Protocol
लार्वा के 1. तैयारी
- , हरकत या स्थिति वरीयता के लिए एक वांछित लार्वा का विश्लेषण मानक मक्खी भोजन 11 का उपयोग 10 परख करने के लिए वांछित उम्र के लिए मानक शर्तों के तहत लार्वा विकसित करने के लिए।
- सिल्क स्क्रीन ग्रेड नायलॉन एक कीप के ऊपर जाल खींच कर एक जाल फिल्टर बनाओ। रबर बैंड के साथ कीप गर्दन पर जाल सुरक्षित। एक बीकर में कीप रखें।
- विश्लेषण के लिए लार्वा को इकट्ठा करने के लिए, एक रंग-पूर्ण संस्कृति की बोतल से foraging लार्वा युक्त भोजन का स्कूप और एक तूलिका 10 के साथ जाल से सीधे व्यक्तिगत लार्वा का संग्रह, जाल फिल्टर से अधिक आरटी नल के पानी से धो लें।
परख ट्यूब्स 2. तैयारी
- परख ट्यूब प्लग करने के लिए तैयार करते हैं, ध्यान से एक 4% अगर जेल फोड़ा और 1.5 सेमी की गहराई तक एक पेट्री डिश में डाल देना। पशु संलग्न है जब इस ट्यूब के दोनों ओर के लिए एक प्लग प्रदान करेगा। 4% समाधान पी से लार्वा को रोकने के लिए पर्याप्त रूप से घना हैप्लग enetrating।
- ट्यूब स्वच्छ और लार्वा की प्रविष्टि करने के लिए स्पष्ट पहले कर रहे हैं सुनिश्चित करें। वे नहीं कर रहे हैं, तो यह दर्ज किया जा रहा से आंदोलनों ब्लॉक कर सकते हैं।
- लार्वा आंदोलन के लिए पर्याप्त नमी है सुनिश्चित करने के लिए गर्म पानी की एक छोटी राशि से युक्त एक निचोड़ बोतल तैयार करते हैं। ध्यान से एक सिंक की ओर आउटलेट ओरिएंट, बोतल पलटना और पिक ट्यूब से पानी को निकालने के लिए धीरे दबाओ।
- परख नली में बोतल आउटलेट डालें। संघनन की एक पतली परत ट्यूब की दीवार पर दिखाई देता है जब तक परख नली में पानी वाष्प देने के लिए बोतल निचोड़। वीडियो 1 नमी की एक उचित राशि के साथ एक ट्यूब में चलती एक लार्वा को दर्शाता है।
- ट्यूब में लार्वा को सील करने के लिए, पेट्री डिश से 1.5 सेमी मोटी अगर जेल को हटाने और एक अगर प्लग ट्यूब में डाला जा सकता है, ताकि अगर नीचे airflow की अनुमति के लिए एक जाल सतह पर जगह है। एक छोर में जेल के दो प्लग डालने के लिए दो बार जेल में परख ट्यूब के एक छोर दबाएं।
- एक PAINTB के साथ, भीड़ लगभग 1.5 इंच गहरा ट्यूब में एक लार्वा जगह है और अगर जेल में लार्वा निकटतम अंत दबाकर ट्यूब सील। जिसके परिणामस्वरूप दबाव विपरीत छोर से अगर जेल के दूसरे प्लग जबरदस्ती बाहर और ट्यूब के भीतर पशु सील होगा।
- प्लेस MB5 मल्टी बीम ड्रोसोफिला गतिविधि मॉनिटर (बांध) डिवाइस में ट्यूबों, और जानवरों सेंसरों की सीमा से परे ले जाया जा सकता है, ताकि ट्यूब 'के पदों पर समायोजित करें।
- ट्यूब परिवहन के दौरान डिवाइस की अवरक्त पढ़ने फ्रेम से बाहर स्लाइड नहीं है कि परख सुनिश्चित करने के लिए प्रत्येक ट्यूब जहां यह संपर्क रिकॉर्डिंग डिवाइस के आसपास पोटीन की एक अंगूठी बन्धन से जगह में ट्यूब पकड़।
3. मापने गतिविधि
- एक मशीन में रिकॉर्ड गतिविधि के कारण छाया, फ्लोरोसेंट रोशनी करने के लिए या प्रयोगशाला में तापमान परिवर्तनों के कारण हो सकता है कि गलत रीडिंग को रोकने के लिए। प्रणाली का सुझाव दिया व्यवस्था के लिए 5 चित्रा देखें।
- 20 डिग्री सेल्सियस (चित्रा 1 देखें) करने के लिए एक मशीन सेट करें। रिकॉर्डिंग के दौरान की वजह से गरमागरम प्रकाश स्रोतों से हस्तक्षेप करने के लिए झूठी रिकॉर्डिंग से बचने फ्लोरोसेंट इनक्यूबेटर लाइट बंद कर देते हैं और इनक्यूबेटर में रिकॉर्डिंग करते हुए एक अलग एलईडी प्रकाश स्रोत का उपयोग करने के लिए। Aberrantly सेंसर ट्रिगर नहीं करते कि प्रकाश की स्थिति सुनिश्चित करने के लिए किसी भी जानवरों के बिना एक परीक्षण प्रदर्शन करते हैं। इस परीक्षण के बाद नहीं दर्ज आंदोलन डेटा नहीं होना चाहिए।
- लार्वा परख के शुरू करने से पहले 5 मिनट के लिए 20 डिग्री सेल्सियस इनक्यूबेटर सेटिंग्स करने के लिए acclimate करने की अनुमति दें।
- वांछित रिकॉर्डिंग अंतराल (जैसे, 1 मिनट) बांध प्रणाली स्थापित करने, बांध प्रणाली रिकॉर्डिंग सॉफ्टवेयर कंप्यूटर 12 की मेजबानी और PSIU इंटरफ़ेस करने के लिए रिकॉर्डिंग कक्ष को जोड़ने के लिए पहले बांध सिस्टम फ़ाइल को खोलने के लिए डाउनलोड किया जाता है सुनिश्चित करते हैं।
- फिर डेटा सहेजा जाएगा, जिस पर यात्रा की रिकॉर्डिंग आवृत्ति, का चयन वरीयताओं को सेट करने के लिए अलग-अलग समय फ्रेम का चयन करने के लिए ऊपर या पढ़ने के अंतराल विकल्प नीचे क्लिक करें जो डेटा मेंसंग्रहीत किया जाएगा। उदाहरण के लिए, 1 घंटे के लिए 1 सेकंड से अंतराल बार पढ़ने का चयन करें।
- , डेटा रिकॉर्डिंग के लिए अलग-अलग पैरामीटर का चयन वरीयताओं को चुनें और फिर उत्पादन डेटा प्रकार के तहत इसी बॉक्स का चयन करने के लिए (मायने रखता है, चलता है, पदों और ध्यान केन्द्रित करना, 1 टेबल देखें)। प्रत्येक पैरामीटर ट्यूब के भीतर लार्वा गतिविधि का एक अनूठा विश्लेषण प्रदान करता है।
- रिकॉर्डिंग शुरू CAB6 टेलीफोन केबल का उपयोग कर बिजली की आपूर्ति इंटरफेस यूनिट (PSIU) को मॉनिटर कनेक्ट करने के लिए। एक बिजली के आउटलेट को PSIU कनेक्ट करें। हरी बत्ती उपयुक्त कनेक्शन का संकेत होगा।
- डेटा रिकॉर्डिंग के लिए एक Macintosh या Windows पीसी के लिए एक यूनिवर्सल सीरियल बस (USB) केबल के माध्यम से PSIU कनेक्ट करें। स्वचालित रूप से डेटा रिकॉर्डिंग शुरू करने के लिए कंप्यूटर पर बांध SystemMB1v6x प्रोग्राम खोलें।
- वांछित संग्रह समय पूरा होने पर, छोड़ो का चयन करें, और उसके बाद बांध गतिविधि स्क्रीन पर अब छोड़ दिया; डेटा तो स्वचालित रूप से बांध सिस्टम डेटा के अंतर्गत सहेजा जाएगा। इस डेटा फाइल ले (जैसे, 1 की निगरानी) और खींचें एक अलग फ़ोल्डर में। वे बाद में कार्रवाई की जा सकती है, ताकि इस बांध सॉफ्टवेयर से कच्चे डेटा की दुकान है।
प्रसंस्करण के लिए डेटा की तैयारी 4. (बांध filescan)
- एक समझ प्रारूप में कच्चे डेटा की प्रक्रिया में बांध filescan आवेदन खोलें और इनपुट डेटा फ़ोल्डर का चयन करें। फिर डेटा फ़ोल्डर और इच्छित फ़ाइल चुनते हैं, और स्कैन विकल्प का चयन करें। अन्त में वांछित पढ़ने की अवधि के लिए बिन लंबाई का चयन करें। इस ऑपरेटर द्वारा निर्धारित मापदंडों में कच्चे डेटा का आयोजन होगा और इस कार्यक्रम के उस विशेष श्रेणी में एकत्र डेटा रिपोर्ट करेंगे।
- (निगरानी में गिना जाता है, चलता रहता है, ध्यान केन्द्रित करना) वांछित गति सेटिंग का विश्लेषण करने के लिए उत्पादन डेटा प्रकार का चयन करें। अतिरिक्त रीडिंग मेनू के तहत, बिन में चुनिंदा राशि (इस बिन लंबाई चयनित सिस्टम पढ़ने के अंतराल से अधिक होता है तो)।
- उचित रूप से फ़ाइल का नाम और बचाने के लिए। फ़ाइल कदम 3.9 से फ़ोल्डर के रूप में एक ही स्थान में संग्रहीत किया जाएगा।
- पहले से बचाया गया था कि फ़ाइल (4.3 चरण) खोलने के लिए, औसत चलता रहता है, इस प्रक्रिया को एक स्प्रेडशीट कार्यक्रम में एक मेज उत्पन्न करने के लिए चरण 4 से उत्पन्न कच्चे डेटा एकत्र करने के लिए, और पाठ आयात विज़ार्ड विंडो प्रकट होता है, जब चुनिंदा खत्म खोलने के लिए आदेश में एक स्प्रेडशीट प्रारूप में डेटा फ़ाइलों।
नोट: डेटा का विश्लेषण के प्रकार पर निर्भर करता है, स्प्रेडशीट अलग ढंग से पढ़ा जाएगा। प्रत्येक व्यक्ति पढ़ने ट्यूब एक नामित पत्र प्राप्त करेंगे, जबकि आमतौर पर, अध्ययन के समय अवधि संख्यानुसार दर्ज किया जाएगा मॉनिटर चलता है या मायने रखता है मापने के लिए। स्प्रेडशीट में डेटा को देखते समय, कॉलम परख ट्यूब 1-16 क्रमशः के लिए स्लॉट का प्रतिनिधित्व करते हैं केजेड। पंक्तियों एकत्र आंकड़ों अंक का प्रतिनिधित्व करते हैं। - चालें 1 मिनट के अंतराल में 20 मिनट के लिए एकत्र किए गए थे, तो उदाहरण के लिए, चलता रहता है / मिनट और अन्य माप की औसत संख्या की गणना करने के लिए 20 पंक्तियों औसत।
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Representative Results
चित्रा 1 सात अलग तापमान पर लार्वा हरकत में अंतर का पता लगाने के लिए निगरानी उपकरण का उपयोग कर, 1118 डब्ल्यू नियंत्रण तीसरे instar लार्वा के तापमान प्रतिक्रिया का अध्ययन, से परिणाम से पता चलता है। लार्वा धोया और ऊपर वर्णित के रूप में बांध गतिविधि डिवाइस में रखा है, और वांछित तापमान सेट करने के लिए एक मशीन में रखा गया था। रिकॉर्डिंग शुरू होने से पहले तंत्र फिर 5 मिनट के लिए पर्यावरण के लिए acclimate करने के लिए अनुमति दी गई थी। प्रत्येक लार्वा को व्यक्तिगत रूप से एक 20 मिनट की अवधि में हरकत और प्रति मिनट चाल की औसत संख्या के लिए विश्लेषण किया गया था हर जानवर के लिए गणना की और 32 जानवरों के प्रत्येक सेट के लिए औसतन किया गया था। डेटा का विश्लेषण किया और एक स्प्रेडशीट प्रोग्राम का उपयोग कर रेखांकन किया गया। तापमान एक 20 डिग्री सेल्सियस पर इस प्रवृत्ति में तोड़ने के लिए और 25 डिग्री सेल्सियस के लिए छोड़कर, 5 डिग्री वेतन वृद्धि में 5-35 डिग्री सेल्सियस से तदनुसार वृद्धि हुई है के रूप में लार्वा काफी बढ़ रही गतिविधि का प्रदर्शन किया।
मतभेद cou के सत्यापित करें किएलडी एक नियंत्रण और पहले hypoactive, निष्क्रिय लार्वा (iav 1) के रूप में वर्णित एक उत्परिवर्ती परीक्षण किया गया के बीच पता लगाया जा। डाटा 32 जानवरों में से प्रत्येक के लिए चालें / मिनट के रूप में विश्लेषण किया गया और एक औसत फिर गणना की गई। चित्रा 2 में दिखाया गया है, विश्लेषण निष्क्रिय लार्वा एक नियंत्रण की तुलना में काफी कम मोबाइल थे कि इंगित करता है। वे तीसरे instar लार्वा की तुलना में बहुत छोटे होते हैं जबकि 20 मिनट परख के प्रत्येक मिनट में तीसरे instar लार्वा की चित्रा 3। गतिविधि के रूप में दिखाया, पहली और दूसरी instar लार्वा की गतिविधि की अवधि के दौरान अपेक्षाकृत लगातार बने रहने के लिए दिखाया गया था, यह भी औसत दर्जे का था ( चित्रा 4)।
1118 लार्वा हरकत डब्ल्यू चित्रा 1. 5 डिग्री सेल्सियस से अलग तापमान दर्ज किया गया था -। 35 डिग्री सेल्सियस पूर्वी वायु कमानएच स्तंभ सेट के बीच में औसतन प्रति मिनट व्यक्ति चाल के साथ 32 तीसरे instar जानवरों की औसत गति का प्रतिनिधित्व करता है। * सभी का औसत 10 डिग्री सेल्सियस को छोड़कर एक दूसरे से काफी अलग हैं और 15 डिग्री सेल्सियस (पी = .116) (विभिन्न पत्र एक महत्वपूर्ण अंतर, छात्र टी परीक्षण से संकेत मिलता है)।
काफी कम गतिशीलता नियंत्रण की तुलना में 20 डिग्री सेल्सियस। Iav 1 लार्वा प्रदर्शनी में निष्क्रिय (iav 1) लार्वा की तुलना में चित्रा 2. तीसरे instar नियंत्रण लार्वा।
चित्रा प्रत्येक लार्वा चरण के लिए 20 डिग्री सेल्सियस। एन = 32 पर एक 20 मिनट की रिकॉर्डिंग के अंतराल पर प्रथम, द्वितीय और तृतीय instar लार्वा की गतिविधि के 3. मापन।
20 मिनट की रिकॉर्डिंग के अंतराल के प्रत्येक मिनट में होने वाली चाल की औसत संख्या प्रदर्शित चित्रा 4. हिस्टोग्राम। 32 तीसरे instar लार्वा 20 डिग्री सेल्सियस पर assayed थे। लाल रेखा प्रति मिनट चाल की संख्या पूरे 20 मिनट के अंतराल के लिए औसतन प्रतिनिधित्व करता है।
PSIU इंटरफ़ेस इकाई और एक डेस्कटॉप कंप्यूटर के लिए ड्रोसोफिला गतिविधि मॉनिटर सेट अप और अपने संपर्क illustrating चित्रा 5. आरेख। इनक्यूबेटर के अंदर दर्शाया गया है, लेकिन इनक्यूबेटर रिकॉर्डिंग बंद किया जा रहा है के दौरान किया जाता है।
| विवरण | पैरामीटर |
| रिकॉर्ड डेटा हर बारएक लार्वा एक किरण पार, और अतिरिक्त मायने रखता दर्ज कर रहे हैं लार्वा चलता रहता है अगर एक भी किरण के भीतर है। | गिनता |
| एक मक्खी अलग बीम के बीच repositions जब रिकॉर्ड डेटा केवल, यह एक किरण के भीतर आंदोलन रिकॉर्ड नहीं है। | चालें |
| एक रिकॉर्डिंग अंतराल पर एक दूसरे पर जानवरों की स्थिति रिकॉर्ड। यह आंकड़ा एक परख के पाठ्यक्रम पर प्रत्येक संवेदक पर बिताए समय के एक समारोह के रूप में स्थिति वरीयता का पता चलता है। | ध्यान केन्द्रित करना |
| यह सेटिंग पशु आंदोलन के दौरान ट्रिगर है सेंसर, जो यह दर्शाता है, ट्यूब के भीतर जानवर की सामान्य स्थिति का विश्लेषण करती है। | स्थान |
| यह सेटिंग एक निर्धारित समय सीमा के दौरान एकत्र किए गए आंकड़ों डेस्कटॉप कंप्यूटर पर सहेजा जाता है, जिस पर आवृत्ति निर्धारित करता है। | रिकॉर्डिंग अंतराल |
Measu की तालिका 1. विवरणrement के मानकों (गिनता है, चलता रहता है, ध्यान केन्द्रित करना और स्थितियां)।
पूर्व वीडियो 1. बांध प्रणाली परख ट्यूब ऑपरेटिंग डिवाइस में प्रविष्टि करने के लिए। नमी सांस से संक्षेपण द्वारा प्रदान की जाती है। इस स्तर पर तैरने लगते हैं या तैरने के लिए पशु के कारण के बिना अध्ययन की अवधि के दौरान लार्वा हरकत को बनाए रखने के लिए पर्याप्त है। इस वीडियो को देखने के लिए यहां क्लिक करें।
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Discussion
ड्रोसोफिला लार्वा की गतिविधि जीनोटाइप 8, 13 साल की उम्र और परिवेश के तापमान 2 सहित कारकों की एक किस्म से प्रभावित है। अत्यधिक विस्तृत विश्लेषण करने में सक्षम शक्तिशाली videographic विधियों हरकत 5 का अध्ययन करने वाले उन लोगों के द्वारा विकसित किया गया है, विस्तार के इस स्तर गतिविधि के बुनियादी मानकों का निर्धारण करने के लिए चाहते हैं के लिए ज़रूरत से ज़्यादा हो सकता है। यहाँ वर्णित विधि, कई प्रयोगशालाओं में उपलब्ध है कि एक युक्ति है, संचालित करने के लिए आसान है कार्यरत अत्यधिक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य परिणाम उत्पन्न करता है, और यहां तक कि जिसका प्राथमिक अनुसंधान ध्यान केंद्रित हरकत नहीं है उन लोगों के लिए प्रबंध है। उदाहरण के परिणाम इस परख अलग तापमान (चित्रा 1) और अलग जीनोटाइप के (चित्रा 2) के अधीन लार्वा में गतिशीलता में महत्वपूर्ण परिवर्तन का पता लगाने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि प्रदर्शित करता है।
35 डिग्री सेल्सियस, उनके - लार्वा 5 डिग्री सेल्सियस से लेकर तापमान पर मापा गया जबगतिविधि 20 डिग्री सेल्सियस और 25 डिग्री सेल्सियस (चित्रा 1) के बीच प्रवृत्ति में एक को तोड़ने के लिए छोड़कर, तापमान के साथ वृद्धि हुई है। यह foraging जल्दी तीसरे instar लार्वा ठेठ 25 डिग्री सेल्सियस तापमान संस्कृति की +/- 2 डिग्री सेल्सियस के भीतर तापमान पसंद करते हैं कि Ainsley और सहकर्मियों द्वारा दिखाया गया है। लार्वा मध्य तीसरे instar चरण भटक दर्ज हालांकि, जब वे कुछ हद तक कूलर तापमान 2 पसंद करते हैं। यही कारण है कि खोज assayed जानवरों के कुछ हिस्से कूलर तापमान में और अधिक सक्रिय है, और कम तो कम से भटक चरण में थे और सुझाव है कि तीसरे instar लार्वा के लिए हरकत गतिविधि 25 डिग्री सेल्सियस से अधिक 20 डिग्री सेल्सियस अधिक है कि अवलोकन के साथ संगत है 25 डिग्री सेल्सियस के सामान्य संस्कृति तापमान।
इस विधि को सादगी, निष्पक्षता और मजबूत throughput के प्रदान करता है, लेकिन सीमाएं हैं। मौजूदा सेट अप जनसंपर्क नहीं है, क्योंकि ऊपर वर्णित अनुप्रयोगों भाग में, एक अपेक्षाकृत कम समय सीमा पर होने वाली assays के प्रतिनिधित्वएक खाद्य स्रोत के साथ ovide लार्वा। पर्याप्त पोषण सुनिश्चित करना समय की विस्तारित अवधि से अधिक गतिविधि में परिवर्तन का अध्ययन करने के लिए या लंबी अवधि में circadian ताल को मापने के लिए आवश्यक होगा। 4% अगर प्लग hypoxic शर्तों का सामना कर लार्वा में परिणाम सकता है जो कक्ष और बाहरी वातावरण के बीच गैस विनिमय सीमित कर सकते हैं। हालांकि इस अवधि के प्रत्येक मिनट के दौरान लार्वा की प्रति मिनट औसत चाल से विश्लेषण किया गया है, जब लार्वा रिकॉर्डिंग अवधि में गतिविधि में कोई बदलाव को दिखाने के लिए प्रकट नहीं किया था, क्योंकि एक 20 मिनट परख अवधि के भीतर गतिविधि को प्रभावित करने के लिए प्रकट नहीं होता है (चित्रा 4) ।
डिवाइस के रिकॉर्ड की स्थिति लगातार यह उद्धृत गैर स्वचालित तरीकों की तुलना में अधिक गति पर कब्जा करने में सुधार का प्रतिनिधित्व करता है, क्योंकि हालांकि कुछ गति का पता लगाने से बच नहीं करता है। बहुत जानवरों के छोटे आंदोलनों इस उपकरण से एक प्रतिक्रिया ट्रिगर नहीं हो सकता है, और लार्वा एक इन्फ्रा के भीतर एक परिधीय फैशन में स्थानांतरित कर सकते हैंगलत ढंग से कम रीडिंग में जिसके परिणामस्वरूप, पड़ोसी मुस्कराते हुए तोड़ने के बिना लाल किरण। इस प्रकार की त्रुटि सभी उपचार समूहों में होने की उम्मीद होगी हालांकि, बाद से, यह भ्रामक परिणाम कारण की संभावना नहीं है। तीसरे instar लार्वा इस विश्लेषण के प्राथमिक ध्यान केंद्रित कर रहे हैं, उपकरण के रूप में अच्छी तरह से (चित्रा 3) बहुत छोटे पहली और दूसरी instar लार्वा की गति को मापने के लिए सक्षम है। जैसी कि उम्मीद थी, छोटे जानवरों में प्रति मिनट दर्ज की चाल की संख्या में बड़ा तीसरे instar जानवरों की तुलना में कम है।
इस डिवाइस के लिए उपयोग करता है की पूरी रेंज अभी तक प्रदर्शन किया गया है, लार्वा शामिल अध्ययन के लिए इस उपकरण का उपयोग करता है में विविधता सकता है कि अन्य रूपांतरों की एक किस्म है। उदाहरण के लिए, डिवाइस ट्यूब की एक निर्धारित क्षेत्र में बिताए समय का प्रतिनिधित्व करता है जो एक 'ड्वेल' माप की अनुमति देता है। विभिन्न ड्रोसोफिला में कार्यरत जब यह लार्वा एक टैक्सियों बहुमूल्य जानकारी प्रदान कर सकता हैssays। ट्यूब खड़ी बजाय क्षैतिज का उन्मुख होते हैं, इसलिए है कि उसकी तरफ से उपकरण रखने से, एक लार्वा geotaxis उपाय कर सकता है। Phototaxis मापने के लिए, एक प्रकाश ढाल लार्वा प्रकाश या अपनी अनुपस्थिति के लिए एक प्राथमिकता है कि क्या परीक्षण नलियों में स्थापित किया जा सकता है। कीमोटैक्सिस का अध्ययन करने के लिए, एक परीक्षण रासायनिक तो के लिए उनकी वरीयता का निर्धारण या रासायनिक से बचाव प्रकट हो सकता है अगर प्लग और लार्वा की स्थिति में से एक पर रखा जा सकता है।
निगरानी प्रणाली पूर्व परख सेटअप के दौरान सभी मापदंडों का चयन करके तालिका 1 में संक्षेप विभिन्न गति मापदंडों का विश्लेषण की अनुमति देता प्रयोगकर्ता परख के बाद का विश्लेषण करने के लिए जो पैरामीटर चुन सकते हैं, (कदम 3.6 देखें)। किसी भी सेटिंग चयनित नहीं है, हालांकि, अगर उस डेटा पद हॉक विश्लेषण के लिए उपलब्ध नहीं होगा। यह समय की प्रत्येक चयनित अवधि के बाद, डेटा वर्तमान में गिना जाता है पर जमे हुए हैं और मेजबान कंप्यूटर को बचाया है कि ध्यान दिया जाना चाहिए। डाटा संग्रह करने के लिए तो फिर सेट करता हैइस अवधि के बाद शून्य और समय अंतराल डेटा बिंदुओं की एक श्रृंखला प्रदान करने, फिर से शुरू होता है। एक मैन्युअल डेटा रिकॉर्डिंग समाप्त करने के लिए छोड़ चाहिए।
इस विधि से जुड़े भविष्य के अध्ययनों से ध्यान केन्द्रित करना पैरामीटर और इसके विभिन्न अनुप्रयोगों के उपयोग पर ध्यान दिया जाएगा। इसके अलावा यह पढ़ाई भोजन उपलब्ध कराने के लिए और एक अधिक गैस पारगम्य सामग्री 14 के लिए अगर प्लग का आदान प्रदान से, इस तरह के दैनिक अध्ययन के रूप में समय की एक लंबी अवधि में घटित करने के लिए अनुमति होगी कि एक प्रोटोकॉल का विकास संभव हो सकता है। सूखे की स्थिति हरकत 15 को बाधित कर के रूप में नमी का स्तर, के रूप में अच्छी तरह से नियंत्रित करने की आवश्यकता होगी। वर्तमान में, इस प्रोटोकॉल प्रयोगात्मक स्थितियों की एक किस्म के तहत लार्वा गतिविधि के बुनियादी मानकों का मूल्यांकन करने के लिए एक सटीक, सरल, लागत प्रभावी तरीका प्रदान करता है।
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Drosophila Activity Monitor, Multibeam, 16 tubes, including wires | TriKinetics Inc. | MB5 | |
| Power Supply Interface for Activity Monitor | TriKinetics Inc. | PSIU24 | |
| Glass 80 x 5 mm tubes for Activity Monitor (100) | TriKinetics Inc. | PGT 5x80 | |
| DAMsystemMB1v6x Data Acquisitions Software for Macintonsh OSX (Intel) | www.trikinetics.com | free download | |
| DAMFileScan 108x software for Macintosh | www.trikinetics.com | free download | |
| USB software (PSIUdrivers.zip). | www.trikinetics.com | free download | |
| DAMSystem Notes 308 | www.trikinetics.com | free download | |
| Zeiss Stemi 2000C- Stereo Microscope | Spectra Services | SP-STEMI2000C-BS | |
| Carbon Dioxide | Maine Oxy | anaesthesia | |
| Fly Pad | Genesee | 59-114 | surface for sorting anaesthetized flies |
| Small paint brush | Winsor & Newton | #2 ROUND | or similar, used for sorting anaesthetized flies |
| Silk Screen Printing Mesh (160) | msj-gallery.com | SM160W63-3YD | pore sized used in this protocol was ~ 0.1 mm |
| Tegosept | Genesee | 20-258 | preservative |
| Ethanol (190proof) | Pharmco | 111000190 | used to dissolve Tegosept |
| 6 oz Square Bottom Bottle (PP) | Genesee | 32-130 | |
| "Flugs" for Plastic Fly bottles | Genesee | 49-100 | |
| Drosophila Vials, Wide (PS) | Genesee | 32-117 | |
| Flugs for wide plastic vials | Genesee | 49-101 | |
| Yellow Degerminated Corn Meal | Gold Medal | ||
| Drosophila agar | LabScientific | FLY 8020 | |
| Baker's Yeast - Red Star | King Arthur Flour | 1270 | |
| Granulated Sugar - Extra Fine | Domino |
References
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