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Medicine

Contrasto dinamico migliorato risonanza magnetica di un modello ortotopico cancro del pancreas mouse

Published: April 18, 2015 doi: 10.3791/52641

Introduction

L'obiettivo generale di questo metodo è quello di applicare dinamico di contrasto maggiore risonanza magnetica (DCE-MRI) per ortotopici xenotrapianti tumorali pancreatiche nei topi. DCE-MRI è un metodo non invasivo per valutare microcircolo in un tessuto bersaglio monitorando la variazione di MR contrasto per un certo periodo di tempo dopo l'iniezione. DCE-MRI è stata utilizzata per diagnosticare tumori maligni e per valutare la risposta del tumore alle varie terapie 1-4. Quantitative DCE-MRI ha presentato alta riproducibilità 5. Per quantificare i parametri farmacocinetici di un agente di contrasto MR in un tessuto bersaglio, tutte le immagini DCE-MR acquisite in diversi momenti e T1 mappa ottenute prima iniezione di contrasto devono essere coregistrata 6. Tuttavia, a causa di movimenti respiratori e peristaltiche nella zona addominale, quantitativa DCE-MRI ha applicazione limitata per i tumori gastrointestinali.

Ortotopico modelli tumorali pancreatiche sono stati utilizzati per valutareRisposta pancreatico-tumorale a seguito di terapie biologiche e chemioterapie 7,8. Modelli tumorali ortotopico sono considerate superiori ai modelli sottocutanei convenzionali, poiché il microambiente nel sito del tumore originale viene riflessa e risposta tumorale umano così alla terapia può essere previsto con maggiore precisione. Tuttavia, il pancreas del mouse si trova nel quadrante in alto a sinistra dell'addome, in modo quantitativo DCE-MRI di ortotopici xenotrapianti tumorali pancreatiche nei topi non è stata immediatamente attuata.

Abbiamo stabilito un protocollo di DCE-MRI dei tumori addominali nei topi fissando i tumori utilizzando una scheda di plastica ortogonalmente piegato per impedire il trasferimento di movimento della regione toracica 9. La pressione applicata da questa tavola è stato localizzato sulla zona addominale, e non ha portato a difficoltà respiratoria. Una tecnica automatizzata immagine coregistrazione è stato convalidato per DCE-MRI di organi addominali in una modalità senza respiro, ma esegue effectively solo quando le regioni obiettivo si muovono lentamente e regolarmente 10. La frequenza respiratoria di animali è variabile durante l'imaging, ritenuta in modo fisico nella zona addominale sarà necessario recuperare i parametri farmacocinetici affidabili ortotopici modelli pancreatiche di topo tumore. Abbiamo quantificato con successo i parametri farmacocinetici di un agente di contrasto MR in ortotopici xenotrapianti tumorali pancreatiche usando la scheda di plastica ortogonalmente piegato in DCE-MRI 11-13. Ecco a voi la procedura dettagliata di ortotopica modellazione tumore pancreatico, DCE-MRI dei xenotrapianti tumorali nei topi, e la quantificazione dei parametri farmacocinetici.

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Protocol

Tutte le procedure sono state approvate dalla cura e l'uso degli animali Comitato Istituzionale presso la University of Alabama a Birmingham.

Modellazione 1. ortotopico pancreatica Tumor mouse

  1. Cultura linee standard di cellule del pancreas-tumorali umane in mezzo modificato Eagle Dulbecco (DMEM) addizionato con siero fetale bovino 10%. Mantenere tutte le culture a 37 ° C in atmosfera umidificata con 5% di CO 2.
  2. Utilizzare 8-10 femminili gravi topi immunodeficienti combinate settimana-vecchio. Posizionare gabbie per gli animali a 12 ore di luce e 12 ore ciclo buio a temperatura ambiente (21 ± 2 ° C), e il 60% di umidità.
  3. Anestetizzare tutti gli animali con ventilazione con il 2% di isoflurano mescolato con l'ossigeno (2 L / min) durante l'intervento chirurgico. Confermare la profondità dell'anestesia dal pizzico punta reflex. Posizionare animali su una piastra elettrica (37 ° C), per mantenere la temperatura corporea. Applicare veterinaria pomata oftalmica sugli occhi per prevenire la secchezza mentre sotto anestesia. &# 160;
  4. Rimuovere il capello nel quadrante superiore sinistro dell'addome di ogni topo, e dare un farmaco analgesico (carpofen, 5 mg / kg di peso corporeo per via sottocutanea) nella zona. Applicare una soluzione betadine alla pelle esposta. Preparare strumenti chirurgici in autoclave.
  5. Fare un 1 centimetro incisione nella pelle e del peritoneo con iris forbici diritte. Rimuovere delicatamente il pancreas dall'addome con una pinzetta chirurgica.
  6. Inserire 28 G ago di una siringa da 0,5 ml insulina nella coda del pancreas e poi lentamente infusione una soluzione di 2,5 milioni di cellule di cancro pancreatico umano in 30 ml di DMEM. Verificare che una piccola bozza viene creato nella testa del pancreas dalla soluzione.
  7. Posizionare delicatamente il pancreas nuovamente dentro l'addome con una pinzetta chirurgica. Chiudere il peritoneo e la pelle in 1 strato con 2 interrotto 5-0 suture Prolene, e quindi terminare la anestesia. Non restituire un animale che ha subito un intervento chirurgico per la compagnia di altri animali fino alla completa guarigione.60; Rimuovere suture a 7 ~ 10 giorni dopo l'intervento chirurgico.
  8. Dare un'altra dose del farmaco analgesico (carpofen, 5 mg / kg di peso corporeo per via sottocutanea) a 24 ore dopo l'intervento chirurgico.
  9. Controllare la dimensione del tumore palpando l'area chirurgia utilizzando due dita. I tumori in genere si sentono più denso e più irregolare rispetto ai tessuti circostanti e organi. Di solito ci vogliono ~ 1 - 2 settimane per iniziare a sentirsi un tumore.
  10. Monitorare gli animali al giorno per i segni della malattia. Quando gli animali appaiono (normali comportamenti di governare e di evitamento mancanza) malati, abbiamo risolto utilizzando dislocazione cervicale mentre sotto anestesia.

2. Magnetic Resonance Imaging

  1. Applicare MRI quando le dimensioni del tumore è di circa 5-7 mm di diametro al solito 2 ~ 4 settimane dopo l'impianto di cellule. Utilizzare uno scanner MR dedicato alle piccole immagini animale o uno scanner MR clinico dotato di una bobina specializzata per piccoli animali di imaging.
    NOTA: Abbiamo utilizzato un piccolo animale scanner RM 9.4T con una combinazione di un volume risuonatore 1 H/ Trasmettitore e un ricevitore bobina di superficie (30 mm di diametro) (Bruker BioSpin Corp., Billerica, MA). Una bobina di superficie fornisce migliore rapporto segnale-rumore (SNR) 14.
  2. Preparare una risonanza magnetica agente di contrasto a base di gadolinio per iniettare ~ 0,1 - 0,2 mmol / kg per ogni animale in ~ 0,1 - 0,2 ml di PBS (tampone fosfato salino).
    NOTA: Abbiamo usato gadoteridolo e iniettato 0,2 mmol / kg in 0,15 ml di PBS in un periodo di 15 sec (0,1 ml / sec).
  3. Preparare un tubo micro-polietilene (lunghezza: 7,62 mm, diametro interno: 0,28 millimetri, diametro esterno: 0,64 millimetri). Inserire un ago 30 G (lunghezza 12,7 mm) in una estremità del tubo, e una punta smussata dell'ago 30 G (9,5 mm di lunghezza) nell'altra estremità. Collegare una siringa da 1 ml contenente mezzo di contrasto MR all'ago punta smussata, e spingere lentamente la siringa per riempire l'intero tubo con l'agente di contrasto MR.
  4. Anestetizzare gli animali utilizzano ventilazione con ~ 1 - 2% di isoflurano mescolato con l'ossigeno (2 L / min) per tutta la preparazione e l'imaging. Confermare la profondità di Anesthesia by pizzico punta reflex. Applicare veterinaria pomata oftalmica sugli occhi per prevenire la secchezza mentre sotto anestesia. Dilatare la vena della coda con una lampada di calore prima dell'inserimento dell'ago. Afferra la metà dell'ago 30 G con pinze Kelly, e inserirlo nella vena della coda. Tape sia la coda e il tubo su un foglio di plastica o di carta cartone (10 mm di larghezza x 100 mm di lunghezza) per mantenere la retta coda.
  5. Posto l'animale in posizione supina nel letto animale dotato di circolazione acqua calda (o aria calda) per regolare la temperatura corporea durante l'imaging. Impostare la temperatura sul letto a 37 ° C. Inserire una sonda di temperatura rettale per controllare la temperatura corporea durante l'imaging.
  6. Applicare una scheda di plastica ortogonale piegata nella zona addominale. Assicurarsi che il tumore si trova dietro l'estremità superiore della scheda, e poi tirare giù il bordo leggermente (~ 2 mm) per garantire il tumore e 'colto dal consiglio. Nastro il consiglio a letto animale saldamente.
  7. Tape à transduce pad respirazioner (SA Instrument, Inc., Stony Brook, NY) sul petto per monitorare la respirazione degli animali durante l'imaging. Inserire una bobina di superficie sulla sommità della regione tumorale, e nastro a letto animale saldamente. Premere il letto animale nello scanner MR per posizionare la regione tumorale al centro della bobina di volume (diametro interno 72 mm).
  8. Eseguire adattamento e di accordo sia per il ricevitore e trasmettitore, seguito da spessori.
  9. Inizia con una sequenza RM anatomica per individuare il tumore. Utilizzare una sequenza spin-echo (T2W) turbo T2-pesate per ottenere immagini assiali con i seguenti parametri di acquisizione. Tempo di ripetizione (TR) / tempo di echo (TE) = 3.000 / 34 msec, 128 x 128 a matrice, 30 x 30 mm campo visivo, il numero delle medie = 1, lunghezza del treno eco = 4, e 20 contigui 1 millimetro fette spesse in una modalità interlacciata per coprire l'intera regione tumorale (tempo totale della scansione: 1,6 min).
    NOTA: Dal momento che i tumori pancreatici ortotopici sono più difficili da trovarsi di quelli sottocutanei, locali convenzionaliimmagini zer hanno risoluzione inferiore non possono essere utili.
  10. Acquisire (T1W) immagini pesate in T1 con diversi angoli di vibrazione per recuperare T1 mappa. A questo scopo, utilizzare un gradiente echo approccio angolo multiflip con i seguenti parametri: tempo di ripetizione (TR) / tempo di eco (TE) = 115/3 msec, 128 x 128 matrice, un campo 30 x 30 mm di vista, il numero delle medie = 4, ~ 5-7 contigue 1 millimetro di spessore fette in una modalità interlacciata per coprire la regione tumorale, e sette angoli di vibrazione di 10, 20, 30, 40, 50, 60, e 70 (tempo totale della scansione per ogni angolo di vibrazione: 1 min).
    NOTA: Tuttavia, l'angolo multiflip approccio è efficace solo quando il campo B1 omogeneità è alta. Se no, mappe T1 può essere ottenuto con l'approccio TR multipla invece 15.
  11. Acquisire le immagini T1W prima e dopo gadolinio basato iniezione di contrasto MR. Utilizzare gli stessi parametri di acquisizione e la geometria per la mappatura T1 ma con l'angolo di vibrazione fisso di 30. Usa codifica lineare per garantire lo stato stazionario, quando si ottiene il centro di k-spazio, especially quando si utilizzano una breve TR e un angolo di vibrazione basso grado. Acquisire 5 immagini al basale prima iniezione di contrasto. Poi acquisire 40 immagini dopo l'iniezione di contrasto (tempo totale della scansione: 45 min). Utilizzare una pompa a siringa per iniettare agente di contrasto ad un tasso costante (0,01 ml / sec).
  12. Monitorare respirazione animale continuamente, e regolare la concentrazione isoflurano per mantenere la frequenza respiratoria di 50 - 100 respiri al minuto. Monitorare la temperatura corporea degli animali in tutta l'imaging.
  13. Dopo aver completato DCE-MRI, togliere l'ago e altre sonde, e mettere l'animale in una gabbia vuota letti con tovaglioli di carta. Massaggiare delicatamente la zona addominale inferiore. La gabbia deve essere posto metà sotto una lampada di calore per consentire all'animale di muoversi dentro e fuori del gradiente termico come recupera. Non lasciare un animale incustodito fino a quando non ha ripreso conoscenza sufficiente per mantenere decubito sternale.

3. Image Processing and Analysis

  1. Regi tumorali Segmento sulle immagini in T2w. In T2w immagini, l'intensità del segnale in regione tumorale è luminoso di quello dei tessuti circostanti, così il confine tumore può essere delineata manualmente.
    NOTA: tecniche di segmentazione semi-automatiche come soglia globale o contornatura attivo possono essere utilizzati 16,17, ma l'intensità sfondo uniforme devono essere corrette in particolare quando si utilizza una bobina di superficie.
  2. Creare T1 e densità protonica mappe. Nelle immagini T1W acquisite con una sequenza gradient echo, supponendo che il tempo di eco (TE) è molto inferiore a T2 * valore, il valore del pixel è determinata dalla
    Equazione 1
    dove S 0 è la densità protonica, T 1 è costante T 1 tempo di rilassamento, TR è tempo di ripetizione, e θ è un angolo di vibrazione. L'equazione (1) può essere riscritta per
    641eq2.jpg "/>
    quando S (θ) / sinθ viene sostituito con Y, e S (θ) / tanθ viene sostituito con X. L'equazione (2) è un'equazione lineare, e il suo coefficiente angolare e può essere utilizzato per recuperare T1 e S 0 valori, rispettivamente.
  3. Calcolare la concentrazione contrasto MR nelle immagini DCE-MR. Quando sulla base di contrasto MR gadolinio viene iniettato, T costante di tempo 1 relax è cambiata nel corso del tempo. Quindi, l'equazione (1) può essere riscritto per
    Equazione 3
    T 1 (t) è correlata con la concentrazione contrasto MR, C (t), come segue,
    Equazione 4
    dove R 1 è relassività longitudinale del mezzo di contrasto MR. Quindi, combinando le equazioni (3) e (4), la concentrazione di contrasto MR è determinata
    "Equazione
  4. Quantificare i parametri di farmacocinetica di MR contrasto agente. C p (t) presenta concentrazioni contrasto MR nel plasma sanguigno al tempo t dopo l'inizio iniezione di contrasto. C p (t) è detta funzione di ingresso arteriosa (AIF). Se AIF è disponibile, i parametri farmacocinetici di mezzo di contrasto MR possono essere calcolati
    Equazione 6
    dove C t (t) è la concentrazione contrasto MR in un tessuto bersaglio, v p è il volume del plasma sanguigno frazionale, v e è frazionata del volume extracellulare extravascolare, e K trans è costante trasferimento di volume. Costante di Flux, k ep, è pari a K trans diviso per v e. Se AIF non è disponibile, allora la regione modello di riferimento può essere utilizzato invece 18,19. La regione modello di riferimento si basa sul flusso limitato Kety modello 20 e usa la concentrazione contrasto in una regione di riferimento per eliminare la necessità di AIF come segue,
    Equazione 7
    dove C t, ROI (t), K trans, ROI, ev e, ROI sono concentrazione contrasto, trasferimento volume costante, e il volume extravascolare-extracellulare frazionata, rispettivamente, nella regione di interesse (ROI), mentre C t, RR (t), K trans, RR, ev e, RR sono quelli della regione di riferimento. Muscoli paravertebrali è spesso selezionato come regione di riferimento, e v e, RR in pa murinomuscolo ravertebral si presume essere costante a 0,08 21. Abbiamo usato la regione modello di riferimento.

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Representative Results

Cellule tumorali pancreatiche umane crescere con successo nel topo pancreas creazione di un tumore solido. La figura 1 mostra le fotografie di (A) un normale pancreas dove soluzione delle cellule tumorali viene iniettato, e (B) un mouse rappresentante recante un ortotopico xenotrapianto tumore pancreatico (MIA PaCa-2 ). Tumor si trova nel quadrante superiore sinistro dell'addome, accanto alla milza. Di solito ci vogliono 2-4 settimane per i tumori a crescere fino a 5-7 mm di diametro dopo l'impianto delle cellule.

Movimento di ortotopici xenotrapianti tumorali pancreatiche è stato sostanzialmente soppresso, anche se il movimento artefatto era presente in immagini RM di una certa portata. In T2W immagini MR, la deviazione standard di segnale RM in aria sopra la regione tumore era circa 2,5 volte maggiore quando le cellule tumorali pancreatiche sono stati impiantati ortotopicamente rispetto a quando un modello di tumore sottocutaneo è stato impiegato. Figura 2A mostra lo schema di una configurazione di DCE -la RM di un pancreati ortotopicac tumore xenotrapianto. Il cerchio arancione rappresenta il tumore, catturato dalla estremità superiore di un bordo di plastica ortogonalmente piegata. La Figura 2B mostra lo schema del bordo di plastica di dimensioni. La larghezza di bordo (30 mm) è stato progettato per essere lo stesso con la larghezza del letto animale per i topi. La lunghezza della tavola è stato progettato per essere abbastanza a lungo per applicare il nastro con fermezza. La profondità della punta pensione (4 mm) è stato progettato per 20 g di topi. La figura 2C mostra le immagini T2W RM (vista sagittale) di un mouse rappresentante recanti un ortotopico tumore pancreatico xenotrapianto (MIA PaCa-2). Tumore è indicato in un cerchio rosso tratteggiato, e il rientro indotto dalla scheda di plastica è indicato con una freccia bianca.

Quantitative DCE-MRI è applicato con successo per ortotopiche xenotrapianti di tumori pancreatici utilizzando la regione di riferimento (RR) modello, come descritto nell'equazione (7). Figura 3A mostra mappe di contrasto nella regione tumorale (scala di colore) a 1 minuto prima MR c ontrast (gadoteridolo) iniezione e alle 5 e 40 minuti dopo l'iniezione, rispettivamente, sovrapposte con immagini T2W RM (scala di grigi). Il mouse portava un MIA PaCa-2 tumore xenotrapianto ortotopicamente. Figura 3B mostra contrasto curve di aumento mediati nella regione tumorale (3 x 3 finestra) e regione muscolare paravertebrale (9 x 9 finestra) indicato con due quadrati bianchi, rispettivamente, in figura 3A. Figure 3C e 3D mostrano le mappe ep trans e K K, rispettivamente.

Figura 1
Figura 1. fotografici di (A) un normale pancreas iniettati con soluzione di cellule tumorali e (B) un ortotopico xenotrapianto tumore pancreatico in un mouse immunodeficienti. Tumore si trova nel quadrante superiore sinistro dell'addome, indicato con un cerchio bianco punteggiato.es / ftp_upload / 52641 / 52641fig1highres.jpg "target =" _ blank "> Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.

Figura 2
Figura 2. Schemi di DCE-MRI di un ortotopico xenotrapianto tumore pancreatico. (A) Schema di una installazione per DCE-MRI di un ortotopico xenotrapianto tumore pancreatico (arancione regione circolare). Un catetere viene inserito nella vena della coda di infondere agente di contrasto MR. (B) Schema di un bordo di plastica piegata ortogonalmente dimensioni. (C) T2W immagini MR (vista sagittale) di un mouse recanti un orthothopic xenotrapianto tumore pancreatico indicato con tratteggiata cerchio rosso, quando una scheda di plastica ortogonale piegato è stato applicato (indicato con una freccia bianca). Clicca qui per vedere un più ampio versisu questa figura.

Figura 3
Figura 3. Immagini DCE-MR e mappe paramatric di un ortotopico xenotrapianto tumore pancreatico. (A) mappe Contrasto a 1 minuto prima o alle 5 e 40 min dopo MR contrasto (gadoteridolo) iniezione. (B) le curve di aumento del contrasto media nella regione del tumore (3 x 3 finestra) e della regione del muscolo paravertebrale (9 x 9 finestra) indicata con 2 quadrati bianchi, rispettivamente, nella Figura 3A. (C) K mappa trans. (D) k ep mappa. Clicca qui per vedere una versione più grande di questa figura.

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Discussion

Abbiamo introdotto metodi dettagliati di modellazione ortotopico tumore pancreatico utilizzando topi immunodeficienti, DCE-MRI dei tumori addominali nei topi, e la quantificazione dei suoi parametri cinetici. In ortotopico modellazione tumore pancreatico, bisogna fare attenzione quando si inserisce un ago nella coda del pancreas. In caso di successo, le cellule saranno trasferiti alla testa del pancreas creare una piccola bozza. Quando si applica una scheda di plastica ortogonalmente piegato, è fondamentale per confermare che il tumore si trova sotto l'estremità superiore della scheda. Poiché il tumore pancreatico è vicina al diaframma, la scheda può non essere in grado di trattenere saldamente, soprattutto quando la dimensione del tumore è inferiore a 5 mm di diametro. Dopo l'imaging, la zona addominale deve essere massaggiato delicatamente finché l'animale è cosciente. Si raccomanda di non superare la imaging e tempo di preparazione totale per ogni animale più di 90 minuti al fine di prevenire il dolore addominale.

La dimensione della plasticabordo può essere necessario regolare nuovamente in base alle dimensioni dei tumori o animali. Se la dimensione del tumore è inferiore a 5 mm, i tumori non possono essere saldamente catturati dal consiglio ortogonalmente piegato con profondità di 4 millimetri e quindi artefatti da movimento può verificarsi in immagini RM. Anche se la dimensione animale è maggiore di 20 g, la profondità 4 millimetri potrebbe non essere sufficiente per tenere il tumore. Tuttavia, troppo alta pressione in addome può danneggiare il sistema nervoso addominale paralizzando la parte inferiore del corpo dell'animale.

Modellazione tumore pancreatico ortotopico nei topi utilizzando linee di cellule di cancro pancreatico umano standard, è stato utilizzato per studiare la risposta terapeutica dei tumori pancreatici. Tuttavia, tumore prendere rate (percentuale di che un animale avrà un tumore palpabile dopo l'impianto) e il tasso di crescita era fortemente dipendente dalle caratteristiche delle cellule tumorali, per cui si consiglia di iniziare con due volte più animali e selezionare la metà di loro cuscinetti dimensioni simili tumori. Dovrebbero essere esclusi i tumori di forma irregolare,poiché potrebbero rispondere ad una terapia diversa; l'irregolarità di forma può essere rilevato da palpazione di routine, ma ecografia fornisce una migliore valutazione 9. Alcune linee cellulari possono sviluppare metastasi solito nel fegato. Metastasi epatiche (MET) possono essere rilevate comunemente utilizzando l'imaging bioluminescente in cui sono state impiantate cellule luciferasi-positive o dissezione del fegato dopo animali sono morti. MET fegato accorciano la durata della vita degli animali, in modo che il programma di studio devono essere stabiliti di conseguenza.

Quantitative DCE-MRI è stato implementato con successo per un pancreas modello di mouse ortotopico tumore. Per quantificare i parametri farmacocinetici di mezzo di contrasto MR basato sul flusso limitato Kety modello 20, la funzione di ingresso arteriosa (AIF) deve essere disponibile. In questa applicazione, l'aorta addominale è all'interno del campo di vista, così fondo può essere ottenuto misurando direttamente la variazione della concentrazione contrasto MR nell'aorta addominale. Tuttavia, tha diametro interno del mouse dell'aorta addominale è inferiore a 1 mm (0,5 - 0,7 mm,) 22, e empiricamente la dimensione dei pixel deve essere almeno quattro volte più piccolo del diametro (0,125 mm) per evitare gravi effetto volume parziale. Inoltre, la frequenza di campionamento ideale di AIF è 1 - 2 sec 23. In MRI, risoluzioni spaziali e temporali compromesso con SNR. Pertanto è difficile da ottenere un fondo di investimento alternativo affidabile in DCE-MRI di topi. In alternativa, la regione di riferimento (RR) modello può essere utilizzato. Modello RR impiega i dati di enhancement in una regione di riferimento (tipicamente tessuto muscolare) per eliminare la necessità di AIF nella farmacocinetica parametro quantificazione. Tuttavia, il volume extracellulare extravascolare frazionale nella regione di riferimento deve presumere, che ha causato errore circa il 35% in uno studio (n = 9) 21. Tuttavia, il cambiamento del microcircolo tumorale dopo terapia può essere misurata con precisione, se la stessa regione di riferimento è selezionata in ogni momento.

24,25.

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
DMEM Invitrogen 11965-118
Fetal bovine serum Harlan Laboratories BT-9501
Betadine Purdue products 67618-153-01
5-0 Prolene sutures Ethicon 8720H
9.4T MR scanner Bruker Biospin Corporation BioSpec 94/20 USR
Gadoteridol Bracco Diagnostics Inc NDC 0270-1111-03
Micro-polyethelene tube Strategic Applications, Inc #PE-10-25
30 G blunt tip needle Strategic Applications, Inc 89134-194
Monitoring and gating system SA instruments, Inc Model 1030 This is an MR compatiable system to measure resiratory rating and body temperature of small animals at the same time.
Syringe pump New Era Pump Systems, Inc. NE-1600

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References

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Kim, H., Samuel, S., Totenhagen, J.More

Kim, H., Samuel, S., Totenhagen, J. W., Warren, M., Sellers, J. C., Buchsbaum, D. J. Dynamic Contrast Enhanced Magnetic Resonance Imaging of an Orthotopic Pancreatic Cancer Mouse Model. J. Vis. Exp. (98), e52641, doi:10.3791/52641 (2015).

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