Summary
Protocol
ड्रोसोफिला अंडाशय विच्छेदन के लिए प्रोटोकॉल
- फ़ीड खमीर 1-2 दिन के साथ पहले मक्खियों उन्हें विदारक अंडाशय मोटा.
- चतनाशून्य करना कार्बन डाइऑक्साइड धारा का उपयोग मक्खियों.
- चिमटी की एक जोड़ी का उपयोग, एक महिला मक्खी का चयन करें.
- डूब 1X पीबीएस में महिला मक्खी.
- चिमटी की एक जोड़ी के साथ अपने निचले छाती पर उड़ पकड़ो.
- चिमटी की एक जोड़ी के साथ पेट के निचले हिस्से पर धीरे tug जब तक पेट में आंतरिक अंगों को उजागर कर रहे हैं.
- अंडाशय की जोड़ी के लिए देखो और यह अन्य अंगों (आंतों उदा) से अलग है.
- Ovarioles (अगर अंडाशय immunostaining के लिए या स्वस्थानी संकरण में इस्तेमाल किया जा रहे हैं) के अलावा छेड़ो.
- जबकि अगले मक्खी विदारक ठंडा 1X पीबीएस में अंडाशय रखें.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
यहाँ हम ड्रोसोफिला में अंडाशय विदारक की एक विधि का प्रदर्शन. अलग सेल प्रकार है कि ड्रोसोफिला अंडाशय में मौजूद संवर्धन की विधि के रूप में अभी तक परिभाषित किया गया है, यह एक तेजी से विधि ड्रोसोफिला डिम्बग्रंथि ऊतक प्राप्त है. मूलतः, हम बताते हैं कि विदारक ड्रोसोफिला अंडाशय एक सरल दो या तीन कदम प्रक्रिया शामिल है. इन dissected अंडाशय के बाद उपचार के बहाव के प्रयोगों है कि प्रदर्शन किया जाएगा पर निर्भर करते हैं.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
| Forceps | Tool | Sigma-Aldrich | T43537 | |
| Glass dissecting dish | Tool | Pyrex | 7220-85 |
References
- Costa, A., et al. The Drosophila fragile X protein functions as a negative regulator in the orb autoregulatory pathway. Dev Cell. 8, 331-342 (2005).
- Tan, L., et al. An autoregulatory feedback loop directs the localized expression of the Drosophila CPEB protein Orb in the developing oocyte. Development. 128, 1159-1169 (2001).
