Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Behavior

Enkel og Computerstøttet Olfactory Test for Mus

Published: June 15, 2015 doi: 10.3791/52944

Abstract

Olfaction er stærkt konserveret blandt arter og kræves til reproduktion og overlevelse.

Hos mennesker olfaction er også en af ​​sanserne, der er påvirket med aldring og er en stærk prædiktor for neurodegenerative sygdomme. Således er olfaction test anvendes som en ikke-invasiv diagnostisk fremgangsmåde til påvisning af neurologiske mangler tidligt. For at forstå de mekanismer, der ligger til grund olfaktoriske netværk modtagelighed, har olfaktoriske forskning i gnavere taget fart i det seneste årti.

Her præsenteres en meget enkel, tidsbesparende og reproducerbar olfaktoriske testmetode medfødt lugt perception og følsomhed i mus uden behov for nogen forudgående føde eller vand begrænsning. Testene udføres i et velkendt miljø til musene, kræver kun de dufte og en 2 min session lugtstof eksponering. Analysen er udført, post-hoc, ved hjælp af computer-assisteret kommandoer på ImageJ og kan derfor, Udføres fra start til slut med en forsker.

Denne protokol kræver ikke nogen speciel hardware eller opsætning og er indiceret til alle laboratorier interesseret i at teste olfaktoriske perception og følsomhed.

Introduction

Olfaction er et af de mest udviklede og vigtige sensoriske funktioner i pattedyr. Eventuelle nedskrivninger i olfaktoriske aktivitet kan påvirke fødeindtagelse, social adfærd og i værste fald, selv overlevelse. Hos mennesker olfaktoriske forringelse afhænger 1 alder og betragtes som en stærk indikator for neurologiske lidelser 2 - 6. Den olfaktoriske test identifikation udviklet af University of Pennsylvania i øjeblikket repræsenterer en af de mest brugte, non-invasive og kvantificerbare, diagnostiske tests, som kan vurdere tidlige neurologiske underskud 7 og med stor sandsynlighed forudsige progression af demens 8,9.

Tilgængeligheden af det olfaktoriske system, og den fremtrædende lugtesansen hos gnavere, har udløst en intens linje af forskning i mekanismer underliggende olfaktoriske funktioner 10. Vi har tidligere vist, at tab af funktion af signal- recepteller Notch1 påvirker olfaktoriske undgåelse 11. I denne protokol anvender vi mus, som mangler den signalerende ligand, Jagged1, i neuroner eller glia at studere olfaktoriske ydeevne.

Medfødte olfaction er defineret ved tre parametre som opfattelsen, forskelsbehandling mellem lugte og olfaktoriske følsomhed 4. Olfaktoriske test i gnavere kan gøres på mange forskellige måder og nogle adfærdsmæssige undersøgelser gør brug af olfactometers, som giver lugt til dyret ved en specifik dampkoncentrationer og i en præcis tidsplan 12-14. Ikke desto mindre er denne instrumentering er dyrt og muligvis kun i specialiserede faciliteter. I vores arbejde, vi leverer en enkel, hurtig og reproducerbar olfaktoriske test-protokol, som udføres ved hjælp af flygtige dufte. Testene beskrevne foranstaltning opfattelse til en tiltrækkende eller frastødende lugt og evaluere forskelsbehandling mellem duft og vand 11,15,16. Under anvendelse af samme opsætning, we kan også måle følsomheden over for en lugt ved forskellige koncentrationer 16,17. Den post-hoc computerstøttet videobehandling, inspireret af arbejdet i Page og kolleger 18, tilbyder uvildige resultater uden brug af eksperimentelle blinding og giver mulighed for en enkelt person til at udføre hele forsøget.

Denne protokol er beregnet til at give et udgangspunkt for at studere olfaktoriske adfærd hos mus.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Alle procedurerne dyr er i overensstemmelse med EU-direktiv 2010/63 / EU om beskyttelse af dyr, der anvendes til videnskabelige formål, og er godkendt af den lokale Animal Care Komité (Canton of Fribourg, Schweiz).

1. Dyrepræparation

  1. Forsøgsdyr
    1. Udføre eksperimenter på voksne mandlige vildtype og transgene mus (C57BL / 6 baggrund), i 3-5 måneders alderen. De tre grupper af mus svarer til vilde typen kuld kontrol (gruppe A, Jagged1 FLOX / FLOX 19) og to betingede KO mus linjer (gruppe B, Jagged1ncKO og C, Jagged1gcKO).
    2. Husmus under standard laboratorieforhold i en ventileret rum, med en 12 timers kontrolleret mørke / lys-cyklus og give mad og vand ad libitum.

2. Eksperimentel opsætning

  1. Eksperimentel arena
    1. For den eksperimentelle arena, skal du bruge en ren steriliseret mus bur (36 cm længde x 20,5 cm bredde x 13,5 cm højde) (figur 1A).
    2. Tildel hver mus til en nummereret bur med frisk strøelse, 3 cm høj. Hvis bure genbruges, som i lugt følsomhed test, træffe følgende foranstaltninger for at undgå krydskontaminering mellem lugte og mus.
      1. Markere vandsiden.
      2. Rengør de smallere væggene i bure med to væv papirer sprøjtet med 70% ethanol, en til hver side.
      3. Hober sig op bure ifølge genotypen af ​​musene og opbevares midlertidigt under en laminar hætte.
  2. Kamera
    1. Montere et kamera på en tilpasset stativ med målsætningen på 58 cm fra bunden af buret (figur 1A). Fastsætte placeringen af ​​stativ og buret og afgrænse med mærker for at tillade kameraet at være centreret på toppen af ​​buret.
    2. Videooptagelse på 320 pixels x 240 pixels, 15.08 frames per sekund som MOV filer.
  3. Lugte
    1. Resuspender scents, når det er angivet, i opløsningsmiddel, hvori de er opløselige.
    2. For præference test brugen jordnøddesmør. Resuspender jordnøddesmør i jordnøddeolie (10% vægt / volumen).
    3. For at undgå test anvendelse ren 2-methylsmørsyre (2-MB) syre (98%).
    4. For følsomheden test, bruger kvindelige urin fra den samme mus koloni og baggrund (C57BL / 6).
      1. For nemheds skyld indsamle urinen 1-2 dage før den olfaktoriske test. Fastholde og holde musen under kølerhjelmen med sin mave over buret nettet. Under buret gitter placere en plastik petriskål at indsamle dråber urin.
      2. Opsaml urin fra hver hun i et 1,5 ml rør og blande alle urinprøver at normalisere for variabiliteten mellem dyr. Opbevares ved -20 ° C indtil anvendelse.
      3. På dagen for eksperimentet tø urinen og udfør 4 fortyndinger i dobbelt destilleret vand ved en fortyndingsfaktor på 10 (1:10, 1: 100; 1: 1000; 1: 10.000).

3. Olfaktoriske Testing

Bemærk: I denne protokol lugte bevidst er blevet valgt som opfattes som stærke attraktanter (jordnøddesmør og kvindelige urin) eller stærk frastødende (2-MB syre) 15. Det er vigtigt at udføre præference og følsomhed test til behagelige lugte før undgåelse test for at eliminere muligheden for interferens med olfaktoriske adfærd. Men for enkelthedens skyld, i dette papir, præference og undgåelse test vil blive både beskrevet under opfattelsen test. Hver adfærdsmæssige session starter med en tilvænning fase.

  1. Tilvænning Phase
    1. Sende dyret i den rene tildelte bur og lad den udforske for 5 min (figur 1B). Da miljøet af den eksperimentelle buret er velkendt for hjemmet bur, denne korte tid er nok til at give mulighed for tilvænning.
    2. Hvis følsomheden testen er afsluttet i en dag, udføre tilvænning kun én gang før application i højeste fortyndede lugt. Hvis følsomheden prøven udføres på forskellige dage, hver dag en tilvænning fase på en ny ren bur er nødvendig.
  2. Perception Test
    1. Efter tilvænning, aktivere kameraet og straks pipette 60 ul af behagelig duft (jordnøddesmør) og 60 pi af den neutrale duft (postevand) på de modsatte vægge af buret på ca. 10 cm fra bunden (figur 1C).
    2. Lad musen udforske lugte i 2 min (figur 1D). Derefter slukke for kameraet.
    3. På dette tidspunkt gå videre med den næste mus startende fra tilvænning fase. Udfør undgåelse test nøjagtigt på samme måde ved at anvende 60 pi af frastødende lugt (2-MB syre) og 60 pi vand.
  3. Følsomhed test
    1. Evaluere tærsklen tiltrækning af hanmus til stigende koncentrationer af kvindelig urin i følgende rækkefølge: 1: 10.000; 1: 1,000; 1: 100; 1:10 og ren urin.
    2. Efter tilvænning, udsættes hver mus til den højeste fortynding pipetteres af eksperimentatoren som tidligere beskrevet i 3.2.1.
    3. Notér udforskende adfærd af urin versus vand, inden for en 2 min tidsramme på et videokamera. Efter at alle mus kohorter testes for den højeste fortynding (1: 10.000), udsættes for en højere koncentration af urin, som angivet ovenfor.

4. Post-hoc Dataanalyse

Bemærk: Alle adfærdstests beskrevne behandles post hoc følge instruktionerne dataanalyse.

  1. Åbn MOV filer i ImageJ for Windows-systemer
    1. Installer Quick Time for Java ved hjælp af de brugerdefinerede indstillinger fra http://www.apple.com/quicktime/download.
    2. Installer Quick Time plugin fra ImageJ hjemmeside (http://rsb.info.nih.gov/ij/plugins/qt-capture.html).
    3. Importere QTJava.zip (C: Programmer QuickTime QTSystem) ind i biblioteket EXTENSion af ImageJ (.ImageJ jre lib ext).
    4. Kopier også QTJava.zip i mappen plugins og omdøbe det som QTJava.jar.
    5. Installer de seks scripts knyttet i mappen makroer (ImageJ plugins Makroer).
    6. Åben ImageJ og kompilere og køre Quick Time plugin, derefter tæt ImageJ.
    7. Genåbn ImageJ og åbn MOV-fil ved hjælp Filer> import> hjælp Quick Time.
  2. Video Adjustment
    1. Når videoen filen åbnes i ImageJ, sender en video for at opnå en konstant 2 min udforskning fra det tidspunkt eksperimentatoren har pipetteret lugtstofferne ind i buret (T0). Identificer rammen svarende til T0 og fjern de tidligere rammer ved hjælp trin på 1 (ImageJ Billede Stacks ToolsSlice remover). Brug den samme kommando til at slette alle rammer, der overstiger 2 min udforskning.
    2. Sørg for, at buret er centreret og om nødvendigt bruge billedet> Transformer> Roter kommando at bringe den.
  3. Video Behandling
    Bemærk: Video behandlingen er fuldt computer-assisteret og bruger makroer kommandoer ledsager dette papir.
    1. For at begrænse det område på bur af en 127 pixels x 218 pixels størrelse køre Trin 1 makroen fra Plugin> Makroer> Kør kommando. Flytte den faste rektangel over buret (Figur 2, trin 1).
    2. Beskære område af buret på området af interesse (ROI) ved anvendelse af trin 2 makro (Figur 2, trin 2).
    3. Brug Trin 3 makro til at udtrække musen billedet fra baggrunden ved at tildele en tærskel signal, prikker og filtrering af signalet varians. Ydelsesværdierne i Z-aksen plot angiver de gennemsnitlige grå værdier, der svarer til intensiteten af ​​muse skygge flytter inden for ROI af "vandkammer" under 2 min udforskning. Kopier resultaterne i et regneark med navnet i henhold til ROI i et regneark fil (figur 2, trin 3).
    4. Brug Trin 4 makro tiludtrække de gennemsnitlige grå værdier af musen i ROI "lugt kammer". Kopier resultaterne i et regneark med navnet i henhold til ROI i samme regneark fil som i 4.3.3 (figur 2, trin 4).
    5. For yderligere at begrænse analysen af ​​musen bevægelse i ROI "vand perimeter" bruge Trin 5 makro. Kopier resultat på regnearket opkaldt efter den ROI i samme regneark fil som i 4.3.3 (figur 2, trin 5).
    6. At begrænse analysen af ​​musen bevægelse i ROI "lugt perimeter" bruge Trin 6 makro. Kopier resultat på regnearket opkaldt efter den ROI regneark fil som i 4.3.3 (figur 2, trin 6).
    7. Behandler alle videoer og tjek for sammenhæng i antallet af billeder pr dyr. Her registrere alle dyr til 1,810 frames svarende til en 2 min udforskning session.
    8. For hvert dyr og hver ROI slags rammer med gennemsnitlige gråtone values større end 0. Opdel antallet af rammer, som de værdier, der svarer til 1 sekund og få sekunder tilbragt i hver ROI.

5. Statistisk analyse

  1. For hver test kontrollere homogenitet af varians inden grupper / genotyper af Bartlett test ved hjælp af formlen findes på http://www.real-statistics.com/one-way-analysis-of-variance-anova/homogeneity-variances/.
  2. I tiltrækning og undgåelse test, foretager sammenligning mellem de tider brugt med vand versus lugt inden for en gruppe ved anvendelse af en ikke-retningsbestemt t-test under forudsætning af ens eller uens varianser afhængigt af resultaterne af Bartlett test. Sammenlign de tidspunkter brugt med lugte trækkes af den tid med vand mellem genotyperne af envejs ANOVA med Bonferroni post-hoc test.
  3. I følsomhed test analysere sammenligninger af den tid med lugten trukket fra den tid med water mellem grupper ved en specifik fortyndinger af urin ved envejs ANOVA med Bonferroni post-hoc test. Sammenligne følsomheden mellem grupper til voksende lugt koncentrationer af 2-vejs ANOVA med gentagelser med Bonferroni post-hoc test.
  4. Samspil mellem genotyper og behandlinger i tiltrækning og undgåelse test undersøges med 2-vejs ANOVA med Bonferroni post-hoc test.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Opfattelsen test måler tiltrækning til jordnøddesmør og undgåelse til 2-MB syre. Tre grupper af mus testes og varigheden i "lugt perimeter" kvantificeres i forhold til vand. I præference test, kontrolgruppen A viser signifikant præference til lugten i sammenligning med vand (t 8 = 2,52, p <0,05). På den anden side, er gruppe B ikke nogen signifikant tiltrækning til jordnøddesmør og tilbringer mere tid med vand (t 6 = 3,22, p <0,05). Således er det opfører sig anderledes fra kontrolgruppe A (F 1,7 = 26.39, p <0,005). Desuden gruppe C viser ingen diskrimination og bruger omkring samme tid med vand og jordnøddesmør (t 8 = 0,78, p = 0,45). I det hele taget de tre grupper opfører sig anderledes (F 2,9 = 19,83, p <0,005), og der er en signifikant interaktion mellem genotype og behandling (Jordnøddesmør og vand) (F 2,1 = 4,90, p <0,005) (

Som reaktion på 2-MB acid kontrolgruppen viser en undgåelse refleks og som et resultat tilbringer mere tid med vand (t 8 = 2,67, p <0,05). Tilsvarende gruppe B viser en udtalt undgåelse refleks til 2-MB acid (t 6 = 3,71, p <0,01). På den anden side indeholder gruppe C ikke diskriminere mellem de to lugte og tilbringer sammenlignelige gange med 2-MB syre og vand (t 8 = 2,2, p = 0,6) (figur 3B). I det hele taget at sammenligne undvigereaktion de tre grupper ikke udviser en signifikant forskellig adfærd (F 2, 9 = 0,76, p = 0,49) som et resultat er der ingen vekselvirkning mellem behandling og genotype (F 1, 2 = 0,52, p = 0,63).

I det olfaktoriske følsomhed test kvindelige urin, viser kurven præference til urin i forskellige koncentrationer versus vand (Preference indeks = tid med urin trækkes af den tid med vand). I ther test, vi observerer, at kontrolgruppe A har en attraktion tærskel til urin ved en fortynding på 1: 1.000 og displays stigende tiltrækning til urin med stigende koncentrationer. Gruppe B og C viser en 100 gange højere tærskel til tiltrækning (1:10) i sammenligning med gruppe A (F 2,9 = 4,78, p <0,05). Gruppe B og C display sammenlignelige følsomhed kurver (F 1,19 = 0,36, p = 0,55). Sammenligne følsomheden mellem grupper, fremgår det, at gruppe A har højere følsomhed til kvindelig urin sammenlignet med gruppe B og C (F 2,19 = 7,12, p <0,01) (figur 4).

Figur 1
Figur 1: Repræsentation af opsætningen bruges til at udføre de olfaktoriske tests. (A) Kamera over buret. (B) Mus anbringes i et bur for 5 minutters tilvænningsperiode. (C) Den ODOrants pipetteres på væggen af ​​buret. (D) Den udforskende aktivitet af et lugtstof versus vand testes i en 2 min vindue.

Figur 2
Figur 2:.. Workflow computer-assisteret videobehandling hjælp makroer kommandoer i ImageJ Eksemplet henviser til en mus fra gruppe A udsat for urin ved en 1:10 fortynding Klik her for at se en større version af dette tal.

Figur 3
Figur 3:. Repræsentative resultater af olfaktoriske præference og undgåelse tests Musene af de tre grupper (n = 5 for gruppe A, n = 4 for gruppe B og n = 5 for gruppe C) har været udsat for (A) peanut, menter og (B) 2-MB syre til en 2 min udforskning session. Den samlede tid på at udforske lugt (sorte cirkler) versus vand (grå cirkler) er repræsenteret. Signifikante forskelle i olfaktoriske adfærd mellem grupper er angivet med sorte vandrette barer og stjerner. Væsentlige forskelle i sniffing gange mellem lugt og vand inden for grupper er vist med grå vandrette barer og stjerner. * P <0,05, ** P <0,01, *** p <0,01 (grå vandrette bjælker, t-test, sort vandrette bjælke, envejs ANOVA). Fejlsøjler er standardfejl af middelværdien (SEM).

Figur 4
Figur 4:. Repræsentative resultater af følsomhed test til stigende koncentrationer af kvindelige urin Den præference indeks kurve givet ved udforskning tid med urin ved forskellige koncentrationer trækkes af den tid med vand, viser, at gruppenA (n = 5) har den største følsomhed over for urin sammenlignet med gruppe B (n = 4) og C (n = 5). * P <0,05 (sorte vandrette bjælker, envejs ANOVA). Fejlsøjler er SEM.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

De foreslåede i denne protokol tests gør det muligt at vurdere forskellige aspekter af medfødte olfaktoriske adfærd hos mus: opfattelsen at lugte, forskelsbehandling mellem lugte versus vand og følsomhed over for lugte. Denne protokol kan anvendes på enhver lugt efter præference og undgåelse skala tidligere vist 15. Da protokollen er baseret på eksplorativ aktivitet, er det vigtigt, at mus ikke vise nogen motorisk svækkelse eller angst, der kan påvirke deres bevægelser og forstyrre olfaktoriske udforskning. De beskrevne tests er beregnet til voksne hanmus men de kan tilpasses til at undersøge lugtesansen også hos voksne kvinder eller ældre mus.

Før påbegyndelse sådan undersøgelse undersøger olfaction i mus, er det vigtigt at være opmærksom på følgende aspekter: 1) udføre hver test med et interval på mindst 3 dage. Undgåelse bør testes som sidste til at minimere interferens af olfaktoriske hukommelse 20; 2) udføre experiments på samme tidspunkt af dagen, helst i den sene eftermiddag, når musene er i deres aktive cyklus 21 og bruger en nedtonet lyskilde. Desuden planlægge olfaktoriske test ved definerede gange styringer til mulige døgnrytmen ændringer i olfaktoriske funktioner 22; 3) før undgåelse test, som bruger frastødende lugtstoffer, såsom syrer starter, bringe en bur på det tidspunkt i den eksperimentelle suite og holde buret under en laminar hætte. Dette trin er vigtigt at undgå tilvænning til lugtstoffet og opnå en mere homogen reaktion i samme gruppe; 4) midlertidigt adskille mus, der er blevet testet, indtil alle mus af samme bur er udsat for lugtstoffet, at minimere lugtstof kontaminering; 5) anvender dyr fra samme stamme, da forskellige stammer kan opføre sig på en heterogen måde, når de udsættes for et lugtstof 23; 6) forsøgslederen skal bære en laboratoriekittel på alle tidspunkter og ændre handsker mellem dyr for at forhindre lugt blanding; 7)efter pipettering skal operatøren bevæge sig langsomt væk fra buret i en afstand af 1,3 meter for at undgå enhver confounding stimulering til musene under olfaktoriske udforskning; 8) mus udviser gennemsnitlige grå værdier kun i et kammer, bør udelukkes fra undersøgelsen, da mus forventes at undersøge begge kamre i forskellige grader.

Den beskrevne metode giver flere fordele i forhold til andre protokoller: det er ekstremt enkel at sætte op, bruger billige materialer, er det af hurtig færdiggørelse og udnytter open source-software, som f.eks ImageJ. Derudover giver vi makroer, der er klar til at blive installeret, og som kan custom-brugt og tilpasses enhver arena og mere end 2 lugt påbudt. Det skal bemærkes, at kun den tid i den tildelte lugt perimeter er et mål for olfaktoriske aktivitet. Hvorimod den tid i hvert kammer giver en udlæsning af den sonderende aktivitet af musen og er kun et groft skøn over den olfaktoriske adfærd. Som med andre metoder, kan statistisk styrke kan opnås ved at øge antallet af dyr pr.

I forhold til den olfaktoriske test ved brug olfactometers, som kan styre automatisk for damptryk og leveringstid 12-14, er den foreslåede protokol mindre kontrolleret. Ikke desto mindre er alle lugte anvendt i lige store volumener på defineret stykke og for samme tidsvindue. Således holder disse variable konstant, i denne afprøvning et olfaktometer er ikke nødvendig. Der er en anden potentiel begrænsning for denne protokol består i den tid, der kræves for tilpasning og skæring af hver video til opnåelse af et fast antal frames. Ikke desto mindre kan den samme computer-assisteret analyse anvendes også på mere avancerede opsætninger med lugt porte leverer lugt på bestemte tidspunkter. I dette tilfælde kunne den video skære indstilles automatisk.

I forhold til andre protokoller, der anvender vatrondeller impregnated med lugt til at teste tiltrækning og undgåelse, den nuværende protokol giver en ekstra information om olfaktoriske forskelsbehandling mellem en roman lugt og en neutral lugt (vand) 15,16 i en enkelt eksperimentel session. Desuden indeholder protokollen ikke kræver eksperimenterende blinding og kan helt udføres af en enkelt eksperimentator ved hjælp af den fordomsfri computerassisteret analyse.

Disse enkle tests kan anvendes til at overvåge udviklingen af ​​neurale underskud i Alzheimers eller Parkinsons sygdom musemodeller og at undersøge mekanismerne for olfaktoriske transmission.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Mouse cage Italplast (Italy) 1144B 36 cm length x 20.5 cm width x 13.5 cm height
Chipped wood bedding Abedd (Austria) LTE E-001 3 cm high
Peanut butter Migros (Switzerland) NA 1:10
2-Methylbutyric Sigma Aldrich (Switzerland) W269514 Pure
Female urine from fertile females of same mouse strain NA NA Dilution series
Camera Olympus (US) Camedia C-8080 MOV files
Quicktime for Java (Windows) Apple (USA) NA video plugin for visualizing MOV files
ImageJ for Windows NIH (USA) NA Video Processing/Analysis

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Doty, R. L., Kamath, V. The influences of age on olfaction: a review. Cognitive Science. 5, 20 (2014).
  2. Mesholam, R. I., Moberg, P. J., Mahr, R. N., Doty, R. L. Olfaction in neurodegenerative disease: a meta-analysis of olfactory functioning in Alzheimer’s and Parkinson’s diseases. Archives of Neurology. 55 (1), 84-90 (1998).
  3. Moberg, P. J., et al. Olfactory Dysfunction in Schizophrenia: A Qualitative and Quantitative Review. Neuropsychopharmacology. 21 (3), 325-340 (1999).
  4. Kovács, T. Mechanisms of olfactory dysfunction in aging and neurodegenerative disorders. Ageing Research Reviews. 3 (2), 215-232 (2004).
  5. Barrios, F. A., et al. Olfaction and neurodegeneration in HD. Neuroreport. 18 (1), 73-76 (2007).
  6. Doty, R. L. Olfaction in Parkinson’s disease and related disorders. Neurobiology of Disease. 46 (3), 527-552 (2012).
  7. Doty, R. L., Shaman, P., Dann, M. Development of the University of Pennsylvania Smell Identification Test: a standardized microencapsulated test of olfactory function. Physiology & Behavior. 32 (3), 489-502 (1984).
  8. Devanand, D. p, et al. Olfactory Deficits in Patients With Mild Cognitive Impairment Predict Alzheimer’s Disease at Follow-Up. American Journal of Psychiatry. 157 (9), 1399-1405 (2000).
  9. Conti, M. Z., et al. Odor Identification Deficit Predicts Clinical Conversion from Mild Cognitive Impairment to Dementia Due to Alzheimer’s Disease. Archives of Clinical Neuropsychology. 28 (5), 391-399 (2013).
  10. Keller, A., Vosshall, L. B. Better Smelling Through Genetics: Mammalian Odor Perception. Current opinion in neurobiology. 18 (4), 364-369 (2008).
  11. Brai, E., et al. Notch1 activity in the olfactory bulb is odour-dependent and contributes to olfactory behaviour. European Journal of Neuroscience. 40 (10), 3436-3449 (2014).
  12. Larson, J., Hoffman, J. S., Guidotti, A., Costa, E. Olfactory discrimination learning deficit in heterozygous reeler mice. Brain Research. 971 (1), 40-46 (2003).
  13. Alonso, M., et al. Olfactory Discrimination Learning Increases the Survival of Adult-Born Neurons in the Olfactory Bulb. The Journal of Neuroscience. 26 (41), 10508-10513 (2006).
  14. Wesson, D. W., Keller, M., Douhard, Q., Baum, M. J., Bakker, J. Enhanced urinary odor discrimination in female aromatase knockout (ArKO) mice. Hormones and behavior. 49 (5), 580-586 (2006).
  15. Kobayakawa, K., et al. Innate versus learned odour processing in the mouse olfactory bulb. Nature. 450 (7169), 503-508 (2007).
  16. Witt, R. M., Galligan, M. R., Despinoy, J., Segal, R. Olfactory Behavioral Testing in the Adult Mouse. Journal of Visualized Experiments JoVE. (23), (2009).
  17. Lee, A. W., Emsley, J. G., Brown, R. E., Hagg, T. Marked differences in olfactory sensitivity and apparent speed of forebrain neuroblast migration in three inbred strains of mice. Neuroscience. 118 (1), 263-270 (2003).
  18. Page, D. T., et al. Computerized assessment of social approach behavior in mouse. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 3, 48 (2009).
  19. Nyfeler, Y., et al. Jagged1 signals in the postnatal subventricular zone are required for neural stem cell self-renewal. Embo J. 24 (19), Available from: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?cmd=Retrieve&db=PubMed&dopt=Citation&list_uids=16163386" 3504-3515 (2005).
  20. Tong, M. T., Peace, S. T., Cleland, T. A. Properties and mechanisms of olfactory learning and memory. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 8, (2014).
  21. Steinlechner, S. Chapter 2.12 - Biological Rhythms of the Mouse. The Laboratory Mouse (Second Edition). , Available from: http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780123820082000179 383-407 (2012).
  22. Corthell, J., Stathopoulos, A., Watson, C., Bertram, R., Trombley, P. Olfactory Bulb Monoamine Concentrations Vary with Time of Day. Neuroscience. 247, 234-241 (2013).
  23. Lehmkuhl, A. M., Dirr, E. R., Fleming, S. M. Olfactory assays for mouse models of neurodegenerative disease. Journal of Visualized Experiments: JoVE. (90), e51804 (2014).

Tags

Adfærd mus olfaktoriske perception olfaktoriske følsomhed jordnøddesmør urin 2-methylbutansyre computerstøttet videobehandling
Enkel og Computerstøttet Olfactory Test for Mus
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Brai, E., Alberi, L. Simple andMore

Brai, E., Alberi, L. Simple and Computer-assisted Olfactory Testing for Mice. J. Vis. Exp. (100), e52944, doi:10.3791/52944 (2015).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter