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Chemistry

माउस अंगों को लागू उच्च परिशुद्धता जिंक समस्थानिक माप

Published: May 22, 2015 doi: 10.3791/52479
Automatic Translation
1, 2
1Institut de Physique du Globe de Paris, Institut Universitaire de France, Université Paris Diderot, 2INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale), U1148: Laboratory for Vascular Translational Science, Université Paris Diderot

Abstract

हम माउस अंगों में उच्च परिशुद्धता जस्ता आइसोटोप अनुपात के साथ मापने के लिए एक प्रक्रिया प्रस्तुत करते हैं। जिंक स्वाभाविक रूप से माउस अंगों के बीच fractionated कर रहे हैं, जो 5 स्थिर आइसोटोप (64 Zn, 66 Zn, 67 Zn, 68 Zn और 70 Zn) से बना है। हम पहले Zn के परमाणुओं को मुक्त करने के क्रम में विभिन्न अंगों को भंग करने के लिए कैसे दिखा; इस चरण HNO 3 और एच 2 ओ 2 के एक मिश्रण से पता चला है। हम तो एक पतला HBR / HNO 3 मध्यम में आयनों विनिमय क्रोमैटोग्राफी द्वारा समदाब रेखीय हस्तक्षेप (जैसे, नी), से विशेष रूप से, अन्य सभी तत्वों से जिंक परमाणुओं शुद्ध। ये पहले दो चरणों उच्च शुद्धता रसायनों का उपयोग कर एक साफ प्रयोगशाला में प्रदर्शन कर रहे हैं। अंत में, आइसोटोप अनुपात कम संकल्प में, एक बहु-कलेक्टर उपपादन-मिलकर-प्लाज्मा मास-स्पेक्ट्रोमीटर का उपयोग करके मापा जाता है। नमूने correc है एक स्प्रे चैम्बर और जन-स्पेक्ट्रोमीटर से प्रेरित समस्थानिक विभाजन का उपयोग कर इंजेक्ट कर रहे हैंएक मानक (मानक bracketing तकनीक) के अनुपात के नमूने के अनुपात की तुलना द्वारा टेड। इस पूरे ठेठ प्रक्रिया एक 50 पीपीएम (2 एसडी) reproducibility के साथ एक आइसोटोप अनुपात पैदा करता है।

Introduction

उच्च परिशुद्धता के माप (बेहतर की तुलना में 100 पीपीएम / परमाणु भार इकाई) जस्ता स्थिर आइसोटोप रचना ही बहु-कलेक्टर प्लाज्मा स्रोत बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रोमीटर के विकास के लिए लगभग 15 वर्षों के लिए धन्यवाद के लिए संभव हो गया है और तब से ज्यादातर धरती में लागू किया गया है और ग्रह विज्ञान। चिकित्सा क्षेत्र के लिए आवेदन उपन्यास कर रहे हैं और जिंक की चयापचय (जैसे, अल्जाइमर रोग) को संशोधित कि रोगों के लिए बायोमार्कर के रूप में एक मजबूत क्षमता है। इस पत्र में विभिन्न माउस अंगों में उच्च परिशुद्धता के साथ जिंक की प्राकृतिक स्थिर आइसोटोप अनुपात को मापने के लिए एक विधि की रिपोर्ट। एक ही मानव नमूनों के लिए लागू होगा। विधि अंगों, परमाणुओं के बाकी हिस्सों से जिंक की रासायनिक शुद्धि, और फिर एक बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रोमीटर पर आइसोटोप अनुपात का विश्लेषण के विघटन के होते हैं।

Zn के समस्थानिक माप की गुणवत्ता रासायनिक शुद्धिकरण की गुणवत्ता (Zn की शुद्धता, कम रिक्त कंप्यूटर अनुप्रयोग पर निर्भर हैनमूने में Zn के वर्तमान की राशि के लिए ared, उच्च रासायनिक प्रक्रिया की उपज) और वाद्य पूर्वाग्रह के नियंत्रण पर। अंतिम Zn के अंश का उच्च शुद्धता एक मैट्रिक्स प्रभाव पैदा कि समदाब रेखीय interferences और गैर समदाब रेखीय हस्तक्षेप दोनों को दूर करने की जरूरत है। समदाब रेखीय nuclides प्रत्यक्ष हस्तक्षेप (जैसे, 64 नी) बनाते हैं। गैर-समदाब रेखीय interferences के तथाकथित 'मैट्रिक्स' प्रभाव पैदा करते हैं और नमूने 1 की तुलना में कर रहे हैं जो करने के लिए शुद्ध जस्ता मानक की तुलना में आयनीकरण की हालत को बदलने की माप के विश्लेषणात्मक परिशुद्धता बदल। एक कम रिक्त (<10 एनजी) बाहरी Zn के द्वारा नमूनों की कोई संदूषण वहाँ इंगित करता है कि पूर्वाग्रह मापा समस्थानिक रचना होगा। Zn आइसोटोप आयन एक्सचेंज क्रोमैटोग्राफी 2 के दौरान fractionated जा सकता है, सभी Zn के परमाणुओं के संग्रह के लिए कोई समस्थानिक विभाजन रासायनिक प्रक्रिया एक पूर्ण उपज होना चाहिए कि जो अर्थ होता है, सुनिश्चित करता है कि। अंत में, बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रोमेट्री माप के दौरान महत्वपूर्ण भूमिका निभाई समस्थानिक विभाजन के सुधार "मानक bracketing" विधि के माध्यम से किया जाता है।

इसलिए, मुख्य कठिनाइयों प्राप्त करने के लिए सटीक मापन किसी अन्य परमाणुओं या अणुओं की साफ है कि एक पूर्ण उपज रासायनिक शुद्धिकरण के उत्पादन, (रिक्त यानी, कम) बाहरी प्रदूषण को नियंत्रित करने, और बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रोमीटर पर वाद्य समस्थानिक विभाजन को सही कर रहे हैं। इस पत्र में हम माउस अंगों के साथ ही बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रोमेट्री माप से Zn अलग करने के लिए हमारे विश्लेषणात्मक प्रोटोकॉल का वर्णन करेंगे।

निष्कर्षण आयनों विनिमय राल के सूक्ष्म कॉलम (0.5 μl और 0.1 μl) पर पतला एसिड की कम मात्रा (HBR / HNO 3 मीडिया) का उपयोग किया जाता है। यह एक पूर्ण उपज है और माप के एक बाहरी reproducibility के 66 Zn / 64 Zn के अनुपात पर बेहतर की तुलना में 50 पीपीएम है। मेथ का एक और लाभआयुध डिपो यह है कि बहुत जल्दी है। विधि इसलिए बहुत अच्छी तरह से इनमें से एक विश्लेषणात्मक तरीकों को विकसित किया गया है, जहां भूविज्ञान, की तुलना में नमूनों की एक बड़ी संख्या का विश्लेषण करने की जरूरत है, जिसमें चिकित्सा विज्ञान के लिए अनुकूल है।

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Protocol

नोट: जानवरों को शामिल प्रक्रियाओं Université पेरिस Diderot पर संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति (IACUC) द्वारा अनुमोदित किया गया है।

माल की 1. तैयारी

  1. उप-फोड़ा अशुद्धता से उन्हें शुद्ध करने के क्रम में एसिड की 1 एल (HNO 3, HBR) गढ़ने।
  2. एक गर्म (~ 100 डिग्री सेल्सियस) में बीकर और टिप एडाप्टर साफ कम से कम दो दिनों के लिए HNO 3 एसिड स्नान ध्यान केंद्रित किया।
  3. कई दिनों के लिए एक ठंडा 3 एन HNO 3 स्नान में पिपेट सुझावों को धो लें और de-ionized पानी के साथ व्यक्तिगत रूप से तीन बार कुल्ला।

2. नमूना तैयार

  1. Ketamine और xylazine की intraperitoneal इंजेक्शन द्वारा चूहों anesthetize। पैर के अंगूठे चुटकी विधि द्वारा संज्ञाहरण का आकलन करें।
  2. 1.5 मिलीलीटर ट्यूब में हेपरिन की उपस्थिति में एक हृदय पंचर द्वारा रक्त ले लीजिए।
  3. Centrifugation के (10 मिनट, 1500 XG) के द्वारा रक्त कोशिकाओं से प्लाज्मा अलग और polypropylene ग के लिए प्लाज्मा हस्तांतरणpolypropylene के सुझावों का उपयोग ryogenic शीशियों।
  4. दिल के माध्यम से DPBS के यकृत नस काटने और इंजेक्शन लगाने के द्वारा अंगों से शेष रक्त निकालें। गर्भाशय ग्रीवा अव्यवस्था से माउस की मौत का आकलन करें।
  5. बाँझ स्टेनलेस स्टील के उपकरणों के साथ अंगों हार्वेस्ट यदि कोई है तो वसा के आस-पास के उन्हें मुक्त, और polypropylene क्रायोजेनिक शीशियों में उन्हें फ्रीज तस्वीर।

3. रासायनिक शोधन

  1. सबसे पहले, केंद्रित (30%) की ~ 1 एमएल एच 2 ओ 2 और केंद्रित (~ 15 एम) HNO 3 की ~ 1 एमएल के एक मिश्रण में नमूने भंग। एक धूआं हुड के अंदर इन सभी कदम है।
    1. एक 15 मिलीलीटर टेफ्लॉन बीकर में ब्याज की पूरी अंग रखें। फिर, बीकर से 5 एच 2 ओ 2 / HNO 3 जोड़ें। कार्बनिक पदार्थ के ऑक्सीकरण की प्रतिक्रिया और सीओ 2 के रिलीज होने के कारण बौछार से बचने के लिए कुछ मिनट के लिए खुला बीकर रखें।
    2. अंत में, ABO पर एक गर्म थाली पर बीकर डालसमाधान घंटे के लिए या जब तक एक जोड़ी के लिए केन्द्र शासित प्रदेशों के 100 डिग्री सेल्सियस पूरी तरह से स्पष्ट है।
  2. बीकर खोलें और के बारे में 100 डिग्री सेल्सियस पर एक गर्म थाली पर समाधान के लिए सूखी।
  3. नमूना सूखी है एक बार, नमूने के लिए 1.5 एन HBR के 1 मिलीलीटर जोड़ने; बीकर बंद करें और इसे कुछ घंटों के लिए 100 डिग्री सेल्सियस पर एक गर्म थाली पर भंग करते हैं।
  4. इस बीच 500 μl कॉलम तैयार करते हैं।
    1. स्तंभ के लिए AG1X8 200-400 जाल राल के 500 μl जोड़ें और इसके नीचे एक कचरा बीकर के साथ स्तंभ रैक पर रख दिया। 5 मिलीलीटर MΩ ⋅ सेमी पानी, 0.5 एन HNO 3 से 5 मिलीलीटर, पानी की 5 मिलीलीटर, 0.5 एन HNO 3 से 5 मिलीलीटर 18.2 की, और पानी की तो 5 मिलीलीटर: बारी से राल धो लें। 1.5 एन HBR के 5 मिलीलीटर के साथ राल हालत।
  5. बीकर आरटी के लिए शांत हो जाओ तो गर्म थाली से बीकर निकालें और के बारे में 30 मिनट के लिए एक अल्ट्रासोनिक स्नान में डाल दिया है, और।
  6. बीकर ठंडा है और राल धोया जाता है एक बार, बीकर खुला। टी करने के लिए टिप एडाप्टर रखोवह, सिरिंज एक विंदुक टिप जोड़ने; नमूने के 1 एमएल पिपेट और (राल आंदोलन के लिए नहीं क्रम में बहुत धीरे धीरे) राल पर इसे लोड।
  7. सभी तरल स्तंभ के माध्यम से गुजरता है एक बार, 1.5 एन HBR के 5 मिलीलीटर जोड़ें।
  8. 1.5 एन HBR के 5 मिलीलीटर कॉलम के माध्यम से पारित करने के बाद, एक स्वच्छ 15 मिलीलीटर बीकर के साथ कचरा बीकर जगह।
  9. एक समय में 0.5 एन HNO 3 2.5 मिलीलीटर के 5 मिलीलीटर जोड़ें। इस अवस्था में Zn के राल से eluted है।
  10. HNO 3 से 5 मिलीलीटर कॉलम के माध्यम से गुजरता है एक बार, बीकर को हटा दें और सूखे जब तक 100 डिग्री सेल्सियस पर एक गर्म थाली पर जगह है।
  11. स्तंभ धारक से स्तंभ निकालें; राल कचरा (प्रत्येक नमूने के लिए एक नई राल का उपयोग करें)।
  12. नमूना सूखी है एक बार, एक छोटे स्तंभ पर एसिड (100 μl) का एक ही मात्रा के साथ प्रोटोकॉल को दोहराने और फिर सूखे जब तक एक गर्म थाली पर जगह है। नमूना जन-स्पेक्ट्रोमेट्री के लिए तैयार है।

4. मास-स्पेक्ट्रोमेट्री मापन

  1. Zn के समस्थानिक कम्पो का विश्लेषण करेंएक बहु कलेक्टर-उपपादन द्वारा मिलकर प्लाज्मा मास स्पेक्ट्रोमीटर (एम सी-आईसीपी एमएस) पर विपक्षी।
    1. तालिका 1 में संक्षेप मशीन मापदंडों का उपयोग करें।
  2. 62 नी, 63 घन मीटर, 64 Zn, 65 घन, 66 Zn, 67 Zn और 68 Zn के द्रव्यमान (एम / Z) में एकत्र करने के लिए फैराडे कप स्थिति।
  3. समस्थानिक विश्लेषण के लिए 0.1 में एम HNO 3 500 पीपीबी Zn युक्त समाधान तैयार करें।
  4. एक 100 μl / मिनट Teflon छिटकानेवाला के साथ संयुक्त एक स्प्रे चैम्बर का उपयोग करके Zn के 500 पीपीबी समाधान का विश्लेषण करें। प्रत्येक नमूने के लिए, प्रत्येक स्कैन के एकीकरण के समय 8.389 सेकंड है, जिसमें 30 स्कैन (30 चक्र का 1 ब्लॉक) को मापने।
  5. एक खाली समाधान (नमूने फिर से भंग करने के लिए प्रयोग किया जाता 0.1 एम HNO 3 समाधान) से पर पीक शून्य तीव्रता को घटाकर की पृष्ठभूमि ठीक कर लें।
  6. नियंत्रण और 62 नी चोटी की तीव्रता को मापने के द्वारा सही संभव 64 नी समदाब रेखीय हस्तक्षेप।सही, 64 नी / 62 नी अनुपात स्वाभाविक है कि वाद्य बड़े पैमाने पर पूर्वाग्रह से इस मूल्य (0.2548) मान, और उसके बाद के रूप में बड़े पैमाने पर 64 पर 64 नी निकालें:
    मापा 64 Zn के असली = 64 Zn - मापा 64 नी = 64 Zn - (64 नी / 62 नी) 62 एक्स प्राकृतिक नी मापा जाता है।
  7. जेएमसी ल्योन Zn के मानक के 500 पीपीबी मानक समाधान (या IRMM-3702 के रूप में इस तरह के एक अन्य उपलब्ध मानक) के साथ नमूने के प्रत्येक bracketing द्वारा निभाई बड़े पैमाने पर पूर्वाग्रह ठीक कर लें। पहले और नमूना शून्य से 1 के बाद मापा जाता है और 1000 से गुणा दो मानकों का 66 Zn / 64 Zn के अनुपात की औसत से नमूने के 66 Zn / 64 Zn के अनुपात में विभाजित करके मानक bracketing प्रदर्शन करना (1 समीकरण देखें)। जेएमसी ल्योन Zn के मानक पर विशिष्ट बाहरी परिशुद्धता 0.05 permil / एएमयू (2 मानक विचलन, 2 एसडी) है।

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Representative Results

1.5 एन HBR में, मुख्य जस्ता प्रजातियों (ZnBr3-) आयनों विनिमय राल के साथ रूपों बहुत मजबूत परिसरों, अधिकांश अन्य तत्वों राल के साथ बातचीत नहीं करते, जबकि। जिंक तो, पतला HNO 3 करने के लिए मध्यम बदलते राल 6,7 से जारी है जो Zn को Zn की प्रजातीकरण 2 + बदलकर बरामद किया है।

आइसोटोप अनुपात आम तौर पर एक मानक के सापेक्ष 1,000 विचलन प्रति भागों के रूप में व्यक्त कर रहे हैं:

1 समीकरण

एक्स = 66 या 68 के साथ प्रयोग किया संदर्भ सामग्री Zn "ल्यों" मानक जेएमसी 3-0749 एल 1 है। "ल्यों" मानक Zn आइसोटोप डेटा मानक के अनुसार सबसे मोटे तौर पर इस्तेमाल संदर्भ सामग्री है। सूचना मिली सभी समस्थानिक परिणामों इसलिए रिश्तेदार हैं। इस संदर्भ में पृथ्वी च का समस्थानिक रचना का प्रयोगया δ 66 Zn 0.28 ± 0.05 8 है। 66 Zn जे एम सी-ल्योन = 66 Zn: जे एम सी-ल्योन मानक इस मानक के अभाव में आसानी से उपलब्ध नहीं है, इसलिए वैकल्पिक माप के दौरान एक संदर्भ के रूप में मानक IRMM-3702 का उपयोग करें और के रूप में संदर्भ 9 का उपयोग कर परिणाम कन्वर्ट करने के लिए है IRMM-3702 .29। ठेठ रिक्त <10ng है।

इस विधि के साथ प्राप्त ठेठ परिणाम एक तीन आइसोटोप साजिश अलग माउस अंगों के लिए (δ 66 Zn बनाम δ 68 Zn) के रूप में, चित्रा 1 में प्रतिनिधित्व कर रहे हैं। एक ठेठ स्थलीय चट्टान के दोहराया प्रयोगों की तालिका 2 और 3 की रिपोर्ट परिणाम (एक हवाई बेसाल्ट) और माउस की लाल रक्त कोशिकाओं।

चित्र 1
Δ 66 Zn बनाम चित्रा 1. δ 68 Znअलग माउस अंगों के लिए। ठेठ त्रुटि बार 68 Zn के आंकड़े पर दिखाया गया है δ के लिए 0.07 δ 66 Zn के लिए permil और 0.15 है। संदर्भ में 15 से डेटा।

एम सी-आईसीपी एमएस सेटिंग नेपच्यून
आरएफ शक्ति (डब्ल्यू) 1300
त्वरण क्षमता (वी) 10,000
गैस प्रवाह दरों
अर शीतलक (एल / मिनट) 18
अर सहायक (एल / मिनट) 1
अर नमूना (एल / मिनट) 1-1.2
समाधान तेज दर (molution 100
विश्लेषण मापदंडों
ब्लॉक की संख्या 1
ब्लॉक प्रति माप की संख्या 30
एकता समय (एस) 8.389
नमूने और मानक की विशिष्ट Zn एकाग्रता (पीपीबी) 500
ठेठ संचरण क्षमता वी / पीपीएम 25

तालिका 1: Institut डी काया डु ग्लोब डे पेरिस में Zn के आइसोटोप मापन के लिए एम सी-आईसीपी एमएस सेटिंग्स।

नमूने δ 66 Zn 2se δ 68 Zn 2se n एक
1 दोहराने 0.34 0.01 0.68 0.04 4
2 दोहराने 0.34 0.01 0।68 0.01 3
3 दोहराने 0.34 0.02 0.67 0.02 4
4 दोहराने 0.36 0.06 0.7 0.09 4
5 दोहराने 0.31 0.02 0.65 0.06 4
6 दोहराने 0.33 0.01 0.68 0.02 3
7 दोहराने 0.32 0.06 0.63 0.1 6
औसत 0.33 0.03 0.67 0.05 7
2SD 0.04 0.05
एम सी-आईसीपी-एमएस द्वारा दोहराने माप की एक एन = संख्या

तालिका 2: हवाई बेसाल्ट K179-1R1-170.9 के समस्थानिक रचना Zn प्रत्येक को दोहराने के लिए एक पूर्ण रासायनिक शोधन और कई स्वतंत्र बड़े पैमाने पर स्पेक्ट्रोमीटर माप के औसत का प्रतिनिधित्व करता है।। संदर्भ 8 से डेटा।

माउस संख्या δ 66 Zn δ 68 Zn
1 1 0.82 1.6
12 0.79 1.55
13 0.84 1.65
14 0.87 1.72
औसत 0.83 1.63
2SD 0.07 0.15

तालिका 3: चूहों की हड्डियों के समस्थानिक रचना Zn प्रत्येक को दोहराने के लिए एक पूर्ण रासायनिक शुद्धिकरण का प्रतिनिधित्व करता है।। संदर्भ में 15 से डेटा।

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Discussion

माप के reproducibility विभिन्न विश्लेषणात्मक सत्र के दौरान किए गए एक ही नमूनों की दोहराया विश्लेषण के माध्यम से मूल्यांकन किया जाता है। उदाहरण के 6 के लिए, हम एक ही स्थलीय रॉक 7 बार दोहराया है और हम तालिका 2 में रिपोर्ट प्राप्त परिणामों।

समस्थानिक विभाजन 10 के सिद्धांत से होने की उम्मीद है और अब तक किसी भी सौर प्रणाली सामग्री में मापा जाता है के रूप में (जैसे, उल्का 11-13, 3-5, गहरे समुद्र में तलछट 14, जानवरों 15-17 पौधों) के रूप में, परिणाम एक mass- का पालन करें निर्भर कानून (चित्रा 1 देखें)। 68 Zn और 64 Zn के बीच बड़े पैमाने पर फर्क 66 Zn और 64 Zn के बीच के अंतर को दो बार है क्योंकि δ 68 Zn, के बारे में दो बार 66 Zn (चित्रा 1) δ है। यह हमारी माप डेटा है कि बाहर ड्राइव करेंगे (समदाब रेखीय हस्तक्षेप से मुक्त होते हैं कि पता चलता हैसीधी लाइन) और है कि जस्ता आइसोटोप का एक ही समस्थानिक पूल से बाहर fractionated हैं।

माउस अंगों के लिए, प्रत्येक अंग में Zn की सीमित मात्रा में एक भी अंग 15 के कई replicates प्रदर्शन से हमें रोका गया है। हालांकि, हम एक ही उम्र और (16 सप्ताह पुरानी चूहों, 3 टेबल की हड्डियों के लिए उदाहरण के लिए) एक ही तनाव के विभिन्न चूहों के लिए एक ही ऊतक के लिए डेटा की तुलना द्वारा reproducibility के लिए एक उच्च सीमा अनुमान कर सकते हैं। इस reproducibility के यह नमूने की विविधता के साथ ही विभिन्न चूहों के बीच समस्थानिक परिवर्तनशीलता भी शामिल है क्योंकि आश्चर्य की बात नहीं है जो बेसाल्ट चट्टानों से अनुमान लगाया गया था कि क्या से बड़ा (δ 66 Zn के लिए 0.04 बनाम 0.07) है। इसलिए यह reproducibility के एक overestimation है, और हम प्रत्येक व्यक्ति के अंग पर सटीक हम बेसाल्ट चट्टानों पर निर्धारित किया था क्या करने के लिए इसी तरह की होगी कि विश्वास करते हैं। हम सुरक्षित रूप से ^ के लिए 0.10 की तुलना में reproducibility के बेहतर मान सकते हैं8; 66 Zn के कुछ अंगों (चित्रा 1 और संदर्भ 15 देखें) के बीच सूचना दी परिवर्तनशीलता की तुलना में 10 गुना बड़ा एक सटीक प्रतिनिधित्व करता है जो (2 एसडी)।

Zn के स्थिर आइसोटोप रचना मापने शरीर की Zn के संतुलन को संशोधित कि रोगों के लिए नैदानिक ​​उपकरण के रूप में भविष्य में इस्तेमाल किया जाएगा। उदाहरण के लिए, अल्जाइमर रोग के साथ जुड़े जस्ता अमीर सजीले टुकड़े सीरम में जिंक की एकाग्रता को बदलने और मस्तिष्क और सीरम अलग समस्थानिक रचना 15 Zn आइसोटोप के बाद से रोग की प्रारंभिक अवस्था का पता लगाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है।

अधिकांश वैकल्पिक तरीकों यहां 1-4 इस्तेमाल एक से बड़ा स्तंभ पर केंद्रित एचसीएल मीडिया में रासायनिक शुद्धि शामिल एम सी-आईसीपी-एमएस द्वारा Zn के समस्थानिक रचना को मापने के लिए। माइक्रो कॉलम और पतला एसिड के आधार पर हमारे विधि कम कारतूस है और दो बार और अधिक सटीक (50 पीपीएम 100 बनाम पीपीएम 2 एसडी) कर रहे हैं जो डेटा पैदा करता है। Addit मेंआयन, हमारे विधि (कारण कॉलम के छोटे आकार और इस्तेमाल एसिड की छोटी राशि के लिए) बहुत तेज है और बहुत अच्छी तरह से (आमतौर पर नैदानिक ​​अध्ययन में जरूरत के रूप में) के नमूनों की बड़ी राशि का विश्लेषण करने के लिए अनुकूल है। विधि की सादगी अच्छी तरह से नमूनों की एक बड़ी संख्या के मापन की अनुमति होगी जो एक स्वत: रासायनिक शुद्धिकरण प्रणाली में इस्तेमाल किया जा करने के लिए अनुकूल होगा।

इस दृष्टिकोण की एक सीमा (1 प्रक्रिया Zn की माइक्रोग्राम ~ उपयोग करता है) केवल बड़े थोक नमूनों का विश्लेषण किया जा सकता है। कीमती नैदानिक ​​नमूनों के साथ काम कर जब नमूने का आकार कम करने के लिए महत्वपूर्ण है। सीटू विश्लेषण में कुछ अनुप्रयोगों के लिए आवश्यक हो सकता है, जबकि यह विधि भी, थोक मापन के लिए सीमित है। तकनीक पर भविष्य के सुधार के प्लाज्मा मास-स्पेक्ट्रोमीटर (ला-एम सी-आईसीपी एमएस) के साथ एक लेजर पृथक प्रणाली के संयोजन से सीटू समस्थानिक माप में सुधार लाने के साथ संबंध में होना चाहिए। इस P बिना स्थानिक छोटे नमूने का माप की अनुमति होगी(नमूने को दूषित करने के लिए जाता है) rior रासायनिक शुद्धिकरण। इसके अलावा, बगल में माप रहने वाले ऊतकों पर Zn के समस्थानिक रचना की माप के लिए अनुमति देगा। हमारे ज्ञान करने के लिए वहाँ केवल एक ऐसी तकनीक का उपयोग करते हुए 18 जस्ता आइसोटोप अनुपात को मापने के लिए एक प्रयास किया गया है और पद्धति अभी भी काफी सटीक है, तथापि, ला-एम सी-आईसीपी-एमएस द्वारा उच्च परिशुद्धता आइसोटोप अनुपात की माप फे के लिए किया गया है नहीं है आधुनिक लेसरों का उपयोग तकनीक के 19 और बी 20 और रिफाइनिंग एक बड़ी सफलता के लिए नेतृत्व कर सकते हैं।

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Disclosures

लेखकों का खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है।

Acknowledgments

एफएम एक chaire डी 'उत्कृष्टता IDEX सोरबोन पेरिस तलब के माध्यम से ANR से धन स्वीकार करता है, insu एक PNP अनुदान के माध्यम से, संस्थान Universitaire डी फ्रांस के साथ-साथ सोरबोन पेरिस तलब (ANR-10-LabX-0023 और ANR पर Labex UniverEarth कार्यक्रम -11-IDEX-0005-02)। हम यह भी यूरोपीय समुदाय के H2020 ढांचा कार्यक्रम / ईआरसी अनुदान समझौते # 637,503 (प्राचीन) के तहत यूरोपीय अनुसंधान परिषद से धन धन्यवाद।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Multi-collection inductively-coupled-plasma mass-spectromter Thermo-Fisher
Anion-exchange resin AG1 X8 200-400 Bio-Rad 140-1443-MSDS
Teflon beakers Savillex  200-015-12
In-house-made teflon colunms made with shrinkable teflon

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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Moynier, F., Le Borgne, M. High… More

Moynier, F., Le Borgne, M. High Precision Zinc Isotopic Measurements Applied to Mouse Organs. J. Vis. Exp. (99), e52479, doi:10.3791/52479 (2015).

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