Abstract
יש צורך באינטגרציה מורכבת של אותות מולקולריים וחשמליים להפוך רחם שקט לאיבר התכווצות בסוף ההריון. למרות הגילוי של רגולטורים מרכזיים של התכווצות רחם, תהליך זה הוא עדיין לא הבין באופן מלא. עכברים מהונדסים לספק מודל אידיאלי שבו ללמוד המלטה. בעבר, השיטה היחידה ללמוד התכווצות רחם בעכבר הייתה הקלטות vivo לשעבר איזומטרי מתח, שהם לא טובים מכמה סיבות. הרחם יש להסיר מן הסביבה הפיזיולוגית שלה, כמובן זמן מוגבל של חקירה אפשרי, והעכברים חייבים להיות קורבן. הפיתוח האחרון של טלמטריה רדיומטרי אפשר למדידות של לחץ תוך רחמי in vivo בעכברים אורך, בזמן אמת. כאן, ההשתלה של מַד מֶרְחָק תוך רחמי כדי למדוד שינויי לחץ ברחם העכבר מאמצע הריון ועד ללידה מתוארת. על ידי הבדלים בהשוואה לעיתונותures בין סוג בר עכברים הטרנסגניים, ההשפעה הפיזיולוגית של גן של עניין אפשר לבאר. טכניקה זו צריכה לזרז את פיתוח התרופה המשמש לטיפול בהפרעות myometrial במהלך הריון, כוללים צירים מוקדמים.
Introduction
לידה מוקדמת היא הסיבה המובילה לתחלואה והתמותה במדינות מפותחות סביב הלידה; הוא אחראי על 50% מתחלואה סבה-לידתית ו -75% מ1,2 תמותה סביב הלידה. צירים מוקדמים הוא רב פנים ויכולים להיות אידיופטית. למרות שמחקרים רבים התפתח במסלולים המולקולריים וחשמליים משנים את myometrium מרקמה שקטה להתכווצות אחד, הפתופיזיולוגיה של צירים מוקדמים המדויקת נותרת חמקמקה. האנדוקרינית, דלקתי, וויסות הגנים יש כל קשורות ללידה מוקדמת 3,4. עם זאת, חששות אתיים להגביל את היכולת לבצע מחקר על המנגנונים של צירים מוקדמים בבני אדם.
בהתחשב במגבלות אלה, חוקרים רבים פנו לעכברים כמודל למערכת שבה לומד את הפיסיולוגיה של לידה. יש עכברי הריונות קצרים שנמשכו כשלושה שבועות והוא יכול בקלות להיות מניפולציות גנטית. בנוסף, יש לי מודלים עכבר גנטיים מרוביםפותח כדי לקבוע מסלולי האיתות כי הם חיוניים לעבודה 5. למרות הבדלים עיקריים בין העכבר והמלטת אדם, עכברים ובני אדם חולקים רבים של אותם המנגנונים שהם חיוניים לעבודה, כולל דלקת תוך רחמי וזיהום 6. כך, עכברים לשמש ככלי רב ערך לבחינת פעילות רחם. עד כה, את תקן הזהב למדידת התכווצות רחם בעכברים היו vivo לשעבר הקלטות מתח איזומטרי; עם זאת, זה מוגבל לנקודת זמן הריון אחד לכל ניסוי ודורש ההסרה של הרחם מהסביבה הפיזיולוגית שלה. גורם חשוב נוסף הוא המספר הגדול של בעלי חיים הנדרשים לחקירות אלה. לבסוף, מתודולוגיה זו אינה מאפשרת למחקרים ארוכי טווח בוחנים גיוס של הפתופיזיולוגיה עבודה ומוקדמת.
הפיתוחים אחרונים שנעשו במכשירי טלמטריה רדיומטרי משמשים ללמוד לחץ דם משתנה 7 בעכברים וintלחץ rauterine בחולדות 8 התחנן השאלה אם באותה הטכנולוגיה יכולה לשמש כדי לחקור שינויים בלחץ תוך-רחמית בעכברים במהלך הריון. לאחר פתרון בעיות ראשוניות, שיטה פותחה בהצלחה למדידת אינדוקציה עבודה והתקדמות בעכבר. גישה זו in vivo יכולה למדוד את המעבר מהמדינה בלחץ הנמוך של הרחם שקט למדינה בלחץ גבוה מעידה על צירה לידה חזק. שיטה זו הייתה מסוגלת לזהות הבדלים משמעותיים בין לחץ עכברים הטרנסגניים עם תהליך לידה שנפרצו ועכברים סוג בר, הממחיש את ההשפעה הפיזיולוגית של ביטוי גנים 9 גם. פרוטוקול זה מספק בזמן אמת, בשיטת vivo ללמוד לחץ רחם עכבר בזמן ההריון.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
הערה: כל נהלי בעלי החיים עמדו בהנחיות לטיפול ושימוש בבעלי החיים שנקבעו על ידי המכון הלאומי לבריאות. כל הפרוטוקולים אושרו על ידי ועדת בעלי החיים באוניברסיטת וושינגטון בסנט לואיס.
הערה: חומרים ספציפיים וציוד לפרוטוקול זה מופיעים חומרים וציוד שולחן.
1. גידול מתוזמן של נקבות עכברים
- גזע נשים בוגרות בין שניים לשישה חודשים של גיל בחלון זמן 2 hr עם זכרים. שעה רבייה ספציפית אין צורך כל עוד הם נשמרים עקביים למכלול הניסוי.
- לאשר את ההריון על ידי הנוכחות של תקע הזדווגות. לייעד את היום ושעה שבו התקע נראה לראשונה כמו יום שלאחר משגל-0 (dpc0). זכור שעה מסוימת כאשר מתחיל הקלטת לחץ.
- לבצע ניתוחים על dpc8-13. DPC המדויק תלוי בזן העכבר.
- כדי לקבוע אם עכבר הוא בהריון לפני הניתוח, PEההדמיה אולטרסאונד rform של הבטן עם בדיקה מערך ליניארי 40 MHz מצמידים את מערכת הדמיה לפני מתן הרדמה. זה יאפשר להדמיה של שקי הריון. אם מערכת אולטרסאונד אינה זמינה, השתמש במשקל של העכבר.
הערה: עלייה במשקל של לפחות 2 גרם בין dpc0 וdpc8 והתנפחות של הבטן הוא אינדיקטור טוב להריון.
2. ניתוח טלמטריה Prep
- השתמש החיטוי לעקר מכשירים, גזה, צמר גפן, וילונות כירורגי, וטיפים פיפטה בתוך 24 שעות לפני הניתוח.
- משטח ניתוח נקי עם אתנול 70%.
- הפעל כרית חימום (מתמחה למכרסמים) ומעקר את החרוז.
3. ניתוח טלמטריה
- להרדמה, להשתמש 4-5% isoflurane עם קצב זרימת חמצן של 1-2 ליטר / דקה.
- חכה עד שהעכבר מראה סימנים של הרדמה ולאחר מכן להזריק תת עורי עם עצירות (משכך כאבים: 0.1 מיליליטר לכל 20 גרם).
- לגלח את הבטן של העכבר מהחלק התחתון של הצלעות עד לשלפוחית השתן.
- להביא את העכבר לשולחן הניתוחים על כרית חימום מראש התחמם, ולכסות את עיניו של העכבר עם משחת עיניים כדי למנוע התייבשות.
- תתחיל בטכניקה סטרילית. לשים על כפפות סטריליות ולשמור את העטיפה כמשטח סטרילי בו יש להציב סקראבס יוד ואתנול.
- הסר את מַד מֶרְחָק מהחבילה או מלוח ולהשתמש במלקחיים סטרילי כדי למקם אותו בגזה סטרילית.
- השתמש במזרק (המסופק על ידי ספק מַד מֶרְחָק) כדי למלא את קצה הצנתר עם ג'ל. יש ללחוץ בעדינות את הקטטר יצירת לחץ שלילי מספיק כדי למשוך את הג'ל לקטטר.
- הנח טיפ סטרילי בפיפטה. פיפטה 2 μl של דבק כירורגים ולהגדיר את פיפטה על משטח סטרילי.
- כדי לנקות את האתר כירורגית, ספוגית האזור עם יוד ולאחר מכן עם 70% אתנול.
- חותך חור בווילון כירורגי פשוט הגדול מספיקלשטח הדרוש לחתך והמקום על העכבר.
- בצע קמצוץ רגל (תגובת דוושה) כדי להבטיח את העכבר הוא מורדם לחלוטין לפני ביצוע חתך.
- לעשות חתך קו האמצע אנכי קטן. בשלב הבא, לעשות חתך דומה דרך קיר גוף השריר הבסיסי.
- משוך בעדינות את הרחם אל מחוץ לחלל הגוף ולאתר את קרן הרחם המכילה את רוב הגורים שהם קיימא.
- אופציונאלי - לתוספת של מירנה, להזריק וקטור נגיפי אל תוך שכבת שריר של רחם לפני החדרת מַד מֶרְחָק.
- לעשות חתך קטן בקצה של קרן הרחם עם 3 מ"מ חיתוך מספריים אביב קצה.
- השחל את הצנתר, ללא סחיטה, בין דופן הרחם וצקים עובריים. הכנס את קטטר העבר כמה שקים כדי להפחית ההסרה המקרית שלה. ודא שקים העובריים אינם מופרעים על ידי ההכנסה.
- פיפטה דבק כירורגים לאתר של הכנסת מַד מֶרְחָק לדבוק קטטר לuקרן terine ולמנוע את הקטטר מלהחליק מתוך קרן הרחם. חכה כמה שניות עד שהדבק להפוך נוקשה, ולאחר מכן למקם את הרחם בזהירות בחזרה בתוך חלל הגוף.
- הנח את מַד מֶרְחָק בחלל הגוף בצד השני של אתר הכנסת קטטר.
- תפר את חלל הגוף סגור עם 6.0 תפרים נספגים. ראשית, לעשות תפר תיק ולאחר מכן 03:57 תפרים בודדים.
- לתפור את העור על ידי שימוש באותה הטכניקה, אבל עם תפר 6-0 לא נספג.
- dibucaine ספוגית (משכך כאבים אקטואליים) משחה על אתר החתך.
- הזרק 0.3-0.4 מיליליטר של תמיסת מלח סטרילית תת עורי כדי לעזור רעננותם של בעלי החיים.
- לפקח על בעלי החיים לאחר הניתוח עד שהוא ער לחלוטין. אל תניח את העכבר לכלוב שלו עד שהוא מסוגל להחזיק באופן חופשי את ראשה מעל לטבלת סוגים מסוימים של מצעים יכולים לחנוק את העכבר הרדים בכבדות. לעכבר שכבר הרדים במשך 30-45 דקות, יש לצפות העכבר e להיות ער באופן מלא על ידי 1 שעה ו -15 דקות.
- אם ביצוע ניתוחים נוספים, לנגב מכשירים עם אתנול 70% וחרוז לעקר לפני שימוש חוזר.
-ניתוח ההודעה Recovery 4.
- לעקוב אחר התקדמות לאחר ניתוח יומי ביומן. קטלוג עלייה במשקל והפסד ולצפות לעייפות, דימום, או סגירה חלקית של החתך הניתוחי.
- להאכיל את אוכל העכבר התרכך עכבר (~ העקביות של רסק תפוחים) או מזון התאוששות דיאטה מיוחד.
- בדוק את התפרים ולוודא שהם לא הוציאו, אבל מנסים לא להתמודד עם העכבר מוגזם.
5. טלמטריה הקלטה
- ביום של עניין (לפחות 2-3 ימים לאחר העכבר התאושש מניתוח), למקם את מגנט ליד העכבר כדי להפעיל את מַד מֶרְחָק. שים את כלוב העכבר על המקלט. הנורית במקלט צריכה להפעיל אם מַד מֶרְחָק מופעל.
- לכייל teleme החדש ters עם כיולים מסוימים יצרן סיפק. מפרטי כיול מַד מֶרְחָק שימוש חוזר, יישמרו בתוכנה.
- בתוך התוכנה, להתחיל בהקלטה על ידי לחיצה ימנית על "חיה" ולחץ על "התחל דגימה, רציפה," המאפשרת דגימה בשיעורים של עד 500 הרץ. ודא שהתוכנה מוגדרת כדי לשמור ולעקוב אחר.
הערה: כאשר סמל עכבר הדגימה הופך ירוק, לחצים מתועדים. מטריד את העכבר במהלך הלידה יכולה להפריע או לשנות עבודה, כך להתבונן בזהירות. - לאחר תקופת לידה או זמן של עניין, לעצור את הקלטה על ידי לחיצה ימנית על "בעל חיים" ובחירה באפשרות "להפסיק הקלטות, כל". השתמש במגנט כדי לכבות מַד מֶרְחָק כדי להציל את חיי סוללה, כסוללת מַד מֶרְחָק תהיה אחרונה בדרך כלל רק עבור 1.5 חודשים של הקלטה רציפה.
- להרדים את העכבר על ידי CO 2 יתר ולשחזר את מַד מֶרְחָק. גורים מומתים על ידי עריפת ראש.
- הנח את מַד מֶרְחָק בתמיסה של 1% חומר ניקוי אנזים במים למשך לילה deionized בטמפרטורת חדר.
- יש לשטוף את מַד מֶרְחָק במים ללא יונים ולהסיר את כל הרקמה ודבק, נזהר שלא לסחוט את הקטטר.
- דגירה מַד מֶרְחָק בglutaraldehyde 2% למשך 24 שעות בטמפרטורת חדר כדי לעקר.
- יש לשטוף את מַד מֶרְחָק עם תמיסת מלח סטרילית ולאחסן אותו בתמיסת מלח סטרילית עד ההשתלה הבאה או להישלח חזרה ליצרן להיות משופץ. יש שופץ Telemeters אם רקמה ממוקמת בתוך קטטר לאחר עיקור. בדרך כלל ניתן להשתמש telemeters 4-5 פעמים לפני הצורך להיות משופצים.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
בזמן אמת בלחצים תוך רחמי vivo ניתן להקליט באמצעות מערכת רכישת telemetric. דגימת לחץ יחד עם הקלטת וידאו בו זמני של העכבר שימשה כדי ללכוד את מועד המסירה של כל גור המדויק ולתאם זמן אספקה ללחץ תוך רחמי של האם. אז יכולה להיות זממו את כל נקודות הנתונים בכל ההקלטה כדי ליצור עלילה (איור 1 א) לחץ-נגד-זמן. עלילה זו מציגה את הנקודות במהלך הריון כאשר השינויים בלחץ תוך רחמי, כמו גם את ההבדל בלחץ בין המחזורים הכהים ובהירים. בנוסף, ממוצע נע של הלחץ תוך רחמי ניתן להתוות (איור 1). זה שימושי כדי לחזות עליות מתמשכים בלחץ אופייני תוך רחמי של ההתכווצויות הקשורים בתהליך העבודה בקלות רבה יותר (הקלטות שהושגו במהלך משלוח כבר פורסמו בעבר 9).
הנתונים ניתן לנתח עוד יותר על ידי יצוא נקודות נתונים לתוכנת ניתוח נתונים ממוצעים על פני תקופת הזמן של עניין. כאשר משווה תנאי ניסוי שונים, כגון סוג בר לעומת עכברים הטרנסגניים, יומי או לפי שעות לחצים מעכברים שונים יכול להיות בממוצע לבחון דפוסי התכווצות תלויים בגן של עניין. בנוסף, המובהקות הסטטיסטיות של הבדלים ניתן לקבוע. ניתן לבדוק לחצים תוך רחמי במהלך לידה, או יכול להיות שנערך מחקר אורך לבחון את תקופת ההריון כולו בתנאים שונים.
טלמטריה תוך רחמי יכולה לשמש לבדיקה בתגובות vivo לסוכנים תרופתיים במהלך הריון. באופן ספציפי, שיטה זו מאפשרת לבדיקות סמים מוקדמות לפני ניסויים קליניים. הבדלים בתגובה לסוכנים ספציפיים ניתן לבדוק בעכברים מהונדסים, כמו גם בעכברים שאינם בהריון או בהריון. סוכן תרופתי ספציפי אחד הידוע להגדיל uteriהתכווצות ne, אוקסיטוצין, יכולה להיות מועבר תת עורי כפי שתוארה לעיל במודל עכברים 10. מַד מֶרְחָק יכול להיות מושתל באותו הזמן כמשאבת מיקרו-האוסמוטי כדי לספק קצב קבוע של אוקסיטוצין. הבדלים בהקלטות בין (איור 2 א) שאינו בהריון ועכברים בהריון (איור 2) עם ממשל של אוקסיטוצין יכולים גם להיבחן.
יישום אפשרי נוסף של טלמטריה תוך רחמי הוא מסתכל על התכווצויות רחם לאחר השתקת מירנה / shRNA של חלבונים. מודלים עכבר אינם זמינים לכל הגנים שהם חיוניים להמלטה. לפיכך, השתקת גנים בשילוב עם מדידות לחץ תוך רחמי יכולה לשמש כדי לחקור חלבונים של עניין. על ידי הזרקת מירנה להביע וקטורי lentiviral לmyometrium במהלך השתלת מַד מֶרְחָק, מציאה רחם ספציפי של גן של עניין ניתן לבחון, כפי שניתן לראות באיור 3 א. מופעי מחקר שנערך לאחרונהדוגמא ספציפית הוכחה כי יש לו את הערוץ Kir7.1 תפקיד חשוב בquiescence רחם לאחר השימוש בשתי מירנה וטלמטריה לבחון שינויים בלחץ תוך רחמי בכל הריון 11. העתקי נציג של מירנה המקושקשת (איור 3 א) או Kir7.1 מירנה (איור 3) מראים כי דריסה ביטוי של ערוץ אשלגן Kir7.1 גרמה ללחץ תוך-רחמית להגדלה. העתקי נציג אלה הם דומים למה שראה במודלים של עכברים מהונדסים כפי שתואר קודם לכן 9.
איור 1: הקלטת לחץ תוך רחמי רציפות נציג נתונים בלחץ תוך-רחמית () בזמן אמת נרשמו in vivo ברציפות במשך ארבעה ימים (15-19 DPC).. (ב) העברה ממוצעת לשעה של נתונים ב(). מה עלי לעשותברים ITE והשחורים על גבי הקלטות מצביעים 12 מחזורי שעות אור וחושך, בהתאמה. (ג) מוגדל בשמץ של עכבר בהתכווצויות בודדות vivo. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 2: לחצים תוך רחמית בתגובה לאוקסיטוצין העתקי נציג של לחץ תוך רחמי מmyometrium שאינו בהריון (NP) (א) ומאוחר בהריון (18 DPC) myometrium (B) נחשף עד 5 יחידות / יום של אוקסיטוצין לעליית תכנית 24 שעות. בלחץ בסוף ההריון לעומת עכברי NP. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 3: מדידה של לחץ תוך-רחמית לאחר ההשתקה של ערוץ אשלגן על ידי מירנה / shRNA סכמטי (א) למיקום של מַד מֶרְחָק והאתרים של הזרקה של lentiviruses מירנה להביע.. מחקרים שנעשה לאחרונה הראו העתקי הנציג של לחץ תוך רחמי מmyometrium transduced עם (B) מקושקשות מירנה או (C) Kir7.1 מירנה. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
חקירות של התכווצות myometrial הסתמכו על מדידות vivo לשעבר של מתח שרירים. מתודולוגיה זו יכולה להיות שימושית לבדיקה בשלב מוקדם בתרופות חדשות שפותחו uterotonic שלא יכול להינתן לבעלי חיים. עם זאת, בvivo גישות נחוצות כדי להבין את ההתקדמות של עבודת מחקר לאורך זמן. מדידות in vivo לשרת מספר מטרות. ראשית, הם מאפשרים לכידה של תמונה של שינויים בדפוס התכווצות רחם על משך ההריון מלא. שנית, הם מבטלים את ההטיה של הקלטות vivo לשעבר הדורשות רקמת רחם להיות מותקנות או אנכי או אופקי, הגבלת ההבנה של התפקיד של שכבת השריר המעגלית ואורך של הרחם המלא שלנו. שלישית, הם מאפשרים הקלטה של לחץ ברחם בסביבה ההורמונלית אנדוגני, ובכך הופכים אותו ניתן ללמוד בצורה מדויקת יותר המלטה במודלים של עכברים. לבסוף, הם מאפשרים ליותר trחקירות anslational בין מודלים של עכברים ובני האדם כטלמטריה רחם דומה יותר למדידות שנלקחו בנשים בהריון עם צנתרים לחץ תוך רחמי.
השיטות לטלמטריה רחם עכבר הן קלה ללמוד, אבל קשה לשלוט. חוקרים בעלי ניסיון ניתוח עכבר קודם עשויים להשיג הצלחה מהירה יותר, אבל זה לא צריך להרתיע ממעבדות שימוש בטכניקה זו חשובה. המחקרים המקוריים באמצעות טלמטריה רחם עכבר נעשו על ידי טירון בהצלחה רבה לאחר כמה ניסיונות, ולכן מעבדות צריכה להיות מוכנות לכמה ניתוחים הראשונים לגרום לסכר לאבד את כל העוברים. הנה כמה עצות שכדאי לזכור. כמו בכל ניתוח, המשך הקצר ביותר הוא הטוב ביותר עבור בעלי החיים. ניתוח מהיר יגביל התייבשות והצורך במנות נוספות של הרדמה. אם החוקר הוא שיש תקופה קשה שסיים את ההליך לפני העכבר מתעורר, isoflurane יכול לשמש כדי לשמור על anesthetiz העכבראד עוד. יש לנו גם מצא כי השימוש בisoflurane מגדיל את מספר גורי קיימא ועדיף על פני קטמין. החתך הקטן ביותר האפשרי, רק מעט יותר גדולה מהגוף של מַד מֶרְחָק, יקטין את הסיכוי לפצע הפעור מאוחר יותר, לקצר את הזמן הדרוש לתפר, ולשפר את התאוששות עכבר. עם חתך בבטן קטן, מושך את הרחם מחוץ לחלל הגוף יאפשר ראות טובה יותר במהלך החדרת קטטר. כאשר שימוש חוזר מַד מֶרְחָק, גורם בעקומה הקודמת של קטטר כאשר השחלה אותו קרן הרחם. מאפשר דבק כירורגים להקשיח לחלוטין לפני הצבת קרן הרחם בחזרה בתוך חלל הגוף יעזור לשמור את הקטטר במקום ולמנוע את הדבק מלהידבק למעי. גוף מַד מֶרְחָק יכול לפגוע בכבד אם להציב גבוה מדי, והבטן של העכבר היא מסוגלת להרחיב בהרחבה, ולכן אל תהסס להעמיד את מַד מֶרְחָק נמוך יותר בגוף. שיטות אלה יצטרכו להיות מותאמות אישית to להתאים לצרכים של מעבדות שונות ומודלים של עכברים שונים, אבל היתרונות של טלמטריה הרחם עולים בהרבה על המכשולים.
ישנן מספר מגבלות שיש לשקול בעת יישום מתודולוגיה זו. אחד האתגרים העיקריים שיש להתגבר עליהם הוא מידת האובדן של העובר לאחר השתלה של המשדר. בדו"ח הראשוני טלמטריה תוך רחמי 9, היו לי כל עכברי SK3 T / T וסוג בר מהונדסים מידה מסוימת של אובדן עוברי בקרנות או שניהם ברחם אחד, ללא קשר אם הקרן שנבחרה למיקום מַד מֶרְחָק. אופטימיזציה של הבחירה של היום במהלך הריון כאשר מַד מֶרְחָק היה בניתוח הוכנסה שיפר את שיעור הריונות מוצלחים לטווח שלנו, אבל מלא של גורים מעולם לא הושגה. יש לציין, היום האופטימלי של ניתוח לעכברי SK3 T / T שונה מזו בסוג בר, עם תוצאות טובות יותר רבייה ציין בdpc12-13 לSK3 T / T עכברים לעומת dpc8-9 לWT עכברים, Suggeעוקץ שפרוטוקול הניתוח ייתכן שיהיה הצורך לשנות עבור כל דגם עכבר של עניין. הנתונים שלנו מצביעים על כך שמספר גוריו נולדו לא לתאם עם לחץ תוך רחמי כולל. תוצאות עוברית לא לשפר עם כישורים משופרים כירורגית על ידי הנסיין, ואחרים שיישמו מתודולוגיה זו במעבדה שלהם ציינו כי תוצאות עובריות השתפרו עם השימוש בisoflurane במקום קטמין. צפוי כי ככל שיותר מעבדות להשתמש במתודולוגיה זו, טכנולוגית משדר ותוכנת ניתוח תוך רחמי יהפכו מעודנות יותר. זה יהיה ללא ספק לקדם את התועלת של טכנולוגיה זו במחקרים של המנגנונים שתורמים לעבודה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Surgical Glue | 3M Vetbond | 1469SB | Tissue Adhesive--stored in Drierite |
| Absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | J212H | Vicryl |
| Non-absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | 8706H | Prolene |
| Water Jacket Blanket + Heating Pad | Gaymer | T/Pump PN 11184-000 Blanket-66N111CC | Specialized for rodents |
| Bead sterilizer | Keller | Z378577 | Steri 250 Sterilizer |
| Disecting Microscope | Nikon | SMZ754 | Fibre optic gooseneck external light source |
| Sterile Surgical Gloves--Latex | Cardinal Health Triflex | 2D7253 | |
| PhysioTel PA-C10 Pressure Transmitter | Data Sciences International | 270-0135-001 | TA11PA-C10 |
| Telemeter Reciever | Data Sciences International | 272-6001-001 | RPC-1 |
| Dataquest ART 4.3.2 Analysis Platinum | Data Sciences International | 271-0147-141 | Analysis software |
| Diet Recovery Gel | Clear H2O | 72-01-5022 | Purified Soft Diet for Rodents |
| Tergazyme | Sigma-Aldrich | Z273287 | Enzyme detergent |
References
- Slattery, M. M., Morrison, J. J. Preterm delivery. Lancet. 360, 1489-1497 (2002).
- Goldenberg, R. L., Culhane, J. F., Iams, J. D., Romero, R. Epidemiology and causes of preterm birth. Lancet. 371, 75-84 (2008).
- Keelan, J. A. Pharmacological inhibition of inflammatory pathways for the prevention of preterm birth. Journal Of Reproductive Immunology. 88, 176-184 (2011).
- Voltolini, C., et al. Understanding spontaneous preterm birth: from underlying mechanisms to predictive and preventive interventions. Reproductive Sciences. 20, 1274-1292 (2013).
- Ratajczak, C. K., Muglia, L. J. Insights into parturition biology from genetically altered mice. Pediatric research. 64, 581-589 (2008).
- Rajakumar, A., et al. Placental HIF-1 alpha, HIF-2 alpha, membrane and soluble VEGF receptor-1 proteins are not increased in normotensive pregnancies complicated by late-onset intrauterine growth restriction. American Journal Of Physiology. Regulatory, Integrative And Comparative Physiology. 293, (2007).
- Whitesall, S. E., Hoff, J. B., Vollmer, A. P., D'Alecy, L. G. Comparison of simultaneous measurement of mouse systolic arterial blood pressure by radiotelemetry and tail-cuff methods. American journal of physiology. Heart And Circulatory Physiology. 286, H2408-H2415 (2004).
- Mackay, L. B., Shi, L. B., Maul, H. ., Maner, W. L., Garfield, R. E. The effect of bilateral pelvic neurectomy on cervical ripening in pregnant rats. Journal Of Perinatal Medicine. 37, 263-269 (2009).
- Pierce, S. L., Kutschke, W., Cabeza, R., England, S. K. In vivo measurement of intrauterine pressure by telemetry: a new approach for studying parturition in mouse models. Physiol Genomics. 42, 310-316 (2010).
- Imamura, T., Luedke, C. E., Vogt, S. K., Muglia, L. J. Oxytocin modulates the onset of murine parturition by competing ovarian and uterine effects. American Journal Of Physiology. Regulatory, Integrative And Comparative Physiology. 279, R1061-R1067 (2000).
- McCloskey, C., et al. The inwardly rectifying K+ channel KIR7.1 controls uterine excitability throughout pregnancy. EMBO Mol Med. 6 (9), 1161-1174 (2014).
