Protocol
ПРИМЕЧАНИЕ: Все процедуры, выполняемые здесь были представлены и одобрены IACUC (Управление научных исследований соответствия) и были проведены в соответствии с руководствами NIH. Мыши используются в поведенческой тестирования парадигмы были наивны и не используется для других испытаний. C57BL / 6 дикого типа и Knock Out мышей используемые в настоящем Протоколе были описаны ранее 9 и данные, представленные здесь, с этой рукописи.
1. Подготовка комнату тестирования и в открытом грунте аппарата
- Используйте Многоквартирный открытом поле лабиринт (OFM), состоящий из четырех камер деятельности был использован для анализа (рисунок 1). Каждая камера измеряется 50 см (длина) х 50 см (ширина) х 38 см (высота) и был сделан из белого высокой плотности и непористого пластика.
- Текстура полы в лабиринте на тягу во время передвигаться в то время как лабиринт стены были гладкими. Лабиринт квадранта были совершенно пустыми для целей данного испытания. При рассмотрении остальной части этой протоCol, один квадрант лабиринт, описанной выше, будут использоваться для демонстрации OFM.
- Протрите камеру с 95% этанола до использования и перед последующими испытаниями, чтобы удалить любые обонятельные ключи, оставленные предыдущим темы мыши.
- Разрешить этанол полностью испариться до испытания мышей. Это может занять 5-10 минут между каждым тестирования сессии.
- Для этого анализа используют программное обеспечение SMART отслеживания видео из PanLab / Harvard аппарата для записи и оценки движения мыши.
Примечание: Любое коммерческое камеры слежения видео и программное обеспечение может быть использована для отслеживания испытуемый и оценивать результаты открытом поле лабиринта. Это очень важно для конечного пользователя, чтобы понять, как калибровать и запустить программное обеспечение, используемое для каждого отдельного анализа. Независимо от видеокамеры и слежения программного обеспечения, используемого, наилучшие результаты получаются, когда камера и программное обеспечение правильно откалиброван в соответствии с инструкциями изготовителя. - Выполните тестирования яСтандарт на освещенной комнате, способные содержать лабиринт аппарат и компьютер, необходимый для запуска программного обеспечения. Приостановить видеокамеру над лабиринтом либо присоединением его к потолку или с помощью каких-либо повышенный систему поддержки, которая позволяет объектив камеры, чтобы увидеть всю область лабиринт (рис 2).
- Как человека администратора теста, убедитесь, что у вас достаточно места в комнате, чтобы быть полностью ненаблюдаемой по испытуемых в лабиринте, чтобы не влиять на поведение мышей.
2. Подготовка программного обеспечения для измерения активности
- Откройте программное обеспечение отслеживания видео.
- После того, как программное обеспечение открыто, переместить курсор к опции «отслеживания Single-субъект», расположенный на вкладке "Сбор данных" и одним щелчком мыши, чтобы открыть эту опцию.
- Выберите опцию "статичный фон", расположенную в нижней части экрана.
- После выбора "статич" является выбралип, необходимо использовать программное обеспечение, чтобы сделать снимок лабиринта перед добавлением испытуемых. Для этого переместите курсор на кнопку "Фото", расположенной в нижней части экрана и одним щелчком мыши.
ПРИМЕЧАНИЕ: программное обеспечение будет сфотографировать сценария без испытуемого, который будет вычтен из изображения, полученного в процессе слежения. Это приводит к только движение объекта анализируются с помощью программного обеспечения. - Убедитесь, что фоновое изображение, сделанная выше полностью удаляется с помощью программного обеспечения отслеживания, перемещая курсор на кнопку «Тест», расположенную в нижней части экрана и нажав один раз. Твердое белое поле будет показано, если фоновое изображение полностью удаляется из изображения слежения. Если условия освещения изменить или лабиринт случайно удален, то вы увидите черные "тени" в этой области, указывающее, что два изображения не вполне совпадают. Чтобы исправить эту ситуацию, просто повторите Steр 2,4 выше.
- После подтверждения параметров фона, используйте опцию синхронизации настроить путь время контролируется во время приобретения. Для этого переместите курсор на вкладку "Конфигурация" и щелкните один раз по заголовку "Временные". Используйте открывшемся окне ввести экспериментальные параметры.
- Для этого протокола, выбрал вариант "запрограммированного времени", как 10-минутного периода отслеживания. Установите "Латентный период" для 5 сек, чтобы позволить пользователю время, чтобы поместить курсор в центре лабиринта и отойти до начала отслеживания. Введите "время приобретение" 10 мин на протяжении всего испытания. Установите "Стоп контроль" в положении "Когда запрограммированное время (10 мин) составляет более", который будет автоматически выключать камеру и функцию отслеживания программного обеспечения.
- Наведите курсор на кнопку "Закрыть" после все замеры были установлены, чтобы закрыть окно. Теперь вы готовы, чтобы начать тестчисле процедуру.
3. Администрация Теста открытом поле
ПРИМЕЧАНИЕ: пакет программного обеспечения, используемого в данном протоколе позволяет отслеживать до 16 отдельных мышей в одно время. Для простоты завершения и, как упоминалось выше, протокол обсуждается здесь для одной мыши с помощью одного квадранта OFM. Для оборудования, применяемого для данного протокола, максимум 4 отдельных мышей может быть прослежен, используя каждый квадрант лабиринт. Если использование лабиринт с несколькими корпуса, поставив первым субъектом мышь на определенной квадранте, поместите оставшиеся мышей в их соответствующих лабиринт квадранте для отслеживания анализа. Для целей данного протокола, дополнительно команд будет специфичные для одного квадранта в лабиринте.
- Принесите мышей в их клетках от их жилья комнаты в комнату тестирования. Разрешить мыши, чтобы акклиматизироваться к процедурной комнате в течение как минимум 30 мин до начала испытания.
- Удалить одну мУЗ от дома клетке, осторожно держа за хвост и поместите курсор в середине открытого поля лабиринт, одновременно активизируя Smart Software по однократным щелчком на кнопке Пуск, чтобы начать отслеживание движения мыши. Это нормально для мыши сразу же перейти к периферии стен лабиринта и сроках релиза и отслеживания захват мыши должны совпадать, чтобы записать это движение.
- Разрешить свободное и бесперебойное движение объекта мыши на соответствующей четверти лабиринте для одного периода 10 мин, во время которого, отслеживания программного обеспечения будет записывать движение (рис 3).
- В конце испытательного периода, забрать предмет мышь мягко, удаляя его из лабиринта и вернуть его в исходное клетке.
- Перед очисткой лабиринт, визуально подсчет фекальных Боли гранулы, присутствующие в лабиринте и вручную записывать номера для дальнейшего анализа.
- Удалить все фекальные шарики и протрите все пятна мочеиспускания, Спрей пол и стены лабиринта квадранте с 95% этанола и протрите чистой бумажной салфеткой. Разрешить раствор этанола, чтобы полностью сухой до испытания других мышей.
- Повторите процедуру со следующей мыши.
4. Измерение и анализ поведения во время процедуры тестирования
ПРИМЕЧАНИЕ: Для измерения, три аспекта поведения открытом грунте легко охарактеризовать, используя этот протокол (см обсуждение). Краткая инструкция о том, как получить доступ к этим измерений в программном обеспечении отслеживания видео ниже.
- В главном экране Smart Software, переместите курсор на "зонах" на вкладке и одним щелчком мыши "определение", чтобы открыть редактор зоны.
- Следуйте подробной инструкции в руководстве по SMART пользователя программного обеспечения вы определить зоны или сетки для наложения на путях слежения. Здесь программное обеспечение было использовано для определения 5 х 5 сетку 10 см квадратов, покрывающих пол лабиринта (
- В главном экране Smart Software, переместите курсор на вкладку "Анализ" и одним щелчком мыши, чтобы открыть окно Анализ данных.
- Наведите курсор на вкладку "Файл" и откройте файл зоны, созданный выше.
- Наведите курсор на вкладку "Конфигурация" и откройте "Track Analysis". Это откроет окно "Конфигурация Single-субъект анализа».
- Наведите курсор на вкладку "Standard" и переместите параметр "Путешествовал расстояние" от списка доступных параметров (левая сторона) к включенному в окне Параметры (правая сторона).
- Наведите курсор на вкладку "Зоны переходов" и переместить все соответствующие параметры в окне входили параметры, как указано выше.
- Убедитесь, что окно "Полное Track" проверяется в нижней части окна.
- Moве курсор на кнопку ОК и закройте Single-субъект окно настройки анализа.
ПРИМЕЧАНИЕ: В зависимости от анализа вы хотите выполнить, и многие другие опции могут быть выбраны в этом окне для добычи данных анализа. Читайте подробную инструкцию по эксплуатации в вашей конкретной программы, чтобы определить, какие параметры являются наиболее важными для анализа ваших данных.
- На вкладке Файл в верхнем левом углу окна программы, откройте единого окна при условии дорожки и поставьте галочку рядом с анализируются все треки. Подведите курсор к кнопке галочка в верхней части окна и нажмите, чтобы закрыть окно Track Explorer.
- Наведите курсор на кнопку "Go" в окне Анализ данных и одним щелчком мыши, чтобы начать анализ данных дорожки.
- Анализ данных может быть выведен либо как ASCII текстовых файлов или это может быть непосредственно экспортированы в таблицы Excel. Используйте выходные инструментов программного обеспечения, которые вы используете для вывода дата для собственного использования.
ПРИМЕЧАНИЕ: Всего пройденное расстояние и время, проведенное в указанных зонах будет выводиться после шагов анализа данных, указанных выше. Опять же, следует подчеркнуть, что шаги, чтобы достичь этих измерений представлены здесь будет отличаться в зависимости от программного обеспечения пользователя используется. Но сами данные и интерпретация результатов должна быть похожа зависит от используемого программного приложения. Стоит также отметить, что смещение администратор тест удаляется из данного протокола, как и все собранные данные количественно измеренных данных с помощью программного обеспечения, а не администратором. Таким образом, нет qualifiable элемент данных, собранных как описано выше.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Среднее количество особей на штамме мышей, испытанных в большинстве случаев примерно от 20 до получения достаточной статистической значимости. Тем не менее, это число может быть в диапазоне 8-30 в зависимости от наличия мыши. В зависимости от измерения или сравнения требуется, это также выгодно использовать соответствующего возраста предметов.
Первый и, пожалуй, самый важный специальный параметр для измерения в открытом поле лабиринт общей амбулаторно расстояние. В то время как единица измерения не имеет значения для целей сравнения, наиболее часто выражается как метрики измерения (см). В экспериментальных данных, представленных здесь (Рисунок 5), дикого типа (WT) или нормальные C57BL / 6 мышей показывают, что аналогичные амбулаторного способность к определенному нокаут-C57BL / 6 линии мышей (KO). Когда общее расстояние, пройденный похожа между штаммами или лечения, дальнейший анализ эмоциональных поведения упрощается, так как двигательная активность, эффективно удаляется из EQUAния. Если имеются существенные различия в опорно-двигательного аппарата способности испытанию мышей, дальнейший анализ, например, записи зоны и время, потраченное в некоторых выделенных зон лабиринта, могут быть искажены из-за бездеятельности вместо деформации или обработки эффектами. Методы существуют, чтобы объяснить неодинаковой двигательной активности, но они чаще всего характерные для исследовательского вопроса.
Как общее амбулаторное расстояние между двумя линиями мышей был похож, мы смогли проанализировать thigmotaxis или тенденция субъекта оставаться близко к стенам, в WT против нокаутом мышей (рис 6). Степень thigmotaxis была подтверждена в качестве меры анксиогенных поведения у мышей 10. Thigmotaxis увеличивается как уровень тревожности расти. Использование Smart Software, отдельные зоны были наложены на пути, пройденного мышей (Рисунок 3) и время, проведенное во внутренних зонах по сравнению с внешними зонами рассчитаны и представлены в виде функции от общего времени (10 мин) в тон лабиринта. В этом случае, мышей KO отображается значительно более высокую анксиогенных поведение, чем их аналоги дикого типа. Представитель путь перемещения может быть видно на фиг.4, где путь WT мыши пересекает средние участки лабиринта на гораздо большей частотой, чем это делает мышь KO, которая остается близко к стенкам лабиринта, хотя расстояние, пройденное обоих мышей похоже. Мы можем заключить из этого, что мыши KO, имеют более высокую тревогу, связанную поведение, чем сделать мышей дикого типа.
Для дальнейшей поддержки повышенный уровень тревожности у мышей KO, фекальные Боли оставили в лабиринте после тестовый период 10 мин подсчитывали наблюдателем один раз испытуемый был удален (рисунок 13). После популярную точку зрения, что высоко эмоциональные животные обладают повышенной дефекации, мыши KO демонстрируют значительный рост фекальных Боли сейчас, когда по сравнению с мышами дикого типа. Это коррелирует с уровнем thigmotaxis измеренных у мышей KO и указывает ТНА т мышей нокаут-использованные в этом исследовании показали повышенную эмоциональность и беспокойство по сравнению с их аналогами дикого типа.
Рисунок 1. Пример четырехквадрантной OFM. OFM на фото была получена из Сан-Диего инструментов и используется во всех процедурах тестирования описаны. Размеры одного квадранта лабиринта в сантиметрах и каждый квадрант идентифицируется (Q1-Q4).
Рисунок 2. Пример вид сверху камеры четырехквадрантной OFM. Изображение на экране является представителем в поле зрения камеры, признанной Smart Software до процедуры отслеживания. Каждый квадрант обозначен (Q1) по (Q4) и будет содержать одну мышь для отслеживания.
Рисунок 3. Сравнение легкой путей для WT и КО мышей. Представительства дорожки для любой WT или KO мышей показано на рисунке. Каждый трек представляет собой общее расстояние, пройденное субъекта в течение 10 мин периода времени испытания. Дело в начало (B) и конечная точка (Е) отслеживания указывается. Пример дорожки WT пересекает в центральной части лабиринта через регулярные промежутки времени, а след КО остается в тесном контакте в непосредственной близости от стенок лабиринта указано увеличена thigmotaxis или поведения, связанных с тревоги.
Рисунок 4. Зона наложения используется для интерпретации данных отслеживания для thigmotaxis из OFM. Использование пакета SMART программного обеспечения для анализа, серия 10 х 10 см зон были identified и используется для оценки предметных композиций. Внешняя зона состоит из 16 блоков, как это определено в то время как внутренняя зона состоит из 9 блоков и находится в тени. Большой время, проведенное во внешних зонах лабиринта записывается как увеличение thigmotaxis и свидетельствует усиленного поведения тревоги, связанные с.
Рисунок 5. общее расстояние, пройденное в OFM. WT (п = 24) и КО (п = 27) мышей подвергали OFM и общее расстояние в сантиметрах от их соответствующих композиций были объединены и статистически анализировали в себе какие-либо различия в ходьбе. WT и KO мышей осуществляется аналогично в OFM, когда общее расстояние измерялась. Результаты данных были выражены в виде среднего +/- SEM Статистический анализ (т-тестов) были выполнены с помощью Excel 2010 (Microsoft, Redmond WA) и SAS 9,2 (SAS Institute, Cary NC). [Данные modified от Рамеш Бабу, et.al., 2008]
Рисунок 6. Время, затраченное на внутренней и внешней зон OFM. WT (п = 24) и КО (п = 27) мышей подвергали OFM и времени, проведенного в внутренних и внешних зон лабиринт статистический анализ различий в мыши штаммы. Время, проведенное во внешних зонах лабиринта, обозначенных на рисунке 7 меры thigmotaxis или поведение стена-обниматься и свидетельствует о поведении тревоги, связанные с. Мышей KO, имели более высокий меры беспокойства, чем весу, исходя thigmotaxis. Результаты данных были выражены в виде среднего +/- SEM Статистический анализ (т-тестов) были выполнены с использованием Excel 2010 (Microsoft, Redmond WA) и SAS 9,2 (SAS Institute, Cary NC). Р <0,05. [Данные редактировался Рамеш Бабу, et.al., 2008]
Рисунок 7. Анализ кала на Boli депозиты в OFM. WT (п = 24) и КО (п = 27) мышей давали пройти тест 10 минут в OFM перед удалением его из лабиринта обратно в их клетки. После мышей были удалены, количество дефекаций или фекальных Боли отложений вручную рассчитывали наблюдателем. Увеличение числа пилюль может свидетельствовать о повышенной тревожности и эмоциональность предметной животного. КО мышей наблюдалось увеличение фекальной пилюль по сравнению с WT. Результаты данных были выражены в виде среднего +/- SEM Статистический анализ (т-тестов) были выполнены с использованием Excel 2010 (Microsoft, Redmond WA) и SAS 9,2 (SAS Institute, Cary NC). Р <0,05. [Data впервые опубликована в Рамеш Бабу, et.al., 2008]
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Открыть поле лабиринт является одним из наиболее широко используемых платформ в животных поведенческих исследований. Ряд важных традиционных и этологии параметров 2,4 могут быть собраны и проанализированы в ходе выполнения OFM. Эти данные позволяют исследователю оценить поведение, начиная от общей активности опорно-двигательного аппарата с тревогой, связанных с эмоциональными поведения 8. Тем не менее, использование OFM не без недостатков. Один озадачив вопрос Широкий диапазон статических переменных, которые могут обрабатываться в любой сессии тестирования. Примеры включают время, условия освещения и объекта включение романа. Изменчивость в экспериментальной установке протокола и дизайна, которые имеют важное значение для поддержки широкого спектра приложений, может сделать это трудно сравнивать исследования. Когда разброс объект, например, различных фоновых или трансгенные мыши линии и медикаментозное лечение включены, трудности в сравнении тестовых может увеличиться еще больше. Несмотря на эти проблемы, OFM остается одним из наиболее широко применяемых методов в грызунов поведенческих исследований. Здесь мы рассмотрим результаты, полученные от OFM и их анализ, как он относится к беспокойству мыши и эмоциональности.
Вот три аспекта поведения открытом грунте легко охарактеризовать, используя этот протокол: 1) Всего пройденное расстояние (в см) в течение всего приурочен части испытания; 2) Thigmotaxis или мерой процентов 10 мин общего времени испытания, что предмет остается рядом с наружной стенкой лабиринта, который является показателем тревожности, как поведение; 3) количество фекальных шариков (комков), оставшихся в квадранте после подлежат удаляется считается. Дефекации отрицательно связана мера эмоциональность у грызунов 5 и может быть использован, чтобы указать, уровень тревоги у субъекта мыши. Краткая инструкция о том, как получить доступ к этим измерений в Smart Software следующим образом.
Двигательная активность испытуемых важноразличить до анализа ФОМ данных или на то пошло, любого животного, поведенческой лабиринта. При сравнении различных штаммов мышей или различных эффектов лекарственной терапии, амбулаторно Способность мышиного имеет первостепенное значение. Если опорно-двигательного аппарата способность находится под угрозой из-за эффектов лечения, то измерения деятельности, которые опираются на способность субъекта двигаться посрамлен. Поэтому первый шаг в этом эксперименте было сравнить общее движение между двумя подлежащих штаммов. Использование ведения объекта особенность Smart Software, мы измерили общее амбулаторное расстояние, пройденное в лабиринте в течение срока испытания двумя различными штаммами C57BL / 6 мышей (рис 4). Как дикого типа, (WT) и генетических выбиваемые мыши (KO), демонстрировали сходное амбулаторно способности. Там не было никакой статистической разницы в общей дистанции (в см), проходимое любой линии мыши в течение 10 мин времени эксперимента в. Если бы один штамм показали значительную разницу в ходьбе сравнениюс другой стороны, более специализированное исследование, возможно, с помощью других поведенческих парадигм, потребуется, чтобы охарактеризовать различия. Тем не менее, в этом случае, передвигаться из подлежащих штаммов был равен позволяет непосредственное использование нескорректированные данные по игре полученных для дальнейшего исследования анксиолитическое параметров. Следует отметить, что некоторые исследователи интерпретировали высокую активность или увеличить исследовательское поведение в качестве индекса низкой эмоциональность, а другие себе исследовательское поведение не зависит от эмоциональность 11. Надо признать, что различия в двигательной активности может посрамить эмоциональные меры 12. Однако, как общее амбулаторное расстояние было одинаковым во всех линиях мышей, используемых здесь, уровни активности мышей были отделены от факторов эмоциональности.
Выращивание поведение состоит из предметных животных, стоящих на обеих задних лапах в вертикальном вертикальном положении. Считается, исследовательское поведение и был использован в качествемерой тревоги как в OFM и приподнятого крестообразного лабиринта 13. Тем не менее, нет никаких явных признаков воспитания поведение либо анксиолитическое или анксиогенным. Некоторые исследования свидетельствуют о повышении воспитание в согласовании с повышенным уровнем тревожности у мышей 14, а другие постулат снизился воспитания поведение свидетельствует о повышенной тревожностью 15. Таким образом, в то время выращивания не анализировали здесь, в зависимости от экспериментального протокола и параметров, рассмотренных этологическими, выращивание может быть использован для различения тревожных-сшитый поведения от простой амбулаторной поведения.
Было предложено, что измерительный беспокойство в моделях грызунов намного сложнее, чем при использовании одного параметра в единой среде лабиринт 16. Таким образом, с помощью нескольких тестов или несколько мер в одном тесте может усилить оценку результатов. Thigmotaxis или настенный обнимать поведение наблюдается в большинстве видов грызунов и связан с тревогой, связанной бытьhaviors. Это, скорее всего, связаны с основной склонности грызуна, чтобы избежать больших открытых областей или областей, воспринимаемой угрозы 17,18. Независимо от основной причины, thigmotaxis является важным тревогу связаны поведение, которое часто считается отправной точкой для дальнейшего конкретных тревогу, связанную с тестов 19.
Thigmotaxis в OFM используется для оценки анксиолитическое, анксиогенные и даже не-фармакологические методы лечения. Тревожные, связанные лекарственные средства, такие как диазепам и хлордиазепоксид показали значительное воздействие на поведение мыши в то время как OFM 4 агонисты дофамина, показали, что рецепторы допамина D1 и D2 участвуют в анксиогенных-подобных эффектов в связи с увеличением дофаминергических передач 20. Есть также четкие различия деформации в ответ на мыши тревоги, как поведение в OFM 21. Например, BALB / с мышами, альбинос лаборатория разводят штамм общий дом мыши, проявлять большую поведенческую реакциюострого стресса, чем сделать C57BL / 6 мышей 22. Таким образом, базовый вариант в ответах между субъектами должны быть приняты во внимание при настройке параметров, связанных с тестирования парадигм и выбору, какие виды чтобы использовать для конкретного исследовательского вопроса.
Это также популярное мнение, что высоко эмоциональные животные обладают повышенной дефекации. Эта точка зрения была подтверждена некоторыми, но действительность дефекации в отличие меру беспокойства была поставлена под сомнение 23. Однако, поскольку первоначального трактате Холла (1934) коррелируют дефекации события с эмоциональностью у грызунов, большое количество литературы по этой теме, подтвердил эту связь 2. Другие недавние исследования показали, что дефекаций может быть действительно полезным показателем эмоциональных тревоги, связанные с поведением в относительно короткие периоды испытаний, как выполняется здесь, в отличие от длинных наблюдений (30 мин), где различия в ответах менее ясно 21
Важно отметить, что поведение мышей в по игре зависит от их тактильных ощущений. Таким образом, любое повреждение или нехватка усов на мышах может привести к снижению измеренной поведения тревожность связаны, как мыши теряет тактильный контакт со стенками лабиринта и ввести центральных частей более легко 3. Разведка лабиринт может также зависеть от пищи или водной депривации, освещение во время процедуры тестирования или даже от цвета лабиринта пол 24. Важно проверить эти переменные, а также любое обращение, вызванной факторами, прежде чем интерпретировать результаты OFm для беспокойства, связанные с поведением. Подробная отчетность всех испытательных условиях, в рукописях также имеет важное значение для содействия соответствующие сравнения, кросс-обучения.
Кроме того, в то время как здесь мы обсуждаем использование OFM как он относится к автомобильным движения и эмоциональности мышей исследованных по игре также могут быть использованы для тестирования других поведения суч в романе распознавания объектов и памяти 25. В зависимости от типа памяти, проанализированы, время в лабиринте с объектом роман может варьироваться от 5 минут до 24 часов. Простота и гибкость лабиринт в тесте распознавания новых объектов позволяет испытывать кратко- или долгосрочной памяти, и может быть использован для выборочного анализа последствий острого медикаментозного лечения на определенном этапе формирования памяти. В заключение, по игре это верхушечный тест быстродействия 26. Поведение тревоги, связанные с измеренные кумуляции из нескольких поведенческих, лежащих в основе процессов. Таким образом, когда ответ обнаруживаемой измеряется, часто бывает необходимо исследовать, что реакцию дополнительно, чтобы идентифицировать конкретный дефект.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Multi Unit Open Field Test | San Diego Instruments, Inc. | White 7001-0354 | Any single or multi unit open field maze can be used |
| SMART DT Tracking Software | PanLab/Harvard Apparatus | 76-0695 | Any tracking software can be utilized with this protocol |
| Sony 990x Video Camera Recorder | Sony | CCD-TRV328 | Any suitable video camera can be attached to computer for recording tracking profiles. |
References
- Hall, C. S. Emotional behavior in the rat: defecation and urination as measures of individual differences in emotionality. J. Comp. Psychol. 18, 385-403 (1934).
- Walsh, R. N., Cummins, R. A. The open field test: a critical review. Psychol. Bull. 83, 482-504 (1976).
- Prut, L., Belzung, C. The open field as a paradigm to measure the effects of drugs on anxiety-like behaviors: a review. Eur. J. of Pharm. 463, 3-33 (2003).
- Choleris, E., Thomas, A. W., Kavaliers, M., Prato, F. S. A detailed ethological analysis of the mouse open field test: effects of diazepam, chlordiazpoxide and an extremely low frequency pulsed magnetic field. Neurosci. Biobehav. Rev. 25, 235-260 (2001).
- Ramos, A. Animal Models of anxiety: do I need multiple tests. TIPS. 29, 493-498 (2008).
- Archer, J. Tests for emotionality in rats and mice: a review. Anim. Behav. 21, 205-235 (1973).
- Gray, J. A. Emotionality in male and female rodents: a reply to Archer. Brit. J. Psych. 70, 425-440 (1979).
- Carola, V., D’Olimpio, F., Brunamonti, E., Mangia, F., Renzi, P. Evaluation of the elevated plus-maze and open-field tests for the assessment of anxiety-related behavior in inbred mice. Behav. Brain Res. 134, 49-57 (2002).
- Ramesh Babu, J., Seibenhener, M. L., Peng, J., Strom, A. L., Kemppainen, R., Cox, N., Zhu, H., Wooten, M. C., Diaz-Meco, M. T., Moscat, J., Wooten, M. W. Genetic inactivation of p62 leads to accumulation of hyperphosphorylated tau and neurodegeneration. J. Neurochem. 106, 107-120 (2008).
- Simon, P., Dupuis, R., Costentin, J. Thigmotaxis as an index of anxiety in mice: influence of dopaminergic transmissions. Behav. Brain Res. 61, 59-64 (1994).
- Denenberg, V. H. Open-field behavior in the rat: what does it mean. Ann. N.Y. Acad. Sci. 159, 852-859 (1969).
- Stanford, S. C. The open field test: reinventing the wheel. J. Psychopharm. 21, 134-135 (2007).
- Ennaceur, A. Tests of unconditional anxiety – pitfalls and disappointments. J. Phys. Behav. 135, 55-71 (2014).
- Borta, A., Schwarting, R. K. Inhibitory avoidance, pain reactivity, and plus-maze behavior in Wistar rats with high versus low rearing activity. J. Phys. Behav. 84, 387-396 (2005).
- Costall, B., Jones, B. J., Kelly, M. E., Naylor, R. J., Tomkins, D. M. Exploration of mice in a black and white test box: validation as a model of anxiety. Pharmacol. Biochem. Behav. 32, 777-785 (1989).
- Bouwknecht, J. A., Paylor, R. Pitfalls in the interpretation of genetic and pharmacological effects on anxiety-like behavior in rodents. Behav. Pharm. 19, 385-402 (2008).
- Webster, D. G., Baumgardner, D. J., Dewsbury, D. A. Open field behavior in eight taxa of muriod rodents. Bull. Psychonom. Soc. 13, 90-92 (1979).
- Wilson, R. C., Vacek, T., Lanier, D. L., Dewsbury, D. A. Open field behavior in muroid rodents. Behav. Biol. 17, 495-506 (1976).
- Crawley, J. N. Behavioral phenotyping of transgenic and knockout mice: experimental designs and evaluation of general health, sensory functions, motor abilities and specific behavioral tests. Brain Res. 835, 18-26 (1999).
- Simon, P., Dupuis, R., Costentin, J. Thigmotaxis as an index of anxiety in mice. influence of dopaminergic transmissions. Behav. Brain Res. 61, 59-64 (1994).
- Miller, B. H., Schultz, L. E., Gulati, A., Su, A. I., Pletcher, M. T. Phenotypic characterization of a genetically diverse panel of mice for behavioral despair and anxiety. PLoS One. 5, e14458 (2010).
- Tannenbaum, B., Anisman, H. Impact of chronic intermittent challenges in stressor-susceptible and resilient strains of mice. Biol. Psych. 53, 292-303 (2003).
- Lister, R. G. Ethologically-based animal models of anxiety disorders. Pharmacol. Ther. 46, 321-340 (1990).
- Kulesskaya, N., Voikar, V. Assessment of mouse anxiety-like behavior in the light-dark box and open-field arena: role of equipment and procedure. Phys. Behav. 133, 30-38 (2014).
- Han, H., Du, W., Zhou, B., Zhang, W., Xu, G., Niu, R., Sun, Z. Effects of chronic fluoride exposure on object recognition memory and mRNA expression of SNARE complex in hippocampus of male mice. Biol. Trace Elem. Res. 158, 58-64 (2014).
- Barrow, P., Leconte, I. The influence of body weight on open field and swimming maze performance during the post-weaning period in the rat. Lab. Animals. 30, 22-27 (1996).
