Summary
Rotte, på grunn av sin størrelse, tilgjengelighet og heller føyelig oppførsel, har blitt benyttet som et forskningsmodellen i mange år. Målet med denne protokollen er å utnytte den rotte som en iskemisk hud sårtilheling modell for å gi verdifull innsikt i patofysiologien av kroniske sår.
Abstract
Tilbøyelighet for kroniske sår hos mennesker øker med aldring, sykdomstilstander som diabetes og nedsatt hjertefunksjon, og unrelieved press på grunn av immobilitet. Dyremodeller har blitt utviklet som forsøk på å etterligne disse betingelser i den hensikt å fremme forståelsen av kompleksiteten av kroniske sår. Modellen er beskrevet her er en rotte iskemisk hud klaff modell som tillater en langvarig reduksjon av blodstrøm som resulterer i sår som blir iskemisk og ligner en kronisk sår fenotype (redusert vaskularisering, økt betennelse og forsinket lukking av sår). Den består av en bipedicled dorsal klaff med to iskemiske sår plassert sentralt og to ikke-iskemiske sår lateralt for klaffen som kontroller. En ny tillegg til dette iskemisk hud klaff modellen er plasseringen av en silikonplate under klaffen som fungerer som en barriere, og en skinne for å hindre revaskularisering og redusere kontraksjon som sår gror. Til tross for detdebatt om å bruke rotter for sårheling studier på grunn av deres ganske distinkte anatomiske og fysiologiske forskjeller sammenlignet med mennesker (dvs. tilstedeværelse av en panniculus carnosus muskel, kort levetid, økt antall hårsekker, og deres evne til å helbrede infiserte sår) modifikasjonene ansatt i denne modellen gjør det til en verdifull alternativ til tidligere utviklede iskemiske hud klaff modeller.
Introduction
Effektiv utvikling av legemidler og andre sårtilheling therapeutics kreve egnet in vivo-modeller, til tross for kjente problemer i sette funn i dyremodeller til menneskelige behandlinger en. Det som følger er en beskrivelse av en detaljert protokoll for anvendelse av en rottemodell for iskemisk hud sårheling å undersøke mekanismer som ytterligere forståelse av patologisk sårheling. Rotte arter, ofte ansatt på grunn av sin bred tilgjengelighet, størrelse og føyelig natur brukes for sårtilheling studier som det er stor nok til å gi et egnet hudområde for operasjonssåret og excisional såret, bildebehandling og vev samling 2. Men det bør tas i nøye overveielse at huden av en rotte og et menneske er forskjellige anatomisk, med rotter blir referert til som løs-skinned dyr. Denne distinkte karakteristiske tillater såret sammentrekning, snarere enn epithelialization å bidra vesentlig til stenging av rotte hud wounds to. I tillegg er tilstedeværelsen av en subkutan panniculus carnosus muskelen hos rotter, bidrar til helbredelse av både sammentrekning og kollagendannelse 3,4. Disse meget viktige anatomiske forskjeller ble vurdert i utviklingen av ischemisk rottemodell sår hud og spesifikke modifikasjoner ble gjennomført for å redusere såret kontraksjon og redusere innflytelsen av panniculus carnosus muskel 5.
I diabetiske fotsår, venøse leggsår, og trykksår, er healing forsinket og disse sårene anses kronisk. Sårene er preget av overdreven betennelse, som hindrer såret fra framdrift til de neste fasene av sår reparasjon seks. En av de viktigste faktorer i utviklingen av kronisk sår er lokalisert vevsischemi (redusert blodstrøm) 5 bidrar til den manglende evne til å fjerne inflammasjon. På den tiden denne modellen ble utviklet og validert (i 2003-4), Var det ingen standardiserte dyremodeller som kan gi nok vev til å teste induksjon av angiogenese i såret seng, en viktig fase under normal healing sår og motivasjon for å utvikle denne modellen fem. Når det er sagt, er modellen som presenteres her er en modifikasjon av den ischemiske såret modellen opprinnelig beskrevet av Schwartz et al. 7 og senere brukt i modifisert form av Chen et al. 8
I den modifiserte iskemisk såret modellen, er det gjort endringer for å omgå de nevnte anatomiske karakteristika for rotte som fører til helbredelse ved sammentrekning i stedet epithelialization: (1) To fulle tykkelse Excisional sår er skapt i et bipedicled rygghuden klaff og den panniculus carnosus muskel er fjernet fra sårflaten ved dissekere like over muskel fascia. (2) Klaffen selv har flere smale dimensjoner, som sikrer at blodtilførselen er tilfeldig og sårene som ligger på midtpunktet av than klaff er iskemiske. (3) Et silikonplate er satt inn under klaffen, hindrer readherence og reperfusjon av klaffen fra underliggende vev. Sår sammentrekning er begrenset (ikke eliminert) ved forankring eller sy klaffen til silikon ark 5.
Modellen har nylig blitt brukt i studier som spenner fra hyperbar oksygen effekter på iskemisk sårheling 9,10 til iskemisk sårtilheling i ung versus eldre rotter 11 og har vist seg å være en pålitelig modell av langvarig vevsischemi. Dimensjonene på bipedicled klaff har også blitt tilpasset til forskjellige rottestammer, inkludert Sprague Dawley (11 cm lang med 2 cm bred) og F344-rotter (10,5 cm lang og 3,0 til 3,5 cm bred) og andre arter, inkludert svine 12 og mus 13,14. Denne videoen benytter F344 innavlet rotte belastning i demonstrasjonen av iskemisk hud såret modell.
Godkjenning for alle dyre prosedyrer som presenteres nedenfor var fåed fra University of South Florida Animal Care Committee (IACUC) og overholde alle krav i dyrevernloven og Guide for Pleie og bruk av forsøksdyr.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
MERK: Godkjenning for alle dyre prosedyrer som presenteres nedenfor er hentet fra University of South Florida Animal Care Committee (IACUC) og overholde alle krav i dyrevernloven og Guide for Care og bruk av forsøksdyr.
1. Utarbeidelse av silikon Ark og kirurgiske instrumenter
- Precut strimler (10,5 cm x 3,0 cm) av uarmert 0,01 tykkelse, medisinsk silikon sheeting og sterilisere ved hjelp av en autoklav.
- Rense og sterilisere egnede kirurgiske instrumenter (saks, pinsett og gardiner eller håndklær for å skape et sterilt felt under operasjonen).
2. forsøksdyr
- Bruk voksen hann- eller hunnrotter som veier innenfor rekkevidde 250-350 g hentet fra en kommersiell oppdretter. Hvis eldre rotter benyttes, bør de være ≥350 g for å sikre bedre overlevelse etter kirurgi. Før starten av noen eksperimenter akklimatisere alle dyr i minst7 dager under standardbetingelser på en 12 timers lys-mørke-syklus med mat og vann ad libitum.
3. Anestesi, Pre-operativ analgesi og Operative Forberedelse
- Indusere anestesi ved hjelp av isofluran med 3% -4% via en induksjonskammeret og vedlikeholde (via bruk av en neseseksjon) ved 1% -2% med O 2 i løpet av preparering av huden og kirurgi. Overvåke anestesidybden ved observasjon av hastigheten og dybden av åndedrett, inter klype eller palpebral blunkerefleksen.
MERK: På denne tiden, kan en veterinær salve bli plassert på øynene for å hindre tørrhet mens dyret er under narkose. - På et sted fjernt fra den sterile kirurgiske området, plasserer rotte i liggende stilling og barbere dorsum med clippers fra bunnen av halsen og ned ca 11 cm. Sjablong med permanent markør, omrisset for 3,0 cm x 10,5 cm klaff (se figur 1A).
- Flytt rotte til en ren, utpekt surgical område utstyrt med en godkjent varmeputen og sterile operasjonsduker eller håndklær. Injisere 5 mg / kg Ketoprofen subkutant før de første kirurgiske snitt for smertebehandling. Ytterligere væske (saltvann) kan gis (opp til 5 cm) subkutant etter behov.
- Forbered huden ytterligere ved pensling først med 70% isopropylalkohol og andre med 0,2% klorheksidin, og deretter bruke sterile forheng for å skape et sterilt felt. 10% povidon-jod (Betadine) kan også brukes.
NB: Et antibiotikum (ampicillin ved 15 mg / kg) administreres subkutant, men hvis gode aseptiske teknikker brukes det ikke er nødvendig.
4. Opprette Excisional Sår og Bipedicled Flap
- Ved hjelp av en steril engangs 6 mm biopsi stanseverktøyet, lage to sirkulære "ischemiske" sår i sentrum av den angitte klaff område (figur 1B). Dybden på såret bør være ned til (ikke gjennom) den underliggende fascia av panniculus Carnosus muskel (Figur 1B innfelt).
- Ved hjelp av pinsett løfte huden på midten av såret omrisset laget av stanse biopsi og deretter bruke iris saks (med buede tips) for å skjære den sirkulære stykke vev (inkludert panniculus carnosus muskelen). Resultatet vil være en full-tykkelse viklet med fascia som base av såret.
MERK: utskåret vev (viklede plugger) kan hurtigfrosset i flytende nitrogen eller fiksert i 10% bufret formalin-O / N for senere behandling som kontroll, normal hud. - Opprette en bipedicled klaff ved å lage innsnitt med en steril skalpell på hver side av de ischemiske sår langs pre-tegnede linjer (figur 1C), som er 10,5 cm i lengde og 3,0 cm fra hverandre. Dybden av innsnittene bør være ned til paraspinous muskler. Ved hjelp av iris saks, skille panniculus carnosus fascia fra paraspinous muskler, er forsiktig med å holde konseptet intakt som "base" av de 6 mm stanser (Figur 1D).
- Ta en steril pre-cut silikon ark og plassere den i mellom panniculus carnosus fascia og paraspinous muskler (Figur 1E) som sikrer at arket ikke buer eller fold. Ved hjelp av sorte, ikke-absorberbare suturer (størrelse 4,0) lukker begge snittene ved forankring av silikonplate til huden med minst 8 avbrutt masker på hver side, langs lengden av klaffen (figur 1F og 1G).
- Ved hjelp av en steril engangs biopsi stanseverktøyet, lage to interne kontroll "ikke-iskemiske" sår (ned til den fremre fascia av panniculus carnosus muskel) 1 cm lateralt for iskemiske sår på hver side av klaffen (fig 1G).
- Plasser en linjal under sårene og ta digitale bilder for sår måleformål (se figur 3A). På dette tidspunktet, kan blodstrømmen (perfusjon) overvåkes ved bruk av laser Doppler eller andre manipulasjoner (aktuell narkotika plassering) som utføres.
- Påfør en godkjent flytende lim både kranie og hale til sårene og en gjennomsiktig film dressing for å holde såret miljøet fuktig og ren (steril). En ytterligere bandasje kan være plassert på hale ende av klaffen for å hindre dyret fra å fjerne de kaudale suturer.
5. Post-operative prosedyrer
- Plassere dyrene i bur (enkeltvis plassert) er utstyrt med grunne forer derved å hindre den kirurgiske området fra å gni mot materen. Dyr bør ikke stå uten tilsyn eller returneres til selskapet av andre dyr før de gjenvinne tilstrekkelig bevissthet for å opprettholde sternum recumbency og viser målrettet bevegelse. Varmematter bør plasseres under halvparten av buret for opp til to dager i løpet av utvinning.
- Å håndtere smerte postoperativt, administrere Ketoprofen (5 mg / kg) subkutant til dyr følgende morgen og 1x per dag i inntil 48 timer etter operasjonen. Dyrene bør også overvåkes daglig iforlengede tegn på smerte, vekttap eller postoperative sårinfeksjoner.
6. Etterfølgende Wound Målinger og bandasjeskift
- Mål iskemiske og ikke-iskemiske sår ofte under narkose ved å bruke 3% isofluran på -4% via en induksjonskammeret og opprettholdt (via en nesekonus) ved 1% -2% med O 2 som i trinn 3.1.
- Fjern bandasjen forsiktig for å ikke trekke limet fra huden. På denne tiden flere digitale bilder er tatt for sår målinger, aktuelle behandlinger brukt igjen, laser Doppler (LDI) eller andre manipulasjoner utført for å passe undersøkerens behov.
- Påfør klebemiddel og et rent dressing og tillater dyret å gjenopprette som i trinn 5.1.
7. Sår Collection og Avlivning
- Høste iskemisk og ikke-iskemiske sår (på dager etterforskeren finner passende) mens dyret er i narkose ved hjelp isofluran på 3% -4% via en induction kammer og holdt (via en nesekonus) ved 1% -2% med O 2 som i trinn 3.1.
- Ved hjelp av en skalpell, lage en firkant formet excision rundt såret for å ta med noen friske vevet rundt såret. Plasser eksisjon i en 1,5 ml snap kork og snap fryse i flytende nitrogen (oppbevar ved -80 ° C) for fremtidig molekylær analyse eller inkubasjon i 10% bufret formalin O / N ved RT for histologisk bearbeiding.
MERK: Såret excisions kan også bli kuttet i to for å gi flere prøver for analyse. - Etter såret vev fjerning, avlive dyret ved bruk av godkjent metode for CO 2 innånding.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Rotte iskemisk sårtilheling modell protokollen bør ta ca 20 min per dyr hvis det utføres effektivt. Før påføring av en dressing modellen skal vises som representert i figur 1G. Det vil være viktig å kontrollere at bipedicled klaff og sår der er iskemisk. Subkutan oksygentensjon (PscO 2) på nivå med de sår har blitt målt under valideringen av modellen 5 ved å plassere en polarografisk elektrode i det subkutane vevet mellom de to iskemiske sår. PscO to verdier var i den kritiker iskemisk utvalg (20-40 mmHg). Siden utviklingen av denne modell ved bruk av LDI har i økende grad blitt brukt til å måle blod-perfusjon, og denne teknikken vil gi tilstrekkelig informasjon om iskemisk tilstand av bipedicled klaff.
Kort sagt blir LDI teknikk basert på utsendelse av en stråle av laserlys som bæres av en fiberoptisk probe. Den measuring dybde avhenger av vev egenskaper og bølgelengden av laserlyset. I normal hud, et instrument med en sonde med standard fiberseparasjon (0,25 mm) og en 780 nm bølgelengde laser, vil måling av dybde være av størrelsesorden 0,5-1 mm. En representativ dopplerbilde (venstre) for en dorsal bipedicled klaff som viser både en perfusert område (til venstre for sutur-linjen) og det ikke-perfunderte område (til høyre på sutur-linjen) er vist i figur 2.
I tillegg til å måle underhudsfett oksygen spenning, kan man også bruke sonder eller vanlige biokjemiske markører for å fastslå at sårene i klaffen er iskemisk. PECAM-en eller CD31 normalt finnes på vaskulære endotelceller er en markør for nytt fartøy dannelse i sårene. Ulike markører for reaktive oksygenforbindelser, funnet å være forhøyet i iskemiske sår, er tilgjengelig kommersielt ofte som fluorescerende-merket antistoffer eller superoksyddannende indikatorer som dihydroethidium (DHE).
Wound målinger i området for å spore sårheling kan representeres på en rekke måter. Vanligvis vikles område kvantifisert fra digitale bilder av sårene over tidsforløpet for helbredelse 11 ved hjelp av en formel som (6 mm biopsier område = (π) R2 = 3,14 x 9 = 28,26 mm 2 ved dag 0) med data presentert som prosent av initial sårområde eller vikles flateareal på en bestemt dag kan kvantifiseres som i Gould et al. 5 For formålene med denne demonstrasjonen sårlukking progresjon representeres som prosent av initial sårområdet over et tidsforløp på 28 dager . Ved hjelp av gratis programvare ImageJ, er et digitalt bilde som er åpnet og skalaen stilles inn med 10 mm på linjalen i bildet (figur 3A). En linje trukket 10 mm i lengde tilsvarer en bildeelement teller (innfelt i figur 3A), som kan omdannes til en enhet av valg, i dette tilfelle (mm). Deretter blir omkretsen av såret spores på bildet (Figur 3B) og når måle kommandoen er gitt, er området presentert i mm (innfelt i figur 3B). Data kan så bli presentert som prosent av initial sårområdet på y-aksen og dager på x-aksen (figur 3C).
Figur 1. Fotografier viser trinnene under operasjonen for å skape iskemiske sår, den bipedicled klaff, og ikke-iskemiske sår. (A) Pre-kirurgisk hårfjerning og hud utarbeidelse av en bedøvet rotte mottar en pre-kirurgisk dose smertestillende (Ketoprofen) subkutant for smertebehandling. (B og innfelt) iskemisk sår er skapt inne i to innsnitt markører ved å benytte en steril punsj biopsiverktøyet. (C) Snittene blir lagt langs den merkede linjen ned til paraspinous muskel og (D) den bipedicled klaffen løftesvise separasjon av klaffen (med panniculus carnosus fascia intakt) fra muskellaget nedenfor. (e) Et ark av sterilt silikon (sort pil) er plassert mellom fascia av panniculus carnosus og paraspinous muskel. (F) svart, ikke-absorberbare suturer (størrelse 4,0) lukker begge snittene ved forankring av silikonplate i huden med flere avbrutt sting langs lengden av klaffen (G). To ikke-iskemiske sår (svarte piler) er laget ved hjelp av en steril punsj biopsi verktøy lateralt for bipedicled klaff på begge sider. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 2. Representant laser Doppler bilde av blodperfusjon etter operasjonen. Retten panel viser en svart og hvitt bilde av to iskemiske sår (svarte piler) i midten av bipedicled klaff og en ikke-iskemisk sår (enkel svart pil) laterale til klaffen. Suturlinjen har blitt markert i hvitt. Venstre panel viser Doppler bilde av samme område avbildet i panelet til høyre. Områder med lysere farger er mer perfundert enn områder med mørk blå. Denne forskjell i perfusjon mellom den ikke-iskemiske området (til venstre) og den ischemiske området (høyre) er fri og kan følges langs hele lengden av suturen linje. Legg merke til at sårene på begge sider vises lyse, som blodceller er fortsatt til stede til en viss grad. Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Figur 3. Sår måling og datarepresentasjon. (A) Digitale bilder som skildrer sår måling området ved hjelp av programvare (ImageJ), konvertering av piksler til (mm) (svarte piler) og metoden for å fange en nøyaktig omkrets (enkel svart pil) av såret (B). Statistiske data (gjennomsnitt ± SEM av viklede områder på en gitt dag) kan så bli presentert som prosent av initial område såret (dag 0) på y-aksen og dager på x-aksen (C). De linjediagrammet angir data analyseres ved bruk av en to-veis ANOVA med Sidak multiple sammenligninger test, *** representerer signifikant høyere (p = 0,0004) enn ikke-iskemisk samtidig punkt (dag 10), n = 8 sår pr gruppe. Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Sårtilheling hos rotter har ofte vært gjenstand for debatt på grunn av deres evne til å helbrede infiserte sår og høy grad av interanimal variabilitet 5. En av de opprinnelige målene i modellen under utviklingen var å redusere denne variasjonen. Modifikasjoner til bredden av klaffen, redusere antall sår med spesiell plassering (sentrert på klaff med konsistent cranio-caudal plassering) og innføring av en silikonplate har oppnådd dette målet. Sårtilheling ved sammentrekning har også blitt redusert og helbredelse ved epithelialization, som hos mennesker, er den målte utfall. Tilpasning av modellen til en annen stamme av rotte, den F344, har vist seg altså også vellykket og gjengir graden av iskemi observert ved hjelp av Sprague Dawley rotter. Samlet kirurgiske teknikker (biopsi, suturering og sår eksisjons-) som kreves for denne modellen er lett kjøpt opp av de fleste studenter og teknikere med begrenset kirurgisk erfaring.
_content "> For å oppnå samsvar med denne modellen mens du utfører flere operasjoner, ble det funnet at det er viktig å skape de iskemiske sår før heving av klaffen for silikon ark plassering 5. I tillegg, ikke punching gjennom panniculus carnosus fascia er kritisk til tilveiebringe en levedyktig sårflaten å forbli over silikon. Silikonet virker ikke bare for å forhindre vaskulær gjenvekst, men også som en "splint" som oppmuntrer såret re-epitelialisering. Påføringen av klebemiddel og dressinger for å forhindre infeksjon og opprettholde et fuktig miljø etter sårtilheling er også viktig. Produktvalg kan det foretrekkes eller brukes i forskerens dyre anlegget. Det er imidlertid ikke uvanlig at noen av dyrene for å være i stand til å fjerne sine dressinger, uansett hva slags lim / dressing kombinasjonen er anvendes.Den bipedicled klaff bør være levedyktig gjennom en gang løpet av healing som er omtrentlig ly 28 dager, avhengig av rotte belastning og andre tilleggslidelser stede. I sjeldne tilfeller kan abscesser dannes i klaffen (spesielt i nærheten sting) og seromas kan danne under klaffen. Fluid kan dreneres og antibiotika administreres om nødvendig. Imidlertid, hvis klaffen mister levedyktighet og blir nekrotisk, anbefales det at dyret ikke lenger brukes. Sår excision for biokjemisk analyse gjør introdusere variasjon pga (1) noen normalt vev må beholdes for støtte (2) valg av vev homogenisering og forberedelse for isolering av RNA, DNA eller protein og (3) iboende interanimal variabilitet 5,10, 11. Man kan tenke seg dette siste punktet en begrensning til modellen, og det ble funnet at å redusere størrelsen av klaffen (<2,0 cm) eller klaff traumer kan føre til nekrose, noe som indikerer at mindre variasjoner i faktorer som temperatur eller stressnivå, også kan føre til biokjemisk påvises variasjon mellom sår prøver fra en rotte til en annen 5.
ve_content "> I sammendraget, denne modellen, med en langsgående, bipedicled klaff spenner 2,0 til 3,0 cm i bredden og en strategisk plassert silikon ark, er en pålitelig modell av langvarig vevsischemi. Når brukeren er flinke til å bruke teknikker for å skape en konsekvent iskemisk sår, bør de være i stand til å tilpasse den til flere aldre og arter av gnagere (mus inkludert). De Excisional sår kan behandles lokalt, eller systemiske behandlinger anvendes til ytterligere utforske mekanismen (e) som er involvert i kronisk sår dannelse, forverret inflammatoriske responser, avvik angiogenese og forsinket lukking av sår.Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Sil-Tec medical grade sheeting | Technical Products Inc. | 500-3 | nonreinforced, 0.01 inches in thickness |
| Mini Iris scissors, 8 cm, curved, SS | World Precision Instruments | #503671 | |
| Ethilon Nylon Sutures | Ethicon | 1964G | black, size 4.0, PC-3 16 mm needles (3/8 circle) |
| Laser Doppler Imager | Moor Instruments | moorLDI2-IR | Standard blood flow imager: http://us.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8 |
| ImageJ | NIH | free download | http://rsb.info.nih.gov/ij/ |
| Mastisol | Henry Schein | Cat # 7289210 | Fisher Scientific NC9774929 |
| Tegaderm | Medical Specialties | 3M1624W | Fisher Scientific NC9922128 |
References
- Ansell, D. M., Holden, K. A., Hardman, M. J. Animal models of wound repair: Are they cutting it. Experimental dermatology. 21 (8), 581-585 (2012).
- Dorsett-Martin, W. A. Rat models of skin wound healing: a review. Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 12 (6), 591-599 (2003).
- Davidson, J. M. Animal models for wound repair. Arch Dermatol Res. 290 (S1-11), (1998).
- Finn, G., Magnus, S. A., Tonny, K. Models for use in wound healing research: A survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue). Wound Repair and Regeneration. 8, (2000).
- Gould, L. J., Leong, M., Sonstein, J., Wilson, S. Optimization and validation of an ischemic wound model. Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 13 (6), 576-582 (2004).
- Loots, M. A., et al. Differences in cellular infiltrate and extracellular matrix of chronic diabetic and venous ulcers versus acute wounds. The Journal of investigative dermatology. 111 (5), 850-857 (1998).
- Schwartz, D. A., Lindblad, W. J., Rees, R. R. Altered collagen metabolism and delayed healing in a novel model of ischemic wounds. Wound Repair Regen. 3 (2), 204-212 (1995).
- Chen, C., et al. Molecular and mechanistic validation of delayed healing rat wounds as a model for human chronic wounds. Wound Repair and Regeneration. 7, (1999).
- Zhang, Q., Chang, Q., Cox, R. A., Gong, X., Gould, L. J. Hyperbaric oxygen attenuates apoptosis and decreases inflammation in an ischemic wound model. The Journal of investigative dermatology. 128 (8), 2102-2112 (2008).
- Zhang, Q., Gould, L. J. Hyperbaric oxygen reduces matrix metalloproteinases in ischemic wounds through a redox-dependent mechanism. The Journal of investigative dermatology. 134 (1), 237-246 (2013).
- Moor, A. N., et al. Consequences of age on ischemic wound healing in rats: altered antioxidant activity and delayed wound closure. Age (Dordrecht, Netherlands). 36 (2), 733-748 (2014).
- Roy, S., et al. Characterization of a preclinical model of chronic ischemic wound). Physiological genomics. 37 (3), 211-224 (2009).
- Biswas, S., et al. Hypoxia inducible microRNA 210 attenuates keratinocyte proliferation and impairs closure in a murine model of ischemic wounds. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107 (15), 6976-6981 (2010).
- Winocour, S., Vorstenbosch, J., Trzeciak, A., Lessard, L., Philip, A. CD109, a novel TGF-beta antagonist, decreases fibrotic responses in a hypoxic wound model. Exp Dermatol. 23 (7), 475-479 (2014).
