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Neuroscience

कवकरूप papillae का उद्देश्य विश्लेषण के लिए डेनवर papillae प्रोटोकॉल

doi: 10.3791/52860 Published: June 8, 2015

Summary

यहाँ हम डिजिटल तस्वीरों से कवकरूप अंकुरक घनत्व को मापने के लिए एक प्रोटोकॉल उपस्थित थे। इस विधि मिलर और गन्ने का (1990) से कवकरूप papillae पर मूल वर्णनात्मक काम में प्राथमिकता और उद्देश्य विशेषता मेट्रिक्स बनाता है।

Abstract

डेनवर papillae प्रोटोकॉल का गोल स्कोरर के बीच लगातार स्कोरिंग सुनिश्चित करने के लिए कवकरूप papillae (एफपी) की विशेषताओं को परिभाषित करने और प्राथमिकता करने के लिए एक दिचोतोमोउस कुंजी का उपयोग करने के लिए है। इस प्रोटोकॉल स्वाद ताकना घनत्व के लिए एक प्रॉक्सी के रूप में एफपी का उपयोग कर स्वाद अनुसंधान के अंतिम दो दशकों से उत्पन्न हो गई है कि एक की जरूरत के बंद बनाता है। , गोल लाइटर, बड़े, और ऊंचा दाग: एफ पी घनत्व ऐतिहासिक मिलर और गन्ने के 1990 उनकी आकृति विज्ञान के अभिलक्षण का उपयोग कर विश्लेषण किया गया है। इस काम में, लेखकों की जरूरत एफपी आकृति विज्ञान की सख्त परिभाषाओं को रेखांकित किया जाना है कि forewarned। कार्रवाई करने के लिए इस कॉल के बावजूद, ऊपर का पालन साहित्य मिलर और गन्ने की मूल कृति का हवाला देते जारी रखने के अधिकांश अध्ययन के साथ दुर्लभ हो गया है। नतीजतन, एफपी घनत्व की रिपोर्ट के स्वाद के प्रति संवेदनशीलता में एफपी की भूमिका पर प्रतिकूल निष्कर्ष करने के लिए योगदान कर सकते हैं, छोटा सा नमूना आकार के साथ संयुक्त, अत्यधिक चर रहा है और है। स्वाद लैब के जेनेटिक्स यह स्पष्ट इनकॉन का पता लगायागिनती में sistency और एफपी की सूचना दी गुणों की, लेकिन सभी नहीं, स्कोरर व्यक्तिगत रूप से अलग ढंग से इन विशेषताओं के महत्व को प्राथमिकता पाया गया कि और एक अंकुरक कुछ था जब के लिए कोई मार्गदर्शन किया था। इस आत्मीयता का परिणाम एक ही जीभ छवि का अत्यधिक चर एफपी मायने रखता है। डेनवर papillae प्रोटोकॉल आगे परिभाषित करता है और मिलर और गन्ने के आगे रख दिया विशेषताओं के महत्व को प्राथमिकता कि एक दिचोतोमोउस कुंजी के उपयोग के माध्यम से इस परिणाम के उपाय करने के लिए विकसित किया गया है। प्रस्तावित विधि स्वाद और पोषण संबंधी अध्ययन के क्षेत्र में शोधकर्ताओं के लिए एफ पी यों के लिए एक मानक तरीका बनाने में मदद कर सकता है।

Introduction

Papillae जीभ की सतह पर दिखाई समान हैं। कवकरूप (एफपी), पत्ते के रूप में, circumvallate, और filiform: papillae के चार प्रकार के होते हैं। Filiform papillae जीभ की सतह पर फैले हुए हैं, वहीं circumvallate केवल जीभ की पीठ पर स्थानीयकृत हैं, और पत्ते के रूप में पक्षों पर पाए जाते हैं। इसके विपरीत, एफपी जीभ के सामने की ओर स्थित हैं। वे filiform करते हुए नहीं स्वाद को नियंत्रित करने की क्षमता है क्योंकि एफपी, पत्ते के रूप में, और circumvallate papillae स्वाद माना जाता है। स्वाद रासायनिक tastants का पता लगाने और मस्तिष्क में एक स्वाद सिग्नल में उत्तेजनाओं transducing के लिए जिम्मेदार कोशिकाओं के समूहों रहे हैं। लार और खाद्य अणुओं स्वाद अणुओं तो स्वाद कोशिकाओं को सक्रिय करने की क्षमता है, जहां स्वाद है pores बुलाया उद्घाटन के माध्यम से स्वाद में दर्ज करें।

पहले जीभ का एक ऊतकीय अध्ययन में मनाया के रूप में दिलचस्प है, स्वाद कली घनत्व में बड़ी व्यक्तिगत मतभेद हैं18 शवों (मिलर, 1988) से 1। जीवन में videomicroscopy का उपयोग कर स्वाद pores और कवकरूप papillae की पहचान करने के लिए एक विधि विकसित करने के लिए मिलर और गन्ने का (1990) के नेतृत्व में जो उचित बढ़ाई, प्रकाश व्यवस्था, और धुंधला तकनीक का उपयोग करते समय खुद को जीभ की सतह पर दिखाई नहीं देते हैं स्वाद, हालांकि, स्वाद है pores दिखाई दे रहे हैं मनुष्य 2। प्रयोगशालाओं की संख्या अभी भी फोटोग्राफी और छोटी या नहीं बढ़ाई उपयोग करते हुए, अपने मूल videomicroscopy तकनीक को संशोधित किया है। कवकरूप papillae की तुलना में कल्पना करने के लिए बहुत आसान कर रहे हैं लेकिन, जब से इन बाद तकनीकों का उपयोग करते हुए pores के हैं, प्रयोगशालाओं स्वाद pores के स्थान पर कवकरूप papillae की गिनती के लिए बदल गया। ऐसा करने में, यह कवकरूप अंकुरक घनत्व कई कवकरूप papillae स्वाद pores के होते हैं या कलियों 3 स्वाद नहीं है, भले ही स्वाद ताकना घनत्व के लिए एक उचित प्रॉक्सी उपाय है कि माना जाता है; न केवल एफपी अधिक दिखाई और circumvallate और पत्ते के रूप में papillae की तुलना में पहुंच रहे हैं, लेकिन उनकी छवि पर कब्जा कम ती हैमुझे videomicroscopy 2,4 के वैकल्पिक पद्धति के माध्यम से स्वाद ताकना विश्लेषण की तुलना में काफ़ी। 1990 में, मिलर और गन्ने का ताकना घनत्व आगे इस शारीरिक संबंध के अलावा Bartoshuk एट अल। 5 में पुष्टि की थी जो एफपी घनत्व 3 के साथ सहसंबद्ध होते हैं कि स्वाद को खोजने के लिए इस तकनीक का इस्तेमाल किया है, मिलर और गन्ने का यह भी पाया कि ऊपरी में 8 व्यक्तियों स्वाद ताकना घनत्व वितरण के आधे से भी सुक्रोज, सोडियम क्लोराइड, और के रूप में काफी अधिक तीव्र अन्य 8 व्यक्तियों 3 की तुलना में propylthiouracil (सहारा) मूल्यांकन किया गया। Bartoshuk एट अल द्वारा बाद में काम करते हैं। (1994) 42 विषयों 5 में एक suprathreshold प्रोप स्वाद तीव्रता और कवकरूप अंकुरक घनत्व के बीच संबंध है, साथ ही स्वाद ताकना घनत्व, मनाया। यह सुविधाजनक तरीका जिनकी जीभ कई papillae है विषयों कड़वा tastants phenylthiocarbamide सहित कई tastants, करने के लिए एक मजबूत प्रतिक्रिया प्रकाश में लाना है कि रिपोर्टिंग प्रभावशाली पढ़ाई करने के लिए नेतृत्व (पीटीसी) और सहारा 6,7।

पीटीसी और सहारा बार बार एक व्यक्ति के स्वाद संवेदनशीलता phenotype और उनके जीनोटाइप के बीच स्पष्ट संबंध की वजह से इस्तेमाल किया अच्छी तरह से शोध tastants हैं। जनसंख्या अध्ययन जीन, TAS2R38 की समयुग्मक अप्रभावी diplotype लोग हैं, जो जीन 8-10 के प्रमुख या विषमयुग्मजी संस्करण के वाहक से भी आराम मिलता है एक काफी कम संवेदनशीलता दिखाई है। आर्थर एल फॉक्स पीटीसी 11 के लिए "स्वाद अंधापन" की अपनी खोज की घोषणा करते हैं तो यह पैतृक घटना पहली बार 1932 में सूचना मिली थी। इन कड़वा यौगिकों स्वाद करने में सक्षम लोगों के बीच, स्वाद की तीव्रता excruciatingly कड़वा 6 कहीं भी थोड़ा अप्रिय से भिन्न हो सकते हैं की सूचना दी। TAS2R38 से नहीं समझाया जा सकता है कि विचरण के लिए खाते में करने के लिए, सिद्धांत यह जीभ 4 पर एफपी के घनत्व के लिए जिम्मेदार ठहराया जा सकता है कि आगे रखा गया था।

स्वाद अनुसंधान रूप में आगे बढ़े, महसूसडी एफ पी और कड़वा स्वाद संवेदनशीलता की भूमिका के विषय में इस सिद्धांत के आसपास सोचा के दो स्कूलों में विभाजित किया गया था। कई अध्ययनों एफपी घनत्व प्रोप में एक कारक 4,6,12,13 संवेदनशीलता है कि मूल दावे की पुष्टि की है, भूमिका 10 को दोहराने के लिए एक असमर्थता रिपोर्टिंग, सबूत यह खंडन करने के लिए पाया गया है कि एक छोटे, लेकिन महत्वपूर्ण आकस्मिकता कर दिया गया है, 14,15,16। Delwiche एट अल। (2001) की प्रवृत्ति अत्यधिक चर रहा है कि चेतावनी दी है; एफपी घनत्व विषयों भर में कड़वाहट संवेदनशीलता में मतभेद के लिए नहीं समान रूप से खाते करता है, और 7 सहारा कम से कम एक उदारवादी संवेदनशीलता के साथ विषयों के लिए ही स्पष्ट हो गया था। एफपी यों के लिए पर कम कड़ाई से परिभाषित मिलर और गन्ने का विधि का उपयोग करने के लिए इसके अलावा, यह फिशर द्वारा आयोजित ऊदबिलाव बांध वंश अध्ययन 15 के अपवाद के साथ एट अल।, ऊपर पढ़ाई का सबसे छोटा सा नमूना था कि नोट के लिए महत्वपूर्ण है भी पर असंगत निष्कर्षों में योगदान कर सकते हैं, जो आकारस्वाद में एफपी की भूमिका।

संक्षेप में, मिलर और गन्ने की मौलिक कार्यप्रणाली पेपर (1990) में, लेखकों filiform papillae डाई को अवशोषित और नीले रंग की बारी है, जबकि एफपी गुलाबी रहते हैं क्योंकि एफपी यों के लिए नीले रंग की जीभ से सना हुआ। उन्होंने कहा, "गोल गुलाबी संरचनाओं व्यास में लगभग 0.5 मिमी" के रूप में 2 एफ पी वर्गीकृत। लेखकों भिन्नता पहले से ही साहित्य में उल्लेख किया है कि आगे विश्लेषणात्मक कार्य के लिए इस विधि का उपयोग करने से पहले, एफपी विशेषताओं और अधिक सख्ती से परिभाषित किया जाना चाहिए कि सलाह दी और निष्कर्ष निकाला है जबकि 2, "अलग विषय आबादी, विभिन्न विधियों, और विभिन्न जांचकर्ताओं के कारण हो सकता है," उनके अनुसंधान एफपी 17,18 गोल कर रहे हैं कि आमतौर पर स्वीकार कर लिया विशेषताओं, बड़े 2, गुलाबी करने के लिए नेतृत्व या 2 लाइटर, और 4 ऊंचा दाग चुका है। अंकित मूल्य पर लिया है, इन विशेषताओं बहुत सीधे आगे दिखाई देते हैं। स्वाद लैब की आनुवांशिकी में, से मुलाकात के उपयोग (लैब या लैब मिल गया)विशेषताओं उपस्थित थे के विभागाध्यक्ष, सभी नहीं क्वालीफाइंग में स्कोरर 'व्यक्ति के प्रयास से जटिल और उपरोक्त विशेषताओं जब कुछ के महत्व को प्राथमिकता, लेकिन किया गया था। इन जटिलताओं बहुत बड़ा papillae के बीच में गुलाबी दिखाई दिया कि छोटे papillae शामिल; इस प्रकार रंग भिन्नता के आधार पर वर्गीकरण को नष्ट करने नीले रंग की डाई को अवशोषित पूरी जीभ; बजाय दौर की आयताकार papillae; और जीभ एक ही छवि के व्यापक रूप से विभिन्न एफपी मायने रखता है रिपोर्टिंग स्कोरर के लिए योगदान दिया है, जो सभी के उन्नयन में कोई भिन्नता है, कर रही है।

विश्लेषण में इन बदलावों सही और निष्पक्ष एफपी को परिभाषित करने और स्कोर करने के लिए एक प्रोटोकॉल, आत्मीयता तुच्छ आमतौर पर स्वीकार किए जाते हैं एफपी विशेषताओं के लिए कोई अपवाद की पहचान करने और अंततः वसीयत करने के क्रम में साहित्य की समीक्षा करने के लिए हमें का नेतृत्व किया।

सबसे पहले, एफपी आकार एक गोल, मशरूम की तरह संरचना 17,18 के रूप में साहित्य में वर्णित है। को छोड़कर हालांकि, उल्लेखनीयआयनों भी उल्लेख किया गया था। मिलर शब्द "कवकरूप" मशरूम के आकार का नहीं कर रहे हैं एक मिथ्या नाम और है कि कई एफपी है लेकिन आकार और आकृति विज्ञान 18 में व्यापक रूप से भिन्न हो सकते हैं पर बल दिया। मेलिस एट अल। एक ही दिशा में एफ पी व्यास दूसरी दिशा में 19 में से कम से कम दो मानक विचलन रह गया था, जहां (2013) भी, "विकृत" पर विचार किया गया है कि कई papillae का वर्णन किया। इसके अलावा, चेंग और रॉबिन्सन धुंधला द्वारा एफपी का संकेत करते हैं, वे से उपस्थिति 20 में लम्बी को फ्लैट में सबसे ऊपर बताया गया है कि पाया। इसके बाद के संस्करण अपवादों को ध्यान में रखते हुए, गोल किया जा रहा है एक एफ पी के लक्षण वर्णन और मशरूम के आकार का प्रतीत होता है परिभाषा संकीर्ण भी।

दूसरा, एफपी रंग नीले रंग के साथ जीभ धुंधला के बाद 7 "एक नीले रंग की पृष्ठभूमि के खिलाफ गुलाबी हलकों" के रूप में वर्णित किया गया है। हल्का धुंधला साहित्य भर एफपी की सबसे लगातार कसौटी था हालांकि यह अभी भी एक समान पात्रता नहीं था। चेंग और ; रॉबिन्सन पहचान मुश्किल और 20 अनिश्चित बना रही है, एफपी हमेशा हल्के से दाग नहीं किए गए मनाया। यह जीभ को अलग ढंग से डाई को अवशोषित और इसके विपरीत कई जीभ पर स्पष्ट है, जबकि दूसरों को तुरंत नीले रंग की डाई 21 में से किसी का पता लगाने खोना है, जबकि कुछ कोई विशिष्टता के साथ पूरी तरह से नीला हो गया है कि उसके बाद दिखाई देता है।

तीसरी विशेषता, एफपी आकार, 0.5 मिमी से 0.97 मिमी 6,18 से लेकर कागजात के बीच काफी अनुरूप था। साहित्य में मिलर जीभ की पृष्ठीय पूर्वकाल पर papillae के दो आकार पर्वतमाला रहे थे कि उल्लेख किया। एक छोटे व्यास के साथ papillae ज्यादातर filiform 18 थे, जबकि बड़े व्यास के साथ papillae, मुख्य रूप से कवकरूप और शंक्वाकार papillae थे। हालांकि, ऊदबिलाव बांध वंश अध्ययन 21 के अपवाद के साथ, आकार एक संरचना साहित्य में एक एफपी है, तो यह निर्धारित करने के लिए प्रकट नहीं किया था, लेकिन पहले से ही "कवकरूप" के रूप में वर्गीकृत papillae के लिए प्रदान किया गया।

मिलर filiform और कवकरूप papillae के बीच उस भेद से बाहर बताया है, हालांकि जीभ के मार्जिन के पास इस मापदंड का उपयोग करते समय _content "> अंत में, ऊंचाई 4 विशेषता चौथे एफपी के रूप में मुश्किल है सूचीबद्ध है। उन्होंने कहा कि पदोन्नति में बहुत विविध है कि एफ पी के दो उदाहरण दिया एक और ऊंचाई में कम से कम 0.1 मिमी था, लेकिन अभी भी स्पष्ट रूप से 18 मनाया गया है कि दो स्वाद है pores था, जबकि ऊंचाई में 0.8 मिमी की जा रही है। यह अवलोकन भी पीछा किया और Shahbake एट अल द्वारा पुष्टि की गई। 4

इन परिभाषाओं और उनकी सूचना दी अपवाद स्वाद क्षेत्र में लंबे समय एफपी और मिलर और गन्ने से सामान्य रूप से प्रयुक्त प्रोटोकॉल की कमियों निस्र्पक में विसंगति को मान्यता दी गई है कि पता चलता है। दरअसल, मिलर और गन्ने का आगे एफपी 2 की सुविधाओं को परिभाषित करने के लिए क्षेत्र का आह्वान किया। हम स्कोरर विशेषताओं के लिए अलग अलग वजन दे रही है और जब पैप अलग तरह से उनके महत्व को प्राथमिकता गया धारणा है किillae इस तरह के एक अंकुरक आकार में बड़े और मशरूम था जब के रूप में हर कसौटी को पूरा करने में विफल रहा है, लेकिन नीले दाग। यह पूर्व में प्रकाशित अध्ययन के जांचकर्ताओं संभावना है, छोटा सा नमूना आकार के साथ संयुक्त, विभिन्न परिणामों को इस विधि के प्रयोग से आने के लिए खाते सकता है जो एक ही किया था कि समझाया गया था।

मिला लैब उद्देश्य माप का उपयोग करने के लिए प्रत्येक विशेषता को परिभाषित करता है और विश्लेषण में पूर्वता लेता है जो इंगित करने के लिए विशेषताओं प्राथमिकता है कि एक दिशानिर्देश के विकास के द्वारा एफपी कार्यप्रणाली में इस अंतर को संबोधित किया। इस विधि डेनवर papillae प्रोटोकॉल (डीपीपी), जीभ के डिजिटल तस्वीरों से सटीक और repeatable मायने रखता है सुनिश्चित करने के लिए एफ पी के स्पष्ट और विशिष्ट विशेषताओं के साथ एक दिचोतोमोउस कुंजी है। डीपीपी पहले से इस्तेमाल किया मिलर और गन्ने का तरीका है, इस प्रकार अलग-अलग व्याख्या को दूर करने और एफपी घनत्व का विश्लेषण करते समय अधिक अनुरूप परिणाम सुनिश्चित करने के मानकीकरण के लिए एक प्रस्तावित विधि है। ऐसा करके, डीपीपी घ अधिक विश्वास करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता हैस्वाद में एफपी की भूमिका etermine।

विषयों का लिया जीभ छवियों इस अध्ययन का सच विषय हैं जो लैब के नागरिक वैज्ञानिकों (स्कोरर) द्वारा विश्लेषण किया गया। नागरिक वैज्ञानिकों की लैब के मुख्य मध्य 80 के लिए 16 से उम्र में लेकर समुदाय के सदस्यों (वर्ष) शामिल है। 2012 में संग्रहालय द्वारा कमीशन एक योगात्मक मूल्यांकन रिपोर्ट विज्ञान के क्षेत्र में एक मजबूत हित होने के रूप में और दो-तिहाई एक वैज्ञानिक अनुशासन 22 में एक कॉलेज की डिग्री अर्जित होने के साथ नागरिक वैज्ञानिकों का वर्णन है। उम्मीदवार नागरिक वैज्ञानिकों वर्तमान में सफलतापूर्वक संग्रहालय में अनुभवी स्वयंसेवकों के साथ एक साक्षात्कार प्रक्रिया को पूरा करने, और संग्रहालय की स्थायी स्वास्थ्य प्रदर्शनी, अभियान स्वास्थ्य, में एक परीक्षण अवधि से गुजरना होगा, मुँह के शब्द के माध्यम से भर्ती कर रहे हैं वे एक स्थिति में के लिए आवेदन करने का अवसर है से पहले लैब। लैब में स्वीकार किए जाने के बाद, नागरिक वैज्ञानिकों ने एक 12 सप्ताह के प्रशिक्षण से गुजरना मानव विषय नामांकन के लिए प्रमाणित बनने के लिएएस। इस प्रमाण पत्र के बाद, वे लैब में विभिन्न तकनीकों (जैसे papillae गिनती, डीएनए निष्कर्षण) और अतिरिक्त प्रमाणपत्र और नियमित रूप से गुणवत्ता नियंत्रण उपायों का पालन पर प्रशिक्षण मॉड्यूल लेने के लिए सक्षम हैं, इन नागरिक वैज्ञानिकों सक्रिय रूप से डेटा विश्लेषण में भाग लेने का अवसर है। नागरिक वैज्ञानिकों ने अपने समय स्वयंसेवक और संग्रहालय के लिए अपने योगदान के लिए मुआवजा नहीं कर रहे हैं।

Protocol

इस अध्ययन में रन बनाए छवियों प्रकृति और विज्ञान (संग्रहालय) 10 में से डेनवर संग्रहालय में स्वाद लैब के जेनेटिक्स में किए गए एक बड़े स्वाद अध्ययन के हिस्से के रूप में एकत्र किए गए थे। बड़ा अध्ययन के विषयों 18-93 साल की उम्र में लेकर (एन = 1195) संग्रहालय आगंतुकों थे। विषयों के सात महाद्वीपों के छह से आया है, वहीं प्रतिभागियों को मुख्य रूप से यूरोपीय वंश के थे। प्रत्येक विषय के डेटा से एक 30 मिनट प्रयोगशाला सत्र में एकत्र किया गया था। पश्चिमी संस्थागत समीक्षा बोर्ड प्रोटोकॉल, सूचित लिखित सहमति के लिए दिया गया था मंजूरी दे दी है, और विषयों उनके समय स्वेच्छा से और अध्ययन में अपनी भागीदारी के लिए मुआवजा नहीं थे।

1. डेटा संग्रह

  1. चित्र उतारना
    1. दिखाएँ एक खुद को खड़ा करने के लिए कैसे की तस्वीर (चित्रा 1) और क्या कब्जा कर लिया छवि की तरह दिखेगा विषयों।
      चित्र 1 चित्रा 1: छवि कैद पोज।
    2. सीधी विषयों एक कागज हाथ तौलिया के साथ अपनी जीभ सूखी और उनके मुंह से फैला हुआ जीभ छोड़ने के लिए।
    3. एक 1 इंच टिप के साथ एक बाँझ, रेयान applicator का उपयोग कर जीभ के शीर्ष करने के लिए एक 1:36 एकाग्रता में नीले रंग भोजन डाई के लगभग 3 मिलीलीटर लागू करें। विषयों उनके मुँह करने के लिए जीभ लौटने और अतिरिक्त डाई दूर करने के लिए निगल लो।
    4. उनके हाथ और स्थिरता के लिए एक मेज पर खड़ा कोहनी पर अपनी ठोड़ी के साथ, चित्र 1 में दिखाया के रूप में विषयों खुद को ढोंग है। सीधी विषयों उनके जीभ एक आरामदायक दूरी का विस्तार करने और अपने दांतों के बीच धीरे यह सुरक्षित करने के लिए।
    5. Midline के लिए अगले जीभ के बाईं ओर के पूर्वकाल की टिप करने के लिए उस में मुक्का मारा एक 10 मिमी व्यास परिपत्र cutout के साथ फिल्टर पेपर के एक 2.5 सेमी टुकड़ा पालन (चित्रा 1 देखें)।
    6. जीभ, सीए के कम से कम तीन बंद हुआ छवियों लोपूरे 10 मिमी परिपत्र cutout pturing कि क्षेत्र के भीतर सभी एफपी के दृश्य सुनिश्चित करने के लिए। स्थिरता के लिए एक तिपाई से जुड़ी एक उच्च गुणवत्ता वाले डिजिटल बिंदु और गोली मार कैमरा के मैक्रो सेटिंग का उपयोग करें।
      1. अभी भी कैमरे की सिफारिश जूम सीमा के भीतर है, जबकि पूरे कटआउट फोटो खिंचवाने है कि हद तक ज़ूम इन करें। कैमरे के लेंस के विमान जीभ के विमान के समानांतर है कि सुनिश्चित करें और कटआउट आयताकार के बजाय इस तस्वीर में परिपत्र प्रकट होता है। वे उच्च गुणवत्ता और गिनती के लिए उपयोगी होते हैं यह सुनिश्चित करने के लिए फोटो की समीक्षा करें।
  2. छवि के चयन और तैयारी
    1. कंप्यूटर के लिए तस्वीरें अपलोड करें।
    2. जीभ कैमरे की ओर व्यापक और फ्लैट है तो एक ही विषय की जीभ का लिया छवियों की, उच्चतम ज़ूम पर जीभ और कम से कम विकृत कोण पर संरचनाओं के बीच स्पष्ट परिभाषा के आधार पर आगे के विश्लेषण के लिए केवल एक का चयन करें।
    3. खुले स्रोत में चयनित कच्चे छवि को खोलने ताकिftware, ImageJ। "विश्लेषण" और क्लिक करने के लिए "प्लगइन्स" पर और लटकती मेनू पुस्तक में क्लिक करें "सेल काउंटर।" सेल काउंटर खुलने पर, सेल काउंटर करने के लिए छवि लिंक करने के लिए "प्रारंभ" पर क्लिक करें।
      नोट: यहाँ, 32-बिट जावा 1.6.0_10 संस्करण के साथ ImageJ 1.45 सेकंड का उपयोग करें।
      1. स्कोरर के बीच और एफपी स्कोर करने के बाद के चरणों में उपयोग के लिए स्थिरता के लिए 50% की एक मानक बढ़ाई प्रयोग करें। अगले सेल काउंटर करने के लिए स्क्रीन के बाईं ओर करने के लिए इस छवि को ले जाएँ। इस चित्र को कॉपी ए (स्क्रीन के चित्रा 2, बाईं ओर देखें) के रूप में निर्दिष्ट किया जाएगा।
  3. Papillae के व्यास को मापने के लिए कच्चे छवि (कॉपी बी) के एक दूसरे की नकल ओपन मात्रा निर्धारित किया जा रहा है। में और स्कोरिंग प्रक्रिया के दौरान व्यक्तिगत स्कोरर की वरीयता के रूप में की जरूरत बाहर ज़ूम। इसलिए दो प्रतियां गलती से भ्रमित नहीं कर रहे हैं स्क्रीन के दाईं ओर करने के लिए इस प्रति ले जाएँ। (चित्रा 2, दाईं ओर देखेंस्क्रीन)
  4. लाइन उपकरण पर क्लिक करें। सही रूप में किसी भी कोण पर फिल्टर पेपर के 10 मिमी इनर सर्कल के पार एक व्यास आकर्षित और क्लिक करें "विश्लेषण" और के रूप में ज्यादा के रूप में आवश्यक में नकल बी, जूम का प्रयोग "पैमाने पर सेट।" "ज्ञात दूरी" में भरें "10 होने के लिए । "पैमाने एक वैकल्पिक कोण को मापने के द्वारा सही है सत्यापित करें और व्यास रेंज 9.8-10.2 मिमी के बीच है सुनिश्चित करते हैं। यदि ऐसा नहीं है, इस चरण को दोहराएँ।

चित्र 2
चित्रा 2: प्रति में एक और कॉपी बी प्रतिलिपि एक (बाएं) सेल काउंटर खिड़की से जुड़ा हुआ है और नकल बी (दाएं) व्यक्ति की पसंद से बढ़कर किया जा सकता है, जबकि स्कोरर के लिए गणक से स्थिरता के लिए 50% बढ़ाई पर बनी हुई है।

डेनवर papillae प्रोटोकॉल dichotomous कुंजी का प्रयोग 2. स्कोरिंग एफपी

  1. प्रत्येक उम्मीदवार papil के लिएला, यह एक एफपी है, तो यह निर्धारित करने के मापदंड का ब्यौरा निम्नलिखित दिचोतोमोउस कुंजी (कदम 2.2-2.5) का उपयोग करें। एफपी के रूप में वर्गीकृत किया जाता है कि papillae के एक दृश्य के लिए और इस प्रक्रिया में हर कदम पर खारिज कर दिया है कि लोगों के लिए 3 चित्रा का संदर्भ लें।
    चित्र तीन चित्रा 3: papillae अस्वीकृत एफपी बनाम। चित्रा 3 ए -3 बी-3E हर नियम का उल्लंघन करने वाले क्षेत्रों की परिक्रमा की है, जबकि कई योग्यता एफपी के साथ एक जीभ है। (3 बी) क्षेत्र अनाकार है; (3 सी) papillae बहुत छोटे हैं; 3 डी) अंकुरक यह आसपास के लोगों की तुलना में नीले रंग की है, (3E) अंकुरक recessed इसके चारों ओर उन लोगों की तुलना की जाती है।
  2. आकार
    1. उम्मीदवार अंकुरक (निराकार) अनाकार अगर निर्धारित करते हैं। एक सामान्य रूप से मान्यता प्राप्त ज्यामितीय आकार (अंडाकार, आयातफलकी, गोल) अगर वहाँ 50% ज़ूम पर देखते हैं।
    2. एक ज्यामितीय आकार (चित्रा 3A देखें) है, तो 2.3 कदम के लिए कदम।
    3. वहाँ तोई कोई ज्यामितीय आकार है, प्रति एक (50% ज़ूम) पर "टाइप 1." सेल काउंटर खिड़की के पास जाओ और क्लिक करें (चित्र 3 बी देखें), के रूप में यह अनाकार नहीं है और एक एफपी चिह्नित करने के लिए उम्मीदवार अंकुरक क्लिक करें। इस और बाद के चरणों में प्रकार 1-4 पर क्लिक स्कोरर वे सभी उम्मीदवार papillae को संबोधित किया और कदम 2.7.2 में चर्चा में सहायता करेगा जो एक संरचना को खारिज जब उल्लंघन किया गया था, जो नियम categorizes है पता करने के लिए अनुमति देता है।
  3. रंग
    1. एक 50% पर जूम को कॉपी और जीभ की सतह पर किसी भी रंग भेदभाव नहीं है, तो यह निर्धारित करने के लिए देखें। यदि हां, तो अगले 2.3.2 जारी है। यदि नहीं, तो एक निर्धारण कारक के रूप में रंग का प्रयोग नहीं करते; 2.4 कदम के लिए कदम।
    2. उम्मीदवार अंकुरक ऊतक या इसके आसपास papillae की तुलना में हल्का है अगर (चित्रा 3A देखें) निर्धारित करते हैं। उम्मीदवार अंकुरक के किसी भी हिस्से गुलाबी बने रहे या हल्का दाग चुका है, तो 2.4 कदम के लिए कदम।
    3. उम्मीदवार अंकुरक नीला है और आसपास के papillae कर रहे हैं(चित्रा -3 सी देखें) लाइटर, सेल काउंटर पर "टाइप 2" सेल काउंटर खिड़की के पास जाओ और क्लिक करें। प्रति एक पर, के रूप में भी नीला नहीं है और एक एफपी चिह्नित करने के लिए उम्मीदवार पर क्लिक करें।
  4. आकार
    1. नकल बी का उपयोग करना, एक आराम से उम्मीदवार अंकुरक की रूपरेखा देख सकते हैं, जहां दूरी में ज़ूम।
    2. लाइन उपकरण पर क्लिक करें और उम्मीदवार अंकुरक के सबसे लंबे समय तक आयाम भर उपाय। क्लिक करें, फिर "उपाय।" "विश्लेषण" और मापा लंबाई 0.5 मिमी या अधिक से अधिक (चित्रा 3A देखें) है, तो 2.5 कदम के लिए कदम।
    3. मापा लंबाई 0.499 मिमी या उससे कम है, तो सटीकता सुनिश्चित करने के लिए एक बार और अधिक उपाय। यह अभी भी 0.499 मिमी या उससे कम है तो (एफ igure 3 डी देखें), सेल काउंटर खिड़की पर और प्रति एक पर "टाइप 3" पर क्लिक करें रूप में यह बहुत छोटा है और नहीं एक एफपी चिह्नित करने के लिए उम्मीदवार अंकुरक क्लिक करें।
  5. मंदी
    1. उम्मीदवार अंकुरक वर्दी या तो अगर प्रति एक का उपयोग करना, आकलन वहजीभ या ऊंचा के आराम के साथ ight। अंकुरक एक दरार में है, तो दरार, नहीं जीभ की सतह में अन्य संरचनाओं की तुलना में इसकी ऊंचाई निर्धारित करते हैं। अंकुरक इसके आसपास papillae की तुलना में कम है, तो (3E चित्रा देखें) एक एफपी recessed और नहीं के रूप में चिह्नित करने के लिए "प्रकार 4" और प्रति एक पर, क्लिक करें उम्मीदवार अंकुरक का उपयोग करें।
    2. उम्मीदवार अंकुरक जीभ के आराम के साथ एक समान ऊंचाई की या तो या (चित्रा 3A देखें) ऊंचा है, का उपयोग करें "प्रकार 5" इसे क्लिक करें और यह एक एफपी है कि चिह्नित करने के लिए। इस प्रकार 5 कुल कच्चे एफपी स्कोर है। ImageJ प्रतिलिपि ए पर प्रकार 1-5 से सेल काउंटर पर स्कोर को और न ही रंग के निशान नहीं बचा है के रूप में इस बिंदु पर प्रतियां बंद न करें
  6. सहेजा जा रहा है प्रति एक
    1. नोटबुक कच्चे एफपी स्कोर में लिख लें।
    2. सेल काउंटर खिड़की पर, "निर्यात छवि।" पर क्लिक करें प्रयोगशाला के वांछित नामकरण प्रणाली के साथ बचाओ। इस पुलिस के उद्घाटन के लिए अनुमति देगाभविष्य में वाई एक प्रकार 1-5 से रंग के निशान बनाए रखने के लिए। यह कच्चे एफपी स्कोर नहीं बचा होगा।
  7. गुणवत्ता नियंत्रण
    1. दो अलग-अलग स्कोरर द्वारा प्रत्येक तस्वीर स्कोर और 7 की तुलना करें।
    2. उच्च एफपी कच्चे स्कोर कम एफपी कच्चे स्कोर के 10% के भीतर है, एक आम सहमति एफपी स्कोर के लिए एक साथ दो स्कोर के औसत। दो एफपी कच्चे स्कोर 10% से अधिक से भिन्न होते हैं, तो स्क्रीन पर दोनों रन बनाए तस्वीरें खींच।
      1. एक अंतिम आम सहमति स्कोर पर विसंगतियों की चर्चा करने में सहायता प्रदान करने के लिए और काउंटर प्रकार 1-4 का उपयोग करें। कोई आम सहमति चर्चा के दौरान पहुंचा जा सकता है, तो स्कोरिंग से एक ब्रेक ले लो। बाद में एक बिंदु पर, छवि Rescore और चर्चा की। अभी भी एक आम सहमति तक नहीं पहुंचा जा सकता है, तो एक तिहाई गणक में खींच। अन्य दो के साथ छवि और संवाद स्कोर करने के लिए उनसे पूछो।

3. प्रशिक्षण स्कोरर डीपीपी का प्रयोग करने के लिए

  1. ट्रेनिंग पर पृष्ठभूमि
    1. दो स्कोरर है छवियों की एक किस्म गिनती,व्यक्तिगत रूप से स्कोरिंग और वे एक ही मापदंड इस्तेमाल कर रहे थे कि यह सुनिश्चित करने के लिए नियमित रूप से प्रदान। रन बनाए जब व्यक्ति की गिनती के प्रत्येक छवियों के लिए एक दूसरे की 10% के भीतर लगातार थे तभी (ऊपर को अंतिम रूप दिया) विधि स्वीकार्य माना जाता है और डीपीपी करार दिया था।
    2. 15 सरकारी छवियों और स्कोर करने के लिए अनुक्रमिक क्रम में 15 प्रशिक्षण छवियों (पूरक 2-17 आंकड़े) चुनें। एक छवि चयन के दौरान बेशुमार समझा था, तो छवि को छोड़ और अगले अनुक्रमिक छवि का चयन करें।
      नोट: लैब अभी भी सही फोटोग्राफी तकनीक mastering किया गया था जबकि वे चुने गए हैं के रूप में इन छवियों की गुणवत्ता और आकार में भिन्नता है। चयनित छवियों में से एक इस प्राथमिक गिनती की प्रक्रिया के माध्यम से बेशुमार समझा था लेकिन स्कोरर की जरूरत है कि जब कॉल करने के लिए सक्षम थे कि यह सुनिश्चित करने में छोड़ दिया गया था। इसलिए केवल 15 छवियों रन बनाए, हालांकि प्रशिक्षुओं को दिया 16 छवियाँ हैं।
    3. 15 प्रशिक्षण छवियों गिनती और एक आम सहमति बनाने के लिए, डीपीपी उपर्युक्त स्कोरर का उपयोग करप्रत्येक के लिए स्कोर।
    4. प्रशिक्षुओं 15 सरकारी चित्र दे और एक आधारभूत बनाने के लिए मिलर और गन्ने का उपयोग करते हुए स्कोर करने के लिए पूछना। रिकॉर्ड स्कोर। 3.2 कदम का पालन किया है, जो एक समूह के प्रशिक्षण का संचालन। 3.2 कदम पूरा किया गया था एक बार, स्कोरर फिर 15 सरकारी छवियों स्कोर और अपने स्कोर का रिकॉर्ड है।
  2. डीपीपी पर बाद में स्कोरर प्रशिक्षण
    1. प्रशिक्षण स्कोरर पहला प्रशिक्षण छवि दे और इस छवि पर कुछ papillae के लिए डीपीपी प्रदर्शित करता है। चयन या एक एफ पी के रूप में प्रत्येक अंकुरक खारिज करने के लिए तर्क पर चर्चा करें। प्रशिक्षुओं उस तस्वीर के आराम के लिए स्कोरिंग का अभ्यास जारी है और आम सहमति संख्या के साथ प्रदान (मिला लैब आम सहमति नंबर के लिए और 1-5 मार्करों टाइप करें, अनुपूरक चित्रा 1 देखें) करने की अनुमति दें। इस तस्वीर के लिए डीपीपी की समझ सुनिश्चित करने के लिए की परवाह किए बिना 10% की कोई फ़र्क पर चर्चा की।
    2. बाद में स्कोरर दूसरा प्रशिक्षण छवि दे और उन्हें डीपीपी का उपयोग करते हुए स्कोर है।
    3. प्रशिक्षु कच्चे एफपी स्कोर दस भीतर हैस्थापित आम सहमति का प्रतिशत। खंड 3.1.3 से गिनती प्रशिक्षु अगली छवि पर कदम और कदम दोहराने के लिए अनुमति देते हैं।
    4. स्कोर में दस प्रतिशत की सीमा के बाहर है, तो समझते हैं और विसंगति की पहचान और उसके बाद डीपीपी के प्रतिकूल समझ को संबोधित करने प्रकार 1-5 का प्रतिनिधित्व प्रशिक्षु के रंग के निशान का उपयोग करें।
    5. प्रशिक्षु छवि Rescore और एक बार फिर नए स्कोर को सत्यापित करने का अवसर दे। यदि सफल सभी छवियों को पूरा कर रहे हैं, जब तक प्रशिक्षु अगली छवि पर ले जाता है।

Representative Results

यहाँ एक प्रतिनिधि तस्वीर दौर, बड़े, गुलाबी के क्षेत्र मानकों के आधार पर एफपी पहचान के लिए सामान्य रूप से प्रयुक्त मिलर और गन्ने पद्धति का उपयोग करते समय दो व्यक्ति स्कोरर द्वारा बनाए या हल्का दाग, और बुलंद, और फिर उसी तस्वीर के दो स्कोरर से रन बनाए है डीपीपी के प्रयोग से। दिखाया मायने रखता है डीपीपी का उपयोग कर कम विचरण की तुलना में मूल विधि का उपयोग कर मनाया उच्च विचरण के प्रतिनिधि हैं।

चित्रा 4

चित्रा 4:। मिलर और गन्ने मात्रा डीपीपी मात्रा बनाम बाईं ओर छवि मिलर और गन्ने का विधि का उपयोग करते हुए दो स्कोरर की गिनती का प्रतिनिधि है। सही पर छवि डीपीपी का उपयोग करते हुए दो स्कोरर की गिनती का प्रतिनिधित्व करता है। लाल गणक 1 है, पीला गणक 2 है, ग्रीन स्कोरर 1 और 2 है।

डी पी के सांख्यिकीय विश्वसनीयतापी पहले से परिवर्तनशीलता 10 का आकलन करने के लिए एक मिश्रित रेखीय मॉडल का उपयोग कर अध्ययन किया गया था। संक्षेप में, डीपीपी स्कोर की संगति में खेलता भूमिका का आकलन करने के लिए डेटा उत्पन्न करने के लिए, पंद्रह छवियों दो बार रन बनाए थे। स्कोर के पहले बैच में, डीपीपी भोले स्कोरर मिलर और गन्ने का विधि 2 का इस्तेमाल किया। स्कोरर तो डीपीपी उपयोग करने के लिए प्रशिक्षित किया गया और छवियों को व्यक्तिगत रूप से गुणवत्ता नियंत्रण (चित्रा 5) का ब्यौरा खंड 2.7 में वर्णित अंतिम आम सहमति कदम के बिना rescored गया। एफपी स्कोर डेटा सेट कारण तो प्रोटोकॉल (चित्रा 6), भीतर-गणक परिवर्तनशीलता और दोनों के बीच बातचीत के लिए संयुक्त मतभेद का आकलन करने के लिए मिश्रित मॉडल में इस्तेमाल किया गया था। 6.99 (एसई = 0.99) द्वारा एक उच्च गिनती करने के लिए अग्रणी डीपीपी के साथ डीपीपी (पी मूल्य <1 एक्स 10 -6) की तुलना में मिलर और गन्ने का विधि का उपयोग करते समय यह मॉडल स्कोरिंग में एक महत्वपूर्ण अंतर दिखाया है; स्कोर में परिवर्तनशीलता के 5.2% शेष होने के कारण, स्कोरर के लिए 25.9% की वजह से प्रशिक्षण की वजह से था, औरछवि 10 के लिए विशिष्ट परिवर्तनशीलता के लिए। अगला, भीतर-गणक परिवर्तनशीलता का निर्धारण करने के लिए डेटा उत्पन्न करने के लिए, यादृच्छिक क्रम में तीस छवियों की एक श्रृंखला 11 व्यक्तियों द्वारा रन बनाए थे। स्कोरर के लिए अनजान, छवियों की इस श्रृंखला में दोहराया गया है कि तीन चित्र शामिल थे। हम अलग छवियों की तुलना स्कोर परिवर्तनशीलता में भारी फर्क छवियों versusrepeated मनाया।

चित्रा 5
चित्रा 5:। डीपीपी भोले पोस्ट बनाम डीपीपी प्रशिक्षण पैनलों 15 छवियों के लिए समीक्षक स्कोर के boxplots पहले और बाद डेनवर papillae प्रोटोकॉल प्रशिक्षण प्रदान करते हैं। एक खुला वृत्त एक ग़ैर से संकेत मिलता है, जबकि प्रत्येक boxplot के लिए, सर्कल में भरा एक मतलब इंगित करता है।

चित्रा 6
चित्रा 6:। गणक विचरण में बदलें ग्रे टी का प्रतिनिधित्व करता हैवह डीपीपी प्रशिक्षण के लिए पहले व्यक्तिगत स्कोरर के लिए विचरण। ब्लैक में एक ही गणक पद डीपीपी प्रशिक्षण है।

Discussion

डीपीपी का प्रयोग, छवि के भीतर विचरण स्वतंत्र स्कोरर भर में गिना जाता है और भीतर-गणक मायने रखता काफी कमी आई है। इस विधि videomicroscopy बिना कम व्यक्तिपरक दृश्य एफपी घनत्व विश्लेषण करता है, यह है कि इस पद्धति केवल स्कोर एफपी ध्यान दिया जाना चाहिए। डीपीपी एफपी के रूप में वर्गीकृत संरचनाओं स्वाद है pores और इसलिए स्वाद papillae हैं और न ही मायने रखता है असली स्वाद कली घनत्व को प्रतिबिंबित करता है कि यह गारंटी नहीं दे सकता है 20,23 इस विधि की व्याप्ति में प्रकृति यह स्थिरता और परिशुद्धता के माध्यम से विश्वसनीयता स्थापित करता है, हालांकि, यह एक लगातार दिशा में परिणाम biasing जा सकता है। , अधिक इसरो एफपी की आकृति विज्ञान निस्र्पक और एक दिचोतोमोउस चाबी बनाने के द्वारा इस study.However के दायरे से परे का विस्तार होगा स्वाद कली घनत्व (जैसे, videomicroscopy) के एक सही उपाय का उपयोग अन्य तरीकों के लिए सटीकता के रिश्तेदार का परीक्षण करने के लिए, इस विधि के पते मिलर और एफपी के और अधिक लक्षण वर्णन है कि क्षेत्र के लिए गन्ने का का आरोपउनकी आकृति विज्ञान और मात्रा का ठहराव 2 पर आम सहमति के क्रम में किया जाना चाहिए। साथ ही, वे इस लक्षण वर्णन "विषयों के बीच मतभेद के कुछ स्पष्ट और जांचकर्ताओं 2 के बीच असमान परिणामों में से कुछ की व्याख्या।" हो सकता है कि संकेत दिया स्वाद और पोषण में एफपी की भूमिका पर विसंगतियों के कई गुणात्मक रूप से एक समान विधि उपलब्ध कराने के द्वारा संबंधित अनुसंधान को सुधारा जा सकता है।

दिचोतोमोउस कुंजी अलग छवि पर कब्जा करने की तकनीक के लिए समायोजित किया जा सकता है। माप पैमाने के लिए जाना जाता दूरी आसानी सरन लपेटो या कांच छवि पर कब्जा करने के लिए जीभ पर रखा गया था अगर रियायती जा सकता है कि प्रत्येक प्रयोगशाला और मंदी के दौर में इस्तेमाल किया व्यास करने के लिए सेट किया जा सकता है। मिला प्रयोगशाला में, यह तटस्थ जीभ papillae की सबसे अच्छी परिभाषा प्रदान की जाती है कि पाया गया था। इस वजह से गधे कर दिया है कि एक चमक पैदा वापस कैमरे में प्रकाश को प्रतिबिंबित करने के लिए सरन लपेटो या कांच के कारण होता है जो लैब में प्रकाश की राशि के लिए किया जा सकता हैsment मुश्किल है। कुछ प्रयोगशालाओं वे डाई अधिक चुनौतीपूर्ण गिनती करने के लिए मिल ने कहा है, लेकिन मिल गया लैब जीभ के बहुमत पर कवकरूप और filiform papillae के बीच आदर्श विपरीत प्रदान की 01:36 के एक एकाग्रता में एक पतला नीले भोजन डाई पाया।

एफपी लक्षण वर्णन के लिए एक दिचोतोमोउस कुंजी के निर्माण के लगातार जीभ पर संरचनाओं का विश्लेषण और उनके परिणामों की रिपोर्टिंग में विश्वास है, छवि पर कब्जा करने के तरीकों की एक किस्म का उपयोग, विभिन्न प्रयोगशालाओं में शोधकर्ताओं के लिए अनुमति देगा। अंत में, एक दिचोतोमोउस कुंजी का उपयोग संरचनाओं या वस्तुओं के गुणों का अध्ययन करने के लिए अध्ययन से असंगत संख्या प्रदान कर रहे हैं, जहां वैज्ञानिक पद्धति के अन्य क्षेत्रों में प्रयोजनों के लिए हो सकता है।

Disclosures

लेखकों वे कोई प्रतिस्पर्धा वित्तीय हितों की है कि घोषणा।

Acknowledgments

इस काम के स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थान और अनुसंधान संसाधन के लिए राष्ट्रीय केन्द्र से 2008-2012 के बीच विज्ञान शिक्षा पार्टनरशिप अवार्ड (SEPA) R25 RR025066 में भाग द्वारा वित्त पोषित किया गया। जॉन हेस, मुकदमा Coldwell, पॉल Breslin, कार्ला Schubert: विभिन्न प्रयोगशाला परिदृश्यों में डीपीपी के उपयोग पर साहित्य, हमारे परिणाम और प्रतिक्रिया के विचारशील चर्चा के लिए स्वाद क्षेत्र में सहयोगियों के लिए धन्यवाद। प्रकृति और विज्ञान के डेनवर संग्रहालय में नेतृत्व और अभियान के स्वास्थ्य के भीतर स्वाद लैब की आनुवंशिकी के भीतर नागरिक विज्ञान के समर्थन में कर्मचारियों के लिए भी धन्यवाद। भालू आरागॉन, माइक आर्चर, र Ataman, माइकल Bagley, A'nette बर्ट्रेंड, डायना Boyles, वेंडी गुप्त, साशा Dooley: अंत में, सहित विकासशील और इस प्रोटोकॉल का उपयोग करने के लिए अपने समय और समर्पण के लिए हमारे स्वयंसेवक नागरिक वैज्ञानिकों का सभी को धन्यवाद , पैटी Drever, जेसिका अर्न, लौरा Harmacek, शॉन Hibbard, जॉइस Hutchens, मैट जू, चलो कीन, विलेम Leenhouts, Stephania लूkjan, एशले मैथ्यू, माइक प्रकार की पिस्तौल, स्टेफ़नी मिलर, Hallie मॉर्गन-रोड्रिगेज, ग्रिफिन Scherma, एलिसा Schickedanz, टेरी साइमन, Dylan थॉमस, रूडी टोरेस, टायलर विल्सन, डायने Woltkamp।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Image J National Institutes of Health http://rsb.info.nih.gov/ij
Food dye, Deep Blue Shade Esco http://escofoods.com/blue-food-coloring.html
Sterile Rayon Tipped OB/GYN Applicators Puritan 25-808 1PR
Grade 1 Filter Paper Whatman Whatman No.: 1001-325
Coolpix P100 (10.3 megapixels) and P500 (12.1 megapixels) Nikon http://imaging.nikon.com/lineup/coolpix/ neither model appears to be available on the website any longer
Paper Hand Towels Kleenex https://www.kleenex.com/HandTowelsDetail.aspx

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कवकरूप papillae का उद्देश्य विश्लेषण के लिए डेनवर papillae प्रोटोकॉल
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Nuessle, T. M., Garneau, N. L., Sloan, M. M., Santorico, S. A. Denver Papillae Protocol for Objective Analysis of Fungiform Papillae. J. Vis. Exp. (100), e52860, doi:10.3791/52860 (2015).More

Nuessle, T. M., Garneau, N. L., Sloan, M. M., Santorico, S. A. Denver Papillae Protocol for Objective Analysis of Fungiform Papillae. J. Vis. Exp. (100), e52860, doi:10.3791/52860 (2015).

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