Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Behavior

माउस सुशीलता के प्रायोगिक आकलन एक स्वचालित इमेज प्रोसेसिंग दृष्टिकोण का उपयोग

Published: May 15, 2016 doi: 10.3791/52508

Summary

इस प्रोटोकॉल माउस सुशीलता यों के लिए एक विधि का वर्णन है। चूहे वीडियो टेप कर रहे हैं के रूप में वे कदम है और एक विशेष पिंजरे में बातचीत। मूवी प्रसंस्करण उत्कृष्ट सटीकता और विश्वसनीयता के साथ सुशीलता के स्वचालित मात्रा का ठहराव के लिए अनुमति देता है।

Abstract

माउस सुशीलता बढ़ाने के लिए बनाया दवाओं के परीक्षण के लिए पसंदीदा मॉडल जीव है। हम माउस सुशीलता जिसमें परीक्षण माउस एक मानकीकृत तंत्र में रखा गया है और प्रासंगिक व्यवहार तीन अलग-अलग सत्रों में मूल्यांकन कर रहे हैं (सत्र मैंने फोन किया, द्वितीय, और तृतीय) यों तो एक तरीका मौजूद है।

तंत्र तीन डिब्बों (चित्रा 1 देखें) है, बाएँ और दाएँ डिब्बों एक औंधा कप जो एक माउस ( "प्रोत्साहन माउस" कहा जाता है) कर सकते हैं घर में होते हैं।

सत्र मैं में, परीक्षण माउस पिंजरे में रखा गया है और अपनी गतिशीलता डिब्बों के बीच बना संक्रमण की संख्या के द्वारा होती है। सत्र द्वितीय में एक प्रोत्साहन माउस उल्टे कप से एक के तहत रखा गया है और परीक्षण माउस की सुशीलता मात्रा में समय का यह कप संलग्न प्रोत्साहन माउस बनाम खाली उल्टे कप युक्त पास खर्च करता है के द्वारा मात्रा निर्धारित है। सत्र III में, उल्टे कप हटा रहे हैं एक डी दोनों चूहों को स्वतंत्र रूप से बातचीत। सत्र III में परीक्षण माउस की सुशीलता सामाजिक दृष्टिकोण यह प्रोत्साहन माउस की ओर बनाता की संख्या से और समय की संख्या से यह प्रोत्साहन माउस से एक सामाजिक दृष्टिकोण से बचा जाता मात्रा निर्धारित है।

फिल्म के स्वचालित मूल्यांकन परीक्षा माउस, जो सत्र मैं और द्वितीय में सभी वर्णित सुशीलता उपायों के निर्धारण के लिए अनुमति देता है की नाक का पता लगाता है (सत्र III में, दृष्टिकोण स्वचालित रूप से पहचाने जाते हैं लेकिन मैन्युअल वर्गीकृत)। नाक लगाने के लिए, एक खाली पिंजरे की छवि को डिजिटल फिल्म के हर फ्रेम से घटाया जाता है और जिसके परिणामस्वरूप छवि माउस पिक्सल की पहचान करने के binarized है। माउस पूंछ स्वचालित रूप से हटा दिया जाता है और शेष दो माउस के सबसे दूर के अंक निर्धारित कर रहे हैं; इन नाक और पूंछ के आधार के करीब हैं। माउस की गति का विश्लेषण करने और निरंतरता तर्क का उपयोग करके, नाक की पहचान की है।

</ HTML"चित्रा 1" src = "/ files / ftp_upload / 52508 / 52508fig1.jpg" />
चित्रा 1. सुशीलता के आकलन 3 सत्र के दौरान सत्र मैं (ऊपर):।। पिंजरे में परीक्षण माउस के दशानुकूलन सत्र द्वितीय (मध्य):। टेस्ट माउस पिंजरे में स्वतंत्र रूप से घूम रहा है, जबकि प्रोत्साहन माउस एक औंधा कप में संलग्न है सत्र III (नीचे): दोनों परीक्षण माउस और प्रोत्साहन माउस आसानी से ले जाने के लिए और एक दूसरे के साथ बातचीत करने के लिए अनुमति दी जाती है।

Introduction

बिगड़ा सुशीलता आत्मकेंद्रित स्पेक्ट्रम विकार (अस्ड्स) 1,2 सहित neurodevelopmental विकार, की एक सीमा में प्राथमिक लक्षण डोमेन में से एक है। यह गंभीर रूप से मरीजों के संबंधों को विकसित करने की क्षमता को सीमित करता है और बहुत रोगियों, परिवारों और देखभाल करने वालों को 2,3 प्रभावित करता है।

बेहतर तंत्र बिगड़ा सुशीलता अंतर्निहित समझते हैं और उपचार को विकसित करने के प्रयास में, कई माउस मॉडल 1,4-9 अध्ययन किया गया है। ऐसा ही एक तनाव BALB / ग माउस, एक जन्मजात तनाव है कि ऊँची कम सुशीलता दर्शाती है, ASD5 8-12 के साथ रोगियों में देखा सुविधाओं जैसी है। उदाहरण के लिए, BALB / ग माउस सामाजिक दृष्टिकोण और एक प्रोत्साहन माउस (जैसे, सामाजिक परिहार) स्विस वेबस्टर तुलनित्र तनाव से 10 के द्वारा सामाजिक दृष्टिकोण के लिए एक आम तौर पर नकारात्मक प्रतिक्रिया का एक कम आवृत्ति को प्रदर्शित करता है।

क्या एक प्रस्तावित उपचार प्रभावी ढंग से परीक्षण करने के लिए हैसुशीलता बढ़ाने में ई, उद्देश्य के उपायों की जरूरत है। व्यापक रूप से स्वीकृत ढांचे एक मानकीकृत उपकरण तीन डिब्बों है कि में सुशीलता का विश्लेषण करने के लिए है (चित्रा 1 देखें)।

छोड़ दिया और सही डिब्बों प्रत्येक एक औंधा तार कप जो एक सामाजिक रूप से मुख्य प्रोत्साहन माउस घरों में होते हैं। परीक्षण माउस 10 मिनट के तीन अंतराल (सत्र मैं- III) के लिए तंत्र में जारी की है; सत्र रहा, परीक्षण माउस की हरकत गतिविधि का आकलन है, जबकि सत्र द्वितीय और तृतीय परीक्षण माउस के सुशीलता के विभिन्न पहलुओं का आकलन करें।

सत्र मैं में, परीक्षण माउस तंत्र के लिए acclimate करने के लिए अनुमति दी है। इस सत्र में, संक्रमण की संख्या कि परीक्षण माउस अलग अलग डिब्बों के बीच में आता है मापा जाता है। महत्वपूर्ण बात है, सुशीलता उपायों मानक तीन डिब्बे तंत्र में प्राप्त कर रहे हैं हरकत गतिविधि पर निर्भर करता है, और कम हरकत गतिविधि समाज की व्याख्या कर सकते हैं उलझानाक्षमता डेटा।

सत्र द्वितीय में, परीक्षण माउस स्वतंत्र रूप से बढ़ रहा है और एक प्रोत्साहन माउस उल्टे कप से एक के तहत रखा गया है (counterbalanced)। प्रोत्साहन चूहों 4 सप्ताह पुराने outbred पुरुष आईसीआर चूहों, उम्र और सेक्स से मिलान परीक्षण चूहों के लिए कर रहे हैं। प्रोत्साहन माउस सामाजिक डिब्बे के रूप में नामित पक्ष में एक औंधा कप में संलग्न है, और एक खाली उल्टे कप nonsocial डिब्बे के रूप में नामित पक्ष में रखा गया है। सत्र द्वितीय में, परीक्षण माउस की सुशीलता समय यह "सामाजिक" उल्टे कप (कम से कम 2 सेमी की दूरी पर) बनाम समय यह "nonsocial" उल्टे कप के पास खर्च करता है के पास खर्च करता है की तुलना द्वारा मात्रा निर्धारित है, और समय से यह बनाम समय यह nonsocial डिब्बे में खर्च करता है और सामाजिक डिब्बे में खर्च करता है। स्विस वेबस्टर तुलनित्र चूहों सामाजिक डिब्बे में और BALB / ग चूहों कि सामाजिक के लिए कोई महत्वपूर्ण वरीयता दिखाने की तुलना में सामाजिक उल्टे कप के पास काफी अधिक समय खर्च करते हैंउल्टे कप या सामाजिक डिब्बे 12।

सत्र III में, परीक्षण और प्रोत्साहन चूहों को स्वतंत्र रूप से बातचीत करने के लिए (उल्टे कप हटा रहे हैं) की अनुमति है। डिब्बों के बीच सुशीलता के उपाय, stereotypic व्यवहार और संक्रमण मज़बूती से परीक्षण और प्रोत्साहन चूहों और विश्लेषण के बीच मुक्त बातचीत का तीसरा 10 मिनट के सत्र में प्राप्त कर रहे हैं। इस रिपोर्ट में, परीक्षण माउस की सुशीलता दो उपायों के माध्यम से मात्रा निर्धारित है: 1) सामाजिक दृष्टिकोण की संख्या में यह प्रोत्साहन माउस, जहां एक सामाजिक दृष्टिकोण प्रोत्साहन माउस की दिशा में आगे बढ़ रहा है (नाक प्रथम) के रूप में परिभाषित किया गया है ओर बनाता है तो यह है कि नाक प्रोत्साहन माउस से कम से कम 2 सेमी की दूरी पर है; 2) प्रोत्साहन माउस द्वारा सामाजिक दृष्टिकोण के avoidances की संख्या। परीक्षण माउस अगर यह बदल जाता है या उत्तेजना माउस से दूर ले जाता है, या अगर यह अस्थायी रूप से चलती रुक जाता है ( "ठंड व्यवहार") उत्तेजना माउस के बाद टेस्ट माउस से संपर्क किया है दृष्टिकोण से परहेज किया जाता है। BALB /ग चूहों स्विस वेबस्टर तुलनित्र तनाव 10 की तुलना में सामाजिक प्रोत्साहन माउस और प्रोत्साहन माउस द्वारा सामाजिक दृष्टिकोण के लिए नकारात्मक प्रतिक्रियाओं की संख्या में वृद्धि की दिशा में किया दृष्टिकोण की संख्या में कमी, दिखा।

व्यवहार फिल्मों के मूल्यांकन के पारंपरिक रूप से मैन्युअल रूप से किया गया है, यानी, (कम गति पर संभवतः) ध्यान से फिल्म देखने के लिए और समय माउस एक निश्चित डिब्बे में या उल्टे कप 10 से एक के पास खर्च के लिए stopwatches सक्रिय द्वारा। इस विधि को बार-बार फिल्म की आवश्यकता है और देख रहा है, इसलिए है, बहुत समय लेने वाली। इसके अलावा, सटीकता अनुभव करने के लिए है कि क्या माउस उल्टे कप के 2 सेमी के भीतर है स्टॉपवॉच माप और क्षमता के लिए करदाता की प्रतिक्रिया समय से सीमित है। हाल ही में काम, दो यौगिकों, (घ-सेरीन और डी-साइक्लोसेरीन) BALB / ग चूहों 9,10,12 में सुशीलता बहाल करने में प्रभावी सिद्ध कर दिया है। ऐसा नहीं है कि दोनों घटकों मॉड्यूल में जाना जाता हैदेर NMDA रिसेप्टर, जो जाना जाता है सामाजिक व्यवहार 2,12 में एक केंद्रीय भूमिका निभाते हैं। यौगिकों का एक बड़ा सरणी अच्छी तरह से परिभाषित तरीकों की एक किस्म में NMDA रिसेप्टर गतिविधि मिलाना के लिए जाना जाता है, और एएसडी उपचार में एक सफलता के लिए संभावित इन यौगिकों एक प्राथमिकता है और मूल्यांकन के उच्च वांछनीय के लिए एक तेजी से स्वत: विधि की तेजी लाई मूल्यांकन करता है।

नीचे वर्णित एक स्वचालित विश्लेषण माउस सुशीलता के आकलन के लिए विकसित की प्रक्रिया है। यह माउस फिल्मों के सभी तख्ते पर छवि प्रसंस्करण विधियों का उपयोग करता माउस या चूहों की स्थिति की पहचान करने के लिए। सत्र में मैं और द्वितीय, यह आगे नाक स्थिति का पता लगाता है और सुशीलता उपायों की गणना करने के लिए इसे इस्तेमाल करता है। सत्र III में, यह स्वचालित रूप से सभी दृष्टिकोणों का पता लगाता है, लेकिन मैनुअल वर्गीकरण (सामाजिक दृष्टिकोण है, सामाजिक परिहार, या अन्य) की आवश्यकता है।

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

1) प्रायोगिक प्रक्रिया और 2) स्वचालित विश्लेषण: स्पष्टीकरण की आसानी के लिए प्रोटोकॉल 2 भागों में विभाजित किया गया है। सभी जानवरों की देखभाल और प्रयोगशाला पशु 15 के उपयोग के लिए गाइड के अनुसार इलाज किया गया, और सभी प्रक्रियाओं संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया।

1. प्रायोगिक प्रक्रिया

  1. सामाजिक, nonsocial, और एक तटस्थ बीच डिब्बे (चित्रा 1): पिंजरे, जो एक काला गैर चिंतनशील Plexiglas आयताकार बॉक्स (52 x 25 x 23 सेमी 3) तीन डिब्बों में विभाजित है सेट करें। अंत डिब्बों में से प्रत्येक में उलटा तार कप सत्र के दौरान जगह मैं और द्वितीय (नीचे) पर चर्चा और सत्र के दौरान द्वितीय प्रोत्साहन माउस घर।
  2. इस तरह है कि पिंजरे देखने के क्षेत्र भरता में कैमरा सेट करें। चूंकि प्रकाश माउस व्यवहार के साथ हस्तक्षेप कर सकते हैं, पिंजरे के अंदर कोई अधिक से अधिक 3.5 लक्स की एक luminance को बनाए रखने, से अप्रत्यक्ष प्रकाश से आ रहीएक गरमागरम प्रकाश बल्ब और ऊपर की दिशा में पिंजरे फर्श पर मापा जाता है। इसके अलावा एक अवरक्त प्रकाश स्रोत है, जो चूहों को समझ नहीं सकते हैं, लेकिन कैमरे का पता लगाने कर सकते हैं का उपयोग करें। 720 x 480 मानक परिभाषा में सभी फिल्मों रिकॉर्ड।
  3. बाद में छवि प्रसंस्करण के लिए एक खाली पिंजरे ( "संदर्भ फ्रेम" कहा जाता है) के एक भी फ्रेम रिकॉर्ड और एक स्केल छवि के रूप में बचाने के लिए।
  4. सत्र मैं: पिंजरे में परीक्षण माउस का परिचय और पिंजरे के ऊपर हाथ की लहर, सत्र की शुरुआत (स्वचालित विश्लेषण तुलना) का संकेत है। 10 मिनट के लिए रिकार्ड फिल्म। 10 मिनट के अंत में, अपने मूल पिंजरे में वापस माउस डाल दिया।
  5. सत्र द्वितीय: उल्टे कप से एक के तहत प्रोत्साहन माउस रखो (counterbalanced)।
  6. चयन करने के लिए है कि क्या प्रोत्साहन माउस छोड़ दिया पर या सही पर उल्टे कप में उलटा कप में है "सामाजिक छोड़ दिया" या "सामाजिक सही" बटन का प्रयोग करें।
    ध्यान दें: प्रोत्साहन माउस के साथ उल्टे कप "सामाजिक कप" कहा जाता है, जबकि अन्यकप "nonsocial कप"। डिब्बे में जो सामाजिक कप स्थित है सामाजिक डिब्बे कहा जाता है, nonsocial कप के साथ डिब्बे nonsocial कम्पार्टमेंट है, और मध्य डिब्बे "तटस्थ डिब्बे" है।
  7. पिंजरे में परीक्षण माउस का परिचय। पिंजरे के ऊपर वेव हाथ सत्र के शुरू होने से संकेत मिलता है। 10 मिनट के लिए रिकार्ड फिल्म। महत्वपूर्ण बात है, शुरू करने के लिए सत्र III उल्टे कप हटाने से पहले सुशीलता तंत्र में चूहों रहते हैं।
  8. सत्र III: उल्टे कप निकालें, दोनों चूहों जारी है और परीक्षण और प्रोत्साहन चूहों को एक दूसरे के साथ स्वतंत्र रूप से बातचीत करने के लिए अनुमति देते हैं। पिंजरे के ऊपर वेव हाथ सत्र के शुरू होने से संकेत मिलता है। 10 मिनट के लिए रिकार्ड फिल्म। 10 मिनट के अंत में, वापस उनके संबंधित पिंजरों में दोनों चूहों डाल दिया।

2. स्वचालित विश्लेषण

नोट: धारा 2 में आदेश एक ग्राफिकल यूजर इंटरफेस के माध्यम से जारी किए जाते हैं (देखें चित्र 2) कि चोरहमारे सॉफ्टवेयर trols। यहाँ हम कदम-दर-कदम प्रसंस्करण कि हमारे सॉफ्टवेयर की अनुमति देता समझा; सॉफ्टवेयर भी उपयोगकर्ता इनपुट के बिना बैच मोड में विश्लेषण प्रदर्शन करने में सक्षम है।

  1. हर फिल्म के लिए, निम्न प्रसंस्करण कदम निष्पादित:
    1. लोड फिल्म (लोड बटन पर क्लिक करें)।
    2. पिंजरे विन्यास, जो विश्लेषण कार्यक्रम पिंजरे सीमाओं, डिब्बे सीमाओं, और कप स्थानों के स्थान बताता का चयन करें। चार बचाया विन्यास में से एक का चयन करें या स्वयं सभी निर्देशांक समायोजित करें।
      नोट: विन्यास आम तौर पर एक प्रयोग से अगले करने के लिए कोई बदलाव नहीं होता और इसलिए पुन: उपयोग किया जा सकता है।
    3. फिल्म के हर फ्रेम के लिए, निम्न प्रसंस्करण कदम (2.1.3.1-2.1.3.6) प्रदर्शन करते हैं।
      1. "स्केल" बटन पर क्लिक करके स्केल करने के लिए फ्रेम कन्वर्ट।
      2. डिजिटल "घटाएँ" बटन पर क्लिक करके स्केल संदर्भ फ्रेम (1.3 चरण देखें) घटाना। नोट: इस कदम का लक्ष्य पिक्सेल VA बनाने के लिए हैफ्रेम बहुत करीब से लूस माउस की स्थिति को छोड़कर हर जगह शून्य करने के लिए।
      3. काला करने के लिए एक निश्चित सीमा के स्तर से नीचे सभी पिक्सल की स्थापना करके फ्रेम Binarize, सफेद करने के लिए उस स्तर से ऊपर सभी पिक्सल ( "Binarize" बटन क्लिक करें)।
        नोट: यह विचार है कि जब से माउस पिक्सल आम तौर पर शेष पिक्सल से अधिक मूल्य नहीं है, माउस पिक्सल सफेद और अन्य सभी पिक्सल काला हो जाएगा। इष्टतम दहलीज स्तर प्रकाश व्यवस्था की स्थिति पर निर्भर करता है और एक फिल्म में माउस के आकार का आकलन करने से निर्धारित किया जा सकता है। सीमा बहुत कम चुना जाता है, माउस बहुत बड़ी प्रतीत होता है, और पिक्सल है कि माउस का सदस्य नहीं है सफेद रंग का हो सकता है। सीमा बहुत अधिक है, तो माउस छोटा हो जाता है और काट दिया टुकड़ों में बिखर सकता है। दर्ज की फिल्मों में, इष्टतम सीमा 20 और 35 के बीच (0 से 255 के पैमाने पर) हमेशा से था।
      4. इरोड 13 binarized चित्र ई बार, तो 13 2 ई गुना चौड़ा करना है, तो EROडी फिर ई बार, बटन "Erod / दिल 'धक्का द्वारा।
        नोट: इस प्रक्रिया के लिए उद्देश्य पूंछ हटाने के लिए है। संकल्प (720 x 480) है कि इस्तेमाल किया गया था, के लिए ई = 3 सभी परिस्थितियों में काम किया।
        नोट: सॉफ्टवेयर चित्र में एक हाथ की उपस्थिति के लिए स्वचालित रूप से चेक (फिल्मों की रिकॉर्डिंग के दौरान, हाथ में एक सत्र की शुरुआत का संकेत करने के लिए चित्र के माध्यम से लहराया जाता है)। एक हाथ मौजूद है, तो वहाँ binarized फ्रेम में असामान्य रूप से कई सफेद पिक्सल हो जाएगा क्योंकि हाथ एक माउस की तुलना में बहुत बड़ा है। एक हाथ की उपस्थिति के लिए शर्त binarized फ्रेम में 10,000 से अधिक सफेद पिक्सल देखते हैं कि है। सॉफ्टवेयर मैं, द्वितीय, और तृतीय, फ्रेम में जो हाथ आंदोलनों घटित की सीमा पता लगाने के द्वारा सत्र की शुरुआत निर्धारित करता है।
  2. सत्र में मैं और द्वितीय, इस प्रकार के रूप में जारी रखने के लिए:
    1. सफेद पिक्सल के सेट का सबसे बड़ा जुड़े घटक का पता लगाने (क्लिक करें "LComp")। नोट: उद्देश्य ओच इस कदम सफेद पिक्सल है कि माउस, जैसे, सत्र द्वितीय में प्रोत्साहन माउस की गति की वजह से ताल्लुक नहीं रखता खत्म है। सबसे बड़ा जुड़े घटक में लगभग सभी फ्रेम माउस है।
    2. क्लिक "समाप्त होता है पता लगाएं," द्वारा दो सबसे दूर सफेद पिक्सल (माउस के "समाप्त होता है" कहा जाता है) का निर्धारण करते हैं।
      नोट: सॉफ्टवेयर, दो समाप्त होता है, यानी की निरंतरता स्थापित पहला फ्रेम में समाप्त होता है में से प्रत्येक के लिए बाद में फ्रेम वे हैं में समाप्त होता है जो करने के लिए। सामान्य विचार है कि जब से फ्रेम उच्च दर पर दर्ज हैं, समाप्त होता है अब तक एक फ्रेम से अगले करने के लिए यात्रा नहीं कर सकते है, तो अगले एक फ्रेम से सिरों का सही निरंतरता के लिए जो दूरी की राशि को कम करता है कि यह है कि सिरों चलते हैं। अधिक विस्तार के लिए चर्चा देखें।
    3. निर्धारित बनाने के लिए माउस का जो अंत नाक है।
      1. दिशा निर्धारित जिसमें देख कर एक माउस चाल कैसे गुरुत्वाकर्षण का केंद्र (दांता)फ्रेम से परिवर्तन फ्रेम करने के लिए (दांता के प्रस्ताव सभी माउस पिक्सल का योग का प्रस्ताव है)।
        नोट: पिक्सल पी 1 का एक सेट की दांता, ..., निर्देशांक के साथ पी एन एक्स 1, .., एक्स एन द्वारा परिभाषित किया गया है:
        1 समीकरण
        चूहे आम तौर पर आगे बढ़ने (यानी, उनकी नाक की ओर)। कई सौ फ्रेम के एक वर्ग में, वहाँ हमेशा सिर / पूंछ का पता लगाने में बहुत अधिक विश्वास है।
        नोट: सॉफ्टवेयर स्वचालित रूप से निर्धारित करता है पता चला की जिस दिशा में समाप्त होता है माउस को ले जाता है; यह अंत नाक के रूप में पहचान की है और फिल्म में एक लाल वृत्त के साथ चिह्नित है। पता चला नाक हर फ्रेम में एक लाल वृत्त के साथ चिह्नित है, तो उपयोगकर्ता का पता लगाने की गुणवत्ता की जांच कर सकते हैं।
  3. सत्र III में, इस प्रकार के रूप में जारी रखने के लिए:
    1. सफेद पिक्सल के दो सबसे बड़े घटक का पता लगाने।
      1. दोनों AM लिए स्वीकार्य आकार के होते हैंouse और गुरुत्वाकर्षण के अपने केन्द्रों (cogs) पिछले फ्रेम के माउस cogs, इन दोनों घटकों दो चूहों पर विचार के साथ संगत कर रहे हैं।
      2. माउस स्वीकार्य आकार पर विचार करता है, तो वे अधिक से अधिक 20% द्वारा पिछले फ्रेम के बाद से नहीं बदला है, और संगत के रूप में लगातार दो फ्रेम के Cogs पर विचार करता है, तो उनके अंतर दूरी एक माउस फ्रेम के बीच समय में यात्रा कर सकते हैं की तुलना में बड़ा नहीं है (यह दूरी इस प्रकार है (सत्रों में के रूप में मैं और द्वितीय) अधिकतम गति माउस, जो कई व्यक्तिगत चूहों की गति का विश्लेषण करके एक प्रयोग श्रृंखला की तैयारी के भाग के रूप में निर्धारित किया जा सकता है।
        नोट: दो सबसे बड़े घटक एक माउस के लिए स्वीकार्य नहीं आकार रहे हैं, या cogs पिछले फ्रेम में उन लोगों से बहुत अलग हैं, तो सॉफ्टवेयर स्वचालित रूप से binarization सीमा बढ़ जाती है जब तक दो सबसे बड़े घटक स्वीकार्य आकार के होते हैं और उनके Cogs के साथ संगत कर रहे हैं पिछले फ्रेम के उन।
    2. में परीक्षण के लिए माउस क्लिक करेंपहला फ्रेम। सत्र III के हर फ्रेम में दोनों परीक्षण और प्रोत्साहन माउस की पहचान करने के लिए 2.3.1 में विश्लेषण का प्रयोग करें।
    3. सत्र III जिसमें एक माउस सामाजिक रूप से दूसरे दृष्टिकोण में फ्रेम को पहचानें। नोट: सॉफ्टवेयर स्वचालित रूप से जाँच है कि चूहों के बीच की दूरी चूहों के विशिष्ट बातचीत दूरी से भी कम है द्वारा इस कदम को लागू करता है (हम 2 सेमी का उपयोग करें)।
    4. सॉफ्टवेयर उपयोगकर्ता को पता चला दृष्टिकोण के साथ फिल्म की एक छोटी खंड निभाता है, कि क्या इस दृष्टिकोण परीक्षण माउस, परीक्षण माउस, या न के द्वारा सामाजिक परिहार द्वारा एक सामाजिक दृष्टिकोण के रूप में उत्तीर्ण इंगित करने के लिए एक बटन पर क्लिक करें।
      नोट: चरण 2.3.4 अगर यह जाना जाता है जो माउस परीक्षण माउस है automatized जा सकता है। इस जानकारी के बाद से खो दिया हो जाता है जब चूहों भी एक दूसरे के करीब लाने के (या एक दूसरे के शीर्ष पर चढ़ाई), और जब से हम नहीं अभी तक एक तरीका है कि हमारे सॉफ्टवेयर से मज़बूती से पता लगाया जा सकता है और करता है में चूहों लेबल करने के लिए एक रास्ता मिल गया उनके व्यवहार को प्रभावित नहीं है, हम करने के लिए वापस सौंप दिया हैअब के लिए मैनुअल वर्गीकरण।
  4. प्रसंस्कृत फिल्में, लोड फिल्म का मूल्यांकन करने के लिए लोड बटन का उपयोग कर।
    1. सत्र 1 का पहला फ्रेम प्रदर्शित करने के लिए प्रारंभ सत्र 1 पर क्लिक करें (या सत्र 2 का पहला फ्रेम प्रदर्शित करने के लिए सत्र 2 शुरू)।
    2. खेलते हैं और फिल्मों को रोकने के लिए प्ले / रोकें पर क्लिक करें।
      नोट: प्रसंस्कृत फिल्में सिर और पूंछ अलग रंग हलकों के साथ चिह्नित के साथ माउस को प्रदर्शित करेगा। सभी सुशीलता उपायों स्क्रीन पर प्रदर्शित किया और अद्यतन के रूप में फिल्म निभाता रहे हैं।
    3. निर्यात सुशीलता "निर्यात" पर क्लिक करके एक्सेल प्रारूप में डेटा।
    4. पर "संकलन डाटा" पर क्लिक करें एक भी Excel फ़ाइल में एक फ़ोल्डर में सभी फिल्मों के सभी डेटा संकलन करने के लिए।

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

चित्रा 3 एक खाली पिंजरे के साथ एक व्यवहार फिल्म का एक रंग के फ्रेम से पता चलता है। माउस पिंजरे में अभी तक नहीं शुरू किया गया है। कप, (सामाजिक और nonsocial) और डिब्बे सीमाओं की स्थिति को आरोपित कर रहे हैं। के रूप में 4 चित्र में दिखाया गया है और एक संदर्भ के फ्रेम के रूप में इस्तेमाल खाली पिंजरे के रंग के फ्रेम 8 बिट स्केल में बदल जाती है। संदर्भ फ्रेम पर कब्जा कर लिया फिल्म के हर दूसरे फ्रेम से घटाया जाता है।

चित्रा 5 डिब्बे चौके और कप पदों पर आरोपित के साथ फिर से, मैं सत्र के दौरान फिल्म से फ्रेम में से एक से पता चलता है। संदर्भ फ्रेम नमूना फ्रेम और परिणाम है, फर्क फ्रेम बुलाया से घटाया जाता है, चित्रा 6 में दिखाया गया है।

चित्रा 7 अंतर फ्रेम के binarized संस्करण है। (खंड 2.1.3.3 देखें)। आंकड़ा भी नाक (लाल वृत्त) की स्थिति और प्रादेशिक सेना के बेस से पता चलता हैIL (ग्रे वृत्त), धारा 2.2.4 में निर्धारित रूप में)।

एक बार नाक की स्थिति फिल्म के हर फ्रेम के लिए स्थापित किया गया है, माउस की गति को किसी भी वांछित तरह से विश्लेषण किया जा सकता है। चित्रा 8 फिल्म का एक हिस्सा है कि लगभग 1000 फ्रेम कवर के लिए माउस नाक के पदों (सफेद हलकों) से पता चलता है (~ 30 सेकंड)।

9 चित्रा पिंजरे डिब्बों के बीच संक्रमण की संख्या हरकत गतिविधि का एक उपाय के रूप में प्रयोग किया जाता है सत्र मैं के लिए एक सुशीलता विश्लेषण का परिणाम (दिखाए गए उदाहरण में, 10 मिनट में 59 संक्रमण सामान्य हरकत गतिविधि से संकेत मिलता है) से पता चलता। समय पिंजरे के अलग-अलग हिस्सों में खर्च सत्र द्वितीय में सामाजिक कम्पार्टमेंट / कप के लिए वरीयता न्याय करने के लिए एक आधार रेखा के रूप में सेवा करते हैं।

चित्रा 10 सत्र द्वितीय के लिए सुशीलता विश्लेषण के परिणाम से पता चलता। विशेष रुचि के समय (सामाजिक बनाम nonsocial कप पास खर्च दिखाए EXA में हैंmple 230.8 बनाम 72.3 सेकंड) और सामाजिक बनाम तटस्थ और nonsocial डिब्बों (314.7 बनाम 109.4 बनाम 185.5 सेकंड)। सामाजिक कप और डिब्बे की ओर स्पष्ट पूर्वाग्रह चूहों पर नियंत्रण के लिए विशिष्ट हैं, और सत्र मैं (9 चित्रा) के आंकड़ों के साथ तुलना स्पष्ट रूप से दर्शाता है कि पूर्वाग्रह वास्तव में एक प्रोत्साहन माउस की उपस्थिति का एक परिणाम है।

11 चित्रा सत्र III के लिए सुशीलता विश्लेषण के परिणाम से पता चलता। सामाजिक दृष्टिकोण (35 10 मिनट में) के साथ ही प्रोत्साहन माउस (9/10) द्वारा सामाजिक दृष्टिकोण के घने सकारात्मक प्रतिक्रियाओं की उच्च संख्या सामान्य सुशीलता के साथ चूहों के प्रतीक हैं।

चित्र 2
चित्रा 2. ग्राफिकल यूजर इंटरफेस। कृपया गयह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ चाटना।

चित्र तीन
चित्रा 3. खाली पिंजरे। इस पैमाने पर ग्रे के लिए रूपांतरण के बाद एक संदर्भ फ्रेम के रूप में प्रयोग किया जाता है। लाल वृत्त सामाजिक कप और विपरीत दिशा में nonsocial कप की स्थिति से पता चलता। खड़ी सफेद लाइनें अलग डिब्बों में पिंजरे में विभाजित है और आयत पिंजरे के भीतर की सीमा से पता चलता है।

चित्रा 4
चित्रा 4. चित्रा 3 के स्केल संस्करण।

चित्रा 5
चित्रा 5. मूल फ़्रेम। स्केल प्रारूप में एक फिल्म फ्रेम। सामाजिक सिलेंडर एक सफेद वृत्त द्वारा चिह्नित है, औरएक त्रिज्या 2 सेमी सामाजिक सिलेंडर की तुलना में बड़ा के साथ एक अतिरिक्त ग्रे वृत्त जो इस क्षेत्र में परीक्षण माउस सामाजिक सिलेंडर के लिए "बंद" माना जाता है हदबंदी के लिए तैयार है। विपरीत कोने में, nonsocial सिलेंडर एक ग्रे चक्र और फिर, एक 2 सेमी बड़ा त्रिज्या क्षेत्र है कि nonsocial सिलेंडर का करीबी माना जाता है हदबंदी के लिए तैयार है के साथ एक अतिरिक्त वृत्त द्वारा चिह्नित है। खड़ी सफेद लाइनें अलग डिब्बों में पिंजरे में विभाजित है और आयत पिंजरे के भीतर की सीमा से पता चलता है।

चित्रा 6
चित्रा 6 अंतर छवि। छवि नमूना फ्रेम से फ्रेम संदर्भ घटाकर द्वारा प्राप्त की।

चित्रा 7
चित्रा 7. binarized छवि। Di के पिक्सलfference छवि है कि (इस उदाहरण में 30) एक विशेष सीमा से अधिक माउस पिक्सल माना जाता है और सफेद दिखाए जाते हैं। लाल वृत्त नाक अर्थ और सफेद वृत्त पूंछ है।

आंकड़ा 8
8 चित्रा माउस प्रक्षेपवक्र। छोटे सफेद हलकों सत्र के शुरू से ही नाक के स्थान मैं जब तक इस फ्रेम कब्जा कर लिया था दिखा।

9 चित्रा
सुजनता विश्लेषण के 9 चित्रा परिणाम सत्र I. के लिए संबंधित पिंजरे डिब्बों के ऊपर संख्या बार संकेत मिलता माउस (उन में बिताया इस मामले में छोड़ दिया डिब्बे में 254.3 सेकंड, तटस्थ डिब्बे में 155.2 सेकंड, और सही में 237.0 सेकंड डिब्बे)। हलकों के अंदर संख्या से संकेत मिलता बार माउस संसाधन और अन्य विभागों के करीब खर्च किएpective कप ( "बंद" कम से कम 2 सेमी दूर का मतलब है, या दो हलकों के बाहरी अंदर): 140.0 सेकंड शेष कप के करीब है, और 105.6 सेकंड सही कप के करीब। नीचे केंद्र में नंबर इंगित करता है कि कितनी बार माउस पिंजरे के विभिन्न डिब्बों (उदाहरण में 59 बार) के बीच transitioned।

चित्रा 10
चित्रा 10 सुजनता विश्लेषण के परिणाम सत्र द्वितीय के लिए। डिब्बों के ऊपर और अंदर हलकों में चित्रा 9 / सत्र आई नोट के रूप में पिंजरे के विभिन्न हिस्से में बिताए बार संकेत मिलता संख्या सत्र द्वितीय में, वहाँ एक में एक प्रोत्साहन माउस है कि उल्टे कप (बाएं से एक इस मामले में) की है, इसलिए इस कप "सामाजिक" कप हो जाता है। सत्र मैं के उपायों के अलावा, समय परीक्षण माउस के लिए पहली बार दिया जाता है सामाजिक सिलेंडर के करीब (2 सेमी के भीतर) प्राप्त करने के लिए ले जाता हैकेंद्र के नीचे सही में। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

11 चित्रा
चित्रा 11. सुजनता विश्लेषण के परिणाम सत्र III के लिए। "दृष्टिकोण" के बाद नंबर सामाजिक परीक्षण माउस द्वारा किए गए दृष्टिकोण, "स्थिति के बाद संख्या की संख्या में कहा गया है। Resp। "और" Neg। Resp। "राज्य प्रोत्साहन माउस द्वारा सामाजिक दृष्टिकोण के लिए परीक्षण माउस द्वारा सकारात्मक और नकारात्मक प्रतिक्रियाओं की संख्या।

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

वीडियोटैपिंग चूहों और स्वत: फिल्म विश्लेषण के संयोजन से, हम एक सस्ती, विश्वसनीय उच्च throughput स्क्रीनिंग तकनीक बनाया है।

स्वचालित विश्लेषण की सटीकता 100 से अधिक फिल्मों के लिए मैनुअल के विश्लेषण के परिणामों के साथ तुलना में किया गया था। फ्रेम के तख्ते की भारी बहुमत (> 99%) में, माउस की नाक अच्छा परिशुद्धता के साथ पहचान की है। इतना है कि फिल्मों में से 80% के आसपास किसी भी सुधार की आवश्यकता नहीं है (कुछ) misdetections से अधिकांश, सुशीलता उपायों पर कोई प्रभाव नहीं है।

उन फिल्मों है कि misdetections शामिल करते हैं, अब तक का सबसे आम समस्या है कि सिर और पूंछ भ्रमित कर रहे हैं, तो हम सॉफ्टवेयर में एक फिल्म खंड के लिए सिर और पूंछ स्विच करने के लिए एक आसान तरीका भी शामिल है में। फिल्मों के लिए जाँच करें और सभी misdetections सही करने के लिए देखा जाता है, भले ही इस चेक के बारे में 3 बार वास्तविक समय गति से किया जा सकता है ताकि मूल्यांकन समय बहुत ही कम रहता है। फिल्म के कुछ वर्गों मेंजिसमें माउस बंद करने के लिए सिलेंडरों में से एक भी उच्च गति पर देखा जा सकता है।

सब स्वचालित और मैन्युअल चुना गया सुशीलता उपायों के बीच समझौते उत्कृष्ट (यह मानते हुए कि संभव misdetections सही किया गया है) है। वास्तव में, स्वचालित रूप से निर्धारित सुशीलता उपायों की गुणवत्ता मैन्युअल, निर्धारित करने के लिए लोगों क्योंकि उद्देश्य मानदंडों लगातार दूरी और समय निर्धारित करने के लिए इस्तेमाल कर रहे हैं, जबकि पुस्तिका मूल्यांकन मानव धारणा और प्रतिक्रिया समय की सीमा से ग्रस्त बेहतर है। इन सीमाओं को देखने उच्च गति है, जो मूल्यांकन के समय को सीमित करना वांछनीय हैं के साथ और अधिक गंभीर हो गया है।

कदम 2.2.2 के बारे में नोट .: यह दिनचर्या मानक छवि प्रसंस्करण उपकरण 14 का उपयोग अपनी सीमा को सफेद पिक्सल के सेट को कम करने और किसी भी दो सीमा पिक्सल के बीच की दूरी की गणना के द्वारा कार्यान्वित किया जाता है। सबसे दूर अंक पाने के लिए उपयोगी है क्योंकि नाक और पूंछ के आधारबहुत ही इन दोनों सिरों के लिए बंद हो जाते हैं।

पूर्णता के लिए, सिरों की निरंतरता (कदम 2.3.4) के कार्यान्वयन के नीचे वर्णित है। सिरों सी और डी और समाप्त होता है एक और बी के साथ एक पूर्ववर्ती फ्रेम के साथ एक भी फ्रेम में, चाहे ग के लिए एक और डी अंतर्गत आता है ख या ग (चित्रा 12 देखें) बी और एक करने के लिए डी के अंतर्गत आता है।

चित्रा 12
नाक और पूंछ के साथ चित्रा 12. निरंतरता निर्धारण। माउस हल्के भूरे रंग में एक के रूप में चिह्नित और ख क्रमश: प्रारंभिक स्थिति है। नाक से पूंछ के साथ सफेद रंग में माउस ग और घ चिह्नित क्रमश: अगले फ्रेम में माउस की स्थिति है।

सामान्य विचार है कि सही निरंतरता के लिए, दूरी सिरों से कूच का योग गलत जारी रखने के लिए तुलना में छोटी है, क्योंकि माउस एक फ्रेम से अगले करने के लिए अपने स्वयं की लंबाई से भी कम समय में यात्रा करता है। उदाहरण में (चित्रा 2 δ 1 = | सी - एक |, δ 2 = | डी - बी |, Δ 1 = | सी - बी |, और Δ 2 = | डी - एक |, और कहते हैं कि क्योंकि δ 1 + δ 2 1 + 2 Δ, सही निरंतरता एकसी और बी डी → है। इस तरह के एक दृढ़ संकल्प के विश्वास के लिए एक अच्छा उपाय अनुपात आर = अधिकतम है 1 + δ 2, Δ 1 + Δ 2) / मिनट 1 + δ 2, Δ 1 + Δ 2), जो बताती है कि बहुत अधिक समाप्त होता है एक continuatio में यात्रा करेंगेn अन्य बनाम। परिभाषा के अनुसार, आर बड़ा या 1. लम्बी माउस आकार के लिए बराबर है, आर आम तौर पर 10 से भी बड़ा है, तभी माउस आकार (, जैसे क्योंकि माउस अपने पिछले पैरों पर खड़ा है) और अधिक परिपत्र हो जाता है, आर के करीब हो सकता है एक और निरंतरता अविश्वसनीय है। विश्वसनीय निरंतरता के लिए, R> 2.5 की एक सीमा इस्तेमाल किया गया है। इस सीमा के साथ, फ्रेम के वर्गों जिस पर समाप्त होता है की निरंतरता की स्थापना की है, सैकड़ों से फ्रेम के हजारों लोगों के लिए आम तौर पर बीच है। प्रत्येक अनुभाग के लिए, जो निर्धारित करने की दिशा में अंत में माउस एक अनुभाग के भीतर बढ़ रहा है। एक बार एक खंड में निरंतरता की स्थापना की है, "गुरुत्वाकर्षण का केंद्र" (दांता, सभी माउस पिक्सल की औसत निर्देशांक) सेक्शन में प्रत्येक फ्रेम के लिए चुना गया है। अगले करने के लिए एक फ्रेम से दांता में अंतर दो फ्रेम के बीच माउस के वेग को परिभाषित करता है। इस वेग सदिश दोनों सिरों को जोड़ता है कि क्या और कितना माउस टो बढ़ रहा है देखने के लिए पर पेश किया जाता हैपहले या दूसरे छोर की ओर ARDS। कुल मोशन (जो या तो पहले या दूसरे छोर की ओर) सभी फ्रेम के प्रस्तावों के माध्यम से योग है।

वर्तमान प्रोटोकॉल विभिन्न प्रयोगात्मक जरूरतों को संबोधित करने के लिए कई मायनों में संशोधित किया जा सकता है। माउस के आंदोलन (जैसे, औसत वेग) के विभिन्न पहलुओं के हित में हैं, तो इन गणना माउस प्रक्षेपवक्र से निकाला जा सकता है। प्रकाश व्यवस्था की स्थिति यहाँ वर्णित उन लोगों से बहुत अलग हैं, तो binarization कदम है कि माउस पिक्सल पैदावार में सीमा समायोजित किया जा सकता है। एक अलग पिंजरे आकार की तरह भी परिवर्तन के लिए हमारे वर्तमान पिंजरे विन्यास दिनचर्या को संशोधित करके लागू किया जा सकता है।

वर्णित सॉफ्टवेयर कभी कभी सिर और पूंछ (फिल्मों में से कम से कम 20% में, सुधार के लिए एक की जरूरत है क्योंकि सिर / पूंछ फ्लिप हमारे मूल्यांकन को प्रभावित होता है) confuses। हम जानते हैं कि उपयोगकर्ता पहचान के लिए पहले वें अनुमति देता है एक सुविधाजनक उपकरण लिखा थाई अंतराल में जो सिर और पूंछ की जरूरत फ़्लिप किया जा करने के लिए और फिर एक क्लिक के साथ इस सुधार पर अमल की अंतिम सीमा। बहुत कम फिल्में (कुछ प्रतिशत) सिर / पूंछ फ्लिप के अलावा अन्य समस्याओं का था, इन के लिए हम उस उपयोगकर्ता पिंजरे के जो हिस्से में परीक्षण माउस नाक किसी भी अंतराल के दौरान निर्दिष्ट करने के लिए अनुमति देता है एक अधिक सामान्य सुधार उपकरण बनाया है। ध्यान दें कि सुधार के लिए जरूरत है तो शायद ही है कि मूल्यांकन के समय पर प्रभाव छोटे उत्पन्न होती है।

प्रोटोकॉल की योजना बनाई एक्सटेंशन भी अधिक सामाजिक रूप से इस तरह का पीछा और anogenital सूँघने (शरीर के लिए परीक्षण माउस के नाक और प्रोत्साहन माउस की गुदा से दूरी की निगरानी से पता लगाया जा सकता है जो क्रमशः) के रूप में प्रासंगिक व्यवहार का पता लगाने के लिए कर रहे हैं। टकसाली व्यवहार भी पता लगाने योग्य हो सकता है, उदाहरण के पालन, जो माउस के आकार में परिवर्तन से पता लगाया जा सकता है। एक और दिलचस्प विस्तार अलग रंग के चूहों का उपयोग करते हैं, जो परीक्षण एक के रंग के रूप में लंबे समय स्पष्ट किया जाना चाहिए हैडी प्रोत्साहन माउस पिंजरे की दीवारों और फर्श पिंजरे के रंग के साथ अच्छा विपरीत है।

सारांश में, वर्णित प्रोटोकॉल एक प्रयोगात्मक और एक छवि प्रसंस्करण हिस्सा है। प्रयोग के भाग में, सबसे महत्वपूर्ण कदम प्रकाश व्यवस्था और पिंजरे की स्थिति की जांच करने के लिए और फिर (तीन सत्रों के दौरान माउस व्यवहार रिकॉर्ड करने के लिए मैं कर रहे हैं: पिंजरे में अकेले, द्वितीय: सीमित प्रोत्साहन माउस के साथ, तृतीय: स्वतंत्र रूप से प्रोत्साहन के साथ बातचीत माउस)। विश्लेषण के भाग में, महत्वपूर्ण कदम एक फिल्म और पिंजरे विन्यास लोड करने के लिए, नाक और पूंछ पदों का निर्धारण करने के लिए प्रत्येक फिल्म के फ्रेम पर छवि प्रसंस्करण प्रदर्शन करने के लिए और उसके बाद आवश्यक आँकड़े गणना करने के लिए नाक और पूंछ प्रक्षेप पथ से सुशीलता यों कर रहे हैं।

वर्णित विधि की एक सीमा है कि यह केवल सफेद फर के साथ चूहों के लिए परीक्षण किया गया है। यह कारण है कि स्वचालित विश्लेषण के रूप में लंबे समय के रूप तंत्र दीवारों और फर्श प्रदान अन्य फर रंगों के साथ समान रूप से अच्छी तरह से काम करेगा खड़ाफर रंग के साथ मजबूत विपरीत है, लेकिन यह अभी तक स्थापित नहीं किया गया।

एक और सीमा सत्र III के मूल्यांकन के स्वचालन की कमी है। हमारे लिए बड़ी कठिनाई, अन्य समूहों के लिए के रूप में, ट्रैक जिनमें से माउस परीक्षण माउस और जो चूहों के लगातार बंद मुठभेड़ों के दौरान प्रोत्साहन माउस है रखने के लिए है। हमने पाया है कि हम इस तरह के चूहों के कान के बीच रंग का डॉट्स के रूप में मार्कर के साथ इस समस्या को हल कर सकते हैं, लेकिन सभी अंकन तरीकों कि हम कोशिश की है अब तक चिढ़ कम से कम चूहों का हिस्सा है और काफी हद तक उनके व्यवहार को बदल दिया। इसलिए, हमारे सत्र III की वर्तमान विश्लेषण स्वचालित रूप से सभी दृष्टिकोणों का पता लगाता है, लेकिन मैनुअल वर्गीकरण की आवश्यकता है।

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

लेखकों के पास खुलासे के लिए कुछ भी नहीं है।

Acknowledgments

इस शोध वर्जीनिया कॉमनवेल्थ स्वास्थ्य अनुसंधान बोर्ड से अनुदान धन से समर्थन किया था।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Plexiglas cage Norva Plastics, Norfolk, VA custom made Dimensions and layout described in manuscript,
can be adjusted according to needs.
Use non-reflective plexiglas for to facilitate image processing
Wire cups Kitchen plus 315 Use one to house stimulus mouse, one empty
Video camera SONY HDR-PJ790 Can be replaced by any camera with
Comparable specifications
OpenCV (Image processing library) Willow Garage N/A Any modern image processing library
can be used.

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Brodkin, E. S. BALB/c mice: Low sociability and other phenotypes that may be relevant to autism. Behavioural Brain Research. 176, 53-65 (2007).
  2. Deutsch, S. I., Burket, J. A., Urbano, M. R., Herndon, A. L., Winebarger, E. E. Impaired sociability of the BALB/c mouse, an animal model of autism spectrum disorders, is attenuated by NMDA receptor agonist interventions: clinical implications. Comprehensive Book on Autism Spectrum Disorders. Mohammadi, M. A. , InTech. Available from: http://www.intechopen.com/books/a-comprehensive-book-on-autism-spectrum-disorders/impaired-sociability-of-the-balb-c-mouse-an-animal-model-of-autism-spectrum-disorders-is-attenuated 323-342 (2011).
  3. Dunn, M. E., Burbine, T., Bowers, C. A., Tantleff-Dunn, S. Moderators of stress in parents of children with autism. Community Mental Health Journal. 37, 39-52 (2001).
  4. Babineau, B. A., Yang, M., Berman, R. F., Crawley, J. N. Low home cage social behaviors in BTBR T+tf/J mice during juvenile development. Physiology & Behavior. 114-115, 49-54 (2013).
  5. Benson, A. D., Burket, J. A., Deutsch, S. I. BALB/c mice treated with d-cycloserine arouse increased social interest in conspecifics. Brain Research Bulletin. 99, 95-99 (2013).
  6. Burket, J. A., Benson, A. D., Tang, A. H., Deutsch, S. I. Rapamycin improves sociability in the BTBR T(+)Itpr3(tf)/J mouse model of autism spectrum disorders. Brain Research Bulletin. 100, 70-75 (2014).
  7. Burket, J. A., Benson, A. D., Tang, A. H., Deutsch, S. I. D-Cycloserine improves sociability in the BTBR T+ Itpr3tf/J mouse model of autism spectrum disorders with altered Ras/Raf/ERK1/2 signaling. Brain Research Bulletin. 96, 62-70 (2013).
  8. Burket, J. A., Herndon, A. L., Deutsch, S. I. Locomotor activity of the genetically inbred BALB/c mouse strain is suppressed by a socially salient stimulus. Brain Research Bulletin. 83, 255-256 (2010).
  9. Deutsch, S. I., et al. D-cycloserine improves sociability and spontaneous typic behaviors in 4-week old mice. Brain Research. 1439, 96-107 (2012).
  10. Jacome, L. F., Burket, J. A., Herndon, A. L., Deutsch, S. I. Genetically inbred BALB/c mice differ from outbred Swiss Webster mice on discrete measures of sociability: relevance to a genetic mouse model of autism spectrum disorders. Autism Research. 4, 393-400 (2011).
  11. Jacome, L. F., Burket, J. A., Herndon, A. L., Cannon, W. R., Deutsch, S. I. D-serine improves dimensions of the sociability deficit of the genetically-inbred BALB/c mouse strain. Brain Research Bulletin. 84, 12-16 (2011).
  12. Deutsch, S. I., Burket, J. A., Jacome, L. F., Cannon, W. R., Herndon, A. L. D-Cycloserine improves the impaired sociability of the BALB/c mouse. Brain Research Bulletin. 84, 8-11 (2011).
  13. Shih, F. Y. Image Processing and Mathematical Morphology: Fundamentals and Applications. , CRC Press. (2009).
  14. Nixon, M. Feature Extraction & Image Processing. , Academic Press. (2008).
  15. National Research Council. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , Eighth Edition, The National Academic Press. (2011).

Tags

व्यवहार अंक 111 माउस सुशीलता एएसडी स्वचालित सॉफ्टवेयर उच्च throughput स्क्रीनिंग
माउस सुशीलता के प्रायोगिक आकलन एक स्वचालित इमेज प्रोसेसिंग दृष्टिकोण का उपयोग
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Varghese, F., Burket, J. A., Benson, More

Varghese, F., Burket, J. A., Benson, A. D., Deutsch, S. I., Zemlin, C. W. Experimental Assessment of Mouse Sociability Using an Automated Image Processing Approach. J. Vis. Exp. (111), e52508, doi:10.3791/52508 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter