Protocol
NOTA: Todos los procedimientos realizados aquí fueron presentados y aprobados por IACUC (Oficina de Cumplimiento de Investigación) y se llevaron a cabo siguiendo las directrices del NIH. Los ratones utilizados en el paradigma de las pruebas de comportamiento eran ingenuos y no se utiliza para otras pruebas. La C57BL / 6 de tipo salvaje y ratones knock out utilizado en este protocolo se han descrito anteriormente 9 y los datos presentados aquí son de ese manuscrito.
1. Preparación de la sala de pruebas y Aparato campo abierto
- Utilice un laberinto campo abierto unidad múltiple (OFM) que consta de cuatro cámaras de actividad se utilizó para este análisis (Figura 1). Cada cámara de medida 50 cm (longitud) x 50 cm (ancho) x 38 cm (altura) y se hizo desde el blanco de alta densidad y de plástico no poroso.
- Textura Las plantas del laberinto para la tracción durante la deambulación mientras que las paredes del laberinto eran lisas. Cuadrantes Maze eran completamente vacía para el propósito de esta prueba. En consideración a el resto de este protocol, un único cuadrante del laberinto se ha descrito anteriormente se utilizará para demostrar la OFM.
- Limpiar la cámara con un 95% de etanol antes de su uso y antes de las pruebas posteriores para eliminar cualquier olor pistas dejadas por el sujeto ratón anterior.
- Deje que el etanol se evapore completamente antes de probar los ratones. Esto puede tomar 5-10 minutos entre cada sesión de evaluación.
- Para este análisis, utilice el software SMART Seguimiento por vídeo de Aparato PanLab / Harvard para registrar y evaluar el movimiento del ratón.
NOTA: Cualquier cámara de seguimiento de vídeo comercial y el software se pueden utilizar para realizar un seguimiento del sujeto de prueba y evaluar los resultados del laberinto campo abierto. Es muy importante para el usuario final para comprender cómo calibrar y ejecutar el software utilizado para cada análisis individual. Independientemente de la cámara de vídeo y software de seguimiento utilizado, se obtienen mejores resultados cuando la cámara y el software están calibrados correctamente de acuerdo con las instrucciones del fabricante. - Realice la prueba inorma na sala capaz de contener el aparato laberinto y el equipo necesario para ejecutar el software iluminado. Suspender la cámara de vídeo por encima del laberinto bien asociándolo al techo o utilizando cualquier sistema de soporte elevada que permite el lente de la cámara para ver toda la zona de laberinto (Figura 2).
- Como administrador humano de la prueba, asegúrese de tener suficiente espacio en la sala de estar completamente inobservable por los sujetos de prueba en el laberinto para no influir en el comportamiento de los ratones.
2. Preparar el software para medir la actividad
- Abra el software de seguimiento de vídeo.
- Una vez que el software se abre, mover el cursor a la opción "seguimiento de un solo sujeto" que se encuentra bajo la pestaña de "Adquisición de datos" y solo clic para abrir esta opción.
- Elija la opción "fondo estático", ubicado en la parte inferior de la pantalla.
- Después de elegir "fondo estático" es elegidon, es necesario utilizar el software para tomar una imagen del laberinto antes de la adición de los sujetos de prueba. Para ello, mueva el cursor en el botón "Foto", ubicado en la parte inferior de la pantalla y solo clic.
NOTA: El software tomará una foto del escenario sin el sujeto de prueba que se restará de la imagen tomada durante el proceso de seguimiento. Esto resulta en sólo el movimiento del sujeto que se analiza por el software. - Confirme que la imagen de fondo tomada anteriormente se extrae completamente el software de seguimiento al mover el cursor en el botón "Test" situado en la parte inferior de la pantalla y haciendo clic una vez. Un campo sólido blanco se mostrará si la imagen de fondo se elimina completamente de la imagen de seguimiento. Si las condiciones de iluminación cambian o el laberinto es accidentalmente movido, podrás ver "sombras" negros en este campo que indica las dos imágenes no coinciden perfectamente. Para remediar esta situación, simplemente repita step 2.4 anteriormente.
- Después de confirmar la configuración del fondo, utilice la opción de sincronización para configurar el modo de tiempo se controla durante la adquisición. Para ello, mueva el cursor a la pestaña "Configuración" y haga clic una vez en el título "Tiempos". Utilice la nueva ventana abierta para entrar en parámetros experimentales.
- Para este protocolo, eligió la opción "Tiempo programado" como el período de seguimiento de 10 min. Ajuste el "período de latencia" a 5 segundos para dar tiempo al usuario colocar el ratón en el centro del laberinto y alejarse antes de iniciar el seguimiento. Introduzca el "Tiempo de adquisición" de 10 min para la duración de la prueba. Ajuste la "Llave de Paso" en "Cuando el tiempo programado (10 min) ha terminado", que se apagará automáticamente la cámara y la función de seguimiento del software.
- Mueva el cursor sobre el botón "Cerrar" después de todos los tiempos se han establecido para cerrar la ventana. Ahora está listo para iniciar la pruebaing procedimiento.
3. Administración de la prueba de campo abierto
NOTA: El paquete de software utilizado en este protocolo permite el seguimiento de hasta 16 ratones individuales al mismo tiempo. Para facilidad de realización y como se mencionó anteriormente, el protocolo descrito aquí es para un solo ratón utilizando un único cuadrante de la OFM. Para el equipo utilizado para este protocolo, un máximo de 4 ratones individuales podría ser rastreado utilizando cada cuadrante del laberinto. Si la utilización de un laberinto de múltiples recinto, después de realizar el primer tema del ratón en su cuadrante definido, coloque los ratones restantes en su respectivo cuadrante laberinto para el seguimiento de análisis. A los fines de este protocolo, más instrucción será específico para un solo cuadrante del laberinto.
- Llevar los ratones en sus jaulas de su habitación vivienda en la sala de pruebas. Permita que los ratones se aclimate a la sala de procedimientos por un mínimo de 30 minutos antes de comenzar la prueba.
- Quitar una sola mOuse desde la jaula de alojamiento agarrando suavemente su cola y colocar el ratón en el centro del laberinto campo abierto, mientras que al mismo tiempo activar el software SMART con un simple clic en el botón Inicio para comenzar a rastrear el movimiento del ratón. Es normal que el ratón para desplazarse inmediatamente a las paredes de la periferia del laberinto y el momento de la liberación y el seguimiento de la captura del ratón debe coincidir para registrar este movimiento.
- Permitir el movimiento libre e ininterrumpido del ratón asignatura a lo largo del respectivo cuadrante del laberinto para un único período de 10 minutos durante los cuales, el software de seguimiento registrará movimiento (Figura 3).
- Al final del período de prueba, recoge el tema del ratón suavemente, de sacarlo del laberinto y devolverlo a su jaula.
- Antes de limpiar el laberinto, contar visualmente los pellets boli fecales presentes en el laberinto y anote los números para su posterior análisis manualmente.
- Quite todos los sedimentos fecales y limpie todos los puntos de la micción. Rocíe el piso y las paredes del cuadrante laberinto con etanol al 95% y limpie con una toalla de papel limpia. Deje que la solución de etanol que se seque completamente antes de probar otros ratones.
- Repetir el procedimiento con el siguiente ratón.
4. Medición y Análisis de Comportamiento Durante el Procedimiento de Pruebas
NOTA: Para la medición, tres aspectos de la conducta campo abierto se caracterizan fácilmente utilizando este protocolo (véase el debate). Una breve instrucción sobre cómo acceder a estas medidas en el software de seguimiento de vídeo sigue.
- Desde la pantalla principal del software SMART, mover el cursor a la ficha y solo clic "zonas" "Definición" para abrir el Editor de Zona.
- Siga las instrucciones detalladas en el Manual del usuario del software SMART no definir zonas o rejillas de la superposición en los caminos de seguimiento. Aquí, el software se utiliza para definir una cuadrícula de 10 cm cuadrados que cubren el suelo del laberinto 5 x 5 (
- Desde la pantalla principal del software SMART, mover el cursor a la pestaña "Análisis" y solo clic para abrir la ventana de Análisis de Datos.
- Mueva el cursor a la ficha "Archivo" y abra el archivo Zona creado anteriormente.
- Mueva el cursor a la pestaña "Configuración" y abra la opción "Análisis de pista". Esto abrirá la ventana "Configuración de análisis de un solo sujeto".
- Mueva el cursor a la pestaña "Standard" y mueva el parámetro "distancia recorrida" en el cuadro Parámetros Disponible (lado izquierdo) a la caja de parámetros incluidos (lado derecho).
- Mueva el cursor a la pestaña "Zonas Transiciones" y mover todos los parámetros adecuados para el cuadro Parámetros Incluido como anteriormente.
- Asegúrese de que la casilla de "Full Track" está marcada en la parte inferior de la ventana.
- Move el cursor al botón OK y cierre la ventana de configuración de análisis de una sola materia.
NOTA: En función del análisis que desea realizar, muchas otras opciones se pueden elegir en esta ventana para extraer datos de los análisis. Lea el manual del usuario detallado de su programa específico para determinar qué parámetros son los más importantes para el análisis de sus datos.
- En la ficha Archivo en la parte superior izquierda de la ventana del programa, abra la ventana sola pista tema y colocar una marca de verificación junto a todas las pistas están analizando. Mueva el cursor hasta el botón Marca de Verificación en la parte superior de la ventana y haga clic en para cerrar la ventana Track Explorer.
- Mueva el cursor sobre el botón "Go" en la ventana de Análisis de Datos y solo clic para iniciar el análisis de los datos de la pista.
- Análisis de datos se pueden enviar ya sea como archivos de texto ASCII o puede ser exportado directamente en una hoja de cálculo Excel. Utilice las herramientas de salida del programa de software que está utilizando para dar salida al data para su propio uso.
NOTA: la distancia total recorrida y el tiempo empleado en las zonas indicadas se emitirá siguiendo los pasos de análisis de datos antes mencionados. Una vez más, se hace hincapié en que los pasos para llegar a estas mediciones representadas aquí será diferente dependiendo del software de usuario utilizado. Pero los propios datos y la interpretación de los resultados deben ser independientes similar del programa de software utilizado. También vale la pena señalar que el sesgo de administrador de la prueba se elimina de este protocolo ya que todos los datos recogidos se cuantifica datos medidos por el software y no el administrador. Por lo tanto no hay ningún elemento calificable de los datos recogidos tal como se describe.
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Representative Results
El número promedio de individuos por cepa de ratones ensayados en la mayoría de los casos es de aproximadamente 20 para generar suficiente relevancia estadística. Sin embargo, este número puede estar en el intervalo de 8-30 dependiendo de la disponibilidad del ratón. Dependiendo de la medición o comparaciones requeridas, también es favorable para utilizar los sujetos de la misma edad.
La primera y posiblemente más importante parámetro específico de medir en el campo Maze Open es la distancia total ambulatoria. Mientras que la unidad de medida es irrelevante a efectos de comparación, se expresa más comúnmente como una medida métrica (cm). En los datos experimentales presentados aquí (Figura 5), de tipo salvaje (WT) o C57BL / 6 ratones normales muestran capacidad ambulatoria similar a un C57BL / 6 cepa de ratones knock-out específico (KO). Cuando la distancia total recorrida es similar entre las cepas o tratamientos, un análisis más profundo de las conductas emocionales se simplifica porque la actividad locomotora se elimina eficazmente de la ecuaciónción. Si hay diferencias significativas en la capacidad locomotora de los ratones ensayados, los nuevos análisis tales como entradas de zona o el tiempo invertido en determinadas zonas designadas del laberinto pueden estar sesgadas debido a la inactividad en lugar de cepa o los efectos del tratamiento. Existen técnicas para dar cuenta de la actividad locomotora desigual pero estos son más a menudo específicas de la pregunta de investigación.
Como distancia ambulatoria total entre las dos cepas de ratón fue similar, hemos sido capaces de analizar thigmotaxis, o la tendencia de un sujeto a permanecer cerca de las paredes, en el WT frente a ratones KO (Figura 6). El grado de thigmotaxis ha sido validado como una medida del comportamiento ansiógeno en ratones 10. Thigmotaxis aumenta a medida que se elevan los niveles de ansiedad. Usando el software SMART, zonas individuales fueron superpuestos en los caminos recorridos por los ratones (Figura 3) y el tiempo transcurrido en las zonas interiores frente a las zonas exteriores calculados y presentados como una función del tiempo total (10 min) en tél laberinto. En este caso, los ratones KO muestran significativamente mayor comportamiento ansiogénico que sus homólogos WT. Una trayectoria de desplazamiento representante puede verse en la Figura 4 en que la trayectoria de ratón WT atraviesa las zonas medias del laberinto en una frecuencia mucho mayor que lo hace el ratón KO que permanece cerca de las paredes del laberinto a pesar de que la distancia recorrida de ambos ratones es similar. Podemos concluir que los ratones KO presentan ansiedad comportamiento asociado mayor que los ratones WT.
Para un mayor apoyo aumentó los niveles de ansiedad en los ratones KO, boli fecal izquierda en el laberinto después del período de prueba de 10 min se contaron por el observador una vez que el sujeto de prueba se eliminó (Figura 13). Siguiendo la visión popular de que los animales altamente emocionales presentan aumento de la defecación, los ratones KO muestran aumentos significativos en fecal boli presente en comparación con los ratones WT. Esto se correlaciona con los niveles de thigmotaxis medidos en los ratones KO e indica Tha t los ratones knock-out utilizados en este estudio mostraron una mayor emotividad y la ansiedad en comparación con sus homólogos WT.
Figura 1. Ejemplo de una OFM de cuatro cuadrantes. El OFM En la foto se obtuvo de San Diego Instrumentos y se utilizó en todos los procedimientos de ensayo descritos. Las dimensiones de un cuadrante del laberinto están en centímetros y cada cuadrante se identifica (Q1-Q4).
Figura 2. Ejemplo de vista de la cámara de arriba de un OFM de cuatro cuadrantes. La imagen que se muestra es representativa de la vista de la cámara reconocido por el software SMART antes de los procedimientos de seguimiento. Cada cuadrante tiene la etiqueta (Q1) a (Q4) y contendría un solo ratón para el seguimiento.
Figura 3. Comparación de los caminos de pista para y ratones KO. Se muestran pistas representativos para ya sea WT o ratones KO. Cada pista representa la distancia total recorrida por el tema durante el período de tiempo de 10 minutos de la prueba. El punto de inicio (B) y el punto final (E) del seguimiento se indica. El ejemplo pista WT cruza en la parte central del laberinto, a intervalos regulares, mientras que la pista KO sigue siendo de cerca en la proximidad de las paredes del laberinto indicaron un aumento thigmotaxis o comportamiento relacionado con la ansiedad.
Figura 4. Zona superposición utilizado para interpretar los datos de seguimiento para thigmotaxis de la OFM. Usando el paquete de análisis de software SMART, una serie de 10 x 10 cm zonas eran identified y utilizado para evaluar pistas sujetos. La zona exterior consistía en 16 bloques identificados, mientras que la zona interna consistió en 9 bloques y está sombreada. Mayor tiempo de permanencia en las zonas exteriores del laberinto se registra como aumento thigmotaxis y es indicativo de un comportamiento relacionado con la ansiedad amplificado.
Figura 5. La distancia total recorrida en la OFM. WT (n = 24) y KO (n = 27) los ratones fueron sometidos a la OFM y la distancia total en centímetros de sus respectivas pistas se reunieron y analizaron estadísticamente para visualizar las diferencias en la deambulación. Y ratones KO a cabo de manera similar en la OFM cuando se midió la distancia total. Los resultados de los datos se expresaron como la media +/- SEM análisis estadístico (t-pruebas) se realizaron utilizando Excel 2010 (Microsoft, Redmond WA) y SAS 9.2 (SAS Institute, Cary NC). [Datos es modified de Ramesh Babu, et al, 2008]
Figura 6. Tiempo de permanencia en las zonas interiores y exteriores de la OFM. WT (n = 24) y KO (n = 27) los ratones fueron sometidos a la OFM y el tiempo transcurrido en las zonas interiores y exteriores del laberinto estadísticamente analizados por diferencias en ratón cepas. El tiempo pasado en las zonas exteriores del laberinto identificados en la Figura 7 medidas thigmotaxis o comportamiento pared abrazos y es indicativo de un comportamiento relacionado con la ansiedad. Ratones KO exhibieron medidas de ansiedad más elevados que a WT basados en thigmotaxis. Los resultados de los datos se expresaron como la media +/- SEM análisis estadístico (t-pruebas) se realizaron utilizando Excel 2010 (Microsoft, Redmond WA) y SAS 9.2 (SAS Institute, Cary NC). P <0,05. [Los datos se modificó a partir de Ramesh Babu, et al, 2008]
Figura 7. depósitos boli fecales en la OFM. WT (n = 24) y KO (n = 27) los ratones se les permitió completar una prueba de 10 minutos en la OFM antes de ser retirado del laberinto volver a sus jaulas. Después se retiraron los ratones, el número de defecaciones o depósitos fecales boli se contó manualmente por el observador. Aumento del número de bolos puede ser indicativo de aumento de la ansiedad y la emotividad del sujeto animal. Ratones KO mostraron un aumento en boli fecal en comparación con WT. Los resultados de los datos se expresaron como la media +/- SEM análisis estadístico (t-pruebas) se realizaron utilizando Excel 2010 (Microsoft, Redmond WA) y SAS 9.2 (SAS Institute, Cary NC). P <0,05. [Datos publicado originalmente en Ramesh Babu, et al, 2008]
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Discussion
El Open Field Maze es una de las plataformas más utilizadas en los estudios de comportamiento animal. Una serie de importantes parámetros convencionales y etológicas 2,4 puede ser recogida y analizada durante la realización de la OFM. Estos datos permiten al investigador para medir los comportamientos que van desde la actividad general de la locomotora a comportamientos emocionales relacionados con la ansiedad 8. Sin embargo, el uso de OFM no está exenta de defectos. Un problema confuso es la amplia gama de variables estáticas que pueden ser manipulados durante cualquier sesión de evaluación. Los ejemplos incluyen el tiempo, las condiciones de iluminación y novedosa inclusión objeto. La variabilidad en la configuración del protocolo experimental y el diseño, que son esenciales para apoyar un amplio espectro de aplicaciones, puede hacer que sea difícil comparar los estudios. Cuando variabilidad tema, como fondo o transgénicos líneas de ratones y los tratamientos farmacológicos diferentes están incluidos, la dificultad de las comparaciones de las pruebas puede aumentar aún más. A pesar de estas cuestiones, la OFM sigue siendo una de las técnicas más comúnmente utilizados en la investigación del comportamiento de los roedores. Aquí, se discuten los resultados obtenidos de la OFM y su análisis en lo que respecta a la ansiedad del ratón y emotividad.
Aquí, tres aspectos de la conducta campo abierto se caracterizan fácilmente utilizando este protocolo: 1) La distancia total recorrida (en cm) durante toda la parte cronometrada de la prueba; 2) thigmotaxis o una medida del porcentaje del tiempo total de 10 min de prueba que el sujeto permanece adyacente a la pared exterior del laberinto, que es indicativo de ansiedad-como comportamiento; 3) El número de bolitas fecales (boli) que quedan en el cuadrante después de que el sujeto se retira se cuenta. La defecación es una medida relacionada negativamente de emotividad en roedores 5 y se puede utilizar para indicar los niveles de ansiedad en el sujeto ratón. Una breve instrucción sobre cómo acceder a estas medidas en el software SMART sigue.
La actividad locomotora de los sujetos de prueba es importantediscernir antes del análisis de los datos OFM o para el caso, cualquier laberinto de comportamiento animal. Al comparar las diferentes cepas de ratones o diferentes efectos de los tratamientos farmacológicos, la capacidad ambulatoria del ratón es de suma importancia. Si la capacidad del aparato locomotor se ve comprometida debido a los efectos del tratamiento, a continuación, medir las actividades que se basan en la capacidad del sujeto para mover se confunde. Por lo tanto el primer paso en este experimento fue comparar el movimiento total entre las dos cepas sometidas. Uso de la función de seguimiento de sujeto del software SMART, medimos la distancia total cubierta ambulatoria en el laberinto durante la duración de la prueba por dos cepas diferentes de ratones C57BL / 6 (Figura 4). Tanto de tipo salvaje (WT) y los ratones knock-out genéticos (KO) muestran la capacidad ambulatoria similar. No hubo diferencias estadísticas en la distancia total (en cm) viajó por cualquiera de las líneas de ratón a lo largo del período de tiempo de 10 minutos del experimento. Una cepa había mostrado una diferencia significativa en la deambulación comparacióna la otra, una investigación más especializado, posiblemente usando otros paradigmas de comportamiento, se requeriría para caracterizar la diferencia. Sin embargo, en este caso, la deambulación de las cepas sometidas era igual que permite el uso directo de datos de OFM derivados no ajustados a investigar más a fondo los parámetros ansiolíticos. Cabe señalar aquí que algunos investigadores han interpretado alta actividad o incrementar el comportamiento exploratorio como un índice de baja emotividad mientras otros conciben la conducta exploratoria que se mantiene independiente de emotividad 11. Hay que reconocer que las diferencias en la actividad locomotora pueden confundir medidas emocionales 12. Sin embargo, como la distancia total ambulatoria fue similar entre las cepas de ratón usados aquí, los niveles de actividad de los ratones fueron separados de factores emocionalidad.
Alzar el comportamiento consiste de los animales en pie sobre las dos patas traseras en una posición vertical. Se considera un comportamiento exploratorio y se ha utilizado comouna medida de la ansiedad en tanto la OFM y el laberinto elevado en cruz 13. Sin embargo, no hay ninguna indicación clara de que la crianza de comportamiento es bien ansiolítica o ansiógena. Algunos estudios indican un aumento de la cría está en concordancia con el aumento de los niveles de ansiedad en ratones 14 mientras que otros postulado de disminución de la crianza de comportamiento es indicativo del aumento de la ansiedad 15. Así, mientras que la crianza no fue analizado aquí, en función de protocolo experimental y los parámetros etológicos examinados, la cría podría ser utilizado para discriminar los comportamientos de ansiedad ligado de comportamiento ambulatorio simple.
Se ha propuesto que la medición de la ansiedad en modelos de roedores es mucho más complicado que el uso de un único parámetro en un único entorno laberinto 16. Por lo tanto, el uso de múltiples pruebas o medidas múltiples en una sola prueba puede reforzar la evaluación de los resultados. Thigmotaxis o pared-abrazo comportamiento se observa en la mayoría de las especies de roedores y está vinculada a la ansiedad relacionada con serconductas. Es muy probable que se ata a la tendencia subyacente de un roedor para evitar grandes áreas abiertas o áreas de peligro percibido 17,18. Independientemente de la causa subyacente, thigmotaxis es un comportamiento ansiedad ligada importante que a menudo se considera el punto de partida para una mayor ansiedad específica pruebas relacionadas 19.
Thigmotaxis en la OFM se utiliza para evaluar los tratamientos ansiolíticos, ansiogénicos e incluso no farmacológicas. Fármacos relacionados con la ansiedad tales como el diazepam y el clordiazepóxido han mostrado efectos significativos sobre el comportamiento del ratón en la OFM 4, mientras que agonistas de la dopamina han demostrado que los receptores de dopamina D1 y D2 están implicados en efectos ansiogénicos como debido al aumento de las transmisiones dopaminérgicas 20. También hay distinciones claras de deformación en respuesta al ratón ansiedad-como comportamiento en la OFM 21. Por ejemplo, los ratones BALB / c, de una cepa de laboratorio albino criados de la casa común del ratón, muestran una mayor respuesta de comportamientoal estrés agudo que hacer C57BL / 6 ratones 22. Por lo tanto, la variación de la línea de base en las respuestas entre los sujetos hay que tener en cuenta al configurar los parámetros asociados a los paradigmas de pruebas y elegir qué especies a utilizar para una pregunta de investigación particular.
Es también la opinión popular de que los animales altamente emocionales presentan aumento de la defecación. Esta opinión ha sido corroborada por algunos, pero la validez de la defecación como distinta medida de la ansiedad ha sido puesta en duda 23. Sin embargo, desde el tratado original del Hall (1934) correlacionar eventos de defecación con emotividad en los roedores, una gran cantidad de literatura sobre el tema ha afirmado esta relación 2. Hallazgos más recientes han indicado que las defecaciones pueden de hecho ser un indicador útil de los comportamientos relacionados con la ansiedad emocionales en los períodos de prueba relativamente cortos interpretada aquí en oposición a las observaciones de largo (30 min), donde las diferencias en las respuestas son menos claros 21
Es importante tener en cuenta que el comportamiento de los ratones en el OFM depende de sus sensaciones táctiles. Por tanto, cualquier daño o escasez de bigotes para los ratones pueden causar una disminución en el comportamiento de ansiedad ligado medida como los ratones pierden el contacto táctil con las paredes del laberinto y entran en las porciones centrales más fácilmente 3. Exploración Maze también puede ser dependiente de los alimentos o privación de agua, la iluminación durante el procedimiento de prueba o incluso en el color de la planta laberinto 24. Es importante verificar estas variables, así como los factores de tratamiento inducido, antes de interpretar los resultados de OFM para los comportamientos relacionados con la ansiedad. Informes detallados de todas las condiciones de prueba en los manuscritos también es fundamental para facilitar las comparaciones entre los estudios apropiados.
Además, mientras que aquí se discute el uso de la OFM lo que se refiere a la locomoción motor y la emotividad de los ratones investigados, la OFM puede también ser utilizado para probar otros comportamientos such como novedoso el reconocimiento de objetos y la memoria 25. Dependiendo del tipo de memoria que se analiza, el tiempo en el laberinto con un objeto novedoso puede variar de 5 min a 24 hr. La facilidad y flexibilidad del laberinto en la prueba de reconocimiento de objetos novela permite para la prueba de la memoria a corto o largo plazo, y se pueden utilizar para analizar selectivamente los efectos del tratamiento agudo de la droga en una etapa específica de la formación de la memoria. En conclusión, la OFM es una prueba de rendimiento apical 26. Los comportamientos relacionados con la ansiedad medidos son la acumulación de varios procesos que subyacen a la conducta. Por lo tanto, una vez que se mide de forma detectable una respuesta, a menudo es necesario investigar aún más que la respuesta para identificar un defecto específico.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Multi Unit Open Field Test | San Diego Instruments, Inc. | White 7001-0354 | Any single or multi unit open field maze can be used |
| SMART DT Tracking Software | PanLab/Harvard Apparatus | 76-0695 | Any tracking software can be utilized with this protocol |
| Sony 990x Video Camera Recorder | Sony | CCD-TRV328 | Any suitable video camera can be attached to computer for recording tracking profiles. |
References
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