Abstract
降低脊髓血流量（SCBF）（ 即缺血）起着外伤性脊髓损伤（SCI）的病理生理关键作用，并进行相应的治疗神经保护的一个重要目标。虽然有几种方法已被描述，以评估SCBF，它们都具有显著局限性。克服后者，我们提出使用实时超声造影成像（CEU）。在这里，我们描述这种技术在脊髓损伤的大鼠模型挫伤的应用程序。甲颈静脉导管，首先注入在重复注射造影剂，六氟化硫包封的微泡氯化钠溶液。脊柱然后稳定与定做的三维帧和脊髓硬膜通过椎板切除术在THIX-ThXII露出。超声波探头然后定位在硬膜（涂有超声凝胶）的后方面。为了评估禁忌基线SCBF，单次静脉注射（400微升）圣剂施加穿过完好脊髓微血管记录其通过。的重降装置随后被用于生成SCI的可重复实验挫伤模型。造影剂重新注入15分钟以下的伤害，以评估后SCI SCBF变化。 CEU允许实时体内的变化SCBF以下脊髓损伤的评估。在未受伤的动物，超声造影显示沿完好的脊髓不均匀血流量。此外，15分钟后SCI，有缺血的关键在震中的水平，而在SCBF较偏远地区的完好保存依然。在相邻的震中（既延髓和尾部）的区域，SCBF被显著降低。这对应于先前描述的“局部缺血半影区”。这个工具是用于评估疗法旨在限制缺血和随后的SCI所产生的组织坏死的影响重大利益的。
Introduction
外伤性脊髓损伤（SCI）是一种破坏性的条件，导致电机显著障碍，感觉和自治职能。迄今为止，还没有治疗已显示出它在患者的效率。对于这样的原因，以确定新的技术，这将提高潜在的治疗方法的评估，并可以进一步阐明损伤pathiophysiology 1是非常重要的。
SCI被分为两个连续的阶段，称为初级和继发性损伤。原发性损伤对应于最初的机械损伤。而继发性损伤团的各种生物事件（如炎症，氧化应激和缺氧）的级联进一步向初始损伤，组织损伤，因此，神经功能缺损2,3的逐渐扩大。
在脊髓损伤的急性期，神经保护疗法旨在减少继发性损伤的病理和sh乌尔德从而提高神经系统的结果。在众多的继发性损伤的事件，缺血起着至关重要的作用4,5。在SCI震中的水平，受损的脑实质微血管阻碍了有效的脊髓血流量（SCBF）。此外，SCBF也显著在围绕损伤震中，具体被称为“局部缺血半影区”的区域中的区域减小。如果SCBF不能迅速这些区域内恢复，局部缺血可导致补充实质坏死和进一步的神经组织损伤。因为即使是轻微的组织保存可以有功能的重大影响，这是主要的兴趣来开发药物和治疗方法，可以减少缺血后SCI。为了突出这一现象，以前的工作表明，只能保存10％髓鞘的轴突就足以使走在猫后SCI 6。
虽然有几种方法已被描述，以评估SCBF，所述Ÿ都有显著的局限性。例如，使用放射性微球7,8-和C14-iodopyrine放射自显影9需要后续动 物牺牲并不能重复在稍后的时间点。氢气清除法10取决于脊柱内电极，其可进一步损伤脊髓的插入。而激光多普勒成像，光电容积描记14,15 和体内光镜16具有测量11-13的一个非常有限的深度/面积。
我们的团队此前曾表明，超声造影（CEU）成像，可用于评估实时体内大鼠脊髓实质17 SCBF变化。要注意的是类似的技术是由Huang 等人施加是很重要的。在脊髓18的猪模型。 CEU应用于超声成像的具体方式，它允许灰度形态IM关联年龄的血流19的空间分布（通过常规的B模式获得）。该SCBF成像和定量依赖于血管内注射回声造影剂。造影剂是由六氟化硫微泡（平均直径约2.5微米，90％的具有直径小于6微米）由磷脂稳定。微泡反映从而增强血液回声和组织根据其血流量增大对比度探头发射的超声波束。因此，能够根据反射信号的强度，以评估在感兴趣的特定区域的血液流动。微泡也安全的，他们已经在人类中被临床应用。六氟化硫被快速清除（平均终末半衰期为12分钟）和80％以上的施用六氟化硫被内注射后2分钟回收在呼出的空气。该协议提供了使用IM CEU一个简单的方法老化，以评估在大鼠SCBF变化。
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Protocol
注：在本手稿中描述的方法被批准由医学，巴黎，法国（CEEALV / 2011-08-01）的拉里布瓦西埃学院的生物伦理委员会。
1.仪器准备
- 准备和清理的导管插入以下工具：微型镊子，微型剪刀，微细血管钳，剪刀大，手术线（黑色编织丝绸4-0）和地下14导尿管。 Heparinize用肝素溶液（5,000单位/毫升）的导管。
- 准备和清理的椎板以下工具：剪刀大，手术刀和骨刀。用一个定制的骨刀，旨在减少椎板（ 图1）期间损害脊髓的风险执行椎板切除术。
- 设置用于定位的动物的和稳定的三维帧。定做的框架是建立与外部固定器霍夫曼3在相关的镊子的元素，WHICH与被弯曲，以适应动物的腰椎。
- 准备用于脊髓损伤生物力学的重量降装置（冲击）。
注：定制嵌塞设备的设计采用三维软件和打印3D。 - 打开超声机上。
- 制备的试剂盒，所述造影剂的重建。
注：该套件包括1瓶含有25mg冻干粉末，含有5ml氯化钠和一个微型尖峰转移系统（ 图2）1预填充注射器。详述的步骤的造影剂的重构下面（在第5）。
2.颈内静脉穿刺置管（图3）
- 麻醉 ，用4％的异氟醚的动物。发生在仰卧位动物。确认正确麻醉，确保动物没有响应时，爪子都捏了钳子。适用兽医药膏眼睛，防止干燥而UND呃麻醉。
- 剃颈部和清洁皮肤。使在颈部的中线切口。缩回sternocleidomastoidian肌肉，以便找到颈内静脉。拧紧一个连字在静脉的喙部。
- 上静脉，1厘米以下结扎申请微血管钳。通过另一个线程周围的静脉，刚刚与结随时可以收紧时，夹子松开夹子下面。
- 打开静脉（venotomy）钳和吻端结扎之间的墙。在静脉腔内引入地下14导管将其推向心脏。
- 当它碰到夹紧，松开后者与导管推进一步。固定导管的静脉，紧紧拧紧结上与导管内静脉。
- 通过抽出，在导管少量的静脉血，并随后再与肝素化盐水冲洗它评估导管的通畅。这可以防止阻塞的catheter一个潜在的血块。
- 连接软管的导管进一步注入造影剂（微泡）的。保持它关闭（密封），直到准备使用。
3.访问的脊柱，椎板和鼠定位（在3D帧）
- 将动物在一个平面俯卧水平位置。剃并清洁动物背部（胸部区域）。
- 通过触诊（ 图4）确定的最后一个肋（在大鼠的第十三次）。这允许人们估计第十三次胸椎（ThXIII）的位置。
- 使4cm的皮肤切口上的中线，集中在ThXIII。打开皮肤切口，以及底层的囊中。观察背部肌肉腱膜以及椎脊柱过程的提示。
- 通过仔细触诊肋骨第十三次定位ThXIII脊柱过程。
注：第十三次肋骨连接到ThXIII，因此代表易失水TE解剖标志为ThXIII鉴定。这一步使ThXII的本地化THIX棘突，以及L1和L2（第一和第二腰椎椎）。 - 切开肌肉腱膜和分离在任一侧上的肌肉在棘突的椎板和小关节从THIX暴露到L2。通过从横突分离肌肉暴露L1和L2的横向方面。
- 钩的三维帧以固定位置（ 图5）对动物的门牙。夹紧L1和L2椎体与改性钳子。连接改性镊子三维帧，以稳定的动物。
- 轻轻拉动尾部保持腰椎的镊子，以加强整个脊椎和提升从板凳上胸部。
注意：使用上述结构的动物应该能够呼吸。此外，尽管肋骨，脊柱和脊髓的呼吸运动线也应该保持不动。 - 取出棘突processess从THIX到ThXII。轻轻插入骨刀的下刃ThXII的左椎板下方，然后关闭该骨刀，以切割薄片（ 图6）。
- 重复同样的动作为右椎板和删除先后后弓。重复前面的步骤为椎体ThXI到THIX以实现四级椎板。每个椎骨取出两个小关节。
注意：在整个过程中，清洁手术视野从局部出血。对于这一点，用棉签和灌溉用温水盐水。止血系统发生在几分钟之内。
4. CEU探头定位
- 覆盖硬脑膜超声波凝胶。这允许有效传输探针和脊髓（ 图7）之间的超声波。
- 稳定的超声探头机智公顷钳可随后连接到3D-帧由一个铰接臂。手动定位探头。确保探头导向，以获得纵向斜切片矢状位。在一个正确的位置，脊髓是在图像上严格水平和脊髓的中央管是沿着脊髓的全段可见。
注：定位应由超声波机的屏幕上显示的实时B模式图像被引导。超声波探头的焦距应与脊髓中央管对齐。此时，脊髓的后方面是可访问的，这将最终允许冲击器的定位。 - 当最佳，锁定铰接臂以稳定的位置。
5.准备造影剂 - 微泡重建
- 使用商业重构试剂盒的内容，并通过紧固它氩弧焊连接的柱塞杆htly到注射器（顺时针）。打开传送系统水疱并取下注射器尖端帽。打开传送系统帽和连接注射器输送系统（系紧）。
- 取下小瓶保护磁盘。小瓶滑入的透明套
- 传输系统并按牢牢锁定小瓶到位。
- 清空注射器的内容物到小瓶通过推动柱塞杆上。剧烈振荡20秒以混合所有的内容在小瓶，得到白色乳白色均相液体。
- 倒置制度和退出仔细造影剂进入注射器。拧下传输系统中的注射器。重建（指示）后，将1ml所得分散体包含8微升六氟化硫的微泡。绘制微泡的悬浮液加入100毫升注射器。插入100毫升注射器进入电动泵。盖上盖子。
- 开始重新的恒定的搅拌构成的微泡。得到恒定的搅拌用注射器，它保持了微泡悬浮液的缓慢旋转。通过柔性管连接泵的颈静脉导管。超声机器设置为“谐波模式”。
注：后者对应于其中微气泡可以特异性检测和可视化的方式。该模式具有低机械指数，其不破坏微泡，而不是B模式。 - 通过注入造影剂的第一剂（400微升）吹扫导管。在这第一次输液，检查微气泡真的出现在超声屏幕上。这证实了整个电路（从注射器到老鼠的血液）是完整和开放的。
- 超声机设定为“B模式”形象化脊髓实质和残留在血流中少数微泡的破坏。的“B型”的高频移植史密茨高能量的微泡，这让他们崩溃。
- 让动物静静地躺着大约30分钟。此期间允许血液动力参数的稳定化。
在完整的脊髓6.评估的SCBF
- 超声机器设置为“谐模式”。同时开始（1）输注造影剂（400微升）和（2）时计的。
注：在输注，微泡在血液中的浓度应增加，使脊髓（ 图8）的对比度想象。由于微气泡被迅速破坏，微泡的血液浓度开始下降，一旦注射完成，其产生在脊髓的对比度可视逐渐降低。 - 1分钟后，选择（按）超声机上的“剪辑保存”按钮。这将使一个保存的r 1分钟AW超声数据及摄像录像（被超声屏幕上先前显示）。
- 超声机设定为“B模式”。这将消除剩余的微泡。
7.实验SCI
- 使用连接到3D-帧的显微，定位重锤落下撞击装置，使冲击器的前端开始与硬脑膜（对脊髓中线）接触，在THX和ThXI之间的交界处（ 图9） 。
注意：此程度应以与超声装置观察到脊髓的段的中间。撞针和撞击的主体是直径8mm。撞击的尖端，这将产生伤害，为3毫米的直径。 - 将冲击装置的前锋在10厘米高的位置。通过释放撞击器的前锋诱导实验SCI。这名前锋下降，释放日Ë冲击，伤及脊髓。所述定制嵌塞提供相当于10克重的冲击，从10cm的高度落下。
SCBF 5分钟后SCI的评估8.
- 重复在第6（SCBF的评估）描述的步骤。微泡将无法穿过受损微血管和损伤震中将保持暗（ 图10）。
9.牲
- 安乐死的动物与腹腔注射死刑戊巴比妥（100毫克）。
10.定量SCBF通过离线分析
- 启动用于定量（超声波机）的超扩展软件。选择“ 文件 ”，然后选择之前保存的原始数据，并打开相关文件。按（选择）了“ 志Q”按钮，激活“ 量化模式 ”。塞莱CT“ 设置的投资回报率 ”（按钮），选择圆形。
- 选择“Draw投资回报率 ”（按钮）和脊髓（ 图11）画的兴趣7相邻的圆形区域（ROI）。打开菜单“ 装修 ”，并选择功能“ 价值曲线 ”。观察显示多个曲线的软件，每一个对应于微泡浓度的ROI内的更改。
注：每条曲线有一个“灌注deperfusion”轮廓。曲线的第一阶段是平坦的且对应于微泡的到来之前的期间。在第二阶段中，微泡的浓度迅速增加作为输液的结果。在第三阶段，该阶段开始时，输注完成后，微泡的浓度逐渐降低，因为它们在血液中disintegratse。 - 将第一条垂直线的C的第二阶段的开始urve并选择“ 设置 ”。该通知从哪里开始分析软件。
- 将第二垂直线在记录结束，并再次选择“ 设定 ”。该通知软件在哪里停下分析。
- 看看“CV”菜单并记录“AUC”值，其对应于“ 曲线下面积 ”进行分析。该值正比于相应的ROI内的SCBF。
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Representative Results
与上面描述的协议，有可能映射沿纵向脊髓矢状段SCBF。
在完整的脊髓，似乎有实质（ 图12）内SCBF不规则性。这可以通过radiculo髓动脉变量分布（RMA）的从一个动物进行说明到另一个。 RMA指节段性即到达脊髓前动脉（ASA），因此提供血液供应脊髓实质内动脉。与此相反，根性动脉对应节段性动脉，这没有达到ASA和因此不提供脊髓血液供应。因此，在脊髓节段所在的RMA吻合与ASA，有更多的血液流动（如图中的结果）。
脊髓损伤后，实时成像CEU显示流通不足的损伤震中。震中不亮（无造影剂信号），因为没有活性的血流。使用几个感兴趣区的血流的更详细的分析显示了三个独特的血流领土。首先，在震中的水平，血流是最低约-90％的平均下降。其次，在相邻的震中（既延髓和尾部）的领土，SCBF也显著下降（从50％到-80％）。第三，对应于完整的组织最偏远的地区，SCBF被保留。第二区域相当于“缺血半影区”，这应该是潜在的神经保护疗法的靶标。能够容易地可视化和量化SCBF改变后的SCI是用于评估疗法旨在减少组织缺血的效率是有用的，因此突出了这种技术（ 图13）的重要性。
所述试剂盒为微泡重构和Vueject°泵用于微泡输注图2示意图 。传输系统允许小瓶和注射器之间的微泡和生理盐水的交付。 请点击此处查看该图的放大版本。
图3. 颈静脉导管 。该导管将在颈静脉插入，然后推向心脏和最后扣上一个结。 请点击此处查看该图的放大版本。
图4.方法正确识别椎体水平 。在大鼠中，最后肋附接至第十三次椎骨。后者可以通过皮肤作为一个具有里程碑意义的最后胸椎，第十三次被触及。肌肉超脱于棘突两侧。 请点击此处查看该图的放大版本。
图5.稳定在3D-帧的动物（1）的门牙被钩在框架上，而第一和第二腰椎椎体（L1＆L2）被夹紧以定做钳子。 （2）腰椎轻微收紧其稳定的动物，并从板凳提升胸部，从而使免费呼吸运动不运动的脊椎。 请点击此处查看该图的放大版本。
图中的椎板6.技术细节。首先，定做骨刀的薄刀片传递椎板下方而不损坏脊髓。然后将骨刀是封闭的，其中ÇUTS并移除椎板的一部分。该过程重复两侧并从ThXII到TxIX以实现四级椎板。最后，小关节也被删除。 请点击此处查看该图的放大版本。
图7.定位超声波探头和嵌塞的装置。该探针平行于脊髓和稍微倾斜（20〜30°），以使重锤落下冲击可以放置在硬脑膜的后方面。脊髓应与整个的超声成像“B模式”的中间段中央管目前可见的。 请点击这里查看一个更大的版本这个数字。
完整脊髓图8.对比度成像。在对比模式的连续数字（橙色彩色图像）显示了如何将造影剂（微泡）逐步出现以下的输液，从而增强了脊髓的对比度。推注持续约10秒，对比数据记录1分钟。 请点击此处查看该图的放大版本。
图9.下列实验的SCI的变化在B模式，一个强回声病变出现在实质内，对应于初始实质ħ emorrhage后SCI。组织学（H＆E染色）：由小血管，导致血液外渗的实质（黄色比例尺= 2000微米）大规模破坏外伤出血的结果。所述撞击装置示于右侧。这名前锋是从10厘米的高度释放，碰撞与随后产生脊髓损伤的冲击。 请点击此处查看该图的放大版本。
图10.对比度成像15分钟后的SCI，类似于图8，微泡是可见的，因为他们通过脊髓微血管通过。在震中（星号），血流量由微血管中断受阻。10large.jpg“目标=”_空白“>点击此处查看该图的放大版本。
图11.协议SCBF定量。随着超扩展软件，感兴趣区域（ROI）7个圆形和相邻区域的绘制纵向脊髓图像上。第1ROI放置在损伤震中。在每个ROI中，软件生成一个灌注deperfusion曲线和该曲线下计算区域。该值与相关这方面的血流。 请点击此处查看该图的放大版本。
图12.异质血流沿脊髓。这些曲线图显示脊髓血流量的异质性以及动物之间的变异性。这可以由脊髓的血管解剖在很大程度上说明。然而，由于异质性和可变血管解剖，人们必须使用的血液流量测量（从每个ROI）受伤前作为基准。在以下时间点（后SCI）的测量结果表示为基线的百分比变化。 请点击此处查看该图的放大版本。
图13.变化脊髓血流量（SCBF）诱导实验性脊髓损伤（SCI）。SCI后15分钟有在震中的关键水平，而缺血仍SCBF p在较偏远地区的完好保留。在相邻的震中（既延髓和尾部）的区域，SCBF被显著降低。这对应于前面描述的“缺血半暗带区”。 请点击此处查看该图的放大版本。
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Discussion
尽管我们已经描述了如何使用CEU在大鼠脊髓挫伤模型，该协议可以被修改，以适应其他的实验的目标或SCI模型。我们选择（损伤，15分钟后的SCI之前）来衡量SCBF只在两个时间点，然而时间点的数目和SCBF测量之间的延迟可以适于满足其他研究的需要。例如，在我们以前的工作如图17所示 ，我们已经测量SCBF在五个连续的时间点在整个第一小时后的SCI。值得注意的是，假手术组（无SCI）中，我们惊奇地观察SCBF逐渐减小是很重要的。虽然我们最初担心反复微泡输注可能损害脊髓血管，进一步的实验（未发表数据）证实，这些变化是由渐进的改变在局部组织生理条件（温度，水合作用）诱导椎板，以及延长的引起的T博览会他硬膜与周围组织的环境空气和超声波凝胶。这些问题是在处理微循环所有实验通用的，作为循环是极其敏感的许多参数，因此容易发生vascoconstriction或血管舒张。因此，我们建议在此期间，外科伤口保持开放的期间是尽可能短。如果需要在延长的时期的多个SCBF测量，这将是优选的以关闭采集之间的动物切口以围绕恢复生理条件和脊髓内。
另外，也可以进行修改的形状，大小，位置和ROI的用于SCBF分析的数量。之一的CEU的主要优点是，测量可以随时下述实验完成由所记录的数据脱机处理来制备。另外，也可以重复进行测量，或者如果必要修改的测量设置/标准。
超声成像的空间分辨率是成正比的超声波的频率。的超声频率更高，更好的空间分辨率。我们已经使用了一个高- 频率（12-14兆赫）探针，其提供了一个图象具有约100微米的像素分辨率。具有非常高的分辨率的系统中，频率增加至55兆赫和每个像素为约20微米20。这种装置也可用于CEU，其中描绘SCBF的更精确的实质的分布。然而，非常高的分辨率的系统昂贵得多。
其他一些技术已经提出了SCI来衡量SCBF，但它们都具有唯一的限制。有些人，如放射性微球7,8或14碘放射自显影安替比林9，需要动物的牺牲。在这些情况下，脊髓必有收获用于分析。另一方面，氢气清除法10中 ，需要脊柱内电极插入实际上可能修改SCBF。此外，测量只能在脊髓实质的非常有限的区域进行。光镜通过脊柱窗口还提供了一种方法来评估微循环，但是这种方法有观察一个非常有限的深度。它仅允许观察流通的浅表软问题，而不是实质16内。
在文学，实时体内评估SCBF由激光多普勒成像11-13通常执行。然而，即使这种技术具有若干限制。首先，由于该激光是小于1毫米的直径，SCBF只能在对应于一半球形的约1mm直径的非常有限的区域评估。由于大鼠脊髓为约3毫米的直径，分析的有限区域是一个主要的制约因素。此外，正如我们已经表明，SCBF在原封脊髓是不均质的，它以测量SCBF在一个较大的区域为组织的微循环的适当表示是非常重要的。其次，该激光器具有的渗透，因此DETE一有限的深度浅表美分的SCBF。其结果是，它不仅测量实质SCBF而且，该软脑膜（即围绕实质）。由于软脑膜具有独特的血管系统，不进行相同的自动调节机制的实质容器，这些信息可能会产生误导。最后，激光多普勒不提供任何形态信息。 CEU通过显示线（B模式）的形态的图像，而唯一地呈现可在实质内明确确定造影剂克服了这些限制。
尽管它的许多好处其他方法，CEU也有一些明显的局限性。由于测量是在一个二维的矢状切片制成（通常平行于中央管），SCBF从实质的其它区域是不可访问的。此外，通过单一的二维的矢状脊髓节段产生的信息可能不能代表整个帘线。 Nevertheleβ，这可以通过一些预防措施来控制。首先，通过重复测量在同一位置，所述第一测量制成（完好脊髓）可以用作基线值。第二，由受伤在脊髓中线（双边损伤）时，SCBF变化应当是对称的左和右（未公布的数据）之间。这些预防措施有助于确保单一矢状切片的分析也足以体现SCBF的全球纵向分布。
超声设备的高成本是另一个限制。然而，几个解决方案存在针对此问题。首先，一些实验室可以制造商为他们的实验协商临时贷款。超声机器是可运输的，临时的贷款是可能的。这一直是使用由我们实验室的方法。另外，一组实验室可以集中资源，以购买机器和分裂的成本。否则，许多大学院校有成像设备和超声波机S能推荐作为必不可少的工具。因此，可以将动物用于运输CEU评估成像设施，然后带回进行其他实验。
为了评估血管变化，造影剂（微泡）必须静脉注射。虽然颈静脉或股静脉插管是侵入性和风险性，静脉是方便和清晰可辨。相比之下，尾静脉注射是非常创伤小，但船是杰出很差/可见光进行适当的导管。因此，存在这样的风险：针尖不会被正确地放置在静脉内或它可能在注射过程中移动，危及整个实验。对于这样的原因，我们更倾向于使用颈静脉并引入导管一致的微泡输液。
脊椎骨骼环绕脊髓。超声波被骨反射并不能穿过脊髓椎板，成像需要骨切除（椎板切除术）打开声窗。打开椎管最简单的方法就是通过椎板切除术去除椎后弓。在这个协议中，我们需要一个四级椎板切除术可视化一个长段脊髓，包括震中，半影区和完整脊髓的偏远地区。虽然大多数的实验模型SCI要求椎板切除术（用于剪辑应用程序或冲击挫伤），这些通常由1-2去除椎板。广泛4级椎板切除术，是我们研究的另一个限制。但是，如果一个人只需要学习的震中和半影区，可大可小椎板切除术可和建议。
最后，尽管上述的几个限制，CEU是评估SCBF变化和各种疗法（研究目的）的效果的有用工具。此可靠，实时， 在体内的方法是理想的观察治疗，以减少缺血和坏死组织后SCI。
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| External Fixator Hoffman 3 | Stryker, Kalamazoo, USA | Modular system used to build the custom made 3D frame and the jointed arm holding the ultrasound probe | |
| Toshiba Applio | Toshiba, Tokyo, Japan | Ultrasound machine | |
| Sonovue | Bracco, Milan, Italy | Contrast agent : microbubbles | |
| Vueject pump | Bracco, Milan, Italy | Electric pump for infusion of microbubbles bolus | |
| Aquasonic Ultrasound Gel | Parker Laboratories, Fairfield, NJ, USA | Ultrasound gel used to transmit the ultrasound waves | |
| Isovet | Piramal Healthcare, Mumbai, India | Isoflurane used for anesthesia | |
| Ultra Extend | Toshiba, Tokyo, Japan | Software used for quantification of spinal cord blood flow | |
| Mastercraft Five-piece Mini-pliers Set, Product #58-4788-6 | Canadian Tire, Toronto, Canada | Set of pliers for Do-it-yourself job |
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