Abstract
A halitose é uma queixa comum envolvendo problemas sociais e comunicacionais em seres humanos e também afeta o pet-proprietário relacionamento. Neste cruzamento avaliação clínico randomizado controlado por placebo, que avaliou a eficácia de um suplemento dietético se dedica a melhorar a halitose crônica em 32 cães de diferentes raças e idades. Este protocolo descreve como se avaliar a presença de compunds orais suphur voláteis, por exemplo, mercaptano de metilo, sulfureto de hidrogénio e sulfureto de dimetilo, por meio de um dispositivo de cromatografia de gás portátil acoplado com uma seringa, o qual foi utilizado para recolher o ar, e um software dedicado, o que permite ao operador monitorizar cada concentração do composto no decurso de cada medição, num relativamente curto período de tempo (8 min).
Uma modificação significativa dos parâmetros de halitose foi observada após 30 dias desde o início do tratamento (p <0,05), enquanto um efeito de longa duração ainda foi observada mesmo a 20 dias afTer a suspensão do tratamento. Cromatógrafo de gás portátil, que também é largamente utilizado na prática clínica, pode ser, portanto, utilizados para confirmar e controlar halitose em seres humanos e animais. Mesmo que as espécies humanas e animais apresentar algumas diferenças, esta terapia inovadora e alternativa para a gestão de halitose pode ser estendido a prática clínica humana como uma abordagem dietética adjuvante.
Introduction
Halitose, também conhecida pelo termo halitose, é uma queixa comum que causa constrangimento nas relações sociais interpessoais um tanto quanto o mau cheiro corporal 2. Embora a maioria dos dados epidemiológicos sobre a halitose é limitado em precisão e sensibilidade devido a uma auto-avaliação subjetiva, estudos relatam que 30-50% da população é afetada por esta patologia 3-6. Alguns estudos também têm demonstrado que é mais prevalente em homens do que em mulheres, independentemente da idade com uma relação de 3: 1 e a proporção é ligeiramente maior em pessoas com mais de 20 anos 7.
A halitose pode ser encenado dependendo de sua etiologia: tipo 1 (oral), tipo 2 (via aérea), tipo 3 (gastroesofágico), tipo 4 (transmitida pelo sangue) e tipo 5 (subjetiva); no entanto, foi levantada a hipótese de que poderia ser potencialmente halitose considerada a soma destes tipos, em qualquer combinação, sobreposto ao fisiológico presente odor em saúde (Tipo 0) 8,9. Scully et ai., que amplamente descrito e caracterizado aetiopathogenesis e gestão da halitose, relatou que, em alguns pacientes, tem uma etiologia extra-oral e, em algumas delas, as anomalias metabólicas estão envolvidos 10. Os autores apontaram que os compostos voláteis de enxofre (VSC) e alguns fatores predisponentes, por exemplo, má higiene oral, hipossalivação, aparelhos dentários, gengival e doença periodontal e doença das mucosas, são os principais responsáveis pelo mau odor. Além disso, eles propuseram a melhoria da saúde oral, terapias anti-mau cheiro e mau odor counteractives como uma abordagem de base convencional. Além disso, eles também proposto o uso de probióticos e vacinas contra bactérias que causam mau odor.
Companheiros humanos e animais, ou seja. cães e gatos, podem ser afetados por reações adversas relacionadas com os alimentos que podem envolver vários sistemas como o gastroenteric, cutânea, otológica, ocular, urinário e respiratório 11-13. No entanto, vários estudos em animais têm apontado que a câmara nasal é um dos sistemas mais envolvidos onde tartar 14, estomatite 15, e 16 halitose são, muitas vezes presente. Além disso, as bactérias que causam mau hálito pode ser transmitida de companheiros animais para os seres humanos 17. Iwanicka-Grzegorek quantificada compostos de enxofre e baixa massa molecular aminas na saliva de 84 pacientes que sofrem de halitose e 40 controlos saudáveis. Mais de 80% dos pacientes pertencentes ao grupo halitose relataram ter animais de estimação na infância (p <0,001) e mais de 70% ainda possuía um animal de estimação (P <0,001).
Portanto nutrição pode ser usado para gerenciar halitose. Além disso, a nutrição desempenha um papel fundamental no desenvolvimento dos dentes, a integridade do tecido oral e gengiva, resistência óssea e até mesmo da boca e dentes gestão da doença 18. Com base nessas considerações, a Associação Italiana para a doença de Investigação Oncológica (AIRMO) Centro, Corremos um crossover avaliação clínica placebo-controlado randomizado envolvendo 32 cães que sofrem de halitose, a fim de investigar a eficácia de um suplemento dietético vs. um alimento animal de estimação disponível no mercado.
Protocol
Esta avaliação clínica foi planejado em conformidade com a legislação europeia (86/609 / UE) eo protocolo experimental foi aprovado pelo Comitê de Ética e Bem-Estar Animal do Centro de Pesquisa AIRMO (Milão, Itália).
1. Os cães e Alimentação Seleção
- Aleatoriamente dividir 32 cães de diferentes raças (7,01 ± 0,20 anos [média ± erro padrão da média (SEM)]; 34,05 ± 1,47 kg [média ± SEM]; 12 homens e 20 mulheres) que sofrem de halitose crônica em 2 grupos, proporcionando-lhes quer com o suplemento dietético ou o placebo, ao longo de um período de 30 dias.
- Certifique-se de que cada cão recebe a dose apropriada de suplemento dietético ou placebo com base no peso do animal em quilogramas, de acordo com as instruções do fabricante. (Tabela 1).
- Depois de um tratamento de 30 dias, garantir que ambos os grupos têm 10 dias de lavar, onde todos os animais são alimentados com placebo. No fim deo período de lavagem para fora, o regime de alimentação para os dois grupos são invertidas de modo a que o grupo de controle recebe o suplemento dietético para mais 30 dias e o grupo de tratamento recebe o placebo.
- Dois controlos veterinários realizados em cães de ambos os grupos, uma antes e outra após o tratamento de 30 dias.
2. O Cromatógrafo de Gás
Nota: O cromatógrafo de gás é um dispositivo portátil que mede os compostos voláteis de enxofre (VSC), sulfureto de hidrogénio, metil mercaptano e dimetil sulfureto, que são os principais factores causadores da halitose, fornecendo informação sobre a concentração de cada gás medido. Medindo cada VSC ajuda a identificar a causa da halitose e avaliar a eficácia do tratamento.
- Usando o procedimento descrito nas secções 3 e 4, examine compostos voláteis de enxofre (VSC) antes do tratamento com o suplemento dietético (tempo 0), 10 dias após o tratamento (tempo de 10), 20 dias pós-tratamento (tempo20) e no final do tratamento (tempo de 30).
3. Cromatógrafo a Gás Ambiente
- Ligar o interruptor principal na parte de trás da unidade. Nota: A tela inicial exibe a palavra "modo de medição".
- Pressione a tecla ENTER para selecionar o modo de medição.
Nota: WAIT é exibido na tela eo tempo de espera necessário para estabilizar o dispositivo de medição é exibido ao lado da palavra "COUNTER". Quando o tempo de espera chegou ao fim, o dispositivo está pronto para medir automaticamente ea lâmpada indicadora READY acende.
4. Cães Respiração Amostragem e Análise
- Execute o software Data Manager.
- Clique em "Medição" depois de confirmar que "Estado atual" está "pronto para medir"
- Digite o ID e clique em "Selecionar". Nota: Uma mensagem é exibida no canto superior direito da janela.
- Se a mensagem exibida é & #8220; Injectar gás bucal ", iniciar a medição.
- Se a mensagem exibida é "O dispositivo está sendo preparado", e depois esperar.
- Por meio de uma seringa descartável de 1 ml, recolher o ar da boca do cão, colocando a seringa na comissura labial do cão, lentamente puxando o êmbolo e retirar a seringa da boca do cão.
- Ajustar o volume da seringa de 1 ml.
- Coloque a agulha fornecida à extremidade da seringa e, depois de abrir a tampa, ejectar a amostra para a entrada da unidade principal do dispositivo, empurrando o êmbolo.
Nota: Medidas iniciado automaticamente ea lâmpada indicadora READY apaga. A medição é concluída em 8 min e o resultado é exibido automaticamente (display pode ser alterado para "Chromatogram"). A janela Acórdão aparece ao completar a medição. Histórico de medições e dados medidos podem ser exibidos. - Aperte ENTER para armazenar o i resultadosnto da unidade.
Nota: Os dados estão expressos em unidades padrão de partes por bilião (ppb) e / ou 10 ng / ml. - Em seguida, esperar um minuto para estabilizar o dispositivo e realizar uma nova medição. Nota: No final deste intervalo de tempo, a lâmpada se acenda o que significa que o dispositivo está pronto.
Representative Results
Ambos placebo e suplemento dietético foram ajustados de forma a proporcionar a ingestão nutricional e calórico semelhante e para satisfazer a exigência nutricional de cães adultos, em particular. Sua composição analítica foi: proteína bruta 26%, óleos e gorduras brutos 13%, fibra bruta 2,5%, ash bruto 8% e metabolizado Energia (EM) 3464 kcal / kg. Energia metabolizável foi calculado de acordo com as orientações nutricionais para ração animal completo e complementares para cães e gatos por The Pet Food Industry Federation Europeia. Placebo foi composta de carne de frango desidratado, arroz, gordura animal, ovos desidratados, de aveia, polpa de beterraba seca, sementes de linho, hidrolisado de proteínas animais, óleo de peixe, óleo vegetal, carbonato de cálcio, levedura de cerveja seca, fosfato monocálcico, cloreto de sódio. Suplemento dietético diferiu do placebo quanto à presença de substâncias ativas contidas no frio pressionado comprimidos em forma de coração especiais (patente n Europeia. EP 2526781) incluído no i alimento completona percentagem de 6-7%, e para a fonte de proteína, farinha de peixe em vez de alimentação de frango. Os comprimidos continham própolis (0,0161%), Salvia officinalis (0,0087%), clara de ovo (lisozima 0,0078%), extrato de laranja desidratada (bioflavonóides 0,0077%), Thymus vulgaris (0,0127%), Ribes nigrum (0,0040%).
Os dados foram analisados, apresentados como médias ± erro padrão da média e verificada a sua normalidade usando o teste de normalidade D'Agostino-Pearson. Um múltiplo teste t foi utilizado para comparar mudanças na VSCs marcar pelo acompanhamento versus o valor basal para cada modalidade de tratamento.
A Figura 1A mostra uma diminuição significativa na concentração de sulfureto de hidrogénio em animais tratados, a partir de um valor de linha de base de 0,43 ng / ml a 0,06 ng / ml, após o tratamento de 30 dias. A Figura 1B mostra uma diminuição significativa da concentração de metil mercaptano nos animais tratados, a partir de um baselinevalor de 0,30 ng / ml a 0,06 ng / ml, após o tratamento de 30 dias. A Figura 1C mostra uma redução significativa na concentração de sulfureto de dimetilo em animais tratados, a partir de um valor de linha de base de 0,28 ng / ml a 0,13 ng / ml, após 30 dias de tratamento .
A Figura 2A mostra uma diminuição significativa na concentração de sulfureto de hidrogénio, a partir de um valor de linha de base de 0,37 ng / ml a 0,10 ng / ml, após o tratamento de 20 dias. Na Figura 2B uma tendência semelhante é observado também em metil-mercaptano, que mostra uma redução significativa da concentração do composto, a partir de um valor de linha de base de 0,24 ng / ml a 0,05 ng / ml, após o tratamento de 30 dias. Quanto ao sulfureto de dimetilo, a Figura 2C, uma diminuição significativa da concentração do composto, a partir de um valor de linha de base de 0,32 ng / ml a 0,11 ng / mL, foi observada após 30 dias de tratamento.
| PESO CORPORAL | MONTANTE suplemento dietético por dia (g) |
| 1 - 10 | 30-180 |
| 11 - 20 | 190-300 |
| 21 - 35 | 310-455 |
| 36 - 50 | 465-595 |
Tabela 1: quantidade diária de alimento fornecido aos cães.
Figura 1: (A) Representação Gráfica de sulfeto de hidrogênio Concentração Tendência dos tratados (n = 16) vs Controle (n = 16) Grupo durante os 30 dias período de tratamento; * P <0,05; (B) Representação Gráfica de metilmercaptano Concentração Tendência dos tratados (n = 16) vs Controle (n = 16) Grupo durante os 30 dias período de tratamento; * P <0,05; (C)Representação gráfica da concentração da Trend Dimetil Sulfeto no tratado (n = 16) vs Controle (n = 16) Grupo durante os 30 dias período de tratamento; * P <0,05.
Figura 2: (A) Representação Gráfica de sulfeto de hidrogênio de concentração Tendências em tratados (n = 16) vs Controle (n = 16) Grupo após os 10 dias Lave Fora Período; * P <0,05; (B) Representação Gráfica de metilmercaptano Concentração Tendência dos tratados (n = 16) vs Controle (n = 16) Grupo após os 10 dias Lave Fora Período; * P <0,05; (C) Representação Gráfica de dimetil sulfeto de concentração Tendências em tratados (n = 16) vs Controle (n = 16) Grupo após os 10 dias Lave Fora Período; * P <0,05.
Discussion
A halitose é um problema comum em cães, representando uma questão psicossocial que afecte significativamente o pet-proprietário relacionamento 19. Mau hálito vem do metabolismo microbiano de ambos os substratos proteicos exógenos e endógenos dentro da cavidade oral 20 o que resulta na produção de composto de enxofre volátil, e é agravada por outros fatores, incluindo gengivite aguda necrosante ulcerativa, local de extracção contaminado, restos sob aparelhos dentários, úlceras, tonsilloliths e baixa 21-23 higiene. Os principais agentes responsáveis pela produção de mau hálito são as bactérias Gram-negativas 24 e seu aumento está relacionado a um espessamento da placa dentária 25. Uma boa higiene oral, juntamente com dietas específicas pode reduzir a carga microbiana ao nível fisiológico, reduzir a halitose e evitando gengivite e doenças periodontais que tenham efeitos desagradáveis no respiração 26.
Esta visão é apoiada por nossa study que mostra que, após 10 dias de ingestão de suplemento dietético, uma melhoria global foi observada em 29 dos 32 cães (90%) apresentando um mau odor moderateto grave e, no final da avaliação, 19 dos 29 cães (65% ), que conseguiram uma melhoria adquiriu uma condição fisiológica estável em relação a concentração dos CSVs.
Nossa investigação aborda a questão muito intrigante do possível a administração de um suplemento dietético para cães com mau hálito por basicamente a introdução de proteínas de peixe hidrolisada, sábio, Ribes nigrum L., Tomilho, lisozima, própolis, bioflavonóides e vitamina C na programação nutricional diária. Estes compostos, são amplamente usadas na medicina tradicional, foram já provou ser eficaz tanto in vitro como in vivo.
Especificamente, as proteínas de peixe foram escolhidos com base em estudos cromatográficos anteriores que indicaram a presença de grandes quantidades de sulfureto de hidrogénio, metanotiol, etanotiol, sulfureto de dimetilo, sulfureto de etileno e em proteínas de carne 27. Literatura estudos demonstraram também uma actividade antimicrobiana de sálvia e Ribes nigrum L. Streptoccocus mutans contra o qual é conhecido por ser um dos agentes patogénicos orais (juntamente com Porphyromonas gingivalis e Cândida albicans), responsáveis pelo mau hálito e de cáries dentárias formação 28-30. Os bioflavonóides e vitamina C têm sido reconhecidos como os agentes anti-inflamatórios e bacteriostáticos que limitam o crescimento de certas bactérias associadas com doenças periodontais 31.
Quanto própolis e tomilho, uma redução na produção de mau odor de todo incubadas saliva foi demonstrado por Sterer et al. 32 A actividade bacteriostática de própolis tem sido amplamente demontrated na literatura, variando de limitação da quantidade de placa bacteriana 33-37 para a diminuição da tolerância de microorganismos para pH ácido 38 39. Além disso, a própolis foi comprovadamente eficaz na redução da cárie dentes em ratos que limitam o número de microorganismos, diminuindo a síntese de glucanas insolúveis, e atividade de glicosiltransferase 40.
O nosso estudo apresenta algumas limitações, tais como a sensibilidade do instrumento, se comparada com outras técnicas disponíveis (por exemplo, instável nanoestrutura WO3 hemitube assistida por plasma de O 2 por modificação da superfície com funcionalização de material à base de grafeno 41, SnO 2 electrospun nanofibras sensibilizadas com óxido de grafeno reduzida nanoplacas 42, benzoil-DL-arginina-naftilamida (BANA) de teste 43, Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC) e 44-Extracção Gás Cromatografia de Fase Sólida Micro / Espectrometria de Massa (SPME-GC / MS 45). Por outro lado, o dispositivo utilizado no presente trabalho pode permitir, por instance, coleta de dados rápida para alcançar rapidamente um diagnóstico precoce da hepatite viral B, que também é caracterizada por elevados níveis de sulfeto de dimethile 46 ou para estabelecer um estado de doença sistêmica e / ou respiratória (como pneumonia, enfisema pulmonar e bronquite) que são caracterizado por sulfureto de hidrogénio elevada, mercaptano de metilo e sulfureto de dimetilo 47 níveis.
Durante o procedimento, percebemos que o tempo disponível para coletar o sopro da boca de um cão foi um pouco menor do que o requerido (alguns segundos contra 30 seg sugeridos pelo fabricante). Este problema foi superado com sucesso, repetindo cada medida três vezes. Um passo crítico durante o experimento foi coleção respiração. A fim de não deixar o cão com a boca aberta por muito tempo sem danificar a seringa, que colocou a seringa na comissura labial do cão, a fim de recolher de forma segura a respiração.
Como observadoem seres humanos, mais aplicações desta técnica será a prevenção de doenças relacionadas com a respiração, isto é, sistémica e respiratória, em cães e mais geralmente em animais de estimação. Em resumo, nosso estudo mostrou que o suplemento dietético foi eficaz na redução da halitose crônica em cães. Os nossos resultados também pode ser de acordo com o que é proposto por Porter et ai., Que a hipótese de uma possível interacção entre a halitose e do tracto gastrointestinal o que sugere que uma terapia para a halitose com origem oral pode também ter algum efeito sobre a composição de bactérias do intestino que é conhecido por ser responsável, em alguns casos, para a produção de compostos sulfurados voláteis 48. No entanto, a disbiose também pode ocorrer depois de um uso massivo de antibióticos 49, ou carne proveniente de pecuária intensiva e comumente usado na maioria dos animais e alimentos humanos 50,51.
Disclosures
Os autores não têm nada a revelar.
Acknowledgments
Esta avaliação não foi apoiada por doações. Nós thankSanypet Spa (Pádua, Itália) para gentilmente fornecer o suplemento dietético e placebo utilizadas no presente estudo. Agradecemos também a San Patrignano comunitário que participou no estudo gentilmente pelo fornecimento de todos os cães.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| OralChroma CHM-1 | FIS Inc. | 10061285 | portable gas cromatograph |
| FORZA10 Oral Active | SANYpet .Sp.a. | dietary supplement | |
| InJ/Light-100 PCS | Rays S.p.a. | INJ5171112 | disposable syringes |
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