Introduction
Möss är beroende av luktsinne för att navigera nya miljöer, att hitta mat, för att känna igen andra individer, och sexuellt beteende 1-3. Det är viktigt att utredarna fastställa huruvida försöksdjur har en fungerande luktsinne före administrering beteendetester som involverar mat, social interaktion, eller någon lukt som är avsedda att framkalla ett svar från musen. Luktsinne eller oförmåga att skilja mellan olika lukter, kan resultera i falska positiva eller negativa i en mängd olika beteende paradigm, så en mus förmåga att upptäcka och särskilja lukter bör inrättas före andra typer av beteendetester utförs.
Lukt tillvänjning / dishabituation testet beskrevs första gången på 1980-talet 4. Testet har anpassats för användning i möss av Dr.. Mu Yang och Jacqueline Crawley 5. Detta är ett enkelt och billigt test, som gör det möjligt för forskaren att Estáblish att en mus kan upptäcka och skilja mellan lukter. Förutom att testa lukt, gör detta test utredaren att iaktta det allmänna beteendet hos musen och bör göras i början av en test regim. Kvalitativa iakttagelser om musens förflyttning, tecken på ångest, aktivitetsnivå, och svar på sociala lukter kontra livsmedel lukter kan signalera nya områden där tester kan utföras.
I detta test är tops doppas i olika lukter presenteras för en mus tre gånger i rad. Med varje upprepad presentation av en lukt, kommer musen vänja till bomullspinne, spendera mindre tid på att undersöka det med varje efterföljande presentation. När en ny lukt presenteras sker dishabituation, och en typisk mus kommer att tillbringa mer tid att utreda pinnen, vilket tyder på att det kan skilja mellan de nuvarande och tidigare lukter 5. Detta test administreras till en mus i taget och inkluderar en 45 min enllimation period följt av 45 min av testning.
Även om detta test är enkel att utföra, kan den användas för att undersöka avancerade frågor om musen luktsystemet. Andra populära tester av lukt, såsom begravda mat testet, helt enkelt fastställa närvaron eller frånvaron av luktsinne. Men gör lukt diskriminering och tillvänjning testet utredaren att fastställa att en mus har inte bara förmågan att upptäcka lukter, men kan skilja mellan olika lukter. Mönstret av tillvänjning och dishabituation har använts för att fastställa att nya mutanter kan skilja mellan lukter 6,7. I en överraskande studie, Fadool och kollegor använde komplexa blandningar av lukter visar att möss med genen inriktade strykningen av Kv1.3 kanal "super smellers" som kan diskriminera mycket likartade lukter bättre än normala möss 8.
Vid prövningen av en ny knockout mus modell är det nyttigt att establish närvaro av normalt beteende för grundläggande sensoriska uppgifter. När du är klar i början av en test regim, lukt diskriminering och tillvänjning test ger en utredare möjlighet att observera några ovanliga beteenden. Dessa observationer kan förhindra falska positiva eller negativa resultat i efterföljande testning som är hänförliga till confounding egenskaper mutanten. Som forskare fortsätta att undersöka socialt beteende behovet av att kontrollera grundläggande lukt funktion blir allt viktigare. Förutom att undersöka olfaction i muterade linjer, kan detta test användas för att ta itu med särskilda frågor, såsom huruvida en farmakologisk behandling specifikt ökar djurets svar på sociala lukt stimuli eller om deras svar ökar till alla lukt stimuli.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
De vuxna hanmöss användes i följande experiment genererades och inrymt vid Baylor University vid en omgivningstemperatur på 22 ° C, med en 14 timmar ljus och 10 timmar mörker (20:00 till 06:00 h) dygnscykel. Mössen gavs ad libitum tillgång till mat och vatten. Alla förfaranden för att mössen var i enlighet med National Institutes of Health riktlinjer för vård och användning av försöksdjur och djur protokollet godkändes av Baylor University Djurvård och användning kommittén. Möss testades på förmiddagen / tidig eftermiddag. För alla förfaranden under utredaren ska bära handskar för att eliminera lukt och förhindra kontaminering.
1. Framställning av icke-sociala lukter
- Förbered färska icke-sociala lukter varje testdag.
Obs: Utredaren bör använda handskar för att förbereda lukter.- Fyll tre centrifugrör med 10 ml vatten vardera.
- Tillsätt 100 pl av bananextrakt i en 15 ml & #160; koniskt rör och 100 ul av mandel extrakt till en andra 15 ml koniskt rör för en 1: 100 spädning.
Obs: Den tredje 15 ml tub kommer endast att innehålla vatten.
2. Framställning av sociala lukter
- Förbered färska sociala lukter på morgonen tester kommer att ske. Skaffa sociala lukter från två burar som inte har rengjorts i minst tre dagar och innehåller lika många möss. Skaffa sociala lukter från möss av samma kön som försökspersonen.
Obs: Dessa ska förvaras vid rumstemperatur och skall användas inom 4-6 timmar för att upprätthålla en stark och konsekvent lukt.- Bestäm hur många sociala lukt bomullspinnar måste skapas: varje mus som testas kommer att presenteras med tre bomullstoppar från social lukt 1, och tre från social lukt 2.
- Bered sociala lukter genom att torka en bomullstopp i en sicksack sätt över bottnen av en smutsig bur. Skaka bort överflödigt strö klamrar sig fast spetsen.
- Förvara kompresser i stora glasburkar med lock eller i bägare täckt med parafilm. Utse en behållare för social lukt 1 och en sekund för social lukt 2.
- Behåll lukt källa burar utanför försöksprovningsrummet.
3. Acklimatisering av testmus
- Sätt på handskar och väger musen som ska testas och placera sig i en ren bur med en tråd locket på och vattenflaska bort.
- Låt musen för att anpassa sig till den nya buren i 45 min i ett annat rum än provningsrummet. Se till att det inte finns några ovanliga lukter eller ljud i rummet.
- Som test tar ca 45 minuter, sprida acklimatiseringen gånger genom att sätta nästa musen för att testas i en ren bur att acklimatisera höger innan du testar den aktuella musen.
4. Beredning av provningsrummet
- Placera färska bomullspinnar, laboratorie band, de flaskor som innehåller sociala lukt kompresser, rören npå social lukt, en mikropipett, två timers, och ett slöseri flaska med ett lock i provningsrummet.
- Se till att testa rummet är någorlunda fritt från lukt, höga ljud och starkt ljus. Bär inte doftande cologne eller lotion.
Obs: Observatören ska inte vara tuggummi eller godis under testperioden och bör försöka begränsa sin exponering för stark lukt livsmedel.
5. Testprocedur
- Ta acklimatiserad musen i sin bur i provningsrummet och placera buren på disken på en höjd som är bekvämt för visning när du sitter.
- Presentera varje lukt tre gånger i rad under 2 minuter varje gång. Använd presentationen ordning som återfinns i tabell 1.
- Pipett 50 ul av luktämnen i doften som skall testas på toppen av bomullspinne och sätt på korken lukten källan. Lyft tråd toppen av buren och sätt i oparfymerade, trä änden av pinnen i vattenflaskan öppningen, pushing längden genom från undersidan av viran till toppen. Undvik att röra vid bomulls tips till någonting, inklusive fingrar, så att lukt föroreningar undviks.
- Fortsätt att dra pinnen genom vattenflaska öppningen till omkring 1 tum av bomulls änden hänger ner i buren. Anbringa trä änden av pinnen till sidan av buren med hjälp av lab tejp.
Obs: Var noga med att inte låta locket falla tillbaka på buren, vilket orsakar en högt ljud som skulle störa testmus. - Omedelbart börja timing för 2 min. Använd en timer för att tajma 2 min presentation. Spela den kumulativa tid sniffa lukt under 2 min rättegång. Räkna djurets sniffning beteende med hjälp av en separat stoppur. Aktiv sniffning definieras när djurets nos är riktad mot bomullsspetsen med nosen ~ 2 cm eller närmare spetsen.
- Efter slutförandet av varje försök, höja tråd locket och ta bort bomullspinne genom att dra det nedåt genom fnderside av locket (för att undvika kontaminering lukt genom att förhindra bomullsspetsen från att röra tråden). Täta används pinne i ett 500 ml avfallsflaska.
- Förbered och lägg nästa stuss och börja timing. Låt ca 1 min mellan varje inter-rättegången intervall. Fortsätt tills varje doft har presenterats tre gånger i rad, under 2 minuter varje gång.
- När musen har avslutat alla rättegångar, tömma avfallsflaskan som innehåller de använda kompresser bomull i en papperskorg utanför testrummet. Återgå musen till sitt hem bur.
6. Analys
- Analysera data för varje grupp per lukt tillstånd med hjälp av tvåvägs ANOVA följt av Newman-Keuls eller en liknande post hoc test för att avgöra betydande tillvänjning (mindre tid sniffar på varandra samma dofter) och dishabitutation (mer tid sniffa en ny lukt).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Efter det protokoll som beskrivs, var resultaten registreras med hjälp av tio vuxna (postnatal dag 90-120) C57BL / 6J möss och åtta manliga FVB blandad bakgrund stam (postnatal dag 50-70). Testning utfördes av en enda utredare över flera dagar. Varje punkt på graferna representerar den genomsnittliga tid att undersöka en lukt.
När bomullstuss doppad i vatten först infördes, mössen tillbringar en hel del tid att undersöka detta nya objekt (Figur 1: första tre datapunkter). Med varje efterföljande presentation, är mindre tid att undersöka pinnen, indikerar tillvänjning. När en ny lukt införes, finns det en uppgång i tid undersöka svabben, vilket indikerar att mössen kan skilja mellan den nya lukt och den föregående (figur 1: Mandel datapunkter). Återigen, med varje efterföljande presentation, är mindre tid att undersöka lukten. Mössen visar en betydande decrease i tiden sniffar pinnen vatten över tre försök F (2,18) = 3,8, p <0,05. De visar ett liknande mönster när upprepade gånger presenteras med mandel lukt F (2,18) = 3,6, p <0,05. Genom den tredje lukt de fortfarande visar tillvänjning men vid denna rättegång djuren når en golveffekt (Figur 1: Banana datapunkter). Golvet effekt är när beteendet är så låg att möjligheten att mäta beteendet något lägre är inte tillförlitlig. De visar inte en förändring under de tre prövningar när presenteras med banan lukt F (2,18) = 2,5, p <0,1. Men en tvåvägs ANOVA för alla 9 presentationer av lukt visar en signifikant effekt över tiden F (8,72) = 3,8, p <0,001.
Samma mönster av tillvänjning och diskriminering kan ses med sociala lukter som med icke-sociala lukter. Men mössen tillbringar mer tid att undersöka de sociala lukter (Figur 2). Det finns en betydande minskning av tid sniffa than sociala lukter när alla 6 försöken kombinerades F (2,18) = 6,1, p <0,01. Det fanns dock en marginell effekt under första tre försök F (2,18) = 3,0, p = 0,076. Detta tyder på att det fanns vissa tillvänjning, men inte en statistiskt signifikant Minskningen tid sniffar det första sociala lukt. Det fanns en signifikant minskning av den tid djuret undersökt den sociala lukten F (2,18) = 6,1, p <0,01 under andra presentationen av en social lukt.
Vi upprepade metoden i en manlig FVB blandad bakgrund stam. När bomullstuss doppad i vatten först infördes, mössen tillbringar en hel del tid att undersöka detta nya objekt (Figur 3: första tre datapunkter). Med varje efterföljande presentation, är mindre tid att undersöka pinnen, indikerar tillvänjning. När en ny doft införs, finns det en uppgång i tid undersöka pinnen, vilket tyder på att mössen kan skilja mellan den nya lukt ennd den föregående (Figur 3: Mandeldatapunkter). Återigen, med varje efterföljande presentation, är mindre tid att undersöka lukten. Mössen visar en signifikant minskning av tiden sniffar svabben av vatten över tre försök F (2,14) = 13,3, p <0,001. De visar ett liknande mönster när upprepade gånger presenteras med mandel lukt F (2, 14) = 12,7, p <0,001. I denna stam fanns det fortfarande en betydande skillnad mellan de tre studierna. Genom den tredje lukt de fortfarande visar tillvänjning (Figur 3: Banana datapunkter) men på grund av golvet effekt de inte visar en förändring under de tre prövningar när presenteras med banan lukt F (2,14) = 3,04, p = 0,08. Men en tvåvägs ANOVA för alla 9 presentationer av lukt visar en signifikant effekt över tiden F (8,56) = 9,6, p <0,001.
Samma mönster av tillvänjning och diskriminering sågs inte med sociala lukter som med icke-sociala lukter. Det var inte en signifikantminskning i tid sniffa de sociala lukter när alla 6 försöken kombinerades F (5,35) = 0,16, p = 0,97. Uppgifterna tyder på att mössen inte vänja till upprepade presentationer av två sociala lukter.
Figur 1: Genomsnittlig tid att undersöka icke-sociala lukter för manliga C57BL / 6J möss Varje datapunkt representerar tiden djuret tillbringade undersöker särskilt icke-social lukt.. Felstaplarna representerar standardfelet för medelvärdet. Asterisker (*) indikerar en signifikant skillnad där gruppen visar tillvänjning (p <0,05).
Figur 2:. Genomsnittlig tid att undersöka sociala lukter för manliga C57BL / 6J möss Varje datapunkt representerar tiden djur spent undersöker viss social lukt. Felstaplarna representerar standardfelet för medelvärdet. Asterisker (*) indikerar en signifikant skillnad där gruppen visar tillvänjning (p <0,05).
Figur 3: Genomsnittlig tid att undersöka icke-sociala lukter för manliga FVB blandad bakgrund stam Varje datapunkt representerar tiden djuret tillbringade undersöker särskilt icke-social lukt.. Felstaplarna representerar standardfelet för medelvärdet. Asterisker (*) indikerar en signifikant skillnad där gruppen visar tillvänjning (p <0,05).
Figur 4: Genomsnittlig tid att undersöka sociala lukter för manliga FVB blandad bakgrund stammen varje datapunkt repre.ts tiden djuret tillbringade undersöka viss social lukt. Felstaplarna representerar standardfelet för medelvärdet.
| Lukt |
| Vatten |
| Vatten |
| Vatten |
| Mandel |
| Mandel |
| Mandel |
| Banan |
| Banan |
| Obekant sociala lukt 1 |
| Obekant sociala lukt 1 |
| Obekant sociala lukt 1 |
| Obekant sociala lukt 2 |
| Obekant sociala lukt 2 |
| Obekant sociala lukt 2 |
Tabell 1
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
De resultat som i detta dokument är optimala för möss. Mössen visa en stark reaktion på en ny lukt, sedan snabbt vänja. En av de viktigaste stegen i denna metod är framställningen av lukter. Utredaren måste ta stor omsorg för att isolera de lukter från varandra för att förhindra kontaminering. En annan viktig aspekt är presentationen av bomullspinne. Utredaren behöver felsöka den bästa platsen för bomullsspetsen så att musen kan undersöka tips men inte riva i spetsen. En viktig komponent i testet är valet av lukter. Vi presenterade tre icke-sociala lukter men det skulle inte vara svårt att inkludera ytterligare lukter. En varning är att välja lukter som är märkbart annorlunda från varandra. Man kan observera en "golveffekt" om liknande lukter presenteras sekventiellt. Dessutom kan mössen börja minska deras svar när de presenteras med för många nya lukter. Om utredaren vill inkludera enTTERLIGARE lukter då han / hon kanske vill inkludera ytterligare dagar av tester. Det tar ungefär en timme för att testa varje mus. Dessutom bör man felsöka urval av lukter i kontrollmöss innan de inkluderas som en experimentell skick.
Lukt tillvänjning / dishabituation är ett viktigt test för att inkludera vid utredning socialt beteende. De tre kammare socialt beteende testet används ofta för att undersöka sociala beteende underskott i möss. Detta test innefattar ett tillstånd där försöksdjur undersöker ett nytt objekt och en ny mus som placeras under en kopp på olika ändar av kammaren. Testet kan också innehålla ett tillstånd där en ny mus placeras under en kopp och en annan mus (bekant mus) placeras under andra koppen. Utredaren undersöker sedan huruvida den experimentella mus kan skilja mellan de två. Eftersom luktsinne är de viktigaste sensoriska modalitet möss använder för att identifiera andra möss 9-11, Kan nedsatt luktsinne försämra deras förmåga på denna uppgift. Nedsatt luktsinne kan feltolka data. Till exempel, kan försöksledaren konstatera att musen inte spendera mer tid med den nya musen jämfört med det välbekanta musen. Detta kan tyckas visa tecken på sociala underskott eller försämrad social minne i möss som testas. Dock kan en enklare tolkning vara att djuret inte riktigt kan identifiera djuret.
Lukt tillvänjning / dishabituation testet har varit till nytta för att klargöra musmodeller av autism. En ofta musmodell av autism är BTBR T + tf / J (BTBR) musstam. Detta är en inavlad stam som har en stark ansikte giltighet till de tre kärnbeteendemässiga egenskaper av autism. Emellertid har en oro varit om deras sociala beteende underskott beror på en försämrad luktsystemet. Yang och kollegor undersökt om BTBR stammen har nedsatt luktsinne genom användningen av Habituation / dishabituation testet 12. De använde tre presentationer av vatten, mandel lukt, och bananer lukt för sina nonsocial lukter. De använde sedan en social lukt framställd från 129 / SvlmJ och B6 musstammar. Den BTBR stammen visas tillvänjning och dishabituation till de nonsocial lukter. Mössen visade boning till det första sociala lukten, men visade inte dishabituation till andra sociala lukt. En möjlighet är att de inte kan ha möjlighet att skilja mellan olika sociala lukter. Det kan försämra deras förmåga i ett beteende-test social när två sociala stimuli presenteras. Detta är en viktig faktor när utforska olika musmodeller av autism och kan ge nya insikter i vad som ändrats i dessa möss.
Tillvänjning och dishabituation är grundläggande icke-associativa mekanismer för inlärning. Dessa lärande principer har visats i många typer av komplexa och enkla organismer 13,14. Dessa mekanismerlärande har undersökts sällan i mus lukt beteende men detta system är viktigt att mäta som en del av ett större batteri av beteendetester. Detta test är billig att installera och köra, kräver endast en testdag, och flera möss kan testas inom en dag. Huvudsyftet med detta test är att undersöka lukt funktion. Resultaten från testet kan bidra till att minska misstolkning av tester socialt beteende och andra tester som inkluderar en luktkomponenten.
När man granskar mus beteende i alla uppgifter finns det flera faktorer. Stammen av mus, kön djuren, och tid på dagen är alla faktorer som måste undersökas. Om utredaren använder en blandad stam så kan det finnas mer variation i utredningen beteende lukter. Vi presenterade data från en blandad FVB stam. De utvecklades väl i de icke-sociala lukttest (Figur 3). Även om de undersökte den sociala lukten för en stor mängd of tid, gjorde de inte visa tillvänjning upprepade presentationer av sociala lukter (Figur 4). Mössen kan behöva genomgå fler försök för att påvisa tillvänjning. Vi har försett en generell metod som bör vara användbara för de flesta stammar. Dock bör faktorerna ovan skall beaktas vid prövningen av beteendet hos någon stam för första gången. Genom att undersöka prestanda för kontrolldjuren utredaren kan behöva justera lukter utvalda, antalet gånger lukten presenteras, ljusförhållandena, tid på dagen för att testa, och könet hos djuret. Detta gäller för alla andra mus beteende och bör beaktas i denna typ av testning. Vi har inkluderat lukter som är lätt tillgängliga för köp. Om utredaren är oroliga för att de inte använder rena lukter då de kan överväga att beställa från Sigma-Aldrich. De har en databas med över 1.600 arom råvaror. Detta gör det möjligt för utredaren att använda en ren lukt men kostnaden kan varaoöverkomliga för vissa laboratorier.
Det finns några testförhållanden försöks kanske vill överväga. I många tester djuret acklimatiserad till rummet kommer att testas i. I detta protokoll acklimatiserad vi försöksdjur i ett rum och testade den i den andra. Detta kommer att orsaka viss upphetsning när de flyttas till det nya rummet. Vi framförde proceduren detta sätt eftersom om alla möss inrymt i samma rum som testmöss då alla möss kommer att utsättas för de nya lukter. Det finns två alternativ som försöksledaren kanske vill överväga. Den första är vad vi beskrivit ovan. Den andra är att flytta djuret till rummet för att låta den anpassa sig till rummet sedan börja testa. Efter att ha testat är klar så har nästa djuret placeras i rummet då får acklimatisera sig. Detta är möjligt, men skulle nästan fördubbla tiden för experimentet. Alternativet vi använde var att flytta test djuret till testrummet endast under experimentet. Detta skulle resultera i literess testtiden. Det finns en balans i att testa effektivitet och oro nyhet inducerad upphetsning. Försöksledaren ska avgöra vilken som är bäst för deras experiment.
Vari detta protokoll, en person får beteendet i realtid, har det blivit alltmer populärt att studera djurens beteende med kameror för att spela in sitt beteende. Det finns flera fördelar med att använda videoinspelningar av djurens beteende. Den ena är att en människa utredare i rummet kan påverka musen beteende. I själva verket fann en studie att ha en manlig försöks kan påverka smärtkänslighet hos möss som testas 15. Ett annat bekymmer är att resultaten är endast från en utredare. Genom att använda videoinspelningar flera observatörer kan göra mål beteende. Man kan sedan mäta hur tillförlitlig poäng är mellan observatörer, vilket kommer att resultera i en mer konsekventa mätningar. En annan fördel är att ramen hastighet filmerna kan minskas och kan provide en mer noggrann mätning av beteendet. Användningen av kameror kan lätt införas i denna metod. Installationen kommer att bero på lab utrymme konfiguration. Nackdelen med att använda kameror är att poängtiden avsevärt kommer att öka. Kräver två eller flera bedömare att göra mål beteendet kommer att öka den tid som krävs för att producera resultat. Detta kommer att öka arbetsbördan till labbet och i vissa situationer kan vara oöverkomliga om screening många knockout linjer. En annan nackdel är att mer än en kamera kan behövas. Kameran kommer att vara i ett fast läge. Om musen undersöker lukt på ett sätt som är förbjudet för observatören att se djuret då försöket kan behöva elimineras. Detta är mindre av ett problem med en person som lätt kan justera sin syn på djuret genom att justera deras siktlinje. Däremot kan den metod som beskrivs i detta protokoll enkelt anpassas för att inkludera videoinspelningar utan väsentlig förändring av protokollet vi fallanderibe.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Mouse cage | Allentown | Standard mouse cage | |
| Wire lid | Allentown | BCU Mouse WBL 2500 | |
| Bedding | Harlan | 7090 Sani-Chips | |
| Cotton swabs | VWR | 89031-270 | 6” wooden handle |
| Banana extract | McCormick | ||
| Almond extract | McCormick | ||
| Laboratory tape | VWR | 89098-062 | |
| Stop watch | VWR | 62374-000 | |
| Nitrile gloves | VWR | 82026 | |
| Timing device | VWR | 61161-350 | |
| 15 ml conical tubes | VWR | 89003-294 | |
| 2 L beakers | Pyrex | 1003 | |
| Parafilm | Parafilm | PM-992 | 4” x 250’ |
| 1 L bottle with cap | VWR | 89000-240 |
References
- Doty, R. L. Odor-guided behavior in mammals. Experientia. 42, 257-271 (1986).
- Restrepo, D., Arellano, J., Oliva, A. M., Schaefer, M. L., Lin, W. Emerging views on the distinct but related roles of the main and accessory olfactory systems in responsiveness to chemosensory signals in mice. Horm Behav. 46, 247-256 (2004).
- Keverne, E. B. Importance of olfactory and vomeronasal systems for male sexual function. Physiol Behav. 83, 177-187 (2004).
- Gregg, B., Thiessen, D. D. A simple method of olfactory discrimination of urines for the Mongolian gerbil, Meriones unguiculatus. Physiol Behav. 26, 1133-1136 (1981).
- Yang, M., Crawley, J. N. Simple behavioral assessment of mouse olfaction. Curr Protoc Neurosci. Chapter 8 (Unit 8 24), (2009).
- Pan, Y. W., Kuo, C. T., Storm, D. R., Xia, Z. Inducible and targeted deletion of the ERK5 MAP kinase in adult neurogenic regions impairs adult neurogenesis in the olfactory bulb and several forms of olfactory behavior. PLoS ONE. 7, e49622 (2012).
- Wesson, D. W., Levy, E., Nixon, R. A., Wilson, D. A. Olfactory dysfunction correlates with amyloid-beta burden in an Alzheimer's disease mouse model. J Neurosci. 30, 505-514 (2010).
- Fadool, D. A., et al. Kv1.3 channel gene-targeted deletion produces 'Super-Smeller Mice' with altered glomeruli, interacting scaffolding proteins, and biophysics. Neuron. 41, 389-404 (2004).
- Arakawa, H., Arakawa, K., Blanchard, D. C., Blanchard, R. J. Scent marking behavior in male C57BL/6J mice: sexual and developmental determination. Behav Brain Res. 182, 73-79 (2007).
- Baum, M. J. Sexual differentiation of pheromone processing: links to male-typical mating behavior and partner preference. Horm Behav. 55, 579-588 (2009).
- Ferguson, J. N., et al. Social amnesia in mice lacking the oxytocin gene. Nat Genet. 25, 284-288 (2000).
- Yang, M., et al. Low sociability in BTBR T+tf/J mice is independent of partner strain. Physiol Behav. 107, 649-662 (2012).
- Best, J. D., et al. Non-associative learning in larval zebrafish. Neuropsychopharmacology. 33, 1206-1215 (2008).
- Wolman, M. A., Jain, R. A., Liss, L., Granato, M. Chemical modulation of memory formation in larval zebrafish. Proc Natl Acad Sci U S A. , (2011).
- Sorge, R. E., et al. Olfactory exposure to males, including men, causes stress and related analgesia in rodents. Nat Methods. 11, 629-632 (2014).
