Protocol
NOTA: Tutte le procedure eseguite qui sono stati presentati ed approvati dalla IACUC (Office of Research Compliance) e sono state condotte seguendo le linee guida NIH. I topi utilizzati nel paradigma comportamentale di prova erano ingenui e non utilizzati per altri test. Il C57BL / 6 wild type e Knock Out topi utilizzati in questo protocollo sono stati descritti in precedenza 9 e i dati qui presentati sono da quel manoscritto.
1. Preparazione della Sala Prove e campo aperto Apparatus
- Utilizzare un'unità multipla campo aperto labirinto (OFM), composto da quattro camere di attività è stato utilizzato per questa analisi (Figura 1). Ogni camera misura 50 cm (lunghezza) x 50 cm (larghezza) x 38 cm (altezza) e si è fatto da alta densità bianco e plastica non porosa.
- Texture i pavimenti del labirinto per la trazione durante la deambulazione, mentre le pareti del labirinto erano lisce. Quadranti Maze erano completamente vuoto ai fini di questa prova. In considerazione del resto di questo protocol, un solo quadrante del labirinto sopra descritto sarà utilizzato per dimostrare la OFM.
- Pulire la camera con etanolo 95% prima dell'uso e prima prove successive per rimuovere eventuali tracce di profumo lasciate dal mouse precedente soggetto.
- Lasciare che l'etanolo di evaporare completamente prima di testare i topi. Questa operazione potrebbe richiedere 5-10 minuti tra ogni sessione di test.
- Per questa analisi, utilizzare il software SMART Video inseguimento da PANLAB / Harvard Apparatus per registrare e valutare il movimento del mouse.
NOTA: Qualsiasi commerciale telecamera di monitoraggio video e software possono essere utilizzati per seguire il soggetto di prova e valutare i risultati del labirinto campo aperto. E 'molto importante per l'utente finale di capire come calibrare ed eseguire il software utilizzato per ogni singola analisi. Indipendentemente dalla telecamera e software di monitoraggio utilizzato, i risultati migliori si ottengono quando la telecamera ed il software sono calibrati correttamente secondo le istruzioni del produttore. - Eseguire l'i testlivello na illuminata sala capace di contenere l'apparato labirinto e il computer richieste per eseguire il software. Sospendere la videocamera sopra il labirinto sia collegandolo al soffitto o utilizzando qualsiasi sistema di supporto elevata che consente l'obiettivo della fotocamera per vedere l'intera area labirinto (figura 2).
- L'amministratore umano del test, assicurarsi di avere abbastanza spazio in camera per essere completamente inosservabile dai soggetti di prova nel labirinto in modo da non influenzare il comportamento dei topi.
2. Preparare il software per misurare l'attività
- Aprire il software Video monitoraggio.
- Una volta che il software è aperto, spostare il cursore sull'opzione "tracciamento singolo soggetto" che si trova nella scheda "Data Acquisition" e solo clic per aprire questa opzione.
- Scegliere l'opzione "sfondo statico" che si trova nella parte inferiore dello schermo.
- Dopo aver scelto "sfondo statico" è scelton, è necessario utilizzare il software per prendere un'immagine del labirinto prima dell'aggiunta dei soggetti di prova. Per fare questo, spostare il cursore sul pulsante "Foto" situato nella parte inferiore dello schermo e click.
NOTA: Il software scattare una foto dello scenario senza che il soggetto di prova che verrà sottratto l'immagine scattata durante il processo di monitoraggio. Ciò comporta solo il movimento del soggetto analizzata dal software. - Verificare che l'immagine di sfondo presa sopra viene completamente rimosso dal software di monitoraggio spostando il cursore sul pulsante "Test" situato nella parte inferiore dello schermo e facendo clic una volta. Un campo bianco solido viene visualizzato se l'immagine di sfondo è completamente rimosso dall'immagine inseguimento. Se le condizioni di luce cambiano o il labirinto sono accidentalmente mossi, vedrete nere "ombre" in questo campo indicando le due immagini non perfettamente coincidenti. Per rimediare a questa situazione, è sufficiente ripetere step 2.4.
- Dopo la conferma delle impostazioni di fondo, utilizzare l'opzione Timing per configurare il modo in cui il tempo è controllato durante l'acquisizione. Per fare questo, spostare il cursore nella scheda "Configurazione" e fare clic una volta sulla voce "Tempi". Utilizzare la finestra appena aperta per immettere i parametri sperimentali.
- Per questo protocollo, ha scelto l'opzione "tempo programmato" da 10 minuti periodo di monitoraggio. Impostare "periodo di latenza" per 5 secondi per consentire all'utente il tempo di posizionare il mouse al centro del labirinto e allontanarsi prima dell'inizio del monitoraggio. Inserire il "tempo di acquisizione" di 10 min per la durata della prova. Impostare il "Stop di controllo" impostato su "Quando il tempo programmato (10 min) è finita", che spegne automaticamente la fotocamera e la funzione di monitoraggio del software.
- Spostare il cursore sul pulsante "Chiudi" dopo che tutti i tempi sono stati impostati per chiudere la finestra. Ora siete pronti per iniziare il testing procedura.
3. Gestione della Open Field Test
NOTA: Il pacchetto software utilizzato in questo protocollo permette l'inseguimento di fino a 16 topi individuali in una sola volta. Per facilitare la compilazione e come menzionato sopra, il protocollo qui discusso è per un singolo mouse utilizzando un singolo quadrante del OFM. Per le attrezzature in uso per questo protocollo, un massimo di 4 topi individuali potrebbe essere rintracciato con ogni quadrante del labirinto. Se utilizzando un labirinto multi-recinto, dopo aver piazzato il primo mouse soggetto nel suo quadrante definito, posizionare i restanti topi nel loro rispettivo quadrante labirinto per il monitoraggio di analisi. Ai fini del presente protocollo, ulteriori istruzioni sarà specifico di un singolo quadrante del labirinto.
- Portare i topi nelle loro gabbie a casa dalla loro camera alloggio nella stanza di prova. Lasciare i topi si adatti alla camera procedimento per almeno 30 minuti prima di iniziare il test.
- Rimuovere un singolo mOuse dalla gabbia di casa afferrando delicatamente la coda e posizionare il mouse in mezzo al labirinto campo aperto, mentre contemporaneamente l'attivazione del software SMART facendo un solo clic sul pulsante Start per iniziare a tracciare i movimenti del mouse. È normale che il mouse per spostare immediatamente alle pareti periferia del labirinto e la tempistica di rilascio e monitoraggio cattura del mouse dovrebbe coincidere per registrare questo movimento.
- Lasciare libera e ininterrotta del mouse soggetto durante l'rispettivo quadrante del labirinto per un singolo periodo di 10 minuti durante il quale, il software di monitoraggio registrerà movimento (Figura 3).
- Al termine del periodo di prova, prendere il topo soggetto delicatamente, rimuovendolo dal labirinto e tornare alla sua gabbia casa.
- Prima di pulire il labirinto, conta visivamente il pellet Boli fecali presenti nel labirinto e manualmente registrare i numeri per ulteriori analisi.
- Rimuovere tutti i pellets fecali e pulire tutte le macchie di minzione. Spruzzare il pavimento e le pareti del quadrante labirinto con il 95% di etanolo e pulire con un tovagliolo di carta pulito. Lasciare la soluzione di etanolo si asciughi completamente prima di testare altri topi.
- Ripetere la procedura con il prossimo mouse.
4. Misura e Analisi di comportamento durante Procedura di test
NOTA: Per la misura, tre aspetti del comportamento in campo aperto sono prontamente caratterizzate con questo protocollo (vedi la discussione). Una breve istruzioni su come accedere a queste misure nel software di monitoraggio video segue.
- Dalla schermata principale del software SMART, spostare il cursore sulla scheda "Zone" e click "Definition" per aprire il Zone Editor.
- Seguire le istruzioni dettagliate nel manuale d'uso del software SMART di non definire zone o griglie di sovrapporre sui sentieri di monitoraggio. Qui, il software è stato utilizzato per definire una griglia 5 x 5 di 10 cm quadrati che coprono il pavimento del labirinto (
- Dalla schermata principale del software SMART, spostare il cursore sulla scheda "Analysis" e solo clic per aprire la finestra di analisi dei dati.
- Spostare il cursore sulla scheda "File" e aprire il file di zona creato in precedenza.
- Spostare il cursore sulla scheda "Configurazione" e aprire l'opzione "Analisi Track". Si aprirà la finestra "Configurazione analisi singolo soggetto".
- Spostare il cursore sulla scheda "Standard" e passare il parametro "distanza percorsa" dalla casella Parametri disponibili (lato sinistro) alla casella Parametri Incluso (lato destro).
- Spostare il cursore sulla scheda "Zone Transitions" e spostare tutti i parametri appropriati per il dialogo Parametri Incluso come sopra.
- Assicurarsi che la casella "Full Track" è selezionata nella parte inferiore della finestra.
- Momentove il cursore sul pulsante OK e chiudere la finestra di configurazione di analisi singolo soggetto.
NOTA: In base all'analisi che si desidera eseguire, molte altre opzioni possono essere scelti in questa finestra di dati miniera dall'analisi. Leggere il Manuale utente dettagliata del vostro programma specifico per determinare quali parametri sono più importanti per l'analisi dei dati.
- Nella scheda File in alto a sinistra della finestra del programma, aprire la finestra singola pista soggetto e mettere un segno di spunta accanto a tutte le tracce in corso di analisi. Spostare il cursore sul pulsante segno di spunta nella parte superiore della finestra e fare clic per chiudere la finestra Traccia Explorer.
- Spostare il cursore sul pulsante "Go" nella finestra di analisi dei dati e solo clic per avviare l'analisi dei dati della traccia.
- I dati di analisi possono essere emessi sia come file di testo ASCII o può essere esportato direttamente in un foglio Excel. Utilizzare gli strumenti di uscita del programma software che si sta utilizzando per l'uscita data per uso personale.
NOTA: la distanza totale percorsa e il tempo trascorso in zone indicate verrà emesso seguendo la procedura di analisi dei dati di cui sopra. Anche in questo caso, si sottolinea che le misure per raggiungere queste misure rappresentate qui sarà diverso a seconda del software utente utilizzato. Ma i dati stessi e l'interpretazione dei risultati dovrebbero essere simili indipendente dal programma software utilizzato. E 'anche interessante notare che pregiudizi amministratore di prova viene rimosso da questo protocollo, come tutti i dati raccolti è quantificato dati misurati dal software e non l'amministratore. Quindi non vi è alcun elemento qualificabile per i dati raccolti come descritto.
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Representative Results
Il numero medio di individui per ceppo di topi testati nella maggior parte dei casi, è di circa il 20 per generare rilevanza statistica sufficiente. Tuttavia, questo numero può essere compreso nell'intervallo di 8-30 a seconda della disponibilità mouse. A seconda della misura o comparazioni richiesto, è anche favorevole utilizzare soggetti di pari età.
Il primo e forse più importante parametro specifico per misurare in campo aperto Maze è la distanza totale ambulatoriale. Mentre l'unità di misura è irrilevante ai fini di confronto, è più spesso espressa come una misura metrica (cm). Nei dati sperimentali presentati qui (Figura 5), di tipo selvaggio (WT) o normali C57BL / 6 topi mostrano simile capacità ambulatoriale ad uno specifico C57BL / 6 ceppo di topi knock-out (KO). Quando la distanza totale percorsa è simile tra i ceppi o trattamenti, ulteriori analisi dei comportamenti emotivi è semplificata perché l'attività locomotoria è effettivamente rimosso dal equazione. Se ci sono differenze significative nella capacità locomotoria dei topi testati, analizza ulteriormente quali voci di zona o il tempo trascorso in alcune zone designate del labirinto possono essere falsati a causa di inattività, invece degli effetti di deformazione o di trattamento. Esistono tecniche per tenere conto di attività locomotoria impari, ma questi sono spesso specifici per la domanda di ricerca.
Come distanza totale deambulatorio tra i due ceppi di topi è stata simile, siamo stati in grado di analizzare thigmotaxis, o la tendenza di un soggetto di rimanere vicino ai muri, nel WT contro topi KO (figura 6). Il grado di thigmotaxis è stato convalidato come misura del comportamento ansiogeno 10 nei topi. Thigmotaxis aumenta i livelli di ansia aumentano. Utilizzando il software SMART, singole zone sono stati sovrapposti sui sentieri percorsi dai topi (figura 3) e il tempo trascorso in zone interne contro zone esterne calcolati e presentati in funzione del tempo totale (10 min) a tegli labirinto. In questo caso, topi KO visualizzati comportamento ansiogeno significativamente più alto rispetto ai loro omologhi WT. Un percorso di viaggio rappresentativa può essere visto in figura 4 in cui il percorso WT topo attraversa le zone centrali del labirinto ad una frequenza molto più grande di quanto non faccia il mouse KO che rimane vicino alle pareti del labirinto anche se la distanza percorsa sia di topi è simili. Possiamo concludere che i topi KO presentano maggiore ansia comportamento associato di quanto non facciano i topi WT.
Per ulteriore supporto aumentato i livelli di ansia nei topi KO, fecale boli sinistra nel labirinto dopo il periodo di prova di 10 minuti sono stati contati dall'osservatore una volta che il soggetto è stato rimosso (Figura 13). Dopo la visione popolare che gli animali altamente emotive mostrano un aumento della defecazione, topi KO mostrano aumenti significativi fecale boli presente rispetto ai topi WT. Questo si correla con i livelli di thigmotaxis misurati nei topi KO e indica tha t i topi knock-out utilizzati in questo studio hanno mostrato una maggiore emotività e ansia rispetto alle loro controparti WT.
Figura 1. Esempio di OFM quattro quadranti. Il OFM nella foto è stato ottenuto da San Diego Instruments ed è stato utilizzato in tutte le procedure di test descritte. Dimensioni di un quadrante del labirinto sono in centimetri e ogni quadrante è identificato (Q1-Q4).
Figura 2. Esempio di vista telecamera aerea di un OFM quattro quadranti. L'immagine mostrata rappresentativa della telecamera riconosciuta dal software SMART prima di procedure di monitoraggio. Ogni quadrante è etichettato (Q1) attraverso (Q4) e dovrebbe contenere un singolo mouse per il monitoraggio.
Figura 3. Confronto tra percorsi di pista per WT e KO topi. Sono mostrati brani rappresentativi sia WT o KO topi. Ciascuna traccia rappresenta la distanza totale percorsa dal soggetto durante il periodo di tempo di 10 min del test. È indicato il punto di inizio (B) e il punto finale (E) del monitoraggio. L'esempio pista WT attraversa nella parte centro del labirinto a intervalli regolari, mentre la pista KO rimane strettamente in prossimità delle pareti del labirinto indicato aumentata thigmotaxis o comportamenti legati all'ansia.
Figura 4. Zone overlay usato per interpretare i dati di monitoraggio per thigmotaxis dalla OFM. Utilizzando il pacchetto software di analisi SMART, una serie di 10 x 10 cm zone erano identified ed utilizzato per valutare tracce soggetti. La zona esterna consisteva di 16 blocchi come identificato mentre la zona interna costituita da 9 blocchi ed è ombreggiato. Maggiore tempo trascorso nelle zone esterne del labirinto viene registrato come un aumento thigmotaxis ed è indicativo del comportamento ansia legati amplificato.
Figura 5. Distanza totale percorsa nel OFM. WT (n = 24) e KO (n = 27) i topi sono stati sottoposti al OFM e distanza totale in centimetri dei rispettivi brani sono stati combinati e analizzati statisticamente per visualizzare eventuali differenze di deambulazione. WT e KO topi eseguite in modo simile nel OFM, quando la distanza totale è stata misurata. I risultati per i dati sono stati espressi come media +/- SEM Analisi statistiche (t -test) sono state eseguite utilizzando Excel 2010 (Microsoft, Redmond WA) e SAS 9.2 (SAS Institute, Cary NC). [Dati è modified da Ramesh Babu, et al, 2008]
Figura 6. Il tempo trascorso in zone interne ed esterne del OFM. WT (n = 24) e KO (n = 27) topi sono stati sottoposti al OFM e il tempo trascorso in zone interne ed esterne del labirinto statisticamente analizzate le differenze nel topo ceppi. Il tempo trascorso nelle zone esterne del labirinto illustrate nella Figura 7 misure thigmotaxis o comportamento parete avvolgente ed è indicativo del comportamento ansia legate. Topi KO esposti misure di ansia più elevati rispetto al WT basati su thigmotaxis. I risultati per i dati sono stati espressi come media +/- SEM Analisi statistiche (t -test) sono state eseguite utilizzando Excel 2010 (Microsoft, Redmond WA) e SAS 9.2 (SAS Institute, Cary NC). P <0.05. [I dati vengono modificati da Ramesh Babu, et al, 2008]
Figura 7. fecali depositi Boli nel OFM. WT (n = 24) e KO (n = 27) i topi sono stati autorizzati a completare un test di 10 min nel OFM prima di essere rimosso dal labirinto di nuovo alle loro gabbie a casa. Dopo topi sono stati rimossi, il numero di deiezioni o depositi Boli fecali stato contato manualmente dall'osservatore. Aumento del numero di boli può essere indicativo di una maggiore ansia e l'emotività del soggetto animale. KO topi hanno mostrato un aumento di boli fecale rispetto al WT. I risultati per i dati sono stati espressi come media +/- SEM Analisi statistiche (t -test) sono state eseguite utilizzando Excel 2010 (Microsoft, Redmond WA) e SAS 9.2 (SAS Institute, Cary NC). P <0.05. [Dati originariamente pubblicato in Ramesh Babu, et al, 2008]
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Discussion
Il Campo Aperto Maze è una delle piattaforme più utilizzate in studi comportamentali su animali. Un certo numero di importanti parametri convenzionali e comportamentali 2,4 possono essere raccolti e analizzati durante l'esecuzione del OFM. Questi dati permettono al ricercatore di misurare i comportamenti che vanno dall'attività locomotoria generale di ansia legati comportamenti emotivi 8. Tuttavia, l'uso di OFM non è priva di difetti. Un problema di confusione è la vasta gamma di variabili statiche che possono essere manipolati durante qualsiasi sessione di test. Gli esempi includono il tempo, le condizioni di illuminazione e nuovi oggetti inclusione. Variabilità nella configurazione protocollo di sperimentazione e di design, che sono essenziali per sostenere un ampio spettro di applicazioni, può rendere difficile il confronto studi. Quando la variabilità soggetto, come il diverso sfondo o transgenici linee del mouse e trattamenti farmacologici sono inclusi, la difficoltà di un confronto di prova può aumentare ancora di più. Nonostante questi problemi, la OFM rimane una delle tecniche più diffuse applicate nella ricerca comportamentale roditore. Qui, discutiamo i risultati ottenuti dalla OFM e la loro analisi in quanto si riferisce ad ansia mouse e emotività.
Qui, tre aspetti del comportamento in campo aperto sono prontamente caratterizzate con questo protocollo: 1) distanza totale coperta (in cm) durante tutta la parte cronometrata della prova; 2) thigmotaxis o una misura della percentuale del tempo totale di prova 10 min che il soggetto rimane adiacente alla parete esterna del labirinto che è indicativo del comportamento ansia simili; 3) Il numero di pellet fecali (Boli) a sinistra nel quadrante dopo che il soggetto è stato rimosso viene contato. Defecazione è una misura negativamente correlata di emotività nei roditori 5 e può essere utilizzato per indicare i livelli di ansia nel soggetto mouse. Una breve istruzioni su come accedere a queste misure nel software SMART segue.
Attività locomotoria dei soggetti del test è importantediscernere prima dell'analisi dei dati OFM o per quella materia, qualsiasi animale labirinto comportamentale. Quando si confrontano diversi ceppi di topi o diversi effetti dei trattamenti farmacologici, la capacità ambulatoriale del mouse è di primaria importanza. Se la capacità locomotoria è compromessa a causa degli effetti di trattamento, quindi misurando le attività che si basano sulla capacità del soggetto di muoversi è confusa. Pertanto il primo passo in questo esperimento era di confrontare circolazione totale tra i due isolati sottoposti. Utilizzando la funzione di monitoraggio oggetto del software SMART, abbiamo misurato la distanza totale coperta ambulatoriale nel labirinto durante la durata della prova da due diversi ceppi di topi C57BL / 6 (Figura 4). Entrambi wild type (WT) e topi knock-out genetico (KO) visualizzate simile capacità ambulatoriale. Non c'era differenza statistica a distanza totale (in cm) viaggiò da una linea di topi per tutto il periodo di tempo di 10 min dell'esperimento. Aveva un ceppo mostrato una differenza significativa in deambulazione rispettol'altro, un esame più specializzato, possibilmente utilizzando altri paradigmi comportamentali, sarebbe necessario per caratterizzare la differenza. Tuttavia, in questo caso, la deambulazione dei ceppi soggetti era pari permettendo l'uso diretto di dati OFM derivato rettificati di approfondire parametri ansiolitici. Va notato qui che alcuni ricercatori hanno interpretato alta attività o aumentare il comportamento esplorativo come indice di scarsa emozionalità, mentre altri concepiscono comportamento esplorativo essere indipendente emotività 11. Si deve riconoscere che le differenze di attività locomotoria possono confondere misure emotivi 12. Tuttavia, la distanza totale ambulatoriale era simile tra i ceppi di topi usati qui, i livelli di attività dei topi sono stati separati da fattori emotività.
Allevamento comportamento consiste animali sottoposti piedi su entrambe le zampe posteriori in posizione eretta verticale. E 'considerato un comportamento esplorativo ed è stato usato comeuna misura di ansia sia nel OFM e Elevated più Maze 13. Tuttavia, non vi è alcuna chiara indicazione che l'allevamento comportamento è o ansiolitico o ansiogeno. Alcuni studi indicano un aumento allevamento è in accordo con l'aumento dei livelli di ansia nei topi, mentre altri 14 sono diminuite postulato comportamento allevamento è indicativa di una maggiore ansia 15. Così, mentre l'allevamento non è stato analizzato qui, secondo il protocollo sperimentale e parametri etologici esaminati, allevamento potrebbe essere utilizzata per discriminare i comportamenti ansia legata da comportamento semplice ambulatoriale.
E 'stato proposto che la misurazione ansia in modelli di roditori è molto più complicato rispetto all'utilizzo di un singolo parametro in un unico ambiente labirinto 16. Pertanto, l'utilizzo di più prove o misure multiple in un singolo test può rafforzare la valutazione dei risultati. Thigmotaxis o parete avvolgente comportamento è osservato nella maggior parte delle specie di roditori ed è legata ad ansia correlata esserecomporta-. E 'più probabile legata alla propensione di fondo di un roditore di evitare grandi aree aperte o zone di pericolo percepito 17,18. Indipendentemente dalla causa sottostante, thigmotaxis è un importante comportamento ansia legata che è spesso considerata il punto di partenza per le prove relative ulteriori ansia specifico 19.
Thigmotaxis nel OFM è utilizzato per valutare i trattamenti ansiolitico, ansiogeni e anche non farmacologiche. Ansia legati farmaci come il diazepam e clordiazepossido hanno evidenziato effetti significativi sul comportamento del mouse nella OFM 4 mentre gli agonisti della dopamina hanno dimostrato che i recettori della dopamina D1 e D2 sono coinvolti in effetti ansiogeni, come effetto della crescita delle trasmissioni dopaminergici 20. Ci sono anche una chiara distinzione di deformazione in risposta al comportamento ansia come mouse nella OFM 21. Ad esempio, i topi BALB / c, un ceppo di laboratorio albino razza del mouse casa comune, mostrano una maggiore risposta comportamentalea stress acuto di fare C57BL / 6 topi 22. Pertanto, la variazione basale nelle risposte tra i soggetti deve essere preso in considerazione quando si impostano i parametri associati con paradigmi di prova e scegliere quali specie da utilizzare per una particolare domanda di ricerca.
E 'anche l'opinione popolare che gli animali altamente emotive mostrano aumentata defecazione. Questa visione è stata confermata da alcuni, ma la validità di defecazione, come misura distinta di ansia è stata messa in discussione 23. Tuttavia, dato trattato originale di Hall (1934) correlare eventi defecazione con emotività nei roditori, una grande quantità di letteratura sull'argomento ha affermato questo rapporto 2. Scoperte più recenti hanno indicato che deiezioni possono effettivamente essere un utile indicatore di comportamenti legati all'ansia emozionali in periodi di prova relativamente brevi interpretato qui invece di lunghe osservazioni (30 min) dove le differenze nelle risposte sono meno chiari 21
È importante notare che il comportamento dei topi nel OFM dipende loro sensazioni tattili. Pertanto, qualsiasi danno o scarsità di baffi ai topi possono causare una diminuzione comportamento ansia legata calcolate in topi perdono il contatto tattile con le pareti del labirinto e inserire la parte centrale più facilmente 3. Esplorazione Maze può anche essere dipendenti dal cibo né acqua, illuminazione durante le prove o anche sul colore del pavimento labirinto 24. E 'importante verificare queste variabili, così come eventuali fattori di trattamento indotto, prima di interpretare i risultati OFM di comportamenti legati all'ansia. Segnalazione dettagliata di tutte le condizioni di prova in manoscritti è anche fondamentale per facilitare adeguate confronti tra studi.
Inoltre, mentre qui si discute l'uso del MDC si riferisce alla locomozione motore e emotività dei topi esaminati, OFM può anche essere usato per testare altri comportamenti such come riconoscimento di oggetti nuovi e di memoria 25. A seconda del tipo di memoria analizzata, tempo nel labirinto con un oggetto romanzo può variare da 5 min a 24 ore. La facilità e la flessibilità del labirinto nel test romanzo riconoscimento di oggetti consente la verifica della memoria a breve oa lungo termine, e possono essere utilizzati per analizzare in modo selettivo gli effetti del trattamento farmacologico acuta su una determinata fase di formazione della memoria. In conclusione, l'OFM è un test di prestazioni apicale 26. I comportamenti legati all'ansia misurati sono il cumulo dei diversi processi sottostanti comportamentali. Così, una volta che una risposta è rilevabile misurata, è spesso necessario approfondire tale risposta per identificare un difetto specifico.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Multi Unit Open Field Test | San Diego Instruments, Inc. | White 7001-0354 | Any single or multi unit open field maze can be used |
| SMART DT Tracking Software | PanLab/Harvard Apparatus | 76-0695 | Any tracking software can be utilized with this protocol |
| Sony 990x Video Camera Recorder | Sony | CCD-TRV328 | Any suitable video camera can be attached to computer for recording tracking profiles. |
References
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