Protocol
पहले किसी भी जानवर की प्रक्रिया करने के लिए, संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) प्रोटोकॉल स्वीकार करना चाहिए। इस प्रोटोकॉल के मिशिगन राज्य विश्वविद्यालय IACUC द्वारा अनुमोदित किया गया था।
FITC-inulin के समाधान के 1. पूर्व प्रयोगशाला तैयारी
- सभी inulin भंग कर रहा है जब तक धीरे धीरे गर्म 20 से 70 डिग्री सेल्सियस के लिए खारा की मिलीलीटर और FITC-inulin (5 मिलीग्राम / एमएल FITC-inulin) के 100 मिलीग्राम में हलचल।
- कूल आरटी के लिए समाधान और गोजातीय सीरम albumin के 800 मिलीग्राम जोड़ने (40 मिलीग्राम / एमएल बीएसए, lyophilized पाउडर, अनिवार्य रूप से agarose जेल वैद्युतकणसंचलन से मुक्त, कम अन्तर्जीवविष, ≥98% शुद्धता globulin)।
- फिल्टर पेपर (ग्रेड 1) के साथ inulin-बीएसए समाधान फ़िल्टर। एक सिरिंज की नोक फिल्टर (0.2 माइक्रोन) के साथ एक 20 मिलीलीटर सिरिंज में फ़िल्टर्ड समाधान प्लेस और प्रकाश से बचाने के लिए पन्नी के साथ कवर किया।
2. संज्ञाहरण और सर्जरी
- संज्ञाहरण प्रेरित करने के लिए 5% isoflurane के साथ भरा एक प्रेरण कक्ष में चूहे रखें। रिकॉर्ड बीओडीY वजन (250-350 ग्राम) और प्रयोग के दौरान 37 डिग्री सेल्सियस शरीर का तापमान बनाए रखने के लिए बनाया गया एक गर्म शल्य मंच पर चूहा जगह है। धीरे पंजे से अधिक प्रयोगशाला टेप के साथ मंच करने के लिए चूहे सुरक्षित। 0.8-1.0 एल / मिनट के airflow दर पर चिकित्सा ग्रेड 100% ओ 2 के साथ 1-2% isoflurane के साथ संज्ञाहरण बनाए रखें।
- रक्तचाप और हृदय गति की निगरानी, और रक्त नमूना लेने के लिए और्विक धमनी में एक पतला कैथेटर (intravascular टिप आयुध डिपो, 2.7F) डालें।
- Inulin के निषेचन के लिए ऊरु नस में एक कैथेटर (पीई 50) डालें। 5 हे लट रेशम शल्य सिवनी 6 के साथ आसपास के ऊतकों को कैथेटर सुरक्षित।
- एक तनाव गेज दबाव transducer के लिए धमनी कैथेटर संलग्न। रिकॉर्ड रक्तचाप और वास्तविक समय में एक कंप्यूटर स्क्रीन पर डाटा अधिग्रहण सॉफ्टवेयर और प्रदर्शन का उपयोग दिल की दर। इस तकनीक वीडियो 6 पर विस्तार से प्रदर्शन किया है।
- एक suprapubic चीरा के माध्यम से मूत्राशय बेनकाब। एक छोटे से कटमूत्राशय की नोक में छेद और एक गर्मी के साथ एक प्रवेशनी (पीई-190) सम्मिलित मूत्र संग्रह के लिए मूत्राशय के अंदर टिप flared। एक पर्स-स्ट्रिंग सीवन के साथ मूत्राशय के लिए प्रवेशनी सुरक्षित।
3. मूत्र और रक्त संग्रह
- (300 ग्राम वजन एक चूहे के लिए 3 मिलीग्राम / घंटा) शरीर के वजन के 100 ग्राम प्रति 1 मिलीग्राम / घंटा का सेट प्रवाह की दर के साथ एक सिरिंज पंप में FITC-inulin के सिरिंज रखें। ऊरु नस कैथेटर के लिए सिरिंज संलग्न। Inulin के अर्क शुरू करें और एक 1-2 घंटा संतुलन अवधि अनुमति देते हैं। प्रकाश से बचाने के लिए पन्नी के साथ कवर किया सिरिंज रखें।
- मूत्र प्रवाह की दर स्थिर है और 10 मिनट की अवधि के लिए एक पूर्व तौला संग्रह शीशी में एक मूत्र का नमूना इकट्ठा करके नमूना विश्लेषण (20 μl / मिनट) के लिए पर्याप्त है कि अगर निर्धारित करते हैं। एक डिजिटल पैमाने के साथ gravimetrically मूत्र की मात्रा का निर्धारण करते हैं। एक 10 मिनट की अवधि के संग्रह के लिए एक पर्याप्त मूत्र की मात्रा 0.2 मिलीग्राम है। लगातार दो संग्रह 20 μl / मी के मूत्र प्रवाह की दर से संकेत मिलता है जब तक मूत्र के नमूने एकत्र करने के लिए जारी रखेंमें या अधिक।
- पूर्व ड्रग नमूने
- एक 20 मिनट की अवधि के दौरान एक मूत्र का नमूना ले लीजिए। मूत्र संग्रह अवधि के मध्य में धमनी कैथेटर से एक खून का नमूना (0.5 मिलीलीटर) लीजिए। 1 यू हेपरिन युक्त एक संग्रह शीशी में खून का नमूना इकट्ठा करने से पहले खारा की पूरी तरह से स्पष्ट धमनी कैथेटर के लिए सावधान रहें। रक्त धमनियों के 0.5 मिलीलीटर के संग्रह की सुविधा के लिए मात्रा चिह्नों के साथ संग्रह शीशियों का प्रयोग करें।
- रक्त (लगभग। 0.1 मिलीग्राम) के कैथेटर खाली करने के लिए हेपरिन-खारा (20 यू / एमएल) के साथ धमनी कैथेटर फ्लश। फ्लश करने के लिए आवश्यक हेपरिन-खारा की मात्रा सीमित करने के लिए संभव के रूप में धमनी कैथेटर की लंबाई के रूप में कम किया जाना चाहिए।
नोट: पतला रक्त के नमूने जीएफआर और ना और लालकृष्ण आंशिक उत्सर्जन की गलत गणना का उत्पादन - 10 मिनट रुको, और एक दूसरे प्री-दवा मूत्र और रक्त के नमूने के संग्रह को दोहराएँ।
- दो पूर्व दवा के नमूनों का संग्रह के बाद, एक मूत्रवर्धक DRU लिए प्रशासनजी, furosemide (10 मिलीग्राम / किग्रा), धमनी कैथेटर के जरिए। दवा की कैथेटर खाली करने के लिए heparinized खारा साथ धमनी कैथेटर फ्लश। धमनी कैथेटर के माध्यम से हवा के इंजेक्शन को रोकने के लिए ध्यान रखना। Furosemide इंजेक्शन के समय रिकॉर्ड।
- पोस्ट-दवा नमूने: नीचे 3 समय बिंदुओं में से प्रत्येक में एक 10 मिनट के संग्रह की अवधि के दौरान एक मूत्र का नमूना है, और मूत्र संग्रह अवधि के मध्य में एक खून का नमूना (0.5 मिलीलीटर) इकट्ठा।
- पोस्ट-ड्रग नमूना 1 के लिए - के बाद furosemide पांच मिनट इकट्ठा।
- पोस्ट-ड्रग नमूना 2 के लिए - के बाद furosemide दस मिनट इकट्ठा।
- पोस्ट-ड्रग नमूना 3 के लिए - के बाद furosemide पंद्रह मिनट इकट्ठा।
- सभी नमूनों को एकत्र किया गया है, के बाद thoracotomy और दिल को हटाने के द्वारा संस्थागत प्रक्रियाओं के अनुसार चूहे euthanize। दोनों गुर्दे निकाल दें। Decapsulate (आसपास के झिल्ली निकालने के लिए) और अतिरिक्त रक्त निकालने के लिए गुर्दे दाग। गुर्दे वजन।
- सभी gravimetrically एक डिजिटल पैमाने के साथ मूत्र नमूना संस्करणों, और रिकॉर्ड वजन के उपाय।
- एक टेबल टॉप अपकेंद्रित्र (1,800 XG) के साथ अपकेंद्रित्र पूरे रक्त के नमूने प्लाज्मा अलग करने के लिए। छोटे से लेबल शीशियों के लिए प्लाज्मा के नमूने स्थानांतरण।
- एक सोडियम पोटेशियम / विश्लेषक के साथ मूत्र और प्लाज्मा नमूनों में ना और कश्मीर सांद्रता का विश्लेषण करें।
- प्लाज्मा और मूत्र में FITC-inulin के मापन
- पूर्व दवा मूत्र पतला, और HEPES बफर (500 मिमी, 7.4 पीएच) के साथ के बाद दवा मूत्र (1:10) (1 से: 400: 200-1)।
- एक 96 अच्छी तरह से थाली (अच्छी तरह से प्रति एक नमूना) में HEPES बफर के मानक या नमूना और 60 μl के 40 μl जोड़ें और एल्यूमीनियम पन्नी के साथ कवर किया जाता है, जबकि 10 मिनट के लिए मिश्रण करने के लिए अनुमति देते हैं।
- की सांद्रता के लिए FITC-inulin के लिए एक मानक वक्र उत्पन्न 6.25, 12.5, 25, 50, 100, 200, 400 माइक्रोग्राम / एमएल (चित्रा 1)। पूर्व के साथ एक microplate रीडर का उपयोग कर नमूने और मानकों में FITC-inulin के प्रतिदीप्ति का निर्धारण करते हैंक्रमश: 485 और 538 एनएम का प्रशस्ति पत्र और उत्सर्जन तरंग दैर्ध्य।
- 4-Paramter रसद समारोह प्रतिगमन विश्लेषण करने के लिए मानकों के लिए फ्लोरोसेंट मूल्यों फ़िट। प्रतिगमन समारोह पैरामीटर प्लाज्मा और मूत्र के नमूने (1 टेबल) में FITC-inulin एकाग्रता की गणना करने के लिए इस्तेमाल कर रहे हैं।
परिणाम की 5. पोस्ट-प्रयोगशाला विश्लेषण: गणना
- (यूवी; मिलीग्राम / मिनट) मूत्र प्रवाह की दर की गणना: [मूत्र की मात्रा एकत्र (माले)] ÷ [संग्रह के समय (मिनट)]
- Glomerular निस्पंदन दर की गणना (जीएफआर; मिलीग्राम / मिनट): ÷ [प्लाज्मा inulin सान्द्र [मूत्र inulin एकाग्रता (g / एमएल) यूवी (मिलीग्राम / मिनट) x]। (G / एमएल)]
- प्लाज्मा सोडियम एकाग्रता (μmol / एमएल) एक्स जीएफआर (मिलीग्राम / मिनट): छानने का सोडियम लोड (μmol / मिनट) की गणना
- सोडियम उत्सर्जन दर (यू ना वी; μmol / मिनट) की गणना: मूत्र सोडियम एकाग्रता (μmol / एमएल) (मिलीग्राम / मिनट) यूवी x
- गणना सोडियम का आंशिक उत्सर्जन (Fe ना;%)[यू ना वी (μmol / मिनट)] ÷ [छानने सोडियम लोड (μmol / मिनट)] एक्स 100
- छानने का पोटेशियम लोड (μmol / मिनट) की गणना: प्लाज्मा पोटेशियम एकाग्रता (μmol / एमएल) जीएफआर एक्स (मिलीग्राम / मिनट)
- पोटेशियम उत्सर्जन दर (यू कश्मीर वी; μmol / मिनट) की गणना: मूत्र पोटेशियम एकाग्रता (μmol / एमएल) (मिलीग्राम / मिनट) यूवी x
- गणना पोटेशियम का आंशिक उत्सर्जन (Fe कश्मीर;%): [यू कश्मीर वी (μmol / मिनट)] ÷ [छानने पोटेशियम लोड (μmol / मिनट)] एक्स 100
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Representative Results
प्रयोगशाला प्रदर्शन में इस्तेमाल मूत्रवर्धक बहुत जल्दी औषधि प्रशासन के मिनट के भीतर वृद्धि हुई ना, कश्मीर में जिसके परिणामस्वरूप गुर्दे, और पानी के उत्सर्जन द्वारा फ़िल्टर ना और कश्मीर के पुनः अवशोषण को रोकता है जो furosemide था। इसका प्राथमिक तंत्र द्वारा, furosemide जीएफआर और ना और कश्मीर के फ़िल्टर लोड पर न्यूनतम प्रभाव होना चाहिए, लेकिन ना और लालकृष्ण का मूत्र प्रवाह, और आंशिक उत्सर्जन में वृद्धि होगी
एक anesthetized चूहे में, जीएफआर के लिए पूर्व दवा मूल्यों की औसत / मिनट, ना उत्सर्जन 0.58 μmol / मिनट (फ़िल्टर भार का 0.1%) 3.2 मिलीलीटर था, और कश्मीर उत्सर्जन उस तालिका में प्रतिनिधि परिणाम 3 शो 4.4 था μmol / मिनट (फ़िल्टर भार का 27%)। Furosemide (के बाद दवा 1), जीएफआर और ना और कश्मीर के फ़िल्टर लोड करने के बाद पांच मिनट अप्रभावित थे। हालांकि, ना की आंशिक उत्सर्जन 11.5% की वृद्धि हुई है, और कश्मीर की आंशिक उत्सर्जन संबंधित फ़िल्टर्ड भार का 63% की वृद्धि हुई। एमए की मापपी और मानव संसाधन furosemide मानचित्र और मानव संसाधन (तालिका 2) पर कम से कम प्रभाव पड़ा है कि संकेत मिलता है।
प्रयोगशाला प्रदर्शन में मूल्यांकन गुर्दे समारोह के सूचकांकों प्लाज्मा गुर्दे द्वारा फ़िल्टर किया जाता है जिसके द्वारा दर के रूप में परिभाषित किया जीएफआर थे; फ़िल्टर्ड ना और कश्मीर, ना और कश्मीर गुर्दे से छान रहे हैं जिसके द्वारा दर के रूप में परिभाषित किया गया; ना और कश्मीर गुर्दे द्वारा उत्सर्जित कर रहे हैं जिसके द्वारा दर के रूप में परिभाषित किया गया ना और कश्मीर उत्सर्जन दर; और गुर्दे द्वारा उत्सर्जित किया जाता है कि फ़िल्टर्ड ना और कश्मीर के प्रतिशत के रूप में परिभाषित किया गया ना और कश्मीर के आंशिक उत्सर्जन,
चित्रा 1:। Inulin मानक वक्र FITC प्रतिदीप्ति मूल्यों 6.25, 12.5, 25, 50, 100, 200 और 400 माइक्रोग्राम / एमएल inulin युक्त मानकों के लिए दिखाए जाते हैं। एक 4-Paramter रसद समारोह प्रतिगमन विश्लेषण सबसे फिट वक्र उत्पन्न करता है। इस वक्र से प्रतिगमन समारोह मापदंडों वित्तीय संस्था की गणना करने के लिए इस्तेमाल किया गयाप्लाज्मा और मूत्र के नमूने में टीसी inulin एकाग्रता।
| FITC-Inulin प्रतिदीप्ति | एकाग्रता | परिणाम | ||||
| मानक | 1 दोहराने | 2 दोहराने | मीन | माइक्रोग्राम / मिलीलीटर | घोला | माइक्रोग्राम / मिलीलीटर |
| रिक्त | 63.9 | 64.8 | 64.4 | 0.4 | 1 | 0.4 |
| 6.25 | 253.2 | 264.1 | 258.7 | 5.9 | 1 | 5.9 |
| 12.5 | 474.0 </ टीडी> | 491.3 | 482.7 | 12.5 | 1 | 12.5 |
| 25 | 854.8 | 881.3 | 868.1 | 24.4 | 1 | 24.4 |
| 50 | 1617.1 | 1618.0 | 1617.6 | 50.3 | 1 | 50.3 |
| 100 | 2813.1 | 2846.1 | 2829.6 | 101.3 | 1 | 101.3 |
| 200 | 4367.3 | 4588.7 | 4478.0 | 198.2 | 1 | 198.2 |
| 400 | 6258.0 | 6650.0 | 6454.0 | 401.6 | 1 | 401.6 |
| मूत्र नमूना | ||||||
| प्री-दवा 1 | 2443.9 | 2062.3 | 2253.1 | 88.5 | 200 | 17,700 |
| प्री-दवा 2 | 2266.5 | 1707.0 | 1986.8 | 76.3 | 200 | 15250 |
| पोस्ट-दवा 1 | हिंदुस्तान टाइम्स "> 1208.91391.2 | 1300.1 | 44.7 | 10 | 447 | |
| पोस्ट-दवा 2 | 2753.4 | 2120.5 | 2437.0 | 97.0 | 10 | 970 |
| पोस्ट-दवा 3 | 2888.3 | 3178.0 | 3033.2 | 124.4 | 10 | 1244 |
तालिका 1:। Inulin परख FITC-Inulin प्रतिदीप्ति मूल्यों का नमूना परिणाम रिक्त अभिकर्मक, 7 मानकों, और 5 मूत्र के नमूने के लिए दिखाए जाते हैं। मानक और नमूने दो प्रतियों में assayed और जरूरत के रूप में पतला थे। प्रत्येक नमूने के लिए औसत प्रतिदीप्ति inulin के एकाग्रता की गणना करने के लिए इस्तेमाल किया गया था। इन मूत्र के नमूने में inulin सांद्रता माप (तालिका 2) की तालिका में शामिल किए गए हैं।
तालिका 2: गुर्दे समारोह लैब प्रदर्शन के दौरान दर्ज की माप पाँच समय अवधि के दौरान दर्ज की गई चर गुर्दे समारोह प्रयोगशाला प्रदर्शन के (दो पूर्व दवा और तीन डाक-दवा) धमनी दबाव (एमएपी) मतलब है, सही और बायां गुर्दा वजन के हैं। दिल की दर (मानव संसाधन), नमूना समय, मूत्र की मात्रा, प्लाज्मा और मूत्र सोडियम (एनए), पोटेशियम (कश्मीर), और inulin सांद्रता। मूत्र inulin सांद्रता तालिका 1 में दिखाया गया inulin परख से निर्धारित किया गया है।
25table3.jpg "/>
तालिका 3:। प्रोटोकॉल धारा 5 में दिखाया गया फार्मूले का उपयोग कर दर्ज की माप से गणना गुर्दे समारोह पैरामीटर, दर्ज चर (तालिका 2) मूत्र प्रवाह की दर, केशिकागुच्छीय निस्पंदन दर (जीएफआर), जीएफआर / छ गुर्दे वजन, उत्सर्जन की दर की गणना करने के लिए इस्तेमाल कर रहे हैं दो पूर्व दवा और तीन डाक-दवा अवधि के दौरान, फ़िल्टर लोड, और सोडियम की आंशिक उत्सर्जन (एनए) और पोटेशियम (कश्मीर)।
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Discussion
चार मानदंडों को पूरा करना होगा जीएफआर माप के लिए एक उपयुक्त मार्कर: स्वतंत्र रूप से ग्लोमेर्युल्स पर फ़िल्टर किया, प्लाज्मा प्रोटीन के लिए अपार हो सकता है, और न ही अवशोषित कर लेता है और न ही नेफ्रॉन में स्रावित किया। Inulin इन मानदंडों को संतुष्ट है, जो एक फ्रुक्टोज बहुलक है। नतीजतन, inulin के गुर्दे की निकासी जीएफआर 7 को मापने के लिए स्वर्ण मानक माना जाता है। प्रदर्शन तकनीक inulin 8,9 की एक निरंतर प्रेरणा के दौरान समय पर मूत्र संग्रह का उपयोग inulin के गुर्दे की निकासी का निर्धारण करने के लिए परंपरागत दृष्टिकोण का प्रतिनिधित्व करता है। पारंपरिक inulin के माप स्पेक्ट्रोफोटोमीटर 10,11 द्वारा मापा inulin के एक मात्रात्मक वर्णमिति दृढ़ संकल्प का उत्पादन करने के लिए anthrone विधि का उपयोग किया गया है। हालांकि, मूत्र और प्लाज्मा की छोटी मात्रा में inulin की माप की सुविधा प्रदान करने के प्रयास में, inulin के 12-14 रेडियोधर्मी, और फ्लोरोसेंट लेबल 15-17 के साथ टैग कर दिया गया है। इस वीडियो को यू में प्रस्तुत प्रयोगशाला प्रदर्शनSED FITC क्योंकि मानव विकिरण जोखिम के जोखिम की कमी और FITC प्रतिदीप्ति 15 को मापने की आसानी से गुर्दे समारोह की माप के लिए inulin के लेबल।
यह लैब प्रदर्शन न्यूनतम प्रयोगशाला कौशल के साथ छात्रों को गुर्दे समारोह को मापने के लिए कैसे की अवधारणाओं को समझने प्रदान करना है। इसलिए, FITC-inulin के समाधान है, और पशुओं की शल्य चिकित्सा की तैयारी की पूर्व प्रयोगशाला तैयारी प्रदर्शन की शुरुआत करने से पहले अनुभवी तकनीशियनों द्वारा किया जाता है। छात्रों 1-2 घंटा inulin के संतुलन अवधि के अंत में प्रदर्शन के लिए पहुंचते हैं। इस समय, छात्रों के एक पूर्व प्रयोगशाला सिंहावलोकन के साथ प्रस्तुत कर रहे हैं और जानवरों पर आयोजित किया गया है कि प्रक्रियाओं के बारे में बताया। दो छात्रों को एक जानवर प्रयोग करने के लिए सौंपा है, और पहले और मूत्रवर्धक दवा के प्रशासन के बाद रक्त और मूत्र के नमूने एकत्र करने के तरीके के बारे में निर्देश दिए हैं। रक्त और मूत्र के नमूनों का विश्लेषण experie के द्वारा आयोजित किया जाता हैnced तकनीशियनों और परिणाम गुर्दे समारोह की गणना के लिए छात्रों को वितरित कर रहे हैं। परिणाम प्रदर्शन के बाद निर्धारित किया जा सकता है, जो एक के बाद प्रयोगशाला चर्चा के दौरान प्रस्तुत कर रहे हैं।
वैध प्रतिक्रियाओं का बीमा करने के लिए प्रोटोकॉल के भीतर कई महत्वपूर्ण कदम उठाए हैं। सबसे पहले, FITC inulin पूरी तरह भंग और पशुओं के प्रशासन के लिए पहले फ़िल्टर्ड किया जाना चाहिए। आदर्श रूप में, FITC inulin के अवशिष्ट अपार FITC दूर करने के लिए आरटी पर 48 घंटे के लिए पानी में dialyzed किया जाना चाहिए। दूसरे, प्लाज्मा नमूने खारा से मुक्त होना चाहिए। छात्रों को धमनी कैथेटर में खारा के सभी निष्कासित कर दिया गया है के बाद ही एक खून का नमूना एकत्र करने के निर्देश दिए हैं और केवल रक्त कैथेटर के बाहर बह रहा है। नमक के साथ पतला कर रहे हैं कि रक्त के नमूने प्लाज्मा inulin, सोडियम और पोटेशियम के लिए गलत मूल्यों प्रदान करेगा। तीसरा, मूत्र प्रवाह विश्लेषण के लिए पर्याप्त नमूना निर्माण करने के लिए स्थिर और पर्याप्त होना चाहिए। यह का एक संकेत है क्योंकि आधारभूत में एक स्थिर मूत्र प्रवाह की दर के लिए महत्वपूर्ण हैएक स्थिर प्रयोगात्मक तैयारी। मूत्र प्रवाह बहुत कम है, inulin के अर्क दर संग्रह नमूना करने के लिए पूर्व बढ़ाया जा सकता है। हालांकि, inulin के अर्क प्रयोग के दौरान निरंतर होना चाहिए, यानी, inulin के अर्क दर प्रयोग के दौरान समायोजित नहीं किया जाना चाहिए। अंत में, microplate रीडर द्वारा प्लाज्मा और मूत्र के नमूने में inulin प्रतिदीप्ति की माप एक सफल प्रयोग के लिए महत्वपूर्ण है। नमूने dilutions की आवश्यकता होती है, तो यह निर्धारित होगा microplate रीडर के विनिर्देशों के बाद से, यह inulin परख की एक परीक्षण चलाने microplate रीडर की विशिष्टताओं का अनुकूलन और कहा कि नमूना प्रतिदीप्ति मान रहे हैं सुनिश्चित करने के प्रयास में प्रयोगशाला प्रदर्शन करने से पहले आयोजित किया जा सिफारिश की है कि मानक वक्र के मध्य दूरी के भीतर।
माना जाता है सोने के मानक inulin के गुर्दे की निकासी के आधार पर गुर्दे समारोह का आकलन करते हैं, इस तकनीक जानवरों anesthetized किया जाना चाहिए क्योंकि सीमाएँ हैं, औरसंवहनी और मूत्राशय कैथेटर के साथ instrumented। Anesthethetic एजेंटों गुर्दे hemodynamics और जीएफआर 18,19 को प्रभावित करने के लिए दिखाया गया है; हालांकि isoflurane और inactin आम तौर पर होने के कारण गुर्दे 19,20 पर अपने न्यूनतम प्रभाव को गुर्दे समारोह प्रयोगों में इस्तेमाल कर रहे हैं। inulin निकासी तकनीक को भी चूहों जैसे छोटे जानवरों में निषिद्ध किया जा सकता है, जो inulin और कई खून और प्लाज्मा नमूनों की एक निरंतर प्रेरणा की आवश्यकता है। इस तकनीक के संशोधन के प्रति जागरूक जानवरों 21 में inulin के एक इंजेक्शन से प्लाज्मा निकासी की माप अनुमति देने के लिए विकसित किया गया है। इन संशोधनों को भी विश्लेषण के लिए रक्त के नमूनों की छोटी मात्रा की आवश्यकता होती है, और चूहों में गुर्दे समारोह का आकलन करने के लिए एक वैकल्पिक तरीका प्रदान करते हैं।
गुर्दे समारोह की माप के शरीर क्रिया विज्ञान, विकृति विज्ञान, विष विज्ञान, औषध विज्ञान और रोग राज्यों के अध्ययन के लिए लागू है। गुर्दे समारोह प्रदर्शन में भाग लेने वाले छात्रों को टी सीखना होगाinulin के गुर्दे की निकासी की है कि वह सोने के मानक तकनीक गुर्दे समारोह का आकलन करने के लिए। इस तकनीक के माहिर द्वारा, छात्रों गुर्दे समारोह के सिद्धांतों को समझते हैं और उन्हें अपने स्वयं के अनुसंधान के लिए तकनीक लागू करते हैं और तकनीक में संशोधनों को उनकी पढ़ाई के लिए उपयुक्त हैं, तो यह निर्धारित करने की अनुमति देगा।
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Disclosures
लेखकों वे कोई प्रतिस्पर्धा वित्तीय हितों की है कि घोषणा। राय या इसमें निहित दावे लेखक के निजी विचार कर रहे हैं और अधिकारी के रूप में या सेना के विभाग या रक्षा विभाग के विचारों को दर्शाती के रूप में लगाया जा करने के लिए नहीं कर रहे हैं।
Acknowledgments
प्रयोगशाला प्रदर्शन के लिए धन स्रोत NIGMS अनुदान था: GM077119। हम एकीकृत और अंग प्रणालियों औषध विज्ञान में लघु couse की उनके समर्थन के लिए डॉ जोसेफ आर हेवुड और डॉ पीटर Cobbett धन्यवाद। हम भी प्रयोगशाला प्रदर्शन की उसकी तकनीकी सहायता के लिए सुश्री हन्ना गार्वर धन्यवाद।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 5-0 Braided Silk Surgical Suture | Surgical Specialties Corp | SP1033 | |
| Assay Plate, 96-Well | Costar | 3922 | |
| Bovine Serum Albumin | Sigma Chemical Co | A2934-25G | |
| Centrifuge | Beckman Coulter | MicroFuge 18, 357160 | |
| Conical Sample Tubes | Dot Scientific Inc. | #711-FTG | |
| Cotton Tipped Applicators | Solon Manufacturing Co | 56200 | |
| Data Acquisition Software | ADInstruments | LabChart Pro 7.0 | |
| Digital Scale | Denver Instrument | APX-4001 | |
| FITC-Inulin | Sigma Chemical Co | F3272-1G | |
| Gauze Sponges | Covidien | 2146 | |
| Heated Surgical Bed | EZ-Anesthesia | EZ-212 | |
| Heparin | Sagnet | NDC 25021-402-10 | |
| HEPES | Sigma Chemical Co | H3375 | |
| Isoflurane | Abbott Animal Health | IsoFlo, 5260-04-05 | |
| Isoflurane Vaporizer | EZ-Anesthesia | EZ-190F | |
| Micro Dissecting Forceps | Biomedical Research Instruments Inc. | 70-1020 | |
| Microplate Reader - Fluoroskan | ThermoScientific | Ascent FL, 5210460 | |
| NOVA 5+ Sodium/Potassium Analyzer | NOVA BioMedical | 14156 | |
| Olsen-Hegar Needle Holders with Scissors | Fine Science Tools | 12002-12 | |
| PE-190 (for bladder catheter) | BD Medical | 427435 | |
| Pressure Transducer | ADInstruments | MLT1199 | |
| Pyrex Culture Tubes | Corning Inc. | 99445-12 | |
| Rat Femoral Tapered Artery Catheter | Strategic Applications Inc. | RFA-01 | |
| Salix Furosemide 5% | Intervet | #34-478 | |
| Strabismus Scissors | Fine Science Tools | 14075-11 | |
| Student Surgical Scissors | Fine Science Tools | 91402-12 | |
| Surgical Gloves | Kimberly-Clark | Sterling Nitrile Gloves | |
| Syringe pump | Razel Scientific | R99-E | |
| Tissue Forceps | Fine Science Tools | 91121-12 | |
| Tissue Scissors | George Tiemann Co | 105-420 | |
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