Introduction
चूहे अन्य व्यक्तियों को पहचानने के लिए, खाना खोजने, नए वातावरण नेविगेट करने के लिए महक पर निर्भर कर रहे हैं, और यौन व्यवहार 1-3। यह जांचकर्ताओं प्रायोगिक पशुओं के भोजन, सामाजिक संपर्क, या माउस से एक प्रतिक्रिया प्रकाश में लाना करने का इरादा किसी भी odors शामिल है कि व्यवहार परीक्षण प्रशासन से पहले गंध के कामकाज की समझ नहीं है या नहीं, की स्थापना आवश्यक है। Anosmia या अक्षमता व्यवहार मानदंड की एक विस्तृत विविधता में झूठी सकारात्मक या नकारात्मक में परिणाम सकता है, अलग odors के बीच भेद करने के लिए है, इसलिए व्यवहार परीक्षण के अन्य प्रकार के प्रदर्शन कर रहे हैं इससे पहले पता लगाने और odors भेद करने के लिए एक माउस की क्षमता स्थापित किया जाना चाहिए।
घ्राण आदी होना / dishabituation परीक्षण पहले 1980 के दशक 4 में वर्णित किया गया था। परीक्षण डीआरएस द्वारा चूहों में उपयोग के लिए अनुकूलित किया गया है। म्यू यांग और जैकलिन क्रौले 5। इस अन्वेषक एस्टा के लिए अनुमति देता है एक सरल और सस्ती परीक्षा हैएक माउस का पता लगाने और odors के बीच अंतर कर सकते हैं कि blish। महक का परीक्षण करने के अलावा, इस परीक्षण के अन्वेषक माउस के सामान्य व्यवहार का निरीक्षण करने के लिए और जल्दी एक परीक्षण के आहार में किया जाना चाहिए की अनुमति देता है। गुणात्मक माउस की हरकत के बारे में टिप्पणियों, चिंता के लक्षण, गतिविधि के स्तर पर, और भोजन odors को बनाम सामाजिक odors के लिए प्रतिक्रिया परीक्षण से बाहर किया जा सकता है, जिसमें नए क्षेत्रों का संकेत हो सकता है।
इस परीक्षण में, विभिन्न odors को में डूबा कपास swabs एक पंक्ति में एक माउस को तीन बार प्रस्तुत कर रहे हैं। एक गंध से प्रत्येक दोहराया प्रस्तुति के साथ, माउस प्रत्येक बाद प्रस्तुति के साथ यह जांच कम समय खर्च, कपास झाड़ू को आदत डालना होगा। एक नए गंध प्रस्तुत किया जाता है, dishabituation होता है, और एक ठेठ माउस यह वर्तमान और पिछले odors को 5 के बीच भेदभाव कर सकते हैं यह दर्शाता है कि झाड़ू की जांच में अधिक समय बिताना होगा। इस परीक्षा में एक समय में एक माउस को दिलाई और एक 45 मिनट एसीसी शामिल हैlimation अवधि के परीक्षण के 45 मिनट के द्वारा पीछा किया।
इस परीक्षण के लिए बाहर ले जाने के लिए आसान है हालांकि यह माउस घ्राण प्रणाली के बारे में परिष्कृत सवालों की जांच के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। ऐसे दफन खाद्य परीक्षण के रूप में महक के अन्य लोकप्रिय परीक्षण, बस anosmia की उपस्थिति या अनुपस्थिति की स्थापना। हालांकि, घ्राण भेदभाव और आदी होना परीक्षण अन्वेषक एक माउस odors को पता लगाने के लिए, लेकिन अलग odors के बीच भेदभाव कर सकते हैं क्षमता है कि न केवल निर्धारित करने के लिए अनुमति देता है। आदी होना और dishabituation की तर्ज नई म्यूटेंट odors को 6,7 के बीच भेदभाव कर सकते हैं स्थापित करने के लिए इस्तेमाल किया गया है। एक आश्चर्य की बात एक अध्ययन में, Fadool और उनके सहयोगियों ने सामान्य चूहों 8 से बेहतर बहुत समान odors को भेदभाव कर सकते हैं कि "सुपर smellers" Kv1.3 चैनल के जीन-लक्षित विलोपन के साथ कि चूहों कर रहे हैं दिखाने के लिए odors का जटिल मिश्रण का इस्तेमाल किया।
एक नए पीटकर माउस मॉडल का परीक्षण करते समय यह establis के लिए उपयोगी हैएच बुनियादी संवेदी कार्यों के लिए सामान्य व्यवहार की उपस्थिति। एक परीक्षण के आहार में जल्दी से किया है, गंध भेदभाव और आदी होना परीक्षण एक अन्वेषक किसी भी असामान्य व्यवहार का पालन करने का अवसर देता है। इन टिप्पणियों उत्परिवर्ती की विशेषताओं confounding के कारण कर रहे हैं कि बाद में परीक्षण में झूठी सकारात्मक या नकारात्मक परिणामों को रोकने सकता है। शोधकर्ताओं सामाजिक व्यवहार बुनियादी घ्राण समारोह सत्यापित करने की आवश्यकता जांच करने के लिए जारी रखने के रूप में तेजी से महत्वपूर्ण हो जाता है। उत्परिवर्ती लाइनों में महक की जांच करने के अलावा, इस परीक्षण में इस तरह के सभी गंध उत्तेजनाओं को एक औषधीय उपचार विशेष रूप से सामाजिक गंध उत्तेजनाओं के लिए एक जानवर की प्रतिक्रिया बढ़ जाती है, चाहे के रूप में या उनकी प्रतिक्रिया बढ़ जाती है अगर विशिष्ट सवालों का पता करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है।
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Protocol
निम्नलिखित प्रयोग में इस्तेमाल वयस्क नर चूहों उत्पन्न होती है और अंधेरे में एक 14 घंटा प्रकाश और 10 बजे (20:00-06:00 एचआर) दीन का चक्र के साथ, 22 डिग्री सेल्सियस के एक परिवेश के तापमान पर Baylor विश्वविद्यालय में रखे थे। चूहों भोजन और पानी के लिए यथेच्छ पहुँच दी गई। चूहों के लिए सभी प्रक्रियाओं Baylor विश्वविद्यालय पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था की देखभाल और प्रयोगशाला पशुओं के उपयोग और पशुओं के प्रोटोकॉल के लिए स्वास्थ्य के दिशा निर्देशों के राष्ट्रीय संस्थानों के अनुपालन में थे। चूहे देर सुबह / जल्दी दोपहर में परीक्षण किया गया। अन्वेषक नीचे सभी प्रक्रियाओं के लिए odors को खत्म करने और प्रदूषण को रोकने के लिए दस्ताने पहनना चाहिए।
गैर सामाजिक odors के 1. तैयारी
- नए सिरे से गैर-सामाजिक odors को परीक्षण के प्रत्येक दिन की तैयारी।
नोट: अन्वेषक odors को तैयार करने के लिए दस्ताने का प्रयोग करना चाहिए।- पानी प्रत्येक के 10 एमएल के साथ 3 अपकेंद्रित्र ट्यूब भरें।
- एक 15 मिलीलीटर & # में केला निकालने की पिपेट 100 μl160; शंक्वाकार ट्यूब और एक 1 के लिए एक दूसरे 15 मिलीलीटर शंक्वाकार ट्यूब में बादाम निकालने के 100 μl: 100 कमजोर पड़ने।
नोट: तृतीय 15 मिलीलीटर ट्यूब केवल पानी में शामिल होंगे।
सामाजिक odors के 2. तैयारी
- घटित होगा सुबह परीक्षण पर ताजा सामाजिक odors को तैयार करें। कम से कम तीन दिनों के लिए साफ और चूहों के बराबर संख्या में होते नहीं किया गया है कि दो पिंजरों से सामाजिक odors को प्राप्त करते हैं। परीक्षण के विषय के रूप में एक ही लिंग के चूहों से सामाजिक odors को प्राप्त करते हैं।
नोट: ये आरटी पर जमा करने के लिए कर रहे हैं और मजबूत और लगातार गंध बनाए रखने के लिए 4-6 घंटे के भीतर किया जाना चाहिए।- कपास swabs जरूरत सामाजिक गंध पैदा किए जाने कितने निर्धारण करें: परीक्षण किया जा रहा प्रत्येक माउस सामाजिक गंध 2 से सामाजिक गंध 1, और तीन से तीन swabs के साथ प्रस्तुत किया जाएगा।
- एक गंदे पिंजरे के नीचे भर में एक वक्र फैशन में एक कपास झाड़ू पोंछते द्वारा सामाजिक odors को तैयार करें। टिप को पकड़ किसी भी अतिरिक्त बिस्तर मुक्त हो जाना।
- Lids के साथ या parafilm के साथ कवर किया बीकर में बड़े कांच के जार में स्टोर swabs के। एक सामाजिक गंध 1 के लिए कंटेनर और सामाजिक गंध 2 के लिए एक दूसरे निर्दिष्ट।
- प्रायोगिक परीक्षण के कमरे के बाहर गंध के स्रोत पिंजरों बनाए रखें।
टेस्ट माउस 3. Acclimation
- दस्ताने पर रखो और परीक्षण किया जा करने के लिए माउस का वजन और शीर्ष पर एक तार ढक्कन और हटाया पानी की बोतल के साथ एक साफ पिंजरे में अलग-अलग जगह है।
- माउस परीक्षण के कमरे के अलावा किसी अन्य कमरे में 45 मिनट के लिए नए पिंजरे में acclimate करने की अनुमति दें। कमरे में कोई असामान्य odors या शोर से कर रहे हैं कि सुनिश्चित करें।
- परीक्षण के बारे में 45 मिनट लगते हैं के रूप में, वर्तमान माउस परीक्षण से पहले सही acclimate करने के लिए एक साफ पिंजरे में परीक्षण किया जा करने के लिए अगले माउस डाल द्वारा दशानुकूलन बार डगमगाते।
परीक्षण के कमरे 4. तैयारी
- ताजा कपास swabs, प्रयोगशाला टेप, सामाजिक गंध swabs युक्त बोतलें, एन के ट्यूबों रखेंपर सामाजिक odors को, एक micropipette, दो टाइमर, और परीक्षण के कमरे में एक ढक्कन के साथ एक बेकार की बोतल।
- परीक्षण के कमरे से odors, जोर शोर, और चमकदार रोशनी का यथोचित स्वतंत्र है कि सुनिश्चित करें। सुगंधित कोलोन या लोशन मत पहनो।
नोट: प्रेक्षक परीक्षण अवधि के दौरान गम या कैंडी चबाने नहीं होना चाहिए और मजबूत गंध खाद्य पदार्थों के लिए अपने जोखिम को सीमित करने का प्रयास करना चाहिए।
5. परीक्षण प्रक्रिया
- परीक्षण के कमरे में अपने पिंजरे में इस्तेमाल माउस ले आओ और बैठा करते हुए देखने के लिए सुविधाजनक है कि ऊंचाई पर काउंटर पर पिंजरे जगह है।
- 2 मिनट के लिए हर बार एक पंक्ति में प्रत्येक गंध 3 बार प्रस्तुत करें। तालिका 1 में पाया जा सकता है कि प्रस्तुति आदेश का प्रयोग करें।
- पिपेट खुशबू में odorant के 50 μl कपास झाड़ू की नोक पर परीक्षण किया और गंध के स्रोत-कैप फिर से हो। Pushin, पिंजरे के तार शीर्ष लिफ्ट और पानी की बोतल खोलने में झाड़ू का unscented, लकड़ी के अंत डालनेजी शीर्ष करने के लिए तार के नीचे से के माध्यम से लंबाई। उस गंध संदूषण से बचा जाता है तो, उंगलियों सहित कुछ भी करने के लिए कपास टिप को छूने से बचें।
- कपास अंत के बारे में 1 इंच पिंजरे में नीचे लटकी हुई है जब तक पानी की बोतल खोलने के माध्यम से झाड़ू आकर्षित करने के लिए आगे बढ़ें। प्रयोगशाला टेप का उपयोग पिंजरे की ओर करने के लिए झाड़ू से लकड़ी के अंत प्रत्यय।
नोट: ढक्कन वापस पिंजरे पर गिर जाने के लिए नहीं सावधान रहो, परीक्षण माउस परेशान होता है कि एक जोर शोर के कारण। - इसके तत्काल बाद 2 मिनट के लिए समय शुरू करते हैं। 2 मिनट प्रस्तुति समय के लिए एक टाइमर का प्रयोग करें। 2 मिनट की सुनवाई के दौरान गंध सूँघने बिताया संचयी समय रिकॉर्ड। एक अलग बंद घड़ी का उपयोग कर पशु के सूँघने व्यवहार गिनो। जानवर की नाक अपनी नाक ~ 2 सेमी या टिप करने के लिए करीब के साथ कपास टिप की ओर उन्मुख है जब सक्रिय सूँघने परिभाषित किया गया है।
- प्रत्येक परीक्षण के पूरा होने के बाद, तार ढक्कन उठाते हैं और संयुक्त राष्ट्र के माध्यम से नीचे की ओर खींच द्वारा कपास झाड़ू को दूरढक्कन के derside (इस तार को छू से कपास टिप को रोकने के द्वारा गंध संदूषण से बचा जाता है)। एक 500 मिलीलीटर की बोतल कचरे में इस्तेमाल झाड़ू सील।
- तैयार है और अगले झाड़ू डालने और समय शुरू करते हैं। प्रत्येक अंतर परीक्षण अंतराल के बीच लगभग 1 मिनट की अनुमति दें। प्रत्येक खुशबू 2 मिनट के लिए हर बार एक पंक्ति में तीन बार प्रस्तुत किया गया है, जब तक जारी रखें।
- माउस सभी परीक्षणों के पूरा हो जाने के बाद कर सकते हैं, बाहर परीक्षा कक्ष के एक कचरे में इस्तेमाल किया कपास swabs युक्त अपशिष्ट बोतल खाली है। अपने घर पिंजरे करने के लिए माउस लौटें।
6. विश्लेषण
- एनोवा न्यूमैन-Keuls द्वारा पीछा दो तरह या महत्वपूर्ण आदी होना निर्धारित करने के लिए एक समान पद हॉक टेस्ट (लगातार एक ही बदबू आ रही है सूँघने कम समय), और dishabitutation (अधिक बार एक नया गंध सूँघने) का उपयोग गंध हालत प्रति प्रत्येक समूह के लिए डेटा का विश्लेषण।
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Representative Results
वर्णित प्रोटोकॉल के बाद, परिणाम दस वयस्क (प्रसव के बाद दिन 90-120) पुरुष C57BL / 6J चूहों और आठ पुरुष FVB मिश्रित पृष्ठभूमि तनाव (प्रसव के बाद दिन 50-70) का उपयोग कर दर्ज किया गया। परीक्षण कई दिनों से अधिक एक एकल अन्वेषक द्वारा किया गया। रेखांकन पर प्रत्येक बिंदु एक गंध की जांच कर बिताया औसत समय का प्रतिनिधित्व करता है।
पानी में डूबा हुआ कपास झाड़ू पहली बार पेश किया गया है, जब चूहों इस उपन्यास वस्तु (: पहले तीन डेटा बिंदुओं चित्रा 1) की जांच के समय का एक बड़ा सौदा खर्च करते हैं। एक के बाद एक प्रस्तुति के साथ, कम समय आदी होना दर्शाता है, झाड़ू की जांच कर खर्च किया जाता है। एक नए गंध की शुरुआत की है, जब समय में इजाफा चूहों नई गंध और पिछले एक (: बादाम डेटा बिंदुओं चित्रा 1) के बीच भेदभाव कर सकते हैं यह दर्शाता है कि झाड़ू की जांच कर बिताया है। फिर, एक के बाद एक प्रस्तुति के साथ, कम समय गंध की जांच कर खर्च किया जाता है। चूहों के एक महत्वपूर्ण डी दिखानेतीन परीक्षणों एफ (2,18) पर पानी की झाड़ू सूँघने समय में ecrease 3.8, पी <0.05 =। बार-बार बादाम गंध एफ (2,18) = 3.6, पी <0.05 के साथ प्रस्तुत किया, जब वे एक समान पैटर्न दिखा। तीसरे गंध द्वारा वे अभी भी आदी होना प्रदर्शन कर रहे हैं लेकिन इस परीक्षण से पशुओं के लिए एक मंजिल प्रभाव (चित्रा 1: केले डेटा अंक) तक पहुंच रहे हैं। व्यवहार की क्षमता किसी भी कम विश्वसनीय नहीं है व्यवहार को मापने के लिए इतनी कम है कि जब मंजिल प्रभाव है। केला गंध एफ (2,18) = 2.5, पी <0.1 के साथ प्रस्तुत जब वे तीन परीक्षणों पर एक परिवर्तन नहीं दिखाते। हालांकि, गंध के सभी 9 प्रस्तुतियों के लिए एक दो तरह एनोवा समय एफ (8,72) = 3.8, पी <0.001 पर एक महत्वपूर्ण प्रभाव दिखाते हैं।
आदी होना और भेदभाव का एक ही पैटर्न गैर सामाजिक odors के साथ ही सामाजिक odors के साथ देखा जा सकता है। हालांकि, चूहों और अधिक समय की सामाजिक odors को जांच कर (चित्रा 2) खर्च करते हैं। टी सूँघने बिताए समय में एक महत्वपूर्ण कमी हैवह सामाजिक odors के सभी 6 परीक्षणों एफ (2,18) = 6.1 संयुक्त थे, जब पी <0.01। हालांकि, पहले तीन परीक्षणों एफ (2,18) = 3.0, पी = 0.076 पर एक सीमांत प्रभाव था। यह कुछ आदी होना नहीं, बल्कि पहले सामाजिक गंध सूँघने समय में कमी का एक सांख्यिकीय महत्वपूर्ण राशि थी चलता है। जानवर एक सामाजिक गंध की दूसरी प्रस्तुति के दौरान सामाजिक गंध एफ (2,18) = 6.1, पी <0.01 जांच की समय की मात्रा में उल्लेखनीय कमी आई थी।
हम एक पुरुष FVB मिश्रित पृष्ठभूमि तनाव में विधि दोहराया। पानी में डूबा हुआ कपास झाड़ू पहली बार पेश किया गया है, जब चूहों इस उपन्यास वस्तु (: पहले तीन डेटा बिंदुओं चित्रा 3) की जांच के समय का एक बड़ा सौदा खर्च करते हैं। एक के बाद एक प्रस्तुति के साथ, कम समय आदी होना दर्शाता है, झाड़ू की जांच कर खर्च किया जाता है। एक नए गंध की शुरुआत की है, जब समय में इजाफा चूहों नई गंध एक के बीच भेदभाव कर सकते हैं यह दर्शाता है कि झाड़ू की जांच कर बिताया है वहाँएन डी पिछले एक (चित्रा 3: बादाम डेटा अंक)। फिर, एक के बाद एक प्रस्तुति के साथ, कम समय गंध की जांच कर खर्च किया जाता है। चूहों तीन परीक्षणों एफ (2,14) = 13.3, पी <0.001 पर पानी की झाड़ू सूँघने समय में एक महत्वपूर्ण कमी दिखाते हैं। बार-बार बादाम गंध एफ (2, 14) = 12.7, पी <0.001 के साथ प्रस्तुत किया, जब वे एक समान पैटर्न दिखा। इस तनाव में अभी भी तीन परीक्षणों भर में एक महत्वपूर्ण अंतर था। तीसरे गंध द्वारा वे अभी भी आदी होना प्रदर्शन कर रहे हैं (चित्रा 3: केले डेटा अंक), लेकिन केला गंध एफ (2,14) = 3.04, पी के साथ प्रस्तुत जब मंजिल प्रभाव के कारण वे तीन परीक्षणों पर एक परिवर्तन नहीं दिखाते = 0.08। हालांकि, गंध के सभी 9 प्रस्तुतियों के लिए एक दो तरह एनोवा समय एफ (8,56) = 9.6, पी <0.001 पर एक महत्वपूर्ण प्रभाव दिखाते हैं।
आदी होना और भेदभाव का एक ही पैटर्न गैर सामाजिक odors के साथ ही सामाजिक odors के साथ नहीं देखा गया था। एक महत्वपूर्ण नहीं थासमय में कमी सभी 6 परीक्षणों एफ (5,35) = 0.16, पी = 0.97 संयुक्त थे जब सामाजिक odors को सूँघने बिताया। डेटा चूहों दो सामाजिक odors से दोहराया प्रस्तुतियों के लिए अभ्यस्त नहीं है कि सलाह देते हैं।
चित्रा 1: औसत समय पुरुष C57BL / 6J चूहों के लिए गैर-सामाजिक odors को जांच कर बिताया प्रत्येक डेटा बिंदु पशु विशेष गैर सामाजिक गंध की जांच कर बिताया मतलब समय का प्रतिनिधित्व करता है।। त्रुटि सलाखों के मतलब की मानक त्रुटि का प्रतिनिधित्व करते हैं। तारों (*) समूह आदी होना प्रदर्शित कर रहा है, जहां एक महत्वपूर्ण अंतर (पी <0.05) से संकेत मिलता है।
चित्रा 2:। औसत समय पुरुष C57BL / 6J चूहों के लिए सामाजिक odors को जांच कर बिताया प्रत्येक डेटा बिंदु मतलब समय का प्रतिनिधित्व करता है पशु spenटी विशेष सामाजिक गंध की जांच। त्रुटि सलाखों के मतलब की मानक त्रुटि का प्रतिनिधित्व करते हैं। तारों (*) समूह आदी होना प्रदर्शित कर रहा है, जहां एक महत्वपूर्ण अंतर (पी <0.05) से संकेत मिलता है।
चित्रा 3: औसत समय पुरुष FVB मिश्रित पृष्ठभूमि तनाव के लिए गैर-सामाजिक odors को जांच कर बिताया प्रत्येक डेटा बिंदु पशु विशेष गैर सामाजिक गंध की जांच कर बिताया मतलब समय का प्रतिनिधित्व करता है।। त्रुटि सलाखों के मतलब की मानक त्रुटि का प्रतिनिधित्व करते हैं। तारों (*) समूह आदी होना प्रदर्शित कर रहा है, जहां एक महत्वपूर्ण अंतर (पी <0.05) से संकेत मिलता है।
चित्रा 4: औसत समय पुरुष FVB मिश्रित पृष्ठभूमि तनाव के लिए सामाजिक odors को जांच कर बिताया प्रत्येक डेटा प्रतिनिधि इशारा करते हैं।मतलब समय टीएस पशु विशेष सामाजिक गंध की जांच कर बिताया। त्रुटि सलाखों के मतलब की मानक त्रुटि का प्रतिनिधित्व करते हैं।
| गंध |
| पानी |
| पानी |
| पानी |
| बादाम |
| बादाम |
| बादाम |
| केला |
| केला |
| अपरिचित सामाजिक गंध 1 |
| अपरिचित सामाजिक गंध 1 |
| अपरिचित सामाजिक गंध 1 |
| अपरिचित सामाजिक गंध 2 |
| अपरिचित सामाजिक गंध 2 |
| अपरिचित सामाजिक गंध 2 |
तालिका एक
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Discussion
इस पत्र में प्रदान की जाती परिणामों चूहों के लिए इष्टतम है। चूहों के एक उपन्यास गंध करने के लिए एक मजबूत प्रतिक्रिया दिखाना है, तो जल्दी आदत डालना। इस विधि में महत्वपूर्ण कदमों में से एक odors की तैयारी है। अन्वेषक प्रदूषण को रोकने के लिए एक दूसरे से odors को अलग करने के लिए महान देखभाल करने के लिए की जरूरत है। एक अन्य महत्वपूर्ण पहलू कपास झाड़ू की प्रस्तुति है। माउस टिप की जांच कर सकते हैं, लेकिन नोक पर आंसू नहीं करता है तो अन्वेषक कपास टिप का सबसे अच्छा स्थान का निवारण करने की जरूरत है। परीक्षण का एक महत्वपूर्ण घटक odors का चयन होता है। हम तीन गैर सामाजिक odors को प्रस्तुत किया है, लेकिन यह अतिरिक्त odors को शामिल करने के लिए मुश्किल नहीं होगा। एक चेतावनी एक दूसरे से काफ़ी अलग है कि odors को चुनने के लिए है। इसी तरह odors को क्रमिक रूप से प्रस्तुत कर रहे हैं अगर एक एक "मंजिल" प्रभाव का निरीक्षण कर सकते हैं। इसके अतिरिक्त, चूहे भी कई उपन्यास odors के साथ प्रस्तुत जब उनकी प्रतिक्रिया को कम करने के लिए शुरू हो सकता है। अन्वेषक एक में शामिल करना चाहता हैdditional odors को तो वह / वह परीक्षण के अतिरिक्त दिनों के शामिल करने के लिए चाहते हो सकता है। यह प्रत्येक माउस का परीक्षण करने के लिए लगभग एक घंटा लगता है। इसके अलावा, एक एक प्रयोगात्मक शर्त के रूप में उन्हें शामिल करने से पहले नियंत्रण चूहों में odors के चयन का निवारण करना चाहिए।
घ्राण आदी होना / dishabituation सामाजिक व्यवहार की जांच जब शामिल करने के लिए एक महत्वपूर्ण परीक्षा है। तीन चैम्बर सामाजिक व्यवहार का परीक्षण आमतौर पर चूहों में सामाजिक व्यवहार घाटे की जांच करने के लिए प्रयोग किया जाता है। इस परीक्षा में प्रयोगात्मक जानवर एक उपन्यास वस्तु और चैंबर के अलग सिरों पर एक कप के तहत रखा जाता है जो एक उपन्यास माउस की जांच जहां एक की हालत भी शामिल है। परीक्षण भी एक उपन्यास माउस एक कप और अन्य कप के अंतर्गत रखा गया है एक और माउस (परिचित माउस) के तहत रखा गया है जहां एक की हालत शामिल कर सकते हैं। अन्वेषक तो प्रयोगात्मक माउस दोनों के बीच अंतर कर सकते हैं कि क्या परख होती है। महक है के बाद से मुख्य संवेदी साधन चूहों अन्य चूहों 9-11 की पहचान करने के लिए उपयोगबिगड़ा महक इस कार्य पर उनकी क्षमता प्रभावित हो सकती है। बिगड़ा महक डेटा के अशुद्ध अर्थ में परिणाम सकता है। उदाहरण के लिए, प्रयोगकर्ता माउस परिचित माउस की तुलना में उपन्यास माउस के साथ और अधिक समय खर्च नहीं करता है कि निरीक्षण कर सकते हैं। इस सामाजिक घाटे या चूहों में बिगड़ा सामाजिक स्मृति का सबूत परीक्षण किया जा रहा प्रदर्शित करने के लिए प्रकट हो सकता है। हालांकि, एक सरल व्याख्या पशु ठीक से जानवर का पता नहीं लगा सकते हैं कि हो सकता है।
घ्राण आदी होना / dishabituation परीक्षण आत्मकेंद्रित के माउस मॉडल को स्पष्ट करने में उपयोगी है। आत्मकेंद्रित में से एक अक्सर इस्तेमाल माउस मॉडल BTBR टी + TF / जम्मू (BTBR) माउस तनाव है। यह आत्मकेंद्रित के तीन मुख्य व्यवहार विशेषताओं को मजबूत चेहरा वैधता है कि एक जन्मजात तनाव है। हालांकि, एक चिंता का विषय उनके सामाजिक व्यवहार घाटा एक बिगड़ा घ्राण प्रणाली की वजह से कर रहे हैं कि क्या किया गया है। यांग और उनके सहयोगियों BTBR तनाव habitu के उपयोग के माध्यम से महक बिगड़ा है कि क्या जांच कीसमझना / dishabituation परीक्षण 12। वे अपने nonsocial odors के लिए पानी, बादाम गंध, और केले गंध से तीन प्रस्तुतियों का इस्तेमाल किया। वे तो 129 / SvlmJ और बी -6 माउस तनाव से तैयार एक सामाजिक गंध का इस्तेमाल किया। BTBR तनाव nonsocial odors के लिए आदी होना और dishabituation का प्रदर्शन किया। चूहों पहले सामाजिक गंध को बस्ती का प्रदर्शन किया लेकिन दूसरे सामाजिक गंध को dishabituation नहीं दिखा था। एक संभावना यह है कि वे विभिन्न सामाजिक odors के बीच अंतर करने में सक्षम नहीं हो सकता है। दो सामाजिक उत्तेजनाओं प्रस्तुत कर रहे हैं जब यह एक सामाजिक व्यवहार की परीक्षा में उनकी क्षमता प्रभावित हो सकती है। आत्मकेंद्रित के विभिन्न माउस मॉडल की खोज और इन चूहों में बदल जाता है में नए अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकता है जब यह एक महत्वपूर्ण विचार है।
आदी होना और dishabituation शिक्षा के बुनियादी गैर साहचर्य व्यवस्था कर रहे हैं। ये सीखने के सिद्धांतों जटिल और सरल जीवों 13,14 के कई प्रकार में प्रदर्शन किया गया है। हालांकि, इन तंत्रोंशिक्षा के माउस घ्राण व्यवहार में बार बार जांच की लेकिन इस प्रणाली के व्यवहार परीक्षण का एक बड़ा बैटरी के भाग के रूप में मापने के लिए महत्वपूर्ण है किया गया है। यह परीक्षण, स्थापना और चलाने के लिए सस्ती है परीक्षण के केवल एक दिन की आवश्यकता है, और कई चूहों एक दिन के भीतर का परीक्षण किया जा सकता है। इस परीक्षण का मुख्य उद्देश्य घ्राण समारोह की जांच करने के लिए है। परीक्षण से परिणाम एक गंध घटक शामिल हैं जो सामाजिक व्यवहार परीक्षण और अन्य परीक्षणों के अशुद्ध अर्थ कम करने में मदद कर सकते हैं।
किसी भी कार्य में माउस व्यवहार का परीक्षण करते समय कई विचार कर रहे हैं। माउस का तनाव, जानवरों की लिंग, और दिन के समय की जांच करने की आवश्यकता है कि सभी कारक हैं। अन्वेषक एक मिश्रित तनाव का उपयोग कर रहा है तो odors की जांच व्यवहार में अधिक परिवर्तनशीलता हो सकता है। हम एक मिश्रित FVB तनाव से डेटा प्रस्तुत किया। वे गैर-सामाजिक गंध परीक्षण में अच्छी तरह से (चित्रा 3) का प्रदर्शन किया। वे एक उच्च राशि ओ के लिए सामाजिक गंध की जांच की, हालांकिएफ बार, वे सामाजिक odors को (चित्रा 4) के दोहराया प्रस्तुतियों के आदी होना का प्रदर्शन नहीं किया था। चूहों आदी होना प्रदर्शित करने के लिए और अधिक परीक्षणों से गुजरना पड़ सकता है। हम सबसे उपभेदों के लिए उपयोगी होना चाहिए कि एक सामान्य विधि प्रदान की है। पहली बार के लिए किसी भी तनाव के व्यवहार की जांच फिर भी, जब उपरोक्त कारकों पर विचार किया जाना चाहिए। नियंत्रण जानवरों के प्रदर्शन की जांच करके अन्वेषक चयनित odors को समायोजित करने की आवश्यकता हो सकती है, गंध प्रस्तुत किया है समय की संख्या, प्रकाश व्यवस्था की स्थिति, परीक्षण के लिए दिन का समय, और जानवर के सेक्स। यह किसी भी अन्य माउस व्यवहार के लिए सच है और परीक्षण के इस प्रकार में विचार किया जाना चाहिए। हम आसानी से खरीद के लिए उपलब्ध हैं कि odors को शामिल किया है। अन्वेषक वे शुद्ध odors को उपयोग नहीं कर रहे हैं कि संबंध है तो वे सिग्मा Aldrich से आदेश देने पर विचार हो सकता है। वे 1600 से अधिक सुगंध कच्चे माल की एक डेटाबेस है। इस अन्वेषक एक शुद्ध गंध का उपयोग करने की अनुमति देगा, लेकिन लागत में हो सकता हैकुछ प्रयोगशालाओं के लिए निषेधात्मक।
प्रयोगकर्ता पर विचार करना चाहते हो सकता है कुछ परीक्षण शर्तों रहे हैं। कई परीक्षणों में पशु में यह परीक्षण किया जाएगा कमरे को आदत है। इस प्रोटोकॉल में हम एक कमरे में प्रयोगात्मक पशु आदत और अन्य में यह परीक्षण किया गया। नए कमरे में ले जाया गया, जब यह कुछ उत्तेजना का कारण होगा। चूहों के सभी परीक्षण चूहों के रूप में एक ही कमरे में रखे जाते हैं तो सब चूहों उपन्यास odors को उजागर करने के लिए किया जाएगा, क्योंकि हम प्रक्रिया इस तरह से प्रदर्शन किया। प्रयोगकर्ता पर विचार करना चाहते हो सकता है कि दो विकल्प हैं। पहले हम ऊपर वर्णित है। अन्य यह तो कमरे के लिए acclimate परीक्षण शुरू करने देने के लिए कमरे में पशु ले जाने के लिए है। परीक्षण के बाद पूरा हो गया तो फिर acclimate करने की अनुमति दी कमरे में रखा अगले जानवर है। यह संभव है, लेकिन लगभग प्रयोग के समय दोगुना होगा। हम इस्तेमाल विकल्प केवल प्रयोग के दौरान परीक्षण के कमरे के लिए परीक्षण जानवर ले जाने के लिए किया गया था। इस एल में नतीजा होगाईएसएस के परीक्षण के समय। नवीनता प्रेरित कामोत्तेजना के बारे में परीक्षण दक्षता और चिंता में एक संतुलन है। प्रयोगकर्ता उनके प्रयोग के लिए सबसे अच्छा है जो यह निर्धारित करना चाहिए।
इस प्रोटोकॉल, एक व्यक्ति के स्कोर व्यवहार वास्तविक समय में, यह उनके व्यवहार को रिकॉर्ड करने के लिए कैमरों के साथ पशुओं के व्यवहार का अध्ययन करने के लिए तेजी से लोकप्रिय हो गया है जिसमें। पशुओं के व्यवहार की वीडियो रिकॉर्डिंग का उपयोग करने के कई फायदे हैं। एक कमरे में एक मानव अन्वेषक माउस व्यवहार को प्रभावित कर सकता है। दरअसल, एक अध्ययन में एक पुरुष प्रयोगकर्ता होने चूहों के दर्द के प्रति संवेदनशीलता 15 परीक्षण किया जा रहा प्रभावित कर सकते हैं पाया। एक और चिंता का परिणाम एक अन्वेषक से ही हो रहा है। वीडियो का उपयोग रिकॉर्डिंग के माध्यम से कई पर्यवेक्षकों का व्यवहार स्कोर कर सकते हैं। एक तो स्कोरिंग अधिक सुसंगत माप में परिणाम होगा जो पर्यवेक्षकों के बीच है कैसे विश्वसनीय उपाय कर सकते हैं। एक अन्य लाभ यह है कि वीडियो के फ्रेम की गति कम हो और हो सकता समर्थक हो सकता हैव्यवहार का एक और अधिक सटीक माप ख़बरदार। कैमरों का इस्तेमाल आसानी से इस विधि में पेश किया जा सकता है। सेटअप प्रयोगशाला अंतरिक्ष विन्यास पर निर्भर करेगा। कैमरों का उपयोग करने का नुकसान यह है कि स्कोरिंग समय में काफी वृद्धि होगी। व्यवहार स्कोर करने के लिए दो या दो से अधिक पर्यवेक्षकों की आवश्यकता परिणामों का निर्माण करने के लिए आवश्यक समय में वृद्धि होगी। इस प्रयोगशाला में श्रम बोझ बढ़ जाएगा और कई पीटा लाइनों स्क्रीनिंग अगर कुछ स्थितियों में निषिद्ध किया जा सकता है। एक और नुकसान अधिक कैमरा की जरूरत हो सकती है। कैमरा एक निश्चित स्थिति में होगा। माउस जानवर को देखने के लिए पर्यवेक्षक पर प्रतिबंध लगाता है कि एक तरह से गंध की जांच तो परीक्षण का सफाया होना पड़ सकता है। यह आसानी से दृष्टि की अपनी लाइन का समायोजन करके पशु के अपने विचार समायोजित कर सकते हैं, जो एक व्यक्ति के साथ एक चिंता का कम है। हालांकि, इस प्रोटोकॉल में वर्णित विधि आसानी से हम जानकारी प्रोटोकॉल के लिए महत्वपूर्ण परिवर्तन के बिना वीडियो रिकॉर्डिंग में शामिल करने के लिए समायोजित किया जा सकता हैRibe।
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Mouse cage | Allentown | Standard mouse cage | |
| Wire lid | Allentown | BCU Mouse WBL 2500 | |
| Bedding | Harlan | 7090 Sani-Chips | |
| Cotton swabs | VWR | 89031-270 | 6” wooden handle |
| Banana extract | McCormick | ||
| Almond extract | McCormick | ||
| Laboratory tape | VWR | 89098-062 | |
| Stop watch | VWR | 62374-000 | |
| Nitrile gloves | VWR | 82026 | |
| Timing device | VWR | 61161-350 | |
| 15 ml conical tubes | VWR | 89003-294 | |
| 2 L beakers | Pyrex | 1003 | |
| Parafilm | Parafilm | PM-992 | 4” x 250’ |
| 1 L bottle with cap | VWR | 89000-240 |
References
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