Introduction
Een myocardiaal infarct (MI) wordt gedefinieerd als de onderbreking van bloed aan een gebied van het hart veroorzaakt door occlusie van een grote kransslagader. De schade die voortvloeit uit een MI komt door de herinrichting van de levensvatbare hartweefsel in niet-functioneel littekenweefsel, die het vermogen van het hart of, specifieker, de linker ventrikel, goed slaan afneemt. Dit resulteert in een afname in de hoeveelheid bloed die kan worden afgegeven aan het lichaam met elke hartslag, bekend als het slagvolume en het percentage bloed dat uit het hart wordt gepompt bij elke hartslag, zogenaamde ejectiefractie 6. Deze, samen met andere verminderde functies, verhoogt de spanning op de rest van het hart om voldoende blijft werken. Vaak kan deze verhoogde druk zo ernstig worden dat het een tweede hartaanval, een verschijnsel waargenomen bij ongeveer 10% van individuen 7 veroorzaakt.
Terwijl de medische praktijken hebben ontwikkeld om te behandelende onmiddellijke nasleep van een MI, is er geen techniek ontwikkeld om te stoppen, vertragen of omkeren van de negatieve bijwerkingen van het weefsel remodeling. Stamceltherapieën hebben zich ontwikkeld tot een mogelijke weg voor een dergelijke behandeling, maar ondanks hun veelbelovend potentieel stamcellen niet succesvol gebleken in de klinische setting. Eén theorie voor hun tekortkomingen is het onvermogen te zorgen voor de gunstige cellen blijven op de plaats van infarct lang genoeg om gunstige resultaten 5 genereren. Het is aangetoond dat niet meer dan 24% van de cellen die alleen worden geïnjecteerd in de plaats van infarct overleefd en bleef op het aangetaste locatie 1 dag na de oplevering 2. Een mogelijke opsporing van deze kwestie retentie cel biocompatibele hydrogel systemen die cellen of geneesmiddelen, die de beschadigde locatie kan worden afgeleverd kapselen ontwikkelen. De hydrogel keuze in dit protocol is een poly (ethyleenglycol) dimethacrylaat vanwege de eerder gebruik in celinkapselende procedures echter een hydrogel staat inkapseling worden toegepast 8. De afgifte van de pleister direct aan de plaats van letsel zorgt cel-weefselcontact over een langere tijdsperiode, waardoor de duur van de cellen kan gunstig factoren verlenen aan de onderliggende myocardium.
Een knelpunt de patch aanpak is de moeilijkheid van het hechten van de pleister op het hart oppervlak. Veel groepen hebben dit ondervangen door een verscheidenheid van technieken, de meest voorkomende zijn een eenvoudige hechting aan de constructie te koppelen aan het hart oppervlak 9,10. Dit is succesvol in een aantal gevallen waarin het construct wordt gemaakt van een stijver materiaal bewezen, maar ontbreekt wanneer geprobeerd op een hydrogel systeem, vanwege de hoge waterconcentratie en delicate aard van de pleister construct. Om dit te voorkomen, hebben we een fibrinelijm externe lijmsysteem dat de chemie van stolselvorming nabootst gebruikt. Fibrinelijm is gebruikt in talrijke medische operaties, Inc.Luding dura tranen, bronchiale fistels, en hoornvliestransplantatie, aandacht voor de biocompatibiliteit van het product als een wond kit 11-13. Daarnaast is fibrine gebruikt voor verschillende cardiale doeleinden, waaronder operatieve behandeling van linker ventrikel breuken en coronaire bypassoperaties is echter het gebruik als een adhesie lijm voor een cardiale patch gebruikelijke 14-17. Een eenvoudige formulering van trombine en fibrinogeen resulteren in een biocompatibele lijm die direct aan de buitenzijde van een externe cardiale pleister kan worden aangebracht, die een levensvatbaar hechting systeem patch hart interactie garanderen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Procedure is volledig compatibel met IACUC protocol nummer 13302 en is van de deling van dierlijke bronnen goedgekeurd.
1. Instrument Voorbereiding
- Autoclaaf alle niet-instrumentatie vóór gebruikt om de chirurgische procedure om steriliteit te waarborgen.
- Steriliseren van instrumenten die worden gebruikt meerdere keren in een sessie met een glazen kraal sterilisator tussen toepassingen.
2. Hydrogel Voorbereiding
- Ontdooi en plaat stamcellen ten minste 24 uur voorafgaand aan de totstandkoming van de hydrogel construct.
- Bereid pleisters één dag voorafgaand aan de chirurgische procedure onder toepassing van een inrichting voor stereolithografie (of gelijkwaardig instrument) die in detail is beschreven in eerdere publicaties 8,18.
- Om de hydrogel te maken, eerst een computer-aided design (CAD) model van de gewenste patch te genereren en exporteren van het ontwerp aan stereolithografische formaat (STL).
- Maak een pre-gel oplossing dissolving poly (ethyleen glycol) dimethacrylaat (PEGDMA) in steriele 1 x PBS tot een 20% w / v oplossing te verkrijgen. Tegelijkertijd Los de fotoinitiator 1- [4- (2-hydroxy- ethoxy) -fenyl] -2-hydroxy-2-methyl-1-propaan-1-on in DMSO. Voeg de fotoinitiator aan de PEGDMA oplossing bij een uiteindelijke w / v van 0,5%. Direct voor de crosslinking, voeg 100 ml van het gewenste dichtheid van de cellen. Opmerking: Een cel dichtheid tussen 2,0 x 10 5 -2,0 x 10 6 cellen / ml wordt aanbevolen.
- Pipetteer de pre-geloplossing in een schaal in het midden van de SLA platform en voer de SLA software met de eerder geladen STL opmaak ontwerp.
- Verwijder de patches van de inrichting en incubeer de hydrogels O / N in Dulbecco's gemodificeerd Eagle's medium (DMEM) aangevuld met 5% foetaal runderserum (FBS), 100 U / ml penicilline en 100 mg / ml streptomycine om voor cellen te passen het milieu in de pleister.
3. Animal Voorbereiding en Oral intubatiop
- Evalueer elke muis voorafgaande aan teneinde ervoor te zorgen dat het dier in goede gezondheid, zoals bepaald uit de verzorging gewoontes en interacties met hun kooi mates. Opmerking: Vrouwelijke 8-10 weken oude C57BL / 6J-muizen werden voor deze procedure echter een muis leeftijd of type kan worden gebruikt.
- Plaats de dieren in een verdoving kamer en bloot te stellen aan 5% isofluorane met een 1 L / min O 2 ondersteuning. Toezicht op het niveau van de anesthesie door teen knijpen reflex.
- Zodra het dier goed is verdoofd, wegen en plaats ze op de intubatie stand.
- Direct een lichtbron richting borstholte van het dier en een tang om de larynx oppervlak trekken en bloot de stembanden. Leid een 20 G angiocath tussen de stembanden, en soepel in te voegen in de luchtpijp. Detect juiste aanbrengen door een mechanische beweging van de borstholte nadat de katheter is verbonden met het kleine dier ventilator.
- Pas ventilatie instellingen aan The gewicht van het dier op basis van de richtlijnen van de fabrikant.
- Eenmaal geïntubeerd, plaats het dier in rugligging op een verwarmingselement om onderkoeling te voorkomen. Zorg ervoor dat de verwarming pad niet meer dan 40 ° C. Indien nodig, plaats een barrière tussen het dier en de verwarming pad om de kans op brandwonden te minimaliseren.
- Haal haar van de operatieplaats door het gebruik van een ontharingscrème. Steriliseer de site met 3 afwisselende scrubs van betadine en 75% ethanol om een goede sterilisatie te verzekeren. Plaats een laken om alleen de operatieplaats bloot en plaats vet zalf op de ogen tot droog tijdens de procedure te voorkomen.
4. Chirurgische Procedure
- De thoracotomie wordt uitgevoerd op de linkerzijde van het dier, dus maakt een incisie van ongeveer 1 cm links van het sternum, dat de lengte van het borstbeen loopt.
- Een tang om de spierlaag te scheiden van de onderliggende ribbenkast in twee stappen. Observeer een DelineAting lijn die de grote borstspier spieren van het dier vertegenwoordigt. Til deze spier lichtjes, scheiden van de onderliggende externe schuine spier en trek mediaal. Vervolgens, vrij de externe schuine spier van de onderliggende ribbenkast op dezelfde wijze en intrekken lateraal, waardoor een vrij uitzicht op de tweede, derde en vierde ribben.
- Voer de thoracotomie tussen de derde en vierde ribben. Til de vierde rib en gebruik een cauterizer de borstholte tussen de derde en vierde rib openen. Plaats retractors naar de holte verder te openen en het hart bloot te leggen.
- Gebruik een tang om de dunne hartzakje van het hart te scheuren.
- Afbinden de linker kransslagader met een 8-0 monofilament nylon hechtdraad. Plaats de hechtdraad ongeveer 4 mm van de apex van het hart, direct onder het onderste uiteinde van het linker atrium. Bepaal de juiste plaatsing hechtdraad door blancheren van het ventriculaire myocardium en een toename in de grootte van het linker atrium na Suture is gebonden.
5. Patch Plaatsing en Lijm
- Houd pleisters bij 37 ° C en 5% CO 2 voorwaarden tot gebruik.
- Til de patch met een plat uiteinde spatel en plaats voorzichtig het op het oppervlak van het hart, op de plaats van infarct.
Opmerking: Om afglijden van de linker hartkamer te voorkomen, kan de pleister op zijn plaats worden gehouden door licht contact te onderhouden met behulp van de spatel of de punt van een pincet. - Bereid de lijm door het mengen van een 4: 1 verhouding van fibrinogeen trombine. Meng de oplossing door herhaaldelijk pipetteren totdat het dikker wordt, wordt binnen 1 minuut na het begin van het preparaat.
- Zodra de oplossingsviscositeit het gewenste niveau bereikt, snel ongeveer 10 ml dragen aan de patch oppervlak. Opmerking: de stollingstijd van de fibrine lijm is een snelle, die een kleine kans voor efficiënte overdracht van de lijm.
6. Hechten
- Sluit de rib laag met 3-4 afzonderlijke onderbroken hechtingen.
- Voor de volledige sluiting van de intercostale laag, plaatst u een PE-10 canule in de incisie aan de borstholte te evacueren na de afsluiting is voltooid en te herstellen juiste intrapleurale druk.
- Sluit de borstspieren met 3-4 individuele onderbroken hechtingen.
- Seal de huidlaag met een continue hechting.
- Na volledige sluiting, bevestig een injectiespuit 1,0 ml aan het einde van de canule en gebruiken om de borstholte te evacueren.
- Breng een weefsellijm de incisieplaats op de hechting plaats te versterken.
7. Post-operatieve behandeling
- Geef muizen een injectie van buprenorfine (0,05-1,0 mg / kg) en carprofen (2,2 mg / kg) subcutaan onmiddellijk na de coronaire ligatie en minstens 20 min voor opwekking. Dien beide geneesmiddelen 6-8 uur na de operatie, En dan tweemaal daags te geven voor maximaal drie dagen om pijn en angst te beheersen.
- Continu toezicht houden op de dieren tot bewuste en elk uur voor de eerste 4 uur na de operatie. Voer een tweede controle in de nacht van de operatie (2-4 uur later) naar een tweede dosis pijnstiller toedienen.
- Dagelijks toezicht op de dieren na de tweede dag na de procedure, totdat dieren stabiel lijken.
8. Analyse van de hartfunctie en Histologie
- Voer echocardiogrammen op de muizen 4 weken na de procedure voor het bepalen van de omvang van de schade na de MI.
- Verdoven muizen met 4-5% isofluraan in een anesthesie kamer voor de inductie van inhalatie-anesthesie, en vervolgens 2% isofluraan via gezichtsmasker voor het onderhoud anesthesie.
- Wis het imaging gebied met een ontharingscrème en gebruik een klein dier echografie om een 2D M-mode echocardiografie scan van het kloppende hart te verkrijgen en noteer de functionele parameters associated ermee.
- Euthanaseren de muizen in een kamer kooldioxide, verzamel de harten van de dieren en in een 10% formaline-oplossing gedurende 24 uur. Na 24 uur en spoel de harten tot 70% ethanol en bewaren bij 4 ° C totdat weefselverwerking.
- Verwerk de harten en insluiten ze in paraffine blokken.
- Snij 5 mm doorsneden het ventriculaire gebied van het hart, te beginnen bij de top en eindigt op het atrium.
- Stain doorsnede plakjes met beide Masson's trichroom en hematoxyline en eosine kleuring met behulp van standaard protocollen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Gedurende de chirurgische procedure, kan ligatie van de linker kransslagader worden geïdentificeerd door een gemarkeerd blancheren stroomafwaarts van de afgesloten arterie. Als een test voor het binden van de knoop, kan de hechting kort worden aangescherpt om te controleren of het op de juiste plaats. Bovendien, aangezien occlusie van de slagader leidt bijna onmiddellijke vermindering van het vermogen van het linker atrium goed slaan, wordt het linker atrium te vergroten in reactie op een terugstroom van bloed in het systeem.
M-mode echocardiografie metingen zo vroeg 2 dagen post-infarct tonen een stopzetting van de linker wand beweging, een indicatie van de spier wederopbouw. Kwalitatieve berekeningen uit de gegevens blijkt een afname ejectiefractie en slagvolume in de geïnfarcteerde harten. Bij de beëindiging van het experiment, toen de harten verzameld voor histologische doeleinden kan een duidelijke dilatatie van het linker ventrikel te zien, samen met een verdunning van de linker ventrikelwand en de afzetting van collageen dat littekenweefsel afzetting geeft in plaats van werking cardiomyocyten (figuur 1).
Ook gezien bij histologische analyse de aanwezigheid van de hydrogel construct door de toediening van de fibrine-gel (Figuur 2). Voor onze doeleinden, moet de lijm systeem viskeuze genoeg om nauwkeurige plaatsing controle mogelijk te maken en het minimaliseren van de daaropvolgende afvalmateriaal in omliggende organen, maar kneedbaar genoeg om niet te bemoeien met de hartfunctie zijn. Voorlopige tests werden uitgevoerd om de viscositeit, geleringstijd en stijfheid van verschillende fibrinogeen / trombine verhoudingen te berekenen, teneinde de juiste combinatie samenstellen zoals onze behoeften te bepalen. In vivo analyse werd uitgevoerd om het vermogen van de fibrinelijm om patch- handhaven testen naar weefselhechting terwijl die volledige hartfunctie (data niet getoond). Opgemerkt zij dat de fibrinelijm niet schadelijk voor het myocardium, zoals blijkt uit de lack weefsel hermodellering of ventriculaire verdunning op de plaats (figuur 2). De hartspiercellen intact blijven, ondanks de toevoeging van zowel een cardiale patch en de bijbehorende lijm. Bovendien levensvatbaarheid testen bevestigden dat de toediening van fibrinelijm worden op het oppervlak van een cel-inkapselende hydrogelpleister heeft geen invloed op de celoverleving in de pleister (figuur 3).
Figuur 1:. Linker kransslagader Ligatie resulteert in een afname van de hartfunctie gemeten door Echocardiografie M-mode echocardiografie van gezonde (a) en infarcted (b) harten. Infarct harten tonen een duidelijk gebrek aan de muur beweging, waar levensvatbare weefsel is vervangen door littekenweefsel. Dit correleert met een meetbare afname van de linker ventrikel ejectiefractie (EF), cardiale beroertevolume (SV) en de cardiale output (CO). Histologische analyse van gezonde (C) en infarcted (d) harten toont dilatatie van het linker ventrikel en verdunning van de linker ventriculaire wand van het geïnfarcteerde myocardium, beide tekens weefsel remodellering en littekenweefsel depositie. Histologische beelden zijn dwarsdoorsnede segmenten vastleggen links (grote kamer) en rechter (kleinere kamer) ventrikels.
Figuur 2:. Toepassing van fibrine Flue Zorgt Patch Hechting aan het hart De pleister wordt op het oppervlak van het hart geplaatst, terwijl de borstholte wordt blootgesteld tijdens de procedure (a). Eenmaal geplaatst, wordt een op basis van fibrine lijm toegevoegd bovenop het hart en drogen. De patch is duidelijk te zien op histologische secties hartweefsel die waren verzameld op 1 week na de procedure (b).Dissociatie van de patch uit het hart oppervlak in histologische beelden is een artefact van de collectie en het snijden proces. De resultaten zijn consistent tot 8 weken hechting.
Figuur 3: fibrine-based lijm niet Harm Encapsulated Tissues levensvatbaarheid van de cellen werd gemeten via MTT analyse 1 week na de toediening van een fibrine-based lijm met behulp van protocollen in detail beschreven in eerdere publicaties. 8. De levensvatbaarheid van cellen binnen de pleister werd niet beïnvloed door de toevoeging van de lijm op het oppervlak van het construct.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Met deze benadering van het murine model MI, hebben we een systeem dat de schade aan niet-myocardium gebieden die zijn geassocieerd met andere murine MI technieken minimaliseert ontwikkeld. Deze gebieden omvatten schade door een tracheostoma, het snijden van de spierlaag en het breken van ribben de borstholte bloot te leggen. Wij geloven dat deze veranderingen de algehele operatie resultaat dankzij de zorgvuldigheid om zoveel mogelijk van grote structuren, waaronder de ribben en spierlagen, intact te houden tijdens de chirurgische procedure.
Opgemerkt zij dat er een aantal beperkingen aan deze techniek, het grootste is het tijdrovende karakter, wat resulteert in slechts 8-10 volledige chirurgische procedures in één dag. Om dit te ondervangen, kan een tweede ventilator worden gebruikt, waardoor de procedure gelijktijdig worden uitgevoerd op twee dieren. Bovendien grote bloedvaten, zoals de intercostale vaten eninterior thoracale ader dient te worden vermeden bij het uitvoeren van thoracotomie. Indien bij een van deze schepen, moet een cauterizer worden gebruikt om te voorkomen bloeden uit te wijten aan een gescheurde slagader.
Fibrinelijm is bekend in zowel het laboratorium en klinische settings dankzij het vermogen om snel te helpen bij stolselvorming, alsmede de mogelijkheden te leveren en gastheer MSCs 14-17,19. Voor onze doeleinden fibrinelijm diende als een biocompatibele benadering hechten een watergedragen hydrogel construct op het oppervlak van het hart. Het gebruik van een op fibrine gebaseerde lijm goed in slaagt de hydrogel construct in het aangetaste locatie tot 8 weken, met de mogelijkheid van weefselcontact een langere tijd bewezen. Het gebruik van dit adhesiesysteem toegestaan besturing voor de plaatsing van de delicate construct zonder extra hechtingen die het myocardium en de constructie zelf beschadigen. Wij hebben gevonden dat de lijm zelf niet toxisch voor de ingekapselde cellen eennd heeft geen negatieve invloed op het onderliggende weefsel. De hydrogel en op basis van fibrine lijm kan worden toegepast op een verscheidenheid van andere tissue engineering doeleinden die cel of therapeutische contact wens gedurende langere tijd. Ook het gebruik van de SLA fabricagemethode, uitvoeringen en constructies kunnen worden opgenomen in de pleister om een complex systeem voor mobiele afgifte 18 creëren.
Een tegenslag voor het gebruik van de basis van fibrine lijm is dat meer dan één onderzoeker in de operatiekamer tijdens patch plaatsing en lijm aanvulling moeten zijn. Het is de taak van de eerste onderzoeker om ervoor te zorgen dat de pleister op zijn plaats blijft en niet verdwalen in de borstholte, terwijl de tweede onderzoeker mengt de oplossing en past het om de patch na het juiste viscositeit wordt bereikt. Om de timing van de lijm levering te optimaliseren, wordt voorgesteld dat de tweede onderzoeker test en soms ook het geleren van de lijm voorafgaand aan de patch plaatsing,aangezien goede gelering van de lijm is van cruciaal belang voor de patch hechting.
Er zijn een aantal kritische stappen en foutgevoelig gebieden binnen het protocol, waarbij de eerste de inductie van het myocard infarct. Het is noodzakelijk te controleren op signalen, zoals het blancheren van de linker ventriculaire wand en de vergroting van het linker atrium, occlusie van de linker kransslagader waarborgen. Dit kan vóór de toevoeging van de steek worden uitgevoerd door het passeren en vastdraaien van de einde van de hechtdraad snaren. Indien wordt bepaald dat de linker kransslagader niet wordt omsloten door de hechtdraad kan het koord worden uitgenomen en weer aangebracht. Een tweede kritische maatregel is om te blijven toezien op de intubatie buis gedurende de procedure, om te zorgen dat het blijft in de luchtpijp en niet wordt uitgetrokken mid-operatie. Tenslotte gehele operatie alle pogingen moeten worden ondernomen om contact met de longen voorkomen, als elke contactpersoon kunnen leiden tot een ingeklapte long.Indien tijdens de operatie, longen inklappen gebeurt simpelweg blokkeren de uitstroombuis van de intubator tot 3 sec in een poging om opnieuw opblazen onrustige gebieden van de longen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Acknowledgments
Dit werk werd gefinancierd door het Amerikaanse leger Grant (W81XWH-08-1-0701) en een Fellowship van Carle Foundation Hospital.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Harvard Model 687 Mouse Ventilator | Harvard Apparatus | 55-0001 | |
| Inintech Biosciences LLC Dry Glass Bead Sterilizer | Fisher Scientific | NC9531961 | |
| Leica MZ6 surgical microscope | Leica | ||
| Cautery Kit | Gemini | GEM 5917 | |
| Delicate Forceps - 0.4 mm Tips Angled | Fine Science Tools | 11063-07 | |
| Agricola Retractor - 3.5 cm Spread | Fine Science Tools | 17005-04 | |
| Spring Scissors - 2.5 mm Blades Straight | Fine Science Tools | 15000-08 | |
| Castroviejo Needle Holder - w/Lock Tungsten Carbide 14 cm | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| Iris Scissors - Delicate Straight 10.5 cm | Fine Science Tools | 14060-10 | |
| 8-0 monofilament suture | Ethicon | 8730P | |
| 6-0 Silk suture | Ethicon | 639G | |
| Thrombin | Sigma | T7009 | |
| Fibrinogen | Sigma | F3879 | |
| Vetbond Tissue Adhesive | 3M | 1469SB |
References
- Kolk, M. V., et al. LAD-ligation: a murine model of myocardial infarction. Journal of visualized experiments : JoVE. , (2009).
- Li, Y., Yao, Y., Sheng, Z., Yang, Y., Ma, G. Dual-modal tracking of transplanted mesenchymal stem cells after myocardial infarction. International journal of nanomedicine. 6, 815-823 (2011).
- Nagaya, N., et al. Intravenous administration of mesenchymal stem cells improves cardiac function in rats with acute myocardial infarction through angiogenesis and myogenesis. American journal of physiology. Heart and circulatory physiology. 287, H2670-H2676 (2004).
- Wang, J. S., Shum-Tim, D., Chedrawy, E., Chiu, R. C. The coronary delivery of marrow stromal cells for myocardial regeneration: pathophysiologic and therapeutic implications. The Journal of thoracic and cardiovascular surgery. 122, 699-705 (2001).
- Cashman, T. J., Gouon-Evans, V., Costa, K. D. Mesenchymal stem cells for cardiac therapy: practical challenges and potential mechanisms. Stem cell reviews. 9, 254-265 (2013).
- Sutton, M. G., Sharpe, N. Left ventricular remodeling after myocardial infarction: pathophysiology and therapy. Circulation. 101, 2981-2988 (2000).
- Smolina, K., Wright, F. L., Rayner, M., Goldacre, M. J. Long-term survival and recurrence after acute myocardial infarction in England, 2004 to 2010. Circulation. Cardiovascular quality and outcomes. 5, 532-540 (2012).
- Chan, V., Zorlutuna, P., Jeong, J. H., Kong, H., Bashir, R. Three-dimensional photopatterning of hydrogels using stereolithography for long-term cell encapsulation. Lab on a chip. 10, 2062-2070 (2010).
- Kai, D., et al. Stem cell-loaded nanofibrous patch promotes the regeneration of infarcted myocardium with functional improvement in rat model. Acta biomaterialia. 10, 2727-2738 (2014).
- Serpooshan, V., et al. The effect of bioengineered acellular collagen patch on cardiac remodeling and ventricular function post myocardial infarction. Biomaterials. 34, 9048-9055 (2013).
- Cavallo, L. M., Solari, D., Somma, T., Savic, D., Cappabianca, P. The Awake Endoscope-Guided Sealant Technique with Fibrin Glue in the Treatment of Postoperative Cerebrospinal Fluid Leak After Extended Transsphenoidal Surgery: Technical Note. World neurosurgery. , (2013).
- Chung, H. W., Mehta, J. S. Fibrin glue for Gundersen flap surgery. Clinical Ophthalmology. 7, 479-484 (2013).
- Dunn, C. J., Goa, K. L. Fibrin sealant: a review of its use in surgery and endoscopy. Drugs. 58, 863-886 (1999).
- Chi, N. H., et al. Cardiac repair achieved by bone marrow mesenchymal stem cells/silk fibroin/hyaluronic acid patches in a rat of myocardial infarction model. Biomaterials. 33, 5541-5551 (2012).
- Erb, M. A., Claus, T., Hartrumpf, M., Bachmann, S., Albes, J. M. The use of Tachosil surgical patch or fibrin glue in coronary artery surgery does not affect quality of anastomosis or provoke postoperative adhesions in pigs. European journal of cardio-thoracic surgery : official journal of the European Association for Cardio-thoracic Surgery. 36, 703-707 (2009).
- Okada, K., et al. Surgical treatment for rupture of left ventricular free wall after acute myocardial infarction. Interactive cardiovascular and thoracic surgery. 4, 203-206 (2005).
- Simpson, D., Liu, H., Fan, T. H., Nerem, R., Dudley, S. C. A tissue engineering approach to progenitor cell delivery results in significant cell engraftment and improved myocardial remodeling. Stem Cells. 25, 2350-2357 (2007).
- Jeong, J. H., et al. Living' microvascular stamp for patterning of functional neovessels; orchestrated control of matrix property and geometry. Advanced Materials. 24, 58-63 (2012).
- Wu, X., Ren, J., Li, J. Fibrin glue as the cell-delivery vehicle for mesenchymal stromal cells in regenerative medicine. Cytotherapy. 14, 555-562 (2012).
