Summary
쥐가 크기 때문에, 가용성, 오히려 유순 한 행동에, 몇 년 동안 연구 모델로 이용되고있다. 이 프로토콜의 목적은 만성 상처의 병태 생리에 대한 통찰력을 제공하는 허혈성 상처 치유 피부 모델로서 쥐를 이용하는 것이다.
Abstract
인간의 만성 상처에 대한 성향 등으로 인해 부동에 당뇨병과 장애인 심혈관 기능 및 누그러 압력 노화, 질병 상태에 따라 증가한다. 동물 모델은 만성 상처의 복잡성의 이해를 발전하기위한 목적으로 이러한 조건을 모방하는 것을 시도 개발되었다. 본 명세서에 기재된 모델은 허혈성되고 만성 상처 표현형 (혈관 감소, 염증 및 지연 증가 상처 봉합)을 닮은 상처 발생 혈류 감소 연장을 허용 래트 피변 허혈 모델이다. 그것은 컨트롤 등의 플랩 측 방향의 중앙 배치의 2 허혈성 상처와이 비 허혈성 상처와 bipedicled 등의 플랩으로 구성되어 있습니다. 이 피변 허혈 모델 신규 추가 배리어 및 혈관 재 형성을 방지 및 상처 치유로 수축을 감소시키기 부목로서 기능 플랩 아래에 실리콘 시트의 배치이다. 에도 불구하고때문에 사람에 비해 자신의 매우 독특한 해부학 및 생리 학적 차이에 대한 연구를 상처 치유에 대한 쥐를 사용하는 논쟁 (즉, panniculus의 카르노 서스 근육, 짧은 수명의 존재, 모낭의 수가 증가하고, 감염된 상처를 치유 할 수있는 능력) 이 모델에 사용 된 수정은 이전에 개발 된 허혈성 피부 플랩 모델에 귀중한 대체합니다.
Introduction
효과적인 약물 개발 및 다른 상처 치유 치료제는 인간의 치료 1 동물 모델에서 연구 결과를 번역하는 알려진 문제점에도 불구하고, 생체 내 모델에서 적절한 필요합니다. 다음은 병리 기전 상처 치유의 추가적인 이해를 조사하는 허혈성 피부 상처 치유 쥐 모델의 사용을위한 프로토콜의 상세한 설명이다. 쥐의 종, 종종 넓은 가용성, 크기로 인해 고용하고 절개 및 절제 상처, 이미징 및 조직 2 컬렉션에 적합한 피부 영역을 제공하기에 충분히 큰 같이 유순 자연 상처 치유 연구에 사용됩니다. 그러나 쥐가 느슨한 피부 동물 언급되면서, 쥐와 인간의 피부 해부학 적 차이가 심하게 고려해야한다. 이 독특한 특성은 래트 피부의 폐쇄 w 크게 기여하기보다는 오히려 상피화, 상처 수축 허용ounds 2. 또한, 쥐의 피하 panniculus 카르노 서스 근육의 존재는, 수축 모두 콜라겐 형성에 의해 3,4- 치유에 기여한다. 이러한 매우 중요한 해부학 적 차이는 허혈 래트의 피부 상처 모델의 개발을 고려하고, 특정 변형 상처 수축을 감소시키고 panniculus 카르노 서스의 근육 (5)의 영향력을 감소시키기 위해 실행되었다.
당뇨병 성 족부 궤양, 다리 궤양, 및 욕창에서 치유가 지연되고 이러한 상처는 만성 간주됩니다. 상처는 상처 수리 (6)의 다음 단계로 진행되지 않도록 상처 과도한 염증을 특징으로한다. 만성 상처의 개발에 주요 요인 중 하나는 염증을 취소 무능력에 기여 지역화 된 조직의 허혈 (감소 혈액의 흐름) 5입니다. 이 모델은 2003-4 년에 (개발 및 유효성을 검사 한 동안시), 상처 침대, 정상적인 상처 치유 동안 키 단계와이 모델 5 개발을위한 동기 부여 혈관 신생 유도를 테스트하기에 충분한 조직을 제공 할 수있는 표준화 된 동물 모델은 없었다. 즉, 여기에 제시된 모델은 첸 등에 의해 변형 된 형태로 사용 원래 슈워츠 등. 7, 이후 설명하는 허혈성 상처 모델의 변형입니다 말했다. (8)
변성 허혈성 상처 모델에서 변경 오히려 상피화보다 수축에 의해 치유 이어질 래트 상술 한 해부학 적 특징을 우회 이루어져왔다 : (1) 두 전층 절제 상처는 bipedicled 등쪽 피부 플랩 내에 생성된다 panniculus 카르노 서스 근육은 단지 근육의 근막 위의 해부에 의해 침대 상처에서 제거됩니다. (2) 자체가 플랩 t의 중간에 위치하는 더 좁은 혈액 공급이 랜덤 인 것을 보장 차원 및 상처를 가지고그는 플랩 허혈성 있습니다. (3) 실리콘 시트는 하부 조직으로부터 플랩의 재관류 재 부착을 방지 플랩 아래에 삽입된다. 상처 수축 고정 또는 실리콘 시트 (5)에 의해 봉합 플랩 (제거되지 않은) 제한된다.
이 모델은 최근 세 쥐 11 대 젊은 허혈성 상처 치유에 9,10 치유 허혈성 상처에 고압 산소의 효과에 이르기까지 연구에 사용되었으며, 장기간 조직 허혈의 신뢰할 수있는 모델로 입증되었습니다. bipedicled 플랩의 크기는 돼지 (12)와 마우스를 포함하여 다른 종 (3.0-3.5 cm 폭 10.5 cm 길이)와 F344 쥐 (2cm 폭으로 11cm 길이) 스프 라그을 포함한 다른 쥐의 변종에 맞게 조정되었습니다 13, 14. 이 비디오는 허혈성 피부 상처 모델의 데모에서 F344 근친 쥐의 피로를 사용합니다.
아래에 제시된 모든 동물 절차에 대한 승인 획득했다사우스 플로리다의 동물 관리위원회 (IACUC)의 대학에서 에드와 동물 복지법 및 관리에 대한 가이드 및 실험 동물의 사용의 모든 요구 사항을 준수.
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Protocol
참고 : 아래에 제시된 모든 동물 절차에 대한 승인은 사우스 플로리다의 동물 관리위원회 (IACUC)의 대학에서 얻은 동물 복지법 및 실험실 동물의 관리 및 사용을위한 설명서의 모든 요구 사항을 준수했다.
실리콘 시트 및 수술 도구 1. 준비
- 규격에 맞게 자르는 스트립 (10.5 cm X 3.0 cm) 0.01 두께, 의료용 실리콘 시트를 비는 강화 및 오토 클레이브를 사용하여 소독.
- 청소하고 (수술 중 멸균 필드를 만들 가위, 집게와 커튼이나 수건) 적절한 수술 도구를 소독.
2. 실험 동물
- 성인 남성 또는 상업적 개종에서 얻은 250-350g 범위에 무게 암컷 쥐를 사용합니다. 세 래트가 이용되는 경우, 더 잘 수술 후 생존을 보장하기 위해 ≥350 g이어야한다. 모든 실험의 시작에 앞서 적어도 모든 동물을 순응먹이와 물은 마음대로 먹게하면서 12 시간 명암주기의 표준 조건 하에서 칠일.
3. 마취, 수술 전 진통과 수술 준비
- 유도 챔버를 통해 3 % -4 %를 이소 플루 란을 사용하여 전신 마취를 유도하고 피부 준비 및 수술 중 O 2 1 %에서 (코 콘의 사용을 통해) -2 %를 유지한다. 속도와 호흡, 인터 핀치 또는 눈꺼풀 깜빡임과 깊이의 관찰에 의해 마취의 깊이를 모니터링합니다.
주 :이 때, 수의사 연고 동물이 마취 상태에서 건조를 방지하기 위해 눈 상에 배치 될 수있다. - 무균 수술 영역에서 위치 원격에서 발생하기 쉬운 위치에 쥐를 배치하고 목 아래 약 11cm의 기지에서 가위로 배부 면도. 영구 마커 스텐실, 3.0 cm X 10.5 cm 플랩에 대한 개요는 (그림 1A 참조).
- 깨끗하고 지정된 surgica에 쥐를 이동승인 된 가열 패드 및 무균 수술 커튼이나 수건을 갖추고 리터 영역입니다. 통증 관리를위한 제 절개 수술 5 ㎎ / kg 케토 프로 피하 주사 종래. 필요에 따라 추가의 유체 (생리 식염수)를 피하에 (최대 5를 CC)을들 수있다.
- 멸균 필드를 만들 멸균 커튼을 적용 후, 70 % 이소 프로필 알코올 0.2 % 클로르헥시딘과 초 먼저 보라고하여 더 피부를 준비합니다. 10 % 포비돈 - 요오드 (베타 딘)도 사용할 수있다.
참고 : 항생제 (15 ㎎ / ㎏에서 암피실린)를 피하 투여 할 수 있지만, 좋은 무균 기술을 사용하는 경우, 그것은 필요하지 않습니다.
4. 절제 상처와 Bipedicled 플랩 만들기
- 멸균 일회용 6mm 생검 펀치 도구를 사용하여, 지정된 영역 플랩 (도 1b)의 중심에 두 개의 원형 "허혈"상처를 만든다. 상처의 깊이는 아래 (안 통해)에 panniculus의 carno의 기본 근막해야SUS 근육 (그림 1B 인세 트).
- 사용 집게 펀치 생검에 의해 생성 된 상처 윤곽의 중간에 피부를 들어 올린 다음 (panniculus의 카르노 서스 근육 포함) 조직의 원형 조각을 절제하는 (곡선 팁) 홍채 가위를 사용합니다. 결과는 상처의 기부로서 근막 권취 전층 것이다.
참고 : 적출 한 조직 (상처 플러그) 액체 질소에 냉동 또는 제어와 같은 후 처리, 정상 피부에 10 % 완충 포르말린 O / N에 고정 스냅 할 수 있습니다. - 떨어져 길이 10.5 cm 3.0 cm있는 사전으로 그린 선 (그림 1C)을 따라 허혈성 상처의 각 측면에 멸균 메스로 절개를함으로써 bipedicled 플랩을 만듭니다. 절개의 깊이는 아래 paraspinous 근육해야한다. 홍채 가위를 사용하여, (6mm 펀치의 "기본"으로 그대로의 밴드되지 않도록 조심스럽게 paraspinous 근육에서 F를 panniculus의 카르노 서스 근막을 분리igure 1D).
- 1 멸균 프리 컷 실리콘 시트를 가지고 panniculus의 카르노 서스 근막 시트가 구부러 지거나 접하지 않는 것을 보장 paraspinous 근육 (그림 1E) 사이를에 배치합니다. 블랙, 비 흡수성 봉합사 (크기 4.0)를 사용하여 플랩 (도 1F 및 1G)의 길이를 따라, 각각의 측면상의 적어도 8 중단 바늘 피부에 실리콘 시트를 고정함으로써 두 절개를 닫는다.
- 멸균 일회용 생검 펀치 도구를 사용하여, 1cm가 플랩 (그림 1G)의 양쪽에있는 허혈성 상처에 대해 측면 (panniculus의 카르노 서스 근육의 앞쪽 근막 아래로)이 내부 통제 "비 허혈성"상처를 만들 수 있습니다.
- 상처 아래 통치자를 놓고 상처 측정을 목적으로 (그림 3A 참조) 디지털 사진을 찍어. 이때, 혈류 (재관류) 레이저 도플러 또는 다른 조작이 수행 (국소 약물 배치)를 이용하여 모니터링 할 수있다.
- 뇌와 꼬리 상처와 촉촉하고 (멸균) 깨끗한 상처 환경을 유지하기 위해 드레싱 투명 필름을 모두 승인 된 액체 접착제를 적용합니다. 추가적인 드레싱 가장 꼬리 봉합사를 제거하는 동물을 방지 플랩의 꼬리 단부에 배치 될 수있다.
5. 수술 후 절차
- 공급 문지르는 수술 부위를 방지하기 위해 얕은 공급기가 장착 케이지 (단독으로 보관)에있는 동물을 놓습니다. 동물 방치 또는 흉골 드러 누움을 유지하고 목적이있는 운동을 전시 할 수있는 충분한 의식을 되 찾을 때까지 다른 동물의 회사에 반환 할 수 없습니다. 난방 매트를 복구하는 동안 최대 2 일 동안 케이지의 절반 아래에 배치해야합니다.
- 수술 후 통증을 관리하려면, 최대 48 시간의 수술 후는 다음 아침과 하루에 1 배 동물에 피하 케토 프로 펜 (5 ㎎ / ㎏)을 관리 할 수 있습니다. 동물도 매일 모니터링해야통증, 체중 감소 또는 수술 부위 감염의 징후 연장.
6. 후속 상처 측정 및 드레싱 변경
- 유도 챔버를 통해 3 %에서 이소 플루 란을 사용하여 전신 마취 자주 -4 %를 허혈성 및 비 허혈성 상처를 측정하고 단계 3.1에서와 같이 O 2와 1 % -2 %에서 (코 콘을 통해) 유지.
- 피부 접착제를 잡아 당기지하기로 부드럽게 드레싱을 제거합니다. 추가 디지털 사진 감아 측정에 찍은이 때, 국소 치료 재인가, 레이저 도플러 영상 (LDI) 또는 연구자의 필요에 맞게 다른 조작을 수행.
- 접착제 깨끗한 드레싱을 적용하고 동물이 단계 5.1에서와 같이 복구 할 수 있습니다.
7. 상처 수집 및 안락사
- 동물 공업을 통해 3 % -4 %를 이소 플루 란을 사용하여 전신 마취 상태에서 수확 허혈성 및 비 허혈성 상처 (날이 조사는 적절하다고 판단)uction 챔버 및 단계 3.1에서와 같이 O 2와 1 % -2 %에서 (코 콘을 통해) 유지.
- 메스를 사용하여, 상처 주위의 건강한 조직을 일부 포함하는 상처 주위에 사각형 모양의 절개를 만든다. 1.5 ml의에 절제를 놓고 캡 튜브 스냅와 미래의 분자 분석 (-80 ° C에서 저장) 액체 질소에 동결 스냅 또는 조직 학적 처리를 위해 RT에서 10 % 포르말린의 O에서 / N을 배양한다.
주 : 상처 절개도 분석을 위해 더 많은 샘플을 제공하기 위해 반으로 잘라 될 수있다. - 상처 조직을 제거한 후, CO 2 흡입의 승인 된 방법을 사용하여 동물을 안락사.
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Representative Results
효율적으로 수행 한 경우 쥐의 허혈성 상처 치유 모델 프로토콜은 동물 당 약 20 분 소요됩니다. 이전 그림 1G에 나타낸 바와 같이 나타납니다 모델을 드레싱의 응용 프로그램. 그것은 bipedicled 플랩과 상처 안에 허혈성 있는지 확인하는 것이 중요 할 것입니다. 상처의 수준에서 피하 산소 장력 (PSCO 2) 두 허혈성 상처 사이의 피하 조직에 폴라 전극을 배치하여이 모델 5의 검증으로 측정되었습니다. PSCO 2 값은 비판적으로 허혈성 범위 (20 ~ 40 mmHg로)에 있었다. 이 모델의 개발 이후 LDI의 사용이 점점 혈류를 측정하기 위해 사용되었으며,이 기법은 bipedicled 플랩 허혈 상태에 대한 적절한 정보를 제공 할 것이다.
간략하게, LDI 기술은 광섬유 프로브에 의해지지 레이저 광의 빔의 방출에 기초한다. measuriNG 깊이는 레이저 광의 조직 특성 및 파장에 따라 달라진다. 정상 피부에서 표준 섬유 분리 (0.25 mm) 및 780 nm 파장의 레이저 프로브와 악기, 깊이를 측정하는 0.5 mm의 순서에있을 것입니다. (봉합선 왼쪽) 관류 영역 및 관류 비 영역 (봉합선의 우측) 모두를 도시 등쪽 bipedicled 플랩위한 대표적인 도플러 이미지 (왼쪽)도 2에 도시되어있다.
피하 산소 장력을 측정하는 이외에, 하나는 플랩의 상처는 허혈성 것을 확립 프로브 또는 일반적인 생화학 적 마커를 사용할 수있다. 정상 혈관 내피 세포에서 발견 PECAM-1 또는 CD31은 상처의 새로운 혈관 형성을위한 마커이다. 허혈성 상처에 상승되는 것으로 반응성 산소 종에 대한 다양한 지표는, 예를 dihydroethidium (DHE) 상업적으로 자주 형광등 - 태그 항체 또는 수퍼 옥사이드 지표를 사용할 수 있습니다.
Woun창상 폐쇄를 추적하는 영역 (D) 측정은 다양한 방식으로 표현 될 수있다. 일반적으로 감긴 영역은 같은 수식을 사용하여 치료 (11)의 시간 경과에 걸쳐 상처의 디지털 이미지에서 정량화 데이터 (6mm 펀치 생검 면적 = (π) R 일 0시 2 = 3.14 X 9 = 28.26 mm 2) 초기 창상 면적의 백분율 또는 특정 일에 상처 면적으로 제시는 굴드 등 같이 정량화 될 수있다.이 예제의 목적을 위해 5 창상 폐쇄 진행 28 일 시간 과정을 통해 초기 창상 면적의 백분율로 표현되고 . 자유 소프트웨어 ImageJ에 사용, 디지털 사진이 열리고 규모는 이미지 (그림 3A)의 통치자에 10mm를 사용하여 설정합니다. 길이 10mm의 그려진 선은이 경우 (mm)에, 선택 유닛으로 전환 될 수있다 (도 3a의 확대 그림) 픽셀 카운트 총점. 이어서, 상처의 둘레에 화상을 추적 (그림 3b)와 측정 명령이 부여되면,이 지역은 그림 3b에 인세 mm (에 제시되어있다). 그후 데이터는 X 축 (도 3c)에 Y 축과 일에 초기 창상 면적의 백분율로 표현 될 수있다.
수술 중 단계를 묘사하는 그림 1. 사진은 허혈성 상처, bipedicled 플랩, 비 허혈성 상처를 만들 수 있습니다. (A) 수술 전 제모 통증 관리를위한 진통제 (케토 프로 펜) 피하의 수술 전 투여를 수신 마취 된 쥐의 피부 준비. (B 및 삽입) 허혈성 상처가 2 절개 마커 내부에 생성되는 살균 펀치를 이용하여 조직 검사 도구는. (C) 절개는 bipedicled 플랩가 발생 paraspinous 근육과 (D) 아래로 표시된 라인을 따라 만들어진아래의 근육층에서 (panniculus의 카르노 서스 근막 손상으로) 플랩의 분리를 표시합니다. (E)를 panniculus의 카르노 서스의 근막과 paraspinous 근육 사이에 위치 멸균 실리콘 (검은 색 화살표)의 시트. (F)를 블랙, 비 흡수성 봉합사 (크기 4.0) 다중 플랩 (G)의 길이를 따라 스티치 중단으로 피부에 실리콘 시트를 고정함으로써 두 절개를 닫는다. 두 비 허혈성 상처 (검은 색 화살표)가 양쪽에 bipedicled 플랩에 멸균 펀치 생검 도구 측면을 사용하여 만들어집니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
혈액 관류 수술 후 그림 2. 대표 레이저 도플러 이미지입니다. 오른쪽 팬엘은 플랩에 측면 bipedicled 플랩의 중간에 2 허혈성 상처 (검은 색 화살표) 1 비 허혈성 상처 (하나의 검은 색 화살표)의 흑백 이미지를 보여줍니다. 봉합선은 흰색으로 표시하고있다. 왼쪽 창에는 오른쪽 패널에 묘사 된 같은 지역의 도플러 이미지를 보여줍니다. 밝은 색상 영역은 더 어두운 파란색 영역보다 관류한다. 비 - 허혈 영역 (왼쪽) 및 허혈성 영역 (오른쪽) 사이 관류의 차이는 명확하고 봉합선의 전체 길이를 따라 올 수 있습니다. 혈액 세포는 여전히 어느 정도 존재로 양쪽에 상처, 밝은 표시합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
그림 3. 상처 측정 및 데이터 표현. (A) (ImageJ에)을 소프트웨어를 사용하여 상처 면적 측정을 묘사 한 디지털 사진은 (mm) (흑색 화살표) 및 방법에 관한 화소의 변환은 상처 (B)의 정확한 주위 (하나의 검은 화살표)를 포착한다. 통계 데이터는 x 축 (C)에 Y 축과 일에 초기 창상 면적 (0 일)의 백분율로 표현 될 수있다 (주어진 날에 감기 영역으로 ± SEM을 의미). 선 그래프 선물 데이터 *** 군당 N은 = 8 상처, 동일 시각 (10 일째)에서의 비 - 허혈성보다 (= P 0.0004) 상당히 높은을 나타내고, Sidak의 다중 비교 시험으로 2 웨이 ANOVA를 이용하여 분석 하였다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.
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Discussion
쥐의 상처 치유는 종종 인해 감염된 상처와 interanimal 변화 (5)의 높은 비율을 치유 할 수있는 능력에 논쟁의 대상이되어왔다. 개발 중 모델의 원래 목표 중 하나는이 편차를 감소하는 것이었다. 특정 위치와 상처의 수를 감소 플랩의 폭에 대한 수정이, 실리콘 시트 및 소개 (일관성 cranio-꼬리 위치와 플랩을 중심으로)이 목표를 달성했다. 수축에 의해 상처 치유는 또한 인간에서와 같이, 측정 된 결과이고, 상피화 및 치료에 의해 감소되었다. 쥐의 다른 균주에 모델의 적응은, 즉, F344도 스프 라그 돌리 래트를 관찰하여 성공적인 검증 및 허혈의 정도를 재생했다. 전반적으로이 모델에 필요한 수술 기법 (조직 검사, 봉합 상처 절제술) 쉽게 대부분의 학생들과 제한된 수술 경험이있는 기술자가 취득된다.
_content은 "> 여러 수술을 수행하는 동안, 그것은이 실리콘 시트 배치 5 플랩 상승 이전에 허혈성 상처를 만드는 것이 중요하다고 발견 된이 모델 일관성을 유지합니다. 또한 중요하다 panniculus의 카르노 서스 근막을 통해 펀칭하지 실리콘 위에 남아 베드 가능한 상처를 제공한다. 실리콘은 또한 상처 재 상피화 장려 "부목"로 혈관 재성장을 방지 할뿐만 아니라, 작용한다. 감염을 방지하기위한 습한 환경을 유지하기 위해 접착제 드레싱의 응용 동물 중 일부는 상관없이, 접착제의 유형을 자신의 드레싱을 제거하지 할 수 있도록하기위한 상처 치유도 중요합니다. 제품 선택이 무엇을 선호 또는 연구자의 동물 시설에서 사용 할 수 있습니다. 그러나, 그것은 드문 일이 아니다 / 드레싱 조합이다 사용.bipedicled 플랩은 대략적인 치유의 시간 과정을 통해 실행 가능한 유지해야 LY 이십팔일, 쥐의 피로와 현재의 다른 동반 질환에 따라. 드물게, 농양은 플랩 아래에 형성 할 수 플랩 (특히 근처 봉합)와 seromas에 형성 할 수 없습니다. 유체가 배출 될 수 있고, 필요한 경우 항생제 투여. 플랩 생존 능력을 잃고 괴사하게하면, 그 동물이 더 이상 사용되지하는 것이 좋습니다. 생화학 적 분석을위한 상처 절제 (1) 일부 정상 조직이 지원을 위해 유지되어야로 인해 변동성을 소개하지 (2) RNA, DNA 또는 단백질 (3) 고유 interanimal 변동성 5, 10의 분리를위한 조직의 균질화 및 준비의 선택, (11). 하나는이 마지막 점을 모델에 제한을 고려할 수 있으며 플랩 (<2.0 cm) 또는 플랩 외상의 크기를 줄이는 것이 온도 나 스트레스 수준 등의 요소에 약간의 변동 사항이도 발생할 수 있음을 나타냅니다 괴사를 일으킬 수 있다는 것을 발견했다 한 쥐에서 다른 5에 상처 샘플 간의 생화학 적으로 검출 변화에.
ve_content은 "> 요약하면, 2.0 내지 3.0 폭 cm과 전략적으로 배치 실리콘 시트에 이르기까지 종, bipedicled 플랩이 모델은 장기간 조직 허혈의 신뢰할 수있는 모델이다. 사용자가 생성하는 기술을 사용하여 숙달되면 일관된 허혈성 상처, 그들은 추가 연령과 종 설치류 (쥐 포함). 절제 상처, 국소 처리 될 수 있거나 상기 만성적 상처 형성에 관여하는 메카니즘 (들)를 탐색하기 위해 이용 전신적 치료에 적응할 수 있어야 염증 반응, 비정상적인 혈관 신생 및 지연 상처 봉합을 악화.Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Sil-Tec medical grade sheeting | Technical Products Inc. | 500-3 | nonreinforced, 0.01 inches in thickness |
| Mini Iris scissors, 8 cm, curved, SS | World Precision Instruments | #503671 | |
| Ethilon Nylon Sutures | Ethicon | 1964G | black, size 4.0, PC-3 16 mm needles (3/8 circle) |
| Laser Doppler Imager | Moor Instruments | moorLDI2-IR | Standard blood flow imager: http://us.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8 |
| ImageJ | NIH | free download | http://rsb.info.nih.gov/ij/ |
| Mastisol | Henry Schein | Cat # 7289210 | Fisher Scientific NC9774929 |
| Tegaderm | Medical Specialties | 3M1624W | Fisher Scientific NC9922128 |
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