लथपथ धुंध में उन्हें लपेटें।
  8. तेजी से overlying पुनः के माध्यम से विदारक द्वारा आईवीसी और उदर महाधमनी का पर्दाफाशTRO-पेरिटोनियल वसा।
  9. एक घुमावदार पोत दबाना उपलब्ध है और तैयार होना है।
  10. Circumferentially proximally और distally आईवीसी और महाधमनी स्वतंत्र और 4-0 रेशम संबंधों के साथ उन्हें घेरना। इन साइटों के बीच अंतरिक्ष के 3 सेमी - लगभग 2 होना चाहिए।
  11. ध्यान से आईवीसी और महाधमनी दोनों की पर्याप्त भाग दबाना के जबड़े से ऊपर उजागर कर रहे हैं कि यह सुनिश्चित करने, घुमावदार पोत दबाना लागू होते हैं।
  12. एक नमकीन से भरे 1 मिलीलीटर सिरिंज से जुड़ा एक 25 जी सुई के साथ आईवीसी के पूर्वकाल दीवार में एक चीरा बनाओ। दाता आईवीसी छिद्र की लंबाई मैच के लिए पॉट्स कैंची से चीरा बढ़ाएँ।
  13. इसके कंटेनर से दिल फेफड़ों भ्रष्टाचार निकालें और यह हृदय का पक्षाघात से डिस्कनेक्ट। शिरापरक सम्मिलन प्रदर्शन करने के लिए एक इष्टतम स्थिति में प्राप्तकर्ता के पेट में भ्रष्टाचार रखें।
    नोट: दिल फेफड़ों भ्रष्टाचार अंततः पेट की ओर इशारा करते हुए सुप्रीम साथ, थोड़ा फेर से उन्मुख हो जाएगा कम वृत्त का चतुर्थ भाग छोड़ दिया है।
  14. एड़ी सुरक्षितऔर पैर के अंगूठे 9-0 नायलॉन सीवन के साथ सम्मिलन के समाप्त होता है। सिवनी की एक लंबी बांह से जुड़ी सुई, और बाद में करने के लिए बंधे होने के लिए सिवनी की एक छोटी अंत छोड़ रहा है, प्रत्येक के अंत में एक सुरक्षित गाँठ बाँध। हृदय का पक्षाघात की एक खुराक प्रशासन।
  15. फैशन चल रहा है, का विरोध कम सिवनी हाथ करने के लिए सीवन लाइन और टाई की पूरी एक से डेढ़। हृदय का पक्षाघात की एक खुराक प्रशासन।
  16. सीवन लाइन के अन्य आधा पूरा करें और इसे नीचे टाई। शिरापरक सम्मिलन पूरा हो गया है। हृदय का पक्षाघात की एक खुराक प्रशासन
  17. ओरिएंट पेट की ओर दिल की सर्वोच्च ओर इशारा करते हुए के साथ दिल फेफड़ों भ्रष्टाचार कम वृत्त का चतुर्थ भाग छोड़ दिया है। शिरापरक सम्मिलन kinked या नहीं मुड़ जाता है कि सुनिश्चित करें।
  18. तनाव मुक्त और संयुक्त राष्ट्र के kinked विन्यास में आईवीसी और महाधमनी anastomoses दोनों को बनाए रखने, प्राप्तकर्ता महाधमनी तक पहुँचने के लिए आवश्यक हो जाएगा कि दाता महाधमनी की लंबाई का आकलन करें।
  19. एक आईरिस कैंची के साथ (बाएं अवजत्रुकी धमनी के लिए बाहर का) उतरते महाधमनी फूट डालो।
  20. एक incisio बनाओn एक खारा से भरे 1 मिलीलीटर सिरिंज से जुड़ा एक 25 जी सुई के साथ प्राप्तकर्ता महाधमनी के पूर्वकाल दीवार में। दाता महाधमनी छिद्र की लंबाई मैच के लिए पॉट्स कैंची से चीरा बढ़ाएँ।
  21. 9-0 नायलॉन सीवन का उपयोग महाधमनी प्राप्तकर्ता को दाता महाधमनी के पैर (बेहतर पहलू एंकर)। फिर, महाधमनी के औसत दर्जे का पहलू को सुई से गुजरती हैं और फैशन चलाने में सम्मिलन का आधा पूरा करें।
  22. महाधमनी सम्मिलन की एड़ी में, सीवन लाइन (सिलाई की दिशा में एक संक्रमण) के उन्मुखीकरण रिवर्स, और फैशन चलाने में सम्मिलन के पार्श्व आधा पूरा करें।
  23. धीरे धीरे एसवीसी में चतुर्थ कैथेटर को हटाने, और एक शल्य क्लिप के साथ एसवीसी ligate।
  24. डी-हवा संयुक्त राष्ट्र के काटा बाईं आम मन्या धमनी लगाने से महाधमनी। हवा आज़ादी को खाली करने के लिए अनुमति देगा कि एक ईमानदार स्थिति में, खुले धमनी पकड़ो।
  25. संक्षेप में डी घुमावदार पोत दबाना के जबड़े खोलने के लिए और (मन्या धमनी खून बहाना करने की अनुमतिई-हवा) के लिए 2 - 3 सेकंड। पोत दबाना फिर से लागू।
  26. कैरोटिड धमनी के लिए एक शल्य क्लिप को लागू करें। घुमावदार पोत दबाना निकालें।
  27. सिवनी लाइनों पर खून बह रहा है के लिए जाँच करें। वर्तमान हैं, 9-0 नायलॉन सीवन (रक्तस्राव की गंभीरता पर निर्भर करता है) की लंबाई के साथ शल्य धुंध या मरम्मत के साथ कोमल संपीड़न लागू होते हैं।
  28. दाता दिल मिनट के भीतर की धड़कन को फिर से शुरू करना चाहिए।
  29. प्राप्तकर्ता का महत्वपूर्ण लक्षण, संज्ञाहरण की गहराई के लिए करीब ध्यान देना है, और जरूरत के रूप में मात्रा पुनर्जीवन प्रशासन।
  30. या तो, प्रयोगात्मक समापन पर निर्भर करता है कि जानवर के पेट को बंद करने और इसे संज्ञाहरण से उबरने दें, या हृदय मूल्यांकन के लिए पशु तैयार करते हैं।
    नोट: भ्रष्टाचार के आकलन के उदाहरण लोड पर निर्भर है और लोड स्वतंत्र hemodynamics के vivo उपायों, इन विट्रो Langendorff में समारोह के उपायों और काम कर दिल मोड, और (अस्तित्व सर्जरी में) एचोकर्दिओग्रफिक या एमआरआई जांच में शामिल हैं।
  31. परतीव्र टर्मिनल प्रयोगों के अंत में, जानवरों exsanguination द्वारा euthanized हैं।

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Representative Results

ऊपर वर्णित HAHLT तकनीक उच्च तकनीकी है और विस्तार। टेबल के करीब ध्यान देने की आवश्यकता पर प्रकाश डाला गया 1 असफल प्रक्रियाओं बनाम सफल के साथ जुड़े महत्वपूर्ण कारकों में से कुछ, और तकनीकी कठिनाइयों के निवारण के लिए एक गाइड के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है।

प्राप्तकर्ता महाधमनी unclamped है, के बाद भ्रष्टाचार कोरोनरी धमनियों ऑक्सीजन युक्त रक्त के साथ भरने के लिए देखा जाना चाहिए। तदनुसार, मायोकार्डियम गुलाबी और अच्छी तरह से perfused बन जाना चाहिए। तकनीकी रूप से सफल प्रयोगों में, दिल भ्रष्टाचार reperfusion के बाद शीघ्र ही हरा करने के लिए शुरू हो जाएगा। कार्यात्मक वसूली के लिए अनुमति देने के लिए 30 मिनट - भ्रष्टाचार के कम से कम 20 की अवधि के लिए (प्राप्तकर्ता आईवीसी clamped) के साथ एक उतार राज्य में छोड़ दिया जाना चाहिए। उस के बाद, भ्रष्टाचार के लदान की स्थिति प्रयोगात्मक उद्देश्य के अनुरूप बदला जा सकता है। वांछित के रूप में भ्रष्टाचार समारोह (और एक सफल परिणाम) के और अधिक मात्रात्मक उपायों नियोजित किया जा सकता है। प्रोटोकॉल में उल्लेखित है, इन विवो इन विट्रो कार्यात्मक अध्ययन, साथ ही एचोकर्दिओग्रफिक और एमआरआई जांच में। इस तरह की जानकारी उपलब्ध कराने के 1 आंकड़े और 2 में इन विट्रो आधारभूत के उदाहरण हैं और इस पद्धति के साथ तीव्रता से प्राप्त किया जा सकता है कि दबाव मात्रा डेटा-रोड़ा प्रीलोड कर सकते हैं। इन अध्ययनों से hemodynamic डेटा कार्डियक आउटपुट, स्ट्रोक मात्रा चैम्बर मात्रा, हृदय गति, इंजेक्शन फ्रैक्शन, अंत सिस्टोलिक elastance साथ जांचकर्ताओं को प्रदान करते हैं, और recruitable स्ट्रोक काम प्रीलोड कर सकते हैं। वांछित के रूप में कई अन्य मानकों, मात्रा निर्धारित किया जा सकता है।

चित्र 1
चित्रा 1. आधारभूत दबाव मात्रा डेटा। इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 1 आधारभूत प्रेस से पता चलता हैहृदय समारोह की एक में इन विट्रो काम कर दिल आकलन से ure मात्रा डेटा। EDV, अंत डायस्टोलिक मात्रा; ईडीपी, अंत डायस्टोलिक दबाव; ईएसवी, अंत सिस्टोलिक मात्रा; ईएसपी, अंत सिस्टोलिक दबाव।

चित्र 2
चित्रा 2. प्रीलोड-रोड़ा दबाव मात्रा डेटा। इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

हृदय समारोह की एक में इन विट्रो काम कर दिल आकलन से चित्रा 2 से पता चलता है प्रीलोड-रोड़ा दबाव मात्रा डेटा। EDPVR, अंत डायस्टोलिक दबाव मात्रा संबंध; ESPVR, अंत सिस्टोलिक दबाव मात्रा रिश्ता है।

सफल प्रक्रिया असफल प्रक्रिया
दाता
दाता स्थिरता स्थिर अस्थिर
तैयारी विच्छेदन कुशल, लिमिटेड अक्षम, अत्यधिक
रक्त की हानि मिनिमल अत्यधिक
टाइम explant के लिए कम से कम लम्बे समय तक
Cardioplegic गिरफ्तार तीव्र विलंबित
कलम
कुल इस्केमिक समय <90 मिनट > 90 मिनट
Cardioplegic गिरफ्तार समय-समय पर अनुरक्षित अधूरा
प्राप्तकर्ता
प्राप्तकर्ता स्थिरता स्थिर अस्थिर
तैयारी विच्छेदन दक्ष अप्रभावी
क्लैंप टाइम्स <45 मिनट > 45 मिनट
सम्मिलन समय <30 मिनट > 30 मिनट
रक्त की हानि मिनिमल अत्यधिक
भ्रष्टाचार डी प्रसारण पर्याप्त अपर्याप्त
वॉल्यूम पुनर्जीवन पर्याप्त अपर्याप्त
सफल reperfusion हाँ नहीं
स्थिर हृदय समारोह की वापसी हाँ नहीं

टेबल असफल HAHLT प्रक्रियाएं बनाम सफल 1. लक्षण।

तालिका 1 </> मजबूत सफल और असफल दाता, भ्रष्टाचार, और प्राप्तकर्ता के संचालन के साथ जुड़े कारकों के उदाहरण प्रदान करता है।

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Discussion

यहाँ वर्णित तकनीक के साथ सफलता के कई कारकों पर predicated किया जाएगा। उनके बीच की चाबी वर्दी भ्रष्टाचार ठंडा करने के साथ पूरा cardioplegic गिरफ्तारी, कुल इस्कीमिक समय कम से कम, यह सुनिश्चित करने के लिए सुरक्षित और कम से कम खून की कमी के साथ जुड़ा हुआ है कि सावधानीपूर्वक ऑपरेटिव तकनीक अपनाने, दोनों दाता और प्राप्तकर्ता जानवरों की स्थिरता सुनिश्चित करने, और पर्याप्त रूप से de-प्रसारण भ्रष्टाचार किया जाएगा। इसके बाद के संस्करण में स्वीकार किया है, तकनीक की तकनीकी जटिलता उसके प्रमुख सीमा है।

हम कई मायनों में पिछले HAHLT तकनीक उन्नत है। दाता और प्राप्तकर्ता के संचालन में वर्णित संशोधनों के एक नियंत्रित और कुशल तरीके से आवश्यक ऑपरेटिव चरणों का प्रदर्शन करने का एक साधन प्रदान करते हैं। वर्णित दौरे सुरक्षा प्रोटोकॉल इस्कीमिक अवधि के दौरान चोट को कम करने का एक आदर्श साधन है। अंतिम परिणाम ज्यामिति अनुकूलित किया गया है, जिसमें एक HAHLT भ्रष्टाचार है, चोट को कम से कम किया गया है, और आंतरिक भ्रष्टाचार समारोह से पूर्व कर दिया गया हैसंभव सबसे बड़ी हद तक सेवा की।

ऊपर वर्णित तकनीक गतिशील और संभावित पास शारीरिक निलय लोडिंग शर्तों के साथ एक HAHLT भ्रष्टाचार अर्जित करता है। तकनीक में महारत हासिल किया गया है, भ्रष्टाचार समारोह के vivo लक्षण वर्णन में पूरा प्रत्यारोपण विन्यास परमिट। बताया गया है, प्रीलोड और afterload शर्तों तीव्रता से या लंबे समय से बदला जा सकता है, और दाता फेफड़ों तीव्रता से फिर से हवादार होना हो सकता है। भ्रष्टाचार संरचना और समारोह का अध्ययन करने की क्षमता को बनाए रखना है, जबकि जांचकर्ताओं को आसानी से और मोटे तौर पर, कई चिकित्सा की स्थिति का अध्ययन करने के लिए इस मॉडल को लागू कर सकते हैं।

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Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है।

Acknowledgments

मार्क जे Kearns (चिकित्सकों और कनाडा के शल्य चिकित्सकों के रॉयल कॉलेज के माध्यम से सम्मानित किया गया) यूबीसी चिकित्सक अन्वेषक कार्यक्रम, और UBC 4YF डॉक्टरल फेलोशिप से समर्थन प्राप्त करता है।

जॉन एच बॉयड स्वास्थ्य रिसर्च स्कॉलर के लिए एक राष्ट्रीय Sanitorium एसोसिएशन और माइकल स्मिथ आधार है। CIHR के माध्यम से धन। लेखकों सेटअप और छिड़काव उपकरण के रखरखाव के साथ उनकी सहायता के लिए डॉ एम Allard और रिचर्ड Wamboldt का शुक्रिया अदा करना चाहते हैं।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Celsior Cardioplegic Soution Genzyme The solution is kept on ice throughout the procedure. We prepare our own solution, with slight modifications.
Rodent Ventilator Harvard Apparatus Model 683
Vital Sign Monitor Nonin Model 9847V Displays SpO2 and heart rate.
IV Cannulae Jelco 3063 24 - 26 G x 3/4" cannulae.
IV Tubing CareFusion MP9259-C Short-length connector tubing (18 cm).
Surgical Clips Teleflex Medical 001204 Horizon titanium ligating clips.
Sutures Ethicon, Sharpoint LA54G, AK-0107 3-0 silk reel, and 9-0 prolene suture (single-armed, DR5 needle).
Surgical Instruments Not Applicable Not Applicable The instruments used are generic, and can be purchased from any surgical supply company.

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References

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चिकित्सा अंक 99 हृदय फेफड़े प्रत्यारोपण चूहे कार्डियक सर्जरी हृदय समारोह hemodynamic माप
चूहा Heterotopic पेट दिल / एक मात्रा से भरी हुई विन्यास में एकल फेफड़ों प्रत्यारोपण
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Kearns, M. J., Wang, Y., Boyd, J. H. More

Kearns, M. J., Wang, Y., Boyd, J. H. Rat Heterotopic Abdominal Heart/Single-lung Transplantation in a Volume-loaded Configuration. J. Vis. Exp. (99), e52418, doi:10.3791/52418 (2015).

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