Introduction
Fareler diğer bireylerin tanımak için, yiyecek bulma, yeni ortamlar seyrüsefer olfaction bağlıdır ve cinsel davranış 1-3. Bu araştırmacılar deney hayvanları yiyecek, sosyal etkileşim, ya da fare bir yanıt ortaya çıkarmak amacıyla herhangi bir koku içeren davranışsal testler uygulamadan önce koku işleyen duygusuna sahip olsun ya da olmasın kurmak esastır. Anozmi veya yetersizlik davranışsal paradigmaların çok çeşitli yanlış pozitif veya negatiflerin yol açabilir, farklı kokulara ayırt etmek, yani davranış testleri diğer türleri yapılmadan önce tespit ve kokuları ayırt etmek için bir farenin kabiliyeti kurulmalıdır.
koku alışkanlık / dishabituation testi ilk olarak 1980'li yıllarda 4 tarif edilmiştir. Test Dr farelerde kullanılmak üzere adapte edilmiştir. Mu Yang ve Jacqueline Crawley 5. Bu araştırmacı esta sağlayan basit ve ucuz bir testtirFare algılamak ve kokuları ayırt edebilir Blish. Koku alma test ek olarak, bu test araştırmacı fare genel davranışını gözlemlemek ve erken test rejiminde yapılmalıdır sağlar. Nitel farenin lokomosyon ilişkin gözlemleri, anksiyete belirtileri, aktivite düzeyi ve gıda kokuları karşı toplumsal kokulara tepki testi yapılabilir hangi yeni alanlara işaret ediyor olabilir.
Bu testte, çeşitli kokular daldırılır pamuklu bir satırda bir fare üç kez sunulmaktadır. Bir koku her tekrarlanan sunumu ile fare sonraki her bir sunum ile araştıran az zaman harcayarak, pamuklu çubukla alışmakta olacaktır. Yeni bir koku sunulduğunda, dishabituation oluşur ve tipik bir fare mevcut ve önceki kokuları 5 arasında ayrım olduğunu belirten çubukla araştıran daha fazla zaman geçireceksiniz. Bu test, her seferinde bir fareye uygulanan ve 45 dakika acc içerirlimation süresi test 45 dakika izledi.
Bu testi taşıması kolay olmasına rağmen, fare koku sistemi hakkında sofistike soruları araştırmak için kullanılabilir. Gömülü Gıda testi gibi koku alma diğer popüler testler, sadece anozmi varlığını veya yokluğunu tespit. Ancak, koku ayrımcılık ve alışkanlık testi araştırmacı fare kokuları algılamak için ancak farklı kokular ayırt edebilir yeteneğine sahip değil sadece belirlemenize olanak sağlar. alışkanlık ve dishabituation desen yeni mutantlar kokuları 6,7 arasında ayrım olduğunu belirlemek için kullanılır olmuştur. Şaşırtıcı bir çalışmada, Fadool ve arkadaşları normal farelere 8 daha çok benzer kokuları ayırt edebilir "süper smellers" Kv1.3 kanalının gen hedefli silme ile bu fareler vardır göstermek için kokuların kompleks karışımlarını kullanılır.
Yeni bir nakavt fare modelini incelerken o establis yararlıdırh temel duyu görevler için normal davranış varlığı. Bir test rejiminde erken Bittiğinde, koku ayrımcılık ve alışkanlık testi bir araştırmacı herhangi bir olağandışı davranışları gözlemlemek için fırsat verir. Bu gözlemler mutant özelliklerini karıştırıcı atfedilebilecek sonraki test yanlış pozitif veya negatif sonuçları önleyebilir. Araştırmacılar sosyal davranışı, temel koku işlevini doğrulamak için gereğini araştırmak devam ederken giderek daha önemli hale gelir. Mutant hatlarında koku alma duyusunu inceleyen yanı sıra, bu test gibi tüm koku uyaranlara karşı bir farmakolojik tedavi özellikle sosyal koku uyaranlara bir hayvanın tepkisi artar olmadığı gibi ya da tepki artarsa belirli soruları için kullanılabilir.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Aşağıdaki deneyde kullanılan yetişkin erkek fareler, yeniden oluşturulmuştur ve koyu bir 14 saat ışık ve 10 saat (20:00-6:00 saat) gündüz döngüsü, 22 ° C'lik bir çevre sıcaklığında Baylor Üniversitesi'nde barındırıldı. farenin yemek ve su ad libitum verildi. Farelere tüm işlemler Baylor Üniversitesi Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi tarafından onaylandı Laboratuvar Hayvanları Bakım ve Kullanımı ve hayvansal protokolü için Sağlık Rehberi National Institutes uygun idi. Fareler geç sabah / öğleden sonra test edilmiştir. Araştırmacı altındaki tüm prosedürler için kokuları ortadan kaldırmak ve kirlenmeyi önlemek için eldiven giymeli.
Sigara sosyal Kokular 1. Hazırlanması
- Taze olmayan sosyal edici kokuları test her gün hazırlayın.
Not: Araştırmacı kokuları hazırlamak için eldiven kullanmalıdır.- Su, her biri 10 ml 3 santrifüj tüplerini doldurun.
- 15 ml & # içine muz ekstresinin Pipet 100 ul160; konik tüp ve 1 için bir ikinci 15 ml konik bir tüp içine badem özü 100 ul: 100 seyreltide kullanıldı.
Not: Üçüncü 15 ml tüp sadece su ihtiva edecektir.
Sosyal kokuların 2. Hazırlık
- Meydana gelecektir sabah testi taze sosyal kokuları hazırlayın. En az üç gün süreyle temizlenmiş ve farelerin eşit sayı içeren henüz iki kafesleri sosyal kokuları edinin. Denek olarak aynı cinsten farelerin sosyal kokuları edinin.
Not: Bu, oda sıcaklığında saklanabilir ve güçlü ve sürekli bir koku sağlamak için 4-6 saat içinde kullanılmalıdır.- Pamuklu çubuk ihtiyacımız sosyal koku oluşturulacak kaç belirleyin: test edilen her bir fare sosyal koku 2 sosyal koku 1 ve üç üç bezlerden ile sunulacak.
- Kirli bir kafes alt kısmında bir zikzak biçimde bir pamuklu çubukla silerek sosyal kokuları hazırlayın. Ucuna tutunarak herhangi bir aşırı yatak silkeleyin.
- Kapaklı veya parafilm kaplı bardak büyük cam kavanozlarda saklayın bezlerden. Tek sosyal koku 1 konteyner ve sosyal koku 2 için ikinci belirleyin.
- Deneysel test odası dışında koku kaynağı kafesleri koruyun.
Deney Mouse 3. Acclimation
- Eldiven giyin ve test edilecek fare tartmak ve üstüne bir tel kapak ve kaldırıldı su şişesi ile temiz bir kafese ayrı ayrı yerleştirin.
- Fare test odasına başka bir odada 45 dakika yeni kafes gelmesini bekleyin. Odaya hiçbir olağandışı koku veya gürültü olmadığından emin olun.
- Test yaklaşık 45 dakika sürer gibi, mevcut fare test etmeden önce hakkını gelmesini temiz bir kafes içine test edilecek bir sonraki fare koyarak aklimasyonundan kez sendeleyip.
Test Odası 4. hazırlanması
- Taze pamuk bezlerden, laboratuvar bant, sosyal koku bezlerden içeren şişeleri, n tüpleri yerleştirinon-sosyal kokuları, bir mikropipet, iki zamanlayıcı ve test odasında kapaklı bir çöp şişe.
- Test odası kokuları, yüksek sesler ve parlak ışık oldukça serbest olduğundan emin olun. Kokulu kolonya ya da losyon giymeyin.
Not: Gözlemci test süresince sakız veya şeker çiğneme olmamalı ve güçlü bir koku gıdalara maruz kaldıkları sınırlamak için çalışmalısınız.
5. Test Prosedürü
- Test odasına kendi kafesine alıştırıldı fareyi getirin ve otururken görüntülemek için rahat bir yükseklikte tezgahın üzerine kafes yerleştirin.
- 2 dakika her zaman için bir satır, her, koku 3 kez sunun. Tablo 1'de bulunabilir sunum sırasını kullanın.
- Pipet kokusu odorant 50 ul pamuklu çubukla ucuna test ve koku kaynağı-keper yeniden edilecek. Pushin, kafesin tel üst kaldırın ve su şişesi ağzına çubukla kokusuz, ahşap ucunug üstüne tel altından aracılığıyla uzunluğu. O koku kirlenmesi önlenmiş olur, böylece parmaklar dahil her şey, pamuk ucuna dokunmaktan kaçının.
- Pamuk sonu yaklaşık 1 inç kafes içine aşağı sarkar kadar su şişesi açıklığından çubukla çizmek devam edin. Laboratuvar bant kullanarak kafesin yanına çubukla ahşap ucunu yapıştırın.
Not: Kapak kafesine geri üzerine düşmesine izin vermemek için dikkatli olun, sınav fare rahatsız edecek bir gürültü neden olur. - Hemen 2 dakika süreyle zamanlama başlar. 2 dk sunum zaman bir zamanlayıcı kullanın. 2 dk deneme sırasında koku koklama harcanan toplam zamanı kaydedin. Ayrı bir kronometre kullanarak hayvanın koklama davranışını güvenin. Hayvanın burnu onun burnu ~ 2 cm veya ipucu yakın pamuk ucuna yönelik olduğunda aktif koklama tanımlanır.
- Her deneme tamamlanmasından sonra, tel kapağı kaldırın ve un aşağı doğru çekerek pamuklu çubukla kaldırmakKapağın derside (bu tel dokunmasını pamuk ucu önleyerek koku kirlenmesini önler). Bir 500 ml atık şişe kullanılan bez kapatın.
- Hazırlayın ve sonraki çubukla takın ve zamanlama başlar. Her arası deneme aralığı arasında yaklaşık 1 dakika bekleyin. Her koku 2 dakika her zaman için, üst üste üç kez sunulmuştur kadar devam edin.
- Fare tüm denemeler tamamlandıktan sonra, can dışarıda test odasında bir çöp kullanılan pamuklu çubuklarla içeren atık şişesini boşaltın. Evde kafes fare dönün.
6. Analiz
- ANOVA Newman-Keuls ardından iki yönlü veya önemli alışkanlık belirlemek için benzer bir post hoc testi (ardışık aynı kokuyor koklama az zaman) ve dishabitutation (daha fazla zaman yeni bir koku koklama) ile koku durumuna başına her bir grup için verileri analiz.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Tarif edilen protokol izlenerek, sonuçları on yetişkin (doğum sonrası gün 90-120) erkek C57BL / 6J fareler sekiz erkek FVB karma arka suşu (doğum sonrası gün 50-70) kullanılarak kaydedildi. Test birden fazla gün boyunca tek bir araştırmacı tarafından yürütülmüştür. Grafikler her nokta bir koku araştıran harcanan ortalama süreyi temsil eder.
Suya batırılmış pamuklu ilk tanıtıldı zaman, fareler bu yeni nesneyi (: İlk üç veri noktaları Şekil 1) araştıran zaman büyük bir harcama. Birbirini izleyen her sunumu ile, daha az zaman alışkanlık belirten çubukla soruşturma harcanmaktadır. Yeni bir koku verildiğinde, zaman içinde bir uptick fareler yeni koku ve bir önceki (: Badem veri noktaları Şekil 1) arasında ayrım olduğunu belirten çubukla soruşturma geçirdi yoktur. Yine, her başarılı sunumu ile, daha az zaman koku soruşturma harcanmaktadır. farenin önemli bir D,Üç deneme F (2,18) üzerinde su çubukla koklama zamanında ecrease 3.8, p <0.05 =. Defalarca badem kokusu F (2,18) = 3.6, p <0.05 sunulduğunda Onlar benzer bir model göstermektedir. Üçüncü koku hala alışkanlık gösteriyorlar ama bu deneme ile hayvanların bir zemin etkisi (Şekil 1: Muz veri noktaları) ulaşıyor. davranış yeteneği herhangi düşük güvenilir değildir davranışı ölçmek için o kadar düşük olduğunda zemin etkisidir. Muz kokusu F (2,18) = 2.5, p <0.1 ile sunulan Onlar üç denemeler üzerinde değişiklik görünmüyor. Ancak, koku 9 sunumlar için iki yönlü ANOVA süresi F (8,72) = 3.8, p <0.001 üzerinde önemli bir etki göstermektedir.
alışkanlık ve ayrımcılık aynı model olmayan sosyal kokular gibi sosyal kokuları ile görülebilir. Ancak, fareler daha fazla zaman sosyal kokuları soruşturma (Şekil 2) harcarlar. T koklama harcanan zaman önemli bir düşüş varO sosyal kokular 6 denemeler F (2,18) = 6.1 kombine edildiğinde, p <0.01. Ancak, ilk üç denemeler F (2,18) = 3.0, p = 0.076 üzerinde marjinal bir etkisi vardı. Bu, bazı alışkanlık değil ilk sosyal koku koklama zaman içinde azalma istatistiksel olarak anlamlı miktarda olduğunu düşündürmektedir. Hayvan sosyal koku ikinci sunumu sırasında sosyal koku F (2,18) = 6.1, p <0.01 araştırıldı süreyi belirgin bir azalma vardı.
Bir erkek FVB karma arka suşu yöntemi tekrarlandı. Suya batırılmış pamuklu ilk tanıtıldı zaman, fareler bu yeni nesneyi (: İlk üç veri noktaları Şekil 3) araştıran zaman büyük bir harcama. Birbirini izleyen her sunumu ile, daha az zaman alışkanlık belirten çubukla soruşturma harcanmaktadır. Yeni bir koku verildiğinde, zaman içinde bir uptick fareler yeni koku a ayırt belirten, çubukla soruşturma geçirdi oradand bir önceki (Şekil 3: Badem veri noktaları). Yine, her başarılı sunumu ile, daha az zaman koku soruşturma harcanmaktadır. fareler üç deneme F (2,14) = 13.3, p <0.001 üzerinde su çubukla koklama süresinde önemli bir azalma göstermektedir. Defalarca badem koku F (2, 14) = 12.7, p <0.001 sunulduğunda Onlar benzer bir model göstermektedir. Bu zorlanma hala üç denemeler karşısında anlamlı bir fark yoktu. Üçüncü koku hala alışkanlık gösteriyorlar (Şekil 3: Muz veri noktaları) ama muz kokusu F (2,14) = 3,04, p sunulduğunda zemin etkisi nedeniyle üç denemeler üzerinde değişiklik görünmüyor = 0.08. Ancak, koku 9 sunumlar için iki yönlü ANOVA süresi F (8,56) = 9.6, p <0.001 üzerinde önemli bir etki göstermektedir.
alışkanlık ve ayrımcılık aynı model olmayan sosyal kokular gibi sosyal kokuları ile görülmedi. Anlamlı değildizaman içinde azalma 6 denemeler F (5,35) = 0.16, p = 0.97 kombine edildiğinde sosyal kokuları koklama geçirdi. veri fareler iki sosyal kokuları tekrarlanan sunumlar alışmakta olmadığını göstermektedir.
Şekil 1: Normal süresi erkek C57BL / 6J fareler olmayan sosyal kokuları soruşturma geçirdiği Her bir veri noktası hayvan, özellikle sosyal olmayan koku araştıran harcanan ortalama süreyi temsil eder.. Hata çubukları, ortalamanın standart hatasını temsil eder. Yıldız (*) Grup alışkanlık görüntüleyen anlamlı bir fark (p <0.05) göstermektedir.
Şekil 2:. Ortalama süre erkek C57BL / 6J fareler için sosyal kokuları soruşturma geçirdiği Her bir veri noktası, ortalama süreyi temsil hayvan Spent Özellikle sosyal koku soruşturma. Hata çubukları, ortalamanın standart hatasını temsil eder. Yıldız (*) Grup alışkanlık görüntüleyen anlamlı bir fark (p <0.05) göstermektedir.
Şekil 3: Ortalama süre erkek FVB karma plan suşu olmayan sosyal kokuları soruşturma geçirdiği Her bir veri noktası hayvan, özellikle sosyal olmayan koku araştıran harcanan ortalama süreyi temsil eder.. Hata çubukları, ortalamanın standart hatasını temsil eder. Yıldız (*) Grup alışkanlık görüntüleyen anlamlı bir fark (p <0.05) göstermektedir.
Şekil 4: Ortalama süre erkek FVB karma plan suşu için sosyal kokuları soruşturma geçirdiği Her veri Represen etmektedir.Bu arada ts hayvan belirli sosyal koku soruşturma geçirdi. Hata çubukları, ortalamanın standart hatasını temsil eder.
| Koku |
| Su |
| Su |
| Su |
| Badem |
| Badem |
| Badem |
| Muz |
| Muz |
| Unfamiliar sosyal koku 1 |
| Unfamiliar sosyal koku 1 |
| Unfamiliar sosyal koku 1 |
| Unfamiliar sosyal koku 2 |
| Unfamiliar sosyal koku 2 |
| Unfamiliar sosyal koku 2 |
Tablo 1
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu makalede yer alan sonuçlar fareler için en uygun olan. farelere yeni bir koku güçlü bir tepki göstermektedir, daha sonra hızlı bir şekilde alıştırarak. Bu yöntemde önemli safhalardan biri kokuların hazırlanmasıdır. Araştırmacı kirlenmesini önlemek için birbirinden kokuları izole etmek büyük özen gerekiyor. Başka bir önemli yönü pamuklu çubukla sunumudur. Fare ucu araştırabilir ama ucunda gözyaşı değil bu yüzden araştırmacı pamuk ucu en iyi yer giderilir gerekiyor. Testin önemli bir bileşeni, koku seçimidir. Biz üç sosyal olmayan kokuları sunulan ancak ek kokuları dahil etmek zor olmayacaktır. Bir ihtar birbirinden belirgin farklı kokuları seçmektir. Benzer kokular sırayla sunulmaktadır eğer biri "zemin etkisi" gözlemleyebiliriz. Ayrıca, fareler çok yeni kokuları ile sunulduğunda onların tepkisini azaltmaya başlayabilir. Araştırmacı bir dahil etmek istiyorsasize ilave kokular o / o test ek günleri dahil etmek isteyebilirsiniz. Her fare test etmek için yaklaşık bir saat sürer. Ayrıca, bir deneysel koşul olarak koymadan önce kontrol farelerinde kokuların seçimini giderilir gerekir.
koku alışkanlık / dishabituation sosyal davranışları soruşturma sırasında dahil etmek önemli bir testtir. Üç odacıklı sosyal davranış testi yaygın farelerde sosyal davranış açıkları incelemek için kullanılır. Bu test, deneysel hayvan yeni bir nesne ve bölmenin farklı uçlarında bir fincan altına yerleştirilir yeni bir fare araştıran bir koşul bulunmaktadır. Bu test ayrıca yeni bir fare, bir kabı ve diğer fincan altında yerleştirilen bir fare (tanıdık fare) altına yerleştirilen bir durum içerebilir. Araştırmacı daha sonra deneysel fare ikisi arasında ayrım olup olmadığını inceler. Olfaction olduğu ana duyusal modalite fareler, diğer farelerin 9-11 tanımlamak için kullanın, Engelli olfaction bu görevi yeteneklerini bozabilir. Bozulmuş olfaction verilerinin yanlış yorumlanmasına neden olabilir. Örneğin, deneyci fare tanıdık fare ile karşılaştırıldığında yeni fare ile daha fazla zaman harcamak olmadığını gözlemek. Bu toplumsal açıklarının ya da farelerde bozulmuş toplumsal belleğin kanıt denenmektedir göstermek için görünebilir. Ancak, basit bir yorumlama hayvan düzgün hayvan algılayamaz olabilir.
koku alışkanlık / dishabituation testi otizm fare modelleri aydınlatılmasında yararlı olmuştur. Otizmin biri sık kullanılan fare modeli BTBR T + tf / J (BTBR) fare türdür. Bu Otizmin üç temel davranış özellikleri güçlü yüz geçerliliği olan bir kendilenmiş türdür. Ancak, tek bir endişe sosyal davranış açıkları bozulmuş koku sistemi nedeniyle olup olmadığını olmuştur. Yang ve arkadaşları BTBR suşu Habitu kullanımı yoluyla koku alma duyusunu engelli olup olmadığını araştırdıktirme / dishabituation testi 12. Onlar nonsocial kokuları su, badem koku ve muz kokusu üç sunum kullanılır. Daha sonra 129 / SvlmJ B6 fare suşlarının hazırlanabilir sosyal koku kullanılır. BTBR suşu nonsocial kokulara karşı alışma ve dishabituation sergiledi. fareler ilk sosyal koku yerleşime gösterdi ama ikinci sosyal koku dishabituation yoktu. Bir ihtimal de farklı sosyal kokulara ayırt etmek mümkün olmayabilir olmasıdır. Iki sosyal uyaranlar sunulmaktadır Bu bir toplumsal davranış testinde yeteneklerini bozabilir. Otizmin farklı fare modellerini keşfetmek ve bu farelerde değişmiş ne yeni bakış açıları sağlayabilir, bu önemli bir husustur.
Alışma ve dishabituation öğrenmenin temel ilişkisel olmayan mekanizmalar vardır. Bu öğrenme ilkeleri, karmaşık ve basit organizmaların 13,14 sayısız türde gösterilmiştir. Bununla birlikte, bu mekanizmaÖğrenmenin fare koku alma davranışlarında sık incelenen ancak bu sistem davranış testleri daha büyük bir pil parçası olarak ölçülmesi önemlidir oylandı. Bu test, kurulumu ve çalıştırmak için ucuz olan test sadece bir gün gerektirir ve pek çok fare, bir gün içerisinde test edilebilir. Bu testin temel amacı koku işlevini incelemektir. Test sonuçları bir koku bileşeni içerir sosyal davranış testleri ve diğer testler yanlış yorumlanmasına azaltmaya yardımcı olabilir.
Herhangi bir görev fare davranışını incelerken bazı noktalar vardır. fare suşu, hayvanların seks ve günün saati incelenmesi gereken faktörlerdir. Araştırmacı karışık suşu kullanılarak ise, koku araştırılması davranışı daha fazla değişkenlik olabilir. Biz karışık FVB gerginlik veri sundu. Bunlar sosyal olmayan koku testlerinde de (Şekil 3) seslendirdi. Onlar yüksek miktarda o sosyal koku araştırdık rağmenf süresi, sosyal kokular (Şekil 4) tekrarlanan sunumlara alışma olmadığı görülmüştür. fareler alışkanlık göstermek için daha fazla deneme geçmesi gerekebilir. Çoğu suşlar için yararlı olacaktır genel bir yöntem sağlamıştır. Ilk defa bir suşun davranışı incelerken Bununla birlikte, yukarıda faktör dikkate alınmalıdır. Kontrol hayvanlarının performansını inceleyerek araştırmacı seçilen kokuları ayarlamanız gerekebilir, koku sunulmuştur sayısı, aydınlatma koşulları, test için günün saati ve hayvan seks. Bu, herhangi bir diğer fare davranışı için de geçerlidir, test bu tür dikkate alınmalıdır. Biz kolayca satın alınabilecek kokuları dahil ettik. Araştırmacı onlar saf kokuları kullanarak değil endişe edilirse o zaman Sigma-Aldrich sipariş düşünebilirsiniz. Bunlar 1600 aroma hammadde bir veritabanı var. Bu araştırmacı saf koku kullanmanızı sağlayacak ancak maliyet olabilirBazı laboratuvarlar için fahiş.
Deneyci dikkate almak isteyebilirsiniz bazı test şartları vardır. Birçok testlerde hayvanın test edilecektir odaya alıştırıldı edilir. Bu protokolde bir odada deneysel hayvan alıştırıldı ve diğer test. Yeni bir odaya taşındı Bu biraz uyarılma neden olur. Farelerin tüm test farelerde aynı odada muhafaza edilir, sonra tüm fareler roman kokulara maruz kalacağı çünkü prosedürü bu şekilde gerçekleştirdi. Deneyci göz önünde bulundurmak isteyebilirsiniz iki seçenek vardır. İlk Yukarıda anlatılan budur. Diğer daha sonra odasına gelmesini test başlayalım odasına hayvan hareket etmektir. Test tamamlandıktan sonra daha sonra alışmaya izin odaya yerleştirilen bir sonraki hayvan var. Bu mümkün ama neredeyse deney süresini iki katına olacaktır. Kullandığımız seçeneği yalnızca deneme sırasında test odasına test hayvan taşımak oldu. Bu l neden oluress test süresi. Yenilik kaynaklı uyarılma konusunda test verimliliği ve endişe içinde bir denge vardır. deneyci onların deney için iyi olduğunu belirlemek gerekir.
Bu protokol, bir kişinin puanları davranış gerçek zamanlı, onların davranışlarını kaydetmek için kamera ile hayvan davranışlarını incelemek için giderek daha popüler hale gelmiştir burada. Hayvan davranışları video kayıtlarına kullanımına çeşitli avantajları vardır. Bir odada insan araştırmacı fare davranışını etkileyebilir olmasıdır. Nitekim, bir çalışma erkek deneyci olan farelerin ağrı duyarlılığı 15 denenmektedir etkileyebilir bulundu. Başka bir endişe sonuçları tek araştırmacı yalnızca olmasıdır. Videonun kullanımı kayıtlar arasında birden fazla gözlemci davranış puanı. Bir sonra puanlama daha tutarlı ölçümlere neden olacaktır gözlemciler arasında ne kadar güvenilir ölçebilirsiniz. Bir başka avantajı videoları kare hızı azalır ve mayıs yanlısı olmasıdırdavranışının daha doğru bir ölçüm vide. kamera kullanımı kolayca bu yönteme dahil edilebilir. Kurulum laboratuvar alanı yapılandırmasına bağlıdır. kameralar kullanarak dezavantajı puanlama süresi önemli ölçüde artacak olmasıdır. Davranış puanı iki veya daha fazla gözlemci Gerektiren sonuçlar üretmesi gereken zamanı artacaktır. Bu laboratuara işgücü yükünü artıracak ve birçok nakavt hatları tarama eğer bazı durumlarda engelleyici olabilir. Bir başka dezavantaj, birden fazla kamera gerekli olmasıdır. Kamera sabit bir konumda olacaktır. Fare hayvan görmek için gözlemci yasaklayan bir şekilde koku inceler sonra deneme ortadan kaldırılması gerekebilir. Bu kolayca görüş onların hattı ayarlayarak hayvanın kendi görünümünü ayarlayabilirsiniz bir birey ile bir endişe azdır. Ancak, bu protokol açıklanan yöntem kolayca biz Detaylar protokole önemli değişiklik olmadan video kayıtları içerecek şekilde ayarlanabilirribe.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Mouse cage | Allentown | Standard mouse cage | |
| Wire lid | Allentown | BCU Mouse WBL 2500 | |
| Bedding | Harlan | 7090 Sani-Chips | |
| Cotton swabs | VWR | 89031-270 | 6” wooden handle |
| Banana extract | McCormick | ||
| Almond extract | McCormick | ||
| Laboratory tape | VWR | 89098-062 | |
| Stop watch | VWR | 62374-000 | |
| Nitrile gloves | VWR | 82026 | |
| Timing device | VWR | 61161-350 | |
| 15 ml conical tubes | VWR | 89003-294 | |
| 2 L beakers | Pyrex | 1003 | |
| Parafilm | Parafilm | PM-992 | 4” x 250’ |
| 1 L bottle with cap | VWR | 89000-240 |
References
- Doty, R. L. Odor-guided behavior in mammals. Experientia. 42, 257-271 (1986).
- Restrepo, D., Arellano, J., Oliva, A. M., Schaefer, M. L., Lin, W. Emerging views on the distinct but related roles of the main and accessory olfactory systems in responsiveness to chemosensory signals in mice. Horm Behav. 46, 247-256 (2004).
- Keverne, E. B. Importance of olfactory and vomeronasal systems for male sexual function. Physiol Behav. 83, 177-187 (2004).
- Gregg, B., Thiessen, D. D. A simple method of olfactory discrimination of urines for the Mongolian gerbil, Meriones unguiculatus. Physiol Behav. 26, 1133-1136 (1981).
- Yang, M., Crawley, J. N. Simple behavioral assessment of mouse olfaction. Curr Protoc Neurosci. Chapter 8 (Unit 8 24), (2009).
- Pan, Y. W., Kuo, C. T., Storm, D. R., Xia, Z. Inducible and targeted deletion of the ERK5 MAP kinase in adult neurogenic regions impairs adult neurogenesis in the olfactory bulb and several forms of olfactory behavior. PLoS ONE. 7, e49622 (2012).
- Wesson, D. W., Levy, E., Nixon, R. A., Wilson, D. A. Olfactory dysfunction correlates with amyloid-beta burden in an Alzheimer's disease mouse model. J Neurosci. 30, 505-514 (2010).
- Fadool, D. A., et al. Kv1.3 channel gene-targeted deletion produces 'Super-Smeller Mice' with altered glomeruli, interacting scaffolding proteins, and biophysics. Neuron. 41, 389-404 (2004).
- Arakawa, H., Arakawa, K., Blanchard, D. C., Blanchard, R. J. Scent marking behavior in male C57BL/6J mice: sexual and developmental determination. Behav Brain Res. 182, 73-79 (2007).
- Baum, M. J. Sexual differentiation of pheromone processing: links to male-typical mating behavior and partner preference. Horm Behav. 55, 579-588 (2009).
- Ferguson, J. N., et al. Social amnesia in mice lacking the oxytocin gene. Nat Genet. 25, 284-288 (2000).
- Yang, M., et al. Low sociability in BTBR T+tf/J mice is independent of partner strain. Physiol Behav. 107, 649-662 (2012).
- Best, J. D., et al. Non-associative learning in larval zebrafish. Neuropsychopharmacology. 33, 1206-1215 (2008).
- Wolman, M. A., Jain, R. A., Liss, L., Granato, M. Chemical modulation of memory formation in larval zebrafish. Proc Natl Acad Sci U S A. , (2011).
- Sorge, R. E., et al. Olfactory exposure to males, including men, causes stress and related analgesia in rodents. Nat Methods. 11, 629-632 (2014).
