Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Demonstration av Rat Ischemisk hudsår Modell

doi: 10.3791/52637 Published: April 1, 2015
* These authors contributed equally

Summary

Råttan, på grund av sin storlek, tillgänglighet, och ganska fogliga beteende, har använts som en forskningsmodell för många år. Målet med detta protokoll är att utnyttja råttan som en ischemisk hud sårläkning modell för att ge värdefull insikt i patofysiologin av kroniska sår.

Abstract

Benägenheten för kroniska sår hos människor ökar med åldrande, sjukdomstillstånd som diabetes och nedsatt kardiovaskulär funktion, och oförlöst tryck på grund av orörlighet. Djurmodeller har utvecklats som försök att efterlikna dessa villkor i syfte att främja vår förståelse av komplexiteten av kroniska sår. Modellen beskrivs här är en råtta ischemisk hudfliken modell som möjliggör en förlängd minskning av blodflödet vilket resulterar i sår som blir ischemisk och liknar ett kroniskt sår fenotyp (reducerad vaskularisering, ökad inflammation och fördröjd sårtillslutning). Den består av en bipedicled ryggflik med 2 ischemiska sår placerade centralt och 2 icke-ischemiska sår sidled till fliken som kontroller. En roman Utöver detta ischemisk hudfliken modell är placeringen av ett silikonblad under flik som fungerar som en barriär och en skena för att förhindra revaskularisering och minska sammandragning som såren läker. Trots denDebatten om att använda råttor för sårläknings studier på grund av deras helt skilda anatomiska och fysiologiska skillnader jämfört med människor (dvs närvaron av en panniculus carnosus muskel, kort livslängd, ökat antal hårsäckar, och deras förmåga att läka infekterade sår) de ändringar som används i denna modell gör det ett värdefullt alternativ till tidigare utvecklade ischemiska hud klaffmodeller.

Introduction

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Effektiv läkemedelsutveckling och andra sårläknings terapeutiska kräver lämpliga in vivo-modeller, trots kända problem i att översätta fynd i djurmodeller för att mänskliga terapier en. Vad som följer är en beskrivning av ett detaljerat protokoll för användning av en råttmodell av ischemisk hud sårläkning att undersöka mekanismer som främjar förståelse av patologisk sårläkning. De råttarter, ofta anställda på grund av dess breda tillgänglighet, storlek och foglig naturen används för sårläkning studier eftersom det är tillräckligt stor för att ge en lämplig hudområde för incisional och excisional såra, bildbehandling och vävnadssamling 2. Det bör emellertid tas i noggrant övervägande att huden på en råtta och en människa är olika anatomiskt, med råttor refereras till som lösa skal djur. Denna distinkta karakteristiska möjliggör sårkontraktion, snarare än epitelbildning att väsentligt bidra till stängning av råtthud wounds 2. Dessutom närvaron av en subkutan panniculus carnosus muskeln hos råttor, bidrar till läkning av både kontraktion och kollagenbildning 3,4. Dessa mycket viktiga anatomiska skillnader ansågs i utvecklingen av råttans ischemisk hudsår modell och specifika modifieringar genomfördes för att minska sårkontraktion och minska påverkan av panniculus camosus muskeln 5.

I diabetiska fotsår, venösa bensår och trycksår, är helande försenad och dessa sår anses kronisk. Såren kännetecknas av överdriven inflammation, vilket hindrar såret från utvecklas till kommande faser av sårläkning 6. En av de viktigaste faktorerna i utvecklingen av ett kroniskt sår är lokaliserad vävnadsischemi (minskat blodflöde) 5 bidrar till oförmåga att rensa inflammation. Vid den tid under vilken denna modell var att utvecklas och valideras (i 2003-4), Fanns det inga standardiserade djurmodeller som kan ge tillräckligt med vävnad för att testa induktion av angiogenes i såret, ett avgörande skede under normal sårläkning och motivationen för att utveckla denna modell 5. Som sagt, den modell som presenteras här är en modifiering av den ischemiska sår modellen ursprungligen beskrivits av Schwartz et al. 7 och därefter användas i modifierad form av Chen et al. 8

I den modifierade ischemisk såret modell, har förändringar gjorts för att kringgå de ovan nämnda anatomiska egenskaper hos råtta som leder till läkning av kontraktion i stället epithelialization: (1) Två fulla tjocklek excisionssår skapas inom en bipedicled rygg hudfliken och panniculus carnosus muskel avlägsnas från sårbädden genom att dissekera precis ovanför muskeln fascia. (2) Klaffen sig har smalare dimensioner, se till att blodtillförsel är slumpmässig och såren belägna vid mittpunkten av than klaff är ischemisk. (3) Ett silikonarket infogas bakom luckan, förebygga readherence och reperfusion av klaffen från underliggande vävnad. Sårkontraktion är begränsad (inte elimineras) genom att förankra eller suturering fliken till silikonskiktet 5.

Modellen har nyligen använts i studier som sträcker sig från hyperbar syrgas effekter på ischemisk sårläkning 9,10 till ischemisk sårläkning i unga kontra åldrade råttor 11 och har visat sig vara en pålitlig modell av långvarig vävnadsischemi. Måtten på bipedicled klaffen har också anpassats till olika råttstammar, däribland Sprague Dawley (11 cm lång och 2 cm bred) och F344-råttor (10,5 cm lång och 3,0-3,5 cm breda) och andra arter, inklusive svin 12 och möss 13,14. Denna video använder F344 inavlade råttstam i demonstrationen av ischemisk hudsår modell.

Godkännande för alla förfaranden djur presenteras nedan var fåed från University of South Florida Animal Care kommittén (IACUC) och följa alla krav i djurskyddslagen och vägledningen för vård och användning av försöksdjur.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

OBS: Godkännande för alla förfaranden djur presenteras nedan erhölls från University of South Florida Animal Care kommittén (IACUC) och följa alla krav i djurskyddslagen och vägledningen för vård och användning av försöksdjur.

1. Beredning av silikon Lakan och kirurgiska instrument

  1. Förskuma remsor (10.5 cm x 3.0 cm) av icke-förstärkt 0.01 tjocklek, medicinsk silikon plåt och sterilisera genom att använda en autoklav.
  2. Rengör och sterilisera lämpliga kirurgiska instrument (saxar, pincetter och draperier eller handdukar för att skapa ett sterilt område under operation).

2. Experimentella Djur

  1. Använd vuxen man eller honråttor som väger i intervallet 250-350 g erhållits från en kommersiell uppfödare. Om åldrade råttor utnyttjas, bör de vara ≥350 g i syfte att säkerställa bättre överlevnad efter operation. Inför starten av några experiment acklimatisera alla djur under minst7 dagar under standardbetingelser för en 12 h ljus-mörkercykel med mat och vatten ad libitum.

3. Anestesi, Preoperativ Analgesi och Operative Förberedelse

  1. Framkalla narkos med hjälp isofluran vid 3% -4% via en induktionskammare och underhålla (via användning av en noskon) vid 1% -2% med O2 under beredning och kirurgi huden. Övervaka anestesidjupet genom observation av hastigheten och djupet av andning, inter nypa eller ögonlocksblinkreflex.
    OBS: Vid denna tid, kan en veterinär salva placeras på ögonen för att förhindra torrhet medan djuret är under narkos.
  2. I ett läge på avstånd från det sterila operationsområdet, placera råttan i liggande ställning och raka dorsum med Clippers från basen av nacken ner ca 11 cm. Stencil med permanent markör, konturerna för 3,0 cm x 10,5 cm flik (se Figur 1A).
  3. Flytta råtta till en ren, betecknad surgical utrustad med godkänd värmedyna och sterila operationsdukar eller handdukar. Spruta 5 mg / kg Ketoprofen subkutant före de första kirurgiska snitt för smärtlindring. Ytterligare vätskor (saltlösning) kan ges (upp till 5 cc) subkutant efter behov.
  4. Förbered huden ytterligare genom badda först med 70% isopropylalkohol och andra med 0,2% klorhexidin, sedan tillämpa sterila draperier för att skapa ett sterilt område. 10% povidon-jod (Betadine) kan också användas.
    OBS: Ett antibiotikum (ampicillin vid 15 mg / kg) kan ges subkutant, men om goda aseptiska tekniker används det inte behövs.

4. Skapa excisionssår och Bipedicled Flap

  1. Med hjälp av en steril engångs 6 mm biopsistans verktyg, skapa två cirkulära "ischemiska" sår i mitten av den utsedda flikområdet (Figur 1B). Djupet av såret bör vara ner till (inte igenom) den underliggande fascia panniculus Carnosus muskeln (Figur 1B infälld).
  2. Använd pincett lyfta huden i mitten av sårets kontur skapas genom stansbiopsi och sedan använda iris sax (med böjda spetsar) för att skära den cirkulära bit vävnad (inklusive panniculus camosus muskeln). Resultatet kommer att vara en full-tjocklek lindas med fascian som bas av såret.
    OBS: Den exciderade vävnaden (lindade pluggar) kan snabbfrystes i flytande kväve eller fast i 10% buffrad formalin-O / N för senare bearbetning som kontroll, normal hud.
  3. Skapa en bipedicled flik genom att göra snitt med en steril skalpell på varje sida av de ischemiska sår längs förhandsdragna linjer (figur 1C) som är 10,5 cm i längd och 3,0 cm från varandra. Djupet på snitten bör vara ner till paraspinous muskler. Använda iris sax, separera panniculus carnosus fascia från paraspinous muskler, är noga med att hålla fascian intakt som "bas" av mm stansar 6 (Figure 1D).
  4. Ta 1 steril färdigskurna silikon plåt och placera den i mellan panniculus carnosus fascia och paraspinous musklerna (Figur 1E) säkerställer att arket inte bucklas eller lägga sig. Använda svarta, icke-absorberbara suturer (storlek 4,0) stänga båda snitt genom att förankra silikonbladet på huden med minst 8 avbrutna maskor på var sida, längs med klaffen (Figur 1F och 1G).
  5. Med hjälp av en steril engångsbiopsistans verktyg, skapar två interna kontroll "icke-ischemiska" sår (ner till den främre fascia av panniculus camosus muskeln) 1 cm lateralt mot ischemiska sår på vardera sidan av klaffen (figur 1G).
  6. Placera en linjal nedanför såren och ta digitala foton för lindade mätningsändamål (se figur 3A). Vid denna tid, kan blodflödet (perfusion) övervakas genom användning av laser Doppler eller andra manipulationer (utvärtes läkemedel placering) utförs.
  7. Applicera en godkänd flytande lim både kranial och kaudalt såren och en transparent filmförband för att hålla såret miljön fuktig och ren (steril). En extra dressing kan placeras vid den kaudala änden av fliken så att djuret från att ta bort de mest stjärtfenan suturer.

5. Postoperativa procedurer

  1. Placera djur i burar (var för sig inrymda) försedda med grunda matare för att förhindra den kirurgiska platsen från gnidning mot mataren. Djur bör inte lämnas utan uppsikt eller returneras till företaget av andra djur tills de återfår tillräcklig medvetenhet för att upprätthålla sternala VILA och uppvisar målmedveten rörelse. Värmemattor bör placeras under hälften av buren i upp till 2 dagar under återhämtning.
  2. För att hantera smärta postoperativt, administrera ketoprofen (5 mg / kg) subkutant till djur följande morgon och 1x per dag i upp till 48 h efter kirurgi. Djur bör också övervakas dagligen förförlängda tecken på smärta, viktnedgång eller infektioner i operationsområdet.

6. Efterföljande Wound Mått och omläggningar

  1. Mät ischemiska och icke-ischemiska sår ofta under narkos använder isofluran vid 3% -4% via en induktionskammare och underhålls (via en noskon) vid 1% -2% med O 2 som i steg 3.1.
  2. Avlägsna förbandet försiktigt så att inte dra limmet från huden. Vid denna tid ytterligare digitala bilder är tagna för sår mätningar, utvärtes behandlingar ommålas, laser Doppler imaging (LDI) eller andra manipulationer som utförs för att passa utredarens behov.
  3. Applicera lim och en ren dressing och låt djuret att återhämta sig som i steg 5.1.

7. Sår Insamling och Eutanasi

  1. Harvest ischemisk och icke-ischemiska sår (på dagarna utredaren finner lämpligt) medan djuret är under narkos använder isofluran vid 3% -4% via en induktion kammaren och underhålls (via en noskon) vid 1% -2% med O 2 som i steg 3.1.
  2. Med hjälp av en skalpell görs en kvadrat formad excision runt såret för att inkludera några frisk vävnad runt såret. Placera excision in i en 1,5 ml snap kapsylröret och snap frysa i flytande kväve (förvaras vid -80 ° C) för framtida molekylär analys eller inkubera i 10% buffrad formalin O / N vid RT för histologisk bearbetning.
    OBS: De lindade excisioner kan också halveras för att ge fler prover för analys.
  3. Efter sårvävnad avlägsnande, avliva djuret med den godkända metoden för CO2 inandning.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Råttan ischemisk sårläkning modell protokoll bör ta cirka 20 minuter per djur om det utförs på ett effektivt sätt. Före applicering av ett förband modellen ska visas som representeras i Figur 1G. Det kommer att vara viktigt att kontrollera att bipedicled klaffen och sår däri är ischemisk. Subkutan syrespänning (PscO 2) i nivå med såren har uppmätts under valideringen av denna modell 5 genom att placera en polarografisk elektrod i den subkutana vävnaden mellan de två ischemiska sår. PscO 2 värden var i kritiskt ischemisk intervall (20-40 mmHg). Eftersom utvecklingen av denna modell att använda LDI har alltmer använts för att mäta blodgenomströmningen och denna teknik kommer att ge tillräcklig information om den ischemiska tillstånd bipedicled klaffen.

I korthet LDI teknik baserad på emission av en stråle av laserljus som bärs av en fiberoptisk sond. Den measuring djupet beror på egenskaperna vävnads och våglängd av laserljuset. I normal hud, ett instrument med en sond med standardfiber separation (0,25 mm) och en 780 nm våglängd laser, kommer djupmätning vara i storleksordningen av 0,5-1 mm. En representativ dopplerbild (vänster) för en dorsal bipedicled klaff som visar både en perfusion område (till vänster om suturlinjen) och den icke-perfuserade området (höger av suturen linjen) visas i fig 2.

Förutom att mäta subkutan syrespänning, kan man även använda prober eller gemensamma biokemiska markörer för att fastställa att såren i klaffen är ischemisk. PECAM-1 eller CD31 som normalt finns på vaskulära endotelceller är en markör för ny kärlbildning i såren. Olika markörer för reaktiva syreföreningar, som konstaterats ha förhöjda i ischemiska sår, finns tillgängliga i handeln ofta som fluorescerande-märkta antikroppar eller superoxid indikatorer såsom dihydroethidium (DHE).

Wound arealmätningen att spåra sårtillslutning kan representeras i en mängd olika sätt. Vanligen lindas område kvantifieras från digitala bilder av såren över tidsförloppet av healing 11 med hjälp av en formel såsom (6 mm stansbiopsi område = (π) r 2 = 3,14 x 9 = 28,26 mm 2 vid dag 0) med data presenteras som procent av initial sårområdet eller sår yta på en viss dag kan kvantifieras som i Gould et al. 5 I denna demonstration, sårtillslutning progression representeras som procent av initial sårområdet under ett tidsförlopp för 28 dagar . Använda fri programvara ImageJ, är en digital bild öppnas och skalan ställs in med 10 mm på linjalen i bilden (Figur 3A). En linje dragen 10 mm i längd motsvarar en pixel count (infälld i figur 3A), som kan omvandlas till en enhet val, i detta fall (mm). Härnäst är omkretsen av såret spåras på bilden (Figur 3B) och en gång kommandot åtgärden ges, är det område som presenteras i mm (infällda i figur 3B). Data kan sedan presenteras som procent av initial sårområdet på y-axeln och dygn på x-axeln (figur 3C).

Figur 1
Figur 1. Fotografier föreställande steg under operation för att skapa ischemiska sår, den bipedicled klaffen, och icke-ischemiska sår. (A) Pre-kirurgisk hårborttagning och hud beredning av en sövd råtta emot en pre-kirurgisk dos av smärtstillande (Ketoprofen) subkutant för smärtlindring. (B och infälld) Ischemisk sår skapas inuti 2 snitt markörer genom att använda en steril punch biopsi verktyg. (C) Snitt görs längs de markerade linjerna ner till paraspinous muskler och (D) den bipedicled klaffen höjsatt visa separationen av klaffen (med panniculus carnosus fascia intakt) från muskellagret nedan. (E) Ett ark av steril silikon (svart pil) placeras mellan fascia av panniculus camosus och paraspinous muskeln. (F) Svart, icke-absorberbara suturer (storlek 4,0) stänga båda snitt genom att förankra silikonbladet till huden med flera avbrutna stygn längs med klaffen (G). Två icke-ischemiska sår (svarta pilar) är skapade med en steril punch biopsi verktyg sidled till bipedicled klaffen på båda sidor. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figur 2
Figur 2. Representant laser Doppler bild av blodperfusion efter operationen. Rätt panel visar en svartvit bild av 2 ischemiska sår (svarta pilar) i mitten av den bipedicled klaffen och 1 icke-ischemisk sår (enda svart pil) laterala till klaffen. Suturen linjen har belysts i vitt. Den vänstra panelen visar dopplerbild av samma område som avbildas i den högra panelen. Områden med ljusare färger är mer perfusion än områden med mörkblå. Denna skillnad i perfusionen mellan det icke-ischemiska området (vänster) och det ischemiska området (höger) är klar och kan följas längs hela längden av suturen linjen. Observera att såren på båda sidor visas ljusa, eftersom blodkroppar är fortfarande i viss utsträckning. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figur 3
Figur 3. Sår mätning och datarepresentation. (A) Digitala fotografier föreställande sårområdet mätning med hjälp av programvara (ImageJ), omvandling av pixlar (mm) (svarta pilar) och metoden för att fånga en exakt omkrets (enda svart pil) av såret (B). Statistiska uppgifter (medelvärde ± SEM av lindade områden på en viss dag) kan sedan presenteras som procent av initial sårområdet (dag 0) på y-axeln och dagar på x-axeln (C). Linjediagrammet presenterar data analyseras med användning av en 2-vägs ANOVA med Sidak multipla jämförelser test *** representerar signifikant högre (P = 0,0004) än icke-ischemiska vid samma tidpunkt (dag 10), N = 8 sår per grupp. Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

or Start trial to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Sårläkning hos råttor har ofta varit föremål för diskussion på grund av deras förmåga att läka infekterade sår och hög interanimal variabilitet 5. En av de ursprungliga målen för modellen under dess utveckling var att minska denna variation. Ändringar av bredden på klaffen, minska antalet sår med specifik placering (centrerad på klaffen med konsekvent kranio-caudal plats) och införande av ett silikonblad har åstadkommit detta mål. Sårläkning genom kontraktion har också minskat och läkning av epitelbildning, som hos människa, är det uppmätta resultatet. Anpassning av modellen till en annan stam av råtta, dvs F344, har också visat sig vara framgångsrik och återger graden av ischemi observerades vid användning av stammen Sprague Dawley. Sammantaget de kirurgiska tekniker (biopsi, suturering och sår excision) krävs för denna modell är lätt förvärvas av de flesta studenter och tekniker med begränsad kirurgisk erfarenhet.

_content "> För att uppnå överensstämmelse med den här modellen när de utför flera operationer, visade det sig att det är viktigt att skapa de ischemiska sår före förhöjning av klaffen för silikon plåt placering 5. Dessutom inte stans genom panniculus carnosus fascia är avgörande för ge en livskraftig såret förbli över silikon. Silikon agerar inte bara för att förhindra kärl återväxt utan också som en "spjäla" som uppmuntrar sår åter epitelisering. Tillämpningen av limmet och dressingar att förhindra infektion och bibehålla en fuktig miljö för sårläkning är också viktigt. Produkt val kan det föredras eller används i forskarens djuranläggning. Det är dock inte ovanligt att några av djuren för att kunna ta bort sina förband, oavsett vilken typ av lim / förband kombinationen är användas.

Den bipedicled klaffen bör förbli livskraftig under ett tidsförlopp för healing som är ungefärlig ly 28 dagar, beroende på råttstam och andra komorbiditet närvarande. I sällsynta fall kan bölder bildas i klaffen (särskilt nära suturer) och seromas kan bildas under fliken. Fluid kan tömmas och antibiotika administreras vid behov. Men om klaffen förlorar livskraft och blir nekrotisk rekommenderas att detta djur inte längre användas. Wound excision för biokemisk analys gör införa variabilitet på grund av (1) en del normal vävnad måste sparas för stöd (2) val av vävnads homogenisering och förberedelse för isolering av RNA, DNA eller protein och (3) inneboende interanimal variabilitet 5,10, 11. Man skulle kunna överväga denna sista punkt en begränsning till modellen och det konstaterades att minska storleken på klaffen (<2,0 cm) eller klaff trauma kan orsaka nekros, vilket tyder på att mindre variationer i faktorer som temperatur eller stressnivåer, även leda att biokemiskt detekterbara variation mellan lindade prover från en råtta till en annan 5.

ve_content "> Sammanfattningsvis denna modell, med en längsgående, bipedicled flik sträcker 2,0-3,0 cm i bredd och en strategiskt placerad silikon plåt, är en pålitlig modell av långvarig vävnadsischemi. När användaren är skicklig på att använda tekniker för att skapa en konsekvent ischemisk sår, bör de kunna anpassa det till ytterligare åldrar och arter av gnagare (möss ingår). De excisionssår kan behandlas lokalt, eller systemisk behandling som används för att ytterligare utforska mekanismen (s) deltar i kroniskt sår bildning, förvärras inflammatoriska svar, onormal angiogenes och fördröjda sårtillslutning.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Sil-Tec medical grade sheeting Technical Products Inc. 500-3 nonreinforced, 0.01 inches in thickness
Mini Iris scissors, 8 cm, curved, SS World Precision Instruments #503671
Ethilon Nylon Sutures Ethicon 1964G black, size 4.0, PC-3 16 mm needles (3/8 circle)
Laser Doppler Imager Moor Instruments moorLDI2-IR Standard blood flow imager: http://us.moor.co.uk/product/moorldi2-laser-doppler-imager/8
ImageJ NIH free download http://rsb.info.nih.gov/ij/
Mastisol Henry Schein Cat # 7289210 Fisher Scientific NC9774929
Tegaderm Medical Specialties  3M1624W Fisher Scientific NC9922128

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ansell, D. M., Holden, K. A., Hardman, M. J. Animal models of wound repair: Are they cutting it. Experimental dermatology. 21, (8), 581-585 (2012).
  2. Dorsett-Martin, W. A. Rat models of skin wound healing: a review. Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 12, (6), 591-599 (2003).
  3. Davidson, J. M. Animal models for wound repair. Arch Dermatol Res. 290, (S1-11), (1998).
  4. Finn, G., Magnus, S. A., Tonny, K. Models for use in wound healing research: A survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue). Wound Repair and Regeneration. 8, (2000).
  5. Gould, L. J., Leong, M., Sonstein, J., Wilson, S. Optimization and validation of an ischemic wound model. Wound repair and regeneration : official publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 13, (6), 576-582 (2004).
  6. Loots, M. A., et al. Differences in cellular infiltrate and extracellular matrix of chronic diabetic and venous ulcers versus acute wounds. The Journal of investigative dermatology. 111, (5), 850-857 (1998).
  7. Schwartz, D. A., Lindblad, W. J., Rees, R. R. Altered collagen metabolism and delayed healing in a novel model of ischemic wounds. Wound Repair Regen. 3, (2), 204-212 (1995).
  8. Chen, C., et al. Molecular and mechanistic validation of delayed healing rat wounds as a model for human chronic wounds. Wound Repair and Regeneration. 7, (1999).
  9. Zhang, Q., Chang, Q., Cox, R. A., Gong, X., Gould, L. J. Hyperbaric oxygen attenuates apoptosis and decreases inflammation in an ischemic wound model. The Journal of investigative dermatology. 128, (8), 2102-2112 (2008).
  10. Zhang, Q., Gould, L. J. Hyperbaric oxygen reduces matrix metalloproteinases in ischemic wounds through a redox-dependent mechanism. The Journal of investigative dermatology. 134, (1), 237-246 (2013).
  11. Moor, A. N., et al. Consequences of age on ischemic wound healing in rats: altered antioxidant activity and delayed wound closure. Age (Dordrecht, Netherlands). 36, (2), 733-748 (2014).
  12. Roy, S., et al. Characterization of a preclinical model of chronic ischemic wound). Physiological genomics. 37, (3), 211-224 (2009).
  13. Biswas, S., et al. Hypoxia inducible microRNA 210 attenuates keratinocyte proliferation and impairs closure in a murine model of ischemic wounds. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 107, (15), 6976-6981 (2010).
  14. Winocour, S., Vorstenbosch, J., Trzeciak, A., Lessard, L., Philip, A. CD109, a novel TGF-beta antagonist, decreases fibrotic responses in a hypoxic wound model. Exp Dermatol. 23, (7), 475-479 (2014).
Demonstration av Rat Ischemisk hudsår Modell
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Trujillo, A. N., Kesl, S. L., Sherwood, J., Wu, M., Gould, L. J. Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model. J. Vis. Exp. (98), e52637, doi:10.3791/52637 (2015).More

Trujillo, A. N., Kesl, S. L., Sherwood, J., Wu, M., Gould, L. J. Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model. J. Vis. Exp. (98), e52637, doi:10.3791/52637 (2015).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
simple hit counter