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Behavior

संशोधित छेद बोर्ड - चूहों और चूहों में व्यवहार, अनुभूति और सामाजिक संबंधों को मापने

Published: April 8, 2015 doi: 10.3791/52529

Abstract

इस प्रोटोकॉल एक पारंपरिक छेद बोर्ड और खुले मैदान से सुविधाओं को जोड़ती है और छोटी प्रयोगशाला स्तनधारियों (जैसे, चूहों, चूहों, पेड़ shrews और छोटे प्राइमेट) में असुविधाजनक व्यवहार के कई आयामों को मापने के लिए बनाया गया है जो संशोधित छेद बोर्ड (MHB), का वर्णन है। एक पशु के व्यवहार प्रोफाइल का एक व्यापक व्यवहार स्पेक्ट्रम एक एकल परीक्षा में जांच की जा सकती है क्योंकि यह प्रतिमान, एक व्यवहार परीक्षण बैटरी के इस्तेमाल के लिए एक मूल्यवान विकल्प है।

तंत्र एक समूह डिब्बे से अलग 'सुरक्षित' क्षेत्र का प्रतिनिधित्व, एक बॉक्स के होते हैं। छोटे सिलेंडरों तीन लाइनों में कंपित कर रहे हैं जिस पर एक बोर्ड, सेट-अप के 'असुरक्षित' क्षेत्र का प्रतिनिधित्व करने, बॉक्स के केंद्र में रखा गया है। जानवरों की संज्ञानात्मक क्षमताओं बोर्ड पर कुछ सिलेंडरों baiting और काम कर रहे हैं और संदर्भ स्मृति को मापने के द्वारा मापा जा सकता है। ऐसे activit के रूप में अन्य असुविधाजनक व्यवहार,Y-related-, चिंता-related- और सामाजिक व्यवहार, इस प्रतिमान का उपयोग करते हुए देखा जा सकता है। व्यवहार में लचीलापन और एक उपन्यास पर्यावरण के लिए अभ्यस्त करने की क्षमता इसके अतिरिक्त, MHB में कई परीक्षणों के लिए जानवरों को subjecting 'जानवरों अनुकूली क्षमता में अंतर्दृष्टि खुलासा द्वारा मनाया जा सकता है।

एक व्यवहार परीक्षण बैटरी में आदेश प्रभाव का परीक्षण करने के लिए कारण, भोले जानवरों प्रत्येक व्यक्ति के प्रयोग के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए। एक भी प्रतिमान में एकाधिक व्यवहार आयामों का परीक्षण करने और इस तरह इस मुद्दे को धोखा करके, इस्तेमाल किया प्रायोगिक पशुओं की संख्या कम है। जानवरों से वंचित परीक्षण के दौरान और भोजन की आवश्यकता के बिना सामाजिक अलगाव से बचने के द्वारा इसके अलावा, MHB तनाव के किसी भी, तो बहुत कम राशि उत्प्रेरण, एक व्यवहार परीक्षण प्रणाली का प्रतिनिधित्व करता है।

Introduction

संशोधित छेद बोर्ड (MHB) मुख्य रूप से चूहों और चूहों एक में, असुविधाजनक व्यवहार के कई आयाम का आकलन करने के लिए प्रयोग किया जाता है। व्यापक रूप से इस्तेमाल किया परीक्षणों के एक नंबर पूरी तरह से एक व्यवहार आयाम की पूरी फेनोटाइप कवर नहीं करता है, जो एक एकल व्यवहार पैरामीटर को मापने। MHB कृन्तकों केवल एक अमीर परीक्षण पर्यावरण 2 में उनके अमीर व्यवहार प्रदर्शनों की सूची दिखाने के लिए और इस प्रकार जटिल ethological टिप्पणियों के लिए अनुमति देता है कि अवधारणा के आधार पर विकसित किया गया था।

सेट-अप (यानी, पशुओं की संख्या 1,3,4 इस्तेमाल किया कम करने circumventing में एक परीक्षण बैटरी के नुकसान पर काबू पा जो एक भी जटिल प्रतिमान है, जिसके परिणामस्वरूप पारंपरिक छेद बोर्ड और खुले मैदान परीक्षण की विशेषताओं शामिल परीक्षण के आदेश 5, और समय-प्रभाव और लागत 6) को कम करने के संभावित प्रभाव। सबसे व्यवहार परीक्षण (जैसे, Hånell और Marklund, 2014) के विपरीत 7 </ Sup>, MHB का एक फायदा जानवरों कार्य को हल करने की प्रेरणा को बढ़ाने के लिए वंचित खाद्य होने की जरूरत नहीं है। साथ ही, सामाजिक अलगाव, दृश्य, श्रवण और घ्राण संपर्क 8,9 के लिए अनुमति देता है, एक पारदर्शी छिद्रित विभाजन द्वारा परीक्षण डिब्बे से अलग एक (समूह-) डिब्बे में प्रयोगात्मक जानवर के समूह साथियों रखकर परीक्षण के दौरान उन्हें धोखा दिया जा सकता है।

MHB (औषधीय) दोनों चूहों और चूहों 1,6 के लिए मान्य किया गया है। व्यवहार का एक विस्तृत श्रृंखला के इस तरह के परिहार व्यवहार, जोखिम मूल्यांकन, उत्तेजना, अन्वेषण, हरकत गतिविधि, आदी होना, सामाजिक समानता और अनुभूति 2,8-10 के रूप में मापा जा सकता है। इसके अतिरिक्त, MHB एक भोजन का सेवन निषेध परीक्षण, साथ ही उपन्यास वस्तु मान्यता परीक्षण 10,11 के साथ जोड़ा जा सकता है। अंत में, MHB भी में एक प्रमुख व्यक्ति रखकर जबकि सामाजिक रूप से हरा दिया जानवरों के परीक्षण के द्वारा सामाजिक तनाव प्रयोगों प्रदर्शन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता हैसमूह डिब्बे 12,13। चूहों और चूहों के लिए इस प्रोटोकॉल MHB के कई आवेदनों की एक सिंहावलोकन दे देंगे।

Protocol

नोट: प्रयोगों यूनिवर्सिटी मेडिकल सेंटर उट्रेच और Utrecht विश्वविद्यालय, नीदरलैंड के पशु प्रयोगों समिति द्वारा अनुमोदित किया गया है। इसके अलावा, पशु प्रयोगों प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल के सिद्धांतों का पालन और देखभाल और तंत्रिका विज्ञान और व्यवहार रिसर्च में स्तनधारियों के उपयोग के लिए दिशा-निर्देश को देखें। 25

1. प्रयोगात्मक सेट अप

नोट: मानक MHB तंत्र प्रयोगात्मक जानवर के समूह साथियों के परीक्षण अवधि के दौरान रखा जा सकता है, जिसमें एक अतिरिक्त डिब्बे (50 x 50 x 50 सेमी) से अलग कर एक ग्रे पीवीसी प्रयोगात्मक बॉक्स (100 x 50 x 50 सेमी) के होते हैं एक पारदर्शी, छिद्रित विभाजन 1 से। समूह साथियों की उपस्थिति अवांछित है या व्यक्तिगत रूप से रखे जानवरों का परीक्षण कर रहे हैं, ग्रे परमवीर चक्र से बना एक विभाजन से पारदर्शी विभाजन की जगह (चित्रा 1;।) यह भी देख OHL एट अल (2001) 1। MHB (WIसंज्ञानात्मक परीक्षण के लिए इस्तेमाल वें अलग माप) प्रोटोकॉल की धारा 5 में वर्णित है।

  1. बोर्ड प्लेस (60 x 20 x 0.5 सेमी; ग्रे परमवीर चक्र से बना) बॉक्स के बीच में।
    नोट: बोर्ड 20 सिलेंडरों (ᴓ 1.5 सेमी) को शामिल कर सकते हैं 14 दो लाइनों या 23 सिलेंडर (ᴓ 3 सेमी) 8 तीन लाइनों में कंपित में कंपित।
  2. 10 आयत (20 x 15 सेमी) और 2 चौकों (20 x 20 सेमी) में काले लाइनों से बोर्ड के आसपास के क्षेत्र फूट डालो।
  3. बोर्ड के बीच प्रकाश की तीव्रता में एक बड़ा विपरीत (एक खुले मैदान या एक प्रकाश-अंधेरे संक्रमण परीक्षण के प्रकाश डिब्बे के केंद्र के साथ तुलनीय एक असुरक्षित क्षेत्र का प्रतिनिधित्व करने वाले) और बॉक्स (संरक्षित क्षेत्र) बनाने के लिए बोर्ड के ऊपर एक मंच प्रकाश की स्थिति बोर्ड 4,8 के प्रतिकूल चरित्र को बढ़ाने के लिए।
  4. हाउस एक 12 घंटा के तहत जानवरों (जैसे, 7:00 पर उतर रोशनी और 7:00 पर पर रोशनी) दिन-रात चक्र उलट।
    नोट: हालांकि, MHB भी कर सकते हैंपारंपरिक प्रकाश अनुसूची के तहत इस्तेमाल किया जा 1,6 (संभावित कमियों पर चर्चा देखें)।
  5. 4,15 (10:00-14:00, उदाहरण के लिए) पशुओं के सबसे सक्रिय चरण में व्यवहार का परीक्षण करते हैं।
  6. सुविधाओं में जानवरों के आने के बाद दो सप्ताह की आदी होना अवधि बनाए रखें। इस अवधि के दौरान एक ही व्यक्ति व्यवहार प्रयोग एक सप्ताह जानवरों चार बार संभाल प्रदर्शन कर दिया है और वास्तविक परीक्षण के दौरान प्रदर्शन किया जा करने के लिए सभी से निपटने प्रक्रियाओं में शामिल हैं। जानवरों पर बाद में परीक्षण को उजागर किया जाएगा, जब दिन के समय के दौरान विशेष रूप से पशुओं को संभालना।
  7. वीडियो पर डेटा भंडारण के लिए और परिणामों का अनुकूलन करने के लिए और अंतर पर्यवेक्षक परिवर्तनशीलता को कम करने के क्रम में प्रयोगों के रिकॉर्ड, पिछले प्रयोगों 2 की वीडियो रिकॉर्डिंग का उपयोग कर व्यवहार स्कोरिंग का अभ्यास करेंगे। पर्यवेक्षक द्वारा निष्पादित सभी कार्यों और प्रक्रियाओं का मानकीकरण करना सुनिश्चित करें।

2. behavioral परीक्षण - समूह साथियों की उपस्थिति के बिना

  1. जानवरों के लिए नियमित रूप में रखे जाते हैं कमरे में व्यवहार का परीक्षण करते हैं (एक परीक्षण के स्थान पर परिवहन के संभावित प्रभावों से बचने के लिए) और सुविधाएं (उपकरणों की उपस्थिति के लिए जानवरों के अभ्यस्त करने के लिए) में पशुओं के आने से पहले सभी परीक्षण उपकरण स्थापित करें।
  2. अपने घर पिंजरे से पूंछ के आधार द्वारा पशु उठाओ और सीधे MHB में जगह है।
  3. (चित्रा 1 में संकेत के रूप में) की दीवार का सामना करना पड़ उसी कोने में तंत्र में प्रत्येक पशु रखें।
  4. पशु स्वतंत्र रूप से समय की अवधि (अक्सर 5 मिनट 1,6,16-18) के लिए MHB पता लगाने के लिए अनुमति दें।
  5. एक अनुभवी पर्यवेक्षक लाइव व्यवहार स्कोरिंग सॉफ्टवेयर का उपयोग कर व्यवहार मापदंडों स्कोर है। तालिका 1 में सूचीबद्ध मापदंडों का उपयोग करें।
    नोट: कुछ व्यवहार मापदंडों (जैसे, मोटर और खोजपूर्ण व्यवहार) जैसे स्वचालित रूप से रन बनाए जा सकते हैं, एट अल द्वारा चर्चा की। (2010) 19 MHB की आवश्यक समायोजन करने के बाद।
  6. घ्राण संकेतों के आधार पर एक पूर्वाग्रह से बचने के क्रम में हर परीक्षण के बाद पानी के नल और एक कागज तौलिया के साथ तंत्र को साफ करें।
    नोट: संभावित परीक्षण के आदेश के प्रभाव सामाजिक रूप से रखे जानवरों के परीक्षण के मन में जब 17,20 में रखा जाना चाहिए।

3. व्यवहार परीक्षण - समूह साथियों की उपस्थिति में

  1. ग्रुप हाउसिंग के मामले में, प्रयोगात्मक और पशु परीक्षण के दौरान अपने पिंजरे साथियों के साथ बातचीत के उपाय।
    1. आदी होना (मुख्य रूप से 10-30 मिनट 1,12) के लिए अनुमति देने के लिए प्रयोगात्मक जानवर के परीक्षण से पहले समूह के डिब्बे में समूह साथियों रखें।
      नोट: सामाजिक तनाव की शर्तों के तहत परीक्षण एक सामाजिक दृष्टि से हरा दिया व्यक्ति 13 जब परीक्षण समूह के डिब्बे में एक प्रमुख पिंजरे के साथी रखकर संभव है।
    2. परीक्षण के डिब्बे में प्रयोगात्मक पशु रखें और यह मुफ़्त करने की अनुमतिधारा 2 में वर्णित के रूप में ly MHB का पता लगाएं।
      नोट: संभावित परीक्षण के आदेश के प्रभाव सामाजिक रूप से रखे जानवरों के परीक्षण के मन में जब 17,20 में रखा जाना चाहिए।
    3. एक अनुभवी पर्यवेक्षक लाइव व्यवहार स्कोरिंग सॉफ्टवेयर का उपयोग कर व्यवहार मापदंडों स्कोर है। तालिका 1 में सूचीबद्ध मापदंडों का उपयोग करें।
    4. घ्राण संकेतों के आधार पर एक पूर्वाग्रह से बचने के क्रम में हर परीक्षण के बाद पानी के नल और एक कागज तौलिया के साथ तंत्र को साफ करें।

4. उपन्यास वस्तु मान्यता और भोजन का सेवन निषेध

  1. दो दिनों के प्रयोग से पहले उनके घर के पिंजरे में एक वस्तु (उदाहरण के लिए एक पासा या एक खाद्य गोली) के साथ जानवरों को परिचित।
  2. शुरुआती बिंदु से भर कोने में एक उपन्यास वस्तु (उदाहरण के लिए एक बोल्ट या अपरिचित खाद्य) से 2 सेमी अलग तंत्र में familiarized वस्तु रखें।
  3. पशु उपन्यास और परिचित वस्तु / खाद्य दृष्टिकोण करने के लिए लगने वाले समय को मापने। में मापदंडों का उपयोग करें <strong> तालिका 1।
  4. घ्राण संकेतों के आधार पर एक पूर्वाग्रह से बचने के क्रम में हर परीक्षण के बाद पानी के नल और एक कागज तौलिया के साथ तंत्र को साफ करें।

5. संज्ञानात्मक परीक्षण

  1. चूहों 3,22 के परीक्षण के लिए बॉक्स के बीच में 10 सिलेंडरों (चित्रा 1) के साथ एक छोटे बोर्ड (35 एक्स 22 एक्स 1 सेमी) रखें। ग्रे परमवीर चक्र से बना एक विभाजन डालने से चूहों 21 के परीक्षण के लिए 50 x 50 सेमी आकार में बॉक्स को कम करें।
  2. एक स्वाद जानवरों (उदाहरण के लिए, वेनिला) करने के लिए आकर्षित कर रहे हैं के साथ सभी सिलेंडरों खुशबू और जानवरों यह नहीं निकाल सकते तो एक इनाम (बादाम के जैसे, एक टुकड़ा, चूहों और चूहों के लिए एक बेहद स्वादिष्ट इनाम) एक ग्रिड के नीचे के साथ सभी चारा।
  3. (ग्रे परमवीर चक्र के साथ विषम) एक रंग की अंगूठी और साथ क्यू सिलेंडरों (अक्सर तीन) एक हटाये इनाम (बादाम के उदाहरण के लिए, 0.05 छ टुकड़ा) के साथ उन्हें चारा।
  4. प्रयोग में पहले दो दिनों में दैनिक इनाम के साथ जानवरों को परिचितचिमटी के साथ यह पेशकश और पशु इसे खा यकीन है कि बनाकर उनके घर के पिंजरे।
  5. एक अनुभवी पर्यवेक्षक लाइव व्यवहार स्कोरिंग सॉफ्टवेयर का उपयोग कर व्यवहार मापदंडों स्कोर है। मान्यता या भोजन का सेवन निषेध वस्तु से संबंधित मापदंडों के अपवाद के साथ धारा 2 (तालिका 1) में वर्णित व्यवहार मापदंडों के अलावा 2 टेबल में सूचीबद्ध मापदंडों को मापने।
  6. चरण 1: प्रत्येक जानवर के साथ एक परीक्षण समाप्त करने के लिए एक निरंतर समय तक एक निरंतर अंतर परीक्षण अंतराल (जैसे, 30-60 मिनट) के साथ दैनिक चार परीक्षणों प्रदर्शन पहुँच जाता है (यानी, सभी तीन बादाम के टुकड़े एकत्र किया गया है जब)।
  7. स्टेज 2: क्यू और चारा तीन अलग अलग सिलेंडरों और उत्क्रमण सीखने की क्षमता का परीक्षण करने के लिए चार परीक्षण के लिए सेटअप में जानवरों की जगह है।
  8. घ्राण संकेतों के आधार पर एक पूर्वाग्रह से बचने के क्रम में हर परीक्षण के बाद पानी के नल और एक कागज तौलिया के साथ तंत्र को साफ करें।

Representative Results

MHB में मापा जा सकता है कि मानकों की बड़ी राशि अनेक व्यवहार आयाम को मापने के लिए इस स्थापना के लिए विशेष रूप से उपयुक्त बनाते हैं। एक उदाहरण के परीक्षण करने के लिए कई बार प्रदर्शन के द्वारा एक उपन्यास पर्यावरण के लिए व्यवहार अनुकूलन की पहचान है। Salomons एट अल (2010) (दो अलग तरह के प्रकाश की शर्तों के तहत MHB करने के लिए चूहों (BALB / मुख्य न्यायाधीश और 129P3 / जे) के दो जन्मजात उपभेदों के आदी होना अध्ययन लाल बत्ती: 45 लक्स बनाम सफेद रोशनी: बॉक्स और बोर्ड के बीच इसके विपरीत: बॉक्स और बोर्ड के बीच इसके विपरीत: 115 लक्स) 4 (भी प्रोटोकॉल खंड 1.3 देखें)। 2A चित्रा के रूप में दिखाया BALC / मुख्य न्यायाधीश चूहों पहले बोर्ड प्रविष्टि तक एक घटते (habituating) विलंबता दिखाने लाल बत्ती की शर्तों के तहत (1 टेबल देखें)। Contrastingly, 129P3 / जम्मू चूहों चित्रा 2B सफेद रोशनी की शर्तों के तहत प्रयोग से पता चलता है। परीक्षणों से अधिक आदी होना के कोई संकेत नहीं दिखा। BALB / मुख्य न्यायाधीश चूहों एक है कि यद्यपि फिर परीक्षणों से अधिक पहले बोर्ड प्रविष्टि के लिए एक कम विलंबता दिखानेnimals लाल बत्ती हालत की तुलना में एक धीमी आदी होना पैटर्न दिखा। 129P3 / जम्मू चूहों न केवल फिर से आदी होना बिगड़ा, लेकिन यह भी सफेद प्रकाश शर्त के तहत संवेदीकरण की दिशा में एक रुझान दिखा। इसी तरह, Salomons के एक अध्ययन में (2012) 129P2 / OlaHsd चूहों नवीनता BALB / cOlaHsd चूहों 23 की तुलना के जवाब में एक भ्रष्ट व्यवहार लचीलापन दिखाया। MHB 4 में परीक्षण किया जब आदी होना क्षमता में अंतर इस प्रकार चूहों के दो जन्मजात उपभेदों के बीच स्पष्ट हो जाता है।

MHB के संज्ञानात्मक संस्करण उदाहरण के लिए चूहों में संज्ञानात्मक क्षति को मापने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। वान डेर Kooij एट अल। (हाय-45 हाइपोक्सिया के 45 मिनट), गंभीर एचआई (हाइपोक्सिया के 75 मिनट, हाय- 75) और sham- (2010) संज्ञानात्मक हल्के मस्तिष्क hypoxia-ischemia के साथ C57BL / 6J चूहों के कामकाज को मापने के लिए इस सेट अप के लिए इस्तेमाल किया नियंत्रण चूहों 9। परीक्षणों को पूरा करने की क्षमता (यानी, 5 मिनट के भीतर baited छेद मिल) चित्रा 3A में दिखाया गया है। चित्रा 3 बी-डी में दिखाया जाता है क्रमशः।

हाय-45 समूह में कोई संज्ञानात्मक हानि था कि इस बात की पुष्टि करने के लिए, इस समूह के एक उलट कार्य में नकली नियंत्रण के खिलाफ परीक्षण किया गया था। तीन baited छेद तीन अलग अलग सिलेंडरों के लिए नियुक्त किया गया था और जानवरों के चार परीक्षण के लिए परीक्षण किया गया। उलटा चरण के पहले परीक्षण के साथ पहले चरण के अंतिम परीक्षण की तुलना करते समय उलटा प्रभाव स्पष्ट हो जाता है। चार उलट परीक्षणों को पूरा करने की अवधि समग्र प्रदर्शन पर एक संकेत देता है। चित्रा 4 दोनों समूहों और एक स्पष्ट समग्र उपचार प्रभाव स्पष्ट है के लिए परीक्षण पूरा करने के लिए विलंबता से पता चलता है। इस उत्क्रमण कार्य में वास्तव में हो जो हाई-45 समूह में संज्ञानात्मक लचीलापन (री-लर्निंग) में एक हानि मतलब है कि वहाँ MHB 9 का उपयोग कर पता लगाने योग्य आया था।

चित्र 1
संशोधित छेद बोर्ड के 1. योजनाबद्ध सिंहावलोकन चित्रा। (ए) के सेट-अप (असुरक्षित) बोर्ड वक्र रेखाएं और समूह के डिब्बे के साथ संकेत दिया बीच में के साथ एक परीक्षण कम्पार्टमेंट (बॉक्स) के होते हैं। चित्रा 5 = उपन्यास वस्तु, चित्रा 6 = परिचित वस्तु, चित्रा 7 = बात शुरू। (बी) चूहों के लिए संशोधित छेद बोर्ड के संज्ञानात्मक संस्करण के योजनाबद्ध सिंहावलोकन। एक सिलेंडर (सी) साइड देखें संशोधित छेद बोर्ड के संज्ञानात्मक संस्करण में प्रयोग किया जाता है। बादाम का एक टुकड़ा सभी सिलेंडरों की ग्रिड के नीचे रखा गया है।लक्ष्य = "_blank"> इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र 2
चित्रा 2. लाल बत्ती या सफेद प्रकाश की स्थिति। (ए) विलंबता पहले बोर्ड प्रविष्टि तक BALB / मुख्य न्यायाधीश की और लाल बत्ती की स्थिति (बॉक्स 0-5 लक्स और बोर्ड 45 लक्स) के तहत मापा 123P3 / जम्मू चूहों (SEM के मतलब है)। Huyn-Feldt समायोजन के साथ एक दोहराया उपायों एनोवा एक तनाव (पी = .025), परीक्षण (पी <0.001) और परीक्षण एक्स तनाव बातचीत (पी <0.001) प्रभाव का पता चला हॉक पोस्ट का विश्लेषण करती है। उपभेदों के बीच: * = पी <0.0026 के बीच लगातार दो परीक्षणों: $ = पी <.0026 (BALB / सीजे) (बी) के पहले बोर्ड प्रविष्टि की विलंबता सफेद रोशनी की स्थिति (बॉक्स 0-5 लक्स और बोर्ड 120 लक्स) के तहत (SEM के मतलब है)।। Huyn-Feldt समायोजन के साथ एक दोहराया उपायों एनोवा एक तनाव (पी = .031), परीक्षण (पी <0.001) और परीक्षण एक्स तनाव बातचीत से पता चला (पी <0.001) प्रभावी तरीके। सीटी पोस्ट हॉक का विश्लेषण करती है: लगातार दो परीक्षणों के बीच * = पी <.0026,: $ = पी <.0026 (BALB / मुख्य न्यायाधीश) और टी = पी <.0026 (123P3 / जम्मू) उपभेदों के बीच। यह आंकड़ा Salomons एट अल। 2010 4 से संशोधित किया गया है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्र तीन
MHB में चित्रा 3. संज्ञानात्मक परीक्षण (चरण 1)। सभी आंकड़े मतलब + SEM के दिखा। (ए) नकली नियंत्रण चूहों का परीक्षण (एसईसी) को पूरा करने के लिए विलंबता, 45-हाय और हाय-75। (बी) चूक त्रुटियों की संख्या, (सी) गैर baited छेद यात्राओं और (डी) baited छेद के लिए फिर से देखता है। * = पी <0.05, ** = पी <0.01, *** पी = <हाय-75 बनाम 0.001 दिखावा, # = पी <0.05, ## = पी <0.01, ### = पी <0.001हाय-45 बनाम हाय-75। यह आंकड़ा वान डेर Kooij एट अल से संशोधित किया गया है। 2010 9। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

चित्रा 4
चित्रा 4. उलटा शिक्षण कार्य (चरण 2)। विलंबता उलट शिक्षण कार्य में एक परीक्षण (एसईसी) (SEM के मतलब है) को पूरा करने के लिए। ट्रायल प्रभाव: # = पी <0.05, ## = पी <0.01 (पिछले परीक्षण बनाम पहला परीक्षण उत्क्रमण कार्य)। उपचार के प्रभाव: * = पी <0.05, ** = पी <0.01 (एचआई-45 दिखावा बनाम)। यह आंकड़ा वान डेर Kooij एट अल। 2010 9 से संशोधित किया गया है।

प्रणाली कार्यकलाप मापा पैरामीटर
Avoमैं नाचता हूं बोर्ड प्रविष्टि बोर्ड पर फ्रीक्वेंसी, विलंबता (एस), अवधि (%) और औसत अवधि (ओं)
जोखिम आकलन तने हुए आती है (हिंद अंग सहित) आवृत्ति और विलंबता (ओं) को बढ़ाकर आसन
कामोत्तेजना सौंदर्य फ्रीक्वेंसी, विलंबता (एस), अवधि (%) और औसत अवधि (एस) आत्म-संवारने
मलत्याग आवृत्ति और बोली की विलंबता (एस) का उत्पादन
मूत्र विसर्जन आवृत्ति और urinations की विलंबता (ओं)
निर्देशित अन्वेषण होल का दौरा आवृत्ति और सिलेंडर यात्राओं की विलंबता (ओं)
उपन्यास वस्तु की खोज फ्रीक्वेंसी, विलंबता (एस), अवधि (%) और औसत अवधि (एस) के उपन्यास वस्तु की खोज
अनिर्दिष्ट अन्वेषण बॉक्स पालन </ टीडी> बॉक्स में आवृत्ति और rearings की विलंबता (एस) (सामने पंजे दीवार को छू नहीं)
पालन ​​बोर्ड बोर्ड पर फ्रीक्वेंसी और rearings की विलंबता (ओं)
होल की खोज आवृत्ति और सिलेंडर अन्वेषणों की विलंबता (ओं)
याद परिचित वस्तु की खोज फ्रीक्वेंसी, विलंबता (एस), अवधि (%) और औसत अवधि (एस) के परिचित वस्तु की खोज
सामाजिक समानता समूह संपर्क समूह डिब्बे के साथ बातचीत के दौरान फ्रीक्वेंसी, विलंबता (एस), अवधि (%) और औसत अवधि (ओं)
हरकत गतिविधि रेखा के पार आवृत्ति और लाइन क्रॉसिंग के विलंबता (ओं)

तालिका 1: व्यवहार मापदंडों की सूची

स्मृति प्रणाली पैरामीटर विवरण
दीर्घकालिक स्मृति गलत विकल्प गैर baited सिलेंडर के लिए जाएं; रिम नीचे नाक
चूक त्रुटि एक baited सिलेंडर की चूक एक baited सिलेंडर के लिए कोई यात्रा
अल्पकालिक स्मृति बार-बार चुनाव Baited सिलेंडर के लिए फिर से आना; रिम नीचे नाक
समग्र प्रदर्शन कुल परीक्षण समय समय सभी baited सिलेंडरों का दौरा किया गया है जब तक

तालिका 2: संज्ञानात्मक मापदंडों की सूची

Discussion

MHB प्रतिमान असुविधाजनक व्यवहार के कई आयामों को मापने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। प्रोटोकॉल थोड़ा प्रयोग के उद्देश्य के आधार पर बदला जा सकता है। इस प्रोटोकॉल में हम सेटिंग्स, बार और माप आमतौर पर हमारी प्रयोगशाला में प्रयोग किया जाता है पर चर्चा की। हालांकि, तंत्र के मापन के लिए मामूली विचलन अतीत में इस्तेमाल किया गया है और यह भी बोर्ड पर सिलेंडरों की राशि तीन अलग-अलग हो सकता है। एक संज्ञानात्मक परीक्षण सफलतापूर्वक या परीक्षण के समय देने में पूरा हो गया है के रूप में पशुओं अत्यंत चिंतित या शारीरिक रूप से प्रभावित कर रहे हैं के रूप में यदि जल्द ही परीक्षण समाप्त, यानी, अक्सर पढ़ाई परीक्षण प्रति 5 मिनट के परीक्षण के समय रोजगार, लेकिन अन्य परीक्षण के समय भी उपयुक्त हो सकता है। परीक्षण के दिन के समय कृन्तकों रात जानवर होते हैं और जल्दी अंधेरे चरण में सबसे अधिक सक्रिय हैं के बाद से लाल बत्ती शर्त के तहत होने के लिए चुना गया था। Roedel एट अल। (2006) व्यवहार और संज्ञानात्मक प्रदर्शन पर प्रकाश या अंधेरे चरण के परीक्षण के प्रभाव से पता चलता हैMHB 16 में डी बी चूहों में। अन्य अध्ययनों से सफेद रोशनी की स्थिति 1,6 के तहत MHB प्रयोगों का प्रदर्शन किया है, हालांकि, यह सफेद रोशनी की शर्तों के तहत परीक्षण के व्यवहार निषेध और (डी बी चूहों में दिखाया गया है) संज्ञानात्मक व्यवधान 16 पैदा कर सकते हैं कि ध्यान दिया जाना चाहिए।

टेबल्स 1 और 2 के व्यवहार मानकों की एक बड़ी राशि से मापा जा करने के लिए होते हैं। डेटा विश्लेषण के दौरान यह नहीं बल्कि एक ही प्रेरक प्रणाली के अन्य मानकों में इस मामले ('बचाव' में), उदाहरण के लिए 'पहली प्रविष्टि बोर्ड को विलंबता' की एक उल्लेखनीय वृद्धि का संकेत कुछ मानकों करने के लिए नेतृत्व कर सकते हैं। कुछ मामलों में यह अनिर्णायक परिणाम के लिए नेतृत्व कर सकते हैं। Guilloux एट अल। (2011) चूहों 24 में व्यवहार phenotyping के लिए एकीकृत व्यवहार जेड स्कोर की शुरुआत की। एकीकृत व्यवहार जेड स्कोर के उपयोग के साथ कई मापदंडों के एक विशेष motivatio का वर्णन एक एकल जेड स्कोर करने के लिए जोड़ा जा सकता हैएनएएल प्रणाली। बाद में जेड स्कोर को अपनी बारी में व्यवहार परीक्षण और प्रयोगों भर की तुलना में अधिक आसानी से हो सकता है।

इस प्रतिमान का वर्णन किया सुविधाओं के अलावा, एक और अधिक गहरा उपयोग Salomons एट अल के अध्ययन में स्पष्ट हो गया। (2012)। MHB में दो माउस उपभेदों (BALC / मुख्य न्यायाधीश और 129P3 / जे) की नवीनता को आदी होना, 129P3 / जम्मू चूहों 4 के एक गैर अनुकूली व्यवहार प्रोफ़ाइल का संकेत व्यवहार लचीलापन में एक अंतर का प्रदर्शन, तुलना में था शायद अनुकूली क्षमता बिगड़ा और mirroring यहां तक ​​कि रोग चिंता।

समापन MHB एक ही प्रयोग में एकाधिक व्यवहार आयामों की माप की अनुमति देता है। यानी एक पारंपरिक छेद बोर्ड और खुले मैदान परीक्षण, असुविधाजनक व्यवहार, सामाजिक संपर्क, अनुभूति और अनुकूली क्षमता से सुविधाओं के संयोजन से, कल्याण की जांच की जा सकती है। उदाहरण के लिए इस परीक्षण कर सकते हैं pharmacological- के कारण व्यवहार में बदलाव का मूल्यांकन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है और / याआनुवंशिक जोड़तोड़, चयनात्मक प्रजनन और अनुकूली क्षमता। शास्त्रीय परीक्षण बैटरी की तुलना में, जरूरत पशुओं की संख्या स्पष्ट रूप से कम हो जाता है और परीक्षण के दौरान जानवरों द्वारा अनुभवी तनाव बेहद कम है।

Materials

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Cognitive mHB apparatus The box for cognitive testing is 50x50 cm by inserting a partition made of grey PVC in the standard mHB. A smaller board (35x22x1 cm) with 10 cylinders is placed in the middle of the box. All cylinders are scented with a flavor animals are attracted to (e.g. vanilla) and all are baited with a reward (e.g. a piece of almond) beneath a grid so the animals cannot remove it. Cylinders (often three) are cued with a colored ring (contrasting with the grey PVC) and are baited with a removable reward (e.g. 0.05 g piece of almond). 
Vanilla flavor Vanilla flavor dissolved in water (0.02%)
Camera Camera that generates sufficient quality output to rescore the behavior from video. 
Stage light A theather light that allows to adjust the light intensity and the dimensions of the surface that is lit. 
Behavioral scoring software Behavioral scoring software.

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References

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Labots, M., Van Lith, H. A., Ohl,More

Labots, M., Van Lith, H. A., Ohl, F., Arndt, S. S. The Modified Hole Board - Measuring Behavior, Cognition and Social Interaction in Mice and Rats. J. Vis. Exp. (98), e52529, doi:10.3791/52529 (2015).

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