Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Behavior

Testning for Lugt Diskrimination og Tilvænning i mus

Published: May 5, 2015 doi: 10.3791/52615

Introduction

Mus er afhængige af lugtesansen til at navigere nye miljøer, finde mad, for anerkendelse andre personer, og seksuel adfærd 1-3. Det er væsentligt, at undersøgere fastslå, hvorvidt forsøgsdyr har en fungerende lugtesans før indgift adfærdsmæssige tests, der involverer mad, social interaktion, eller eventuelle lugtgener bestemt til at udløse en reaktion fra musen. Anosmi eller manglende evne til at skelne mellem forskellige lugte, kan resultere i falske positiver eller negativer i en bred vifte af adfærdsmæssige paradigmer, så en musens evne til at opdage og skelne lugte bør etableres før andre typer af adfærdsmæssige tests udføres.

Den olfaktoriske tilvænning / dishabituation test blev først beskrevet i 1980'erne 4. Testen er blevet tilpasset til anvendelse i mus ved Drs. Mu Yang og Jacqueline Crawley 5. Dette er en enkel og billig test, der gør det muligt for undersøgeren at establish at en mus kan registrere og skelne mellem lugte. Ud over at teste olfaction, denne test giver investigator at observere den generelle opførsel af musen og bør ske tidligt i en test regime. Kvalitative bemærkninger om musens bevægelse, tegn på angst, aktivitetsniveau, og reaktion på de sociale lugte versus mad lugte kan signalere nye områder, hvor testning kunne gennemføres.

I denne test er vatpinde dyppet i forskellige lugte præsenteret for en mus tre gange i træk. Med hver gentagne præsentation af en lugt, vil musen vænne til vatpind, bruger mindre tid på at undersøge det med hver efterfølgende præsentation. Når en ny lugt præsenteres, opstår dishabituation, og en typisk mus vil bruge mere tid på at undersøge vatpinden, hvilket indikerer, at det kan skelne mellem de nuværende og tidligere lugte 5. Denne test er administreret til en mus ad gangen og omfatter en 45 min acclimation periode efterfulgt af 45 min af test.

Selvom denne test er let at udføre den kan anvendes til at undersøge sofistikerede spørgsmål om muse olfaktoriske system. Andre populære test af lugtesansen, såsom begravede fødevareprøvemateriale, simpelthen fastslå tilstedeværelsen eller fraværet af anosmi. , Det olfaktoriske diskrimination og tilvænning test giver dog investigator at fastslå, at en mus ikke blot har evnen til at opdage lugte, men kan skelne mellem forskellige lugte. Mønstret af tilvænning og dishabituation er blevet anvendt til at fastslå, at nye mutanter kan skelne mellem lugte 6,7. I en overraskende undersøgelse, Fadool og kolleger brugte komplekse blandinger af lugte at vise, at mus med gen-målrettet sletning af Kv1.3 kanalen er "super smellers", der kan skelne meget lignende lugt bedre end normale mus 8.

Ved behandlingen af ​​en ny knockout musemodel er det nyttigt at establish tilstedeværelsen af ​​normal adfærd for grundlæggende sensoriske opgaver. Når du er færdig tidligt i en test regime, forskelsbehandling lugt og tilvænning test giver en undersøger mulighed for at observere usædvanlige adfærd. Disse observationer kan forhindre falsk positive eller negative resultater i den efterfølgende test, der kan henføres til confounding karakteristika mutant. Som forskere fortsætte med at undersøge social adfærd er behov for at kontrollere grundlæggende olfaktoriske funktion bliver stadig vigtigere. Ud over at undersøge olfaction i mutant linjer, kan denne test bruges til at behandle specifikke spørgsmål, såsom hvorvidt en farmakologisk behandling specifikt øger et dyrs reaktion på sociale lugt stimuli, eller hvis deres respons øges til alle lugt stimuli.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

De voksne hanmus, der anvendes i det følgende eksperiment blev dannet og anbragt ved Baylor University ved en omgivende temperatur på 22 ° C, med en 14 timers lys og 10 timers mørke (20:00 til 06:00 timer) døgnets cyklus. Musene blev givet ad libitum adgang til foder og vand. Alle procedurer til musene var i overensstemmelse med National Institutes of Health retningslinjer for pleje og anvendelse af forsøgsdyr og dyret protokollen blev godkendt af Baylor University Animal Care og brug Udvalg. Mus blev testet i den sene morgen / tidlig eftermiddag. For alle nedenstående procedurer investigator bør bære handsker til at fjerne lugt og forhindre forurening.

1. Fremstilling af ikke-sociale Lugte

  1. Forbered friske ikke-sociale lugte hver dag i testning.
    Bemærk: Investigator skal bruge handsker til at forberede lugte.
    1. Fyld 3 centrifugerør med 10 ml vand hver.
    2. Tilsæt 100 pi af banan-ekstrakt i en 15 ml & #160; konisk rør og 100 pi mandel ekstrakt i en anden 15 ml konisk rør for en 1: 100 fortynding.
      Bemærk: Den tredje 15 ml rør vil kun indeholde vand.

2. Udarbejdelse af sociale lugte

  1. Forbered friske sociale lugt om morgenen test vil forekomme. Få sociale lugte fra to bure, der ikke er renset i mindst tre dage, og indeholder lige mange mus. Opnå sociale lugt fra mus af samme køn som testpersonen.
    Bemærk: Disse skal opbevares ved stuetemperatur og bør anvendes inden for 4-6 timer for at opretholde en stærk og konsekvent lugt.
    1. Bestemme, hvor mange sociale lugt vatpinde skal oprettes: hver mus bliver testet, vil blive præsenteret med tre podninger fra social lugt 1, og tre fra social lugt 2.
    2. Forbered sociale lugte ved at tørre en vatpind i en zigzag måde tværs over bunden af ​​en beskidt bur. Ryst overskydende strøelse klamrer til spidsen.
    3. Opbevar svaberprøver i store glas med låg eller i bægre dækket med parafilm. Udpege en beholder til social lugt 1 og en anden for social lugt 2.
  2. Bevar lugt kilde bure uden for den eksperimentelle test værelse.

3. Akklimatisering af Test Mouse

  1. Tag handsker og vejes musen skal testes, og placere individuelt i en ren bur med en wire låg på toppen og vandflasken fjernet.
  2. Tillad musen til at akklimatisere sig til den nye bur i 45 minutter i et andet rum end i test værelse. Sikre, at der ikke er usædvanlige lugte eller lyde i rummet.
  3. Som test tager omkring 45 min, forskyde akklimatisering gange ved at sætte den næste musen til at blive testet i en ren bur at akklimatisere lige før at teste den aktuelle mus.

4. Forberedelse af Test Room

  1. Placer friske vatpinde, laboratorium tape, de flasker, der indeholder lugt svaberprøver sociale rørene npå sociale lugte, en mikropipette, to timere, og spild flaske med låg i test værelse.
  2. Sørg for, at test værelse er rimeligt fri for lugt, høje lyde og skarpt lys. Må ikke bære duftende cologne eller lotion.
    Bemærk: Observatøren skal ikke være tyggegummi eller slik i testperioden, og skal forsøge at begrænse deres eksponering for stærk lugt fødevarer.

5. Test Procedure

  1. Bring akklimatiseret mus i sit bur ind i test værelse og placere buret på disken i en højde, der er behageligt for visning, mens siddende.
  2. Præsentere hver lugt 3 gange i træk i 2 min hver gang. Brug præsentationen rækkefølge, kan findes i tabel 1.
    1. Pipette 50 pi lugtstof i duften, der skal testes på spidsen af ​​vatpind og re-cap lugt kilde. Løft tråden toppen af ​​buret og indsæt uparfumeret, træ ende af vatpinden i vandet flasken åbning, pushing længden igennem fra undersiden af ​​tråden til toppen. Undgå at røre ved bomuld tip til noget, herunder fingre, så lugt forurening undgås.
    2. Fortsæt med at trække vatpinden gennem vandflaske åbning indtil omkring 1 tomme af bomuld ende hænger ned i buret. Anbringe træ ende af vatpinden mod siden af ​​buret ved hjælp af lab tape.
      Bemærk: Pas på ikke at lade låget falde tilbage på buret, hvilket medfører en kraftig støj, der ville forstyrre testen musen.
    3. Straks begynder timingen i 2 min. Brug en timer til anden 2 min præsentation. Optage den kumulative tid sniffing lugt under 2 min retssag. Tæl dyrets sniffing adfærd ved hjælp af en separat stopur. Aktiv sniffing er defineret, når dyrets næse er orienteret mod bomuld spidsen med sin næse ~ 2 cm eller tættere på spidsen.
    4. Efter afslutningen af ​​hvert forsøg, hæve wiren låget og fjern vatpind ved at trække den nedad gennem underside af låget (dette undgår lugt forurening ved at forhindre bomuld tip fra rører wire). Forsegl brugt vatpind i en 500 ml affald flaske.
    5. Forberede og indsætte den næste vatpind og begynde timing. Tillad ca 1 min mellem hver inter-trial interval. Fortsæt, indtil hver duft er aflagt tre gange i træk, i 2 min hver gang.
  3. Når musen har afsluttet alle prøvelser, tømme affald flaske indeholdende de anvendte vatpinde i en skraldespand uden for prøverummet. Retur musen til sit hjem bur.

6. Analyse

  1. Analysere data for hver gruppe pr lugt tilstand ved hjælp af to-vejs ANOVA efterfulgt af Newman-Keuls eller en lignende post hoc test for at afgøre betydelig tilvænning (mindre tid sniffing successive samme lugt) og dishabitutation (mere tid snuse en ny lugt).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Efter protokollen beskrevet, blev resultaterne registreret bruger ti voksne (postnatal dag 90-120) mandlige C57BL / 6J mus og otte mandlige FVB blandet baggrund stamme (postnatal dag 50-70). Test blev udført af en enkelt investigator over flere dage. Hvert punkt på graferne repræsenterer den gennemsnitlige tid undersøge en lugt.

Når vatpind dyppet i vand først indført, musene tilbringer megen tid på at undersøge denne roman objekt (Figur 1: første tre datapunkter). Med hver efterfølgende præsentation, mindre tid undersøge vatpinden, hvilket indikerer tilvænning. Når en ny lugt indføres, er der en vækst i tid brugt undersøge vatpinden, hvilket indikerer, at musene kan skelne mellem den nye lugt og den foregående (Figur 1: Almond datapunkter). Igen, med hver efterfølgende præsentation, er mindre tid undersøge lugt. Musene viser en betydelig decrease i tid sniffing podepinden af ​​vand over tre forsøg F (2,18) = 3,8, p <0,05. De viser et lignende mønster, når gentagne gange præsenteret for mandel lugt F (2,18) = 3,6, p <0,05. Ved den tredje lugt de stadig demonstrerer tilvænning, men ved dette forsøg dyrene er ved at nå et gulv effekt (Figur 1: Banana datapunkter). Gulvet virkning er, når adfærden er så lav, at evnen til at måle opførslen eventuelt lavere ikke er pålidelig. De viser ikke en ændring i løbet af de tre forsøg, når de præsenteres med banan lugt F (2,18) = 2,5, p <0,1. Imidlertid en to-vejs ANOVA for alle 9 præsentationer af lugt signifikant effekt over tid F (8,72) = 3,8, p <0,001.

Det samme mønster af tilvænning og diskrimination kan ses med sociale lugte som med de ikke-sociale lugte. Imidlertid musene tilbringer mere tid på at undersøge de sociale lugte (figur 2). Der er en betydelig mindskelse af tiden sniffing the sociale lugte, når alle 6 forsøg blev kombineret F (2,18) = 6,1, p <0,01. Men der var en marginal effekt i de første tre forsøg F (2,18) = 3,0, p = 0,076. Dette tyder på der var nogle tilvænning, men ikke en statistisk signifikant mængde reduktion i tid snuse den første sociale lugt. Der var en signifikant reduktion i mængden af ​​tid dyret undersøgt social lugt F (2,18) = 6,1, p <0,01 i anden præsentation af en social lugt.

Vi gentog fremgangsmåden i en mandlig FVB blandet baggrund stamme. Når vatpind dyppet i vand først indført, musene tilbringer megen tid på at undersøge denne roman objekt (Figur 3: første tre datapunkter). Med hver efterfølgende præsentation, mindre tid undersøge vatpinden, hvilket indikerer tilvænning. Når en ny lugt indføres, er der en vækst i tid brugt undersøge vatpinden, hvilket indikerer, at musene kan skelne mellem den nye lugt ennd den foregående (Figur 3: Almond datapunkter). Igen, med hver efterfølgende præsentation, er mindre tid undersøge lugt. Musene viser et signifikant fald i tid sniffing podepinden af ​​vand over tre forsøg F (2,14) = 13,3, p <0,001. De viser et lignende mønster, når gentagne gange præsenteret for mandel lugt F (2, 14) = 12,7, p <0,001. I denne stamme var der stadig en signifikant forskel på tværs af de tre forsøg. Ved den tredje lugt de stadig demonstrerer tilvænning (Figur 3: Banana datapunkter), men på grund af gulvet effekt de ikke viser en ændring i løbet af de tre forsøg, når de præsenteres med banan lugt F (2,14) = 3,04, p = 0.08. Imidlertid en to-vejs ANOVA for alle 9 præsentationer af lugt signifikant effekt over tid F (8,56) = 9,6, p <0,001.

Det samme mønster af tilvænning og diskrimination blev ikke set med sociale lugte som med de ikke-sociale lugte. Der var ikke en signifikantfald i tidsforbrug snuse sociale lugte, når alle 6 forsøg blev kombineret F (5,35) = 0,16, p = 0,97. Data tyder på, at musene ikke vænne til gentagne præsentationer af to sociale lugte.

Figur 1
Figur 1: Gennemsnitlig tid brugt undersøge ikke-sociale lugte til mandlige C57BL / 6J-mus Hvert datapunkt repræsenterer den gennemsnitlige tid dyret brugt undersøge den pågældende ikke-sociale lugt.. Fejlsøjlerne repræsenterer standardafvigelsen på middelværdien. Asterisker (*) angiver en signifikant forskel, hvor flokken viser tilvænning (p <0,05).

Figur 2
Figur 2:. Gennemsnitlig tid brugt undersøge sociale lugte for mandlige C57BL / 6J mus Hvert datapunkt repræsenterer den gennemsnitlige tid dyret SPENt undersøge særlige sociale lugt. Fejlsøjlerne repræsenterer standardafvigelsen på middelværdien. Asterisker (*) angiver en signifikant forskel, hvor flokken viser tilvænning (p <0,05).

Figur 3
Figur 3: Gennemsnitlig tidsforbrug undersøge ikke-sociale lugte for mandlige FVB blandet baggrund stammen Hvert datapunkt repræsenterer den gennemsnitlige tid dyret brugt undersøge særlige ikke-social lugt.. Fejlsøjlerne repræsenterer standardafvigelsen på middelværdien. Asterisker (*) angiver en signifikant forskel, hvor flokken viser tilvænning (p <0,05).

Figur 4
Figur 4: Gennemsnitlig tidsforbrug undersøge sociale lugte til mandlige FVB blandet baggrund stammen hvert datapunkt repræsen.ts mellemtiden dyret brugt undersøge særlige sociale lugt. Fejlsøjlerne repræsenterer standardafvigelsen på middelværdien.

Lugt
Vand
Vand
Vand
Almond
Almond
Almond
Banan
Banan
Ukendte sociale lugt 1
Ukendte sociale lugt 1
Ukendte sociale lugt 1
Ukendte sociale lugt 2
Ukendte sociale lugt 2
Ukendte sociale lugt 2

Tabel 1

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

De i dette papir resultater er optimale for mus. Musene demonstrerer en stærk reaktion på en ny lugt, derefter hurtigt vænne. Et af de vigtigste skridt i denne metode er udarbejdelsen af ​​lugte. Investigator skal tage stor omhu at isolere lugte fra hinanden for at undgå forurening. Et andet centralt aspekt er præsentationen af ​​vatpind. Investigator skal fejlfinde den bedste placering af bomuld spids, så musen kan undersøge spidsen, men ikke rive på spidsen. En vigtig komponent af testen er udvælgelsen af ​​lugte. Vi præsenterede tre ikke-sociale lugte, men det ville ikke være svært at omfatte yderligere lugte. En advarsel er at vælge lugte, som er mærkbart forskellige fra hinanden. Man kan observere en "gulv effekt", hvis lignende lugt præsenteres i rækkefølge. Derudover kan musene begynde at reducere deres svar, når de præsenteres med for mange hidtil ukendte lugte. Hvis investigator ønsker at inkludere enØ lugte så han / hun ønsker at inkludere yderligere dages test. Det tager cirka en time at teste hver mus. Desuden bør man fejlfinding udvælgelsen af ​​lugte i kontrol mus før herunder dem som en eksperimentel tilstand.

Den olfaktoriske tilvænning / dishabituation er en vigtig test for at medtage, når de efterforsker social adfærd. De tre kammer social adfærd test er almindeligt anvendt til at undersøge social adfærd underskud i mus. Denne test omfatter en tilstand, hvor forsøgsdyr undersøger en roman objekt og en roman mus, der er placeret under en kop på forskellige ender af kammeret. Testen kan også indbefatte en tilstand, hvor en hidtil ukendt mus anbringes under en kop og en anden mus (velkendt mus) er placeret under den anden kop. Investigator derefter undersøger, om den eksperimentelle mus kan skelne mellem de to. Da olfaction er de vigtigste sensoriske modalitet mus bruger til at identificere andre mus 9-11Kunne forringet olfaction forringe deres evne til denne opgave. Nedsat olfaction kunne resultere i fejlfortolkning af data. For eksempel kan forsøgslederen observere, at musen ikke tilbringe mere tid med det hidtil ukendte mus sammenlignet med den velkendte mus. Dette kan synes at vise tegn på sociale underskud eller svækket social hukommelse i musene, der testes. Dog kan en enklere fortolkning være, at dyret ikke er korrekt kan registrere dyret.

Den olfaktoriske tilvænning / dishabituation test har været nyttig i afklaring musemodeller for autisme. Et ofte anvendt musemodel for autisme er BTBR T + tf / J (BTBR) musestamme. Dette er en indavlet stamme, der har en stærk ansigt gyldighed til de tre centrale adfærdsmæssige karakteristika autisme. Imidlertid har en bekymring været, om deres sociale adfærd underskud skyldes en svækket olfaktorisk system. Yang og kolleger undersøgt, om BTBR stamme er forringet lugtesans gennem brug af Habituation / dishabituation test 12. De brugte tre præsentationer af vand, mandel lugt, og banan lugt for deres nonsocial lugte. Derefter anvendes en social lugt fremstillet ud fra 129 / SvlmJ og B6 musestammer. Den BTBR stammen viste tilvænning og dishabituation til nonsocial lugte. Musene demonstrerede beboelse til den første sociale lugt, men viste ikke dishabituation til den anden social lugt. En mulighed er, at de ikke kan være i stand til at skelne mellem forskellige sociale lugte. Dette kan forringe deres evne i en social adfærd prøve, når to sociale stimuli præsenteres. Dette er en vigtig overvejelse, når udforske forskellige musemodeller for autisme og kunne give ny indsigt i, hvad der er ændret i disse mus.

Tilvænning og dishabituation er grundlæggende ikke-associative mekanismer for læring. Disse læring principper er blevet påvist i mange typer af komplekse og simple organismer 13,14. Men disse mekanismeraf læring er blevet undersøgt sporadisk hos mus olfaktoriske adfærd, men dette system er vigtigt at måle som en del af et større batteri af adfærdsmæssige tests. Denne test er billig at installere og køre, kræver kun én dag af test, og flere mus kan testes inden for en dag. Hovedformålet med denne test er at undersøge olfaktoriske funktion. Resultaterne fra testen kan hjælpe med at reducere misfortolkning af social adfærd test og andre test, som omfatter en lugt komponent.

Ved behandlingen mus adfærd i enhver opgave er der flere overvejelser. Den stamme af mus, køn af dyrene, og tidspunkt på dagen er alle faktorer, der skal undersøges. Hvis investigator bruger en blandet stamme kan der være mere variation i undersøgelsen adfærd lugte. Vi præsenterede data fra et blandet FVB-stamme. De klarede sig godt i de ikke-sociale lugt tests (figur 3). Selv de undersøgte sociale lugt for en høj mængde of tid, de ikke vise tilvænning til gentagne præsentationer af sociale lugte (Figur 4). Musene kan være nødvendigt at gennemgå flere forsøg til at påvise tilvænning. Vi har givet en generel metode, der bør være egnede til de fleste stammer. Dog bør de ovennævnte faktorer tages i betragtning ved undersøgelsen af ​​opførslen af ​​en hvilken som helst belastning for første gang. Ved at undersøge udførelsen af ​​kontroldyr skal muligvis undersøgeren til at justere de valgte lugte, det antal gange lugten præsenteres, lysforholdene, tidspunkt på dagen til test, og køn dyret. Dette er sandt for enhver anden mus adfærd og bør overvejes i denne type test. Vi har inkluderet lugte, som er let tilgængelige for køb. Hvis investigator er bekymret for, at de ikke bruger rene lugt så de kan overveje bestilling fra Sigma-Aldrich. De har en database med over 1.600 aroma råmaterialer. Dette vil gøre det muligt for investigator at bruge en ren lugt men omkostningerne kan væreuoverkommelige for nogle laboratorier.

Der er nogle testbetingelser forsøgslederen måske overveje. I mange tests dyret akklimatiseret til værelset vil blive testet i. I denne protokol akklimatiseret vi den eksperimentelle dyr i ét rum og testede det i den anden. Dette vil medføre nogle ophidselse, når de flyttes til det nye rum. Vi udførte proceduren denne måde, fordi hvis alle musene anbragt i samme rum som test-mus så alle mus vil blive udsat for de hidtil ukendte lugte. Der er to muligheder, som forsøgslederen måske overveje. Den første er, hvad vi beskrevet ovenfor. Den anden er at bevæge dyret til plads til at lade det akklimatisere til værelset derefter begynde testning. Efter testen er gennemført så har den næste dyr placeret i rummet derefter lov til at akklimatisere. Dette er muligt, men vil næsten fordoble tidspunktet for forsøget. Den mulighed, vi anvendte, var at flytte dyreforsøg til test værelse kun under eksperimentet. Dette ville resultere i less test tid. Der er en balance i test effektivitet og bekymring nyhed induceret ophidselse. Eksperimentatoren bør afgøre, hvilken der er bedst for deres eksperiment.

Hvori denne protokol, en person scoringer opførslen realtid, er det blevet stadig mere populært at studere dyrs adfærd med kameraer til at optage deres adfærd. Der er flere fordele for anvendelsen af ​​videooptagelser af dyrs adfærd. Den ene er, at et menneske efterforsker i rummet kan påvirke musen adfærd. Faktisk en undersøgelse viste, at have en mandlig eksperimentator kan påvirke smertefølsomhed af mus, der testes 15. En anden bekymring er, at resultaterne er kun fra én investigator. Gennem brug af videooptagelser flere observatører kan score adfærd. Man kan så måle, hvor pålidelig den scoring er mellem observatører, som vil resultere i en mere konsekvent målinger. En anden fordel er, at rammen hastigheden af ​​videoerne kan reduceres og kan proVide en mere nøjagtig måling af adfærd. Brugen af ​​kameraer kan nemt indføres i denne metode. Opsætningen vil afhænge af laboratorieplads konfiguration. Ulempen ved at bruge kameraer er, at scoring tid i væsentlig grad vil stige. Kræver to eller flere iagttagere til at score adfærden vil øge den nødvendige tid til at producere resultater. Dette vil øge arbejdsstyrken byrde til laboratoriet og i nogle situationer kan være uoverkommelige, hvis screening mange knockout linjer. En anden ulempe er, at der kan være behov mere end ét kamera. Kameraet vil være i en fast position. Hvis musen undersøger lugt på en måde, forbyder observatøren at se dyret derefter forsøget kan være nødvendigt at blive elimineret. Dette er mindre af en bekymring med en person, der nemt kan justere deres opfattelse af dyret ved at justere deres synsvidde. Imidlertid kan det beskrives i denne protokol fremgangsmåde let tilpasses til at omfatte videooptagelser uden væsentlig ændring af protokollen vi DESCRibe.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Mouse cage Allentown Standard mouse cage
Wire lid Allentown BCU Mouse WBL 2500
Bedding Harlan 7090 Sani-Chips
Cotton swabs VWR 89031-270 6” wooden handle
Banana extract McCormick
Almond extract McCormick
Laboratory tape VWR 89098-062
Stop watch VWR 62374-000
Nitrile gloves VWR 82026
Timing device VWR 61161-350
15 ml conical tubes VWR 89003-294
2 L beakers  Pyrex 1003
Parafilm Parafilm PM-992 4” x 250’
1 L bottle with cap VWR 89000-240

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Doty, R. L. Odor-guided behavior in mammals. Experientia. 42, 257-271 (1986).
  2. Restrepo, D., Arellano, J., Oliva, A. M., Schaefer, M. L., Lin, W. Emerging views on the distinct but related roles of the main and accessory olfactory systems in responsiveness to chemosensory signals in mice. Horm Behav. 46, 247-256 (2004).
  3. Keverne, E. B. Importance of olfactory and vomeronasal systems for male sexual function. Physiol Behav. 83, 177-187 (2004).
  4. Gregg, B., Thiessen, D. D. A simple method of olfactory discrimination of urines for the Mongolian gerbil, Meriones unguiculatus. Physiol Behav. 26, 1133-1136 (1981).
  5. Yang, M., Crawley, J. N. Simple behavioral assessment of mouse olfaction. Curr Protoc Neurosci. Chapter 8 (Unit 8 24), (2009).
  6. Pan, Y. W., Kuo, C. T., Storm, D. R., Xia, Z. Inducible and targeted deletion of the ERK5 MAP kinase in adult neurogenic regions impairs adult neurogenesis in the olfactory bulb and several forms of olfactory behavior. PLoS ONE. 7, e49622 (2012).
  7. Wesson, D. W., Levy, E., Nixon, R. A., Wilson, D. A. Olfactory dysfunction correlates with amyloid-beta burden in an Alzheimer's disease mouse model. J Neurosci. 30, 505-514 (2010).
  8. Fadool, D. A., et al. Kv1.3 channel gene-targeted deletion produces 'Super-Smeller Mice' with altered glomeruli, interacting scaffolding proteins, and biophysics. Neuron. 41, 389-404 (2004).
  9. Arakawa, H., Arakawa, K., Blanchard, D. C., Blanchard, R. J. Scent marking behavior in male C57BL/6J mice: sexual and developmental determination. Behav Brain Res. 182, 73-79 (2007).
  10. Baum, M. J. Sexual differentiation of pheromone processing: links to male-typical mating behavior and partner preference. Horm Behav. 55, 579-588 (2009).
  11. Ferguson, J. N., et al. Social amnesia in mice lacking the oxytocin gene. Nat Genet. 25, 284-288 (2000).
  12. Yang, M., et al. Low sociability in BTBR T+tf/J mice is independent of partner strain. Physiol Behav. 107, 649-662 (2012).
  13. Best, J. D., et al. Non-associative learning in larval zebrafish. Neuropsychopharmacology. 33, 1206-1215 (2008).
  14. Wolman, M. A., Jain, R. A., Liss, L., Granato, M. Chemical modulation of memory formation in larval zebrafish. Proc Natl Acad Sci U S A. , (2011).
  15. Sorge, R. E., et al. Olfactory exposure to males, including men, causes stress and related analgesia in rodents. Nat Methods. 11, 629-632 (2014).

Tags

Adfærd Lugt diskrimination anosmi lugt tilvænning mus olfaktoriske test social adfærd autisme ASD
Testning for Lugt Diskrimination og Tilvænning i mus
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Arbuckle, E. P., Smith, G. D.,More

Arbuckle, E. P., Smith, G. D., Gomez, M. C., Lugo, J. N. Testing for Odor Discrimination and Habituation in Mice. J. Vis. Exp. (99), e52615, doi:10.3791/52615 (2015).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter