Abstract
Esférulas magnéticas com ~ 1,9 um de diâmetro médio foram usadas para o transporte de volumes de microlitros de líquidos entre os segmentos de líquidos contíguos com um tubo com a finalidade de investigar a mudança de fase dos segmentos de líquido. As pérolas magnéticas foram controlados externamente utilizando um magnete, permitindo que as esferas se colmatar a válvula de ar entre os segmentos de líquidos adjacentes. Um revestimento hidrofóbico foi aplicado à superfície interna do tubo para melhorar a separação entre dois segmentos de líquido. O campo magnético aplicado formado um conjunto agregado de esferas magnéticas, a captura de uma certa quantidade de líquido no interior do conjunto que é referido como o volume de transferência. Um corante fluorescente foi adicionado a um segmento de líquido, seguido por uma série de transferências de líquidos, que, em seguida, a intensidade de fluorescência alteradas no segmento de líquido vizinhos. Com base na análise numérica da mudança medida da intensidade de fluorescência, o volume de reporte por massa de esferas magnéticas foi encontradoser ~ 2 a 3 ul / mg. Esta pequena quantidade de líquido permitiu a utilização de segmentos de líquido relativamente pequenas de algumas centenas de microlitros, aumentando a viabilidade do dispositivo para uma abordagem laboratório-em-tubo. Esta técnica de aplicação de pequena variação da composição num volume líquido foi aplicado para analisar o diagrama de fase binário entre a água e o agente tensioactivo C12E5 (pentaetileno glicol éter monododecil), levando a mais rápida análise de amostras com volumes menores do que os métodos convencionais.
Introduction
As esferas magnéticas (MB) é da ordem de 1 micrómetro de diâmetro foram usadas com bastante frequência em 1,2 aplicações de microfluidos-base, em particular para dispositivos biomédicos. Nestes dispositivos, MBs têm oferecido capacidades, tais como células e separação de ácido nucleico, agentes de contraste, e a entrega de drogas, para citar alguns. A combinação de (campo magnético) de controle externo e microfluídica baseada em gotículas permitiu 3 controle de imunoensaios utilizando pequenos volumes (<100 nl). MBs também têm demonstrado promessa quando utilizado para o tratamento líquido 4. Esta abordagem utiliza os MBs para transportar biomoléculas entre segmentos de líquido dentro de um tubo separado por uma válvula de ar. Este método não é tão poderoso como outros dispositivos lab-on-chip mais complexas visto no passado, mas é muito mais simples e não oferece a capacidade de lidar com volumes microlitro porte de líquido. Uma abordagem semelhante tem sido relatado recentemente 5 por grupo de Haselton e aplicado a biomédicaensaios.
Um dos aspectos mais importantes do presente dispositivo é a separação do segmento de líquido oferecido pela válvula de ar controlada por tensão superficial. Volumes de microlitros de líquido unidas a MBs são transportados através deste espaço de ar entre os segmentos de líquidos usando um campo magnético aplicado externamente. MBs de micropartículas (~ 0,4-7 um em diâmetro com uma média de 1,9 | iM), sob o efeito do campo magnético externo criar um conjunto de micro-poroso que retém o líquido dentro. A força deste aprisionamento líquido é suficiente para suportar as forças de tensão da superfície quando se transportam os MBs de um reservatório para o próximo. Tipicamente, este efeito não é desejável, como a maioria das abordagens somente a moléculas de transporte específicas (tais como biomarcadores) contidos nos líquidos 6. No entanto, como pode ser visto no nosso trabalho, este efeito pode ser utilizado para tornar um aspecto positivo do dispositivo.
Temos utilizado este "laboratório-em-tubo'Abordagem, mostrado esquematicamente na Figura 1, para a análise de diagramas de fases em sistemas de materiais de binários. O surfactante C12E5 foi escolhido como o principal foco de caracterização, uma vez que é amplamente usado em aplicações industriais tais como produtos farmacêuticos, produtos alimentares, cosméticos, etc. Em particular, a H2O / C12E5 sistema binário foi investigada porque fornece uma rica conjunto de fases para explorar. Temos focado em um aspecto específico desta mistura química, a saber, as transições para fases líquidas cristalinas em determinadas concentrações 7-9. Esta transição é facilmente observado em nosso dispositivo, incorporando polarizadores nos estudos de microscopia óptica, a fim de destacar as fronteiras de fase.
Ser capaz de mapear diagramas de fase é uma área muito importante de estudo, a fim de compreender a cinética envolvidos com a transição de fase 10. A capacidade de determinar com precisão a interacção de tensioactivos com um solventesnd outros componentes é crucial, devido à sua complexidade e muitas fases distintas 11. Muitas outras técnicas têm sido anteriormente utilizados para caracterizar mudança de fase. A abordagem convencional envolve a criação de muitas amostras, cada uma consistindo de diferentes concentrações e permitindo-lhes a equilibrar, o que requer tempos de processamento longos e elevada quantidade de volumes de amostra. Em seguida, as amostras são tipicamente analisadas por métodos óticos, como os transportes interfacial difusora (DIT), que oferece alta resolução de tais composições de surfactante 12,13. Semelhante ao método nós utilizamos, o método DIT usa luz polarizada para a imagem de fase fronteiras distintas.
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Protocol
1. Preparação de um tempo de uso de materiais no Device
- Preparação de tubo
- Corte a tubulação em 15 cm segmentos. Tubing tem 1,6 mm de diâmetro interno e 3.2 mm de diâmetro externo.
- Segmentos de tubo pendurar verticalmente usando fita. Coloque uma toalha de papel debaixo de tubos para recolher a solução de fluoropolímero excesso.
- Injectar 100 ul de solução de fluoropolímero na abertura superior de cada um dos segmentos de tubo utilizando uma seringa, de tal forma que ela irá entrar em contacto com a circunferência inteira na parede interior.
- Permitir segmentos de tubo para pendurar no lugar durante 1 h para remover o excesso de quantidade de solução de fluoropolímero.
- Limpe qualquer solução fluoropolymer do lado inferior do tubo que não escorrer para fora. Remova a tubulação a partir da posição de suspensão e dispor de toalhas de papel.
- Colocar o tubo de segmentos em forno a 100 ° C durante 1 h recozer a camada de revestimento de fluoropolímero.
- Remova segmentos de tubo do forno. Use uma pinça, como seg tubomentos estará quente.
- Preparação de solução diluída de esférulas magnéticas
- Calcular a concentração do grânulo magnético necessário para atingir o volume transição desejado, conforme determinado pela relação entre carry-over volume e massa MB mostrado na Figura 2.
Nota: A solução original MB tem 1 g de MBs em 50 ml de solução. Considerando-se um volume de câmara de ensaio de 20 ml, uma solução diluída de MB original com água destilada a uma razão de 6: 4 (solução MB: água) para se obter um volume de transição de ~ 0,4 ul. Ajustar razão de diluição quando diferente volume de carry-over é desejado. - Colocar num frasco de 20 ml da amostra numa micro-balança. Zero o equilíbrio.
- Agitar o recipiente de solução esférulas magnéticas, em seguida, retirar 0,6 ml usando uma micro-pipeta.
- Dispensar solução pipetada para o frasco de amostras em equilíbrio.
- Dispense 0,4 ml de água destilada no frasco da amostra.
- Calcular a concentração do grânulo magnético necessário para atingir o volume transição desejado, conforme determinado pela relação entre carry-over volume e massa MB mostrado na Figura 2.
- Corante fluorescente lpreparação iquid
- Dissolver 2 em peso.% De corante em água desionizada a solução com vortex durante 1 min.
2. Preparação da instalação experimental para experimentos de fluorescência
- Preparação do dispositivo de tubagem.
- Inserir um conector luer fêmea para uma extremidade do tubo.
- Colocar o tubo para uma seringa Luer-lock, que tem um volume de 3 ml e 0,1 ml da graduação.
- Coloque a seringa na bomba de seringa e definir o avanço com 2 ml / h.
- Para a inserção precisa de líquidos para o tubo, usar a bomba de seringa para retirar a solução contendo as esferas magnéticas e corante fluorescente.
- Insira 20 ml de solução de grânulo magnético no tubo usando retirada bomba de seringa. Este segmento de líquido é referido como câmara de ensaio (volume da câmara de ensaio podem variar de acordo com a experiência). Vortex o recipiente com solução grânulo magnético durante 1 minuto e em seguida, agitar manualmente durante o ciclo de retirada de modo a formar MB dispersões uniformes.
- Depois de câmara de teste de inserção líquido é concluído, retire 6 l de ar para dentro do tubo. Este volume de ar irá mais tarde formar uma válvula entre os dois segmentos de líquido.
- Após a inserção do entreferro está concluída, começam retirada 180 ul de líquido com corante fluorescente. Este segmento de líquido é referido como o reservatório. Volume do reservatório pode variar dependendo da experiência. Volume de reservatório maior é benéfica para minimizar a mudança de concentração de corante.
- Coloque um segundo conector luer fêmea na outra extremidade do tubo.
- Remover o dispositivo de tubo da seringa.
- Coloque tampas luer-lock em ambas as extremidades do dispositivo.
- Optics configuração para experimentos de fluorescência
- Ligue todos os componentes ligados ao microscópio invertido.
- Ligue o computador e abra o software de imagem de microscópio.
- Tome medição da intensidade de fluorescência inicial da câmara de ensaio e reservatório usando o microscópio invertido. Ao analisar a fluorescência da amostra, assegurar que o foco está na posição central (em ambas as direcções x e y) do segmento de líquido no interior do tubo. Medições de discos em planilha de dados.
- Coloque dispositivo sobre a parte superior do cubo de modo a que o íman esferas magnéticas todos os segregar para uma área na câmara de ensaio. Transferir as contas para o reservatório, movendo o dispositivo por cima do íman (~ 10 seg). O 1 polegada de ímã de neodímio cubo é grau N48 com uma força de tração de 45,6 kg.
- Uma vez aglomerado esférulas magnéticas é transferida através do intervalo de ar e para dentro do reservatório, agitar as esferas magnéticas através da colocação do dispositivo sobre a parte superior do magneto e rodando para libertar o líquido a ser preso dentro do agrupamento. Continuar a agitação dos grânulos magnéticos até homogeneização do reservatório tenha sidocompletou (~ 30-45 seg).
- Coloque dispositivo por cima do ímã de tal forma que as esferas magnéticas no reservatório todos os segregar a uma área. Transferir o cluster de esférulas magnéticas de volta para a câmara de ensaio.
- Uma vez que o cluster atinge a câmara de ensaio, agitar as esferas magnéticas, colocando o dispositivo por cima do ímã e girando para liberar o líquido fluorescente preso dentro. Continuar a agitação dos grânulos magnéticos até homogeneização da câmara de ensaio tiver sido completado (~ 30-45 seg).
- Aqui intensidade de fluorescência de tanto a câmara de ensaio e o reservatório utilizando o microscópio invertido. Medições de discos em planilha de dados.
- Os passos são repetidos até 3,2-3,6 ambos os segmentos de líquido convergem para intensidades de fluorescência semelhantes (~ 100 ciclos).
4. Análise Numérica de Dados fluorescente
- Com os dados de intensidade fluorescentes armazenadas em uma planilha, execute análise numérica usando MATLAB.
- Derive equações para calcular um valor teórico de intensidade de fluorescência em ambos o reservatório e a câmara de teste. Incorporar as seguintes equações em um arquivo de script MATLAB:
onde I é a intensidade de fluorescência (UA), V é o volume (mL), n é o número de transferências, R é o reservatório, T é a câmara de ensaio, e C é carry-over. - Usando MATLAB, gerar gráficos e analisar para determinar o volume carry-over para todos os experimentos. Use esses dados para produzir a Figura 2.
5. Preparação da instalação experimental para Experimentos surfactante
- Preparação do dispositivo de tubagem.
- Inserir uma fêmea de bloqueio Luer sobre uma extremidade do tubo.
- Colocar o tubo para uma seringa Luer-lock.
- Coloque a seringa na bomba de seringa e definir o avanço com 2 ml / h.
- Para a inserção precisa de líquidos para o tubo, usar a bomba de seringa para retirar a solução contendo as esferas magnéticas e surfactant.
- Insira solução talão 20 l magnético no tubo usando retirada bomba de seringa. Este segmento de líquido é referido como câmara de ensaio (volume da câmara de ensaio podem variar de acordo com a experiência). Agita-se o recipiente com solução de esférulas magnéticas com a mão durante o ciclo de retirada de modo a formar MB dispersões uniformes.
- Depois de câmara de teste de inserção líquido é concluído, retire 6 l de ar para dentro do tubo. Este volume de ar será posteriormente referida como o intervalo de ar.
- Após a inserção intervalo de ar é concluído, começará a retirada de 180 l de surfactante puro C12E5. Este será posteriormente referida como o reservatório.
- Optics configuração para experimentos de surfactante.
- Mova bomba de seringa com dispositivo de tubo de modo que a câmara de teste com esferas magnéticas está em foco com o microscópio estéreo.
- Coloque uma folha de filme polarizador no topo de uma fonte de luz LED. Deslize a fonte de luz LED por baixo do tubo ligado aa bomba de seringa.
- Anexar um outro filme polarizador para a lente do microscópio estéreo usando fita. Certifique-se de que os dois filmes polarizadores têm um grau 90 desfasados um do outro.
- Montar um CCD (Charge Coupled Device) câmera ao microscópio estéreo. Ligue a câmera para o computador e abrir o software de imagem.
6. Procedimento Experimental para Experimentos surfactante
- Coloque o íman cubo ao lado da câmara de ensaio, enquanto que o íman está montado sobre um suporte.
- Uma vez que as esferas magnéticas formar um cluster, começar a bombear líquidos no tubo de alimentação a uma taxa de 2 ml / h de tal modo que o conjunto magnético do grânulo é movido a partir da câmara de ensaio, através da abertura de ar, e para a câmara de reservatório de surfactante.
- Uma vez que o aglomerado esférulas magnéticas atinge o ponto médio da câmara de reservatório, parar o bombeamento da bomba de seringa.
- Mover o íman cubo de distância a partir do tubo, permitindo a contas magnéticas para separar umND reduzir o tempo de difusão do líquido retido no cluster esférulas magnéticas.
- Assista a tela do computador para observar o H 2 O / ciclo de mistura C12E5 por diferentes fases.
- Uma vez que a difusão e a mudança de fase do líquido é completado, colocar o íman de volta ao seu destino, por ex o reservatório de modo que as contas magnéticas para formar um aglomerado.
- Usando a bomba da seringa, retirar os líquidos tais que o conjunto magnético do grânulo é transferido do reservatório de surfactante, através do entreferro, e de volta para a H2O câmara de ensaio.
- Uma vez que o aglomerado esférulas magnéticas atinge o ponto médio da câmara de ensaio, parar o bombeamento da bomba de seringa.
- Mova o ímã cubo longe do tubo. Isto irá permitir que as esferas magnéticas para separar e vai ajudar a reduzir o tempo de difusão do líquido retido no cluster esférulas magnéticas.
- Assista a tela do computador para observar o H 2 O / ciclo de mistura C12E5 por diferentes fases. Uma vez que a difusão e a mudança de fase do líquido é completado, colocar o íman de volta ao seu destino pela primeira câmara de ensaio de modo que as contas magnéticas para formar um aglomerado.
- Repita os passos 6,2-6,11 até que a câmara de teste exibe uma mudança de fase.
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Representative Results
Utilizando a abordagem de laboratório-em-tubo para o transporte de quantidades ul-volume de líquido com esferas magnéticas, juntamente com MATLAB para análise numérica, os volumes de reporte médios líquidos, como uma função de massa de esférulas magnéticas, foram encontrados (Figura 2). Massa maior de esferas magnéticas proporciona maior volume de carry-over na taxa de 2-3 ul / mg. A configuração experimental (Figura 1) foi usado para observar a mudança de fase no H2O / sistema binário C12E5. Uma vez que o sistema de H 2 O / C12E5 é bem conhecida e tem muitas fases distintas, o que pode ser visto na Figura 3B, que serviu como um ponto de referência apropriado para caracterizar ainda mais o nosso dispositivo. A linha a tracejado na Figura 3B mostra a temperatura nominal que as experiências foram realizadas a de ~ 20 ° C. As reacções foram cuidadosamente observados a partir de tempos curtos, tais como 0 a 90 seg visto na Figura 3C, para tempos mais longos, tais como 1,5 a 25 min & #160;. Visto na Figura 4 The L 1 a L α mudança de fase foi utilizada para verificar o volume carry-over no H2O / sistema binário C12E5. Observação de curta duração mostra transições de fase em diversas fases liquidas cristalinas quando a água é levada para a câmara de surfactante C12E5. No entanto, esta mudança de fase pode ser temporal como a difusão continua a atingir um estado homogéneo na câmara de líquido. Eventualmente, as transferências múltiplas irá conduzir a uma mudança de fase permanente, tal como mostrado na Figura 5B. Apesar de um revestimento hidrofóbico foi aplicado à parede interior do tubo, uma preocupação da nossa dispositivo foi a variação no volume transição devido à colagem líquido para a parede interior do tubo como volumes maiores foram bombeados para trás e para a frente . Uma maneira de refutar essa preocupação foi para remover as esferas magnéticas a partir do dispositivo e realizar os mesmos experimentos exatamente como se as esferas magnéticas ainda estavam no lugar. Isto eliminaria o reportesobre o volume, o que nos permite observar quaisquer efeitos sobre a composição química proveniente de esta transferência de líquido indesejado. Uma comparação de mudança de fase quando visto as esferas magnéticas estão no lugar (Figura 5 A, B) versus quando elas são removidas do sistema (Figura 5 C, D), foi feita. Felizmente, essa preocupação foi encontrado para ser insignificante quando comparado com o volume de carry-over.
Figura 1. Diagrama esquemático da configuração experimental e foto de tubo usado mostrando dois segmentos líquidos separados por uma válvula de ar. Reeditado (adaptado) com a permissão de Blumenschein, N., Han, D., Caggioni, M., Steckl, A. Magnética Partículas como veículos líquidos na Abordagem Microfluidic Lab-in-Tube detectar Phase Change. ACS Applied Materials & Interfaces. 6 (11), 8066-8072, doi: 10,1021 / am502845p (2014).Direitos de autor 2014 American Chemical Society. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 2. O volume médio líquido carry-over por transferência de massa vs. grânulo magnético. Análise numérica de terreno usando MATLAB. Reproduzido (adaptado) com a permissão de Blumenschein, N., Han, D., Caggioni, M., Steckl, A. Partículas Magnéticas como veículos líquidos na Abordagem Microfluidic-Lab-in Tubo detectar Phase Change. ACS Applied Materials & Interfaces. 6 (11), 8066-8072, doi: 10,1021 / am502845p (2014). Direitos de autor 2014 American Chemical Society. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 3. (A) de configuração experimental Lab-em-tubo. Mudança lote (B) Fase do H 2 O / sistema binário C12E5. (C) de mudança de fase observada de H2O / C12E5 de 0 a 90 seg. Reproduzido (adaptado) com a permissão de Blumenschein, N., Han, D., Caggioni, M., Steckl, A. Partículas Magnéticas como veículos líquidos na Abordagem Microfluidic-Lab-in Tubo detectar Phase Change. ACS Applied Materials & Interfaces. 6 (11), 8066-8072, doi: 10,1021 / am502845p (2014). Direitos de autor 2014 American Chemical Society. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 4.H 2 O / C12E5 mudança de fase ao longo do período de 1,5 a 25 min. Reeditado (adaptado) com a permissão de Blumenschein, N., Han, D., Caggioni, M., Steckl, A. Partículas Magnéticas como veículos líquidos no Lab Microfluidic -em-tubo abordagem para a detecção de mudança de fase. ACS Applied Materials & Interfaces. 6 (11), 8066-8072, doi: 10,1021 / am502845p (2014). Direitos de autor 2014 American Chemical Society. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 5. Dois dispositivos preparados com uma concentração inicial câmara de ensaio de 1: 1 de H2O / e reservatório contendo C12E5 C12E5 puro. Usando ~ 0,2 mg de grânulos condição inicial (A) a 6 transferências (B), as transições de amostra de L1 para Lα fase. No AbseNCE de MBs, nenhuma mudança de fase é visto (C, D). O experimento foi realizado a 25 ° C. Reproduzido (adaptado) com a permissão de Blumenschein, N., Han, D., Caggioni, M., Steckl, A. Partículas Magnéticas como veículos líquidos na Abordagem Microfluidic-Lab-in Tubo detectar Phase Change. ACS Applied Materials & Interfaces. 6 (11), 8066-8072, doi: 10,1021 / am502845p (2014). Direitos de autor 2014 American Chemical Society. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
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Discussion
Em técnicas mais comuns para a investigação diagrama de fase, múltiplas amostras com diferentes composições e proporções precisa de ser preparado e ter a atingir o equilíbrio termodinâmico, que provoca um processo demorado e uma quantidade significativa de material. Alguns desafios podem ser resolvidos por DIT método (transporte interfacial difusora) usando capilar plano e método de análise de infravermelho, mas nenhum deles pode resolver todos os desafios com investimento de baixo custo.
A viabilidade da utilização de esferas magnéticas como veículos líquidos nesta abordagem de microfluidos "lab-em-tubo" foi demonstrada pelo uso de detectar a mudança de fase entre segmentos de líquido adjacentes. Este método permite a alteração da composição exacta, o que pode ser pré-determinado usando a técnica de análise numérica mostrado. A capacidade de visualizar as alterações ao vivo em um sistema surfactante em água ao fazer alterações minúsculas à composição química provou ser um ativo valioso para este dispositivo.As técnicas atuais utilizados na indústria para a análise de mudança de fase têm alguns aspectos indesejáveis associados. O custo é sempre uma preocupação, e tendo a capacidade de utilizar tais pequenos volumes de produtos químicos caros como o C12E5 no decurso da experimentação é, certamente, uma vantagem. Da mesma forma, quando a redução do tamanho da amostra, o tempo de espera para o processo de difusão para acontecer é significativamente reduzida. O sistema de H 2 O / C12E5 é bastante complexo e pode levar um longo tempo para estabelecer-se em uma fase específica em que sua composição é alterada. Estes tempos longos de difusão pode parecer ser indesejável, mas quando comparando-a com tempos de difusão dos métodos praticados na indústria, é rapidamente visto como um passo progressivo na análise da composição dos sistemas complicados.
Quando a análise de mudança de fase de um sistema binário, ou qualquer número de produtos químicos misturados, é crucial ter precisão suficiente no método a ser utilizado. Muito tempo foi gasto encontrar uma relação entre o volume de carry-over e mamassa talão gnetic. Algumas variáveis diferentes, tais como a porosidade do grânulo magnético cluster, volume da câmara de teste em relação ao volume do reservatório, e de massa dos aglomerados grânulo magnético, foram estudados, o que nos permite amalgamar diferentes conjuntos de dados e criar um modelo. Durante este processo, a grande takeaway foi a relação linear obtida entre o volume de reporte e de massa dos aglomerados grânulo magnético. Encontramos o volume carry-over para ser ~ 2-3 ul / mg de contas. Naturalmente, esta relação não se correlaciona com os volumes das câmaras de ensaio e do reservatório, permitindo que para métodos de experimentação mais complexas. Ou seja, dado que o volume de reporte actua quase como uma constante que depende de massa esférulas magnéticas, os volumes de líquido em que o sistema pode ser pré-determinado para criar mudanças de passo desejado na composição dos dois líquidos. Isto pode vir a calhar quando o usuário quer ver as flutuações de composição em qualquer lugar de 0,25% a 10%.
O protocolo prevê alta de viabilidade para explorar phadiagrama se com uma pequena quantidade da amostra e multa de resolução sobre a composição. No entanto, o protocolo atual ainda requer vários minutos para transferência única, levando a dias para investigação completa diagrama de fases. Esta limitação pode ser superada usando quer o diâmetro do tubo mais fina ou actuação mecânica induzida pela variação do campo magnético externo.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| AccuBead | Bioneer Inc. | TS-1010-1 | Magnetic beads |
| C12E5 Surfactant | Sigma-Aldrich | 76437 | |
| Thermo Scientific Nalgene 890 | Fisher Scientific | 14176178 | |
| Cube Magnet | Apex Magnets | M1CU | |
| Polarizer Film | Edmund Optics | 38-493 | |
| Teflon AF | Dupont | 400s1-100-1 | Fluoropolymer solution |
| Keyacid Red Dye | Keystone | 601-001-49 | Fluorescent dye |
| Luer-Lock | Cole-Parmer | T-45502-12 | Female |
| Luer-Lock | Cole-Parmer | T-45502-56 | Male |
| Syringe | Fisher Scientific | 14-823-435 | 3 ml |
| Syringe Pump | Stoelting | 53130 | |
| Stereo Microscope | Nikon | SMZ-2T | |
| Inverted Microscope | Nikon | Eclipse Ti-U | The filter cube used had an excitation wavelength range from 540-580 nm and a dichroic mirror at 585 nm, allowing for photoemission ranging from 593-668 nm. |
| Balance | Denver Instruments | PI-225D | |
| Microscope-Mounted Camera | Motic | 5000 |
References
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